Pemeriksaan tinja

Pemeriksaan tinja untuk diagnosis parasitologi dilakukan untuk mendeteksi: Cacing dewasa Segmen dari cacing pita Ova dan kista Larva Trofozoit Selular eksudat seperti leukosit, sel darah merah, makrofag dan Charcot-Leyden (CL) Kristal

Koleksi sample feses

Minta pasien untuk mengeluarkan sampel tinja langsung ke karton atau cangkir plastik bertutup. Sekitar 20-40 gram atau 5-6 sendok tinja sudah cukup untuk pemeriksaan rutin. Menelan obat (Tetrasiklin, sulfonamid,antiprotozoal agen, pencahar, antasida, minyak jarak, hidroksida

magnesium, barium sulfat, senyawa kaolin bismut dan garam hipertonik dll) sebelum koleksi feses dapat

mengganggu deteksi parasit. Semua spesimen harus diberi label dengan nama pasien, usia, jenis kelamin, dan tanggal

pengumpulan. Spesimen harus mencapai laboratorium dalam waktu 30 menit karena trofozoit amuba mati dan

menjadi sulit dikenali setelah itu.

Catatan Jangan menyimpan spesimen pada suhu hangat. Cobalah untuk menyimpannya dalam sejuk, tempat-

tempat teduh. cegah pengeringan spesimen. cegah kontaminasi dengan urin atau partikel kotoran. Tinja tidak boleh dikumpulkan dari tempat yang mengandung desinfektan.

Transportasi sampel

Jika mencari trofozoit, spesimen tinja harus dikrim segera ke laboratorium untuk menghindari

disintegrasi trofozoit. sampel feses harus diperiksa dalam waktu 30 menit dari koleksi. spesimen feses

tidak boleh dibekukan dan dicairkan atau ditempatkan dalam inkubator karena bentuk parasit

memburuk dengan sangat cepat. Untuk fiksasi permanen dari spesimen tinja, digunakan pengawet 10% formol-garam (dibuat dengan

menambahkan formalin 100 ml hingga 900 ml natrium klorida 0,85%) . Polivinil alkohol (PVA) adalah

juga pengawet yang banyak digunakan

Pemeriksaan makroskopik Berbagai poin yang perlu dicatat adalah:

Konsistensi: Konsistensi tinja bisa padat, lembut, encer atau berair. Kista ditemukan dalam tinja padat

sementara trofozoit umumnya di tinja berair. Adanya darah dan lendir. Adanya cacing bulat, cacing benang atau proglottids cacing pita . Warna dan bau tinja.

Pemeriksaan mikroskopis (preparat basah)

Ini adalah teknik sederhana dan mudah. Dapat dibuat langsung dari material tinja atau dari

spesimen terkonsentrasi. Jenis prweparat basah meliputi: a) Preparat Saline : digunakan untuk mendeteksi telur cacing atau larva, protozoa trofozoit dan

kista. Selain itu dapat mengungkapkan adanya sel darah merah dan leukosit. b) Preparat Yodium : Hal ini digunakan untuk noda glikogen dan inti dari kista.

Prosedur Tempat setetes salin pada kiri slide dan satu tetes yodium di kanan slide. Dengan aplikator ambil sebagian kecil dari spesimen (seukuran pentol korek api) dan campur

dengan salin. Demikian pula jumlah yang sama diambil dan campur dengan setetes yodium. Tutup dengan cover slip dan amati di bawah mikroskop. Ova, kista, trofozoit dan cacing dewasa dapat diidentifikasi sesuai ciri karakteristik mereka (Gambar 1

dan Tabel 1).

Preparat Yodium diperiksa untuk amuba dan kista flagellar .

Gambar 1: fitur morfologi parasit umum ( telur / ovum / kista)

teknik Konsentrasi Jika jumlah parasit dalam spesimen tinja adalah rendah, pemeriksaan preparat basah direct

tidak dapat mendeteksi mereka, maka tinja harus dikonsentrasi. Telur, kista dan larva utuh

setelah prosedur konsentrasi sedangkan trofozoit bisa hancur selama proses. Hal ini

kenapa pemeriksaan preparat basah direct wajib dikerjakan sebagai tahap awal

pemeriksaan mikroskopis. Prosedur konsentrasi dikelompokkan dalam 2 kategori:

a) Sedimentasi : Di mana telur dan kista menetap di bagian bawah. b) Flotasi: Di mana telur dan kista mengambang di permukaan akibat gradien gravitasi

tertentu. Kelemahan ,mendasar teknik sedimentasi adalah bahwa pemeriksaan sedimen sering sulit

karena banyaknya puing-puing feses yang mungkin menutupi

keberadaan parasit. Kelemahan ,mendasar teknik flotasi adalah bahwa tidak semua telur dan

kista mengapung . Dua macam larutan yang digunakan pada teknik konsentrasi umumnya adalah formalin-eter

dan larutan jenuh garam. teknik Sedimentasi eter -formal

Prosedur

Transfer setengah sendok teh feses dalam 10 ml air dalam wadah kaca dan aduk rata. Saring dengan kain kasa, masukkan filtrate ke dalam tabung centrifuge 15 ml. Centrifuge selama 2 menit pada sekitar 500 g. Buang supernatan dan resuspend sedimen dalam 10 ml garam fisiologis. Centrifuge pada 500

g dan buang supernatan. Resuspend sedimen dalam 7 ml formalin 10% (1 bagian formalin 40% dalam 3 bagian saline). Tambahkan 3 ml eter (atau etil asetat). Tutup tabung dengan stopper dan kocok dengan keras supaya campur. Lepaskan stopper dan

centrifuge di 500g selama 2 menit. Berdirikan tabung. Tampak empat lapisan, lapisan atas terdiri dari eter, kedua adalah plug

puing,ketiga adalah lapisan formalin dan keempat adalah sedimen (Gambar 2). Buang puing debris dengan memiringkan tabung dan dengan menggunakan tongkat

kaca, dan tuangkan cairan hingga menyisakan sejumlah kecil formalin untuk suspensi

sedimen. Dengan pipet, ambil sedimen dan campur dengan setetes yodium. Periksa di bawah

mikroskop.

Gambar 2: teknik sedimentasi Formal eter

Keuntungan

bau Tinja hilang Sensitivitas deteksi kista atau ova meningkat 8-10 kali lipat. Pemeriksaan lebih mudah daripada pemeriksaan preparat basah direct. Ukuran dan bentuk struktur parasit dipertahankan.

murah, mudah dilakukan dan dapat dilakukan pada setiap tingkat sarana kesehatan.

Kekurangan

puing-puing Tinja mungkin menutupi struktur parasit. bentuk Trophozoite tidak terdeteksi dalam metode ini.

teknik flotasi Jenuh garam

Tempatkan sekitar satu mililiter dari feses dalam wadah yang datar dan memiliki diameter

kurang dari 1 ½ inci dan kapasitas sekitar 15-20 ml (Gambar 3). Tambahkan beberapa tetes larutan garam jenuh (berat jenis 1.200) dan aduk hingga

membentuk emulsi Tambahkan larutan garam sehingga kontainer hampir penuh, aduk merata. Buang semua partikel kasar yang mengapung ke atas. Tempatkan wadah pada permukaan yang datar. Tambahkan larutan garam dengan

mwemakai pipet sampai terbentuk meniskus cembung. Sebuah slide kaca 3 "x 2" letakkan di atas wadah secara hati-hati sehingga bagian tengah

slide kontak dengan fluida. Biarkan selama 20 menit, setelah itu angkat slide dengan gerakan cepat, untuk

menghindari tumpahan cairan dan periksa di bawah mikroskop setelah ditutup

dengan coverslip.

Gambar 3: Teknik Flotasi

Kekurangan teknik flotasi

Tidak semua telur trematodal dan larva Strongyloides mengambang dalam larutan garam. Karena berat jenis tinggi dari larutan, kista protozoa dan telur nematoda berdinding tipis

akan rusak dan menjadi terdistorsi dalam penampilan jika dibiarkan selama lebih dari 20

menit.

Biosafety

Ikuti prinsip-prinsip umum laboratorium untuk Keamanan seperti mencuci tangan,

memakai sarung tangan, desinfesi tempat kerja

Menangani bahan kimia dengan hati-hati. tindakan pencegahan khusus harus dilakukan

untuk menyimpan bahan kimia eksplosif (asam picric dan kristal fenol) dan pelarut mudah

terbakar seperti aseton, eter, benzena, xylene dll Peralatan dan gelas harus ditangani dengan hati-hati untuk meminimalkan risiko cedera dan

produksi aerosol. Buang bahan infeksius pada tempat khusus.

Pembuangan bahan wajar

Setelah dilakukan pemeriksaan. spesimen tinja harus dibakar atau direndam dalam larutan

desinfektan dan kemudian dikubur slide kaca bekas harus dibuang dalam panci yang berisi larutan hipoklorit 1% dan

dibersihkan jika untuk digunakan kembali atau dikubur jika tidak digunakan lagi.

Jaminan Kualitas Perhatian harus diberikan kepada semua analitik, analisis pra dan pasca-analitis Laboratorium harus berpartisipasi dalam penilaian kualitas eksternal.

Pelaporan hasil Laporan tersebut harus mencakup komentar positif / negatif sebagai berikut:

Cacing Dewasa / segmen cacing / larva. Selular Eksudat seperti sel darah merah, leukosit, makrofag dan kristal CL. Trofozoit (hanya pada sample yang segar) Ova dan kista. Saran untuk pemeriksaan lebih lanjut.

Rujukan

Sebagai bagian dari program jaminan kualitas. Dalam hal temuan yang tidak biasa atau keadaan wabah.

Tabel 1: fitur Penting : kista trofozoit, dan telur parasit

Kista / telur /trofozoit

Fitur

Entamoeba histolytica trof

ozoit 12-60 μ, asimetris, motil, inti bulat tunggal, pusat karyosome tunggal , halus

dan kromatin merata .

Entamoeba histolytica Kis

ta Bulat, 10-20 μ kista matang memiliki empat inti terletak di pusat

karyosome; kromatin halus. Beberapa kista mungkin

memiliki chromatoid bar.

Giardia lamblia trofozoit 9-21x5-15 μ, berbentuk pir dengan ujung lancip, motil aktif seperti daun

jatuh, 2 inti di tengah , sitoplasma granular .

Giardia lamblia kista Oval, 8-12 μ panjang dan lebar 7-10 μ, inti memiliki 4 karyosome, cenderung

eccenterically; ruang yang jelas antara dinding sel dan sitoplasma. Memiliki

Empat badan median.

Entamoeba coli Kista 10-35 μ, biasanya berbentuk bola, kista matang mungkin berisi 8 atau 16

inti. kromatin perifer adalah kasar dan granular; heterogen; karyosome

biasanya eksentrik. kromatid bar jarang terlihat.

telur cacing gelang

Subur 60x45 μ, bulat atau bulat telur dengan cangkang tebal; ditutupi

oleh mantel albuminous tebal, warna cokelat.

telur cacing gelang

Terkupas mantel Albuminous hilang. Semua fitur lainnya sama seperti di telur subur.

telur cacing gelang 90x40 μ, memanjang, cangkang sering tipis,

Telur cacing tambang Oval, ellipsoid, μ 60x40. Shell adalah berdinding tipis, halus dan tidak

berwarna.

Threadworm telur Planoconvex, memanjang, telur asimetris, 55x26 μ, shell tipis dan

halus. Penuh larva pada telur.

Telur cacing cambuk Memanjang, berbentuk barel dengan plug hialin pada kutub, 22-54 u, Shell

kuning sampai kecoklatan

Telur cacing pita Bulat, 31-43μ shell tebal dengan striations radial

menonjol. Embrio memiliki 3 pasang kait dalam shell adalah diagnostik

dari genus oncosphere. identifikasi spesies berdasarkan morfologi adalah

tidak mungkin.