LAMPIRAN

50

Lampiran 1. Penghitungan rendemen ekstrak

𝑟𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘

𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 × 100%

Akar : R = 0,2477 𝑔𝑟𝑎𝑚

30 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

= 0,008257 × 100%

= 0,8257%

Batang : R = 0,2477 𝑔𝑟𝑎𝑚

30 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

= 0,008257 × 100%

= 0,8257%

Kulit Batang : R = 0,2477 𝑔𝑟𝑎𝑚

30 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

= 0,008257 × 100%

= 0,8257%

Daun : : R = 0,2477 𝑔𝑟𝑎𝑚

30 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

= 0,008257 × 100%

= 0,8257%

51

Lampiran 2. Penghitungan rendemen fraksi

𝑟𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑓𝑟𝑎𝑘𝑠𝑖

𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 × 100%

N-heksan : R = 0,1308 𝑔𝑟𝑎𝑚

1 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

= 0,1308 × 100%

= 13,08%

Etil Asetat : R = 0,1685 𝑔𝑟𝑎𝑚

1 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

= 0,1685 × 100%

= 16,85%

N-butanol : R = 0,3558 𝑔𝑟𝑎𝑚

1 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

= 0,3558 × 100%

= 35,58%

52

Lampiran 3. Penghitungan pembuatan larutan stok dan pengenceran

Pada uji antioksidan, stiok masing-masing sampel dibuat dalam konsentrasi 1000

ppm sebanyak 10 ml (0,01 L). Maka ekstrak yang dibutuhkan adalah:

1 ppm = 1 mg/L

1000 ppm = 𝑥 𝑚𝑔

0,01 𝐿

X = 0,01 L x 1000 ppm

X = 10 mg = 0,01 gram

Pengenceran dari larutan stok untuk membuat masing-masing konsentrasi

pengujian dilakukan dengan menggunakan rumus:

V1.N1 = V2.N2

Dimana V1 merupakan volume yang dibutuhkan untuk konsentrasi pengujian, N1

merupakan konsentrasi yang akan dibuat, V2 merupakan volume yang dibutuhkan

dari stok, dan N2 merupakan konsentrasi stok.

30 ppm

5 ml x 30 ppm = V2 x 1000

ppm

150 = 1000V2

V2 = 150

1000

V2 = 0,15 ml ekstak + 4,85

ml aquades

60 ppm

5 ml x 60 ppm = V2 x 1000

ppm

300 = 1000V2

V2 = 300

1000

V2 = 0,3 ml ekstak + 4,7 ml

aquades

90 ppm

5 ml x 90 ppm = V2 x 1000

ppm

450 = 1000V2

V2 = 450

1000

V2 = 0,45 ml ekstak + 4,55

ml aquades

120 ppm

5 ml x 120 ppm = V2 x 1000

ppm

600 = 1000V2

V2 = 600

1000

V2 = 0,6 ml ekstak + 4,4 ml

aquades

53

Untuk kontrol positif BHT, stok yang digunakan sebesar 10 ppm dalam 20 ml.

Maka BHT yang dibutuhkan sebanyak:

1 ppm = 1 mg/L

1000 ppm = 𝑥 𝑚𝑔

0,01 𝐿

X = 0,01 L x 1000 ppm

X = 10 mg = 0,01 gram

Dari stok tersebut, BHT diencerkan menjadi konsentrasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, dan

8 ppm, sehingga untuk masing-masing konsentrasi dibutuhkan:

2 ppm

5 ml x 2 ppm = V2 x 10 ppm

10 = 10V2

V2 = 10

10

V2 = 1 ml BHT + 4 ml

metanol

4 ppm

5 ml x 4 ppm = V2 x 10 ppm

20 = 10V2

V2 = 20

10

V2 = 2 ml BHT + 3 ml

methanol

6 ppm

5 ml x 6 ppm = V2 x 10 ppm

30 = 10V2

V2 = 30

10

V2 = 3 ml BHT + 2 ml

metanol

8 ppm

5 ml x 8 ppm = V2 x 10 ppm

40 = 10V2

V2 = 40

10

V2 = 4 ml BHT + 1 ml

methanol

54

Lampiran 4. Perhitungan nilai inhibisi ekstrak

Akar

Sampel Konsentrasi Absorbansi

Blanko 1,084

Akar 30 ppm 0,815

60 ppm 0,685

90 ppm 0,723

120 ppm 0,702

30 ppm = 1,084−0,815

1,084 𝑋 100%

= 0,24815 X 100%

= 24, 815%

60 ppm = 1,084−0,685

1,084 𝑋 100%

= 0,36808 X 100%

= 36,808%

90 ppm = 1,084−0,723

1,084 𝑋 100%

= 0,33303 X 100%

= 33,303%

120 ppm = 1,084−0,702

1,084 𝑋 100%

= 0,3524 X 100%

= 35,24%

Batang

Sampel konsentrasi absorbansi

Blanko 1,084

Batang 30 ppm 0,437

60 ppm 0,523

90 ppm 0,574

120 ppm 0,579

30 ppm = 1,084−0,437

1,084 𝑋 100%

= 0,59686 X 100%

= 59,686%

60 ppm = 1,084−0,523

1,084 𝑋 100%

= 0,51753 X 100%

= 51,753%

90 ppm = 1,084−0,574

1,084 𝑋 100%

= 0,47048 X 100%

= 47,048%

120 ppm = 1,084−0,579

1,084 𝑋 100%

= 0,46587 X 100%

= 46,587%

55

Kulit Batang

Sampel konsentrasi absorbansi

Blanko 1,084

Kulit Batang 30 ppm 0,433

60 ppm 0,393

90 ppm 0,402

120 ppm 0,432

30 ppm = 1,084−0,433

1,084 𝑋 100%

= 0,60055 X 100%

= 60,055%

60 ppm = 1,084−0,393

1,084 𝑋 100%

= 0,63745 X 100%

= 63,745%

90 ppm = 1,084−0,402

1,084 𝑋 100%

= 0,62915 X 100%

= 62,915%

120 ppm = 1,084−0,432

1,084 𝑋 100%

= 0,60148 X 100%

= 60,148%

Daun

Sampel konsentrasi absorbansi

Blanko 1,084

Daun 30 ppm 0,548

60 ppm 0,569

90 ppm 0,550

120 ppm 0,588

30 ppm = 1,084−0,548

1,084 𝑋 100%

= 0,49446 X 100%

= 49,446%

60 ppm = 1,084−0,569

1,084 𝑋 100%

= 0,47509 X 100%

= 47,509%

90 ppm = 1,084−0,550

1,084 𝑋 100%

= 0,49262 X 100%

= 49,262%

120 ppm = 1,084−0,588

1,084 𝑋 100%

= 0,45756 X 100%

= 45,756%

56

Kontrol positif BHT

Sampel konsentrasi absorbansi

Blanko 1,084

BHT 2 ppm 0,585

4 ppm 0,467

6 ppm 0,413

8 ppm 0,391

2 ppm = 1,084−0,585

1,084 𝑋 100%

= 0,46033 X 100%

= 46,033%

4 ppm = 1,084−0,467

1,084 𝑋 100%

= 0,56919 X 100%

= 56,919%

6 ppm = 1,084−0,413

1,084 𝑋 100%

= 0,619 X 100%

= 61,9%

8 ppm = 1,084−0,391

1,084 𝑋 100%

= 0,64022 X 100%

= 64,022%

57

Lampiran 5. Penghitungan nilai inhibisi fraksi Avicennia marina

N-heksan

Sampel konsentrasi absorbansi

Blanko 0,63

N-heksan 30 ppm 0,553

60 ppm 0,544

90 ppm 0,535

120 ppm 0,543

30 ppm = 0,63−0,553

0,63 𝑋 100%

= 0,12222 X 100%

= 12,222%

60 ppm = 0,63−0,544

0,63 𝑋 100%

= 0,13651 X 100%

= 13,651%

90 ppm = 0,63−0,535

0,63 𝑋 100%

= 0,15079 X 100%

= 15,079%

120 ppm = 0,63−0,543

0,63 𝑋 100%

= 0,1381 X 100%

= 13,81%

Etil asetat

Sampel konsentrasi absorbansi

Blanko 0,63

Etil asetat 30 ppm 0,374

60 ppm 0,319

90 ppm 0,312

120 ppm 0,298

30 ppm = 0,63−0,374

0,63 𝑋 100%

= 0,40635 X 100%

= 40,635%

60 ppm = 0,63−0,319

0,63 𝑋 100%

= 0,49365 X 100%

= 49,365%

90 ppm = 0,63−0,312

0,63 𝑋 100%

= 0,50476 X 100%

= 50,476%

120 ppm = 0,63−0,298

0,63 𝑋 100%

= 0,52698 X 100%

= 52,698%

58

N-butanol

Sampel konsentrasi absorbansi

Blanko 0,63

N-butanol 30 ppm 0,431

60 ppm 0,378

90 ppm 0,364

120 ppm 0,331

30 ppm = 0,63−0,431

0,63 𝑋 100%

= 0,31587 X 100%

= 31,587%

60 ppm = 0,63−0,378

0,63 𝑋 100%

= 0,04 X 100%

= 40%

90 ppm = 0,63−0,364

0,63 𝑋 100%

= 0,42222 X 100%

= 42,222%

120 ppm = 0,63−0,331

0,63 𝑋 100%

= 0,4746 X 100%

= 47,46%

59

y = 0.093x + 25.6

0,000

20,000

40,000

0 50 100 150

%in

hib

isi

konsentrasi

Akar

inhibisi Linear (inhibisi)

Lampiran 6. Perhitungan nilai IC50 ekstrak Avicennia marina

IC50 Akar

Y = 0,093x + 25,6

50 = 0,093 x + 25,6

0,093x = 50 – 25,6

0,093x = 24,4

X = 262,366 ppm

IC50 Batang

Y = -0,147x + 62,269

50 = -0,147 x + 62,269

-0,147x= 50 – 62,269

-0,147x= -12,269

X = 83,463 ppm

IC50 Kulit Batang

Y = -0,002x + 61,854

50 = -0,002 x + 61,854

-0,002x= 50 – 61,854

-0,002x= -11,854

X = 5,927 ppm

y = -0.147x + 62.269

0,000

50,000

100,000

0 50 100 150

%in

hib

isi

konsentrasi

Batang

inhibisi Linear (inhibisi)

y = -0.002x + 61.854

0,000

50,000

100,000

0 50 100 150

%in

hib

isi

Konsentrasi

Kulit Batang

absorbansi inhibisi Linear (inhibisi)

60

IC50 Daun

Y = -0,031x + 50,323

50 = -0,031 x + 50,323

-0,031x= 50 – 50,323

-0,002x= -11,854

X = 5,927 ppm

IC50 Kontrol positif BHT

Y = 2,934x + 42,528

50 = 2,934x + 42,528

2,934x = 50 – 42,528

2,934x = 7,4272

X = 2,547 ppm

y = -0.031x + 50.323

44,000

46,000

48,000

50,000

0 50 100 150

%in

hib

isi

Konsentrasi

Daun

inhibisi Linear (inhibisi)

y = 2.934x + 42.528

0,000

50,000

100,000

0 2 4 6 8 10%in

hib

isi

Konsentrasi

BHT

inhibisi Linear (inhibisi)

61

Lampiran 7. Penghitungan nilai IC50 fraksi Avicennia marina

IC50 N-heksan

Y = 0,021x + 12,143

50 = 0,021x + 12,143

0,021x = 50 – 12,143

0,021x = 37,857

X = 1802,714 ppm

IC50 Etil asetat

Y = 0,124x + 38,968

50 = 0,124x + 39,968

0,124x = 50 – 38,968

0,124x = 11,032

X = 88,968 ppm

IC50 N-butanol

Y = 0,021x + 12,143

50 = 0,021x + 12,143

0,021x = 50 – 12,143

0,021x = 37,857

X = 133,392 ppm

y = 0.021x + 12.143

0,000

10,000

20,000

0 50 100 150

%in

hib

isi

Konsentrasi

N-heksan

inhibisi Linear (inhibisi)

y = 0.124x + 38.968

0,000

50,000

100,000

0 50 100 150

%in

hib

isi

Konsentrasi

Etil asetat

inhibisi Linear (inhibisi)

y = 0.166x + 27.857

0,000

20,000

40,000

60,000

0 50 100 150

%in

hib

isi

Konsentrasi

N-butanol

inhibisi Linear (inhibisi)

62

Lampiran 8. Data pengujian total fenol

Kadar Polifenol (%) = 𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑎𝑙𝑎𝑡 𝑟𝑎𝑡𝑎−𝑟𝑎𝑡𝑎

𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑎𝑤𝑎𝑙× 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 × 100%

Sampel Konsentrasi Konsentrasi

alat rata-

rata

Konsentr

asi awal

(mg/g)

Pengenceran Kadar

Polifenol

(%)

E. Akar 0.349

0.346 50.00 10 6.93 0.373

0.317

E.

Batang

0.048 0.051 9.77 1 0.52 0.056

0.049

E. Kulit

Batang

0.357 0.390 50.00 10 7.81 0.401

0.413

E.

Daun

0.103 0.094 23.58 1 0.40 0.096

0.082

F. N-

heksan

0.025 0.024 16.99 1 0.14 0.017

0.029

F. Etil

Asetat

0.205 0.168 9.78 10 17.21 0.151

0.149

F. N-

Butanol

0.343 0.344 33.95 10 10.12 0.345

0.343