UJIEFEKHIPOGLIKEMIAFRAKSIETILASETATBIJIJINTENHITAM(NigellasativaLinn)PADATIKUSPUTIHJANTANDENGANMETODEINDUKSIALOKSANDANTOLERANSIGLUKOSA

Skripsi

Diajukansebagaisalahsatusyaratuntuk

MemperolehgelarSarjanaFarmasi

Oleh

IrfanudinPadilah

NIM:105102003331

PROGRAMSTUDIFARMASI

FAKULTASKEDOKTERANDANILMUKESEHATAN

UNIVERSITASISLAMNEGERI(UIN)SYARIFHIDAYATULLAHJAKARTA1430H/2009M

i

ii

iii

LEMBARPERNYATAAN

Denganinipenulismenyatakanbahwaskripsiinibenar-benar

hasilkaryasendiriyangbelumpernahdiajukansebagai

skripsiataukaryailmiahpadaperguruantinggiataulembaga

pendidikanmanapun.

Penulis

iv

ABSTRAK

Judul:UjiEfekHipoglikemiaFraksiEtilAsetatBijiJintenHitam(NigellasativaLinn)PadaTikusPutihJantanDenganMetodeInduksiAloksanDanToleransiGlukosa

Bijijintenhitam(NigellasativaLinn)merupakansalahsatutanamantradisionalyangtelahdiketahuisebagaiobatantidiabetalternatif.Telahdilakukanpengujianefekhipoglikemiafraksietilasetatbijijintenhitamdenganmenggunakanmetodeinduksialoksandenganmasing-masingdosis41mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbbyangdiberikansecaraoralpadatikusputihjantan,pengukurankadarglukosadarahdilakukanpadaharike-7,21dan28denganmenggunakanglukometer.Pemberianvariasidosismenunjukanbahwadosis41mg/200gbbmemberikanpenurunankadarglukosadarahyangterkuat(51,41%),diikutidosis82mg/200gbb(41,86%)dan164mg/200gbb(39,33%),dibandingkandengankontrolpositiftidakberbedasecarabermaknadalamtarafnyata0,05%.Dosis41mg/100gbbfraksietilasetatbijijintenhitamdiberikansecaraoralpadatikusputihjantandenganmenggunakanmetodetoleransiglukosa.Pengukurankadarglukosadarahdilakukansetiap30menitselama180menitdenganmenggunakanglukometer,dibandingkandengankontrolpositiftidakberbedasecarabermaknapadamenitke-0,30,90,120,150dan180sedangkandibandingkandengankontrolnegatifberbedasecarabermaknapadamenitke-60dalamtarafnyata0,05.Hasilpenelitianinimenunjukanbahwafraksietilasetatbijijintenhitamberpotensimenurunkanglukosadarah.

Katakunci:Induksialoksan,Bijijintenhitam,Etilasetat,Toleransiglukosa

v

ABSTRACK

Title:HypoglykemiaEffectOfEthylAcetatFractionOfBlackSeed(NigellaSativaLinn)OnAlloxanInducedAndGlucoseToleranceMethodInRats

Traditionalherbamedicine,blackseed(NigellasativaLinn)hasalreadyknowncanbeusedfororalanti-diabeticdrug.Aninvestigationofthehypoglycemiaeffectofblackseedfractioninethylacetatusingalloxaninducedandglucosetolerancemethod.Measurementthebloodglucoselevelwasdoneonday-17,21and28usingglucose-test.Dosesvariationoftheethylacetatfractionshowedthatthedoseof41mg/200gbwgavethebesthypoglycemiceffect(51,41%),followedbydoses82mg/200gbw(41,86%)and162mg/200gbw(39,33%),comparedwithpositivecontrolwasnotdifferentincisivelywhereascomparedwithnegativecontrolwasdifferentincisivelyofsignificant0,05.Dose41mg/200gbwofethylacetatfractiongivenorallytowhitemaleratsusingglucosetolerancemethod.Measurementofthebloodglucoselevelwasdoneevery30minutesduring180minutesusingglucose-test,comparedwithpositivecontrolatminute-0,30,60,90,120,150and180wasnotdifferentincisivelywhereascomparedwithnegativecontrolwasdifferentincisivelyatminute60ofsignificant0,05.Thisexperimentshowedthatblackseedfractioninethylacetatpotentiallydecreasingbloodglucoselevel.

Keyswords:Alloxaninduced,Blackseed,Ethylacetat,Glucosetolerance

vi

KATAPENGANTAR

PujisyukurkehadiratAllahSWTRabbYangMahaKuasadengankasihdansayang-Nya,berkatrahmatdankuasa-Nyamemberikanjalankepadahamba-NyasehinggapenulisdapatmenyelesaikanpenelitiandanskripsidenganjudulUjiEfekHipoglikemiaFraksiEtilAsetatBijiJintenHitam(NigellasativaLinn)PadaTikusPutihJantanDenganMetodeInduksiAloksanDanToleransiGlukosa.SkripsiinidisusunsebagaisalahsatusyaratuntukmenyelesaikanprogrampendidikantingkatsarjanaStrata1(S1)padaProgramStudiFarmasi,FakultasKedokterandanIlmuKesehatan,UniversitasNegeri(UIN)SyarifhidayatullahJakarta.

Penyusunanskripsiinitidakterlepasdariberbagaipihak.Karenaitupadakesempatankaliinidengansegalakerendahanhatipenulismengucapkanterimakasihyangsedalam-dalamnyakepadayangterhormat:

1.KeluargabesarkuterutamaAyahandatercintaNurdin(alm)danIbundatersayangIhatMuflihatdankakakuTehPaniRopianidansuaminyaAYusufsertaadik-adikkuAiRisnadanMiftahulHudayangselalumemberikanspiritbaikmorilmaupunspiritualselamapenelitiandanpenyusunanskripsiini.2.BapabDrs.MYanisMusdja,M.Sc,Apt.danIbuAzrifitria,M.Si,Apt.SelakupembimbingAkademikyangmemberikanpengarahan,nasehat,dukungandanbimbingannya,sehinggapenulisbisamenyelesaikandanmenyusunskripsiini.3.GuruspiritualUstAdeTaqiyudindanKakSyahrilyangtelahmemberikandorongandanmotivasidengantausiyahnyayangdapatmenyejukanhatidanmendorongpenulisuntukbisamenyelesaikanskripsiini.4.Bapak,IbuDosenProgramStudiFarmasiyangmemberikandukungan,sehinggapenulisbisamenyelesaikanskripsiini.5.Teman-temanProgramStudiFarmasiyangmemberikandukungan,sehinggapenulisbiasmenyelesaikanskripsiini.

vii

6.Semuapihakyangtelahmembantudariawalhinggaakhirpenyusunanskripsiiniyangtidakdapatdisebutkansatupersatu.Penulismenyadaribahwaskripsiinimasihbanyakkekurangan,penulissangatmengharapkankritikdansaranagarskripsipeneltianinibenar-benarbermanfaatuntukkiyasemuaAmin.

Jakarta,4November2009M16Dzulqodah1430H

viii

DAFTARISI

Halaman

HALAMANJUDUL.................................................................................................iLEMBARPERSETUJUANSKRIPSI......................................................................iiLEMBARPERNYATAAN.......................................................................................viABSTRAK.................................................................................................................vABSTRACT..............................................................................................................viKATAPENGANTAR...............................................................................................viiDAFTARISI.............................................................................................................ixDAFTARGAMBAR.................................................................................................xiDAFTARTABEL.....................................................................................................xiiDAFTARLAMPIRAN..............................................................................................xiiiBABIPENDAHULUAN1.1.LatarBelakang..............................................................................................11.2.PerumusanMasalah......................................................................................31.3.PembatasanMasalah.....................................................................................31.4.TujuanPenelitian..........................................................................................41.5.Hipotesis.......................................................................................................41.6.ManfaatPenelitian........................................................................................4BABIITINJAUANPUSTAKA2.1.JintenHitam(NigellaSativaLinn)...............................................................52.1.1.Klasifikasi...........................................................................................52.1.2.Namalain...........................................................................................52.1.3.Morfologi...........................................................................................62.1.4PengembangandanPertumbuhan.......................................................62.1.5.PenanamandanPerkembangbiakan...................................................72.1.6.EkologidanPerkembangbiakan.........................................................72.1.7.Kandungankimiabijijintenhitam.....................................................72.1.8.Khasiatjintenhitam...........................................................................82.2.TinjauanHewanCoba..................................................................................82.3.EkstrakdanEkstraksi....................................................................................92.3.1.Pembuatanserbuk..............................................................................102.3.2.Pembasahan........................................................................................112.3.3.Penyari/Pelarut...................................................................................112.4.DiabetesMellitus..........................................................................................142.4.1.DiabetesmellitusTipe-1IDDM.........................................................142.4.2.DiabetesmellitusTipe-2NIDDM......................................................152.4.3.DiabetesGestional..............................................................................162.4.4.KelainanFisiologispadaDiabetes.....................................................162.4.5.DiagnosisDiabetes.............................................................................182.5.Alloksan.......................................................................................................192.6.Glibenclamid.................................................................................................202.7.Acarbosa.......................................................................................................222.8.Etilasetat.......................................................................................................232.9.MetodePengujian.........................................................................................242.9.1.Metodeinduksialoksan......................................................................24

ix

2.9.2.Metodeujitoleransiglukosaoral.......................................................27BABIIIKERANGKAKONSEP..............................................................................28BABIVMETODEPENELITIAN............................................................................294.1.TempatDanWaktuPenelitian......................................................................294.2.AlatdanBahan..............................................................................................294.2.1.Alat.....................................................................................................294.2.2.Bahan..................................................................................................294.3.ProsedurKerja..............................................................................................304.3.1.PembuatanSimplisia..........................................................................304.3.2.Ekstraksi.............................................................................................304.3.3.UjiPenapisanFitokimia.....................................................................314.3.4.RancanganPercobaan........................................................................334.3.5.PembuatanSediaanUjidanDosis.....................................................354.3.6.CaraPengambilanDarahdanPengkuranKadarGlukosaDarah.......374.3.7.Percobaan...........................................................................................374.3.8.UjiStatistikTerhadapKadarGlukosaDarah.....................................39BABVHASILPENELITIANDANPEMBAHASAN............................................405.1.HasilPenelitian405.1.1.DeterminasiTanaman........................................................................405.1.2.Ekstraksi.............................................................................................405.1.3.HasilPengujianEkstrak.....................................................................405.1.4.PenapisanFitokimia...........................................................................415.1.5.HasilPengukuranKadarGlukosaDarah...........................................415.2.Pembahasan..................................................................................................42BABVIKESIMPULANDANSARAN...................................................................516.1.Kesimpulan...................................................................................................516.2.Saran.............................................................................................................51DAFTARPUSTAKA................................................................................................52

x

DAFTARGAMBAR

Halaman

Gambar1.Alloksan...................................................................................................19Gambar2.Glibenclamid............................................................................................20Gambar3.Etilasetat..................................................................................................23Gambar4.Bijijintenhitam.......................................................................................56Gambar5.Kandangtikus..........................................................................................56Gambar6.Glukose-test.............................................................................................57Gambar7.Pemberiansecaraoral..............................................................................57Gambar8.Kurvakadarglukosadarahrata-ratahewanujisebelumdansesudahdiberibahanujipadaharipengambilansampelselama28hari72Gambar9.Kurvakadarglukosadarahrata-ratahewanujimenitke0,30,60,90,120,180...72

xi

DAFTARTABEL

Halaman

Tabel1.PembagianKelompokHewanUjiInduksiAloksan...................................34Tabel2.PembagianKelompokHewanUjiToleransiGlukosa................................35Tabel3.Hasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam...........................41Tabel4.Hasilpadametodeinduksialoksan.............................................................41Tabel5.Hasilpadametodetoleransiglukosaaloksan.............................................42Tabel6.Konversidosis............................................................................................64Tabel7.Kadarglukosadarahmetodeinduksialoksan............................................68Tabel8.Kadarglukosadarahmetodetoleransiglukosa..........................................70Tabel9.Persentasepenurunanpadainduksimetodealoksan...71Tabel10.Persentasepenurunanpadametodetoleransiglukosa.71Tabel11.SampleKolmogorovUjinormalitas-Smirnov....73Tabel12.UjiHomogenitas........................................................................................73Tabel13.UjiANAVA...............................................................................................74Tabel14.KruskalWallis...........................................................................................74Tabel15.UjiBNTharike-14....................................................................................74Tabel16.UjiBNTharike-17....................................................................................76Tabel17.UjiBNTharike-21....................................................................................77Tabel18.UjiBNTharike-28....................................................................................78Tabel19.UjinormalitasSampleKolmogorov-Smirnov...........................................80Tabel20.UjiHomogenitas........................................................................................80Tabel21.ANAVA.....................................................................................................81Tabel22.KruskalWallis...........................................................................................81Tabel23.UjiBNTmenitke-30.................................................................................82Tabel24.UjiBNTmenitke-60.................................................................................82

xii

DAFTARLAMPIRAN

Halaman

Lampiran1.GambarBahanDanAlatPenelitian.....................................................56Lampiran2.DeterminasiSimplisia..........................................................................58Lampiran3.SertifikatGlibenklamid........................................................................59Lampiran4.SkemaEkstraksidanPartisi..........................................................................60Lampiran5.SkemaPercobaanMetodeInduksiAloksan....................................................61Lampiran6.SkemaPercobaanMetodeToleransiGlukosa.................................................62Lampiran7.PerhitunganDosisLarutanUji...............................................................63Lampiran8.PenetapanKadarAirDanSusutPengeringanEtilAsetat.............................67Lampiran9.DaftarKadarGlukosaDarahMasing-MasingKelompok.....................68Lampiran10.PersentasePenurunanKadarGlukosaDarah.......................................71Lampiran11.KurvaKadarGlukosaDarah................................................................72Lampiran12.AnalisaDataMetodeInduksiAloksan................................................73Lampiran13.AnalisaDataMetodeInduksiAloksan................................................80

xiii

xiv

BABI

PENDAHULUAN

1.1.LatarBelakang

JumlahpenderitapenyakitDiabetesMellitus(DM)diIndonesia,

menurutdataBadanKesehatanDunia(WHO),mencapai17jutaorangatau

8,6%dari220jutapopulasinegeriinidanmeningkatteruspadaakhir-akhir

inikarenaangkatersebutberdasarkanpenelitianpadatahun2001.Menurut

dataBadanKesehatanDunia(WHO)padatahun2003tercatathampir200

jutaorangdiduniamenderitadiabetesdandiperkirakanpadatahun2025

jumlahpenderitabisamencapaisekitar330jutajiwa.Sementaradi

Indonesiasendiri,berdasarkandataWHOpadatahun2003tercatatlebih

dari13jutapenderitadiabetes,darijumlahtersebutdiperkirakanakan

meningkatmenjadilebihdari20jutapenderitapadatahun2030.

BerdasarkanpenelitianDepartemenKesehatanpada2001,untukjenis

penyakitiniIndonesiamenempatiurutankeempatdiduniasetelahIndia,

ChinadanAmerikaSerikat(AS).Padatahun2001silam,tercatat7,5%

pendudukdiPulauJawadanBali,baikpriamaupunwanita,menderitaDM.

Kemungkinanjugaangkattersebutbisabertambahlebihbesarlagi.penyakit

initercantumdalamurutannomor4dariprioritaspenelitiannasionaluntuk

penyakitdegeneratifsetelahkardiovaskular,serebrovaskulardan

geriatri.(Perkeni,2006)

1

Indonesiamerupakannegarayangmemilikikeanekaragamanhayati

terbesardiduniadenganlebihdari30ribuspesiestanamanberkhasiat

mengobatimelaluipenelitianilmiah.Hanyasekitar180spesiestersebut

telahdimanfaatkandalamtanamanobattradisionalolehindustriobat

tradisionalIndonesia.Halinidisebabkanpemanfaatantumbuhanobat

Indonesiauntukmengobatisuatupenyakitbiasanyahanyaberdasarkan

pengalamanempirisyangdiwariskansecaraturuntemuruntanpadisertai

datapenunjangyangmemenuhipersyaratan.Penelitianfarmakologis

dengantahappengujiansecarasistematik,menggunakanmetodeuji

antidiabetesyangtepatharusdigunakanagarhasilnyadapatdipertanggung

jawabkansecarailmiah,bermanfaatbagimasyarakatdandapatmenjadi

acuanuntukpenelitianselanjutnya.

Salahsatutanamanobatyangsecaratradisionaldigunakanuntuk

mengobatidiabetesmellitusadalahjintenhitam(Nigellasativa

Linn).Masyarakatmesirmenggunakanjintenhitamuntukmengobati

kencingmanis,Penggunaanjintanhitamsebagaiobat-obatantelah

dilakukanjutaanorangdiAsia,TimurTengah,danAfrikauntukmenjaga

kesehatan.Jintanhitamadalahtanamanyangberkhasiatobatdantelah

dimanfaatkanribuantahunlampau.Dalammasyarakatislampenggunaan

jintanhitamadalahtermasukkedalampengobatanalanabi(tibbunnabawi).

HaliniterdokumentasidenganbaikmelaluiriwayatimamBukharidan

Muslimyangterjemahannyasebagaiberikut:

2

"DariAbuHurairahra:Rasulullahsaw.bersabda:Sesungguhnya

padajintanhitamituterdapatobatuntuksegalamacampenyakitkecuali

kematian".

Salahsatukhasiatjintenhitamadalahuntukantidiabeteskarena

jintenhitammempunyaibanyakkandungan.(Mahmud2007)

Haltersebutmelatarbelakangidilakukannyapengujiankhasiat

antidiabetesekstrakjintenhitam(NigellasativaLinn)untukmenurunkan

kadarglukosadarahhewanuji.Dalamhalinihewanpercobaanyang

digunakanadalahtikusputihjantangalurwistardanSD(SpragueDawley)

denganmetodeujidabetesaloksandantoleransiglukosasebagaimetodeuji

antidiabetespraklinisyangmendekatikeadaanpenderitadiabetesyang

sebenarnyadanpemeriksaankadarglukosadarahnyamenggunakan

glukometer.

1.2.PerumusanMasalah

Apakahfraksietilasetatbijijintenhitam(nigellasativaLinn)

memilikikemampuanmenurunkankadarglukosadarahpadatikusputih

jantangalurwistardenganmetodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.

1.3.PembatasanMasalah

Penelitianinidibatasihanyauntukmengetahuikemampuanfraksi

etilasetatbijijintenhitam(NigellasativaLinn)dalammenurunkankadar

glukosadarahtikusjantanmenggunakanmetodeinduksialoksandan

toleransiglukosa.

3

1.4.TujuanPenelitian

Untukmengetahuiefekhipoglikemiadalamfraksietilasetatbiji

jintenhitam(NigellasativaLinn)padatikusputihjantangalurwistar

denganmetodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.

1.5.Hipotesis

Fraksietilasetatjintenhitam(Nigellasativa.Linn)dapat

menurunkankadarglukosadarahtikusputihjantanyangdiinduksidengan

metodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.

1.6.ManfaatPenelitian

Hasilpenelitianinidiharapkandapatmemberikaninformasidalam

meningkatkanupayakesehatandenganmengembangkanobattradisional

sehinggadapatdimanfaatkandenganberdasarkanlandasanilmiah.

4

BABII

TINJAUANPUSTAKA

2.1.JINTENHITAM(NigellasativaLinn).

2.1.1.Klasifikasi(ITIS,2009)

Berdasarkanilmutaksonomi,klasifikasitanamanjintenhitam

adalahsebagaiberikut:

Dunia:Plantae

Subdunia:Tracebionta

Divisi:Spermatophyta

Subdivisi:Magnoliophyta

Kelas:Magnopliopsida

Subkelas:Magnoliidae

Bangsa:Ranuculases

Suku:Ranuculaceae

Marga:Nigella

Jenis:NigellasativaLinn

Sinonim:Nigellacreticamiller,NigellaindicaRoxb

2.1.2.Namalain

DiDunia,jintenhitamdikenaldenganberbagainama,antaralain:

Kalonji(bahasaHindi),Kezah(Hebrew),Chamushka(Rusia),Habbatus

Sauda(Arab),Siyahdaneh(Persian),FennelFlower/BlackCumin/

NutmegFlower/RomanCoriander/BlackOnianSeed(English)

5

2.1.3.Morfologi(Tjitrosoepomo,2000)

NigellasativaatauJintenHitamPahitinimerupakanjenistanaman

bunga,tumbuhsetinggi20-50cm,berbatangtegak,berkayudanberbentuk

bulatmenusuk.

Daunruncing,bercabang,bergaris(namungarisdaunnyatidak

sepertibenang;tidakseperticiridauntumbuhangenusNigellapada

umumnya),daunnyakadang-kadangtunggalataubisajugamajemuk

denganposisitersebaratauberhadapan.Bentukdaunnyabulattelur

berujunglancip.Dibagianpermukaandaunnyaterdapatbuluhalus.

Tumbuhanjintanhitammemilikibungayangbentuknyaberaturan.

Bungainikemudianmenjadibuahberbentukbumbungataubuahkurung

berbentukbulatpanjang.Bunganyamenarikdenganwarnabirupucatatau

putih,dengan5-10mahkotabunga.

Buahnyakerassepertibuahbuni.Berbentukbesar,menggembung,

berisi3-7unitfolikel,masing-masingberisibanyakbijiataubenihyang

seringdigunakanmanusiasebagairempah-rempah.Memilikirasapahit

yangtajamdanbausepertibuahstrawberry.Bijinyaberwarnahitampekat.

2.1.4.PengembangandanPertumbuhan(DeGuzman,1999)

Perkecambahansecaraepigeal.didalamiklimhangatjintenhitam

mulaiberbungasekitar100harisetelahpenaburandanbenihmulai

tumbuh50harikemudian.didalamiklimlebihhangat,jintenhitam

berbungamulai8-10minggusetelahperkecambahan.Penyerbukan

sebagianbesardilakukanolehserangga.Penyerbukanterjadipadabunga

yanglebihtuayangmulaimembungkuk.

6

2.1.5.PenanamandanPerkembangbiakan(DeGuzman,1999)

Jintenhitamdapatdikembangbiakandenganmudah,dengancara

bijidisebarkan.Perkecambahandilakukanditempatgelapdan

temperaturtinggi.benihditaburkandidalambloktepukan,setelahmenjadi

kecambahbenihditanamberbaris,umumnyajarakantarabarissatu

denganyanglainadalah25-40cm.Diethiophia,Jintenhitamsering

dipanenbersamaandengandengangandumdanjewawut.

2.1.6.EkologidanPenyebaran(KHyne,1987)

JintenhitamdipercayaberasaldariMediterania(seputarLaut

Tengah),eropaselatan,sampaikeindia.Bentuknyakecilberserabut,

ukurannyatidaklebihdari3mm,dapattumbuhsampaipadaketinggian

1100mdaripermukaanlaut.Biasanyaditanamdidaerahpegunungan

ataupunsengajaditanamdihalamanatauladangsebagaitumbuhan

rempah-rempah.DaerahsentraproduksiJintandiIndonesiaadalah

SumateradanJawasertadiberbagaidaerahlainnya.

2.1.7.Kandungankimiabijijintenhitam(DeGuzman,1999)

Bijijintenhitamantaralainmengandung:

a.Minyakatsiri:thymoquinone25-50,p-cymenedan-pinene,

carvacrol,anetoldan-terpineol.

b.Minyaklemak:asameososianat0,5%,asamlinoleatsekitar60%,asam

linolenat0,3%,asammyristat0,3%,asamoleatsekitar25%,asam

palmiat0,3%danasamstearat3%.

c.Kandunganlainnya:Tanin,alkaloid,nigelon,nigelimin,nigeliminn-

oksidadannigelisin,campestrol,stigmasterol,-sitosterol,-

7

spinasterol.Jugamengandung1,5%glucosidamelantinyangbiladi

hidrolisismenghasilkanracunmelantogenin.

Dalam100gbijijintenhitammengandung:air4g,protein22g,

lemak41g,karbohidrat17g,serat8g,mineral4,5g(Na0,5g,K0,5g,Ca

0,2g,P0,5g,Fe10mg),thiamin1,5mg,piridoksin0,7mg,tokoperol34mg

danniasin6mg.

2.1.8.Khasiatjintenhitam

Diuretik,karminatif,kencingbatu,sakitgigi,bengkakkarena

peradangan,kelelahan,cacingan,masalahkulitsepertijerawat,haid,

menambahASIpadawanitamenyusui,meningkatkansistemkekebalan

tubuh,Khasiatlainnyaadalahmengurangiberatbadandanlingkarperut,

menurunkantekanandarah,guladarahpuasa,trigiliseridadankolesterol

HDL,asamurat,hipoglikemik(Al-Haderetal.,1993).

2.2.TinjauanHewancoba(Sharpetal,1998)

Klasifikasihewancobayangdigunakanpadapenelitianiniadalah:

Regnum:Animalia

Filum:Chordata

Kelas:Mamalia

Bangsa:Rhodenta

Keluarga:Muridae

AnakKeluarga:Murinae

Marga:Rattus

Jenis:R.Norvegicus

8

Ratusnorvegicusmerupakansalahsatuspeciestikusyangpaling

umumdijumpaidirpekotaan.Hasilseleksipadahewaniniseringdigunakan

sebagaihewanpercobaanyangdikenaldengantikusputihdansebagai

hewanpeliharaaandenganwarnayangbervariasi.

2.3.EkstrakdanEkstraksi

Ekstrakadalahsediaanpekatyangdiperolehdenganmengekstraksi

zataktifdarisimplisianabatiatauhewanimenggunakanpelarutyang

sesuai,kemudiansemuaatausebagianpelarutdiuapkandanmassaatau

serbukyangtesisaperlakukansedemikianhinggamemenuhibakuyang

telahditetapkan.(DepkesRI,1994)

Ekstraksiadalahsuatuprosespenarikankandungankimiayanglarut

sehinggadapatterpisahdaribahanbahanyangtidaklarutdengan

menggunakanpelarutcair.Ekstrakmerupakansediaankentalyang

diperolehdenganmengekstraksisenyawaakifdarisimplisianabatiatau

hewanimenggunakanpelarutdandiuapkandanmassaatauserbukyang

tersisadiperlakukansedemikianrupahinggamemenuhibakuyangtelah

ditetapkan.(Harbone,1996)

Ekstraktumbuhanobatyangdibuatdarisimplisianabatidapat

dipandangsebagaibahanawaldianalogkandengankomoditibahanbaku

obatyangdenganteknologifitofarmasidiprosesmenjadibahanantaraatau

produkjadi.Ekstraksebagaibahananataraberartimasihmenjadibahan

yangdapatdiproseslagimenjadifraksifraksi,isolatsenyawatunggal

ataupuntetapsebagaicampuandenganekstraklain,ekstraksebagaiproduk

9

jadiberartiekstrakyangberadadidalamsediaanobatjadisiapdigunakan

olehpenderita.

Prinsipyangsangatpentingdalamekstrakadalahbahwasuatuzat

akanterekstraksiefektifjikaekstraksidilakukanberulang-ulangdengan

menggunakanpelarutdalamjumlahyanglebihkecildaripadahanyasatu

atauduakaliekstraksidenganjumlahyangbesar.

Ekstrakdikelompokanatasdasarsifatnya,yaitu(Voight,2005):

a.Ekstakenceradalahsediaanyangmemilikikonsistensisemacammadu

dandapatdituang.

b.Ekstrakkentaladalahsediaanyangliatdalamkeadaandingindantidak

dapatdituang.Kandunganairberjumlahsampai30%.

c.Ekstrakkeringadalahsediaanyangmemilikikonsistensikeringdan

mudahdituang,sebaiknyamemilikikandunganlembabtidaklebih

dari5%.

d.Ekstrakcairadalahekstrakyangdibuatsedemikianrupasehingga1

bagiansimplisiasesuaidengan2bagianekstrakcair.

Prosesekstraksidapatmelaluitahapmejadi:pembuatanserbuk,

pembasahan,penyariandanpemekatan(DepkesRI,1978,1986)

2.3.1.Pembuatanserbuk

Padaumumnyapenyarianakanbertambahbaikbilapermukaan

serbuksimplisiayangbersentuhandengancairanpenyarisemakinluas.

Kehalusanserbukakanmempermudahprosespenyarian.Tetapiserbuk

yangterlaluhalusakanmerusakseldindingselsehinggaakanmerusakzat

10

aktifpadasimplisiatersebutdanzatyangtidakdiinginkanpundapatikut

masukkedalamhasilpenyarian.

2.3.2.Pembasahan

Pembasahanserbukdilakukanpadapenyarian.Dimaksudkan

memberikesempatansebesar-besarnyakepadacairanpenyarimemasuki

pori-poridalamsimplisiasehinggamempermudahpenyarian

selanjutnya(Depkes,1978)

2.3.3.Penyari/Pelarut

Cairanpenyariyangdigunakandalamprosespembuatanekstrak

adalahpenyariyangbaikuntuksenyawakandunganyangberkhasiatatau

aktif.Penyaritersebutharusdipisahkandaribahandadarikandungan

lainnya,sertaekstrakhanyamengandungsebagianbesarsenyawayang

diinginkan.Faktorutamayangmenjadipertimbangandalampemilihan

penyariadalahselektifitas,ekonomis,dankemudahanbekerja(DepkesRI

1978)

Macam-macammetodepenyariandalamekstraksiyangdapatdi

lakukanialah:

a.Ekstraksidenganmenggunakanpenyari(DepkesRI1978)

1.Maserasi(Depkes2001)

Maserasiadalahprosespengekstrakkansimplisiadengan

menggunakanpelarutdenganbeberapakalipengocokanatau

pengadukanpadatemperaturruangan(kamar)secarateknologi

11

termasukekstraksidenganmetodepencapaiankonsentrasipada

keseimbangan.

2.Perkolasi

Perkolasiadalahekstraksidenganpelarutyangselalubaru

sampaisempurna(exhaustiveextraction)yangumumnyadilakukan

padatemperaturruangan.Prinsipperkolasiadalahdengan

menempatkanserbuksimplisiapadasuatubejanasilinder,yang

bagianbawahnyadiberisekatberpori.Cairanpenyariakanmenarik

zataktifdalamsel-selyangterdapatdalamsimplisia.

3.Refluks

Refluksadalahekstraksidenganpelarutsampaipada

temperaturtitikdidihnyaselamawaktutertentudanjumlahpelarut

terbatasyangrelatifkonstandenganadanyapendinginbalik.

Umumnyadilakukanpengulanganprosespadaresidupertama

sampai3-5kalisehinggadapattermasukprosesekstraksi

sempurna.

4.Sokhletasi

Sokhletadalahekstraksimenggunakanpenyariyang

berbeda.Umumnyadilakukandenganalatkhusussehinggaterjadi

ekstraksiberlanjutsampaijumlahpenyarirelatifkonstandengan

adanyapendinginbalik.

12

5.Digesti

Digestiadalahmaserasikinetik(denganpengadukan

kontinyu)padatemperaturyanglebihtinggidaritemperature

ruangan,secaraumumdilakukanpadatemperature40oC-50oC.

6.Infus

Infusadalahekstraksidenganpelarutairpadatemperatur

penangasairmendidih,temperatureterukur96oC-98oCselama

waktutertentu(15-20menit).Infuspadaumumnyadigunakan

untukmenarikataumengekstraksizataktifyanglarutdalamair

daribahan-bahannabati.Hasildariekstrakiniakanmenghasilkan

zataktifyangtidakstabildanmudahtercemarolehkumandan

kapang,sehinggaekstrakyangdiperolehdenganinfustidakboleh

disimpanlebihdari24jam.

7.Dekok

Dekokadalahinfusyangwaktunyalebihlama(lebihdari

30menit)dantemperatursampaititikdidihair.

Caraekstraksiyangdigunakandalampenelitianiniadalah

maserasi.MaserasiadalahcaraekstraksiyangpalingsederhanaBahan

yangdihaluskansesuaidengansyaratfarmakope(umumnyaterpotong

potongataudiserbukkasarkan)disatukandenganbahanekstraksi.

Waktumaserasiberbedabeda,masingmasingfarmakope

mencantumkan4-10hari.(Voight,1995)

13

b.Destilasiuap

Destilasiuapadalahekstraksikandungansenyawamudah

menguap(minyakatsiri)daribahan(segaratausimplisisa)dengan

uapair.Carainididasarkanpristiwatekananparsialsenyawa

kandunganmenguapdenganfaseuapairdariketelsecaraberlanjut

sampaisempurnadandiakhiridengankondensasifaseuapcampuran

menjadidestilatairbersamasenyawakandunganyangmemisah

sempurnasebagian.

2.4.DiabetesMellitus

Diabetesmellitus,penyakitgulaataukencingmanisadalahsuatu

gangguankronisyangkhususnyamenyangkutmabolismehidratarang

(glukosa)didalamtubuh.Penyebabnyaadalahkekuranganhormoninsulin,

yangberfungsimemanfaatkanglukosasebagaisumberenergidan

mensintesislemak.Akibatnyaialahglukosabertumpukdidalamdarah

(hiperglikemia)danakhirnyadiekskresikanlewatkemihtanpadigunakan

(glycosuria).Olehkarenaituproduksikemihsangatmeningkatdanpasien

selalubuangairkecil,merasaselaluhaus,beratbadanmenurundanberasa

lelah.Penyebablainialahmenurunnyakepekaanreseptorselbagiinsulin

(resistensiinsulin)yangdikibatkanmakanterlalubanyakdankegemukan

(overweigh).

2.4.1.DiabetesmelitusTipe-1(IDDM)

Padatipeiniterdapatdestruksidariselselbetapankreas,

sehinggatidakmemproduksiinsulinlagidenganakibatselseltidak

menyerapglukosadaridarah.Karenaitukadarglukosadarahmeningkatdi

14

atas10mmol/l,yakninilaiambangginjal,sehinggaglukosaglukosa

berlebihandikeluarkanlewaturinbersamabanyakair(glycosuria)Di

bawahkadartersebutglukosaditahanolehtubuliginjal.Tipe-1

mengghinggapiorang-orangdibawahusia30tahun.

Penyebabdiabetestipe-1inibelumbegitujelas,tetapiterdapat

indikasikuatbahwajenisinidisebabkanolehsuatuinfeksivirusyang

menimbulkanreaksiautoimunberlebihanuntukmenanggulangivirus.

Akibatnyasel-selpertahanantubuhtidaktidakhanyamembasmiviru,

melainkanjugaturutmerusakataumemusnahkansel-sellangerhans.

Dalamwaktusatutahunsesudahdiagnosa,80-90%penderitatipe-1

memperlihatkanantibodisel-selbetadidalamdarahnya.Padatipeini

faktorketurunanjugamemegangperanan.Virusyangdicurigaiadalah

virusCoxsackie-BEpstein-Barr,morbilldanvirusparotitis.Pengobatan

tipeinisatu-satunyaadalahpemberianinsulinseumurhidup.(Tjaydan

Rahardja,2002)

2.4.2.DiabetesmelitusTipe-2(NIDDM)

Padatipeinilazimnyamulaidiatas40tahundenganinssidenlebih

besarpadaoranggemukdanpadausialebihlanjut.Orangorangyang

hidupnyamakmur,culasdankuranggerakbadanlebihbesarresiko

terkenagejalaini.Penyebabgejalainiadalahakibatmenua,banyakpasien

jenisinimengalamipenyusutanselselbetayangprogresifsertaserta

penumpukanamiloidsekitarselselbeta.Selbetayangtersisapada

umumnyamasihaktiftetapisekresiinsulinnyasemakinberkurang.Selain

itukepekaanreseptornyamenurun.Hipofunsiselbetainibersama

15

resistensiinsulinyangmeningkatmengakibatkanguladarahmeningkat

(hiperglikemia).Padatipeinitidaktergantungpadainsulindandapat

diobatidenganantidiabetikoral.

Diagnosatipe-2umumnyabarudidiagnosapadastadium

terlambat,padahaldiagnosadiniadalahpentingsekaliuntuk

menghindarkankomplikasilambat.Makabilaterdapatgejalasepertihaus

yanghebat,seringbuangairkecildanturunnyaberatbadansertarasaleti,

makasebaiknyasegerakonsultasikedokteruntukdiperiksapenyakit

gula.(TjaydanRahardja,2002)

2.4.3.DiabetesGestional

DiabetesMellitusgestional(GDM)adalahkeadaandiabetesatau

intoleransiglukosayangtimbulselamamasakehamilan,danbiasanya

berlangsunghanyasementaraatautemporer.

Diabetespadamasakehamilan,walaupunumumnyadapatpulih

sendiribeberapasaatsetelahmelahirkan,namundapatberakibatburuk

yangdapatterjadiantaralainmalformasikongenital,peningkatanberat

badanbayiketikalahirdanmeningkatnyarisikomortalitasperinatal.

WanitayangpernahmenderitaGDMakanlebihbesarrisikonyauntuk

menderitalagidiabetesdimasadepan.(Depkes,2006).

2.4.4.KelainanFisiologispadaDiabetes

Manifestasiutamadiabetesmellitusadalahhiperglikemiayang

terjadiakibatberkurangnyajumlahglukosayangmasukkedalamsel,

berkurangnyapenggunaanglukosaolehberbagaijaringandanpeningkatan

produksiglukosakarenaprosesglukoneogenesisolehhati.Poliuri,

16

polidipsi,polifagidanpenurunanberatbadanmerupakangejalautama

penyakitini.Dalamkeadaanhiperglikemiayangberlangsunglamadan

melewatiambangginjal,akanterjadiglukosuriadimanabatasmaksimal

reabsorbsipadatubulusrenalisdilampauidanglukosaakandiekskresikan

kedalamurin(Murraydkk,1992).

Volumeurinmeningkat(poliuri)akibatterjadinyadiuresisosmotik

yangselanjutnyaakanmenimbulkandehidrasidanadanyarangsangan

untukbanyakminum(polidipsi).Glikosuriamenyebabkankehilangan

kaloriyangcukupbesar(4,1kalbagisetiapkarbohidratyang

diekskresikan).Keadaaninijikaditambahdengandeplesijaringanotot

danadiposaakanmengakibatkanpenurunanberatbadanyanghebat

kendatiterdapatpeningkatanseleramakan(polifagia)danasupankalori

yangnormal.Namunglukosayangdimakantidakakandapatmasukke

dalamseluntukmembentukglikogenmaupundipergunakanuntuk

menghasilkanenergisehinggamengeluhlelah,mengantuk(Murraydkk,

1992;Sylviadkk,1995).

Dalamkeadaandefisiensiinsulin,sintesisproteinakanmenurun.

Pengangkutanasamaminosebagaisubstratglukoneogenikkedalamotot

berkurangsehinggaterjadikeseimbangannitrogenyangnegatif.Defisiensi

insulinjugaterjadikeseimbangannitrogenyangnegatif.Defisiensiinsulin

jugamenyebabkantidakadanyakerjaantipolisismaupunlipogenik

sehinggakadarasamlemakplasmaakanmeninggi.Jikakemampuanhati

untukmengoksidasiasamlemakterlampaui,makasenyawaasam-

hidroksibutiratdanasamasetoasetatakanbertumpuksehinggaterjadi

17

ketosis.Mula-mulapenderitadapatmengimbangipenumpukanasam

organikinidenganmeningkatkanpengeluaranCO2lewatsistemrespirasi,

namunbilakeadaaninitidakdikendalikanmakaakanterjadiasidosis

metabolik,pernafasanmenjadicepatdandalam(pernafasankushmaul)

danpasiendapatmeninggaldalamkeadaankomadiabetik.

Selainketoasidosis,komplikasiyangseringtimbulialah

komplikasivaskularjangkapanjangberupamikroangiopatimencakup

retinopatidiabetik,nefropatidiabetikmaupunneuropatidiabetik.

Mikroangiopatimempunyaigambaranhistopatologisberupa

aterosklerosis,penimbunansorbitoldalamintimavaskular.

Hiperlipoproteinemiamaupunkelainanpembekuandarah.Sehingga

diabetesmellitusdapatmenjadisalahsatupenyebabpenyakitangina

pektoris,onfarkmiokard,gagalginjal,katarak.Kegagalanpernafasan

bahkankematian(Murraydkk,1992;Sylviadkk,1995).

2.4.5.DiagnosisDiabetes

Penyakitdiabetesmelitusditandaigejala3P,yaitupoliuria(banyak

berkemih),polidipsia(banyakminum)danpolifagia(banyakmakan),

yangdapatdijelaskansebagaiberikut:

Disampingnaiknyakadarguladarah,diabetesbercirikanadanya

guladalamkemih(glycosuria)danbanyakberkemihkarenaglukosayang

diekskresikanmengikatbanyakair.Akibatnyatimbulrasasangathaus,

kehilanganenergi,turunnyaberatbadansertarasaletih.Tubuhmulai

membakarlemakuntukmemenuhikebutuhanenerginya,yangdisertai

perubahanzat-zatperombakan,antaralainaseton,asamdiksobutiratdan

18

diacetat,yangmembuatdarahmenjadiasam.Keadaanini,yangdisebut

ketoacidosisdanterutamatimbulpadatipe-1,amatberbahayakarena

dapatmenyebabkanpingsan(comadiabeticum).Napaspenderitasering

kaliberbauaseton(TjaydanRahardja,2002).DiagnosisDMyang

dianjurkanadalahyangsesuaidengananjuranWHO1985dengan

mengambilsampleglukosadarahvenapuasadanduajampostpradial

(Ganiswara,1995).

2.5.Alloksan

Gambar1.AlloksanSinonim:Alloxan;2,4,5,6-tetraoxohexahydropyrimidine;

mesoxalylurea;mesoxalylcarbamide

Rumusmolekul:C4H2N2O4

Beratmolekul:142,07

Persentasekandungan:C33.82%,H1.42%,N19.72%,O45.05%

Kelarutan:mudahlarutdalamair;aseton;alcoholdan

petroleumeter.Larutandalamairpanas

berwarnakuningdansetelahdingin

Penggunaan:Untukmenghasilkandalameksperimen

terhadapbinatangdiabetes;dalameksperimen

nutrisi;dalamsintesissenyawaorganic.

Mekanismekerja:Aloksandengancepatterikatatauterakumulasi

didalamsel-Bpankreasberbedadenganbukan

sel-Bpankreas.agensitotoksiknyasecaracepat

19

danselektifmerusakkemampuansel-Bdalam

memproduksiinsulinyangdikenalsebagaiefek

diabetogenik.

Stabilitas:Aloksanstabilpadasuhu210derajatcelcius.

Penyimpananpadasuhurendahdalamwadah

tidaktembuscahayadantertutuprapat.(Windolz

M,1983).

2.6.Glibenclamid

Gambar2.Glibenclamid

Sinonim:Glibenclamida;Glibenclamidum;Glibenklamid;

Glibenklamidas;Glibenklamidi;Glybenclamide;

Glybenzcyclamide;HB-419;U-26452

(marthindale);Glyburide(merk)

Namakimia:1-{4-[2-(5-Chloro-2

methoxybenzamido)ethyl]benzenesulphonyl}-3-

Rumusmolekul:C23H28ClN3O5S

Beratmolekul:494.01

PersentasiKandungan:C55.92%,H5.71%,Cl7.18%,N8.51%,O

16.19%,S6.49%

20

Deskripsi:Berwarnaputihatauhampirputih,berbentuk

serbukKristal,(Marthindal)

Kelarutan:Praktistidaklarutdalamairdaneter;sedikit

larutdalam,etanol(95%),metanoldanmetil

alcohol;denganmudahlarutdalamdiklormetan

ataumetilenklorida.pKa5,3.Dapatdilarutkan

dalamlarutanhidroksidaalkali.LD50padatikus

(g/kg):>20secaraoral;>12,5i.p;>20s.c.

Penggunaanterapi:Antidiabetikoral(diabetestipe2),hipoglikemik

Dosis:dewasa:oral2,5-5mg/haribersamaanmakan;

untukpasienlebihsensitiveterhadapobat

hipoglikemik(disfungsiginjalatauhati)dewasa:

padaawalnya1,25mg/hari,perawatan:1,2520

mg/haridalamdosistunggalataubagi,tidak

direkomendasikanuntukdosis>20mg/hari.

(AtoZ)

Mekanismekerja:Derivat-klormetoksiiniadalahobatpertama

dariantidiabetikaoralgenerasike-2dengan

khasiathipoglikemisnyayangkira-kira100kali

lebihkuatdaripadatolbutamida.Polakerjanya

berlainandengansulfonylurealain,yaitudengan

single-dosepagiharimampumenstimulasi

sekresiinsulinpadasetiappemasukanglukosa

(selamamakan).Dengandemikianselama24

21

jamtercapairegulasiguladarahoptimalyang

mirippolanormal.resorpsinyadariususpraktis

lengkap,PP-nyadiatas99%,plasma-t1/2-nyaca

10jam,kerjanyadapatbertahansampai24jam.

Dalamhatizatinidirombakmenjadimetabolit

kurangaktif,yangdiekskresikansamaratalewat

kemihdantinja.(TjaydanRahardja,2002)

mekanismenyamengurangiguladarahdengan

menstimulasipelepasaninsulindaripankreas.

Memungkinkanjugamengurangiproduksi

glukosahatidanataumeningkatkanrespon

insulin.

2.7.Acarbosa(Martindale,2007)

Sinonim:Acarbose;Acarbosum;Akarbos

NomorregestasiCAS:56180-94-0

Beratmolekul:645.60

Rumusmolekul:C46.51%,H6.71%,N2.17%,O44.61%

Deskripsi:Berbentukamorp,higroskopis,berwarnaputih/

kekuning-kuningan,sangatmudhlarutdalamair,

larutdalammetalalcoholdanpraktistidaklarut

dalamdiklorometan.

Mekanismekerja:Berkhasiatmenghambatenzimglukosidase

(matase,sukrasedanglukomilase)yangperluuntuk

22

perombakandi/polisakaridadarimakananmenjadi

monosakarida,dengandemikianpenyerapan

glukosadiperlambat,sehinggafluktuasiglukosa

darahmenjadilebihkecildannilairata-ratanya

menurun.

Dosis

Efeksamping

:3dd50mglangsungsebelummakan,bilaperlu

dinaikan1-22minggusampaimaksimal3dd100

mg/minggu.

:Terbentuknyabanyakgasdiususdankejangusus

diakibatkanpenumpukanhidratangyangtidak

dicernadidalamusus.

2.8.Etilasetat(Merk)

Gambar3.Etilasetat

Sinonim

Sifatkimiadanfisika

:Etilester,esterasetat,esteretanol

:Etilasetatadalahpelarutpolarmenengahyang

volatil(mudahmenguap),tidakberacun,dan

tidakhigroskopis.Etilasetatmerupakan

penerimaikatanhidrogenyanglemah,danbukan

suatudonorikatanhidrogenkarenatitidakadanya

protonyangbersifatasam(yaituhidrogenyang

terikatpadaatomelektronegatifsepertiflor,

23

oksigendannitrogen.Etilasetatdapat

melarutkanairhingga3%,danlarutdalamair

hinggakelarutan8%padasuhukamar.

Kelarutannyameningkatpadasuhuyanglebih

tinggi.Namundemikian,senyawainitidakstabil

dalamairyangmengandungbasaatauasam.

NamaCAS:10238-21-8(merek)

Rumusmolekul:C4H8O2

Beratmolekul:88.12g/mol

Deskripsi:Cairantakberwarna

Penggunaan:Secaraluasdigunakansebagaibahanpelarut

untukindusridanbahanpelarutuntukekstraksi.

2.9.MetodePengujian

2.9.1.Metodeinduksialoksan

Keadaandiabetespadahewanujiinidapatdilakukandengan

carapankreotomidanjugasecarakimia.Zat-zatkimiasebagaiinduktor

diabetogenantaralainaloksandanstreptozosinyangpadaumumnya

dapatdiberikansecaraparenteral.Zatdiatasmampumenginduksi

hiperglikemiyangpermanendalamwaktuduasamapitigahari.

Prinsipmetodenyaadalahkepadahewanujidilakukandegan

memberikanaloksanmonohidratsecaraintrevenadengandosis140

mg/kgbb.Hewanujiyangberbedadengankondisiyangberbedaakan

menghasilkandosisyangberbedasehinggaujipendahuluantetap

24

dilakukandelapanharisetelahpemberianaloksan.Pemberianobat

antidiabetiksecaraoraldapatmenurunkankadarglukosadarah

dibandingkanterhadaphewanujinormal.

Keadaandiabetespadahewanujidilakukandengan

memberikanaloksanmonohidratsecaraintravenadengandosis140

mg/kgbb.Hewanujiyangberbedasehinggaujipendahuluantetap

dilakukanuntukmenetapkandosisaloksan.Selanjutnyaperkembangan

hiperglikemiadiperiksasetiaphari.Pemberiantanamanobatyangakan

diujidilakukandelapanharisetelahpemberianaloksan.Pemberianobat

antidiabetiksecaraoraldapatmenurunkankadarglukosadarah

dibandingkanterhadaphewanujinormal.

Keadaandiabetespermanenpadahewancobadapatdicapai

denganpemberiandosisaloksanyangoptimum.Sebelummencapai

keadaantersebut,hewanakanmengalamibeberapatahapanyang

fluktuatifdimanaterjadifasehiperglikemia,fasehipoglikemiadan

kadang-kadangsecaraspontanakankembalinormalbahkandapat

terjadikematian.Adapunfase-faseyangterjadiadalah(Jamalia,2005):

Pertama:setelah5sampai19menitpemberianaloksansecara

intravenaakanterjadifasehipoglikemiaawaldimanasarafotonom

akanmempengaruhiselbetapankreasagarmelepaskaninsulinyang

tersimpansehinggainsulinmasukkeperedarandarahdan

menyebabkanhipoglikemia.Faseiniberlangsungsingkatnamundapat

berakibatfatalpadahewan.

25

Kedua:dalamfaseinimula-mulaterjadistimulasi

orthosimpatikdimanaterjadikekuranganinsulinyangdisebabkan

adanyainhibisisekresiinsulinyangdisebabkanadanyainhibisisekresi

insulindalamsel-selbetapankreas.Faseiniberlangsung30sampai120

menitsetelahpemberianaloksan.Dalamfaseinikadang-kadangkadar

glukosamencapai6g/l.

Ketiga:padafaseiniterjadihipoglikemiasekunderdankadang

terjadikonvulsipadahewan.Padafaseinikadarglukosadarah

menurundanmencapaikeadaanyanglebihgawatdarisemula.Tahap

yangterjadiantarajamketigaataujamkesepuluhsetelahpemberian

aloksansecaraintravenasangatberbahayadandapatmenyebabkan

kematian.Untukkedaanfataldianjurkanpemberianglukosa.

Keempat:faseterjadinyahiperglikemiaawalpermanen.Pada

faseinihewanmenjadihiperglikemiapermanen.Terjadisetelah2

sampai8jamsetelahpemberianaloksansecaraintravena.Tetapipada

faseinihewandapatpulamenjadinormalkembalisecaraspontan

setelahselangwaktutersebut.Olehkarenaitusebaiknyapemeriksaan

kadarguladarahdilakukansetelahtahapkeempattersebutatauharike-

3,diperkirakansindromdiabetespermanenterjadiakibatrusaknya

sebagiansel-selbetapulaulangerhans,tetapiadapulayang

menyatakanbahwahayafungsiselLangerhanssajayangambang

rangsangnyamenurun(Jamalia,2005).

26

2.9.2.Metodeujitoleransiglukosaoral.(Depkes,1993)

Kemampuantubuhuntukmenggunakankarbohidratdisebut

toleransikarbohidrat(toleransiglukosa).Denganmemberikanglukosa

1g/kgbbsecaraoral,kadarglukosadarahakannaik,tetapitetapdalam

keadaannormaltidakpernahmelebihi10sampai170mg/100ml.

Puncakkadarglukosadalamatau1jamdankembalinormalsetelah

2-3jam.

Prinsipmetodenyaadalahkepadahewanujiyangtelah

dipuasakanselama20-24jam,diambildarahvenanyalaludiberikan

bahanujiobatantidiabetesdandiberilarutanglukosaperoral.

Kemudiancuplikandarahdiambillagisetelahintervalwaktutertentu.

27

BABIII

KERANGKAKONSEP

3.1.AlurPenelitian

Menurutempirisbijijintenhitamdapatmenurunkanglukosadarah

Serbukbijijintenhitam

Ekstraksidanpartisi

Pengujianfraksietilasetat

Aklimatisasitikus(2minggu)

MetodeinduksialoksanMetodetoleransiglukosa

Pemeriksaankadarglukosadarahtikus(harike-17,21dan28)

Analisadata

28

Pemeriksaankadarglukosadarahtikus(menitke-30,60,90,120,150dan180)

BABIV

METODEPENELITIAN

4.1.TempatDanWaktuPenelitian

PenelitianinidilakukandilaboratoriumFakultasKedokterandan

IlmuKesehatanUniversitasIslamNegeriSyarifHidayatullahJakarta.

BerlangsungmulaidaribulanApril2009sampaiAgustus2009.

4.2.AlatdanBahan

4.2.1.Alat

Alat-alatyangdigunakandalampenelitianiniadalahsebagaiberikut:

Timbanganhewan,kandangtikusbesertatempatmakanandanminum,

sondeoral,jarumsuntik,hotplate,blender,magneticstirer,destiller,oven,

timbangananalitik,holder,glukometerdantesstrip,vacumrotavapor,

kertassaring,kapas,danalat-alatgelas.

4.2.2.Bahan

Bahanyangdigunakanadalahbijijintenhitam(Nigellasativa

linn),denganspesifikasiwarnahitam,bauaromatik,danrasaagakpedas

yangdiperolehdaritokoIsykarimayangdiimpordariMesir,gibenklamid

sebagaiobatpebandinginduksialoksandanakarbosesebagaiobat

pebandingujitoleransiglukosa.

29

4.3.ProsedurKerja

4.3.1.PembuatanSimplisia

Pembuatansimplisiayangbaikdanmemenuhisyaratterdiridari

tahap-tahapsebagaiberikut:sortasi,pencucian,perajangan,pengeringan,

penggilingandanpengayakan.

4.3.2.Ekstraksi(Harbone,1996)

Simplisiabijijintenhitam(NigellasativaL)diekstraksidengan

metodemaserasisecarabertingkatdenganmenggunakanpelarutetanol

70%sehinggadidapatekstrak,laluekstraktersebutdievaporasidengan

vacuumevaporatorsehinggadidapatekstrakkentalkemudiandi

tambahkanpelarutetilasetatkemudianpartisihinggaterbentuk2lapisan,

lapisanekstraketilasetattersebutdiujiaktivitaspenurunankadarglukosa

darah.

a.Ditimbangserbuksimplisia2000gram,kemudiandimasukkanke

dalamErlenmeyer,ditambahkanpelarutetanol70%sampaiserbuk

simplisiaterendamdanterdapatlapisanpelarutsetebal3cmdiatas

serbuksimplisia.

b.Erlenmeyerditutupmaserasiselamasatuharisambilsesekalidiaduk.

c.Disaringhasilmaserasidenganmenggunakankapasdiatascorong

sehinggadidapatkanfiltrate,selanjutnyafiltrateyangdihasilkan

disaringlagidenganmenggunakankertassaring.Kemudian

dimaserasikembalisampainampakwarnapucat.

30

d.Filtratyangdidapatkankemudiandiuapkanpelarutnyadengan

menggunakanrotaryevaporatorvakumsampaididapatkanektrak

kental.

e.Ekstrakkentalditambahkanairaquadestsebanyak100150lalu

pindahkanpadacorongpisahkemudianmasukanetilasetatsebanyak

100mlkemudiandikocok,lakukanpartisisampaiwarnapelarut

menjadijernihkembalikemudianambillapisanfraksietilasetat.

f.Fraksietilasetatyangdidapatkemudiandimurnikandengan

penambahantragakan,kocokkuatlaludisaringmenggunakankertas

saring.

g.Fraksietilasetatmurnikemudiandiuapkandenganrotaryevaporator

hinggadidapatkanfraksikentaletilasetat.Kemudiandibuatlarutan

ujidandiberikankepadahewanuji.

4.3.3.UjiPenapisanFitokimia

a.Identifikasigolonganalkaloid

Sebanyak+5gramserbukdilembabkandengan5ml

ammoniak25%digerusdalammortir,kemudianditambahkan20ml

kloroformdandigeruskembalidengankuat,campurantersebut

disaringdengankertassaring,filtratberupalarutanorganikdiambil

(sebagailarutanA),sebagailarutanA(10ml)diekstraksidengan10

mllarutanHCl1:10denganpengocokandalamtabungreaksi,diambil

larutanbagianatasnya(larutanB).LarutamAditeteskanbeberapa

tetespadakertassaringdandisemprotatauditetesidenganpereaksi

Dragendroff,terbentukwarnamerahataujinggapadakertassaring

31

menunjukkanadanyasenyawaalkaloid.LarutanBdibagidalam2

tabungreaksi,ditambahkanmasing-masingpereaksiDragendroff

danpereaksiMayer,terbentukendapanmerahbatadenganpereaksi

DragendroffatauendapanputihdenganpereaksiMayermenunjukkan

adanyasenyawaalkaloid.

b.Identifikasigolonganflavonoid

Sebanyak+10gramserbukditambah100mlairpanas,

didihkanselama5menit,saring.Ambil5mlfiltratnya(dalamtabung

reaksi),ditambahkanserbukMgsecukupnyadan1mlasamklorida

pekatdan2mlamilalkohol,kocokkuatdanbiarkanmemisah.

Terbentuknyawarnamerah,kunig,ataujinggapadalapisanamil

alkoholmenunjukkanadanyaflavonoid.

c.Identifikasigolongansaponin

Serbukdimasukkankedalamtabungreaksi,ditambah10

mlairpanas.Setelahdinginkocokkuatsecaravertikalselama10

detik.Terbentuknyabusayangstabil,menunjukkanadanyasaponin,

biladitambahkan1tetesHCl1%busatetapstabil.

d.Identifikasigolongansteroiddantriterpenoid

Sebanyak+5gramserbukdimaserasidalam20mleter

selama2jamkemudiandisaring.Diuapkandalamcawanpenguap

sampaikering.Ditambahkan2tetesasetatanhidratdan1tetesasam

sulfatpekatkedalamresidu.Terbetuknyawarnahijauataumerah

menunjukkanadanyasteroid/triterpenoid.

32

e.Identifikasigolongantanin

Sebanyak+10gramserbukditambah10mlair,didihkan

selama15menit,setelahdinginkemudiandisaringdengankertas

saring.Filtratditambah1-2tetesFeCl31%,terbentuknyawarnabiru,

hijauatauhitammenunjukkanadanyaseyawagolongantanin.

f.Identifikasigolongankuinon

Sebanyak+1gramserbukdipanaskandalamairselama5

menit,disaring.Sebanyakmlfiltatditambah5mlNaOH1N,

terbentukwarnamerahmenunjukkanadanyakuinon.

g.Identifikasigolonganminyakatsiri

Sebanyak+2gramserbukdimasukkankedalamtabung

reaksi(volume20ml),tambahkan10mlpelarutpetroleumeter.Pada

muluttabungdipasangcorongyangdiberilapisankapasyangtelah

dibasahidenganair,kemudiandisaringdengankertassaring.Filtrat

yangdiperolehdiuapkanpadacawanpenguap,selanjutnyaresidu

dilarutkandenganpelarutetanol95%sebanyak5mllalusaring

dengankertassaring.Filtratnyadiuapkandengancawanpenguap,

residuyangberbauaromatikmenunjukkanadanyasenyawagolongan

minyakatsiri.

4.3.4.Rancanganpercobaan

Hewancobayangdigunakanadalahtikusputihjantangalur

Wistar,berumur4-5bulandenganberatbadan180-250gram

diaklimatisasiselamaduamingguagardapatmenyesuaikandengan

33

KelJmlTikusPerlakuan16Kontrolnormal,diberiaqudest1ml/200gbb26Kontrolnegatif,dibuatdiabetes,diberiaqudest1ml/200gbblingkungannya.Selamaprosesadaptasi,dilakukanpengamatankondisi

umumdanpenimbanganberatbadan.

a.Induksialoksan

Hewanujidipilihsebanyak36ekortikusputihjantansecara

acakuntukdibagimenjadi6kelompok,masing-masingterdiridari6

ekor.Penentuanjumlahtikustiapkelompok,dihitungberdasarkan

rumusFederer:(n-1)(t-1)15,dimanatmenunjukkanjumlah

perlakuandannmenunjukkanjumlahulanganminimaldaritiap

perlakuan(Sudjana,1992).

b.Metodetoleransiglukosa

Hewanujidipilihsebanyak32ekortikusputihjantansecara

acakuntukdibagimenjadi4kelompok,masing-masingterdiridari8

ekor.Penentuanjumlahtikustiapkelompok,dihitungberdasarkan

rumusFederer:(n-1)(t-1)15,dimanatmenunjukkanjumlah

perlakuandannmenunjukkanjumlahulanganminimaldaritiap

perlakuan(Sudjana,1992).

Tabel1.PembagianKelompokHewanUjiinduksialoksan

34

KelJmlTikusPerlakuan18Kontrolnormal,diberiaqudest1ml/200gbb28Kontrolnegatif,diberiglukosa,diberiairsuling1ml/200gbb38Kontrolpositif,diberiglukosa,diberisuspensiakarbosa1,0mg/200gbb48Diberiglukosa,diberisediaanujifraksietilasetatbijijintenhitamdosispotensialpadametodeinduksialoksan.36Kontrolpositif,dibuatdiabetes,diberisuspensiglibenklamid0,1mg/200gbb46Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam41mg/200gbb56Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam82mg/200gbb66Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam164mg/200gbbTabel2.PembagianKelompokHewanUjiToleransiGlukosa

4.3.5.PembuatanSediaanUjidanDosis

a)Dosisekstrakbijijintenhitam

DosisdipakaiberdasarkanpenelitianAl-awdidanGumatahun

1987bahwadengandosis41mg/haribijijintenhitamtidak

35

memberikanefekyangsignifikanterhadappenurunankadarglukosa

darahtikusdenganmetodeinduksistreptotozin.Dalampenelitianini

dilakukanpercobaandengandosisfraksietilasetatbijijintenhitam

yangdigunakanadalah:

Dosisrendah41mg/200gbb

Dosissedang82mg/200gbb

Dosistinggi164mg/200gbb

Volumelarutanujiyangdiberikankepadasetiapkelompokuji

dankontrolpembandingsamadenganvolumeairsulingyangdiberikan

kepadakontrolnormaldankontrolperlakuanyaitusebanyak1ml/200

g.

b)Dosisglibenklamid

GlibenklamiddiberikandalambentuksuspensidenganCMC

sesuaidosisoralefektifpadamanusia5mg/60kgbbyang

dikonversikanberdasarkanrumusHED,yaitudosisuntuksetiap200g

bbtikusadalah0,1mg/200gbbtikus.

c)Dosisakarbosa

AkarbosadiberikandalambentuksuspensidenganCMCsesuai

dosisoralefektifpadamanusia50mg/60kgbbyangdikonversikan

berdasarkanrmusHED,yaitudosisuntuksetiap200gbbtikusadalah

1,0mg/200gbbtikus.

d)Dosisaloksan

Dosisaloksanditetapkanberdasarkanhasilujipendahuluandan

penelitiansebelumnya.Diambildosisyangpadaharike-7

36

menyebabkanhiperglikemiatetapibelummenyebabkankematianpada

tikus.Dosisaloksanyangdigunakandalampercobaaniniadalah13

mg/200gbb(maria,2001).

e)Dosisglukosa

Dosisglukosaditetapkanberdasarkanhasilujipendahuluandan

penelitiansebelumnya.Diambildosisyangsetelahpemberian

menyebabkanhiperglikemiatetapibelummenyebabkankematianpada

tikus.Dosisglukosayangdigunakanpadapercobaaniniadalahadalah

200mg/200gbbpemberianyasecaraoral.

4.3.6.CaraPengambilanDarahdanPengkuranKadarGlukosaDarah

Sebelumpengambilandarah,tikusdimasukkankedalamkandang

kecilsedemikianrupahinggatidakdapatbergerak.Kemudianekortikus

dibersihkandenganalkohol70%.Selanjutyaujungekortikusdigunting

0,2cmdariujungekor,dilakukanpemijatanperlahanterhadapekoragar

darahkeluar.Kemudiandiukurkadarguladarahdenganalatglukometer.

4.3.7.Percobaan

a.Metodeinduksialoksan

Padaujipendahuluandilakukanupayapeningkatankadar

glukosadarahdenganmenginduksitikusdenganaloksan13mg/200g

bb.Setelahpenginduksiantersebut,kadarglukosadarahtikusdikontrol

padaharike-3,ke-7danke-14untukmeyakinkanbahwaaloksan

dengandosistersebutmenyebabankerusakanpankreas.

37

Padaharike-3percobaandimulai,dilakukanpenentuankadar

glukosapuasaseluruhhewanujisecarakuantitatif.Setiapkali

pengambilandarah,semuahewanujidipuasakanselama16jam.Kadar

glukosayangdidapatmerupakankadarglukosadarahawal.Kemudian

larutanaloksandisuntikkandibagianvenaekortikuspadakelompok

tikus2,3,4,5dan6.

Padaharike-14dilakukanpengambilandarah.Hasilpengukuran

kadarglukosadarahditetapkansebagaikadarglukosadarah14hari

(hiperglikemiaawal).Kemudiantikusdiberikanbahanujisesuai

rancanganpercobaanyangdiperlihatkanpadatabel1.Selesai

perlakukan,semuatikusdiistirahatkandidalamkandangmasing-

masingdandiberimakandanminum.

Pemberianlarutanbahanuji,pembandingdanairsuling

dilakukansetiaphariselama2minggu.Pengukurankadarglukosa

darahselanjutnyadilakukanpadaharike-3,ke-7danke-14setelah

pemberianbahanujiyangpertama(Antiadkk,2005).

b.Metodetoleransiglukosa

Sebelumujitoleransiglukosa,tikusdiaklimitasiselamadua

mingguagarbisamenyesuaikandirikemudiantikusditimbangberat

badannya.Kadarglukosaawaldiukuruntukmenitke0,sebelumnya

tikusdipuasakanselama16-18jamtujuanyauntukmenghilangkan

faktoryangmempengaruhiperhitunganglukosadarah.Kemudiantikus

38

diberikanbahanujisesuairancanganpercobaanyangdiperlihatkan

padatabel2.

Ekstrakjintenhitamyangdiberikanialahekstrakyangpotensial

darihasilinduksialoksan,setelahjampemberianekstrak,diberikan

glukosa200mg/200gberatbadan,kemudiandiperiksakadargula

darahnyapadamenitke30,60,90,120,150dan180.

4.4.8.UjiStatistikTerhadapKadarGlukosaDarah

Hasilpercobaandihitungsecarastatistik,dimanakadarglukosadarah

awaluntukkelompokhewanujiyangdiinduksialoksandantoleransi

glukosadiujikenormalannyadenganmetodeKolmogorov-Smirnovdan

homogenitasnyadenganmetodeLevene.Bilakeduaujiinidipenuhimaka

dilanjutkandenganujiAnalisisVariansatuarah(ANAVA)untukmelihat

perbedaanantarkelompok(Sudjana,1992).Jikaadaperbedaansecara

bermaknaantarkelompokperlakuanmakadilanjutkandenganujiKruskal

Wallisuntukmelihatperbedaanantarkelompok.Jikamasihadaperbedaan

secarabermaknaantarkelompokperlakuanmakadilanjutkandenganuji

BedaNyataTerkecil(BNT).

39

BABV

HASILPENELITIANDANPEMBAHASAN

5.1.HasilPenelitian

5.1.1.DeterminasiTanaman

DeterminasitanamandilakukandiHerbariumBogoriense,Pusat

PenelitianBiologiLIPI,Bogor,JawaBarat.Hasildeterminasi

menunjukkanbahwatanamaniniadalahjenistanamanjintenhitam

(Nigelalasativa.Llinn)sukuRanuculaceae.

5.1.2.Ekstraksi

Ditimbang2000gramserbukbijijintenhitam(Nigelalasativa.

Linn)dimaserasidenganetanol70%,kemudiandikentalkandenganvacum

rotaryevaporator,dandidapatkanekstrakkental173,5g.ekstrakkental

kemudiandifraksinasidenganetilasetatdandikentalkandenganvacum

rotavapordandidapatkan25,2gfraksikentalbijijintenhitam.

5.1.3.HasilPengujianEkstrak

Darihasilpengujianekstrakbijijintenhitamyangdifraksinasi

denganetilasetatdidapatsusutpengeringanekstrakbijijintenhitam

sebesar0.155%sedangkanhasilpengujiankadarairekstrakbijijinten

hitamsebesar4,87%.

40

Waktu(hari)Kadarrata-rataglukosadarahdanstandardevasiKLNRKLPFKLNFDOS1DOS2DOS3084,75-3,5985,503,4183,75-1,2587,753,30862,2786,752,751488,50-16,84199,5049,47168,5035,30164,2523,93150.514,47150,002,171790,00-14,1472,5027,38165,505,19109,75-8,99122.7510,21118,256,702189,75-14,1577,0024,45170,00-4,0885,004,3299.257,8896,004,892890,00-23,1078,5012,66177,506,4580,256,6087.55,6891,006,95GolongansenyawaHasilpenapisana.Alkaloidb.Flavonoidc.Saponind.Steroid/triterpenoide.Tanninf.Kuinong.MinyakAtsiri++++++-5.1.4.PenapisanFitokimia

Berdasarkanhasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam

(Nigelalasativa.Llinn)terdapatbeberapagolongansenyawa.Hasilnya

dapatdilihatpadatabel3.

Tabel3.Hasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam

Keterangan:(+)Memberikanreaksipositif,(-)Memberikanreaksinegatif

5.1.5.HasilPengukuranKadarGlukosaDarah

Tabel4.Hasilpadametodeinduksialoksan

Keterangan:

KLNR:Kontrolnormal

KLPF:Kontrolpositif

KLNF:Kontolnegatif

DOS1:Dosis41mg

DOS2:Dosis82mg

DOS3:Dosis162mg

41

Waktu(hari)Kadarrata-rataglukosadarahdanstandardevasiKLNRKLPFKLNFDOSP0105.8322,0487.1612,849155,51100.519,783094.169,64141.8319,13166.664,45153.514,706094.338,84102.6616,58150.666,68107.513,4290874,42101.510,5410318,2892.8315,5112086.3320,528711,6497.3314,5896.510,29150878,769613,95100.6618,0093.1610,2218010612.64944,2895.832,7187.338,28Tabel5.Hasilpadametodetoleransiglukosaaloksan

Keterangan:

KLNR:Kontrolnormal

KLPF:Kontrolpositif

KLNF:Kontolnegatif

DOSP:Dosispotensial

5.2.Pembahasan

Jintenhitamyangdigunakanuntukpenelitiansebelumnya

dilakukandeterminasiterlebihdahuluuntukmemastikanbahwatanaman

yangditelitiadalahjintenhitam.Pelarutetanolyangdigunakanuntuk

prosesekstraksisebelumnyadidestilasiterlebihdahulusupayaetanolbenar-

benarjernihdanterhindardaripengotor.Pelarutetanolyangdigunakan

adalahetanol96%yangkemudiandiencerkanmenjadietanol70%supaya

lebihmudahmenariksenyawa-senyawayangterkandungdalamsimplisia

yangmeliputisenyawapolar,semipolardannonpolar.

Caraekstraksiyangdigunakanadalahmaserasi,karenacarainilebih

mudahdilakukan,alatyangdigunakansedehanadanmaseratyang

42

digunakancukupbanyak.Hasilmaserasikemudianditambahkantragakan

untukmenarikpengotoryangadadalamekstak,ekstraklaludisaringdan

dikentalkandenganvacumrotaryevaporatoruntukmenjadiekstrakkental.

Untukmendapatkanfraksietilasetatmakadilakukanpartisiekstaketanol

kentalyangdidapatdalampelarutetilasetat.Partisidilakukanhingga

lapisanfraksietilasetatmenjadijernihkembaliuntukmembuktikanbahwa

senyawasemipolaryangterdapatdalamekstraketanoltidakdapatditarik

kembaliolehetilasetat.

Penelitianinimenggunakantikussebagaihewanujikarenamudah

didapat,murahdantelahadapenelitiansebelumnyayangberhasil.Tikus

purtihjantanpadausia4-5bulanadalahtikusdewasamudayang

mempunyaikeadaanfisiologikyangoptimum.Sebelumdigunakan,tikus

diaklimatisasiselama2minggu,agardapatmenyesuaikandiridengan

lingkungannnyaselamapenelitianberlangsung.

Tikusyangdipilihuntukpenelitianadalahtikusyangsehatdengan

ciri-ciri:bulubersih,matamerahjernihbersinar,tingkahlakunormaldan

beratbadanbertambahsetelahdiaklimatisasimenjadi180-300g.selama

pemeliharaansemuatikusditimbang,diberimakandanminumdengan

takaranyangsamauntuksetiapekor.Sebelumdilakukanpercobaan,tikus

diaklimatisasiselama2mingguagardapatmenyesuaikandiridengan

lingkungannyaselamapenelitianberlangsung.

Sebelumdiberiperlakuan,tikusdipuasakanterlebihdahuluuntuk

meniadakanpengaruhzat-zatlainpadapengukurankadarglukosadarah

puasasebagiankadarglukosadarahawal.Penelitianinimenggunakan

43

metodeinduksialoksandantoleransiglukosayangmerupakanujipraklinik

yanglebihmendekatikeadaanpenderitadiabetesyangsebenarnya.

Terlebihdahuludilakukanpercobaandenganmenggunakanmetode

induksialoksan,padapercobaaninipankreashewanujicobadirusak

denganpemberianaloksansecaraintravenasehinggapankreashanyadapat

menghasilkansedikitinsulindanterjadihiperglikemiapadahewanuji.

Fraksietilasetatbijijintenhitamdiujikemampuannyauntukmerangsang

sekresiinsulindaripankreasyangtelahrusaksehinggadapatmenurunkan

kadarglukosadarah.

Padapenelitianinidigunakan3kelompokkontrolyaitukontrol

normal,kontrolnegatifdankontrolpositif.KelompokKontrolnormal

diperlukanuntukmengetahuikadarnormalglukosadarahselama

percobaan.Kontrolnegatifyangdiinduksidenganaloksansehinggamenjadi

diabetesdiperlukanuntukmengetahuipeningkatankadarglukosadarahdari

keadaannormalselamapercobaan.Sedangkankontrolpositifdalam

penelitianiniadalahglibenklamid,diperlukanuntukmelihatpengaruhobat

antidiabetikoralyangtelahterbuktikhasiatnyauntukmenurunkankadar

glukosadarah.Glibenklamidmerupakanobatgolongansulfonylurea

generasikedua,yangseringdigunakanolehpasiendiabetesmellitus.

Karenaglibenklamidtidaklarutdalamair,makadisuspensikandenganzat

pensuspensiCMC(CarboxyMethyCellulosa)1%.

Berdasarkanpenelitiansebelumnya,dosisaloksanadalah13mg/200

gbb/hariyangdiberikansecaraintravena..Bahanujiyangdigunakandalam

penelitianiniberupafraksietilasetatbijibijijintenhitamdengandosis41

44

mg/200gbb,82mg/200gbb,dan164mg/200gbb.Sedangkandosis

kontrolpositifyangdigunakanadalah0,1mg/200gbb.Dosisini

didapatkanberdasarkandosisefektiforalpadamanusiayangdikonversikan

kedosistikus.Pemberianbahanujidilakukansatukalisehariperoral

denganmenggunakansondelambungselama2mingguberturut-turut.

Padaharipertamapercobaan,sebelumdiinduksidenganaloksan,

kadarglukosadarahtikusseluruhkelompokmenunjukkanhasilyang

normal.Padaharike-3,7dan14setelahdiinduksi,hewanujiyangtelah

diinduksialoksandiperiksakadarglukosadarahnya.Hasilnyamenunjukkan

hewanujitersebutmengalamihiperglikemiamulaiterlihatpadaharike-3,7

danharike-14mengalamihiperglikemiayangsangattinggisetelah

diinduksi,kelompokhewanyangdiinduksialoksanmengalamikeadaan

hiperglikemia.daripenampakanfisik,tikusyangmengalamihiperglikemia

tersebutmengalamipenurunanberatbadan,polidipsi,polifagidanpoliuri

yangjelasterlihat.Keadaankandangdarikelompoktikusyangmengalami

hiperglikemiatersebutmenjadilebihlembabdanberbautidaksedapdari

padakandangkelompoktikusnormal.

Padaharike-17,Ke-20danke28kadarglukosadarahkontrolnormal

masihtetapdalamrentangnormalsedangkankontrolnegatifmengalami

hiperglikemiayangsemakinparah.Tikusyangdayatahantubuhnyatidak

kuatsangatberisikomengalamikematian.Sehinggaharusselaludijagaagar

waktuuntuktikuskontrolnegatiftersebutdipuasakantepatdantidak

menimbulkankematian.Untukkontrolpositifdanujiterlihatpenurunan

kadarglukosadarahsecarabertahappadaharike-3,ke-6danke-14setelah

45

perlakuan.Keadaanfisiktikusjugamengalamiperbaikanberupa

peningkatanberatbadan,danmenurunnyagejalapolidipsidanpolifagi.

Namunpenurunankadarglukosadarahyangpalingcepatterjadipada

kelompokujidosis41mg/200gbb,dimanapadaharike-14setelah

diberikansediaanujimenunjukkankadarglukosadalamrentangnormal.

BerdasarkanujinormalitasKolmogorov-Smirnovmenunjukkan

bahwakadarglukosadarahseluruhkelompokhewanujipadaharike-0,14,

17dan21terdistribusinormalsedangkanpadaharike-28tidakterdistribusi

normal.Padaujihomogenitasmenunjukanhanyakadarglukosaharike-0

yanghomogensedangkanpadaharike-14,17,21dan28tidakhomogen.

Untukharike-0dilanjutkandenganujistatistikANAVAsedangkanuntuk

harike-14,17,21dan28dilanjutkandenganstatistikmetodeKruskal

Wallis.

PadaujistatistikdenganmetodeKruskalWallismenunjukankadar

glukosaharike-14,17,21dan28menunjukanadanyakelompokyang

berbedasecarabermaknaolehsebabitudilanjutkandenganmetodeujibeda

nyataterkecil(BNT).

Padaharike-14BNTmenunjukanantarakelompokujidosis41

mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbbmemperlihatkantidak

adanyaperbedaansecarabermaknaterhadapkontrolnegatif,tetapiada

perbedaansecarabeermaknadengankontrolnormal.Halinimenunjukan

bahwaadakenaikankadarglukosadarahyangefeknyasignifikandengan

dosisnegatif.BNTmenunjukanuntukharike-17antarakelompokujidosis

41mg/200gbbmemperlihatkantidakadaperbedaansecarabermakna

46

dengankontrolnormaltetapiadaperbedaansecarabermaknadengan

kontrolpositifdannegatif.Halinimenunjukanterjadipenurunanglukosa

darahyangsinifikanpadarentangnormaltetapiefeknyatidaksignifikan

denganobatpembanding.Untukdosis82mg/200gbbdan164mg/200gbb

memperlihatkanadaperbedaansecarasignifikanantarakontrolnormal,

kontrolpositifdankontrolnegative.Halinimenunjukanbahwakeduadosis

ujitersebutbelummenunjukanpenurunanyangsignifikan.Padaharike-21

BNTmenunjukandosis41mg/200gbbdandosis164mg/200mgbb

memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrol

nomaldankontrolpositiftetapiberbedasecarabermaknadengankontrol

negatif.Halinimenunjukanbahwaterjadipenurunanyangsignifikan

glukosadarahdalamrentangnormaldanefeknyasignifikandenganobat

pembanding(kontrolpositif).Untukdosis84mg/200gbbmemperlihatkan

tidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrolnormal,tetapiberbeda

secarabermaknadengankontrolnormaldankontrolpositif,menunjukan

terjadipenurunanyangsignifikanglukosadarahdalamrentangnormal

tetapitidaksignifikandenganobatpembanding.BNTmenunjukanuntuk

harike-28dosis41mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbb

memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrol

normaldankontrolpositiftetapiberbedasecarabermaknadengankontrol

negative.Halinimenunjukanpenurunanyangsignifikandalamrentang

normaldanefeknyasignifikandenganobatpembanding.

Jadiujistatistikdalammetodeinduksialoksanpadaumumnyadosis

42mg/200gbbsangatberpotensimenurunkanglukosadarahdisebabkan

47

padaharike-21dan28tidakberbedasecarabermaknadengankontrol

positifdanberbedasecarabermaknadengankontrolnegatifdalamtaraf

nyata.

Selanjutnyadilakukanpercobaandenganmetodetoleransiglukosa

menggunakandosispotensial41mg/200gbbyangdiketahuipadapercobaan

metodeinduksialoksan.Lainhalnyadenganmetodeinduksialoksan,sedian

ujidiberikanterlebihdahulusebelumtejadiefekhiperglikemiadiakibatkan

pemberianglukosasecaraoral,inibertujuanuntukmengetahui

penghambatansediaanujiterhadapabsorpsiglukosadalamtubuhsupaya

mencegahkadarglukosadarahyangmelambungtinggi.

Penelitiantahapiniberlangsungselama180menit.Sebelum

dilakukanpengambilanglukosadarahdanpemberianlarutanuji,tikus

dipuasakanselama16jamuntukmenurunkankadarglukosadarah,dengan

harapanketikadiberiperlakuanakanmudahterlihatpeningkatankadar

glukosadarahnya,danjugauntukmeningkatkanrasalaparpadatikus

sehinggapadasaattikusdiberiperlakuanmaumenelansediaanujidengan

mudah.

Padamenitke-30kadarglukosadarahmeningkatsecaranyatadi

setiapkelompokkontroldanujidisebabkanolehpemberianglukosaoral.

Padapemberiansediaanujifraksietilasetatbijijintenhitammenunjukan

kemampuandalammenghambatpeningkatankadarglukosadarahmulai

terlihatpadamenitke-60dalamrentangnormal,padamenitke-90sedikit

turundancenderungstabilhinggamenitke-180.Begitupulakontrolpositif

(akarbose)menunjukanhalyangsamasepertisediaanuji.Halini

48

menunjukanbahwaefektifitassediaanujisamabaiknyadengankontrol

normal(akarbose)dalammenghambatpeningkatankadarglukosadarah.

Sedangkancontrolnegativeterlihatsecaranyatapeningkatankadarglukosa

darahpadamenitke-30dansedikitturunpadamenitke-60tetapimasih

dalamrentanghiperglikemialalukemblinormalpadamenitke-90danterus

stabilhinggamenitke-180.

Antihiperglikemia/antidiabetesdalammetodeinilebihcenderung

padaprosespenghambatanmeningkatnyakadarglukosadarah,seperti

penghambatanpadaalfaglucosidaseyangdapatmenghambatproses

pemecahankarbohidrat,danpenghambatantransporterssodium-glukosa

yangdapatmenghanbatpenyerapanglukosa.(Kobayashietal.2000).

BerdasarkanujinormalitasKolmogorov-Smirnovmenunjukan

bahwakadarglukosadarahseluruhkelompokhewanujipadamenitke-0

hinggamenitke-150terdistribusinormal.Sedangkanujihomogenitas

menunjukankadarglukosadarahmenitke-0,30,60,120dan150homogen

sedangkanpadamenitke-90dan180tidakhomegen.Makapadamenitke-

90dan180harusdilakukanstatistikdenganmetodeKruskalWallis.

BerdasarkanujistatistikpadametodeKruskalWallis,padamenit

ke-90menunjukanseluruhhewanujitidakberbedasecarabermakna,

sedangkanpadamenitke-180menunjukanadanyakelompokyangberbeda

secarabermaknaolehsebabitudilanjutkandenganujiBedaNyataKecil

(BNT).BNTmenunjukanbahwakelompokujidosis42mg/200gbb

memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknatehadapdosis

kontrolpositifdannegatifdanmenunjukanperbedaansecarabermakna

49

dengankontrolnormal.Halinimenunjukanbahwaefektifitassediaanuji

samabaiknyadenganobatpembanding(acarbose)danadanyasedikit

peningkatankadarglukosadarahpadakontrolnormalsedangkanefek

pemberianglukosaoralpadakontrolnegatiftelahhilang.

Untukmenitke-0,30,60,120dan150dapatdilakukanstatistik

denganANAVAuntukmelihatperbedaanpadasetiapkelompokhewanuji.

Padamenitke-0,120dan150menunjukanseluruhkelompokhewanuji

tidakberbedasecarabermaknasedangkanpadamenitke-30dan60

menunjukanadanyakelompokyangberbedasecarabermaknaolehsebabitu

dilanjutkandenganujiBedaNyataTerkecil(BNT).BNTmenunjukanuntuk

menituntukmenitke-30dosis42mg/200gbbmemperlihatkantidakada

perbedaansecarabermaknaterhadapkontrolpositifdannegatif.Halini

disebabkanolehpemberianglukosaoralmeningkatkankadarglukosadarah

setelah30menit.Untukmenitke-60dosis42mg/200gbbmemperlihatkan

tidakadaperbedaansecarabermaknaterhadapkontrolpositifdannormal,

berbedasecarabermaknadengankontrolnegatif.Halinimenunjukan

bahwaterjadipenghambatanpeningkatankadarglukosadarahsecara

signifikanolehsediaanujihinggabatasrentangnormal.

50

BABVI

KESIMPULANDANSARAN

6.1.Kesimpulan

1.Dosis41mg/200mgbbmenunjukanefekpalingbagusdibandingkan

dengandosis82mg/200gbbdandosis164mg/200gbbdenganpenurunan

glukosadarahmencapai51,14%,padaharike-28.

2.Dosis41mg/200gbbdibandingkandengankontrolpositiftidakberbeda

secarabermaknapadamenitke-0,30,60,90,120,150dan180

sedangkandengankontrolnegatifberbedasecarabermaknauntukmenit

ke-60.

6.2.Saran

1.Untuklebihmelengkapidatailmiah,perludilakukanlebihlanjut

mengenaiefekhipoglikemiatanamaninimenggunakanmetodeyang

lebihbaiksertamencarikandungansenyawaaktifyangberkhasiat

sebagaisenyawahipoglikemianya.

2.Perludilakukanpenelitiantentangtoksisitasbijijintenhitam(Nigella

sativaLinn)pdahewanujiuntukmengevaluasibataskeamanannyajika

digunakandalamjangkapanjang.

51

DAFTARPUSTAKA

[ACUC]AnimlCareandUseCommittes.2005.GuidelinesforSurvivalBleedingofMiceandRates.

Al-awadiFM,GumaaKA.Studiesontheactivityofindividualplantsofanantidiabeticplantmixture,ActaDiabetol,1987;24:7-41.

Anonim.TekhnologiEkstrak.DirektoratJendralPengawasanObatdanmakanan.Jakarta.1-17.

Antia,BS,JEOkon2005.HypoglycemicActivityofAquosLeafExtractofPerseaAmericanaMill.DepartementofChemistry,UniversityofUyo,UyoNigeria.Barre,KJ.1949.LeDiabetiqueAllocanique.1stEdition.ActualPharmacology.NewYork;113-124

Burkill,M.A.GovernmentOfTheStraitsSettlementsAndFederatedMalayStatesByTheCrownAgentsForTheColonies.Millbank.London.1935;1555-1557

Dalimartha,Setiawan.RamuanTradisionalUntukPengobatanDiabetesMellitus.PenebarSwadaya.Depok.2004.59-60

DepartemenKesehatanRI.1979.MateriaMedikaIndonesia.JilidIII.DirjenPOM.DepartemenKesehatanRI.Jakarta;112

DepartemenKesehatanRI.DirektoratBudidayaTanamanRempahDanPenyegar.Jakarta.2006;

DepartemenKesehatanRI.1989VedemekumBahanObatAlam.DirjenPOM.Jakarta;

DepartemenKesehatanRI2001.Bukupanduanteknologiekstrak.DirektoratJendralPengawasanObatdanMakanan.Jakarta;13-14

DepartemenKesehatanRI.2006.PharmaceuticalCareUntukPenyakitDiabetesMellitus.DitjenBinakefarmasiandanAlkes.Jakarta;11

DepartemenKesehatanRI.1979.FarmakopeIndonesia.Edisi3Jakarta;9DepartemenKesehatanRI.1993.Martindale.TheExtraPharmacopoela.30th.

DeGuzman,C.CandSiemonsma,J.S.PlantResourcesOfSouth-EastAsia13.BackhuysPublishers.Leiden.1999;148-151

52

El-NaggarAm,El-DeibAM.AstudyofsomebilogicalactivitiesofNigellasativa(blackseed)HabatElBaraka.JEgyptPharmacolExpTher1992;11:789-99.

Farnsworth,N.R1969.BiologicalandPhytochemicalScreeningofPlants.JournalPharmaceuticalScience.255-265

Ganiswara,SG.Farmakologidanterapi.Edisi4.bagianfarmakologifkui.Jakarta.1995;22,467-481

GanongWF.1999.FisiologiKedokteran,Edisike-14.JonatanOswari.PenerbitBukuKedokteranEGC.Jakarta.Terjemahandri:PetrusAndriano.

Harborne,J.B.MetodeFitokimiaPenuntunCaramodernMenganalisisTumbuhan.Terjemahan:KosasihP,SoediroIwang,BandungITB.1996;6-17.

JamaliaLia.2005.UjiAntidiabetesEkstrakEtanol96%BuahMahkotaDewa(PhaleriamacrocarpaBoerl)PadaTikusPutihYagDiinduksiAloksan.Skripsi.Jakarta.20-25.

JacquieSR,LindaMF,HeidiAf,DelisaJA,RoseL.2004.CanineandFelineDiabetesMelitus:NatureorNarture?.J.Nutr.134:2072S-2080S.

JungB.2007.GestationalDiabetes.DiabetesPartnersinPrevention:APublicationoftheConnecticutDepartementofPublicHealth.KaplanL.1989.ClinicalChemistryTheory,Analysis,andCorrelation.2scEdition.Philadelphia,Toronto:TheC.V.MosbyCompany;850-855.

Kahn,C.R.1995,DisorderofFuelMetabolism,InBecker,K.L.(ed),PrinciplesandPracticeofEndocrinologyandMetabolism,2ndEd,1148-54.

Kundiarto,Kunto.PengaruhPemberianEkstrakKloroformdann-butanoldaunkembangbulan(Tithoniadiversifolia[Hemsley]A.Gray)TerhadapPenurunanKadarGlukosaDarahMencit(Musmusculus).FakultasFamasiUniversitasPancasila.2007.

KHeyne.TumbuhanbergunaindonesiaII.BadanPenelitianDanPengembanganKehutanan.DepartemenKehutanan.1987;751

Lawrence,J.C.,1994,InsulinandOralHypoglycemicAgents,InBrody,T.M.,Larner,J.,Minneman,K.P.,andNeu,H.C.(Ed.),HumanPharmacology,2ndEd.,523-539,Mostby,London.

LinderMC.2006.BiokimiaNutrisidanMetabolisme.UIPress.Jakarta.Terjemahandari:AminudinParakkasi.

MahmudMuhamadMahirHasan.2007.MukjizatKedokteranNabi.QultumMedia.

53

Martindale.TheCompleteDrugReference,35thedn.(SweetmanS,ed.)London:PharmaceticalPress,2007.

Maria,Fatma.PengaruhsariBuahMengkuduterhadapkadarglukosadarahtikusputihyangdiinduksialoksan.FMIPAJurusanFarmasiUI.2001.

MaryadeleJ.Oneil,TheMerckIndexThirdteenEdition.MerckandCompanyIncorporated,Whitehousestation.NewJerseyUSA.2001.

MediaInformasiPeresepanRasionalBagiYenagaKesehatanIndonesia.2001.Non-InsulinDependentDiabetesMellitus.RasionalVolume1,no.3

Murray,RK.,MaysPA,GarnerDK,RodwellVW.1992.Biokimia(ReviewofBiochemistry).Edisi24.EGC;141-151,190,199-200,185,212.

[NDIC}NationalDiabetesInformationClearinghouse.2005.NationalDiabetesStatisticshttp://diabetes.niddk.nih.gov/dm/pubs/statistics/index.htm.diaksesagustus2009.

NSWHealthDepartement.2004.DiabetesinPregnancygestatnaldiabetes.NSWMulticuturalHealthcommunicationservice.http://mhcs.Health.nsw.gov.au.diaksesagustus2009

[Perkeni]PerkumpulanEndokrinologiIndonesia.2006.KonsensusPengelolaandanPencegahanDiabetesMellitusTipe2diIndonesia.

Rees,D,AandAlcolado,J.C.,2005,Animalmodelsofdiabetesmellitus,DiabeticMedicine,22:359-370.

Sudjana.1992.MetodeStastistika.Tarsito.Bandung.299,219-307.

Skudelsky.T.,2001,TheMechanismOfAlloxanAndStreptozotocinActionInCellsOfTheRatPancreas,PhysiologyResearch,50:536-554.

Tjay,TanHoanRahardja,Kirana.2007.Obat-ObatPenting.PenerbitPTElexMedia

Komputindo.Jakarta;693,696-697

Unger,RHandFoster,DW.1992.DiabetesMellitus,InWilson,J.D.andFoster,D.W.Endocrinology,1255-1317,W.BSundersCompany,ADivisionofHarcourtBranceandCompany,London.

Voight,R.1995.BukuPelajaranTeknologiFarmasi.AlihBahasaSoendaniNoeronoSoewandhi.UniversitasGajahMada.Yogyakarta;556,577-578

Tjitrosoepomo.2000.TaksonomiTumbuhan(Spermatophyta).GadjahMada

UniversityPress.Yogyakarta;

Watts,HDavid.1984.Terapimedic(HandbookofMedicalTreatment.Edisike-17.AlihBahasaPetrusLukmanto.PenerbitEGC,Jakarta;240-241

54

WaspadjiSarwono,Darmono,TjokroprawiroAskandar.1996.BukuAjarIlmuPenyakitDalam.JilidIEdisiketiga.BalaiPenerbitFKUI.Jakarta.590-625.

WindolzM.1983.TheMerckIndexAnencyclopedianOfChemicals,DriegsAndBiologocal.4-43

Yuniarti,Titin.EnsiklopediaTanamanObatTradisional.MedPress.Yogyakarta.2008;23-25.

55

Lampiran1.GambarBahanDanAlatPenelitian

Gambar4.Bijijintenhitam

Gambar5.Kandangtikus

56

Gambar6.Glukose-test

Gambar7.Pemberiansecaraoral

57

Lampiran2.DeterminasiSimplisia

58

Lampiran3.Sertifikatglibenklamid

59

Lampiran4.SkemaEkstraksidanPartisi

Serbukbijijintenhitam

-Dimaserasidenganetanol70%

-Disaring

Ekstraketanol70%Residujintenhitam

-Dievaporasi

Ekstrakkentaletanol

-Dipartisi

Fraksietil

Fraksiair

asetat

-Dievaporasi

Fraksikentaletilasetat

Sediaanuji

Ujiefekhipoglikemia

60

Lampiran5.SkemaPercobaanMetodeInduksiAloksan

Persiapantikus(dipuasakan16)jam

KontrolnegatifKontrolpositifKontrolnormalKelompoksediaandosis(41,82,164)

Pengukurankadarglukosaawal

LarutanNaCMC1%Induksialoksan(selama2minggu)

Pengukurankadarguladarahhiperglikemiaawal

LarutanNaCMC1%LarutanNaCMC1%Ujidenganglibenklamid

Pengukuranglukosadarah(padaharike-17,21dan28)

Analisisdata

61

Ujidosis

Lampiran6.SkemaPercobaaanMetodeToleransiGlukosa

Persiapantikus(dipuasakan16)jam)

KontrolnegatifKontrolpositifKontrolnormalKelompoksediaandosispotensial

Pengukurankadarglukosamenitke-0

LarutanNaCMC1%

Aquadest

LarutanNaCMC1%UjidenganakarbosaUjidosis

Pemberianglukosaoral

Pengukurankadarglukosadarah(menitke-30,60,90,120,150,180)

Analisadata

62

Lampiran7.PerhitunganDosisLarutanUji

A.Fraksietilasetatbijijintenhitam(NigellasativaLinn)1.PerhitunganDosisDosis1=41mg/200gbbtikusDosis2=41mg/200gbbtikusx2=82mg/200gbbtikusDosis3=82mg/200gbbtikusx2=164mg/200gbbtikus2.Dosis(41mg/200gbb/hari)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis1adalah:

VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=41mg/200gx200g41mg/ml=1ml

3.Dosis(82mg/200gbb/hari)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis2adalah:

VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=82mg/200gx200g82mg/ml=1ml

4.Dosis(164mg/200gbb/hari)

Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis3adalah:

VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=164mg/200gx200g164mg/ml

=1ml

63

Species2WeightBSA(m)KmfactorManusiaDewasaAnak-anakBaboonAnjingMonyetKelinciGuineapigTikusbesarHamsterTikus601,637200,825120,620100,52030,24121,80,15120,40,0580,150,02560,080,0250,020,0073B.LarutanGlibenklamid

1.PerhitunganDosisTabel6.Konversidosis

HED(mg/kg)=animaldose(mg/kg)x

5mg/60kg=animaldosex6/37

0,083mg/kg=animaldosex0,162

Animaldose=0,083mg/Kg0,162Animaldose=0.10mg/200g

2.DosisI(0,1mg/200gbb)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanGlibenklamidadalah:

VAO=

=,

/,/

=1ml

64

C.LarutanAcarbosa

1.PerhitunganDosis

HED=animaldosex

50mg/60kg=animaldosex6/37

0,83mg/kg=animaldosex0,162

Animaldose=,

.

/

Animaldose=1,0mg/200g

2.DosisI(1,0mg/200gbb)

Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanAkarboseadalah:

VAO=

=,

/,/

=1ml

D.LarutanAloksan

Dosisaloksanadalah65mg/kgbb

DosisAloksanuntuksatuekortikusdenganberatbadan200gadalah13mg/200g

KarenainduksiAloksandibuatIVmakavolumeyangdibuatuntuksatuekortikusdenganberatbadan200gdibuatml.Volumeyangdibuatadalah:

VAO=

=/

/

=ml

65

E.Larutanglukosa

DosisGlukosaadalah1g/kgbb

DosisGlukosauntuksatuekortikusdenganberatbadan200gadalah200mg/200g,makavolumelarutansediaanGlukosaadalah:

VAO=

=/

/

=1ml

66

Lampiran8.PenetapanKadarAirDanSusutPengeringanEtilAsetat

A.DataPengujianFraksietilasetatBijiJintenHitam

Beratcawankosong+tutupsebelumpemanasan:25,3486g

Beratcawankosong+tutupsetelahpemanasan30menitadalah:25,3478g

Beratcawankosong+1gEksrakadalah:26,3663g

Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-1selama30menitadalah:26,2789g

Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-2selama30menitadalah:26,2487g

Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-3selama30menitadalah:26,2378g

B.PerhitunganSusutPengeringanDanKadarAir

1.Susutpengeringan=

X100%

=,

,,X100%

2.Kadarair==,=0,155%

()X100%

,,(,)X100%

=4,87%

67

Kelompok1(Kontrolnormal)Waktu(Hari)TikusXS123409083848284,753,5914101757310588,5016,843100709010090,0014,14780898011089,7514,151476124857590,0023,10Kelompok2(Kontrolpositif)Waktu(Hari)TikusXS1408587898185,503,4114249149185215199,5049,47361844110472,5027,38766108518377,0024,45149364738478,5012,66Kelompok3(Kontrolnegatif)Waktu(Hari)TikusXS123408582848483,751,2514142150220162168,5035,303167170167158165,505,197170175170165170,004,0814185180175170177,506,45Kelompok4(Dosis41mg)Waktu(Hari)TikusXS123408390889087,753,3014161199150147164,2523,933123103107106109,758,9979183818585,004,32148979738080,256,60Kelompok5(Dosis82mg)Waktu(Hari)TikusXS1234090858485862,7014160143134165150,514,473133130115113122,7510,217100110929599,257,88149091907987,505,68Lampiran9.DaftarKadarGlukosaDarahMasing-MasingKelompok

Tabel7.Kadarglukosadarahmetodeinduksialoksan

68

Kelompok6(Dosis164mg)Waktu(Hari)TikusXS1408884908586,752,7514151150147152150,002,163123112113125118,256,707100949010096,004,89149785859791,006,9269

Kelompok1(kontrolnormal)Waktu(menit)TikusXS123456010992921499796105.8322.04301109010286879094.169.64608983107981008994.338.8490809186918589874.24120755611785889786.3320.52150977395838589878.7618091124981111159710612.64Kelompok2(kontrolPositif)Waktu(menit)TikusXS1234560112847882897887.1612.8430110169140149145138141.8319.13609080105128103110102.6616.5890859610810898114101.510.5412070791028797878711.641501008711282831129613.951808895101939295944.28Kelompok3(kontrolnegatif)Waktu(menit)TikusXS12345601008686909589915.5130170168164171168159166.664.4560150158140153146157150.666.869091113809012012410318.281209711474111909897.3314.5815095127951188089100.661818096989893929895.832.71Kelompok4(Dosispotensial)Waktu(menit)TikusXS123456062116100103113109100.519.7830168171134153155140