Post on 11-Oct-2015
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
Facultad de Ciencias de la Salud Escuela Profesional de Medicina Humana
Ctedra de Fisiologa Humana
GUA DE PRCTICAS
de
FISIOLOGIA HUMANA
Autores:
Docentes del Curso Dr. Carlos Ramrez Velasco
(Docente responsable del Curso)
Dra. Pedro Nez Huamani
Dr. Enrique vila Zamora
Dra. Kristel Morales Espinoza
Dr. Edgar Zrate Sez
Chorrillos, Marzo 2013 - I.
LIMA - PER
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE FISIOLOGIA HUMANA
OBTENCION DE MUESTRAS BIOLOGICAS PARA EXPERIMENTACION EN
ANIMALES Y SERES HUMANOS.
MANEJO DE ANIMALES DE
EXPERIMENTACION.
Introduccin
Definicin de Bioseguridad:
Es el conjunto de normas preventivas para proteger la salud y brindar seguridad al personal que trabaja en
salud frente a los diferentes riesgos producidos por agentes: biolgicos, fsicos, qumicos y mecnicos.
Agentes de riesgo o causantes de dao: agentes biolgicos trasmitidos por ingesta, inhalacin, inoculacin,
y por contacto directo a travs de piel y mucosas.
Agentes fsicos y mecnicos: Temperaturas extremas, radiaciones ionizantes, contacto y conexiones
elctricas, defectuosas, vidrios rotos.
Agentes qumicos: corrosivos, txicos, carcinognicos, inflamables, explosivos.
La Bioseguridad implica una accin de conjunto: Todos deben cumplir las normas de Bioseguridad: "El
descuido de una persona es el riesgo de todos"
Riesgo Biolgico: es la probabilidad de infectarse con un agente patgeno (agente patgeno se llama a
toda aquella noxa que es capaz de producir una enfermedaden la actividad laboral.
Exposicin: Es un contacto que implica riesgo con un patgeno capaz de trasmitirse por la va donde se
est produciendo la exposicin.
Propsito de la Bioseguridad:
Promover la salud de los trabajadores de salud mediante la vigilancia de las actividades de cada rea de
trabajo en salud para prevenir las exposiciones a fluidos con riesgo biolgico y vigilancia del
cumplimiento de las normas de bioseguridad. Adems promover, sugerir y establecer polticas que apoyen
la educacin continua de los trabajadores de salud.
Debe tenerse un suministro oportuno y continuo de insumos necesarios para la proteccin.
La disponibilidad de agua potable es primordial.
Disponibilidad de lavamanos cerca del rea de atencin de pacientes Laboratorio de trabajo.
PRACTICAS DE SEGURIDAD
Todo el personal que trabaja en el laboratorio fisiolgico o ingresa a l debe seguir reglas de seguridad.
Las normas de seguridad son obligatorias y son esenciales no solamente para la acreditacin acadmica,
sino porque consisten en prcticas que otorgan seguridad y proteccin al personal, alumnos e
investigadores que trabajan en los laboratorios bioqumicos, fisiolgicos, bacteriolgicos, biolgicos,
qumicos, etc. Muy especialmente en el campo mdico donde trabajamos con muestras material
biolgico que es considerado potencialmente patgeno patgeno. La mxima seguridad y proteccin es
necesaria en estos casos PRACTICAS GENERALES
Se prohbe fumar, comer y aplicarse cosmticos, para evitar la diseminacin de agentes infecciosos o
productos qumicos txicos de las mallas hacia la boca. Con el fin de evitar el contacto con agentes
infecciosos o diseminarlos, debe utilizarse alguna prenda protectora sobre la ropa, como el guardapolvo,
mandil, la bata de laboratorio. Estas prendas de proteccin externa no deben usarse fuera del laboratorio.
Los zapatos han de ser de punta y taln cerrado. No es conveniente que las personas que trabajan en el
laboratorio usen lentes de contacto debido al desprendimiento de vapores y a las salpicaduras que pueden
producirse. Los lentes de contacto inhiben el lagrimeo y permiten que las sustancias permanezcan ms
tiempo en la crnea.
Se recomienda el uso de lentes de proteccin o protectores para la cara a las personas que usan lentes de
contacto, en particular si hay alto riesgo de vapores, aerosoles o salpicaduras. La joyera de tipo colgante,
el cabello largo y barba son riesgosos, ya que es posible que entren en contacto con muestras u otras
superficies, o se enreden o queden atrapados en instrumentos con movimiento, como mquinas rotatorias o
centrifugas. Se prohibe estrictamente pipetear con la boca todo tipo de muestra, reactivo, agua o cualquier
otra sustancia biolgica debern usarse pipetas manuales automticas.
DERRAMES . .
Es necesario desarrollar y tener polticas escritas y procedimientos para instruir a los alumnos y a los
empleados acerca de la manera de manejar derrames qumicos y biolgicos. Existen en el comercio
estuches con insumos para ambos tipos de derrames.. Si no existen tales normas en la institucin el
laboratorio debe desarrollarlas con el fin de asegurar el ambiente de trabajo.
LAVADO DE MANOS
El lavado de manos es una de las principales maneras de evitar la diseminacin de agentes infecciosos.
Aunque se utilicen guantes, el lavado de manos es necesario. Por que es posible que stos tengan huecos
microscpicos. Al tratar con pacientes, es necesario lavarse las manos tras atender a cada uno de ellos
aunque se utilicen guantes.
LIMPIEZA
No debe permitirse que la basura, los desperdicios biolgicos, infecciosos. y el material de vidrio sucio se
acumulen en grandes cantidades en el laboratorio. Los recipientes con muestras de desecho y agentes
etiolgicos deben taparse cuando no se estn empleando. Es necesario limpiar con frecuencia las
superficies de trabajo con algn desinfectante al comenzar y terminar cada turno. El personal de
laboratorio fisiolgico es responsable de mantener el rea de trabajo limpia y sanitaria, aunque haya
servicio de limpieza adicional por parte de la institucin.
ETIQUETAS Y SEALES
Todos los recipientes que contienen productos qumicos deben etiquetarse con claridad, indicando el
nombre del producto y cualquier precaucin para su manejo. Las reas en que se almacenan productos
inflamables, peligrosos o txicos y carcingenos, o en las cuales se utilizan deben estar marcadas
claramente. Las reas en que se almacenan o analizan sangre o liquidos corporales deben estar marcadas
claramente con el signo de riesgo biolgico.
DESECHO DE DESPERDICIOS
Existen normas de la OSHA con respecto al desecho de productos biolgicos. El desecho de materiales
biolgicos, como desperdicios infecciosos, se examina y regula en la actualidad por leyes especficas del
Ministerio de Salud Pblica.
AGUJAS Y OBJETOS PUNTIAGUDOS.
Las agujas y otros objetos puntiagudos constituyen un riesgo fsico de infeccin potencial para el personal
de laboratorio fisiolgico. Todas las agujas desechables y dems objetos punzantes deben colocarse en un
reclpl9nte resistente a la perforacin y a prueba de fugas, marcado con el smbolo de riesgo biolgico.
Estos recipientes se descartan, siguiendo las polticas de la institucin, cuando estn llenos hasta la mitad o
las tres cuartas partes. La mayora de las instituciones incineran los recipientes que contienen objetos
punzantes. Inmediatamente despus de usada una aguja deber incinerarse y para ello existen en la
actualidad equipos especiales incineradores de agujas llamados destructores de agujas.Nunca, deber
reenfundarse volverse a colocar la cubierta de las agujas a menos que se utilice algn dispositivo como
pinzas diseadas para este fin, para evitar la puncin cutnea accidental. Las agujas nunca deben cortarse,
ya que esto puede provocar salpicaduras de sangre o de otros lquidos al medio.
SEGURIDAD CONTRA INCENDIOS
Tipos de Incendio
En el laboratorio Fisiolgico u otros laboratorios biolgicos se requieren lquidos inflamables y
combustibles para ciertos procedimientos, y en ellos tambin existe el riesgo potencial de incendios
elctricos y de basura. El cientfico del laboratorio debe comprender estos peligros y la manera de
afrontarlos en caso de urgencia. Los incendios se clasifican de la clase A a la D.
Los incendios de clase A ocurren con combustibles ordinarios, como madera o papel; los de la clase B
ocurren con lquidos inflamables; en los de la clase C participan circuitos elctricos energetizados, sin
importar el combustible; y los de la clase D, son producidos por metales combustibles como el sodio. Para
cada tipo de incendio se requiere un extinguidor diferente y adecuadocon el fin de controlar de manera
eficiente el fuego y evitar que se ste se extienda.
Extintores Extinguidores para incendios. Clases.
Los extintores contra incendios contienen diferentes sustancias y estn marcados segn el tipo de incendio
para el que deben emplearse. Los extintores clase A estn llenos de agua y nunca deben utilizarse para
incendios de tipo elctrico. ya que el agua puede conducir la electricidad de regreso a la persona que tiene
el extintor en las manos. Los extintores clase B contienen productos qumicos secos, espuma acuosa que
forma una capa (AFFF) o dixido de carbono. Los extintores clase C estn llenos de dixido de carbono o
Halon; los de la clase D de un polvo seco especial que contiene un enlazante termoplstico que permite
que el agente forme una corteza slida al calentarse. Hay extintores que pueden emplearse para Incendios
de clases A ,B y C.Contienen un polvo seco y pueden utilizarse con eficacia y seguridad para las tres
clases de incendios. Generalmente este tipo de extintores es el que se compra para uso en el hogar o en las
oficinas. Sin embargo, si se emplea para incendios de equipo elctrico en el laboratorio, es probable que
sea difcil o imposible eliminar posteriormente dicho polvo de los instrumentos. Por tanto, se recomiendan
los extintores de dixido de carbono para incendios de equipo elctrico.
Causas de incendio y su Prevencin
Las causas fundamentales de incendios en el laboratorio son descuido, falta de conocimiento acerca de los
productos qumicos que se utilizan, permitir que se efecten procedimientos sin.
la vigilancia adecuada, sobrecarga de circuitos elctricos , llamas de gas abiertas. Es necesario impartir
peridicamente conferencias para instruccin sobre seguridad en el trabajo, con el fin de recordar a los
empleados la manera segura de proceder para evitar incendios y otros tipos de accidentes.
En caso de que se produzca un incendio es necesario ponerse en contacto con el departamento de
bomberos y solicitar ayuda antes de intentar extinguirlo, Se pierde tiempo importante cuando se trata de
apagar el incendio primero, y despus se solicita ayuda. Los pasos que deben seguirse en caso de incendio
son:
1. Rescatar a cualquier persona que se encuentre en peligro.
2. Aislar el incendio cerrando alguna puerta.
3. Solicitar ayuda.
4. Intentar extinguido.
5. Evacuar las instalaciones en caso de que no se pueda apagar el fuego
Por supuesto, cuando hay varias personas presentes, estos pasos pueden llevarse a cabo de manera
simultnea y rpida en un esfuerzo conjunto.Es necesario adiestrar al personal de laboratorio en el uso de
los extintores contra incendios. En general, el departamento de incendios de la localidad o el comit de
seguridad de la institucin proporciona este entrenamiento.
SEGURIDAD BIOLOGICA Proteccin Personal
La dispersin epidmica del sndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) ha revivido la preocupacin
acerca de las enfermedades que se transmiten por la sangre entre las personas que trabajan en el
laboratorio. Se sabe que las personas que laboran en los laboratorios mdicos en general, fisiolgicos,
bacterilogos,bilogos y otros relacionados con la salud en general, conforman un grupo de alto riesgo
para infecciones por virus de hepatitis B relacionadas con el trabajo y virus de inmunodeficiencia humana
(HIV). En 1987 el Centro de Enfermedades Transmisibles USA (CDC) y la OSHA publicaron
recomendaciones para proteger a las personas que trabajan al cuidado de la salud y a otras de adquirir la
infeccin por HIV y se actualizaron nuevamente en 1988. Entre las recomendaciones se aconseja que "se
tomen precauciones congruentes al manejar sangre y lquidos corporales de todos los pacientes y las
muestras que se obtengan".
Esto se conoce como precauciones universales.Las recomendaciones incluyen el uso de equipo para
proteccin personal, como guardapolvos, mandiles, batas, guantes descartables y protectores para los ojos
al manipular sangre y lquidos corporales en el laboratorio. La revisin de los CDC en 1988 recomend
usar equipo de proteccin personal para manejar todas las sustancias biolgicas y animales. Deben tratarse
todas las secreciones y excreciones corporales como potencialmente infecciosas, ya que hay otras
enfermedades adems de HBV y HIV que se transmiten a travs de diversos lquidos del organismo
humano y de los animales.
En 1991 la OSHA public una regulacin final la Occupational Exposure to Bloudborne Pathogens
(Exposicin ocupacional a patgenos que se transmiten por la sangre). Esta regla indica que el patrn debe
proporcionar equipo de proteccin personal que no permita que los materiales potencialmente infecciosos
entren en contacto con la ropa. la piel, los ojos y la boca del trabajador en condiciones normales de uso. La
regla tambin indica la manera correcta de disponer de objetos punzantes y otros desperdicios con riesgo
biolgico y seala la necesidad de administrar la vacuna de HBV y el tratamiento tras alguna exposicin a
todos los empleados que corran este riesgo.
Adems de describir equipo de proteccin personal, dicha norma incluye instrucciones para el lavado de
manos, transporte de muestras, uso de pipetas, forma de recoger derrames, desechos de desperdicios y
descontaminacin del equipo.
Derrames
Es necesario que las personas que limpian algn derrame biolgico utilicen guantes descartables y bata de
laboratorio. Se colocan toallas desechables sobre el derrame y se vaca desinfectante sobre ellas. Tras
dejarlo reposar algunos minutos. se recoge la sustancia y el desinfectante con material absorbente (los
cojinetes absorbentes son tiles para derrames grandes) A continuacin se coloca el material contaminado
en un recipiente para riesgos biolgicos: bolsas plstico grueso color rojo en el Per y bolsa de color
negro para basura domstica.
Despus de absorber la mayor parte de material, el rea se limpia con un desinfect8nte de fuerza
intermedia o alta, por ejemplo, dilucin de Leja 1:10. La solucin desinfectante se absorbe con material
desechable. El rea se enjuaga con agua y se seca para evitar que quede resbalosa. Es conveniente preparar
un conjunto de utensilios para limpiar derrames con riesgo biolgico que contenga todos los materiales
necesarios para efectuar la limpieza de este tipo y tenerlo a la mano en el laboratorio en que se manejan
dichas muestras.
SEGURIDAD QUIMICA
Hoja De Datos Sobre Seguridad De Materiales
En Agosto de .1987.)a OSHA enmend la norma Federal Hazard Communication Standard
29CFR 1919: 1200 (Rigllt to Kriow/HCS Standard), hacindola extensiva a todas las industrias,
incluyendo las instalaciones para el cuidado de la salud. Esta norma establece que los responsables de cada
rea determinen si se utilizan productos qumicos peligrosos en el trabajo y proporcionen a los empleados
hojas con datos de seguridad en el uso del material riesgoso y marquen adecuadamente los recipientes que
contienen el producto, indicando el riesgo, y se mantendr una lista de productos qumicos peligrosos, es
decir, un inventario de productos qumicos, y proporcionen al empleado informacin y entrenamiento, y
desarrollen un programa de comunicacin de riesgos por escrito.
Informacin que contiene la hoja de datos de seguridad para cada material grupo de sustancias
relacionadas, de uso en Laboratorio fisiolgico y otros Laboratorios biolgicos.
1. Identificacin del producto qumico (nombre qumico, y sinnimo y/o nombre vulgar.)
2. Ingredientes peligrosos
3. Datos fsicos
4. Datos de incendios y explosiones
5. Informacin de riesgos para la salud
6. Datos de reactividad
7. Procedimientos para derrames, fugas y desecho
8. Informacin de proteccin personal.
9. Precauciones especiales y comentarios
Manejo de Animales
La mejor manera para aprender a manejar correctamente los animales de laboratorio es la instruccin
prctica directa. Pueden enunciarse aqu algunos principios generales.
El personal de laboratorio puede recibir de casi todos los animales (conejos. cobayas. ratones)., pequeos
araazos cuando el animal trata de escapar; pero raras veces intenta ste lesionar al operador. En el caso de
las ratas, las cosas cambian; pueden realizar muchos esfuerzos para escapar. y producir mordeduras
peligrosas, Tambin los monos deben manejarse con cuidado. En cualquier caso, es indispensable que aun
los pequeos araazos de animales se traten en forma adecuada; si el animal ha sido inyectado con
material patolgico la naturaleza de dicho material puede obligar a tomar ciertas medidas para proteger al
personal contra las consecuencias de la mordedura. Por lo tanto, debe reportarse de inmediato, y tratarse
mdicamente cualquier lesin, por pequea que sea.
Toma de Muestras de Sangre
La muestra de sangre para las pruebas de laboratorio pueden tomarse en diferentes sitios: capilar o
perifrica, venosa y ocasionalmente arterial. Esta muestra se utiliza para la valoracin de diversos
parmetros del medio interno que puede llevarse a cabo en sangre completa o una fraccin de la misma.
sea plasma o suero. Si la muestra sangunea no se recoge con una tcnica adecuada puede ocurrir que los
exmenes proporcionen informacin inexacta o incorrecta bien que la muestra se rechace y sea necesario
repetir la puncin. Deben tomarse precauciones en todos los casos por lo que la obtencin y manipulacin
de las muestras se harn con guantes quirrgicos descartables..
Sangre Capilar o Perifrica
La sangre que suele llamarse capilares, al menos parte arteriolar se obtienen por o general de: a). La yema
del dedo; b). el borde del lbulo de la oreja; y c). el taln en los nios pequeos En cualquier de estos
sitios el rea debe de estar tibia (ni fra ni congestionada) ya que de otra manera la composicin de la
sangre varia por la xtasis o la dilucin. Sin embargo debe recordarse que aun ejecutando una buena toma,
los valores de los parmetros difieren entre la sangre capilar y la venosa. Usar alcohol y lancetas
descartables.
TECNICA
1. Limpie la piel con una torunda de algodn con alcohol de 70 o con otro desinfectante adecuado
y deje secar.
2. Haga una puncin profunda (2- 3 mm con una lanceta o aguja estril desechable. La puncin
debe efectuarse de un golpe y rpidamente para que resulte casi indolora (sobre todo el borde del
lbulo de la oreja).
3. La primera gota de sangre se elimina porque contiene desechos tisulares. La sangre no debe
exprimirse o se obtendr una muestra diluida; peso s puede hacerse presin a distancia del sitio
de la puncin. Tras concluir la toma de la muestra se entrega al paciente una torunda limpia que
debe presionar sobre el sitio de lesin.
SANGRE VENOSA
Por lo general se utiliza una de las venas de las fosas antecubitales, pero con frecuencia tambin se
puncionan las venas de las manos las muecas o cualquier vena visible de buen calibre (en los pacientes
prematuros es posible punzar las venas del cuero cabelludo la yugular externa o la femoral) Las venas
deben examinarse cuidadosamente; si son profundas y no se palpan con facilidad se descartan. Para
facilitar el examen se usa un torniquete de jebe.
EQUIPO.
La muestras se toman previa desinfeccin con alcohol y con jeringas desechables con aguja de calibre 19
20 x1 (cuanto ms bajo es el numero mas es el grosor de la aguja, las de menor grosor pueden hemolizar
la muestra y las de mayor grosor se reservan para la obtencin de sangre para transfusiones).
TECNICA
1. El paciente debe estar acostado o sentado cmodamente y con el brazo apoyado en una mesa o
soporte. Algunas pacientes en especiales los jvenes pueden sufrir malestar o incluso
desmayarse. Por tanto mantngase alerta ante seales como palidez o piel fra.
2. Coloque el torniquete con un medio lazo para poder retirarlo fcilmente. No efectu demasiada
presin ya que puede detener la circulacin arterial.
3. Pida al paciente que abra y cierre el puo un par veces para obtener mayor distensin de las
venas. Algunas veces las venas no se ven con claridad pero se palpan.
4. Una vez elegido el sitio de puncin se procede a limpiar con alcohol y se deje secar. Enseguida se
fija la vena sosteniendo el brazo del paciente con la mano mientras se estiran y comprimen con el
pulgar y los tejidos blandos situados justo debajo del escogido para punzar. La jeringa se sujeta
entre el pulgar y los tres ltimos dedos de la otra mano y sus dorsos se apoyan con el brazo del
paciente. El dedo ndice se coloca sobre el casquillo de la aguja y sirve como gua. El bisel de la
aguja debe quedar hacia arriba.
5. Cuando la vena es prominente se punza en forma directa con la aguja colocada horizontal y
dirigida en paralelo a la vena. Al perforar la pared se percibe una sensacin de crujido. Cuando el
acceso a la vena no es tan perceptible, la puncin se efecta en dos tiempos: primero se punza la
piel y luego la vena. Para que la sangre entre a la jeringa se hace una traccin ligera sobre el
embolo evite realizar una traccin excesiva porque la vena puede contraerse e impedir el paso de
la sangre hacia la jeringa. Algunas veces al puncionar se traspasa la vena; entonces debe retirarse
ligeramente la aguja al verificar la entrada de la sangre. Esta operacin puede producir
hematomas; si se advierte seales de extravasacin de sangre a los tejidos, retire la aguja de
inmediato y aplique presin local.
6. Antes de retirar la aguja, quite el torniquete y pida al paciente que abra el puo. En cuanto se
adquiera la destreza necesaria, esta ltima operacin se efecta cuando la sangre termina de
entrar a la jeringa. El paciente debe mantener la presin con una torunda en el sitio de la puncin
y el brazo flexionado durante unos minutos para evitar hematomas.
7. Tras la obtencin de la sangre, se retira la aguja de la jeringa con una pinza de metal y con un
movimiento de torsin y con la ayuda de otra pinza se coloca el extremo del embolo sobre la
pared interna del tubo. Nunca realizar el reenfundamiento de la aguja sin pinzas.La sangre se
vaca suavemente para evitar que se forme espuma y produzca hemlisis. Si la determinacin que
se va efectuar exige sangre completa o plasma la muestra se coloca con un tubo con
anticoagulante y se invierte con suavidad varias veces para mezclar. Si en cambio se desea
obtener suero, la sangre se coloca en tubo, de preferencia de 37 C para que el cogulo se forme
ms rpido. La retraccin del cogulo puede acelerarse separando de la pared del tubo con un
aplicador de madera. Es imperativo usar destructores de agujas en todos los casos.
USO DE VACUTAINER
En muchos laboratorios se utilizan actualmente los tubos Vacutainer para obtener las muestras de sangre
venosa, en lugar de las jeringas. Los tubos estn sellados con un tapn de goma y extraen un volumen de
sangre predeterminado. La aguja desechable se enrosca en el tubo de manera que el tapn de goma alcanc
justo la lnea gua. La aguja ms corta se mete dentro del tapn de goma, pero no penetra y por lo tanto no
rompe el vaci. Una vez que se tiene la certeza de que la aguja ha abordado la vena, se empuja el tubo
hasta el fondo del sujetador lo que rompe el vaco y la sangre entra al tubo. Cuando el flujo cesa, el tubo se
retira y si se desea puede sustituirse por el otro para obtener otra muestra .No debe usarse el Vacutainer
para dosaje de gases arteriales.
SANGRE ARTERIAL
Para la determinacin de gases se requiere puncin arterial. En esos casos la arteria se ubica localizado el
latido por palpacin muy cuidadosa. La puncin es necesariamente ms profunda y se requiere mayor
cautela para impedir hematomas. Debe practicarla el mdico.
ANTICOAGULANTES
Los cuatro anticoagulantes mas usados son una mezcla de oxalato amoniaco y potasio, citrato trisodico,
Sequestrene (EDTA) y heparina. Los tres primeros impiden la coagulacin al sustraer el calcio del plasma
sanguneo por precipitacin o fijacin en forma no ionizada, e inhibe la activacin de los factores de la
coagulacin.
El citrato trisodico se utiliza para impedir la coagulacin de la sangre destinada a transfusiones. El
Sequestrene y la heparina pueden servir para el mismo fin, pero no la mezcla de oxalatos porque es toxica.
La mezcla de oxalato de amonio y (6partes) y oxalato potasio (4partes) en la cantidad de 2 mg/ml de
sangre no afecta el volumen globular medio y puede usarse para hemoglobina, hematocrito y recuentos
globulares. En frotis de sangre su utilidad esta limitada a los primeros minutos por que se desarrollan con
rapidez formas dentadas en los hemates, vacuolizacin en el citoplasma de los granulocitosy artefactos en
los ncleos de linfocitos y monocitos y otras deformidades. Asimismo, la sangre tomada con esta mezcla
de anticoagulantes no puede emplearse para determinados qumicas de nitrgeno ni potasio.
El citrato trisdico en solucin acuosa al 3.8%, se mezcla a razn de 1/9 con sangre para investigaciones
de coagulacin. El Sequestrene (EDTA) se emplea en una concentracin de 1 a 2 mg/ml de sangre. La sal
di sdica o di potsica de Etilendiaminotetracetato es tal vez el anticoagulante que mas se emplea para el
recuento de las clulas sanguneas. Hay que mezclarlo minuciosamente con la sangre. Para el estudio del
hematocrito es equiparable al oxalato y para estudios morfolgicos lo supera, ya que impide la
deformacin y artefactos incluso despus de un reposo prolongado. Se consiguen frotis aceptables aun
cuando hayan pasado 2 o 3 hs y hasta 24hs si la sangre se refrigera. Tambin es posible realizar el
recuento de plaquetas aun despus de unas pocas horas.
La heparina, a razn de 0.1 a 0,2 mg/ml de sangre, no afecta el tamao corpuscular ni el hematocrito. Es el
mejor anticoagulante para prevenir la hemlisis y para las pruebas de fragilidad osmtica. No resulta
satisfactoria para recuentos de leucocitos o cuando han de prepararse frotis (o extensiones de sangre por
que en este segundo caso produce un fondo azul en las preparaciones teidas con el colorante de Wright.
CUIDADO, INOCULACIN Y SANGRIA DE LOS ANIMALES y
DIAGNOSTICO DE SUS ENFERMEDADES Fundamentos
1. Para determinadas investigaciones de laboratorio fisiolgico es indispensable disponer de los
animales apropiados.
2. Los animales habrn de ser sanos y seleccionados con cuidado y estar instalados con limpieza y
comodidad, as como adecuada y suficientemente alimentados.
3. Pocos mtodos de inyeccin y sangra producen mayor dolor que los similares empleados en los
seres humanos, y todos los mtodos operatorios de importancia habrn de efectuarse con el
animal anestesiado. Por otra parte estos animales habrn de ser tratados con la solicitud que
merecen por los servicios que prestan a la humanidad .
ALOJAMIENTO DE LOS ANIMALES.
Las jaulas para los animales pequeos, como conejos, cobayos, ratones y ratas deben construirse y
disponerse de modo que los animales se conserven sanos y cmodos. Se evitara atestar las jaulas con lotes
demasiados numerosos. Convendr disponer de jaulas separadas para los animales normales que no se
utilicen.
Los animales recin llegados al laboratorio debern ser examinados cuidadosamente, a fin de comprobar
que no estn enfermos, antes de colocarlos en las jaulas de los normales. Si se dispone de suficiente
espacio ser conveniente guardarlos en aislamiento durante una semana a diez das.
Las jaulas se construirn de modo que permitan la limpieza y desinfeccin mas completas y posean
suficiente luz y ventilacin, deben construirse expresamente para fines experimentales fisiolgicos.
Debe disponerse de compartimientos, y jaulas de aislamiento para los animales inoculados y debern
estar solos, en jaulas aparte, para protegerlos de las molestias o herida que entre ellos pudieren infligirse.
Los compartimientos de animales deben estar bien iluminados y ventilados .Se procurara conservar a una
temperatura uniforme, da y noche.
IDENTIFICACION DE LOS ANIMALES
Es conveniente adoptar un sistema seguro para la identificacin de los animales .La practica de rotular las
jaulas sirve para la distincin de los lotes numerosos de animales aun cuando para conseguir un registro
completo conviene numera a cada animal y anotar los detalles relativos al sexo, descripcin, etc.
Chapas.
Para los conejos y cobayos pueden emplearse unas pequeas chapas de aluminio que se fijan a una oreja
de animal por medio de una grapa o un hilo metlico que perfore estos rganos y atraviese tambin los
orificios de las chapas.
Para los animales de mayor tamao pueden adquirirse identificadores especiales ..Pueden obtenerse en las
casas de artculos veterinarios.
Descripcin.
Cuando se use nicamente este mtodo de identificacin y haya que alojar juntos en una misma jaula
varios animales, deben seleccionarse los que presenten seales o colores diferentes .Para facilitar el
registro debe disponerse de sellos de goma con dibujos de ratn ,cobayo o conejo. Este mtodo se utiliza
junto con el de la chapa metlica a fin de asegurar la identificacin si la chapa se perdiera. Asimismo,
debe anotarse cuidadosamente cualquier deformidad o sea particular .El sexo debe registrarse en la
descripcin (macho y hembra).
Seales o marcas para identificacin de animales
Los animales pequeos, como ratones y ratas, pueden marcarse en el cuerpo o en la cola pintndose la
piel y el pelo con colorantes (soluciones alcohlicas saturadas de fucsina o cido picrico).Las jaulas
habrn de rotularse.
PREVENCION Y TRATAMIENTO DE LOS ACCIDENTES EN LOS
LABORATORIOS DE FISIOLOGIA Las personas que trabajan en los laboratorios fisiolgicos se hallan rodeadas de mltiples peligros, de
modo especial a causa de las infecciones que pueden contraer durante el manejo de los animales de
experimentacin, durante el trabajo mismo con ellos como actos quirrgicos, exposicin de rganos, u
otros trabajos que as lo demanden los experimentos fisiolgicos, al manipular productos spticos
durante las investigaciones o sufrir quemaduras o la deglucin accidental productos biolgicos
producirse a heridas consecutivas rotura de cristales ,etc. A estos peligros estn principalmente expuestos
los investigadores poco experimentados que los ignoran o se entretienen o distraen mientras trabajan con
animales de experimentacin con productos infecciosos. con cidos, lcalis, etc.
PREVENCION DE LOS ACCIDENTES
Deben emplearse siempre guantes de goma descartables en los experimentos, el investigador ha de tener
especial cuidado en no herirse los dedos con las agujas y evitar cortarse con los instrumentos afiliados,
como bisturs, sierras, etc. Deben usarse pipetas automticas manuales de volmenes regulables con
punteras descartables.
Las pipetas de vidrio, en caso de ser usadas, aunque no es recomendable hacerlo, habrn de tener la parte
bucal tapada con algodn de modo obligatorio y tendrn bulbos de goma para aspiracin, y nunca aspirar
con la boca. Pueden utilizarse asimismo diversas jeringas. De igual modo, al aspirar cidos, lcalis y otras
soluciones peligrosas por medio de pipetas, deben usarse pipetas con bulbos de goma de aspiracin y
nunca hacerlo con la boca. Vale la redundancia, el alumno deber tomar todas estas preocupaciones con el
mximo cuidado. Es de suma importancia preocuparse del trabajo sin conversar ni distraerse.
Las manos del operador habrn de estar libres de cortes y escoriaciones, particulares en la proximidad de
las uas, debiendo lavarse cuidadosamente con jabn y agua y luego sumergirlas en una solucin
desinfectante antes y despus de haber manipulado productos infecciosos y antes de las comidas.
Una vez terminado el experimento deber lavarse la superficie de las mesas con una solucin
desinfectante; algunas veces es recomendable trabajar sobre una toalla humedecida en una de estas
soluciones, como por ejemplo lisol o tricresol al 2 por 100.
Las pipetas,tubos de ensayo y dems instrumentos empleados en la experimentacin fisiolgica tambin
se desinfectarn con una solucin lisol o tricresol al 2 por 100, o se esterilizarn inmediatamente por
ebullicin durante 20 minutos o autoclave que es lo ideal.
Los recipientes, lminas portaobjetos u otro material contaminado con orina heces secreciones
biolgicas de los animales, contaminados con productos biolgicos humanos, no se volvern a tocar por
ningn concepto sino que se sometern a un proceso de desinfeccin inmediata, como hemos indicado
lneas ms arriba
Los calentadores y dems aparatos elctricos se comprobarn con frecuencia para verificar la exactitud de
su funcionamiento, reparando sin prdida de tiempo sus averas a fin de evitar cortos circuitos incendios
.El mechero de Bunsen no debe utilizarse nunca en la proximidad de materias inflamables .Siempre se
verificara que la llave de mechero quede bien cerrada antes de retirarse del Laboratorio , igualmente se
asegurar de cerrar la llave del baln contenedor del gas la llave general del gas del Laboratorio de ser el
caso. El ter, el alcohol y similares deben mantenerse alejados de todo posible contacto elctrico. Es
obligacin del servicio de mantenimiento realizar revisiones peridicas de mantenimiento preventivo.
FISIOLOGIA DE LA MEMBRANA SEMIPERMEABLE
FRAGILIDAD OSMTICA
Introduccin
Todas las clulas del organismo estn rodeadas de una membrana limitante, a travs de la cual obtienen
sus alimentos y el oxgeno y excretan sus productos de deshecho y el C02 resultante de su metabolismo.
La membrana celular tiene propiedades bien establecidas: Solo deja entrar las sustancias que se necesitan
y solo deja salir las secreciones, los productos de desecho y las sustancias no indispensables, en otras
palabras, es semipermeable. Estas funciones las realiza a travs de diversos mecanismos, que hemos
revisado con detalle en las clases tericas. En la presente prctica trataremos de una de ellas que es la
Osmosis. En general la osmosis significa el paso de lquidos y solutos a travs de una membrana
semipermeable .Cuando dos soluciones de diferentes concentraciones estn separadas por una membrana
semipermeable, el solvente y los solutos atraviesan la membrana siguiendo las leyes de que rigen el
fenmeno de la smosis.
El agua es transportada a travs de la membrana celular por una fuerza hidrosttica llamada presin
osmtica, dicho de otro modo, la presin osmtica es la fuerza de atraccin que ejercen las partculas
sobre el agua atrayndola .La osmolaridad depende del nmero de partculas que se encuentran es
solucin .La Unidades de Osmolaridad son el Osmol /Kg H2O , en medicina usamos el sub mltiplo
miliOsmol /Kg H20
Un Osmol por Kg es la fuerza para atraer agua que ejerce un MOL de partculas que se encuentran en 1
Litro Kg de solucin. Cada partcula (tomo) ejerce una presin osmtica independientemente; por
ejemplo un mol de glucosa disuelto en un Kg (litro ) de agua ejerce una presin osmtica de 1 Osmol /kg
agua; en cambio un mol de ClNa disuelto en un litro de agua ejercer una presin Osmtica de dos
Osmoles debido a las dos partculas en que se disocia, una de sodio y otra de cloro. (Na+ y Cl- )
La capacidad de una partcula para producir un flujo de agua a travs de la membrana celular se llama
tonicidad.
Una solucin extracelular que permite que el agua fluya hacia dentro de la clula haciendo que sta se
hinche se llama hipotnica (Hipo osmolar)
Una solucin que permite que el agua fluya hacia fuera de la clula se llama hipertnica. (Hiper osmolar)
La membrana del glbulo rojo nos servir en la presente prctica para demostrar este fenmeno y
asimismo demostrar que la membrana tiene ciertos lmites de resistencia normales a variaciones de la
tonicidad en el medio interno.
Aplicacin clnica.
Existen algunas enfermedades en las cuales se producen alteraciones en la membrana que generan
hemlisis por mayor fragilidad de la membrana , son defectos genticos heterogneos que afectan a las
protenas constitutivas de la membrana del eritrocito .La Enfermedad Esferocitosis es una de ellas, en la en
la cual se ha demostrado una disminucin de la protena membranal Espectrina del hemate, y el grado de
dficit de la protena Espectrina parece asociarse con la gravedad clnica de esta enfermedad, pues los
hemates son muy frgiles y se hemolizan produciendo anemia intensa.
Fundamento
Se llama resistencia globular osmtica a la que presentan los hemates suspendidos en soluciones salinas
hipotnicas. Si empleamos soluciones salinas de 0.76 a 0.9 % y suspendemos dentro de ellas los hemates
veremos que stos se conservan sin alteracin durante varias horas, y que una vez sedimentados
(espontneamente por centrifugan), el lquido que sobrenada es claro y transparente como la misma
solucin salina. Pero si efectuamos suspensiones de hemates en soluciones de cloruro sdico a
concentraciones progresivamente decrecientes observaremos que al llegar a una determinada
concentracin empiezan a destruirse ,liberndose la Hb, lo que confiere al liquido una ligera coloracin
rojiza que no desaparece por centrifugacin .E esto se le llama hemlisis inicial o resistencia mnima, que
normalmente se presenta entre las concentraciones de 0.46 y 0.42 %.Esta hemlisis de los hemates va
aumentando en cantidad a medida que la solucin de cloruro sdico va siendo mas hipotnica hasta
presentarse una hemlisis total. Esta hemlisis total se observa entre las concentraciones de 0.34 a 0.30 %
Esta prctica sirve para determinar la resistencia de la membrana de los glbulos rojos a la hemlisis en
presencia de diferentes concentraciones de soluciones salinas hipotnicas a temperatura ambiente y
veremos en cual de ellas se presenta hemlisis inicial y total.
Reacivos y Equipos Necesarios
1.-Solucin salina al 0.75 %
2.-Pipetas graduadas: 1 ml al 0.01
10 ml al 0.1
5 ml al 0.1
3.- Micropipetas de 0.1 ml
4.- Fiola de 100 ml
5.- Espectrofotmetro
6.- Muestra de sangre venosa desfibrinada hemates lavados.
7.- Agua destilada
8.- Tubos de vidrio 13x 100 mm sin reborde
Metodo
1.- Preparar soluciones seriadas, en tubos de prueba marcados del 1 al 11, segn la tabla adjunta,
haciendo las diluciones con agua destilada segn lo indicado:
Marcar 19 tubos de prueba y repartir as:
Tubos
N
Sol.
NaCl
1% ml
Agua
Destil
ml
Mezclar
Por in-
version
% NaCl
de
la sol resul
tante
El alumno calcular la Osmola
ridad correspondiente a cada
uno de los tubos :( expresar
en unidades mOsm/Kg H20)
1 1.0 9 s 0.10 %
2 2.0 8 S 0.20 %
3 2.5 7.5 Si 0.25 %
4 3.0 7.0 Si 0.30 %
5 3.5 6.5 Si 0.35 %
6 3.75 6.25 Si 0.375 %
7 4.0 6.0 Si 0.40 %
8 4.25 5.75 Si 0.425 %
9 4.50 5.5 Si 0.45 %
10 4.75 5.25 Si 0.475 %
11 5.0 5.0 Si 0.50 %
12 5.5 4.5 Si 0.55 %
13 6.0 4.0 Si 0.60 %
14 6.5 3.5 Si 0.70 %
15 7.0 3.0 Si 0.70 %
16 7.5 2.5 Si 0.75 %
17 8.0 2.0 Si 0.80 %
18 8.5 1.5 Si 0.85 %
19 ------ 10.0 --- 0 % Control de hemolisis total para comparacin
visual.
NOTA: EL NUMERO 19 ES CONTROL DE HEMOLISIS TOTAL (100% HEMOLISIS)
2.- Una vez hecha la distribucin anterior, mezclar bien, por inversin cada uno de
los tubos.NO OLVIDAR ESTE PASO.
3.- Recin ahora, despus de haber mezclad, aadir 0.1 ml de sangre venosa desfibrinada cada uno de los
tubos.
4.- Tapar los tubos y mezclar nuevamente por inversin suave.
5.- Dejar en reposo 10 minutos a temperatura ambiente y luego volver a mezclar
por inversin suave.
6.- Centrifugar a 2000 rpm. Durante 10 minutos.
Examinar por simple inspeccin visual en cual de los tubos se inicia la hemlisis (hemlisis leve),
generalmente a partir del tubo N 8, de 0.425 % NaCl (lo que se manifiesta por el color ligeramente rojizo
del lquido) y luego examinar en qu otro tubo la hemlisis es intensa (aproxim. en 0.36 % NaCl ).
En el Tubo N 19 se producir hemlisis total y corresponde al 100% de Hemlisis.(Destruccin total de
los hemates y no deja nada de sedimento).
Valores Normales:
Hemlisis inicial (leve) (empieza Hemlisis): 0.44 % + -- 0.02
Hemlisis Total (Hemlisis completa): 0.32 % + -- 0.02
CAUSAS DE AUMENTO DE LA FRAGILIDAD OSMTICAGLOBULAR:
(Los hemates son ms frgiles que lo normal, tienen poca resistencia ante ligeras
hipotonas, y se hemolizan muy fcilmente)
-Anemia Hereditaria Esferoctica, en la Enfermedad Hemoltica
del recin nacido por incompatibilidad ABO
-Despus de alguna injuria trmica (quemaduras)
-Anemias Hemolticas sintomticas en algunos casos de:
Linfoma Maligno, Leucemias, Cncer, Cirrosis, etc.
CAUSAS DE DISMINUCIN DE LA FRAGILIDAD OSMTICA
(Los hemates son mas resistentes que lo normal a la hipotona):
En la primera Infancia, tempranamente en la infancia.
En algunas Anemias por deficiencia de Hierro
Talasemia mayor ( anemia de Cooley, anemia del Mediterrneo )
Anemia Drepanocitica ( Hoz, Sickle cell anemia)
Anemia Megaloblstica Nutricional
Post Esplenectoma y algunas hepatopatas con ictericia
FRAGILIDAD EN MEDIO ACIDO:
- En la Hemoglobinuria paroxstica nocturna, que cursa con anemia
hemoltica, usualmente la fragilidad globular realizada en sol. salina
solamente, es NORMAL, PERO la fragilidad
globular realizada en MEDIO CIDO( pH cido)SESTA
AUMENTADA .
La FRAGILIDADMECANICA est aumentada en la Ovalocitosis hereditaria ( Eliptocitosis), en los
casos que evolucionan con anemia hemoltica.
Referencias Bicliogrficas
S., Mellor Leslie ,J. Inwood, Linch R. Medical Laboratory Technology.W.B.Saunders Co.Phila.USA.
1996.
Clinical Diagnosis by Lab Methods. Todd. Stanford, W.B Saunders Co. Phila. USA. 2002
Hematology Physiologic Basis for Clinical Practice .Reich P.MD. Little Brown Co. BostonUSA.2004.
Clinical Laboratory Diagnosis Levonson and Mac Fate.Lea Febiger. 1999.
Wintrobe Clinical Hematology Lea Febiger. 1998.
Diagntico Hematolgico .Laboratorio y Clnica. Ciscar y Farrera. Edit.Jims 1998.
INTERCAMBIO DE LQUIDOS ELECTROLITOS Y OTROS SOLUTOS A
TRAVS DE MEMBRANAS
Introduccin
Existe un intercambio continuo de sustancias entre el medio ambiente y el organismo, a travs de los
epitelios drmicos, digestivos y respiratorios.
Dentro del mismo organismo existe un intercambio entre los espacios intracelulares y extracelular.
Algunas sustancias pueden atravesar la membrana celular por difusin pasiva .Otras requieren consumir
energa para moverse a travs de las membranas contra sus gradientes de concentracin .Estos fenmenos
de difusin pasiva y transporte activo permiten la creacin de una composicin orgnica diferenciada.
La piel del sapo no solamente separa al espacio extracelular del medio ambiente ,sino que permite el
pasaje de muchas sustancias ,incluyendo el agua, el sodio , el cloro y la glucosa.La direccin del
intercambio depende del tipo de transporte involucrado y de la gradiente de concentracin de los solutos
.Cuando cambia la composicin del liquido extracelular los riones excretan las sustancias presentes en
excesos o reabsorben las necesarias para lograr preservar la homeostasis.
Material
17 sapos
Beakers
Agua destilada
Solucin de NaCI 7.5%
Solucin de dextrosa al 15 %
Balanza
Urinmetro
Tubos de ensayo
Pipetas de Pasteur
Goteros
Pinzas mosquito
Mtodo
Experimento N 1: Preparacin del animal
Durante la noche previa al experimento se debe mantener a los sapos en un ambiente hmedo para que
estn adecuadamente hidratados.
Antes de la pruebas se vaca la vejiga de todos los animales y se liga la cloaca para analizar la orina
formada en condiciones experimentales. Sise coloca un sapo en una solucin de dextrosa y luego se
encuentra dextrosa en la orina, puede deducirse que fue absorbida a travs de la piel hasta alcanzar una
concentracin suficiente en liquido extracelular que obligase a los riones a excretar el exceso en la
orina.Los sapos son colocados en soluciones de diferente tonicidad y se les inyecta distintas soluciones
para producir cambios en la composicin de los lquidos corporales.
Los animales son pesados antes de realizar la prueba y despus de haber vaciado sus vejigas. Los cambios
de agua corporal se determinaran pesando a los sapos antes y despus de la exposicin a distintas
condiciones experimentales.
Para cerrar la papila cloacal se la toma con las pinzas mosquito y se liga con firmeza, sin llegar a cortar la
piel , pero lo suficientemente fuerte para prevenir el escape de orina .Despus de esto se pesa al sapo y se
registra su peso.
Experimento N2
Se inyecta a los sapos 4ml de una solucin en el saco linftico dorsal. Esta solucin puede ser hipotnica,
hipertnicas o isotnicas; de cloruro de sodio o dextrosa , tambin inyectaremos en algunos casos agua
destilada .Se vuelve a pesar para confirmar que todo el liquido inyectado se encuentre en el animal.
Se colocan 150 ml de liquido en un beaker de 250 ml y se pone al sapo dentro de el.El liquido debe cubrir
la mitad inferior del animal pero el punto de inyeccin debe permanecer por encima del nivel .Se tapa el
beaker Se pesa el sapo a intervalos de 30 minutos hasta por 8 horas. Se registra los cambios obtenidos:
Saco Linftico
Bao (Inyectar 4ml)
tubo Bao
externo
Saco
linftico
(inyectar
4 ml).
Peso del
sapo al
inicio del
experimento
Glucosa
basal
(inicial)
Peso al final
del
experimento
Glucosa pos
experimento
(final)
2 * NaCl
0.68%
Agua
4 agua NaCl
0.68%
6* NaCl
1.36%
NaCl
0.68%
8 NaCl
0.68%
NaCl
1.36%
10 Dextrosa
3.87%
Agua
12 agua Dextrosa
3.87%
14* Dextrosa
7.74%
Dextrosa
3.87%
16* Dextrosa
al 3.87%
Dextrosa
al 7.74%
Experimento N 3
Despus de 2 horas, se saca el sapo del beaker y se retira la ligadura de la cloaca .Se vaca comprimiendo
el abdomen y se recolecta la orina.
Se pesa nuevamente al sapo .La diferencia entre este peso y el obtenido inmediatamente antes de quitar la
ligadura es igual al peso de la orina recolectada. La diferencia entre el peso despus de recolectar la orina
del animal y el peso inicial antes de sumergido equivale al peso ganado o perdido durante el experimento.
Se debe tomar en cuenta el peso despus de inyectar los 4ml.de solucin en los sacos dorsales .Se calcula
el porcentaje de variacin de peso con respecto a la medida inicial y se registra la cantidad de orina
formada durante el experimento.
Experimento N 4: Anlisis de glucosa en orina del sapo.
La glucosa se determinara en la orina del sapo mediante el mtodo de la glucocinta (Urine Strip Winer
Lab).
Estimulacin muscular
Introduccin
Los tejidos neural y muscular tienen la propiedad de excitabilidad y responden a estmulos, es decir
variaciones del medio qumicas o fsicas, tales como alteraciones de la temperatura, deformacin
mecnica, etc.
En los fenmenos estmulo respuesta, la respuesta depende de las caractersticas del estimulo y de las
condiciones del tejido estudiado. La descripcin correcta de la relacin entre estimulo y respuesta
requiere el control de la duracin , intensidad y frecuencia del estimulo.
Las relaciones estimulo-respuesta se desarrollan en funcin al tiempo y al espacio.
Material
Sapos grandes Tabla de fijacin para batracios
Migrafo Alambre de cobre
Estimulador elctrico Alambre de zinc
Equipo de diseccin Quimgrafo
Mtodo
Experimento N1
Se anestesia al sapo por destruccin del cerebro y la mdula espinal.
Con unas tijeras se hace un ojal en la piel de la regin anterior homloga al tronco. Se contina la incisin
de la piel en cinturn. Una vez completado el cinturn, se desprende la piel de un tirn hacia abajo. En la
regin dorsal se debe tener cuidado por la adherencia de la piel al urostilo.
Se levanta el urostilo con la pinza de diseccin y se seccionan los elementos paravertebralmente y en
direccin ceflica, fracturando el proceso del iliaco paralelo al urostilo que se articula con el proceso
transverso de la novena vrtebra. Inmediatamente se observan dos formaciones blancas que se introducen
por tres races ms arriba en la columna vertebral. Estas estructuras son los nervios citicos. Por debajo se
observa la aorta dorsal con sus bifurcaciones.
Con las tijeras se secciona transversalmente el urostilo, evitando traccionar o lesionar los dos nervios
citicos.
Se pasa un hilo por debajo de cada uno de los nervios citicos y se realiza una ligadura lo mas proximal
posible a la columna vertebral. En este momento se observa una reaccin muscular.
Se secciona el nervio proximalmente a la mdula, entre la columna vertebral y la ligadura. Con la ayuda
del hilo se puede efectuar la diseccin del nervio citico, no siendo necesario manipularlo con ningn
instrumento.
Para poder liberar el nervio, es necesario cortar el msculo piriforme, despus se lo asla por diseccin
roma entre el semimembranoso por dentro y el bceps por fuera. A todo lo largo del nervio se ir
seccionando sus colaterales y se lo aislar hasta la rodilla, comprobando que exista conexin funcional
entre el nervio y el msculo gastrocnemio. Una vez que el nervio ha sido aislado, se debe evitar que se
seque humedecindolo constantemente en solucin fisiolgica.
Experimento N 2: Experimento de Galvani
Se fabrica un asa con alambre de cobre y alambre de zinc. Con el alambre de cobre se toca la piel del
animal y con el zinc el nervio.
Experimento N 3
Se toma la pata del animal y se pasa un hilo por debajo de la aponeurosis plantar, amarrndola
fuertemente. La ligadura queda ubicada proximalmente y se realiza la diseccin de la aponeurosis, que en
el sapo se contina hacia la pierna por el tendn de Aquiles que tiene un sesamoideo.
Se libera el tendn de Aquiles por diseccin roma y se separa el gastronemio hasta llegar a su insercin
superior. Con un golpe de tijera se secciona la tibia por debajo de la rodilla y el fmur un poco por encima
de esta. Se libera el fragmento de fmur del exceso del tejido muscular y se le hace una fuerte ligadura.
Con este mismo hilo se fija al migrafo. El hilo amarrado a la aponeurosis plantar se fija a la otra barra del
migrafo.
Con cuidado se colocael electrodosobre el nervio y se procede a estimular la preparacin neuromuscular.
Con el estimulador elctrico se realiza el estimulo de menor intensidad y se incrementa gradualmente.
Humedecer constantemente la preparacin con un gotero.
Experimento N 4: fenmeno de la escalera
Se realizan descargas simples para buscar el umbral de estimulacin y despus se disminuye el voltaje
para obtener el estimulo subliminal.
Luego de repetir la estimulacin por un tiempo se observar que las contracciones son cada vez mayores
hasta alcanzar un valor mximo.
Experimento N 5: tetania
Se realizan estimulaciones intensas y continuadas y se obtiene una serie de contracciones sucesivas antes
de que el msculo alcance su relajacin completa. Se contina hasta obtener una contraccin permanente.
Experimento N 6: Relacin longitud - tensin
Se da una vuelta completa del quimgrafo para inscribir una lnea basal en reposo. A continuacin se
estimula para que el msculo se contraiga sin vencer ninguna resistencia. Se obtiene un trazado en el
quimgrafo.
Se colocan 10 gramos de peso, con lo que la lnea basal del quimgrafo desciende. A continuacin se
estimula al msculo y se obtiene un trazado. Se aumentan otros 10 gm de peso con lo que la lnea basal
desciende an mas.Se vuelve a estimular el msculo y se obtiene un trazado.
Repetir varias veces el procedimiento, incrementando sucesivamente el peso.
Discusin
Placa mioneural 1. Introduccin
La placa mioneural media la transmisin de la seal de la fibra nerviosa motora a la clula muscular. Salvo
en el caso de las fibras musculares intrafusales, existe una sola placa terminal por cada fibra muscular. A
medida que el axn del nervio se acerca a su fin emite varias ramas, cada una de las cuales inerva una
fibra muscular. Ests ramas terminales son de poco dimetro y carecen de mielina, por lo que la velocidad
de conduccin en ellas es baja. La placa mioneural es una discontinuidad entre la clulas nerviosa y la
muscular donde la transmisin del impulso de despolarizacin queda a cargo de un mediador qumico, la
acetilcolina.
La terminal presinptica posee vesculas sinpticas, las cuales han sido sintetizadas en el soma neural, y
presenta canales de membrana de sodio y calcio dependientes del voltaje.
La generacin del potencial de accin da lugar a la apertura de los canales de calcio y se incrementa la
concentracin citoslica de calcio. Este incremento promueve la fusin de las vesculas sinpticas con la
membrana citoplasmtica del rafe sinptico, liberando acetilcolina. La acetilcolina acta sobre receptores
nicotnico presentes en el miocito y produce despolarizacin de la membrana celular muscular. Este
fenmeno es denominado potencial de la placa terminal.
Este potencial de accin excita a las miofibrillas para que se contraigan. Para el control de la actividad
muscular existe adems una va inhibitoria recurrente, es decir, un mecanismo de retroalimentacin
negativa que mejora la resolucin espacial de la accin neural. Esta va inhibitoria provee un mecanismo
para evitar la contraccin muscular persistente.
El axn de la motoneurona A sale de la sustancia gris a nivel de la medula espinal, pero emite antes una
rama colateral, la rama recurrente. Esta rama se desprende a partir del primer ndulo de Ranvier,
permanece dentro de la materia gris ventral y pasa medialmente y dorsalmente. Est rama forma sinapsis
con interneuronas que se encuentran en la regin ventromedial del asta anterior y son denominadas clulas
de Renshaw. Sus axones se proyectan hacia las motoneuronas , tanto hacia aquella en la cual se origin la
primera sinapsis desde el hasta dorsal, representada como la motoneurona A, y a sus vecinas,
representadas como motoneuronas B, terminan en sinapsis inhibitorias. La transmisin de este sistema
inhibitorio est a cargo de la glicina.
Material
Sapos grandes Succinilcolina
Migrafo Estricnina
Estimulador elctrico Vecuronio
Equipo de diseccin Neostigmina
Tabla de fijacin para batracios Atropina
Mtodo
Experimento N 1
Se l anestesia a un sapo por destruccin del encfalo. Se diseca y se expone el nervio citico en la cara
posterior de ambos muslos, evitando lesionar la arteria femoral que corre paralela al nervio.
En una de las extremidades, se separa el nervio de la arteria y se procede a ligar alrededor del msculo y
de la arteria, dejando libre al nervio.
Se aplica estmulos de baja intensidad a los nervios citicos y se va incrementando su intensidad hasta
obtener la contraccin muscular.
Luego se estimula directamente al msculo gastrocnemio a travs de una incisin hecha en la piel.
Experimento N 2
Se administra 1 mL de succinilcolina en el saco linftico dorsal del sapo. Luego de unos minutos se
procede a estimular con el carrete de induccin ambos citicos.
Experimento N 3
Se administra 1 mL de vecuronio en el saco linftico dorsal del sapo. Luego de unos minutos procede a
estimular con el carrete de induccin ambos citicos.
Experimento N 4
Se administra 1 mL de solucin de atropina y neostigmina en el saco linftico dorsal del sapo. Luego de
unos minutos se procede a estimular con el carrete de induccin ambos citicos.
Discusin
La succinilcolina es un bloqueador muscular despolarizante. Inicialmente simula el efecto de la
acetilcolina, produciendo apertura de los canales inicos y despolarizacin persistente. Inicialmente puede
producir excitacin, la que se manifiesta por fasciculaciones transitorias. Esta fase es seguida por el
bloqueo de la transmisin neuromuscular y parlisis flcida.
La estricnina acta a nivel de la medula espinal, bloqueando la sinapsis inhibitoria de las clulas de
Renshaw sobre las motoneuronas , en las que ejerce el rol de antagonista competitivo selectivo que
bloquea los efectos inhibitorios de la glicina.
La estricnina produce aumento de los impulsos nerviosos sucesivos, creando contracciones similares a las
tetnicas. Origina una contraccin muscular sostenida de extensores y flexores y espasmo muscular
persistente.
PRCTICA DE SHOCK ESPINAL PARA ESTUDIAR LOS
REFLEJOS EN EL SAPO
Leyes Pfluger, Turck, Sumacion Espacial, Sumacion Temporal y efecto de la ablacin medular.-
Material
Sapo
Beakers, estilete de acero,
Carrete de Runckford
Acido sulfrico diludo 0.1 %; 0.2%; 0.3 %; 0.4%; 0.5 %; 1% sol. acuosas.
Suero fisiolgico
Equipo de diseccin, guantes ltex descartables
Sol.Ringer para batracio.
Mtodo
Experimento N 1: PREPARACIN DEL SAPO ESPINAL
Observar la postura, los movimientos espontneos y respuesta a los diversos estmulos, movimientos
respiratorios, reflejos del salto, respuesta a la rotacin y posicin de espalda del sapo normal.
Se fija al animal con la mono izquierda y se determina lasa siguientes lneas: una lnea transversal a nivel
del lmite posterior de la membrana timpnica ( A-B), Una segunda lnea entre el ojo y la membrana
timpnica (X-Z). Se toma una tijera y se introduce uno de sus extremos en la boca del animal y se lo
decapita con un solo golpe, procurando que en este momento el sapo se encuentre con el dorso hacia
abajo, a lo largo de la lnea X-Z Realizar hemostasia por compresin y realizar las mismas observaciones
que en el sapo normal. Este es el sapo descerebrado. En este caso, el sapo puede realizar movimientos
complejos tales como saltar y si se coloca de espalda puede regresar a la posicin normal.
En otro sapo hacer las observaciones del tono y la respuesta a la estimulacin elctrica y luego realice el
corte a lo largo de la lnea A-B.Inmediatamente se observa el tono y la actitud postural del animal y se
efecta el pinzamiento de uno de sus dedos. Se objetivar la depresin motora que constituye uno de los
componentes del shock espinal, ademasno se encuentra los resultados del sapo descerebrado.
Se espera unos minutos y se observa nuevamente el tono y la actitud postural del animal y se efecta el
pinzamiento de uno de sus dedos. Se objetivar las respuestas motoras.
Experimento N 2: leyes de Pfluger
Se pasa un hilo a travs de un orificio hecho en el piso de la boca y se cuelga al sapo espinal de un
estativo.
A continuacin se efecta una secuencia de estmulos graduados, los que producen respuestas
determinadas:
a) Ley de UNILATERALIDAD.- Se pellizca suavemente un dedo y se produce contraccin de la
misma pata solamente.
b) Ley de SIMETRA.- Se pellizca con mayor intensidad el dedo y se produce contraccin de la
misma pata y de la pata opuesta.
c) Ley de IRRADIACIN.- Se pellizca fuertemente un dedo y se produce contraccin de la misma
pata, de la pata opuesta y finalmente de las extremidades anteriores.
d) Ley de GENERALIZACIN.- Se pellizca muy fuertemente un dedo y el animal se contrae y se
mueve enrgicamente.
Experimento N 3: experiencia de Turck
Se emplea la preparacin de sapo espinal. Se la cuelga de un estativo y se espera que est en reposo.
Se prepara varios beakers con concentraciones crecientes de CIDO SULFRICO desde 0.1, 0.2, 0.3,
0.4, 0.5 y 1%. Se sumerge la pata del animal en cada una de las distintas soluciones, empezando por la de
menor concentracin; se espera y se registra el tiempo necesario para la respuesta. Una vez que se haya
producido la respuesta, se lava la pata del animal en suero fisiolgico antes de pasar a la solucin
siguiente.
Se observa y se registra las caractersticas y tipo de respuesta en cada caso.
Experimento N 4: sumacin temporal
Se sumerge la pata del animal en una solucin de cido sulfrico al 0.1% varias veces. Se observa el
incremento progresivo de la respuesta.
Experimento N 5: sumacin espacial
Se sumerge en una solucin de cido sulfrico al 0.1% primero la punta del dedo, luego el dedo completo,
la pata y la rodilla. Se observa la mayor intensidad de las respuestas.
Experimento N 6
Se repite las experiencias anteriores empleando el carrete de Runckford y administrando estmulos
elctricos de intensidad creciente.
Experimento N 7
Se empapa un papel de filtro en cido actico puro y se lo coloca en el dorso del animal
Se observa y se registra las caractersticas de la respuesta.
Experimento N 8
Se hace una incisin en el abdomen y se expone con mucho cuidado una parte del intestino. Se estimula
cuidadosamente con el carrete de induccin.
Se observa y se registra las caractersticas de la respuesta. Al principio se observar una ligera contraccin
de la musculatura abdominal que aumentar al incrementar la intensidad del estmulo hasta llegar a
desarrollar una respuesta flexora amplia.
Experimento N 9
Se introduce un estilete dentro del canal vertebral y se destruye la mdula. Despus se repite las mismas
estimulaciones hechas previamente.-
REFLEJOS OSTEOTENDINOSOS EN EL HOMBRE Introduccin
Los mecanismos reflejos estn constituidos por un rgano receptor, un rgano efector y una red de
comunicaciones entre ambos. La accin refleja se inicia por un estmulo de entrada y tiene como resultado
una respuesta de salida. La accin refleja abarca el reflejo axnico sencillo hasta los reflejos complejos en
los que existe intervencin cerebral.
El sistema nervioso comprende un gran nmero de arcos reflejos. Cualquier estmulo produce una
respuesta. El estmulo puede originarse en los rganos internos y afectar la parte visceral del sistema
nervioso. El sistema puede originarse en el exterior y afectar la parte somtica del sistema nervioso. Un
mismo arco reflejo puede afectar tanto partes viscerales como somticas.
Los reflejos viscerales no suelen alcanzar la conciencia, mientras que los reflejos somticos pueden ser
percibidos concientemente. Muchos reflejos pueden considerarse como parte de un programa, puesto que
la respuesta adecuada parece estar prevista dentro del sistema nervioso.
Los reflejos espinales, que requieren transmisin del estmulo desde la periferia hasta la mdula y de all
regresar al rgano efector, son de este tipo. Los reflejos espinales no requieren de intervencin del sistema
nervioso central y funcionan igualmente bien en un animal cuya mdula se ha seccionado por encima de la
localizacin de las neuronas de los nervios correspondientes.
Las inserciones tendinosas de los msculos poseen receptores sensitivos especiales que responden a ala
distensin y envan la informacin al sistema nervioso central sobre la posicin de un msculo o de un
miembro. Cuando estos receptores tendinosos son estimulados por una distensin rpida y brusca, mandan
impulsos a la mdula espinal y, a travs de una sinapsis a la motoneurona anterior que inerva el msculo.
Esta neurona manda impulsos al msculo y produce una sacudida rpida.
La respuesta de los reflejos espinales puede incrementarse elevando el nivel de excitacin de la mdula
espinal. Esta facilitacin puede conseguirse haciendo que el sujeto enganche sus manos y tire con fuerza.
Material
Sujeto de prueba Martillo de reflejos
Mtodo
Experimento N 1: reflejo rotuliano
Se sienta al sujeto en una posicin cmoda y cruza las piernas. La pierna superior debe estar relajada. Por
palpacin, se localiza el tendn rotuliano y se da un golpe seco con el martillo de reflejos. La respuesta
adecuada es la contraccin del cuadriceps, lo que produce extensin de la pierna.
Experimento N 2: reflejo aquiliano
El sujeto se pone de rodillas sobre una silla y deja colgar fuera los pies sin contraccin de los msculos de
las pantorrillas. Se busca el tendn de Aquiles y se estimula. La respuesta apropiada es la contraccin de
los msculos gemelos y del sleo, lo que produce extensin del pie.
Experimento N 3: reflejo bicipital
El sujeto flexiona su antebrazo sobre el brazo, mientras el examinador soporta el antebrazo. Se busca el
tendn del bceps con el pulgar de la mano que sostiene el antebrazo, se deja el pulgar sobre el tendn y se
da un golpe sobre el pulgar. la respuesta apropiada es la contraccin del bceps, lo que produce flexin del
antebrazo.
Experimento N 4: reflejo tricipital
El sujeto flexiona su antebrazo sobre el brazo, mientras el examinador soporta el antebrazo. Se palpa el
tendn del trceps, inmediatamente por encima de su insercin en el codo, y se golpea el tendn con el
martillo. La respuesta apropiada es la contraccin del trceps, lo que produce extensin del pie.
Experimento N 5: reflejos radial y cubital
Se golpea los tendones insertados sobre los extremos inferiores de ambos huesos, por encima de la
mueca. El examinador sostiene el brazo del sujeto. La respuesta adecuada para el reflejo cubital es la
pronacin de la mano y para el reflejo radial la flexin del antebrazo.
Discusin
EVALUACIN DE LA PERCEPCIN SENSORIAL Y SENSACIONES
NOCICEPTIVAS: EVALUACION DEL UMBRAL DEL DOLOR.
Introduccin
La estimulacin de un receptor tctil de la piel es transmitida por la va del asta posterior (sensitiva) hasta
la corteza somestsica. En esta la excitacin del receptor activa un determinado nmero de neuronas que
constituye su campo cortical. Sin embargo, no todas las neuronas de este campo se estimulan en la misma
magnitud, sino que las que corresponden al centro del campo descargan de forma mxima y las de la
periferia en menor magnitud. Este contraste es el que permite localizar el punto exacto de estimulacin.
Las capacidades tctiles se determinan en muchas ocasiones por la posibilidad de discriminar dos puntos
de estimulacin sobre la piel.
Las diferencias en las capacidades de discriminacin en las diferentes zonas del cuerpo se deben al
nmero de receptores que exista en esa zona y a la representacin cortical que stos poseen. Los dedos
estn profusamente poblados de receptores y el rea de corteza a que llega la informacin proveniente de
ellos es amplia, de ah su mayor posibilidad de discriminacin. Otras zonas del cuerpo tienen menor
densidad de receptores siendo ste uno de los factores que conlleva a que la informacin que llega al rea
de la corteza sea reducida y, por lo tanto, sea menor su posibilidad de discriminacin.
Cuando se estimulan dos puntos cercanos de la piel, cada uno excitar de forma mxima al centro de su
campo cortical; pero como los campos se superponen parcialmente, la resultante ser una excitacin
mayor, aunque se mantienen los mximos de excitacin separados.
El ser humano puede percibir diferentes grados de calor y fro, que pasan del fro glacial, al fro, al fresco,
a la temperatura indiferente, a lo tibio, caliente y quemante.
Objetivos
1. Discriminar procesos y modalidades de percepcin sensorial en el ser humano de tal manera que
pueda sistematizarlos.
2. Comprobar la distribucin anatmica de los receptores cutneos y la importancia fisiolgica de
dicha distribucin.
3. Comprobar la influencia de las bajas temperaturas en la sensibilidad.
4. Comprender los mecanismos que explican dichas funciones, estas observaciones debern ser
correlacionadas con sus conocimientos neuroanatmicos y neurofisiolgicos.
EXPERIMENTO 1: IDENTIFICACIN DE CAMPO RECEPTIVO SENSORIAL
Materiales
- Sello especial
- Hoja de papel
- Pelo de cerda (pelo de Von Frey)
- Sujeto experimental (alumno 1)
- Sujeto experimentador (alumno 2)
Procedimiento
1. Por medio de un sello especial marcar un rea en la piel de un compaero: cara, dorso del cuello,
antebrazo, dorso de la mano.
2. Sellar en una hoja de papel un rea similar y proporcional
3. Luego el sujeto experimental deber cerrar los ojos y se le aplica por medio de un instrumento
sensibilizador llamado pelo de Von Frey, una ligera presin en cada uno de los cuadrantes del
rea delimitada por el sello.
4. El sujeto experimental deber reportar las modalidades de sensaciones que percibe en la piel de
cada cuadrante (tacto, dolor, temperatura, otros).
5. Marcar con notacin diferente, en un esquema, los puntos correspondientes.
6. Anotar cuantos puntos diferentes hay para cada una de las sensaciones investigadas.
Resultados
EXPERIMENTO 2: DISCRIMINACIN DE DOS PUNTOS
Materiales
- Comps de doble punto.
- Regla.
- Sujeto experimental (alumno 1).
- Sujeto experimentador (alumno 2).
Procedimientos
Para la realizacin de estos experimentos los estudiantes se dividirn por parejas, actuando cada uno como
sujeto experimental y como experimentador.
1. Indique a su compaero que cierre los ojos y se concentre en las sensaciones que va a percibir.
2. Aplique los dos extremos del comps de forma tal que lleguen simultneamente al rea de piel
estimulada. Se deber estimular las siguientes zonas: Yema de los dedos, antebrazo, cara y nuca.
3. En cada paso la separacin de las puntas del comps se aplicarn de forma tal que la diferencia
entre ellas sea diferente y, alternante, mantenindose constante para cada zona corporal esto es
0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 y 3 cm.
4. Durante la aplicacin de las agujas, pregunte al compaero cuantos puntos discrimina y anote su
respuesta.
5. Analice el comportamiento de los receptores.
Resultados
Area de la Piel
Estimulada
Distancia de separacin de las puntas del comps ( cm )
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
Yema de los dedos
Antebrazo
Cara
Dorso del Cuello
Dorso de mano
SENSACIONES NOCICEPTIVAS: EVALUACIN
DEL UMBRAL DEL DOLOR
Introduccin
El dolor es un mecanismo de proteccin y por tanto puede definirse como una respuesta de defensa
corporal, el cual aparece siempre que un tejido est siendo lesionado y obliga al individuo a reaccionar
para suprimir el estmulo nocivo.
Si colocamos inadvertidamente el brazo sobre una plancha caliente sentimos dolor e inmediatamente
retiramos el brazo para evitar un mayor dao tisular.
La respuesta al dolor puede expresarse en trminos conductuales, tales como el retiro de la fuente del
estmulo o la fuga; puede haber una respuesta verbal, como el quejido y la expresin del dolor; y puede
haber una respuesta fisiolgica como cambios en la presin sangunea, sudoracin y taquicardia.
El dolor es una respuesta sensorial medible, su magnitud vara con la intensidad del estmulo. Todo ser
viviente presenta una tolerancia al dolor hasta determinado nivel, denominado umbral, en que el dolor es
insoportable. El dolor puede tambin ser socialmente determinado, se dice que hay grupos tnicos ms
sensibles al dolor que otro, y el sexo femenino es ms resistente al dolor que el sexo masculino.
El dolor se ha clasificado en dos tipos fundamentales: 1) Dolor Rpido, que aparece en menos de una
dcima de segundo, no se percibe en los tejidos ms profundos del cuerpo, se transmite a travs de fibras
de tipo A y la seal dolorosa llega al sistema nervioso central va el haz neoespinotalmico. 2) Dolor
Lento, aparece despus de un segundo o ms y aumenta lentamente en el curso de varios segundos o
minutos, suele ir acompaado de destruccin tisular, se percibe en la piel como en cualquier rgano o
tejido profundo, se transmite a travs de fibras tipo C y las seales dolorosas llegan al sistema nervioso
central va el haz palioespinotalmico.
El dolor como todo tipo de sensibilidad tiene receptores y vas neurales especficas.
Los receptores para el dolor son terminaciones libres y se diferencian por el tipo de estmulo al cual
responden y bsicamente son de tres clases:
1) Los mecanociceptores responden a estmulos mecnicos muy intensos de la piel como apretar,
pellizcar, pinchar, etc. Tambin pueden responder a estmulos trmicos repetitivos, entre 45 y
55C.
2) Los termociceptores responden a bajas temperaturas, menos de 10C, y altas temperaturas, por
encima de 42-45C, y asimismo responden a estmulos mecnicos intensos.
3) Los nociceptores polimodales responden a estmulos dolorosos mecnicos, trmicos y qumicos.
El estmulo doloroso (E) acta sobre un terminal nervioso que lleva su axn hacia la neurona sensorial
primaria (1) en las astas posteriores de la mdula espinal. El mediador excitatorio de esta informacin
dolorosa es la sustancia P, aunque tambin pueden participar otras sustancias como el cido glutmico, la
somatostatina y el polipptido intestinal vasoactivo (VIP).
Los axones de las segundas neuronas del sistema de transmisin del dolor (2) ascienden en dos tractos
diferenciables tanto anatmica como funcionalmente; el tracto Pleo-espino-talmico con proyecciones
amplias y difusas; y el tracto Neo-espino-talmico con proyecciones menores y circunscritas. La va
neuronal del neo-espino-talmico es responsable de la localizacin certera en la superficie corporal de los
dolores agudos, siendo pequeo el nmero de las fibras que la componen. Los axones del Pleo-espino-
talmico se enlazan sinpticamente con neuronas del tronco enceflico en especial con la informacin
reticular tegmental y los cuadrigminos (Tracto espino-tectal), mientras que otras de sus fibras alcanzan
directamente a los ncleos talmicos intramamilares. Hasta este nivel no hay participacin de la corteza
cerebral en las sensaciones del dolor.
En el tlamo existen neuronas que vienen a denominarse de tercer orden (3) que provienen de los ncleos
intramamilares del tlamo y que se proyectan enviando sus axones al frontal superior de la corteza
cerebral. Igualmente existen neuronas de tercer orden en el ncleo ventro-basal y grupo posterior del
tlamo que proyectan sus axones al parietal posterior en la corteza cerebral. Es aqu, donde ocurre la
modulacin del dolor, y donde socioculturalmente puede variar la expresin del dolor
EXPERIMENTO N 1: SENSACIONES TRMICAS Y UMBRAL DEL DOLOR
Materiales: Hervidor elctrico con agua ,termmetro y gotero.
Procedimiento
1. Introducir el termmetro en el hervidor elctrico y registrar la temperatura del agua.
2. Aumentar la temperatura del agua, conectando el hervidor en el suministro elctrico.
3. Cada minuto registrar la temperatura del agua y cargar el gotero y dejar caer unas dos o tres gotas
en el dorso de la mano hasta que el sujeto de experimentacin perciba un cambio en la
temperatura del agua en relacion a la temperatura inicial del primer minuto.
4. Continuar con el paso tres hasta el momento en que al dejar caer una gota en la palma de la mano
sienta dolor. 5.- Construir una curva tiempo vs. Temperatura y determine el umbral del dolor.
Resultados
TIEMPO (MIN) TEMPERATURA C DOLOR
EXPERIMENTO N 2: ISQUEMIA LOCAL Y DOLOR
Materiales
- Tensimetro.
- Cronmetro.
- Sujeto Experimental (alumno 1).
- Sujeto Experimentador (alumno 2).
Procedimiento
1. El sujeto de experimentacin deber sentarse cmodamente, colocando el brazo sobre la mesa de
modo que quede a nivel del corazn.
2. Coloque el manguito del esfigmomanmetro, completamente desinflado, alrededor del brazo de
manera que su borde inferior quede 2-4 cm sobre el pliegue del codo.
3. Aumentar la presin del sistema, con la pera insufladora, hasta alcanzar una presin de 200 mm
Hg.
4. Solicitar al sujeto de experimentacin que abra y cierre rtmicamente ambas manos.
5. Registrar el tiempo en que el sujeto empieza a reportar que siente dolor y el momento en que el
dolor se torna insoportable.
6. Disminuir rpidamente la presin del sistema, abriendo la vlvula de la pera insufladora.
7. Monitorear el tiempo en que desaparece el dolor.
8. Realizar el experimento tanto en la mano derecha como en la mano izquierda.
Resultados
BRAZO
Derecho Izquierdo
Inicia el dolor
Dolor insoportable
Desaparece el dolor
UMBRAL DEL DOLOR
DOLOR TIEMPO (MIN) TEMPERATURA (C)
Insoportable
ISQUEMA LOCAL Y DOLOR
BRAZO
Derecho Izquierdo
Inicia el dolor
Dolor insoportable
Desaparece el dolor
PRUEBAS CEREBELOSAS CEREBELO.- PRACTICA DE Fisiologa del CEREBELO 2013- I
Marco Terico.
Anatoma.
Rol Fisiolgico.
Evaluacin de la Fisiologa Cerebelosa.
Sntomas y Signos de la alteracin Cerebelosa.
FUNCIN DEL CEREBELO
la principal funcin del cerebelo es la coordinacin del movimiento, es decir, permitir que el movimiento se realice con facilidad y precisin.
los ncleos profundos tienen una actividad continua en situacin basal, y tienen conexiones excitadoras con el origen de las vas motoras (corteza motora
a travs del tlamo, ncleo rojo, ncleos vestibulares y formacin reticular, que
son el origen respectivamente de las vas motoras corticoespinal, rubroespinal,
vestibuloespinales y reticuloespinales). as, los ncleos del cerebelo mantienen
una activacin tnica de las vas motoras que facilita la realizacin del
movimiento.
Las clulas de Purkinje inhiben a los ncleos profundos, con lo que pueden inhibir unos componentes del movimiento y otros no, y as DAR
FORMA AL MOVIMIENTO.
EL CEREBELO REGULA EL TONO MUSCULAR, modificando la actividad de las motoneuronas gamma, de manera QUE AUMENTA EL TONO
PARA MANTENER LA POSTURA, O LO INHIBE PARA FACILITAR LA
REALIZACIN DE LOS MOVIMIENTOS VOLUNTARIOS.
Tambin contribuye a la COORDINACIN DE LOS MOVIMIENTOS POLIARTICULARES. Las fibras paralelas recorren una larga distancia en la
corteza del cerebelo, y en su recorrido pueden actuar sobre clulas de Purkinje
correspondientes a VARIAS ARTICULACIONES, COORDINANDO SU
ACTIVIDAD.
EL CEREBELO PARTICIPA EN EL APRENDIZAJE DE LOS MOVIMIENTOS. MIENTRAS SE EST APRENDIENDO UN
MOVIMIENTO NUEVO SE PRODUCEN FRECUENTES ESPIGAS
complejas en las clulas de Purkinje. Esto produce depresin a largo plazo, por
lo que una vez que el movimiento se ha aprendido disminuye la frecuencia de
las espigas simples. Puesto que las clulas de Purkinje inhiben a los ncleos
profundos, la disminucin de las espigas simples produce una mayor actividad
de los ncleos profundos y de las vas motoras.
REGIONES FUNCIONALES DE CEREBELO
El cerebelo se divide en tres regiones funcionales. La estructura microscpica es
semejante en las tres, por lo que las diferencias entre ellas se deben a que tienen distintas
conexiones aferentes y eferentes, y realizan el mismo tipo de procesamiento pero con
distinta informacin.
Vestibulocerebelo
El vestbulocerebelo corresponde anatmicamente con el ndulo-flculo.
Colabora con los ncleos vestibulares en las funciones de mantenimiento del equilibrio y de ajuste del reflejo vestibuloocular.
Las lesiones del vestibulocerebelo en un lado producen sntomas parecidos a las lesiones de los ncleos vestibulares en el lado cotralateral. La
razn de esto es que, puesto que la corteza del vestibulocerebelo inhibe a los
ncleos vestibulares ipsolaterales, la lesin del vestibulocerebelo produce
hiperactividad vestibular ipsoateral, que equivale a una lesin de los ncleos
vestibulares contralaterales.
Espinocerebelo.
Incluye al vermis cerebeloso y la zona intermedia de los hemisferios cerebelosos. El vermis junto con el ncleo fastigio se asocia a los movimientos
axiales (del tronco y raz de los miembros) y la zona intermedia de los
hemisferios cerebelosos se asocia a los movimientos la parte distal de las
extremidades. Por5 eso las lesiones del ,los hemisferios cerebelosos se asocian
con alteraciones de los movimientos de las extremidades partes distales. Y las
lesiones de la lnea media (VERMIS) producen inestabilidad en la marcha. Por
eso debe ampliar la base de sustentacin.
El espinocerebelo se encarga de controlar la ejecucin de los movimientos. Recibe informacin por las vas espinocerebelosas de cmo se
estn realizando los movimientos, y si detecta que el movimiento comienza a
apartarse del objetivo deseado, enva seales correctoras. El ncleo fastigio
enva las seales correctoras al origen de las vas que controlan los
movimientos axiales, que son la vestibuloespinal y reticuloespinal, y el ncleo
interpuesto enva seales correctoras al origen de las vas que controlan los
movimientos distales, que son la va corticoespinal lateral y rubroespinal.
El espinocerebelo coordina la actividad de msculos agonistas y antagonistas durante los movimientos. Regula la relajacin del antagonista
durante realizacin del movimiento, y tambin la contraccin del antagonista al
final del movimiento para frenarlo cuando llega al objetivo. Cuando se altera
produce el temblor intencional( no puede ensartar la aguja con un hilo).
Cuando se altera la parte lateral (hemisferio neocerebeloso se produce la ataxia, disimetra, disdiadococinesia (juego sucesivo de palma- dorso de las manos
muy dificultoso) .
Cerebrocerebelo.
Comprende la parte lateral de los hemisferios cerebelosos y el ncleo dentado.
Participa en la preparacin del movimiento. Recibe informacin de la corteza, a travs de los ncleos del puente, sobre el movimiento que se desea
realizar, elabora el plan motor (determina qu msculos hay que contraer, y en
qu secuencia, para realizar ese movimiento) y enva ese plan motor a la corteza
motora, a travs del tlamo, para que se ejecute.:Cuando se retrasa esta accin
de descompone el movimiento en sus partes ( movimientos roboticos)
El cerebrocerebelo es necesario para el aprendizaje de movimientos complejos (p. ej. aprender a tocar el piano).
El cerebrocerebelo tambin interviene en funciones cognitivas no relacionadas directamente con el movimiento.
Para evaluar la FUNCIN CEREBELOSA se estudia la Taxia es decir se explora la
Taxia durante la ejecucin de los movimientos ( Taxia dinmica) se evalan en la
posicin de reposo( Taxia esttica).
Evaluacin de la Taxia DINMICA: Se examina por medio de pruebas que consisten
en establecer una meta u objetivo a los movimientos de la persona. Si estas pruebas se
alteran se dice que existe ataxia dinmica, por ejemplo tenemos:
La Prueba del taln rodilla para miembros inferiores: estando la persona echada tocar
con el taln de un pi la rodilla del la otra pierna, lo debe hacer en forma precisa, exacta,
enseguida se le pide que descienda el taln bordeando la tibia de la pierna opuesta y no
debe zigzaguea hasta llegar al dedo gordo del otro pi. Si tiembla, duda zigzaguea el
taln , es anormal.
Para Miembros superiores: Prueba de Indice-Nariz de ndice- oreja .
Con los dedos de la mano contrados se le pide que con el ndice extendido se toque la
punta de la nariz y luego el lbulo de la oreja con los ojos abiertos y luego cerrados.
Debe hacerlo en forma precisa si