Post on 11-Nov-2015
description
Slide 1
M A L A R I A
EDIDHARMANAM A L A R I APemeriksaan Laboratorium Malaria
Deteksi Plasmodium atau Fragmen Antigen dan DNA parasit
Hapusan Darah tepi
Fluoresensi : QBC, Direct Smears
Rapid Test
PCR
2. Deteksi Antibodi spesifik terhadap Plasmodium
Malaria adalah penyakit karena infeksi parasit Plasmodium
Plasmodium yang dapat menginfeksi manusia ada 5 spesies
Plasmodium falciparumPlasmodium vivaxPlasmodium malariaePlasmodium ovalePlasmodium knowlesi
P.vivaxP.ovaleP. falciparum schizogony di kapiler alat dalamSiklus hidup PlasmodiumDETEKSI MALARIA DENGAN PEMERIKSAAN PARASIT, ANTIGEN dan DNAMikroskopis : hapusan darah
Imunokromatografi : ICT : Rapid Test
Polymerase Chain Reaction : PCR
Gold StandardDapat identifikasi SpesiesDapat menghitung derajat parasitemiaTreshold deteksi : Darah tipis : 100 parasit / uL Darah tebal: 5 10 parasit /uL
Blood smears :Deteksi Plasmodium atau Fragmen Antigen dan DNA / RNA parasit
Trophozoite :AccoleMultiple infectionsSplitting chromatinGametocyte:Sausage shaped
Erythrocytes:EnlargedSchuffners dotsTrophozoite :Ameboid form
Ronald Ross (1857-1932)
Erythrocyte :Oval, ragged edgesSchuffners dots
Trophozoite :Band formSchizont :Rosette
Plasmodium knowlesi
vivaxmalariaefalciparumovaleknowlesi
malariaeknowlesi
DENSITAS PARASIT
Monitoring perjalanan penyakit dan efektifitas terapiSEMI KUANTITATIF :Hitung jumlah parasit aseksual dengan pembesaran kuat , pada Darah Tebal :
+1-10 par / 100 LP
++11 100 par / 100 LP
+++1 10 par / 1 LP
++++> 10 par / 1 LP
Number of parasites X 8000Number of leukocytes (200) counted
Red blood cells parasitized X 100%Total red blood cells countedKUANTITATIFNumber of asexual par. X total RBC/uLTotal red blood cells in 25 fields
Parasitemia and clinical correlatesParasitemiaParasites/l Remarks2-5%100,000-250,00Hyperparasitemia/severe malaria*, increased mortality10%500,000Exchange transfusion may be considered/ high mortality*WHO criteria for severe malaria are parasitemia > 10,000 /l andsevere anaemia (haemaglobin < 5 g/l).Prognosis is poor if > 20% parasites are pigment containing trophozoites and schizonts (more mature forms) and/or if > 5% of neutrophils contain visible pigment.Hnscheid T. (1999) Diagnosis of malaria: a review of alternatives to conventionalmicroscopy. Clin Lab. Haem. 21, 235-245.16Acridine orangeFluorochrome
EDIDHARMANAFluoresen Deteksi nukleotida pada inti
Sensitivitas 90 %
Membutuhkan mikroskop khususDeteksi Plasmodium atau Fragmen Antigen dan DNA parasit
Rapid diagnostic testDeteksi Plasmodium atau Fragmen Antigen dan DNA /RNA parasit
OPTIMAL TestDeteksi antigen PlasmodiumHRP : PfHRP2 spesifik untuk P. falciparum (seksual dan aseksual)pLDH: semua spesies Plasmodium (sexual dan asexual), tersedia PfLDH dan PvLDHPan Antigen Malaria : AldolaseDeteksi Plasmodium atau Fragmen Antigen dan DNA /RNA parasitBlood smearsRDTEquipment
Training
Test duration
Capability
Detection of parasite density
Detection threshold
DisadvantagesMicroscope
Trained microscopist
20 60 min
Detects and differentiates all species at different stages
Possible
5 10 par/uL
Can not detect sequestered P. falciparum
Kit only
Little training
5 30 min
Detects malaria antigens (PfHRP/PMA/pLDH) sexual and asexual formSome RD Test
100 500 par/uL
Cross reactivity Among plasmodial antigens and with auto Ab (RF)
False negative in very low and very high parasitemia
Persistence of AntigensPfHRP : up to 28 dayspLDH : 7 daysComparison of Peripheral Blood Smears and RDTTestSettingSensitivity Specificity PPV+ PPV- ICT Pf #Outpatient,Puskesmas,Jepara P.falciparum 83.3
85.7 96.2 54.6 OptiMAL $Field,Outbreak,BanjarnegaraP.falciparum 85.7
P.vivax 92.7 89.9
96.1 60
95 97.3
94.3EVALUATION OF RAPID DIAGNOSTIC TESTSFOR MALARIA IN CENTRAL JAVA# Hudiarso, M. Hussein Gasem, Budiriyanto, 2001 $ Pugud Samodro, W. Budiwan, M. Hussein Gasem, 2002
kappa index of agreement : P. falciparum 0.96 ; P. vivax : 0.97MH GasemPolymerase Chain Reaction (PCR)Teknik molekuler untuk deteksi materila genetik Plasmodium
Threshold of detection0.1 parasit/l (whole blood in tube)2 parasite/l (kertas filter)Deteksi Plasmodium atau Fragmen Antigen dan DNA / RNA parasit22Polymerase Chain Reaction (PCR)Dapat identifikasi ke 5 spesies
Dapat mengidentifikasi mutasi untuk di korelasikan dengan resistensi obat
Memerlukan peralatan khusus dan kemampuan laboratorik khusus
Dapat dipergunakan untuk mengukur densitas parasit
23DETEKSI MALARIA DENGAN PEMERIKSAAN ANTIBODI SPESIFIK TERHADAP PLASMODIUMDeteksi Antibodi Spesifik ( Serologi )Deteksi dengan metode Imunofluoresen atau Enzyme Immuno Assay.
Bermanfaat untuk :
- Survei epidemiologik
- Screening donor darah pada donor parasitemia rendah
- Penderita demam dengan suspek malaria
- Deteksi malaria kongenital bila hapusan darah ibu negatif
- Evaluasi efektivitas vaksin
TERAPI MALARIACATATAN: Diagnosis malaria membutuhkan pemeriksaan laboratorium yang cepat dan akurat
Hapusan darah (blood smears) masih merupakan gold standard untuk diagnosis malaria
Rapid test dapat dipergunakan sebagai alternatif pemeriksaan walaupun terkadang masih perlu konfirmasi dengan pemeriksaan mikroskopis hapusan darah.
PCR merupakan test yang paling sensitif yang sangat bermanfaat untuk konfirmasi diagnosis
Menegakkan diagnosis malaria memerlukan dasar pengetahuan aspek biologik Plasmodium
Skizontosida jaringanSkizontosida darahSiklus hidup PlasmodiumGametosidaSporontosidaSkizontisida darah : untuk penyembuhan klinis dan suprtesifContoh : klorokuin, kina, artemisinin, meflokuin dll
Skizontosida jaringan : membunuh hipnosoit sehingga mencegah relaps khususnya P. vivax dan P{. OvaleContoh : Primakuin
Gametosida : membunuh gametosid, mencegah penularanContoh : Kina dan klorokuin dapat membunuh gametosit P. vivax, ovale dan malariae Primakuin membunuh gametosit P. falciparum
Sporontosida : membunuh sporosoit dalam tubuh vektorObat : ? Primakuin, Proguanil.
Pengobatan malaria yang dianjurkan :
Pengobatan yang efektif, radikal dan membunuh semua stadium parasit dalam darah
Tujuan Pengobatan :
Penyembuhan klinis, parasitologik dan memutus rantai penularan
WHO merekomendasikan pengobatan malaria secara global dengan penggunaan nregimen obat ACT (Artemisinin Combination Therapy ) yang telah dipakai oleh Depkes sebagai obat lini 1 di seluruh Indonesia
ACT :
Artemisinin + lumefantrenArtesunate + amodiakuinArtesunate + meflokuinArtesunate + sulfadoksin-pirimetamin2009 : Dihidroartemisinin + Piperakuin (DHP)
Pengobatan LINI 1 P. falciparum :Artesunate + Amodiakuin + Primakuin
Pengobatan LINI 2 P. falciparumArtemeter Lumefantrine : A-L (Coartem) + Promakuin
Jika gagal,Kombinasi Kina + Tetrasiklin+PrimakuinKina + Dosisiklin + Primakuin
!!! Wanita hamil dan anak usia