104
Lampiran 1: Skema Kerja Penelitian
Hasil
Uji metabolit sekunder kalus ekplan
stevia (Stevia rebaudiana Bert. Dengan
HPLC
Pengamatan selama 4 minggu
(terbentuknya kalus)
Inkubasi planlet setelah penanaman
Inisiasi (penanaman) eksplan dalam
media di LAF
Sterilisasi ekplan stevia (Stevia
rebaudiana Bert.)
Pembuatan media dan sterilisasi media
Sterilisasi alat yang akan digunakan
Persiapan alat dan bahan
105
Lampiran 2: Skema Kerja Sterilisasi
1. Sterilisasi Alat
2. Sterilisasi eksplan
Diletakkan
dalam ruang
inkubasi dan
siap digunakan
Sterilisasi
dengan
autoklaf 30
menit dengan
suhu 1210C
Botol kultur ditutup
dengan plastik dan
diikat dengan karet
sedangkan cawan
petri dan alat
diseksi dibungkus
dengan aluminium
foil, dimasukkan
plastik dan diikat
karet
Dioven untuk
mengeringkan
Dibilas dengan
air mengalir
Dicuci bersih dengan detergen dan
direndam tepol selama 24 jam Botol kultur, cawan
petri, dan alat diseksi
Dicelupkan larutan
betadin
Dibilas aquades 3 kali
Direndam larutan
bayclin 30%, 20%,
10% selama 10 menit
Sterilisasi LAF
Dibilas air mengalir
dan direndam larutan
fungisida 75% selama
10 menit
Dibilas air mengalir
dan direndam larutan
detergent 5 menit
Sterilisasi luar
Eksplan stevia (Stevia
rebaudiana Bert.)
106
Lampiran 3: Komposisi Media MS
No Bahan Kimia Komposisi
mg/L
Komposisi
mg/50ml
Komposisi
mg/100ml
1 NH4NO3 1650 8,25 16,5
2 KNO3 1900 9,5 19
3 CaCl 440 2,2 4,4
4 MgSO4 370 1,85 3,7
5 KH2PO4 170 0,859 1,78
6 FeSO47H2O 27,8 0,139 0,278
7 Na2EDTA 37,3 0,1865 0,373
8 MnSO44H2O 22,3 0,1115 0,223
9 ZnSO47H2O 8,6 0,043 0,086
10 H3BO3 6,2 0,031 0,062
11 KL 0.83 0,00415 0,0083
12 Na2M0O42H2O 0,25 0,00125 0,0025
13 CuSO45H2O 0,025 0,000125 0,00025
14 CoCl26H2O 0,025 0,000125 0,00025
15 Miyoinosital 100 0,5 1
16 Niacin 0,5 0,0025 0,005
17 Pyrodoxyne-HCL 0,5 0,0025 0,005
18 Thiamin-HCL 0,5 0,0025 0,005
19 Glycine 2,0 0,01 0,02
20 Sukrose 3000 15 30
Lampiran 4: Hari Muncul Kalus
No Perlakuan Ulangan
Rata-Rata 1 2 3
1 K1P1 16 16 17 16,33333333
2 K1P2 14 17 19 16,66666667
3 K1P3 18 17 17 17,33333333
4 K1P4 20 20 14 18
5 K2P1 17 17 18 17,33333333
6 K2P2 17 14 14 15
7 K2P3 14 16 16 15,33333333
8 K2P4 14 14 16 14,66666667
9 K3P1 14 16 17 15,66666667
10 K3P2 14 15 16 15
11 K3P3 14 15 16 15
12 K3P4 16 14 14 14,66666667
107
Lampiran 5: Hasil ANAVA pengaruh 2,4-D dan PEG 6000 terhadap hari
munculnya kalus
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable:Data
Source
Type III Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Model 9167.167a 14 654.798 240.761 .000
Auksin 26.000 2 13.000 4.780 .019
PEG 3.861 3 1.287 .473 .704
Ulangan 1.500 2 .750 .276 .762
Auksin * PEG 15.556 6 2.593 .953 .478
Error 59.833 22 2.720
Total 9227.000 36
a. R Squared = ,994 (Adjusted R Squared = ,989)
Lampiran 6: Hasil uji DMRT 5% 2,4-D terhadap hari munculnya kalus
Data
Duncan
Auksin N
Subset
1 2
3 12 15.08
2 12 15.58
1 12 17.08
Sig. .466 1.000
108
Lampiran 7: Persentase Pertumbuhan Kalus
No Perlakuan Jumlah Ekplan
yang ditanam
Jumlah Eksplan
yang Tumbuh
Persentase Eksplan
yang tumbuh
1 K1P1 9 7 77,77777778
2 K1P2 9 8 88,88888889
3 K1P3 9 6 66,66666667
4 K1P4 9 8 88,88888889
5 K2P1 9 7 77,77777778
6 K2P2 9 7 77,77777778
7 K2P3 9 8 88,88888889
8 K2P4 9 6 66,66666667
9 K3P1 9 8 88,88888889
10 K3P2 9 5 55,55555556
11 K3P3 9 7 77,77777778
12 K3P4 9 4 44,44444444
Lampiran 8: Hasil ANAVA antara 2,4-D dengan PEG 6000 terhadap persentase
pertumbuhan kalus
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable:Data
Source
Type III Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Model 212781.945a 14 15198.710 26.168 .000
Auksin 1296.481 2 648.241 1.116 .345
PEG 1080.531 3 360.177 .620 .609
Ulangan 3518.759 2 1759.380 3.029 .069
Auksin * PEG 4383.173 6 730.529 1.258 .316
Error 12777.833 22 580.811
Total 225559.778 36
a. R Squared = ,943 (Adjusted R Squared = ,907)
109
Lampiran 9: Berat Kalus
No Perlakuan Ulangan
Rata-Rata 1 2 3
1 K1P1 0,37 0,25 0,25 0,29
2 K1P2 0,19 0,39 0,18 0,253333333
3 K1P3 0,13 0,12 0,05 0,1
4 K1P4 0,19 0,13 0,08 0,133333333
5 K2P1 0,27 0,4 0,25 0,306666667
6 K2P2 0,25 0,36 0,19 0,266666667
7 K2P3 0,19 0,12 0,08 0,155
8 K2P4 0,12 0,19 0,07 0,126666667
9 K3P1 0,23 0,21 0,2 0,213333333
10 K3P2 0,19 0,33 0,18 0,233333333
11 K3P3 0,27 0,07 0,06 0,133333333
12 K3P4 0,1 0,2 0,03 0,11
Lampiran 10: Hasil ANAVA antara 2,4-D dengan PEG 6000 terhadap berat
kalus
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable:Data
Source
Type III Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Model 1.572a 14 .112 28.708 .000
Auksin .007 2 .004 .957 .399
PEG .174 3 .058 14.814 .000
Ulangan .060 2 .030 7.704 .003
Auksin * PEG .012 6 .002 .509 .795
Error .086 22 .004
Total 1.658 36
a. R Squared = ,948 (Adjusted R Squared = ,915)
110
Lampiran 11: Hasil uji DMRT 5 % PEG 6000 terhadap berat kalus
Data
Duncan
PEG N
Subset
1 2
3 9 .1211
4 9 .1233
2 9 .2511
1 9 .2700
Sig. .941 .528
.
Lampiran 12: Perhitungan Eksplan Berkalus
1. K1P1: 7
9 x 100% = 77,78 %
2. K1P2: 8
9 x 100% = 88,89%
3. K1P3: 6
9 x 100% = 66,67%
4. K1P4: 8
9 x 100% = 88,89%
5. K2P1: 7
9 x 100% =77.78%
6. K2P2: 7
9 x 100% = 77,79%
7. K2P3: 8
9 x 100% = 88,89%
8. K2P4: 6
9 x 100% = 66,67%
9. K3P1: 8
9 x 100% = 88,89%
10. K3P2: 5
9 x 100% = 55,56%
11. K3P3: 7
9 x 100% = 77,78%
12. K3P4: 4
9 x 100% = 44,44%
111
Lampiran 13: Gamnbar Hasil Pengamatan Kalus Berumur 4 Minggu
Konsentrasi Ulangan I Ulangan II Ulangan III
K1PI
(1 mg/L 2,4-
D + 0 mg/L
PEG 6000)
K1P2
(1 mg/L 2,4-
D + 5 mg/L
PEG 6000)
K1P3
(1 mg/L 2,4-
D + 15 mg/L
PEG 6000)
K1P4
(1 mg/L 2,4-
D + 25 mg/L
PEG 6000)
112
K2P1
(2 mg/L 2,4-
D + 0 mg/L
PEG 6000)
K2P2
(2 mg/L 2,4-
D + 5 mg/L
PEG 6000)
K2P3
(2 mg/L 2,4-
D + 15 mg/L
PEG 6000)
K2P4
(2 mg/L 2,4-
D + 25 mg/L
PEG 6000)
113
K3P1
(3 mg/L 2,4-
D + 0 mg/L
PEG 6000)
K3P2
(3 mg/L 2,4-
D + 5 mg/L
PEG 6000)
K3P3
(3 mg/L 2,4-
D + 15 mg/L
PEG 6000)
K3P4
(3 mg/L 2,4-
D + 25 mg/L
PEG 6000)
114
Lampiran 14: Gambar Alat, Bahan, dan Kegiatan Penelitian
1. Alat
a. Alat-Alat Penelitian
Hot Plate Oven Autoklaf
Refrigator LAF Timbangan Analitik
PH Meter Alat Gelas Cawan Petri dan Alat
Diseksi
b. Alat-Alat High Performance Liquid Cromatography (HPLC)
Kolom C18 Layar Panel Kendali Panel Kendali HPLC
115
Ruang Kolom Set Kromatografi
Kolom
Tampilan
Pengendalian
Tempat Injek Sample
2. Bahan
Bahan Pembuatan Media Bahan Sterilisasi
Eksplan (Luar LAF) Bahan Sterilisasi
Eksplan (Dalam LAF)
Karet, Label, dan Plastik
Tahan Panas
Bahan Sterilisasi Ruang
dan Alat Media Tanam
116
3. Kegiatan Penelitian
Sterilisasi Basah Sterilisasi Kering Penimbangan Bahan
Pemasakan Media Penuangan Media dalam
Botol Kultur
Sterilisasi Eksplan (Luar
LAF)
Sterilisasi Eksplan
(Dalam LAF) Inisiasi Inkubasi
Pengukuran PH Media
117
Lampiran 15: Gambar Hasil Analisis HPLC
1. Daun Stevia
2. K1P1
118
3. K1P2
4. K1P3
119
5. K1P4
6. K2P1
120
7. K2P2
8. K2P3
121
9. K2P4
10. K3P1
122
11. K3P2
12. K3P3
123
13. K3P4
124
KEMENTERIAN AGAMA RI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN)
MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
Jl. Gajayana No. 50 Dinoyo Malang (0341)558933Fax.(0341) 558933
BUKTI KONSULTASI SKRIPSI
Nama : Fittriya Nur Laila
NIM : 09620024
Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi/Biologi
Judul Skripsi : Pengaruh Penambahan ZPT 2,4-D dan PEG
(Polyethylene Glykol) 6000 pada Media MS (Murashige
& Skoog) untuk Produksi Metabolit Sekunder
Steviosida pada Kultur Kalus Stevia (Stevia rebaudiana
Bert. M.)
Pembimbing : Dr. Evika Sandi Savitri, M. P.
125
KEMENTERIAN AGAMA RI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN)
MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
Jl. Gajayana No. 50 Dinoyo Malang (0341)558933Fax.(0341) 558933
BUKTI KONSULTASI AGAMA
Nama : Fittriya Nur Laila
NIM : 09620024
Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi/Biologi
Judul Skripsi : Pengaruh Penambahan ZPT 2,4-D dan PEG
(Polyethylene Glykol) 6000 pada Media MS (Murashige
& Skoog) untuk Produksi Metabolit Sekunder
Steviosida pada Kultur Kalus Stevia (Stevia rebaudiana
Bert. M.)
Pembimbing : Achmad Nasichuddin, M. A.
126
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
RIWAYAT PENDIDIKAN
Tingkat Tahun Lembaga Lokasi Keterangan
SD 1997-2003 SDN. Jogosari Pandaan Lulus
SMP / Mts 2003-2006 Mts. Ma’arif Sukorejo Lulus
SMA / MA 2006-2009 MA. Ma’arif Sukorejo Lulus
Nama Fittriya Nur Laila
Tempat, Tanggal
Lahir Pasuruan, 15 September 1990
Alamat
JL. Lukman Hakim RT. 02 RW. 01
Desa Jogonalan Kecamatan
Pandaan Kabupaten Pasuruan
Jenis Kelamin Perempuan
Agama / Status Islam / Belum Nikah
Kewarganegaraan Indonesia
No. HP 085790800270
Top Related