51
Lampiran 1. Determinasi tanaman Sambiloto dan Kayu Manis
52
53
54
Lampiran 2. Jalannya Penelitian
Serbuk Kayu Manis Cek kadar air
kayu manis Penimbangan serbuk
kayu manis
Penimbangan
serbuk sambiloto
Pembuatan
selongsong kayu
manis
Ekstraksi
Soxhletasi kayu
manis
Hasil soxhletasi Pengecekan kadar
air sambiloto
Ekstraksi soxhletasi
sambiloto
Hasil soxhletasi
sambiloto Rotary Evaporator Adaptasi hewan uji
Pemberian makan
hewan uji
Pembersihan
kandang
Penimbangan hewan
uji
Perlakuan hewan uji
55
Vaksinasi hewan uji Pengambilan darah
mencit
Sentrifugasi
darah
Serum mencit
Vaksin hepatitis B Vaksin dimasukkan
dalam sumuran
Inkubasi 1
malam T 4oC
Pencucian dengan
PBST 20
Serum diencerkan
dengan PBST 20 Serum dimasukkan
dalam sumuran
inkubasi Memasukkan Mouse
anti carp IgG
Inkubasi Rabbit anti mouse IgG
HRP
vortex Inkubasi setelah
pemberian antibody
Penambahan substrat
TMB
Inkubasi pasca pemberian
TMB
Sumuran yang
telah ditambah
TMB
Penambahan H2SO4
56
Setelah penambahan
H2SO4
Dilakukan pembacaan
dengan ELISA reader
(450 nm)
Hasil pembacaan
57
Lampiran 3. Data perhitungan preparasi sampel uji
A. Preparasi sampel
1. Kayu Manis
Dosis tunggal 150 mg/KgBB=
Dosis pemberian Kayu Manis 300 mg/KgBB =
Perhitungan larutan stok Kayu Manis
= 3 mg + 3 mg + 3 mg + 6 mg= 15 mg
Vp ideal p.o pada mencit 0.5 mL
=
2. Sambiloto
Dosis tunggal 150 mg/KgBB=
Dosis pemberian Kayu Manis 300 mg/KgBB =
Perhitungan larutan stok Kayu Manis
= 3 mg + 3 mg + 3 mg + 6 mg= 15 mg
Vp ideal p.o pada mencit 0.5 mL
=
= 3 %
58
B. Volume pemberian
Larutan Stok = 3 % =
=
Perlakuan dengan dosis 150 mg=
= 0.1 mL
Perlakuan dengan dosis 300 mg =
= 0.2 mL
C. Preparasi kontrol positif levamisol
Dosis untuk mencit = 0.45mg/0.7 ml/20gBB
D. Preparasi kontrol negatif vaksin hepatitis b
Dosis vaksin hepatitis b 20 μg/ml (Dewasa)
Dosis untuk mencit = 20 μg x 0,0026 (faktor konversi)
= 0,052 μg/20 gBB mencit
Dosis vaksin hepatitis b untuk pemberian pada mencit adalah 2,6 μL/20 g BB
(Khusnawati, 2015).
Larutan stok vaksin hepatitis b = 0,26 ml ad 10 ml
( 1 ml mengandung vaksin hepatitis b 0,026 ml)
Dosis vaksin hepatitis b = 2,6 μL/20 g BB
= 0,0026 ml
Jadi volume pemberian i.p adalah 0,1 ml (0,1 ml mengandung vaksin
hepatitis b 0,0026 ml
59
Lampiran 4. Nilai OD IgG
60
Lampiran 5. Data OD pada serum hari ke 14
Perlakuan Mencit Nilai OD
Kontrol negatif
I 0.146
II 0.127
III 0.141
IV 0.114
Kontrol Positif
I 0.142
II 0.191
III 0.156
IV 0.142
Kontrol Normal
I 0.142
II 0.136
III 0.158
IV 0.114
Ekstrak Sambiloto
I 0.171
II 0.189
III 0.219
IV 0.134
Ekstrak Kayu Manis
I 0.120
II 0.154
III 0.239
IV 0.157
ES:EKM 1:1
I 0.135
II 0.148
III 0.163
IV 0.260
ES:EKM 1:2
I 0.222
II 0.131
III 0.177
IV 0.193
ES :EKM 2:1
I 0.246
II 0.168
III 0.230
IV 0.216
61
Lampiran 6. Analisa statistika OD Serum hari ke 14
1. Uji Normalitas
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
rata-rata jumlah
IgG
N 32
Normal Parametersa Mean .16162
Std. Deviation .041863
Most Extreme Differences Absolute .191
Positive .191
Negative -.091
Kolmogorov-Smirnov Z 1.079
Asymp. Sig. (2-tailed) .195
a. Test distribution is Normal.
2. Uji Homogenitas
Test of Homogeneity of Variances
rata-rata jumlah IgG
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.301 7 24 .292
3. Uji ANOVA satu jalan
ANOVA
rata-rata jumlah IgG
Sum of Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups .025 7 .004 2.837 .026
Within Groups .030 24 .001
Total .054 31
62
4. Uji LSD
Multiple Comparisons
Dependent Variable:rata-rata jumlah IgG
(I) perlakuan (J) perlakuan
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
LSD kontrol negatif kontrol normal -.000500 .024887 .984 -.05187 .05087
kontrol positif -.044500 .024887 .026 -.09587 .00687
ekstrak Sambiloto (ES) -.083000* .024887 .003 -.13437 -.03163
Estrak Kayu Manis (EKM) .001000 .024887 .968 -.05037 .05237
ES:EKM 1:1 -.025750 .024887 .311 -.07712 .02562
ES:EKM 2:1 -.048750 .024887 .022 -.10012 .00262
ES:EKM 1:2 -.035500 .024887 .167 -.08687 .01587
kontrol normal kontrol vaksin .000500 .024887 .984 -.05087 .05187
kontrol positif -.044000 .024887 .020 -.09537 .00737
ekstrak Sambiloto (ES) -.082500* .024887 .003 -.13387 -.03113
Estrak Kayu Manis (EKM) .001500 .024887 .952 -.04987 .05287
ES:EKM 1:1 -.025250 .024887 .320 -.07662 .02612
ES:EKM 1:2 -.048250 .024887 .024 -.09962 .00312
63
ES:EKM 2:1 -.035000 .024887 .172 -.08637 .01637
kontrol positif kontrol vaksin .044500 .024887 .026 -.00687 .09587
kontrol normal .044000 .024887 .020 -.00737 .09537
ekstrak Sambiloto (ES) -.038500 .024887 .135 -.08987 .01287
Estrak Kayu Manis (EKM) .045500 .024887 .080 -.00587 .09687
ES:EKM 1:1 .018750 .024887 .459 -.03262 .07012
ES:EKM 1:2 -.004250 .024887 .866 -.05562 .04712
ES:EKM 2:1 .009000 .024887 .721 -.04237 .06037
ekstrak Sambiloto (ES) kontrol vaksin .083000* .024887 .003 .03163 .13437
kontrol normal .082500* .024887 .003 .03113 .13387
kontrol positif .038500 .024887 .135 -.01287 .08987
Estrak Kayu Manis (EKM) .084000* .024887 .003 .03263 .13537
ES:EKM 1:1 .057250* .024887 .030 .00588 .10862
ES:EKM 1:2 .034250 .024887 .181 -.01712 .08562
ES:EKM 2:1 .047500 .024887 .068 -.00387 .09887
Estrak Kayu Manis (EKM) kontrol vaksin -.001000 .024887 .968 -.05237 .05037
kontrol normal -.001500 .024887 .952 -.05287 .04987
kontrol positif -.045500 .024887 .080 -.09687 .00587
64
ekstrak Sambiloto (ES) -.084000* .024887 .003 -.13537 -.03263
ES:EKM 1:1 -.026750 .024887 .293 -.07812 .02462
ES:EKM 1:2 -.049750 .024887 .057 -.10112 .00162
ES:EKM 2:1 -.036500 .024887 .015 -.08787 .01487
ES:EKM 1:1 kontrol vaksin .025750 .024887 .311 -.02562 .07712
kontrol normal .025250 .024887 .320 -.02612 .07662
kontrol positif -.018750 .024887 .459 -.07012 .03262
ekstrak Sambiloto (ES) -.057250* .024887 .030 -.10862 -.00588
Estrak Kayu Manis (EKM) .026750 .024887 .293 -.02462 .07812
ES:EKM 1:2 -.023000 .024887 .365 -.07437 .02837
ES:EKM 2:1 -.009750 .024887 .009 -.06112 .04162
ES:EKM 2:1 kontrol vaksin .048750 .024887 .022 -.00262 .10012
kontrol normal .048250 .024887 .024 -.00312 .09962
kontrol positif .004250 .024887 .866 -.04712 .05562
ekstrak Sambiloto (ES) -.034250 .024887 .181 -.08562 .01712
Estrak Kayu Manis (EKM) .049750 .024887 .037 -.00162 .10112
ES:EKM 1:1 .023000 .024887 .365 -.02837 .07437
ES:EKM 2:1 .013250 .024887 .599 -.03812 .06462
65
ES:EKM 1:2 kontrol vaksin .035500 .024887 .167 -.01587 .08687
kontrol normal .035000 .024887 .172 -.01637 .08637
kontrol positif -.009000 .024887 .721 -.06037 .04237
ekstrak Sambiloto (ES) -.047500 .024887 .068 -.09887 .00387
Estrak Kayu Manis (EKM) .036500 .024887 .155 -.01487 .08787
ES:EKM 1:1 .009750 .024887 .699 -.04162 .06112
ES:EKM 1:2 -.013250 .024887 .599 -.06462 .03812
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
5. Histogram OD ±SD serum hari ke 14
0.132±0.007
0.158±0.012 0.1370.0284
0.178±0.0168
0.1675±0.0082 0.163±0.0116
0.18375 ±0.019
0.215±0.2527
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
rata
-rat
a ju
mla
h Ig
G
Perlakuan
Lampiran 7. Data OD hari ke 28
Perlakuan Mencit Nilai OD
Kontrol negatif
I 0.184
II 0.118
III 0.243
IV 0.145
Kontrol normal
I 0.211
II 0.184
III 0.168
IV 0.164
Kontrol positif
I 0.146
II 0.127
III 0.114
IV 0.212
Ekstrak Sambiloto
I 0.344
II 0.201
III 0.295
IV 0.192
Ekstrak Kayu Manis
I 0.315
II 0.148
III 0.163
IV 0.260
ES:EKM 1:1
I 0.233
II 0.334
III 0.145
IV 0.139
ES:EKM 1:2
I 0.215
II 0.314
III 0.313
IV 0.216
ES :EKM 2:1
I 0.676
II 0.175
III 0.245
IV 0.162
Lampiran 8. Analisa Statistik data OD serum hari ke 28
1. Uji Normalitas
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
rata-rata jumlah
IgG
N 32
Normal Parametersa Mean .22009
Std. Deviation .099692
Most Extreme Differences Absolute .241
Positive .241
Negative -.163
Kolmogorov-Smirnov Z 1.365
Asymp. Sig. (2-tailed) .048
a. Test distribution is Normal.
2. Uji Homogenitas
Test of Homogeneity of Variances
rata-rata jumlah IgG
Levene Statistic df1 df2 Sig.
4.464 7 24 .003
3. Uji Kruskal wallis
Test Statisticsa,b
rata-rata jumlah
IgG
Chi-Square 7.368
Df 7
Asymp. Sig. .392
a. Kruskal Wallis Test
Test Statisticsa,b
rata-rata jumlah
IgG
Chi-Square 7.368
Df 7
Asymp. Sig. .392
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable: perlakuan
4. Histogram nilai OD ±SD serum hari ke 28
0,1725±0.027 0,178±0.017 0,1755±0.112
0,258±0.0168 0,2225±0.308
0,212±0.457
0,2645±0.283
0,3145±0.212
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
rata
-rat
a ju
mla
h Ig
G
perlakuan
Lampiran 8. Ethical Clearence
Top Related