Lampiran 1. Determinasi tanaman Sambiloto dan Kayu...

51

Lampiran 1. Determinasi tanaman Sambiloto dan Kayu Manis

54

Lampiran 2. Jalannya Penelitian

Serbuk Kayu Manis Cek kadar air

kayu manis Penimbangan serbuk

kayu manis

Penimbangan

serbuk sambiloto

Pembuatan

selongsong kayu

manis

Ekstraksi

Soxhletasi kayu

manis

Hasil soxhletasi Pengecekan kadar

air sambiloto

Ekstraksi soxhletasi

sambiloto

Hasil soxhletasi

sambiloto Rotary Evaporator Adaptasi hewan uji

Pemberian makan

hewan uji

Pembersihan

kandang

Penimbangan hewan

uji

Perlakuan hewan uji

55

Vaksinasi hewan uji Pengambilan darah

mencit

Sentrifugasi

darah

Serum mencit

Vaksin hepatitis B Vaksin dimasukkan

dalam sumuran

Inkubasi 1

malam T 4oC

Pencucian dengan

PBST 20

Serum diencerkan

dengan PBST 20 Serum dimasukkan

dalam sumuran

inkubasi Memasukkan Mouse

anti carp IgG

Inkubasi Rabbit anti mouse IgG

HRP

vortex Inkubasi setelah

pemberian antibody

Penambahan substrat

TMB

Inkubasi pasca pemberian

TMB

Sumuran yang

telah ditambah

TMB

Penambahan H2SO4

56

Setelah penambahan

H2SO4

Dilakukan pembacaan

dengan ELISA reader

(450 nm)

Hasil pembacaan

57

Lampiran 3. Data perhitungan preparasi sampel uji

A. Preparasi sampel

1. Kayu Manis

Dosis tunggal 150 mg/KgBB=

Dosis pemberian Kayu Manis 300 mg/KgBB =

Perhitungan larutan stok Kayu Manis

= 3 mg + 3 mg + 3 mg + 6 mg= 15 mg

Vp ideal p.o pada mencit 0.5 mL

=

2. Sambiloto

Dosis tunggal 150 mg/KgBB=

Dosis pemberian Kayu Manis 300 mg/KgBB =

Perhitungan larutan stok Kayu Manis

= 3 mg + 3 mg + 3 mg + 6 mg= 15 mg

Vp ideal p.o pada mencit 0.5 mL

=

= 3 %

58

B. Volume pemberian

Larutan Stok = 3 % =

=

Perlakuan dengan dosis 150 mg=

= 0.1 mL

Perlakuan dengan dosis 300 mg =

= 0.2 mL

C. Preparasi kontrol positif levamisol

Dosis untuk mencit = 0.45mg/0.7 ml/20gBB

D. Preparasi kontrol negatif vaksin hepatitis b

Dosis vaksin hepatitis b 20 μg/ml (Dewasa)

Dosis untuk mencit = 20 μg x 0,0026 (faktor konversi)

= 0,052 μg/20 gBB mencit

Dosis vaksin hepatitis b untuk pemberian pada mencit adalah 2,6 μL/20 g BB

(Khusnawati, 2015).

Larutan stok vaksin hepatitis b = 0,26 ml ad 10 ml

( 1 ml mengandung vaksin hepatitis b 0,026 ml)

Dosis vaksin hepatitis b = 2,6 μL/20 g BB

= 0,0026 ml

Jadi volume pemberian i.p adalah 0,1 ml (0,1 ml mengandung vaksin

hepatitis b 0,0026 ml

59

Lampiran 4. Nilai OD IgG

60

Lampiran 5. Data OD pada serum hari ke 14

Perlakuan Mencit Nilai OD

Kontrol negatif

I 0.146

II 0.127

III 0.141

IV 0.114

Kontrol Positif

I 0.142

II 0.191

III 0.156

IV 0.142

Kontrol Normal

I 0.142

II 0.136

III 0.158

IV 0.114

Ekstrak Sambiloto

I 0.171

II 0.189

III 0.219

IV 0.134

Ekstrak Kayu Manis

I 0.120

II 0.154

III 0.239

IV 0.157

ES:EKM 1:1

I 0.135

II 0.148

III 0.163

IV 0.260

ES:EKM 1:2

I 0.222

II 0.131

III 0.177

IV 0.193

ES :EKM 2:1

I 0.246

II 0.168

III 0.230

IV 0.216

61

Lampiran 6. Analisa statistika OD Serum hari ke 14

1. Uji Normalitas

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

rata-rata jumlah

IgG

N 32

Normal Parametersa Mean .16162

Std. Deviation .041863

Most Extreme Differences Absolute .191

Positive .191

Negative -.091

Kolmogorov-Smirnov Z 1.079

Asymp. Sig. (2-tailed) .195

a. Test distribution is Normal.

2. Uji Homogenitas

Test of Homogeneity of Variances

rata-rata jumlah IgG

Levene Statistic df1 df2 Sig.

1.301 7 24 .292

3. Uji ANOVA satu jalan

ANOVA


Sum of Squares Df Mean Square F Sig.

Between Groups .025 7 .004 2.837 .026

Within Groups .030 24 .001

Total .054 31

62

4. Uji LSD

Multiple Comparisons

Dependent Variable:rata-rata jumlah IgG

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound Upper Bound

LSD kontrol negatif kontrol normal -.000500 .024887 .984 -.05187 .05087

kontrol positif -.044500 .024887 .026 -.09587 .00687

ekstrak Sambiloto (ES) -.083000* .024887 .003 -.13437 -.03163

Estrak Kayu Manis (EKM) .001000 .024887 .968 -.05037 .05237

ES:EKM 1:1 -.025750 .024887 .311 -.07712 .02562

ES:EKM 2:1 -.048750 .024887 .022 -.10012 .00262

ES:EKM 1:2 -.035500 .024887 .167 -.08687 .01587

kontrol normal kontrol vaksin .000500 .024887 .984 -.05087 .05187

kontrol positif -.044000 .024887 .020 -.09537 .00737



ES:EKM 1:1 -.025250 .024887 .320 -.07662 .02612

ES:EKM 1:2 -.048250 .024887 .024 -.09962 .00312

63

ES:EKM 2:1 -.035000 .024887 .172 -.08637 .01637

kontrol positif kontrol vaksin .044500 .024887 .026 -.00687 .09587

kontrol normal .044000 .024887 .020 -.00737 .09537

ekstrak Sambiloto (ES) -.038500 .024887 .135 -.08987 .01287


ES:EKM 1:1 .018750 .024887 .459 -.03262 .07012

ES:EKM 1:2 -.004250 .024887 .866 -.05562 .04712

ES:EKM 2:1 .009000 .024887 .721 -.04237 .06037

ekstrak Sambiloto (ES) kontrol vaksin .083000* .024887 .003 .03163 .13437

kontrol normal .082500* .024887 .003 .03113 .13387

kontrol positif .038500 .024887 .135 -.01287 .08987

Estrak Kayu Manis (EKM) .084000* .024887 .003 .03263 .13537

ES:EKM 1:1 .057250* .024887 .030 .00588 .10862

ES:EKM 1:2 .034250 .024887 .181 -.01712 .08562

ES:EKM 2:1 .047500 .024887 .068 -.00387 .09887

Estrak Kayu Manis (EKM) kontrol vaksin -.001000 .024887 .968 -.05237 .05037

kontrol normal -.001500 .024887 .952 -.05287 .04987

kontrol positif -.045500 .024887 .080 -.09687 .00587

64


ES:EKM 1:1 -.026750 .024887 .293 -.07812 .02462

ES:EKM 1:2 -.049750 .024887 .057 -.10112 .00162

ES:EKM 2:1 -.036500 .024887 .015 -.08787 .01487

ES:EKM 1:1 kontrol vaksin .025750 .024887 .311 -.02562 .07712

kontrol normal .025250 .024887 .320 -.02612 .07662

kontrol positif -.018750 .024887 .459 -.07012 .03262



ES:EKM 1:2 -.023000 .024887 .365 -.07437 .02837

ES:EKM 2:1 -.009750 .024887 .009 -.06112 .04162


kontrol normal .048250 .024887 .024 -.00312 .09962

kontrol positif .004250 .024887 .866 -.04712 .05562



ES:EKM 1:1 .023000 .024887 .365 -.02837 .07437

ES:EKM 2:1 .013250 .024887 .599 -.03812 .06462

65


kontrol normal .035000 .024887 .172 -.01637 .08637

kontrol positif -.009000 .024887 .721 -.06037 .04237



ES:EKM 1:1 .009750 .024887 .699 -.04162 .06112

ES:EKM 1:2 -.013250 .024887 .599 -.06462 .03812

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

5. Histogram OD ±SD serum hari ke 14

0.132±0.007

0.158±0.012 0.1370.0284

0.178±0.0168

0.1675±0.0082 0.163±0.0116

0.18375 ±0.019

0.215±0.2527

0

0,05

0,1

0,15

0,2

0,25

rata

-rat

a ju

mla

h Ig

G

Perlakuan

Lampiran 7. Data OD hari ke 28

Perlakuan Mencit Nilai OD

Kontrol negatif

I 0.184

II 0.118

III 0.243

IV 0.145

Kontrol normal

I 0.211

II 0.184

III 0.168

IV 0.164

Kontrol positif

I 0.146

II 0.127

III 0.114

IV 0.212

Ekstrak Sambiloto

I 0.344

II 0.201

III 0.295

IV 0.192

Ekstrak Kayu Manis

I 0.315

II 0.148

III 0.163

IV 0.260

ES:EKM 1:1

I 0.233

II 0.334

III 0.145

IV 0.139

ES:EKM 1:2

I 0.215

II 0.314

III 0.313

IV 0.216

ES :EKM 2:1

I 0.676

II 0.175

III 0.245

IV 0.162

Lampiran 8. Analisa Statistik data OD serum hari ke 28

1. Uji Normalitas

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

rata-rata jumlah

IgG

N 32

Normal Parametersa Mean .22009

Std. Deviation .099692

Most Extreme Differences Absolute .241

Positive .241

Negative -.163

Kolmogorov-Smirnov Z 1.365

Asymp. Sig. (2-tailed) .048

a. Test distribution is Normal.

2. Uji Homogenitas

Test of Homogeneity of Variances


Levene Statistic df1 df2 Sig.

4.464 7 24 .003

3. Uji Kruskal wallis

Test Statisticsa,b

rata-rata jumlah

IgG

Chi-Square 7.368

Df 7

Asymp. Sig. .392

a. Kruskal Wallis Test

Test Statisticsa,b

rata-rata jumlah

IgG

Chi-Square 7.368

Df 7

Asymp. Sig. .392

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable: perlakuan

4. Histogram nilai OD ±SD serum hari ke 28

0,1725±0.027 0,178±0.017 0,1755±0.112

0,258±0.0168 0,2225±0.308

0,212±0.457

0,2645±0.283

0,3145±0.212

0

0,05

0,1

0,15

0,2

0,25

rata

-rat

a ju

mla

h Ig

G

perlakuan

Lampiran 8. Ethical Clearence

Lampiran 1. Determinasi tanaman Sambiloto dan Kayu...

Documents

Transcript of Lampiran 1. Determinasi tanaman Sambiloto dan Kayu...