7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
1/30
PERCOBAAN 3
Asam amino dan Protein
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
2/30
Tujuan
1. Membuktikan adanya ikatan peptida
2. Memahami reaksi xantoproteat dan uji biuretterhadap bermacam-macam kandungan dariprotein
3. Memahami kelarutan dan sifat amfoter dari
asam amino
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
3/30
Landasan TeoriAsam amino adalah sembarang senyawa organik yangmemiliki gugus fungsional karboksil (-COOH) dan
amina (basanya -NH2). Dalam biokimia seringkali
pengeriannnya dipersempi yang keduanya erika pada
sau aom karbon (C) yang sama (disebu aom C alfa).
(!oed"iadi# $%%&)
Asam amino merupakan sauan yang menyusunpepida dan proein. Dari demikian banyak ragam
srukur yang dapa di"umpai# hanya 2' asam amino sa"a
yang pening dalam proein (!ine e al# $%)
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
4/30
Asam amino yang diperoleh dari hidrolisis
proein adalah asam amino. arinya# gugus aminoberbeda pada aom karbon # yaiu di sebelah gugus
karboksil. Asam amino dikenal dengan nama umum.
*asing-masing memiliki singkaan iga-huruf
berdasarkan namanya# yang digunakan bila kiamenulis rumus pepide# dan singkaan sau-huruf
yang digunakan unuk men"elaskan uruan asam
amino dalam suau proein (Har e al.# 2''+)
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
5/30
Alat dan Bahan
,ahan
1. Asam Nitrat pekat
2. Asam aspartat3. ar. !u"#$$. ar. Na#%
&. 'asein
(. )rea*. Albumin
+. ,lisin
. AgN#31.%g!l211./bi
12.'acang 0anah
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
6/30
Cara Kerja*emanaskan '. gram
urea dalam abung
reaksi hingga imbul
padaan dan
mendinginkannya
dalam + ml a/uades dan
menyaringnya
*enambahkan 0ilra
urea# 1asein air# laruansampel daging sapi
dengan $ml NaOH dan +
ees !u"#$
Diamaiapa yang
er"adi3
A. 456 ,64789
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
7/30
HNO+peka
!anaskan
: NaOH
8kses
Diamai
ees
Cara Kerja,. 456 ;AN9O!7O98A9
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
8/30
AgNO
+
9ees demi ees
Diamai
Albumin $ ml
=ampel daging
=api $ ml
Cara KerjaC. 4"i !engendapan dengan 6on >ogam ,era
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
9/30
HgCl2
9ees demi ees
Diamai
Albumin $ ml
=ampel daging
=api $ ml
Cara KerjaC. 4"i !engendapan dengan 6on >ogam ,era
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
10/30
DATA PENGAMATAN
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
11/30
UJI BIURET
No
.
Sampel Reagen Pengamatan Ket Gambar
$. 4rea NaOH :Cu=O&
dikook,iru birukeunguan
:
2. 1aseinCair
NaOH :Cu=O&
!uih keruh keunguan:
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
12/30
+. =ampeldaging sapi
NaOH :Cu=O&
1uning keruh adaendapan ungu +
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
13/30
Uji Xantoroteat
No
.
Sampel Reagen Pengamatan Ket Gambar
$. aruan yang awalnyabening diambahkanHNO+ p.a kemudian
dipanaskan endapanhilang
9erdapa endapan puihpada dasar abung danwarna laruan bening
-
2. 1asein HNO+ :dipanaskan: NaOHekses
!uih
kuning
9erdapa 2 lapisanlaruan warna pada dasarabung berwarna kuningmuda keruh# diaasnya
kuning peka.
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
14/30
+. AsamAspara
HNO+ :
dipanaskan
: NaOHekses
9idak ada perubahanwarna eap bening#erdapa gelembunglonaan gas9eap bening
-
&. =ampeldaging sapi
HNO+ :
dipanaskan
: NaOHekses
1uning ada 2 lapiswarna pada bagian bawah
bening# diaasnya kuningkeruh.9erdapa + lapis warnapada bg.bawah bening#diaasnya kuning# dandiaasnya kuning peka
:
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
15/30
LO!A#No
.
Sampel Reagen Pengamatan Ket Gambar
1. Albumin AgN#3 Mula-mula
bening
kemudian ada
endapan putih
keruh
2. Albumin %g!2 ening agakkeruh
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
16/30
3. "ampel
daging
sapi
AgN#3 'uninglebih
bening ada
endapan
+
$. "ampel
daging
sapi
%g!2 'uning
sedikit bening
ada endapan
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
17/30
Pem$ahasan
Uji Biuret
Rea%en $iuret ini di%una&an untu& men%uji
adan'a i&atan etida ada samel uji( Uji inimen%%una&an larutan NAO) dan Cu*O+se$a%ai
rea%en( Adan'a i&atan etida ,rea&si ositi-.ditunju&&an den%an eru$ahan /arna larutan'an% semula $enin% menjadi /arna un%u(
Penam$ahan NaO) ada larutan roteinterse$ut 'aitu se$a%ai &atalis 'an% $er-un%siuntu& men%han0ur&an atau meme0ah&anrotein(
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
18/30
Reaksi pada reagen biuret
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
19/30
Struktur asam aminodalam uji biuret
478A
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
20/30
Rea&si ositi- terjadi ada semua samel( Untu& samel urea$u&an merua&an rotein1 namun &arena urea men%andun%%u%us 2N),amin. 'an% memun'ai &esamaan den%an %u%us
rotein sehin%%a mem$entu& /arna un%u se$a%ai hasil re&siantara Cu4 den%an 5N)1 dimana ion Cu oleh &arena itu ureamem$eri&an hasil ositi- ada uji $iuret( Pada emanasan ureater$entu& %elem$un% %as dan men%eluar&an $au amonia 'an%san%at men'en%at( mole&ul urea ada suhu tin%%i$er%a$un% atau $erolimerisasi mem$entu& sen'a/a $iuret(
Pada &asein 0air dan da%in% sai terjadi eru$ahan /arna dariutih &eruh menjadi utih &eruh &eun%uan( )al inimenunju&&an adan'a rea&si antara ion Cudan i&atan etidadalam larutan
Intensitas /arna un%u ada masin%2masin% ta$un% $er$eda1dimana intensitas /arna 'an% le$ih tin%%i menunju&&an i&atanetida dalam rotein le$ih $an'a&(
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
21/30
I&atan etida merua&an i&atan 'an% ter$entu&&eti&a atom &ar$on dari %u%us &ar$o&sil suatu
mole&ul $eri&atan den%an atom nitro%en dari %u%usamina mole&ul lain( Rea&si terse$ut mela&u&anmole&ul air sehin%%a dise$ut rea&si &ondensasi(
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
22/30
4"i ;anoproea
!rinsip dari u"i ini yaiu nirasi ini ben?ene oleh asam nira
peka# sehingga menghasilkan reaksi berwarna kuning dan "uga
orange seelah penambahan alkali.
7eaksi @anoproea ini posiif unuk proein yang mengandung
irosin# fenil alanin dan ripofan. 1arena bersifa aromaik dan
keika direaksikan dengan asam nira peka# inin aromaik
akan menghasilkan senyawa niro yang berwarna kuning dalam
suasana basa (membenuk ini ben?ene).
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
23/30
Struktur
Asam Amino
Pada
Xantoproteat
Asam Aspara
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
24/30
Reaksi yang terjadi
7eaksi posiif diun"ukkan oleh kasein# dan sampel
daging. Dari hasil pengamaan ersebu
mengidenifikasikan adanya gugus aromaik pada
srukur molekul kasein# dan sampel dagingmengandung nirofenil.
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
25/30
!roein yang mengandung asama amino# "ika diambahkan
asam nira peka akan mengendap dengan endapan berwarnapuih yang dapa berubah men"adi kuning sewaku dipanaskan.
=enyawa niro yang erbenuk dalam suasana basa (adanya
penambahan NaOH) akan erionisasi dan warnanya akan
berubah men"adi lebih ua aau "ingga.
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
26/30
Uji Pen%endaan den%an Ion Lo%am Berat
Per0o$aan ini dima&sud&an untu&
men%identi6&asi rotein $erdasar&an si-at roteinterhada lo%am $erat( Pada er0o$aan ini rea%en'an% di%una&an adalah A%NO3dan )%Cl(
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
27/30
Dasar reaksi pengendapan oleh logam bera adalah
peneralan muaan. !engendapan dapa er"adi apabila proeinberada dalam benuk isoelekrik yang bermuaan negaif.
Dengan adanya muaan posiif dari logam bera akan er"adi
reaksi neralisasi dari proein dan !ada semua sampel
erbenuk endapan puih yang menun"ukkan bahwa laruan
posif membenuk endapan logam proeina. 6kaan yang
erbenuk ama kua dan akan memuuskan "embaan garam#
sehingga proein mengalami denaurasi.
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
28/30
5umlah endapan yang erbenuk dipengaruhi oleh kereakifan logam
bera yang diambahkan. 7eaksi anara logam bera dengan proein
menyebabkan puusnya ranai samping pada proein sehinggaproein idak akif. 8ndapan puih yang dihasilkan merupakan hasil
dari reaksi peneralan anara ion logam sebagai kaion dengan
molekul-molekul proein sebagai anion# dihasilkan garam neral
yang mengendap. anion-anion dari AgNO+ dan HgCl2 akan
menyebabkan suasana laruan men"adi sediki asam# sehingga
proein akan mengkondisikan diri sebagai basa dan sebagian
erdapa sebagai anion. Anion dari proein inilah yang bereaksi
dengan ion logam bera membenuk garam proeina yang idak
laru dalam air.
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
29/30
*imulan
"ari hasil er0o$aan uji &ar$ohidrat daatdisimul&an7
8( Rea&si ositi- uji adan'a i&atan etida adasamel1 terjadi /arna un%u 'an% tama& setlahsamel direa&si&an den%an NaO) dan Cu*O+(
( Rea&si 'an% terjadi ada 9antoroteat adalahnitrasi ada inti $en:ene 'an% terdaat ada
mole&ul rotein( *edan%&an rea&si uji $iuretditandai den%an ter$entu&n'a &omle&s un%u&arena teri&atn'a asam amino den%an asamamino 'an% lain oleh Cu4
7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN
30/30
"A;TAR PU*TAKA0essenden. $%%.Kimia Organik Ke-3. 5akara 8rlangga
>ehninger. $%2.Dasar-Dasar Biokimia Jilid I. 5akara 8rlangga!oed"adi# A. $%%&.Dasar-Dasar Biokimia.5akara !enerbi 46
!ress.
=oeharsono. $%%&.Biokimia Jilid I. ogyakara