i

i

UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI MINYAK ATSIRI

DAUN SIRIH HIJAU (Piper betle L.) DARI DAERAH

DENGAN VARIASI KETINGGIAN TEMPAT

TUMBUH DI BALI TERHADAP FUNGI Candida

albicans ATCC 10231 DENGAN MENGGUNAKAN

METODE DIFUSI DISK

Skripsi

Ni Luh Putu Putri Ardiyanti

1208505062

JURUSAN FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS UDAYANA

2016

ii

ii

Lembar Pengesahan

UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI MINYAK ATSIRI DAUN SIRIH

HIJAU (Piper betle L.) DARI DAERAH DENGAN VARIASI

KETINGGIAN TEMPAT TUMBUH DI BALI TERHADAP FUNGI

Candida albicans ATCC 10231 DENGAN MENGGUNAKAN

METODE DIFUSI DISK

Skripsi

Skripsi ini diajukan sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S. Farm) di

Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana

Oleh

Ni Luh Putu Putri Ardiyanti

NIM. 1208505062

Menyetujui:

Pembimbing I Pembimbing II

Ni Luh Putu Vidya Paramita, S. Farm., M.Sc., Apt. A. A. Gede Rai Yadnya Putra, S.Farm.,M.Si., Apt.

NIP. 198401032008122004 NIP.

Mengesahkan:

Ketua Jurusan Farmasi

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt.

NIP. 196804201994021001

iii

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan ke hadapan Tuhan Yang Maha Esa karena atas

berkat dan rahmat-Nya, penulis dapat menyelesaikan Tugas Akhir I yang berjudul

”Uji Aktivitas Antifungi Minyak Atsiri Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) dari

daerah dengan variasi ketinggian tempat tumbuh di Bali terhadap Fungi

Candida albicans ATCC 10231 dengan Menggunakan Metode Difusi Disk”.

Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si. selaku Dekan Fakultas Matematika

dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udaya

2. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua

Jurusan di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam Universitas Udayana.

3. Ni Luh Putu Vidya Paramita, S. Farm., M.Sc., Apt. selaku dosen

pembimbing I yang telah membimbing penulis dalam penyusunan

Skripsi ini.

4. A. A. Gede Rai Yadnya Putra, S.Farm.,M.Si., Apt. selaku dosen

pembimbing II yang telah membimbing penulis dalam penyusunan

Skripsi ini.

5. Ni Putu Linda Laksmiani, S. Farm., M.Sc., Apt., Eka Indra Setyawan, S.

Farm., Apt., Made Ary Sarasmita, S. Farm., M. Farm.Klin., Apt. selaku

tim penguji Skripsi. Terima kasih atas saran dan bimbingannya.

iv

iv

6. Seluruh dosen beserta staf pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana yang telah

memberikan dukungan, semangat, dan fasilitasnya.

7. Orang tua penulis, I Made Budi Arta selaku ayah dan Ni Wayan Sri

Yudiani S.H. selaku ibu, serta adik Ni Made Dwika Ardiyanti.

8. Serta seluruh keluarga besar yang telah memberi dukungan, doa, dan

motivasi.

9. I Gusti Ngurah Widiangga Prihantara selaku teman terdekat penulis.

Terimakasih atas dukungan, saran serta motivasi yang telah diberikan

kepada penulis.

10. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman tim

penelitian Sirih, Pebri Utami, Putri Dwijayanti, Cahyani Pratiwi, Dewi,

Sulys Wintari, Suastini, Budningrum, Inggrid, Harlina yang telah

memberikan dukungan dan bantuannya selama penulisan Skripsi ini.

11. Kepada semua pihak yang namanya tidak bisa penulis sebutkan satu per

satu.

Penulis menyadari bahwa Skripsi ini masih jauh dari sempurna, untuk itu

kritik dan saran yang bermanfaat demi kelancaran Skripsi ini sangat penulis

harapkan. Penulis berharap semoga Skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca

dan perkembangan ilmu pengetahuan.

Bukit Jimbaran, Mei 2016

Penulis

v

v

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ........................................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii

KATA PENGANTAR ....................................................................................... iii

DAFTAR ISI ...................................................................................................... v

DAFTAR TABEL ............................................................................................... ix

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... x

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xi

DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH .......................................................... xi

ABSTRAK ..........................................................................................................

ABSTRACT ........................................................................................................ x

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1

1.1. Latar Belakang ............................................................................. 1

1.2. Rumusan Masalah ........................................................................ 4

1.3. Tujuan Penelitian ......................................................................... 5

1.4. Manfaat Penelitian ........................................................................ 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 6

2.1. Tanaman Sirih Hijau ..................................................................... 6

2.1.1. Klasifikasi ................................................................. 6

2.1.2. Deskripsi ................................................................... 6

2.1.3. Kandungan Kimia ..................................................... 7

2.1.4. Bioaktivitas Daun Sirih Hijau terhadap Fungi C.

albicans ..................................................................... 8

2.2. Kandidiasis ..................................................................................... 8

2.3. Candida albicans .......................................................................... 10

2.4. Minyak Atsiri. ............................................................................... 12

2.5. Isolasi Minyak Atsiri .................................................................... 13

2.6. Metode Uji Aktivitas Antifungi ..................................................... 13

BAB III METODE PENELITIAN...................................................................... 15

vi

vi

3.1. Rancangan Penelitian .................................................................... 15

3.2. Lokasi dan Waktu Penelitian ........................................................ 15

3.3. Obyek Penelitian ............................................................................ 16

3.4. Bahan Penelitian............................................................................ 16

3.4.1. Bahan Ekstraksi Minyak Atsiri ....................................... 16

3.4.2. Bahan Uji Antifungi ........................................................ 17

3.5. Alat Penelitian ............................................................................... 17

3.6. Variabel Penelitian ......................................................................... 17

3.6.1. Variabel Bebas ................................................................. 17

3.6.2. Variabel Terikat ............................................................... 18

3.6.3. Variabel Terkendali ......................................................... 18

3.7. Batasan Operasional Penelitian ..................................................... 18

3.8. Prosedur Penelitian......................................................................... 19

3.8.1. Determinasi Tanaman ...................................................... 19

3.8.2. Pengambilan dan Preparasi Sampel ................................. 19

3.8.3. Ekstraksi Minyak Atsiri Daun Sirih Hijau....................... 19

3.8.4. Sterilisasi Alat dan Bahan ................................................ 20

3.8.5. Pembuatan Media ............................................................ 20

3.8.6. Uji Aktivitas Antifungi .................................................... 20

3.9. Analisis Data .................................................................................. 23

3.10.Skema Penelitian ........................................................................... 25

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 28

4.1 Determinasi Tanaman ..................................................................... 28

4.2 Preparasi Sampel ............................................................................. 28

4.3 Ekstraksi Minyak Atsiri Daun Sirih Hijau ...................................... 29

4.4 Uji Aktivitas Antifungi ................................................................... 31

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 36

5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 36

5.2 Saran ............................................................................................... 36

vii

vii

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 37

LAMPIRAN-LAMPIRAN .................................................................................. 41

viii

viii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 3.1 Jadwal Kegiatan. ................................................................................. 15

Tabel 3.2 Sampel Uji, Konsentrasi dan Jenis Fungi yang Digunakan pada Uji

Aktivitas Antifungi.. ........................................................................... 22

Tabel 3.3 Klasifikasi Respon Hambatan ............................................................. 23

ix

ix

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Daun Sirih Hijau.............................................................................. 6

Gambar 3.1 Skema umum ................................................................................... 23

Gambar 3.2 Skema Destilasi Minyak Atsiri ....................................................... 24

Gambar 3.3 Skema Uji Aktivitas Antifungi ........................................................ 25

x

x

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1 Pembuatan Kontrol Positif Flukonazol 1024 µg/mL .................. 41

Lampiran 2 Determinasi Tanaman Sirih Hijau ............................................... 42

xi

xi

DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH

Aerob : Suatu proses biologi yang memerlukan oksigen

(oksigen terlarut).

Anaerob : Suatu proses biologi yang tidak memerlukan

oksigen.

Autoklaf : Pemanas tertutup yang digunakan untuk

mensterilisasi suatu benda menggunakan uap

bersuhu dan bertekanan tinggi (121oC, 15 psi)

selama kurang lebih 15 menit.

ATCC : American Type Culture Collection

C. albicans : Candida albicans

CFU : Colony Forming Unit

Intermediete : Kategori dimana isolat/mikroba dapat dihambat

dengan konsentrasi tertentu secara minimal

KHM : Kadar Hambat Minimum

NCCLS : Nation Comitte for Clinical Laboratory Standar

Resistent :Kategori dimana isolat/mikroba tidak dapat

dihambat oleh konsentrasi yang telah ditentukan

SDA : Saboraund Dextrose Agar

SPSS : Statistical Package for the Social Sciences

Sterilisasi :Proses penghilangan semua jenis organisme hidup,

dalam hal ini adalah mikroorganisme (protozoa,

xii

xii

fungi, bakteri, mycoplasma, virus) yang terdapat

dalam suatu benda.

Streak for single colony: Metode untuk memisahkan mikroorganisme

menjadi koloni tunggal dengan cara

menggoreskan isolat pada media agar

Susceptible :Kategori dimana isolat/mikroba dapat dihambat

dengan konsentrasi tertentu secara maksimal

xiii

xiii

ABSTRAK

Kandidiasis merupakan infeksi karena jamur Candida salah satunya Candida

albicans. Pada umumnya kandidiasis sering terjadi pada daerah beriklim tropis.

Betle oil hasil destilasi daun segar sirih hijau yang berasal dari Bangkok, Thailand

memiliki aktivitas sebagai antifungi terhadap Candida albicans TISTR 5779

dengan KHM sebesar 25 µL/mL. Perbedaan tempat tumbuh daun sirih hijau,

mempengaruhi komponen utama minyak atsiri yang dihasilkan. Sehingga

penelitian ini dilakukan untuk mengetahui perbedaan aktivitas antifungi Candida

albicans ATCC 10231 dari minyak atsiri daun sirih hijau (Piper betle L.), dari

daerah dengan variasi ketinggian tempat tumbuh yang berbeda di Bali.

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental. Pengujian aktivitas

minyak atsiri daun sirih hijau sebagai antifungi terhadap Candida albicans ATCC

10231 dilakukan dengan metode difusi disk dengan konsentrasi larutan uji minyak

atsiri dari masing-masing daerah adalah 100 µL/mL.Aktivitas antifungi ditentukan

berdasarkan diameter zona hambat yang dihasilkan disekitar kertas cakram. Nilai

diameter zona hambat dianalisa secara deskriptif berdasarkan kategori respon

hambat: resistant (≤14 mm), intermediate (15-19 mm), susceptiple (≥20 mm) dan

secara statistik dengan uji ANOVA one way.

Hasil analisis data secara statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan

aktivitas antifungi yang bermakna (P<0,05) dari minyak atsiri daun sirih hijau

yang diperoleh dari daerah dengan ketinggian tempat tumbuh yang berbeda di

Bali terhadap Candida albicans ATCC 10231. Berdasarkan kategori respon

aktivitas agen antifungi, minyak atsiri daun sirih pada dataran rendah memiliki

aktivitas susceptible, sedangkan pada dataran sedang dan dataran tinggi memiliki

aktivitas intermediete. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa

faktor ketinggian tempat tumbuh mempengaruhi aktivitas antifungi yang

dihasilkan.

Kata kunci : Daun sirih hijau, Piper betle L., minyak atsiri, Candida albicans,

Difusi disk

xiv

xiv

ABSTRACT

Candidiasis is a fungal infection due to Candida one of them Candida

albicans. Candidiasis generally occur in tropical climate. Betle oil from distiled

fresh green betel leaf from Bangkok, Thailand has antifungal activity against

Candida albicans TISTR 5779 with a MIC of 25 µL/mL. Differences grown

conditions of green betel leaf , will affect to the main component of essential oil

produced. Therefore, this research was conducted to determine differences in

Candida albicans ATCC 10231 antifungal activity of essential oils of green betel

leaf ( Piper betle L. ), from an area with different heights in Bali.

This study was an experimental research. The activity of essential oils of

green betel leaf as an antifungal against Candida albicans ATCC 10231 test

performed by disk diffusion method, the concentration of the test solution of

essential oils from each area is 100 µL/mL. Antifungal activity is determined by

the diameter of the inhibition zone around the paper disc. The value of diameter of

diameter inhibition zone were analyzed descriptively by category inhibition

response: resistant (≤14 mm), intermediate (15-19 mm), susceptiple (≥20 mm),

and statistical analysis with one-way ANOVA.

The result of statistical analysis showed that there were significant differences

in antifungal activity ( P<0.05 ) of green betel leaf essential oil obtained from an

area with different heights in Bali against Candida albicans ATCC 10231. Based

on the response antifungal agent activity categories, betel leaf essential oil from

area with height 166 asl was susceptible activity, while area with height 668 asl

and area with heigh 1099 asl were intermediete activity. Based on the result can

be concluted different growth heights factor influence of antifungal activity.

Keyword : Green betel leaf, Piper betle L., essential oil, Candida albicans, Difusi

disk

1

1