TRK Meeting 12 SRD
-
Upload
eka-yana-putri-yani -
Category
Documents
-
view
24 -
download
0
description
Transcript of TRK Meeting 12 SRD
-
Kinetika reaksienzimatis
Shinta Rosalia Dewi, M.Sc
-
Enzim : protein yg mengkatalisis prosesbiokimia dalam sel hayati yang spesifikproduksi biomassa atau metabolit, produkpangan, pakan, dll
Reaksi enzimatis :
Sistem homogen atau heterogen
Satu substrat atau lebih
-
Dasar kinetika reaksi enzimatis
Michaelis Mentenlaju awal reaksienzimatis dapat ditentukan berdasarkanfungsi terhadap konsentrasi substrat danparameter yg berpengaruh dalam enzim
Henri pembentukan kompleks enzimsubstrat reversibel selama reaksipembentukan produk dari substrat lajureaksi berbanding lurus dengan konsentrasikompleks
-
Reaksi reversibelk k
kE S ES E P
d[S]v k [E][S] k [ES]
dt
d[ES]v k [E][S] [k k ][ES]
dt
laju pembentukan (kekanan) = laju penguraian (kekiri)
k [E][S] [k k ][ES]
k [E][S] [k k ][ES]
k k[E][S] [ES]
k
1 2
1
1 1
1 1 2
1 1 2
1 1 2
1 2
1
0
k kKm
k
1 2
1
-
T
T
T
T
T
T
max T
max
[E][S] [ES]Km
[E ] [E] [ES]
[E ] [ES] [S] [ES]Km
[E ][S] [ES][S] [ES]Km
[E ][S] [ES] Km [S]
[E ][S][ES]
Km [S]
[E ][S]v k [ES] k
Km [S]
v k [E ]
v [S]v
Km [S]
2 2
2
-
Kinetika reaksi Michaelis-Menten :
maxv [S]vKm [S]
-
Kinetika reaksi homogen : penentuan Km
Persamaan Lineweaver dan Burk
max
max max max
max max
v [S]v
Km [S]
Km [S] Km [S]
v v [S] v [S] v [S]
Km
v v [S] V
1
1 1 1
-
Persamaan Eadie Hofstee
max
max
max
max
max
v [S]v
Km [S]
v Kmv sehingga v =v
Km [S]
[S]
vv = Km v
[S]
vv Km v
[S]
1
1
-
Persamaan Hanes
max
max max
max max
max max
v [S]v
Km [S]
Km(Lineweaver Burk)
v v [S] v
Km[S] [S] [S]
v v [S] v
[S] Km[S]
v v v
1 1 1
1 1 1
1
-
Inhibisi
Kompetitif : inhibitor berkompetisi dengansubstrat untuk berinteraksi dengan sisi aktifenzim
uncompetitive: inhibitor menghambat kerjaenzim di sisi yg berbeda dari interaksisubstrat-enzim terikat pada ES
Non- kompetitif : inhibitor menghambat di sisiberbeda, tidak menghasilkan produkterikat pada E atau ES
-
Inhibisi
Oleh produk produk yang dihasilkan dapatmenghambat kerja enzim kompetitif atautidak kompetitif
Oleh substrat substrat menghambat kerjaenzim (konsentrasi substrat terlalu tinggi) membentuk kompleks tidak kompetitif
-
Inhibisi kompetitif
-
Inhibisi kompetitifk k
k
ki
max
max max
E S ES E P
E I EI
[ET] [ES] [E] [EI]
v [S]v
[I]Km [S]
Ki
Km [I]
v v v Ki [S]
[I]K 'm Km
Ki
1 2
1
1
1 1 11
1
-
Inhibisi uncompetitive
-
Inhibisi uncompetitive
k k i
k
max
E S I ES I ESI
ES E P
[ET] [ES] [E] [ESI]
v[S]
[I]
Kiv
Km[S]
[I]
Ki
1 1
1
1
1
max max
Km [I]
v v [S] v Ki
KmK 'm
[I]
Ki
1 1 11
1
-
Inhibisi non-kompetitif
-
Inhibisi non-kompetitif
k k
k
ki
ki
max
max max
E S ES E P
E I EI
ES I ESI
[ET] [ES] [E] [ESI]
v [S]v
[I]Km [S]
Ki
Km [I]
v v [S] v Ki
1 2
1
1
1
1 1 11
-
Faktor yang mempengaruhi reaksienzimatis
pH perubahan struktur, ionisasi, pengikatanenzim
pH mempengaruhi muatan
Muatan mempengaruhi struktur enzim
Selanjutnya akan mempengaruhi reaksi ES
-
Suhu
k=Ae-E/RT
Pereaksi kimia
-
Penentuan aktivitas enzim
pH Stat pengukuran jumlah asam (H+) yang ditambahkan ke cairan pereaksi volume asam/basa terhadap waktu
Spektrofotometri pengukuran enzimdengan spektrofotometer pada panjanggelombang tertentu
-
Contoh soal
Kinetika enzim glukoamilase ditentukan padasuatu reaktor tertutup pada suhu 40oC berdasarkan glukosa yang terbentuk (mol/L). Bila volume cairan dalam reaktor 500 ml danlarutan enzim yang digunakan 500 L mengandung 4g/L.
-
Bagaimana bentuk kinetika hidrolisis maltosaoleh enzim glukoamilase?
Glukosa sebagai produk juga berfungsi sebagaiinhibitor. Kinetika penghambatannya ditunjukkanpd tabel di bawah. Tentukan model kinetikapenghambatan
Waktu(menit)
Konsentrasi awal maltosa (mM)
50 100 150 200
2 95 110 130 140
5 230 290 320 340
10 440 570 640 670
15 700 860 960 1.000
30 1.400 1.700 1.900 2.000
-
TRK meeting 5.xlsx
Glukosa(mM)
Konsentrasi substrat maltosa (mM)
50 100 150 200
0 5,8 7,2 8 8,4
2,5 5,2 6,9 7.6 8,1
5 4,8 6,4 7,3 7,9
10 4,1 5,8 6,7 7,4