BAHAN DAN METODE Bahan tanaman dan isolasi minyak atsiri Tunas S. aromaticum dibeli di pasar lokal "Agoenyiv" Maret 2008 di pinggiran Kota Lom Togo. Spesimen tersebut diidentifikasi oleh Prof Akpagana, "Departement de Botanique, Facult des Ilmu "di "Universit de Lome" (Togo), di mana spesimen itu Disimpan di Herbarium tersebut. Sampel kering (50g) dari tanaman S. Aromaticum di ekstraksi oleh hydrodistillation. Proses tersebut berlangsung selama 2 jam dalam Clevenger-jenis kaca aparat 10. Hasilnya mengandung minyak atsiri (esensial) mentah dan disimpan dalam botol kedap udara serta gelap dengan tutup karet, ditutupi dengan aluminium foil untuk melindungi isi dari cahaya dan disimpan di bawah pendinginan pada 4 C sampai digunakan tanpa sebelum pemurnian. Analisis minyak esensial Minyak esensial yang diperoleh dianalisis dengan gas kromatografi (GC) dan gas kromatografi (GC) dan gas kromatografi-mass spektrometri (GC-MS). Kromatografi gas.Analisis kromatografi gas dilakukan dengan tipe GC 3300 dilengkapi dengan detektor FID. Sebuah apolar kolom kapiler DB-5 (30 m x 0,25 mm i.d.; ketebalan film 0,25 pM) dan pada kutub Supelcowax kolom 10 dengan karakteristik yang sama seperti disebutkan di atas. Kondisi operasi kolom DB-5 adalah sebagai berikut: pada 50 C (5 menit), dari 50 C sampai 250C di tingkat 2C /menit dan Supelcowax kolom 10, pada 50 C (5 menit), dari 50 C sampai 250C pada 2C /menit. Injektor dan suhu detektor yang masing-masing 250 C dan 300 C serta gas pembawa adalah helium dengan laju alir 1,50 ml /menit. Sampel (0,2 ml) disuntikkan secara manual. Kromatografi gas-spektrometri massa. Analisis GC-MS dilakukan pada Hewlett Packard 5890 SERIES II chromatograph, ditambah dengan mass spektrometer dari Hewlett Packard 5971. Kondisi alat SERIES beroperasi ialah beroperasi pada EI

pada 70 eV. Jenis kolom kapiler adalah DB5-MS (30 m x 0,25 mm i.d.; ketebalan film 0,25 pM). Jumlah sampel disuntikkan dan GC-MS parameter adalah sama seperti di atas. Identifikasi komponen Komponen sampel minyak diidentifikasi oleh waktu retensi retensinya, relatif terhadap C5-C18 n-alkana, komputer indeks sesuai dengan Willey 275.L 11 perpustakaan dan dengan perbandingan spektrum massa mereka dengan sampel otentik atau dengan data sudah tersedia dalam literatur sebesar 1,22. Persentase komposisi diidentifikasi dandihidung persen relatif. Dalam tes in vitro antimikroba Bakteri strain digunakan untuk percobaan yang tercantum dalam Tabel II. Produk tersebut disediakan oleh Institut Pasteur koleksi de Paris(CIP), dengan Profesor Guggenheim dari Institut Zahnrzliches von Zrich (Swiss) dan "Pusat Hospitalier Universitaire de Besanon ". Strain bakteri tumbuh secara rutin setiap dua minggu dalam cawan Petri diameter 6 cm yang berisi media kultur, maka diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam dalam kondisi anaerob. (Actynomyces sp dan Streptococcus sp) disimpan dalam lemari es pada suhu 4 C. Media kultur bervariasi sesuai dengan strain bakteri: Man Rogosa sharp (MRS) untuk Lactobacillus dan Columbia Blood untuk Actynomyces sp dan Streptococcus sp. Sebelum menggunakan bakteri, bakteri yang resown selama 24 jam pada pemeliharaan yang sama dengan media kultur untuk diperoleh strain muda dalam pertumbuhan penuh. Aktivitas antibakteri minyak itu dinilai sesuai dengan metode dilusi padat Agar 18. Strain bakteri yang dibudidayakan di media agar Man Rogosa sharp (MRS) untuk Lactobacillus dan Columbia Blood Agar untuk Actynomyces sp di dalam cawan petri berdiameter 9 cm. Sampel minyak dan komponen murni dari komersial tersebar sebagai suatu emulsi dalam agar Man Rogosa sharp (MRS) atau Columbia Blood Agar menggunakan Tween 80 dilarutkan dalam larutan etanol 95% pada volume yang tepat untuk menghasilkan akhir konsentrasi sampel dalam kisaran 10 uL / L untuk 500 ml /L. Proporsi Tween 80 adalah 1% (v /v) untuk menghindari pengaruh terhadap dari Puncak kromatogram GC tanpa faktor koreksi

pertumbuhan bakteri. Larutan Tween 80 etanolik 95% dan etanol 95% adalah digunakan sebagai kontrol negatif setelah pendinginan dan pemadatan, ke dalam cawan petri secara otomatis diinokulasi dengan suspensi bakteri 105 CFU /mL). Cawan Petri diinkubasi pada suhu 37 C selama 48 jam di bawah anaerob kondisi. Kegiatan antibakteri dievaluasi oleh penentuan hambat minimal konsentrasi dan konsentrasi bakteri minimum. Penghambatan konsentrasi minimum (MIC) ditentukan sebagai yang konsentrasi terendah bahan aktif yang mengakibatkan penghambatan pertumbuhan mikroorganisme dan Minimum konsentrasi bakterisida (MBCs) adalah konsentrasi terendah dari uji bahan aktif yang tidak membolehkan terlihat

pertumbuhan mikroorganisme setelah subkultur. Semua tes dilakukan 3 kali ulangan.