TA Asam Sitrat (Revisi) Hasil Dan Pembahasan (Repaired)
-
Upload
yuji-aditya -
Category
Documents
-
view
151 -
download
0
description
Transcript of TA Asam Sitrat (Revisi) Hasil Dan Pembahasan (Repaired)
DAFTAR ISI
DAFTAR TABEL................................................................................................................3
DAFTAR GAMBAR...........................................................................................................4
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................................5
BAB I PENDAHULUAN....................................................................................................6
1.1 Latar belakang......................................................................................................6
1.2 Rumusan Masalah................................................................................................8
1. 3 Tujuan Penelitian.................................................................................................8
1.3.2 Tujuan Khusus.............................................................................................8
1.4 Manfaat................................................................................................................8
1.4.1 Manfaat Teoritis...........................................................................................8
1.4.2 Manfaat Praktis............................................................................................8
BAB II TINJAUAN PUSTAKA..........................................................................................9
2.1 Pembentukan Urin................................................................................................9
2.2 Glomerulus Filtrartion Rate (GFR)....................................................................11
2.3 Kontrol Fisiologis GFR......................................................................................11
2.3.1 GFR menurun yang dipengaruhi oleh saraf simpatis.................................12
2.3.2 Kontrol GFR secara hormonal...................................................................12
2.4 Reabsorpsi dan Sekresi......................................................................................12
2.4.1 Reabsorpsi..................................................................................................12
2.4.2 Sekresi........................................................................................................13
2.5 Kalsium..............................................................................................................13
2.5.1 Metabolisme dan Ekskresi Kalsium...........................................................13
2.6 Batu Saluran Kemih (Urolithiasis).....................................................................16
2.6.1 Etiologi.......................................................................................................17
2.6.2 Patofisiologi...............................................................................................17
2.6.3 Batu Kalsium..............................................................................................18
2.7 Asam Sitrat.........................................................................................................19
2.7.1 Kimia..........................................................................................................19
2.7.2 Kadar Normal Sitrat...................................................................................20
2.7.3 Mekanisme kerja........................................................................................21
BAB III KERANGKA KONSPETUAL DAN HIPOTESIS.............................................24
1
4.1 Kerangka Konseptual.........................................................................................24
4.2 Hipotesis.............................................................................................................25
BAB IV METODE PENELITIAN....................................................................................26
4.1 Fokus Penelitian.................................................................................................26
4.2 Bahan Yang Diteliti...........................................................................................26
4.3 Waktu dan Tempat Penelitian............................................................................26
4.4 Variabel dan Definisi Operasional.....................................................................26
4.5 Populasi dan Besar Sampel................................................................................27
4.6 Alur Penelitian...................................................................................................29
4.7 Peralatan dan Bahan Penelitian..........................................................................30
4.8 Rancangan Penelitian.........................................................................................30
4.9 Teknik Pengumpulan Data.................................................................................30
4.10 Teknik Analisis Data..........................................................................................31
4.11 Jadwal Kegiatan.................................................Error! Bookmark not defined.
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................................32
LAMPIRAN.......................................................................................................................35
2
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 .......................................................................................................................... 10
Tabel 2.3.2 ....................................................................................................................... 12
Tabel 2.5.1 ....................................................................................................................... 16
3
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.5.1a ………………………………………………………………….. 14
Gambar 2.5.1b ………………………………………………………………...... 15
Gambar 2.7.1 …………………………………………………………………… 20
4
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 …………………………………………………………………………… 32
5
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang
Dewasa ini kasus batu saluran kemih (urolithiasis) menjadi masalah yang
cukup besar di dunia, mengingat pola hidup masyarakat yang semakin modern
karena faktor pekerjaan, makanan dan minuman yang di konsumsi masyarakat
sehari-hari. Batu saluran kemih sebenarnya sudah di kenal sejak 4800 tahun
sebelum masehi pada mumi di Mesir. Penyakit ini terdapat di seluruh dunia, tak
terkecuali Indonesia yang termasuk dalam stone belt [Purnomo, 2003]. Biasanya
di negara-negara maju (USA, Inggris, German) yang lebih sering terjadi adalah
batu saluran kemih bagian atas dan kebalikannya lebih sering terjadi di negara
yang berkembang (Indonesia, Thailand, India). Etiologi dari penyakit ini
bermacam-macam mulai dari gangguan metabolik, sampai idiopatik [Purnomo,
2003]. Jenis batu saluran kemih ini bermacam-macam, ada yang terdiri dari
kalsium, oksalat, struvit, asam urat, dan batu jenis lainnya (sistin, xanthine,
triamteren, dan silikat) [Stoller, 2008] dan kasus batu kalsium merupakan kasus
yang paling sering ditemui yaitu sekitar 70-80% [Purnomo, 2003].
Teori terjadinya batu saluran kemih sendiri masih belum sempurna, tetapi
para ahli menemukan bahwa pembentukan batu saluran kemih membutuhkan
supersaturated urin. Urin yang tersupersaturasi (superasturated urin) sangat
tergantung pada pH urin, kekuatan ikatan ion, konsentrasi dan kerumitan zat-zat
yang terlarut [Stoller, 2008]. Pada awalnya inti batu (nukleasi) yang terbentuk
akan mengadakan agregasi dan menarik kristal-kristal di sekitar untuk membentuk
inti batu yang lebih besar, namun agregat kristal ini masih sangat rapuh untuk
dapat membuntu saluran kemih. Oleh karena itu, agregat kristal yang sudah
terbentuk ini akan menempel pada epitel saluran kemih sehingga bisa
mengagregasi kristal-kristal yang lebih besar dan cukup untuk membuntu saluran
kemih [Purnomo, 2003].
Tubuh sendiri sudah memiliki banyak inhibitor untuk terjadinya batu
saluran kemih dengan bekerja sebagai penghambat kristalisasi, agregasi kristal,
6
maupun retensi kristal. Senyawa-senyawa itu adalah Tamm-Horsfall Protein
(THP), nefrokalsin, osteopontin dan Glikosaminoglikan (GAG). Selain itu, sudah
banyak tindakan preventif yang dilakukan untuk menghindari terjadinya batu
saluran kemih diantaranya asupan makanan yang dibatasi, penggunaan diuretic,
penggunaan allopurinol dan membuat urin menjadi basa [Finkielstein Goldfarb,
2006]. Ada juga penggunaan ion Mg+ yang akan berikatan dengan oksalat
sehingga membentuk ikatan magnesium oksalat dan menghindari terjadinya
ikatan dengan kalsium dan ada pula yang menyebutkan bahwa sitrat dapat
berikatan dengan Ca+ kemudian membentuk kalsium sitrat yang melibatkan
kalsium lepas yang keluar melalui urin akan turun secara signifikan [Purnomo,
2003]. Berbagai jenis tindakan prevensi ini sudah dapat dikatakan cukup efektif
terutama dengan cara membatasi asupan makanan sesuai dengan batu saluran
kemih pasca operasi [Stoller, 2008].
Dari penelitian lain menyebutkan bahwa asam sitrat ini tidak hanya
berpengaruh pada batu saluran kemih jenis kalsium saja, tetapi juga berpengaruh
terhadap batu asam urat [Pak Sakhaee, Successful Management of Uric Acid
Nephrolithiasis with Potassium Citrate , 1986]. Hal ini diawali dari penelitian
sebelumnya yang menunjukkan perubahan yang bermakna pada penggunaan
jangka panjang potassium sitrat sebagai tindakan preventif dan pengobatan dari
batu saluran kemih jenis kalsium yang menurunkan rasio pembentukan batu
sekitar 1,1 ± 0,4 pada pasien per tahun [Barcello Wuhl, 1993].
7
1.2 Rumusan Masalah
Apakah ada pengaruh dari penggunaan Asam Sitrat terhadap perubahan
kadar kalsium total pada urin?
1. 3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Menjelaskan pengaruh asam sitrat terhadap pembentukan batu saluran
kemih (Urolithiasis)
1.3.2 Tujuan Khusus
1. Menganalisis perubahan kalsium dalam urin pasca pemberian asam
sitrat
1.4 Manfaat1.4.1 Manfaat Teoritis
Sebagai informasi ilmiah tentang hubungan antara pemberian asam sitrat
dengan tindakan prevensi batu saluran kemih (urolithiasis)
1.4.2 Manfaat Praktis
Membuktikan efek penggunaan asam sitrat terhadap tindakan prevensi
batu saluran kemih (urolihiasis)
8
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Pembentukan Urin
Ginjal memiliki berbagai macam mekanisme dalam membentuk urin baik
yang pekat maupun yang encer, bila terdapat cairan yang berlebih serta
konsentrasi cairan ekstrasel yang menurun maka ginjal akan mengekskresikan
urin dengan konsentrasi sebesar 50 mOsm/L. Sedangkan jika cairan di dalam
tubuh kurang dan konsentrasi cairan ekstrasel meningkat maka ginjal akan
mengekskresikan urin dengan konsentrasi sebesar 1200 sampai 1400 mOsm/L.
Dalam mekanisme ini Hormon Anti Diuretik (ADH) atau yang kita sebut juga
vasopressin memegang sistem umpan balik yang kuat untuk mengatur kondisi
cairan plasma serta konsentrasi natrium, ADH ini mempengaruhi ekskresi urin di
ginjal tetapi hal ini tidak bergantung pada kecepatan ekskresi zat yang terlarut.
Kemampuan ginjal untuk memekatkan cairan secara maksimal menunjukkan
bahwa ginjal harus mengeluarkan urin dalam jumlah banyak untuk membuang
hasil metabolisme tubuh, di analogikan pada orang yang memiliki berat sekitar 70
kg harus mengeluarkan urin sekitar 600 mOsm dan bila kemampuan maksimal
ginjal untuk memekatkan urin adalah 1200 mOsm, maka urin yang diekskresikan
dapat dihitung sebagai berikut:
600 mOsm/ L1200 mOsm/ L
=¿0,5L/hari
Kehilangan volume urin ini juga ikut berperan pada dehidrasi, kehilangan cairan
melalui kulit, saluran pencernaan, dan saluran pernafasan jika tidak ada air yang
dapat diminum [Guyton, 2006].
Urin dihasilkan oleh 3 proses di ginjal yaitu filtrasi glomerulus reabsorpsi
zat dari tubulus renal ke dalam darah, dan sekresi zat dari darah ke tubulus renal
yang dapat dituliskan secara matematis [Guyton, 2006].
Laju Filtrasi – Laju Reabsorpsi+Laju Sekresi=Kecepatan EkskresiUrin
9
Zat Berat Molekul Kemampuan Filtrasi
Air 18 1,0
Natrium 23 1,0
Glukosa 180 1,0
Insulin 5.500 1,0
Mioglobin 17.000 0,75
Albumin 69.000 0,005
Tabel 2.1. Kemampuan bahan-bahan yang di filtrasi di ginjal [Guyton, 2006].
Urin dibentuk dengan dimulainya filtrasi cairan dalam jumlah yang besar dari
aliran darah glomerulus ke kapsula bowman. Kebanyakan cairan plasma yang
bebas protein secara bebas di filtrasi sehingga konsentrasi antara filtrat glomerulus
dan kapsula bowman kurang lebih sama, oleh karena itu jumlah cairan yang di
filtrasi sama dengan jumlah laju ekskresinya. saat cairan yang di filtrasi melewati
bagian tubulus maka cairan ini akan mengalami perubahan yang diakibatkan dari
reabsorpsi air dan zat terlarut spesifik kembali ke dalam darah. Hasil buangan
tertentu seperti kreatinin, diperlakukan oleh ginjal tanpa direabsorpsi, sehingga
pada dasarnya mengakibatkan ekskresi semua bahan yang difiltrasi [Guyton,
2006].
Reabsorbsi pada tubulus sebenarnya lebih penting dari sekresi di tubulus pada
pembentukan urin, tetapi pada sekresi sangat berperan penting dalam mengatur
ion kalium dan hidrogen serta zat-zat lainnya yang diekskresikan. Zat-zat yang
harus dibersihkan terutama urea, kreatinin, garam-garam asam urat serta asam urat
hanya direabsorbsi sedikit dan lebih banyak di ekskresikan pada urin, sebaliknya
ion-ion seperti natrium, klorida dan bikarbonat di reabsorbsi dalam jumlah yang
besar [Guyton, 2006].
Sudah diketahui bahwa pori-pori membran glomerulus adalah sebesar 8
nanometer (80 angstrom) dan jika ada molekul dengan besar sekitar 6 nanometer
seperti albumin akan lebih mudah masuk, tetapi hal ini tidak terpengaruh oleh
pori-pori saja melainkan juga terpengaruh oleh muatan negatif dan elektrostatik
yang dibentuk oleh proteoglikan pada dinding kapiler glomerulus, sehingga
10
molekul dengan besar yang sama akan lebih sulit masuk jika bermuatan negatif
[Sherwood, 2001]
2.2 Glomerulus Filtrartion Rate (GFR)
Rasio filtrasi pada glomerulus adalah suatu tes untuk mengetahui kerja
ginjal dengan menghitung jumlah darah yang melewati glomerulus [David C.
Dugdale, 2011]. Hal ini sangatlah dipengaruhi oleh daya hidrostatik dan osmotik
koloid pada glomerulus dan koefisien filtrasi glomerulus yang bisa di
matematiskan sebagai berikut:
GFR=K1 ×Tekanan Filtrasi Akhir
Tekanan filtrasi akhir adalah daya osmotik koloid dan hidrostatik yang
mendorong atau melawan filtrasi yang terjadi di glomerulus. Daya ini meliputi (1)
tekanan hidrostatik dalam kapiler glomerulus(mendorong filtrasi); (2) tekanan
hidrostatik dalam kapsula bowman (melawan filtrasi); (3) tekanan osmotik koloid
protein plasma di dalam kapiler glomerulus (melawan filtrasi); dan (4) tekanan
osmotik koloid protein plasma di kapsula bowman (mendorong filtrasi) [Guyton,
2006].
Pada keadaan normal tekanan hidrostatik di kapsula bowman adalah sekitar
18mmHg jika terjadi kenaikan tekanan ini akan menurunkan GFR dan jika
tekanan ini turun maka akan meningkatkan GFR. Dalam keadaan patologis
misalnya terdapat batu saluran kemih dapat meningkatkan tekanan hidrostatik
pada kapsula bowman ini, sehingga akan menurunkan GFR secara drastis dan bisa
merusak ginjal kecuali obstruksi tersebut dapat dihilangkan [Guyton, 2006].
2.3 Kontrol Fisiologis GFR
Hal yang paling signifikan mempengaruhi GFR adalah tekanan osmotik
dan tekanan hidrostatik, tetapi kedua hal ini dikaitkan terhadap beberapa faktor
lain, yaitu: sistem saraf simpatis, hormon dan zat vasoaktif yang dilepas ginjal dan
bekerja secara lokal (autakoid) dan kontrol umpan balik lainnya [Guyton, 2006].
11
2.3.1 GFR menurun yang dipengaruhi oleh saraf simpatis
Secara umum diketahui bahwa pembuluh darah ginjal kaya akan
persarafan simpatis di mana jika sekiranya terjadi gangguan akut dalam waktu
beberapa menit biasanya yang bertanggung jawab dalam penurunan GFR adalah
sistem saraf simpatis ini yang secara langsung akan mengkonstriksi arteriol di
ginjal [Guyton, 2006].
2.3.2 Kontrol GFR secara hormonal
Hormon dan Autakoid Pengaruh pada GFR
Norepinefrin Menurun
Epinefrin Menurun
Endothelin Menurun
Angiotensin II Mencegah Penurunan
NO Endothelial Meningkat
Prostaglandin Meningkat
Tabel 2.2. Hormon yang mempengaruhi filtrasi glomerulus [Guyton, 2006].
Hormon memegang peranan penting dalam berbagai aktivitas di ginjal,
terutama terhadap perubahan GFR. Beberapa hormon dapat menyebabkan GFR
meningkat maupun menurun tergantung dari hormon yang mempengaruhi dan
hormon yang mempengaruhi GFR tersebut terdiri dari berbagai macam hormon
yang di sajikan dalam tabel 2.2.
2.4 Reabsorpsi dan Sekresi
Setelah melalui proses filtrasi di glomerulus maka seluruh filtrat yang siap
dikeluarkan dalam urin akan melalu proses selanjutnya yaitu reabsorpsi dan
sekresi [Cappucio Eastwood, 2000].
2.4.1 Reabsorpsi
Reabsorpsi merupakan sebuah proses yang bisa aktif maupun pasif,
sebagai contoh air yang dapat melalui jalur trans seluler, kemudian secara
12
absorpsi akan dikembalikan ke dalam darah dengan cara ultrafiltrasi yang
diperantarai oleh tekanan hidrostatik dan tekanan osmotik koloid [Guyton, 2006].
2.4.2 Sekresi
Beberapa zat disekresi secara transpor aktif sekunder ke dalam tubulus
sebagai contoh sekresi aktif hidrogen dimana bersamaan dgn reabsorpsi natrium
di tubulus proksimal (counter-transport Natrium Hydrogen) [Guyton, 2006].
2.5 Kalsium
Kalsium merupakan sebuah elemen kimia yang disimbolkan dengan Ca2+
yang selalu dijaga homeostasisnya dalam tubuh dan memiliki andil besar dalam
berbagai macam proses fisiologi di tubuh, yang meliputi kontraksi otot,
pembekuan darah, dan lain-lain [Guyton, 2006].
2.5.1 Metabolisme dan Ekskresi Kalsium
Kadarkalsium ekstrasel di dalam tubuh diatur sangat tepat sehingga jarang
sekali terjadi peningkatan maupun penurunan yang secara ekstrim yang melebihi
nilai normalnya yaitu sekitar 9,4 mg/dl, dimana jika terjadi peningkatan kalsium
(hiperkalsemia) dapat menyebabkan depresi progresif pada sistem saraf pusat dan
jika terjadi penurunan kalsium maka akan menyebabkan sistem saraf menjadi
lebih mudah dirangsang [Guyton, 2006].
Kadar kalsium di ekstrasel yang diukur sekitar 0,1 % sedangkan 1 %
terdapat di intra sel, sisanya disimpan dalam tulang yang merupakan reservoir
terbesar untuk kalsium. Di dalam tubuh kalsium terbagi menjadi 3 bentuk yaitu
(a) kalsium yang telah bergabung dengan protein plasma dan bentuk ini tidak
dapat berdifusi melalui membran kapiler, (b) kalsium bergabung dengan anionik
plasma dan dapat melewati membran kapiler, (c) didapat melalui membran kapiler
dan dapat terionisasi [Guyton, 2006].
13
Kalsium (9%)dengan anionKalsiumKalsiumTerionisasiterikat50%(1,2 mmol/L)Protein 41%
Gambar 2.5. gambar ini menggambarkan distribusi kalsium terionisasi, menjadi
kalsium yang terionisasi, kalsium yang terikat protein dan yang tidak dapat
berdifusi dalam plasma darah [Guyton, 2006].
Ion kalsium di plasma dan cairan interstisial sekitar 1,2
mmol/L(2,4mEq/L) dan kadar ini hanyalah separuh dari kadar yang ada dari
keseluruhan konsentrasi kalsium dalam tubuh. Absorpsi kalsium terjadi di usus
dan di ekskresikan melalui feses, normalnya kalsium susah untuk di absorpsi oleh
usus karena berupa ion divalen sehingga membutuhkan vitamin D untuk
membantu absorpsinya di usus [Jackman Kibel, 1999]
14
Gambar 2.2. metabolisme dan ekskresi kalsium di ginjal [Guyton, 2006].
Tetapi tidak semua kalsium yang masuk dalam tubuh akan diekskresikan
melalui feses saja tetapi juga melalui urin, dimana sekitar 10 % dari kalsium yang
di absorpsi akan keluar dalam bentuk kalsium yang terionisasi atau yang
bergabung dengan anion akan difiltrasi oleh glomerulus (59%) [Guyton, 2006].
Dalam keadaan normal, ditubulus ginjal akan mereabsorbsi hampir 99%
kalsium yang terfiltrasi dan kalsium yang akan ikut keluar bersama urin sekitar
100 mg setiap harinya. Sembilan puluh persen dari kalsium yang difiltrasi oleh
glomerulus akan direabsorpsi secara maksimal di tubulus proksimal, ansa henle
dan sebagian awal dari tubulus distal, kemudian terjadi reabsorpsi yang lebih
selektif lagi di bagian akhir tubulus distal dan duktus kolektikus sekitar 10 %
tergantung dari konsentrasi kalsium di dalam darah. Reabsorpsi kalsium sangat
dipengaruhi oleh adanya hormon paratiroid dan benar-benar diatur sesuai dengan
kebutuhan tubuh sesaat [Sherwood, 2001].
Reabsobsi kalsium terjadi bersamaan dengan air dan natrium di tubulus
proksimal, dan jika terjadi peningkatan volume intrasel dan peningkatan tekanan
arteri maka akan terjadi penurunan reabsorpsi kalsium bersamaan dengan
15
menurunnya reabsorpsi air dan natrium. Hal ini akan meningkatkan ekskresi dari
kalsium di urin, dan begitu juga sebaliknya jika terjadi penurunan tekanan arteri
dan volume intra sel maka akan menurunkan ekskresi kalsium di ginjal [Guyton,
2006]. Selain itu hal yang mempengaruhi adalah fosfat plasma yang akan
mempengaruhi hormon paratiroid untuk meningkatkan maupun menurunkan
reabsorpsi kalsium.
Tabel 2.3. Hal-hal yang mempengaruhi peningkatan danpenurunan ekskresi
kalsium pada urin [Guyton, 2006].
2.6 Batu Saluran Kemih (Urolithiasis)
Batu saluran kemih merupakan salah satu dari 3 penyakit yang sering
menyerang saluran kemih selain Infeksi Saluran Kemih dan kondisi patologi pada
prostat [Stoller, 2008]. Batu saluran kemih ini sudah menyerang sejak zaman
kerajaan mesir sekitar tahun 4800 SM, karena ditemukannya spesimen batu
saluran kemih pada salah satu mumi [Purnomo, 2003].
2.6.1 Etiologi
Etiologi dari batu saluran kemih dapat dibagi 2 yaitu dari faktor intrinsik
dan ekstrinsik yang dapat dibagi lagi menjadi [Purnomo, 2003]:
1. Faktor Intinsik:
16
Peningkatan Ekskresi Kalsium Penurunan Ekskresi Kalsium
Hormon paratiroid Menurun Hormon Paratiroid Meningkat
Cairan ekstrasel meningkat Cairan ekstrasel menurun
Tekanan darah meningkat Takanan darah menurun
Fosfat plasma menurun Fosfat plasma meningkat
Alkalosis metabolik Asidosis metabolik
Vitamin D3
a. Herediter
b. Umur
c. Jenis kelamin
2. Faktor Ekstrinsik
a. Geografi
b. Iklim dan temperatur
c. Diet
d. Asupan air
e. Pekerjaan
2.6.2 Patofisiologi
Sebenarnya mengacu pada etiologi dari batu saluran kemih hal ini
mengacu pada supersaturated urin dimana jika konsentrasi ion meningkat, maka
aktifitas produk mereka akan meningkat sampai di satu titik yang diketahui
sebagai solubility product (Ksp). Jika konsentrasi dari ion ini melebihi dari Ksp
maka akan dapat menginisiasi pembentukan batu saluran kemih dengan semakin
terkonsentrasi nya urin dan mencapai Kfp(formation product). Di titik ini
supersaturation sangatlah tidak stabil sehingga dapat terjadi nukleasi
homogeneous secara spontan [Stoller, 2008].
Setelah terjadi nukleasi ini maka batu tidak begitu saja langsung terbentuk
karena inti dari batu ini sangatlah rapuh dan belum cukup untuk menyumbat
saluran kemih [Purnomo, 2003]. Pada keadaan ini, faktor lain pun mulai bekerja,
yaitu sodium berikatan dengan oksalat dan mengurangi bentuknya dalam ion
bebas, begitu juga ikatan sulfat dengan kalsium. Beberapa faktor inhibitor yang
ada seperti magnesium, sitrat, pirofosfat dapat mengurangi hal ini terjadi [Stoller,
2008].
2.6.3 Batu Kalsium
Batu kalsium merupakan batu yang paling banyak ditemukan(80-85%)
pada penderita batu saluran kemih. Biasanya batu kalsium ini berupa ikatan
kalsium oksalat, kalsium fosfat, maupun campuran dari keduanya. Hal ini terjadi
karena peningkatan kalsium dalam urin, peningkatan asam urat dalam urin,
17
peningkatan oksalat dalam urin atau penurunan dari sitrat di dalam urin [Stoller,
2008].
Terdapat 6 mekanisme yang dapat mempengaruhi terjadinya batu kalsium,
yaitu [Stoller, 2008] [Purnomo, 2003]:
1. Hiperkalsiuri nefrolithiasis et causa absorpsi
Normalnya intake kalsium harian manusia sekitar 900-1000 mg/hari dan
sekitar 150-200 mg diekskresikan melalui urin sedangkan sisanya diekskresikan
melalui feses. Jika terjadi peningkatan absorpsi kalsium di jejunum akan
mengakibatkan peningkatan kalsium yang nantinya akan difiltrasi di glomerulus,
sehingga menyebabkan tersupresinya hormon paratiroid yang akan mengganggu
reabsorpsi kalsium di tubulus.
2. Hiperkalsiuri nefrolithiasis et causa resorptif
Sekitar setengah dari pasien hiperparatiroidisme ditemukan adanya
urolithiasis, hal ini dikarenakan hormon paratiroid mempengaruhi kaskade
peningkatan fosfor plasma dan diikuti dengan peningkatan fosfor di urin, serta
dengan peningkatan kalsium plasma dan penurunan kalsium di dalam urin.
Demikian juga kerusakan ginjal terutama karena hiperkalsemia yang akan
menggaggu kemampuan ginjal untuk mengasamkan urin
3. Hiperkalsiuri nefrolithiasis et causa renal induced
Hal ini dikarenakan adanya faktor intrinsik pada ginjal yaitu defek pada
tubulus dimana terdapat gangguan reabsorpsi kalsium pada tubulus, sehingga
meningkatkan hormon paratiroid, yang memobilisasi kalsium tulang dan
peningkatan absorpsi kalsium di ilium.
4. Hiperoksaluri nefrolithiasis
Jika ekskresi oksalat urin meningkat hingga 45 g/hari maka akan
meningkatkan terjadinya batu kalsium, keadaan tersebut sering terjadi pada pasien
yang mengalami gangguan usus maupun terlalu banyak mengkonsumsi oksalat.
5. Hiperurikosuria nefrolithiasis
Jika ekskresi asam urat di dalam urin meningkat hingga melebihi 850
mg/hari, maka asam urat ini akan bertindak sebagai nukleus dalam pembentukan
batu kalsium oksalat. Hal ini disebabkan karena banyak mengkonsumsi makanan
yang mengandung purin.
18
6. Hipositraturia kalsium nefrolithiasis
Terjadi jika ada penyakit asidosis tubuli ginjal, sindrom malabsorpsi, atau
penggunaan diuretik jenis thiazide dalam jangka waktu yang lama.
2.7 Asam Sitrat
Sitrat diketahui sebagai bahan yang dipelajari untuk mengobati dan
mencegah terjadinya batu kalsium [Marshall L. Stoller, 2007]. Penggunaan asam
sitrat pertama kali dilakukan oleh Sabatini pada tahun 1930, selanjutnya pada
tahun 1981 Butz dan Dulce melakukan penelitan lagi dengan mengganti basisnya
menjadi kombinasi potasium sitrat dengan sodium sitrat yang jelas menurunkan
kadar kalsium dalam urin dan meningkatkan kadar sitrat dalam urin.
2.7.1 Kimia
Asam sitrat merupakan asam trikarboksilat yang terdapat pada tumbuhan
citrus (C. Limon) dan dapat terionisasi sempurna pada pH 6.5 di suhu 37 0C,
normalnya sitrat terabsorpsi sempurna di dalam usus, dalam konsentrasi plasma
0,05-0,3 mM. Jika kita mengasumsikan GFR sekitar 125 mL/menit, maka sitrat
akan terfiltrasi sekitar 6,25 – 37,5 μmol/menit [Finkielstein Goldfarb, 2006].
19
Gambar 2.3. Kondisi sitrat di dalam tubuh. A. Dalam kondisi normal B.
Asidosis, C. Alkalosis. [Marshall L. Stoller, 2007]
2.7.2 Kadar Normal Sitrat
Kadar sitrat di dalam tubuh selalu bervariasi setiap harinya dan kadar
normalnya cukup sulit untuk didefinisikan. Pak telah mendefinisikan sitrat yang
dikeluarkan melalui urin oleh orang yang mengalami asidosis (hipositraturia)
yaitu sekitar 320 mg/hari [Marshall L. Stoller, 2007] sehingga bisa disimpulkan
20
pada orang normal kadar sitrat urinnya di atas 320 mg/hari. Menurut penelitian
Parks dan Coe menemukan bahwa kadar sitrat urin normal pada wanita sekitar
729±47 mg/hari dan pada pria sekitar 547±31 mg/hari.
2.7.3 Mekanisme kerja
Sitrat menghambat proses kalkulogenesis. Salah satu caranya adalah
dengan mengikat kalsium bebas di dalam urin, selanjutnya akan menurunkan
kadar kalsium oksalat dan kalsium fosfat [Murahashi, Takasaki, Nagata, 1979].
Garam kalsium yang terbentuk akan segera hancur jika konsentrasi dari garam
urin ini di bawah dari saturasi urin [CY, 1979].
Sitrat menurunkan kemungkinan pembentukan batu kalsium oksalat secara
spontan [MJ, RJ, CY, 1987]. Melalui mekanisme ini, pembentukan inti batu bisa
di inhibisi. Tetapi, jika garam kalsium fosfat yang terpresipitasi karena suasana
basa yang berlebihan di urin, maka batu kalsium dapat terbentuk. Agregasi
kalsium fosfat dan kalsium oksalat dapat digagalkan jika ada sitrat dalam kondisi
normal [Tiselius Fornander, 1993]. Sitrat mengurangi pembentukan kristal
kalsium oksalat sekitar 33% dalam kondisi metastable secara in vitro [Murahashi,
Takasaki, Nagata, 1979]. Dan juga telah di ujikan pada urin dari salah seorang
pasien yang terkena batu kalsium [Grases F G. C., 1989] [Grases F G. C., 1988]
[Grases F G. J., 1989]. Efek ini tergantung dari keasaman urin sendiri yang
dibawa dari konsumsi suplemen pottasium sitrat. Sitrat menginhibisi melalui
berbagai langkah dalam pembentukan batu saluran kemih terutama dalam hal
pembentukan inti (nukleasi), agregasi dan pembentukan kristal.
Dalam penelitiannya, Barcello menggunakan pottasium sitrat sebagai
tindakan prevensi pada pasien dengan batu kalsium disertai dengan hipositraturi.
Hal ini dilakukan pada 57 pasien dengan batu kalsium yg tingkat keparahannya
sedang atau rendah (<342mg/24 jam) dengan konsentrasi sitrat yang
dirandomisasi. Pada penelitian ini, 16 orang mundur karena memiliki masalah
dengan sistem pencernaannya, sedangkan pada pasien lainnya diberikan
potassium sitrat tablet (30-60 meq/hari) selama 3 tahun. Setelah 3 tahun
pemberian, terjadi peningkatan sitrat pada urin dari 1,9 ± 0,5 mmol/hari (359 ± 95
mg/hari) menjadi 2,8 – 3,5 mmol/hari (529 – 661 mg/hari). Sedangkan rasio
pembentukan batu turun drastis dari 1,2 ± 0,6 menjadi 0,1 ± 0,2 pada setiap pasien
21
setelah pemberian potassium sitrat. Pada 13 pasien tidak terjadi pembentukan batu
selama masa percobaan, beberapa pasien yang telah mengalami batu kalsium tidak
menunjukkan adanya pertumbuhan batu selama masa percobaan ini. Sedangkan
pada pasien yang mengkonsumsi plasebo tidak mengalami perubahan rasio
pembentukan batu (1,1 ± 0,4 – 1,1 ± 0,3) dan 20% dari pasien yang diberi plasebo
ini mengalami remisi pembentukan batu selama masa percobaan [Barcello Wuhl,
1993].
Dengan demikian potensi larutan asam sitrat dapat untuk selanjutnya
dievaluasi kembali dengan berbagai pertimbangan seperti pemaksimalan
pemberian larutan asam sitrat yang berupa suplemen (pottasium sitrat) ataupun
dosis yang lebih tinggi, dan penghitungan kadar kalsium ion pada urin sehingga
dapat dipastikan ada tidaknya penurunan kadar kalsium bebas pada urin [Barcello
Wuhl, 1993].
Potassium sitrat juga berguna dalam pengobatan batu asam urat, hal ini
dikemukakan pertama kali oleh Pak pada tahun 1986. 18 pasien dengan batu asam
urat telah dilakukan pengobatan selama 2,8 tahun. Hal ini menyebabkan tingginya
sitrat urin 503 ± 225 mg/hari menjadi 852 – 998 mg/hari. Rasio pembentukan batu
pada pasien tersebut juga mengalami penurunan dari 1,20 ± 1,86 batu/tahun
menjadi 0,01 ± 0,06 batu per tahun (p <0,001). Penelitian ini menggambarkan
pula bahwa suplementasi potassium sitrat juga berpengaruh pada prevensi dan
pengobatan batu jenis lain [Pak Sakhaee, Successful Management of Uric Acid
Nephrolithiasis with Potassium Citrate , 1986].
Penggunaan potassium sitrat ini makin tampak berpengaruh pada
penghancuran fragmen batu pasca ESWL. Salah satu penelitan menyatakan bahwa
pengobatan spesifik (allopurinol atau potassium sitrat) diberikan pada 80 pasien
pasca ESWL dan hal ini menurunkan rasio pembentukan batu hingga 91% pada
pasien bebas fragmen batu serta 81% pada pasien dengan residual batu pasca
ESWL [Fine Pak, 1995].
Pada penelitian lain juga menyatakan pada pasca ESWL dilakukan
pengobatan yang sama dan menunjukkan presentase yang cukup tinggi. Tujuh
puluh lima persen (75%) dari kelompok perlakuan tidak ditemukan batu residual
22
pasca ESWL dibandingkan dengan kelompok kontrol yang hanya 32%. Sitrat
menurunkan rasio pembentukan batu dan reagregasi fragmen batu. Residual
fragmen pasca ESWL dapat tumbuh kembali pada pasien yang diberikan
potassium sitrat dengan presentase 16%, hal ini berbanding terbalik dengan pasien
yang tidak menerima pengobatan asam sitrat dengan presentase 55% terjadinya
pertumbuhan kembali batu saluran kemih [Cicerello Merlo, 1994].
Selain penggunaan sediaan obat, banyak penelitian menggunakan jeruk,
anggur, nanas dan lemon sebagai tindakan preventif. Seltzer menyatakan bahwa
konsumsi lemon per oral sebanyak 2 L/hari dengan peningkatan sitrat urin
mencapai 346 mg/hari (p<0,001). Hal ini diikuti pula dengan penurunan kadar
kalsium urin yang kurang signifikan. Pak dan Wabner telah melakukan penelitian
yang sama dengan membandingkan konsumsi jus jeruk sebanyak 1,2 L/hari
dengan penggunaan potassium sitrat. Pada penelitian ini, pasien yang
mengkonsumsi jus jeruk mengalami peningkatan sitrat urin yang sebanding
dengan penggunaan potassium sitrat. Tetapi, pada pasien yang mengkonsumsi jus
jeruk terdapat peningkatan oksalat. Hal ini diperkirakan karena oksalat yang
terkandung dalam jeruk atau asam askorbat yang diubah menjadi oksalat [Wabner
Pak, 1993]. Hasil yang serupa juga ditemukan pada penelitian menggunakan jus
anggur, pada penelitian ini dilakukan pemberian jus jeruk pada 7 orang tanpa ada
riwayat batu saluran kemih. Setelah mengkonsumsi jus anggur, sitrat urin
meningkat dari 18,7 mg/jam menjadi 25,8 mg/jam sedangkan kalsium mengalami
peningkatan dari 3,3 mg/jam menjadi 6,7 mg/jam [Trinchiery, Lizzano,
Bernardini, 2002].
23
BAB III
KERANGKA KONSPETUAL DAN HIPOTESIS
4.1 Kerangka Konseptual
: Perlakuan
: Yang Diteliti
24
Pemberian Asam Sitrat
Ekskresi Kalsium Pada Urin
Kalsium Tetap Kalsium Menurun atau Meningkat
Mempengaruhi Pembentukan BSK
Asupan Nutrisi
4.2 Hipotesis
H0 :
Tidak terdapat pengaruh dari penggunaan Asam Sitrat terhadap perubahan
kadar Kalsium total pada urin?
H1 :
Terdapat pengaruh dari penggunaan Asam Sitrat terhadap perubahan kadar
Kalsium total pada urin?
25
BAB IV
METODE PENELITIAN
4.1 Fokus Penelitian
Fokus penelitian ini adalah mengidentifikasi potensi Asam Sitrat sebagai
obat penghambat pembentukan batu saluran kemih.
4.2 Bahan Yang Diteliti
Bahan yang diteliti adalah Asam Sitrat yang diberikan melalui minuman
pada tikus galur wistar (Rattus Novergicus).
4.3 Waktu dan Tempat Penelitian
a. Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan pada bulan Februari 2013 - Maret 2013
b. Tempat Penelitian
Penelitian akan dilakukan di Laboraturium Farmakologi Fakultas
Kedokteran Mulawarman dan Laboratorium Patologi Klinik Rumah
Sakit Umum Abdul Wahab Sjahranie Samarinda
4.4 Variabel dan Definisi Operasional
a. Variabel
i. Terikat
1. Kadar kalsium dalam urin
ii. Kontrol
1. Makanan
2. Minuman
3. Asam sitrat yang diberikan
iii. Bebas
1. Konsentrasi asam sitrat
b. Definisi Operasional
i. Konsentrasi asam sitrat adalah larutan yang diperoleh dari
pelarutan asam sitrat dengan aquadest (mg/mL)
26
ii. Kadar kalsium dalam urin adalah kadar kalsium yang
didapatkan dari urin post konsumsi dan non konsumsi asam
sitrat
iii. Kadar kalsium urin normal pada tikus adalah 7,5 – 9 mg/dl
iv. Untuk mengetahui kadar kalsium urin akan dilakukan
dengan menggunakan potassium oksalat yang tersaturasi
atau menggunakan metode yang lebih modern dengan
Calcium AF FS untuk mengetahui kadar kalsium pada urin
tampung 24 jam.
4.5 Populasi dan Besar Sampela. Populasi
Populasi yang di gunakan adalah tikus galur wistar (Rattus
Novergicus). Metode pengambilan sampel menggunakan teknik
simple random sampling. Kemudian sampel dibagi menjadi 2
kelompok yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan.
Sampel yang digunakan memiliki kriteria sebagai berikut:
Umur : 10-20 minggu
Berat Badan : 200-300 gr
b. Besar Sampel : (Steel and Torrie, 1991)
n =(Z ¿¿α /2+Zβ)σ2
σ2 ¿
α = 0,05
Zα /2 = 1,96
Zβ = 0,84
Pada penelitian eksperimental σ 2 / σ 2 = 1
27
Sehingga n = (1,96 + 0,84)2 = 7,84. Besar Sampel dibulatkan
menjadi 8
c. Kriteria Sampel Urin Rattus Novergicus
i. Kriteria inklusi : Urin yang diambil dari Rattus
Novergicus yang sehat, ditandai dengan rambut yang
bersih, bergerak aktif dengan berat badan 200-300 g
ii. Kriteria eksklusi : Tikus yang tidak dapat
memproduksi urin.
28
4.6 Alur Penelitian
29
Sampel
N = 16
Random Alokasi
Kelompok Kontrol
N = 8
Kelompok Perlakuan
N = 8
Urin tampung 24 jam kelompok
kontrol
Urin tampung 24 jam kelompok
perlakuan
Pengukuran kadar kalsium
urin
Pemberian Larutan Asam
Sitrat
4.7 Peralatan dan Bahan Penelitiana. Peralatan
Alat-alat yang digunakan antara lain kandang hewan coba khusus yang
dibuat sendiri agar dapat menampung kencing dari hewan coba dan spruit
untuk memberikan minum asam sitrat kepada hewan coba.
b. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan adalah larutan asam sitrat yang sudah
diencerkan dengan H2O, Tikus Galur Wistar (Rattus Novergicus) yang
digunakan sebagai hewan coba, dan reagen potassium oksalat tersaturasi
untuk mengetahui kadar kalsium pada saat penghitungan setelah penelitian
ini
4.8 Rancangan PenelitianRancangan penelitian ini adalah Test Only With Control Group dan yang
akan dilakukan adalah dengan memasukkan data hasil penelitian yaitu
berupa penilaian kadar kalsium dalam urin.
a. Indikator Kuantitatif
Untuk mengetahui perubahan kadar kalsium pada urin, sebagai
indikator kuantitatif digunakan nilai kadar kalsium dalam urin
setelah penelitian.
4.9 Teknik Pengumpulan Dataa. Data dan Sumber Data Penelitian
Data dalam penelitian ini didapatkan dari hasil analisis data dari
penelitian yang bersumber dari pencatatan hasil kadar kalsium dalam
urin yang dilakukan pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan.
b. Pelaksanaan Penelitian
i. Pembuatan larutan asam sitrat
Pembuatan larutan asam sitrat dilakukan dengan menggunakan
pelarut aquadest, caranya dengan mencampurkan asam sitrat bubuk
dimasukkan ke dalam bejana kemudian dilarutkan dengan
menggunakan aquadest
30
c. Perisapan Hewan Uji
Hewan uji yang sudah disiapkan (kondisi nutrisi & lingkungannya
yang sudah homogen) akan diminumkan larutan asam sitrat dengan
menggunakan spruit setiap 8 jam sekali
d. Jalannya Penelitian
Hewan uji tikus galur wistar (Rattus Novergicus) yang telah disiapkan
akan dibagi menjadi 2 kelompok yaitu kelompok kontrol (tidak diberi
perlakuan), dan kelompok uji, dimana kelompok kontrol dan kelompok
uji masing-masing terdiri atas 8 hewan uji. Jalannya penelitian akan
dimulai dengan aklimasi hewan uji selama 1 minggu. Setelah proses
aklimasi, penelitian dimulai dengan memberikan larutan asam sitrat
pada kelompok perlakuan dan aquadest pada kelompok kontrol
masing-masing 1 ml pada setiap sampel. Pemberian perlakuan akan
dilakukan selama 1 hari dengan 3 kali pengulangan pada tiap sampel.
4.10 Teknik Analisis DataData hasil penelitian dianalisis dengan menggunakan SigmaPlot
Ver. 12.0 untuk kemudian dilakukan pengujian T-test untuk mengetahui
efektivitas asam sitrat terhadap perubahan kadar kalsium dalam urin.
31
DAFTAR PUSTAKA
Arnida, S. (2008). Relationship of Diuretica Activity and AntiUrolothiatic Bulbus Bawang Dayak Fraction (Eleutherine Palmifolia (L) Merr) on White Male Mice. 3.
Barcello, P., & Wuhl, O. (1993). Randomized Double Blind Study of Potassium Citrate in Idiopathic Hypocitraturic Calcium Nephrolithiasis. 150.
Borghi, L., & Schiani, T. (2002). Comparison of Two Diets for Prevention of Reccurent Stones in Idiopathic Hypercalciuria. N Eng J Med .
Cappucio, F., & Eastwood, J. (2000). Unraveling The Links Between Calcium Excretion, Salt Intake, Hypertension, Kidney Stones, and Bone Metabolism. J Nephrol .
Chen, Y., & DeVivo, M. (2000). Current Trend and Risk Factor for Kidney Stones in Persons with Spinal Cord Injury: a Longitudinal Study. Spinal Cord .
Chen, Y., & Roseman, J. (2000). Geographic Variation and Environmental Risk Factor for The Incidence of Initial Kidney Stones in Patients with Spinal Cord Injury. J Urol .
Cicerello, E., & Merlo, F. (1994). Effect of Alkaline Citrate Therapy on Clearance of Residual Fragments on Reccurent Stone Formation Following Shock Wafe Litothripsy. J Urol .
Citric Acid Material Safety Data Sheet. (2006).
Curhan, G., & Willett, W. (2001). Twenty Four Hour Urine Chemistries and The Risk of Kidney Stones Among Woman and Man. Kid Int .
CY, P. (1979). Hypocitraturic Calcium Nephrolithiasisin: Urolithiasis: A Medical and Surgical Reference. In P. C. Resnick MI, Urolithiasis: A Medical and Surgical Reference. Philadelphia: WB. Saunders.
Danpure, C. (2000). Genetic Disorder and Urolithiasis. Urol Clin N .
David C. Dugdale, I. M. (2011, 9 19). Retrieved 11 03, 2012, from MedlinePlus: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/007305.htm
Fine, J., & Pak, C. (1995). Effect of Medical Management and Residual Fragments on Reccurent Stone Formation Following Shock Wafe Lithotripsy. J Urol .
32
Finkielstein, V. A., & Goldfarb, D. S. (2006). Strategies for preventing calcium oxalate stones. 174.
Grases F, G. C. (1989). Inhibitory Effect of Pryrophospate, Citrate, Magnesium, and Chondrotin Sulfate in Calcium Oxalate Urolithiasis. Br J Urol.
Grases F, G. C. (1988). Variations in the Activity of Urinary Inhibitors in Calcium Oxalate Urolithiasis. BR J Urol.
Grases F, G. J. (1989). Urolithiasis Inhibitors and Calculus Nucleation. Urol Res.
Guyton, A. C. (2006). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC Medical Publisher.
Hall, W., & Pettinger, M. (2001). Risks Factor for Kidney Stones in Older Women in The Southern United States. Am J Med Sci .
Jackman, S., & Kibel, A. (1999). Familial Calcium Stone Disease: Taq 1 Polymorphism and The Vitamin D Receptor. J Endourology .
Jenkins, A., & Dousa, T. (1985). Transport of Citrate Across Renal Brush Border Membrane: Effects of Dietary Acid and Alkali Loading. Am J Physiol .
Loughin, K., & Hawtrey, C. (2003). The Father of Intravenous Urography. Urology .
Marshall L. Stoller, M. V. (2007). Urinary Stone Disease. New Jersey: Humana Press.
Menon, M., & Resnick. (2002). Urinary Lithiasis: Etiology, Diagnosis, and Medical Management. In Campbell's Urology (p. 3242). Philadelphia: WB Saunders.
MJ, N., RJ, S., & CY, P. (1987). Inhibition By Citrate of Spontaneous of Calcim Oxalate In Vitro.
Modlin, M. (1980). A History of Urinary Stones. S Afr Med J .
Murahashi, I., Takasaki, E., & Nagata, M. (1979). A Four Year Retrospective Study of Urolithiasis (Vol. 6). Tokyo: Dokkyo J Med Sci.
Pak, C., & Sakhaee, K. (1986). Successful Management of Uric Acid Nephrolithiasis with Potassium Citrate . Kidney Int.
Pak, C., Oh, M., & Baker, S. (1991). Effect of Meal on Physiological and Physicochemical Action of Potassium Citrate. J Urol .
Purnomo, B. (2003). Dasar-dasar Urologi. Jakarta: Sagung Seto.
33
Reed, B., & Heller, H. (2002). Identification of a Gene with Base Subtitutions Associated with The Absorptive Hypercalciuria Phenotype and Low Spinal Bone Density. J Clin Endocrinol Metab .
Seltzer, M., & Lower, M. (1996). Dietary Manipulation with Lemonade to Treat Hypocitraturic Calcium Nephrolithiasis. J Urol .
Sherwood, L. (2001). Fisiologi Manusia. Jakarta: EGC.
Soygur, T., & Akbay, A. (2002). Effect of Potassium Citrate Therapy on Stone Reccurence and Residual Fragment After Shock Wafe Lithotripsy in Lower Caliceal Calcium Oxalate Urolithiasis. J Endourol .
Stoller, M. L. (2008). Urinary Stone Disease. In Smith's General Urology. New York: McGraw-Hill Companies, Inc.
Tekin, A., & Atsu, N. (2002). Oral Potassium Citrate Treatment for Idiopathic Hypocitraturia in Children with Calcium Urolithiasis. J Urol .
Tiselius, H., & Fornander, A. (1993). The Effect of Citrate and Urine on Calcium Oxalate Crystal Aggregation. Urol Res.
Trinchiery, A., Lizzano, R., & Bernardini, P. (2002). Effect of Acute Load of Grapefruit Juice on Urinary Excretion of Citrate and Urinary Risk Factors for Renal Stone Formation. Dig Liver Dis .
Wabner, C., & Pak, C. (1993). Effect of Orange Juice Consumption on Urinary Stone Risk Factor. J Urol , 149.
日本薬局方(Japanese Pharmacopoeia). (2012). Tokyo: 独立行政法人 医薬品医療機器総合機構 (Pharmaceuticals and Medical Devices Agency).
34
LAMPIRAN
Lampiran 1
Pembuatan Larutan Asam Sitrat
Diketahui bahwa dosis lethal asam sitrat pada penggunaan di tikus coba
adalah 3000 mg/kg, maka akan diberikan dosis sebesar 1500 mg/kg yang nanti
akan dilarutkan dalam aquadest
Larutan Asam Sitrat (mgmL)= massa(mg)
volume (mL)
Sehingga dapat diperhitungkan:
Larutan Asam Sitrat (mgmL
) = 1000 mg
40 mL
= 25mgmL
Larutan ini akan diberikan selama 3 kali selama penelitian berjalan dengan
menggunakan sonde lambung untuk memastikan tikus mengkonsumsi larutan
yang diberikan.
35
Lampiran 2
36