Sofi Siti Shofiyah10506063

Pembimbing: Achmad S. Noer, Ph.D

Seminar Tugas Akhir

Pendahuluan Metodologi Penelitian Hasil Penelitian Pembahasan Kesimpulan 27 Mei 2010*Seminar Tugas Akhir / 24

Seminar Tugas Akhir

Seminar Tugas Akhir

*27 Mei 2010Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: KesimpulanLaju Mutasi mtDNA 10 x lebih cepat dibandingkan DNA inti mitochondrial disease

Fokus penelitian merupakan gen 12S rRNA

Seminar Tugas Akhir

Seminar Tugas Akhir

Diabetes mellitus adalah penyakit yang ditandai dengan peningkatan kadar gula darah yang terus menerus.

Penderita diabetes di Indonesia mencapai angka 8,4 juta di tahun 2004 dan akan meningkat pada 2030 menjadi sebanyak 21,3 juta penderita (WHO,2004)

27 Mei 2010* /24Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: KesimpulanSeminar Tugas Akhir

Jenis Diabetes Mellitus Tipe I Insulin-dependent diabetes

Kerusakan sel -pankreasTipe II Non-insulin-dependent diabetes

Maternally Inherited Diabetes (Mutasi A3243G)

Seminar Tugas Akhir

Heteroplasmi adalah campuran antara mtDNA termutasi dan normal pada satu sel27 Mei 2010*/24Seminar Tugas AkhirPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010Seminar Tugas Akhir*/24Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan1234

Seminar Tugas Akhir

Sampel urin penderita diabetes merupakan sampel yang tidak positif PASA (PCR Alelle Specific Alignment) A3243 G Penelitian sebelumnya (Maksum, 2009) menduga adanya heteroplasmi pada sampel di daerah gen 12s rRNA27 Mei 2010*/24Seminar Tugas AkhirT1420GT1349GPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010Seminar Tugas Akhir*

Seminar Tugas Akhir

*/24Amplifikasi dengan PCR ElektroforesisAnalisis in silicoScreening dan Isolasi PlamidSequencingDirect SequencingKloning genPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

27 Mei 2010*/242491Seminar Tugas AkhirPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Primer Urutan 5 3Posisi Ukuran Afor (PCR) CCTCCCACTCCCATACTACTAA458-47922 nukleotida Arev (PCR)GGGGTAAGATTTGCCGAGT2491-247319 nukelotida2f (Seqeuencing)GAACACTACGAGCCACAGC1138-115620 nukelotida

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010*/24Seminar Tugas AkhirPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010Seminar Tugas Akhir*

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010*/24Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: KesimpulanSeminar Tugas Akhir

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010*/24Seminar Tugas AkhirPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010*/24Marker 7 9 14Ukuran tidak dapat ditentukan dengan jelas Seminar Tugas AkhirPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010*/24 Marker 79 141kb DNA ladder 20.000 pb

5.000 pb

1.500 pb

500 pb

75 kb

Sampel berukuran 5 kbSeminar Tugas AkhirPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010*/24Seminar Tugas AkhirPendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

27 Mei 2010*/24 Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: KesimpulanPenelitian Sebelumnya Perlakuan 1 (PCR) Perlakuan 2 (Kloning gen)(Maksum, 2009)Seminar Tugas AkhirPerlakuan 1Perlakuan 2Maksum, 2009Tidak adanya mutasi pada perlakukan 1 dan 2 pada posisi 1349 dan 1420 dibandingkan dengan penelitian sebelumnya

Seminar Tugas Akhir

Ditemukan mutasi yang ada pada setiap sampel, yaitu A1438G

Terdapat mutasi lain pada sampel hasil kloning 7 , yaitu G1485A27 Mei 2010*/24Seminar Tugas Akhir Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

Mutasi A1438G (Ada pada setiap sampel) dilaporkan di database Mitomap sebagai mutasi yang berkaitan dengan diabetes mellitus (Tawata, 1998)

Mutasi G1485A belum dilaporkan ke Mitomap 27 Mei 2010*/24Seminar Tugas Akhir Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

SindromLocusPenyakit AlelRNAHoHeStatusDiabetes Mellitus MTRNR1DM C1310T12S+-Prov Diabetes Mellitus MTRNR1DMA1438G12S+-ProvDiabetes Mellitus MTTL1DM/DMDFA3243GtRNALeu-+Cfrm

Seminar Tugas Akhir

Sampel merupakan penderita diabetes mellitus tanpa penyakit neuropatik yang menyertai sehingga mutasi yang diperoleh diperkirakan berkaitan dengan penyakit diabetes mellitus.

27 Mei 2010*/24Seminar Tugas Akhir Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Mutasi Penelitian SebelumnyaPerlakuan 1(PCR) Perlakuan 2 (Kloning)T1349G--T1420G--A1438GG1485A--

Seminar Tugas Akhir

Sampel bersifat heteroplasmi karena memiliki campuran mtDNA termutasi yang berbeda antara perlakuan 1, perlakuan 2, dan penelitian sebelumnya

Terdapat mutasi A1438G pada sampel dengan perlakuan PCR dan kloning yang dilaporkan berkaitan dengan diabetes mellitus

Terdapat mutasi yang belum dilaporkan, G1485A, pada sampel dengan perlakuan 2 (kloning)27 Mei 2010Seminar Tugas Akhir*/24Pendahuluan :: Metodologi Penelitian :: Hasil :: Pembahasan :: Kesimpulan

Seminar Tugas Akhir

TERIMA KASIH27 Mei 2010*/24Seminar Tugas Akhir

Seminar Tugas Akhir

************************