praktikum metablisme

1
Sebanyak 15 gram daun kangkung segar disiapkan kemudian dipotong sekecil mungkin memakai gunting lalu digerus kedalam mortar dingin yang telah ditembatkan dalam es. Sebanyak 25 mL grinding medium dingin ditambahkan kemudian daun digerus secara merata. Suspensi berwarna hijau disaring kedalam gelas piala dingin menggunakan lapisa kain kasa dan suspensi diperas lalu residu dibuang. Filtrat yang diperoleh dipindahkan kedalam satu tabung sentrifuse dan tabung sentrifuse kedua berisi air sebagai kontrol kemudian ditimbang agar bobot kedua tabung tersebut tidak berbeda sebanyak 100 mg. Kedua tabung tersebut ditempatkan berlamawanan dalam rotor sentrifuse kemudian disentrifugasi selama 5 menit. Kemudian supernatan yang diperoleh ditempatan kedalam tabung sentrifus yang baru lalu disentrifugasi kembali pada kecepatan 12000 rpm selama 10 menit. Pellet ditempatkan kedalam tabung lalu disimpan kedalam es. Sebanyak 15 mL larutan propilen glikol 10 persen ditambahkan kedalam tabung kemudian disuspensikan lalu dimasukan kedalam satu tabung sentrifuse. Suspensi dipindahkan kedalam taubng reaksi dingin dan bungkus dengan kertas perak lalu disimpan kedalam es dalam keadaan gelap. Suspensi diambil sebanyak 2 mL lalu didihkan kedalam penangas selama 10 mnit. 3 buah tabung spektrofotometer yang bersih diberikan label 1 hingga 3 dengan variasi larutan sebagai berikut : seluruh tabung ditambahkan buffer fosfat sebanyak 3.75 mL dan KCl sebanyak 0.5 mL. Tabung 1 dan 2 ditambahkan suspensi kloroplas sebanyak 0.5 mL dan tabung 3 diberikan suspensi kloroplas yang telah didihkan sebanyak 0.5 mL. Lalu ketiga tabung reaksi tersebut direaksikan dengan D.C.I.P 0.75 mL. Setelah penambahan reagen terakhir larutan dikocok dengan segera kemudian awal waktu dicatat. Penemapatan setiap tabung berbeda beda, tabung pertama diletakkan ke dalam beker gelas dibawah nyala lampu. Tabung kedua ditempatkan kedalam lemari gelap dan tabung ketiga ditempatkan disamping spektrofotometer. Absorbansi dibaca pada panjang gelombang 660 nm setelah larutan didiamkan selama 5 menit. Blanko yang digunakan adalah akuades. Pembacaan dilakukan dari tabung pertama hingga ketiga. Pembacaan dilanjutkan hingga absorbansi pada tabung 1 tidak mengalami penurunan kembali.

description

hhjkjhj

Transcript of praktikum metablisme

Page 1: praktikum metablisme

Sebanyak 15 gram daun kangkung segar disiapkan kemudian dipotong sekecil mungkin memakai gunting lalu digerus kedalam mortar dingin yang telah ditembatkan dalam es. Sebanyak 25 mL grinding medium dingin ditambahkan kemudian daun digerus secara merata. Suspensi berwarna hijau disaring kedalam gelas piala dingin menggunakan lapisa kain kasa dan suspensi diperas lalu residu dibuang. Filtrat yang diperoleh dipindahkan kedalam satu tabung sentrifuse dan tabung sentrifuse kedua berisi air sebagai kontrol kemudian ditimbang agar bobot kedua tabung tersebut tidak berbeda sebanyak 100 mg. Kedua tabung tersebut ditempatkan berlamawanan dalam rotor sentrifuse kemudian disentrifugasi selama 5 menit. Kemudian supernatan yang diperoleh ditempatan kedalam tabung sentrifus yang baru lalu disentrifugasi kembali pada kecepatan 12000 rpm selama 10 menit. Pellet ditempatkan kedalam tabung lalu disimpan kedalam es. Sebanyak 15 mL larutan propilen glikol 10 persen ditambahkan kedalam tabung kemudian disuspensikan lalu dimasukan kedalam satu tabung sentrifuse. Suspensi dipindahkan kedalam taubng reaksi dingin dan bungkus dengan kertas perak lalu disimpan kedalam es dalam keadaan gelap. Suspensi diambil sebanyak 2 mL lalu didihkan kedalam penangas selama 10 mnit.

3 buah tabung spektrofotometer yang bersih diberikan label 1 hingga 3 dengan variasi larutan sebagai berikut : seluruh tabung ditambahkan buffer fosfat sebanyak 3.75 mL dan KCl sebanyak 0.5 mL. Tabung 1 dan 2 ditambahkan suspensi kloroplas sebanyak 0.5 mL dan tabung 3 diberikan suspensi kloroplas yang telah didihkan sebanyak 0.5 mL. Lalu ketiga tabung reaksi tersebut direaksikan dengan D.C.I.P 0.75 mL. Setelah penambahan reagen terakhir larutan dikocok dengan segera kemudian awal waktu dicatat. Penemapatan setiap tabung berbeda beda, tabung pertama diletakkan ke dalam beker gelas dibawah nyala lampu. Tabung kedua ditempatkan kedalam lemari gelap dan tabung ketiga ditempatkan disamping spektrofotometer. Absorbansi dibaca pada panjang gelombang 660 nm setelah larutan didiamkan selama 5 menit. Blanko yang digunakan adalah akuades. Pembacaan dilakukan dari tabung pertama hingga ketiga. Pembacaan dilanjutkan hingga absorbansi pada tabung 1 tidak mengalami penurunan kembali.