Pengenceran Liur

Membuat liur dengan pengenceran 100x :

Menampung air liur sebanyak 1 ml

Kemudian menambahkannya dengan aquades sebanyak 99 ml

Menghomogenkan campuran tersebut

Membuat liur dengan pengenceran 200x :

Mengambil 10 ml (dari pengenceran liur 100x)

Kemudian menambahkannya dengan aquades sebanyak 10 ml

Menghomogenkan campuran tersebut

Membuat liur dengan pengenceran 400x :

Mengambil 10 ml (dari pengenceran liur 200x)

Kemudian menambahkannya dengan aquades sebanyak 10 ml

Menghomogenkan campuran tersebut

Membuat liur dengan pengenceran 800x :

Mengambil 10 ml (dari pengenceran liur 400x)

Kemudian menambahkannya dengan aquades sebanyak 10 ml

Menghomogenkan campuran tersebut

Pengaruh Suhu

Tujuan :

Memperlihatkan kecepatan reaksi enzimatik samapai suhu tertentu sebanding dengan

kenaikan suhu. Reaksi enzimatik mempunyai suhu optimum.

Alat :

- Tabung reaksi

- Mikropipet

- Spektrofotometer

- Inkubator

- Pipet tetes

- Stopwatch

- Waterbath

- Beaker glass

- Gelas ukur

Bahan :

- Amilase liur, diencerkan 100 x

- Larutan pati 0,4 mg/ml dan Larutan Iodium

Tugas :

1. Menghitung ∆A/ menit (v) = AB (serapan blangko) – AU (serapan uji)

2. Membuat kurva yang menghubungkan kecepatan reaksi enzimatik

Blangko

Suhu 60°CSuhu 37°C

BlangkoUji

Suhu 100°C

Blangko Blangko BlangkoUji UjiUji Uji

Menambahkan Pati 1 ml pada setiap tabung blangko dan uji dari setiap suhu

Menginkubasi pasangan tabung dari tiap suhu minimal 5 menit

Menambahkan liur dengan pengenceran 100x sebanyak 200 µl hanya pada tabung uji dari setiap suhu

Mencampur baik-baik (pati ke dalam liur), kemudian menginkubasinya selama 1 menit

Menambahkan Larutan Iodium pada setiap tabung blangko dan uji sebanyak 1 ml dari tiap suhu (untuk suhu 60°C dan 100°C, melakukannya di luar pengangas)

Suhu 25°CSuhu 0°C

Menambahkan Aquades pada setiap tabung blangko dan uji sebanyak 8 ml dari tiap suhu

Membaca serapan (A) tiap tabung pada λ=680 nm

Skema Kerja :

Pengaruh pH

Tujuan :

Membuktikan bahwa keasaman (pH) mempengaruhi kecepatan reaksi enzimatk.

Alat :

- Tabung reaksi

- Mikropipet

- Spektrofotometer

- Inkubator

- Pipet tetes

- Stopwatch

- Waterbath

- Beaker glass

- Gelas ukur

Bahan :

- Amilase liur, diencerkan 100 x

- Larutan pati 0,4 mg/ml pada berbagai pH (1, 3, 5, 7, 11)

- Larutan Iodium

Tugas :

1. Menghitung ∆A/ menit (v) = AB (serapan blangko) – AU (serapan uji)

2. Membuat kurva yang menghubungkan kecepatan reaksi enzimatik

Blangko

pH 7pH 5

BlangkoUji

pH 11

Blangko Blangko BlangkoUji UjiUji Uji

Menambah Pati 1 ml berdasarkan pH pada setiap tabung blangko dan uji

Menginkubasi pasangan tabung pada suhu 37°C min. 5 menit

Menambahkan liur dengan pengenceran 100x sebanyak 200 µl hanya pada tabung uji dari setiap suhu

Mencampur baik-baik (pati ke dalam liur), kemudian menginkubasinya selama 1 menit

Menambahkan Larutan Iodium pada setiap tabung blangko dan uji sebanyak 1 ml pada berbagai pH

pH 3pH 1

Menambahkan Aquades pada setiap tabung blangko dan uji sebanyak 8 ml pada berbagai pH

Membaca serapan (A) tiap tabung pada λ=680 nm

Skema Kerja :

Blangko

Pengenceran liur 100x Pengenceran liur 200x Pengenceran liur 400x Pengenceran liur 800x

Blangko Uji BlangkoBlangko UjiUjiUji

Menambahkan Larutan pati sebanyak 1 ml pada setiap tabung blangko dan uji tiap pengenceran liur

Menginkubasi pasangan tabung pada suhu 37°C, minimal 5 menit

Menambahkan liur berdasarkan pengencerannya, hanya pada tabung uji sebanyak 200 µl

Pengaruh Konsentrasi Enzim

Tujuan :

Membuktikan bahwa kecepatan reaksi enzimatik berbanding lurus dengan konsentrasi enzim.

Alat :

- Tabung reaksi

- Mikropipet

- Spektrofotometer

- Inkubator

- Pipet tetes

- Stopwatch

- Waterbath

- Beaker glass

- Gelas ukur

Bahan :

- Liur dengan pengenceran 100x, 200x, 400x, dan 800x

Larutan pati 0,4 mg/ml dan Larutan Iodium

Tugas :

1. Menghitung ∆A/ menit (v) = AB (serapan blangko) – AU (serapan uji)

2. Membuat kurva yang menghubungkan kecepatan reaksi enzimatik

Skema Kerja :