Paket 1: Hematologi · 2021. 7. 5. · 4 -Cara membuat Hapusan Darah (cara Slide): •1 tetes darah...

Paket 1: Hematologi

Hapusan Darah Tepi dr. Fauqa Arinil Aulia, Sp.PK

Sabtu, 8 Mei 2021

Sub-topik

• Instrumentasi di bidang Hematologi

• Pem. Lab. Hemopoiesis dan Anemia

• Pem. Lab. Kelainan Sistem Lekosit dan Trombosit Non-Neoplastik

• Pem. Lab. Disfungsi Endotel, Mikroangiopati dan Makroangiopati (Cardiac Marker)

• Pem. Lab. Kelainan Hemostasis dan Fibrinolisis

• Pem. Lab. Diatesis Hemoragik dan Trombotik

• Pem. Lab. Sindroma Mielo Displastik, Leukemia Mieloblastik Akut dan Kelainan Mieloproliferatif

• Pem. Lab. Kelainan Limfoproliferatif dan Kelainan Sel Plasma

3

Hapusan Darah Tepi

• Dapat dilakukan dalam 2 cara :

1. Dengan Cover-glass .

2. Dengan Gelas Obyek (cara slide) → paling banyak dilakukan .

4

-Cara membuat Hapusan Darah (cara Slide) :

• 1 tetes darah kapiler/darah-EDTA di dekat salah satu ujung tepi gelas obyek .

• Pegang gelas-penggesek (cover-glass atau gelas obyek lain) dgn tepinya membentuk sudut ± 300 dgn gelas obyek dan tetesan darah didalam sudut tsb .

• Geser penggesek kebelakang menyentuh tetesan darah → darah merata sepanjang tepi penggesek .

5

• Gerakkan penggesek dgn cepat kedepan → darah tergesek tipis merata diatas gelas obyek .

• Keringkan hapusan diudara .

• Tebal/tipis hapusan tergantung : - besar tetesan darah - kecepatan menggesek gelas penggesek - sudut antara penggesek dan gelas obyek gerakan pelan & sudut < 300 → tipis . Gerakan cepat & sudut > 300 → tebal .

7

- Sudut penggesekan dgn gelas obyek dan HDT yang ideal dgn counting area nya :

9

• Lekosit tak boleh menggerombol dibagian ekor hapusan → distribusi tdk merata . Biasanya krn gelas obyek kotor/gesekan terlalu pelan .

• Hapusan segera dikeringkan → larutan diluar sel cepat kering (lbh pekat) → air keluar dari dalam sel → krenasi .

10

Macam cat yang digunakan :

• Dapat dipakai beberapa modifikasi cat Romanowsky a.l :

- Wright - Giemsa - May-Grunwald-Giemsa - Jenner - dll

11

- Cat WRIGHT :

• Terdiri dari eosin (asam) dan biru-metilen (dgn pelarut metanol ; bersifat basa)

• Eosin memberi warna merah ; Biru-metilen memberi warna biru .

• pH dipertahankan antara 6.4 – 6.8 dgn menggunakan larutan buffer .

• Lekosit yg lebih menarik eosin (lbh merah) disebut eosinofil , menarik cat basa (lbh biru) disebut basofil, dan menarik asam/basa sama kuat disebut netrofil

12

• Larutan Buffer : yaitu buffer phosphat (pH 6.4) : R/ KH2PO4 6.63 g Na2HPO4 3.20 g Aquadest ad 1000 ml

• Cara pengecatan Wright : - hapusan kering fiksasi dgn melapisinya dgn cat Wright (2 menit) - tambahkan buffer 1-1.5 x vol.cat , campur dgn meniup bbrp kali (± 20 menit) smp timbul warna metalik, lalu cuci dgn air kran dan keringkan .

13

• Catatan : perhatikan – waktu fiksasi, pH, lama pengecatan dan posisi horizontal hapusan selama menuangi cat / buffer .

• Cat GIEMSA : R/ Giemsa 1.0 g Metanol 100 ml panaskan 500C / 15 menit (sesekali dikocok) → saring Larutan Buffer : Buffer air .

14

- Cara pengecatan Giemsa :

• Fiksasi hapusan kering dgn metanol .

• Tuangi hapusan dgn cat Giemsa (stok Giemsa encerkan dgn buffer 4-5x vol.cat)

• Biarkan 20-30 menit

• Cuci dgn buffer-air atau air biasa (hati2)

• Keringkan hapusan (miringkan pada satu sisinya)

1

• Sampel darah yang dapat digunakan untuk pemeriksaan darah tepi adalah:

• A. Darah dengan antikoagulan EDTA

• B. Darah kapiler

• C. Darah dengan antikoagulan sitrat

• D. A dan B benar

• E. A, B, dan C benar

2

• Besar sudut antara object glass dan cover glass saat membuat sediaan hapusan darah tepi adalah:

• A. 25 derajat

• B. 30 derajat

• C. 45 derajat

• D. 60 derajat

• E. 90 derajat

3

• Leukosit yang menyerap cat basa lebih banyak pada pembuatan hapusan darah tepi dengan cat Wright adalah:

• A. Neutrofil

• B. Eosinofil

• C. Basofil

• D. Limfosit

• E. Monosit

18

- Penilaian Hapusan Darah :

1. Pemeriksaan dengan obyektif 10x : - Penilaian hapusan darah : kwalitas hapusan harus baik, cukup tipis, tak boleh ada endapan cat, sel tercat baik, lekosit tidak menggerombol di ekor . - Penaksiran jumlah Lekosit : 20-30 leko/lp ~ leko 5 x 109/l 40-50 leko/lp ~ leko 10 x 109/l - Penaksiran proporsi jenis lekosit - Ada/tidaknya sel-sel abnormal

19

2. Pemeriksaan dgn obyektif 100x dengan minyak imersi :

- Eritrosit – kesan warna, ukuran, dan bentuk eritrosit (warna jingga ~ kandungan Hb dalam eritrosit) Catat bila ada warna/ukuran/bentuk abnormal .

- Lekosit – kesan morfologi dan proporsi jenis lekosit (hitung jenis lekosit)

20

- Trombosit – kesan jumlah & morfologi trombosit : FN-22 : trombo 13-36/lp FN-18 : trombo 10-22/lp juml.normal FN-<18: trombo 4-10/lp Morfologi trombosit bisa kecil, normal, besar dan giant thrombocyte (sebesar eritrosit)

- Sel-sel lain – adanya sel-sel non hemopoitik

21

• Bila pada hapusan darah dijumpai banyak normoblast → koreksi hitung lekosit (krn inti normoblast terhitung sebagai lekosit)

• Cara koreksi : Hitung normoblast dalam 100 lekosit (N)

• Rumus :

100 Juml.Leko koreksi = --------- x Σ leko awal

100 + N

4

• Penilaian preparat hapusan darah tepi pada pembesaran objektif 10 kali adalah:

• A. Kualitas pengecatan

• B. Taksiran jumlah leukosit

• C. Taksiran proporsi jenis leukosit

• D. Ada/tidaknya sel abnormal

• E. Semua jawaban benar

5

• Penilaian eritrosit pada preparat hapusan darah tepi pembesaran objektif 100 kali adalah:

• A. kesan warna

• B. ukuran

• C. bentuk eritrosit

• D. ada/tidaknya morfologi abnormal

• E. semua jawaban benar

6

• Penilaian leukosit pada preparat hapusan darah tepi pembesaran objektif 100 kali adalah:

• A. kesan jumlah

• B. proporsi jenis leukosit

• C. sel hematopoietik muda



7

• Penilaian trombosit pada preparat hapusan darah tepi pembesaran objektif 100 kali adalah:

• A. kesan jumlah

• B. ukuran trombosit

• C. agregat trombosit



8

• Sel yang perlu dilakukan koreksi jumlahnya jika ditemukan banyak normoblas pada hapusan darah tepi adalah:

• A. Eritrosit

• B. Leukosit

• C. Trombosit

• D. Retikulosit

• E. Sel non-hematopoieti lainnya

27

- Morfologi Eritrosit :

• Warna : normal eritrosit berwarna jingga dgn central palor (CP) ± 1/3 grs tengah eritrosit (disebut normokrom) Bila CP≥ ½ grs tengah = hipokrom

• Ukuran Eritrosit : ± seukuran inti limfosit kecil (normositer) Bila < inti limfosit kecil = mikrositer Bila > inti limfosit kecil = makrositer

28

- Bentuk Eritrosit :

• Normal : Bulat , Bikonkaf (bagian tepi lebih tebal daripada bagian tengah) → bagian tengah lebih sedikit Hb → tercat lebih pucat .

• Morfologi abnormal : - Anisositosis : ukuran eri bervariasi - Poikilositosis : bentuk eri bervariasi - Hipokrom - Sferosit : eri berbentuk bola → lebih kecil dan tercat lebih gelap dpd eritrosit normal .

33

- Sferosit = eritrosit yang bundar, tercat lebih gelap dan ukurannya lebih kecil .Seringkali herediter .

34

- Leptosit = Planocyte ; eritrosit dgn CP yang luas (hampir sama dgn Ø eritrosit)

35

- Ovalosit (eliptosit) = bentuk eritrosit yg oval seringkali herediter

36

- Stomatosit = eritrosit dgn CP berbentuk celah karena bentuk eritrosit yg seperti mangkuk .

37

- Sel Target = codocyte ; dibagian tengah CP didapatkan bagian yg tercat gelap .

38

- Sel Krenasi (crenated cell = Echinocyte)

39

- Gambaran Anisositosis = eritrosit dengan ukuran yang bervariasi .

40

- Fragmentosit = schistocyte , yaitu fragmen pecahan eritrosit (pada proses hemolisis)

41

- Acanthocyte = eritrosit dgn taju-taju yang runcing dan tidak beraturan panjangnya

42

- Tear Drop Cells = dacryocyte ; eritrosit berbentuk tetesan air .

43

- Formasi Rouleaux = tumpukan eritrosit seperti tumpukan uang logam (stack , stalk of coins)

45

- Cincin Cabot :

• Inklusi berbentuk benang dgn formasi cincin (angka ‘8’) , ungu kemerahan yang diduga merupakan sisa mikrotubuli yang membentuk spindle pada proses mitosis .

46

- Howell-Jolly body (tanda ►) , adalah sisa inti dan Pappenheimer bodies (tanda →) = granula siderotik yang mengandung besi (tercat dengan pengecatan besi atau = Siderosit)

47

- Basophilic stippling (tanda →)- bintik2 inklusi basofilik hasil agregat dari ribosom , menyolok pada keracunan timah (Lead intoxication)

48

- Heinz bodies : tampak dgn pengecatan supravital (Methyl-violet), partikel presipitat Hb dgn lokasi dekat tepi membran eritrosit , tanda kerusakan oksidatif eritrosit .

50

• Pada evaluasi HDT perubahan morfologi eritrosit harus dicatat, kecuali krenasi (yaitu eritrosit yg mengkerut akibat kesalahan teknis) . Bentuk abnormal harus dinyatakan berat/derajatnya (“beberapa”, “ringan”, “berat” atau dlm positif-1 sampai positif-4) Misalnya : Sferosit – Pos-1(+) : 0- 5 sferosit/lp Pos-2(++) : 6-10 sferosit/lp Pos-3(+++) : 11-20 sferosit/lp Pos-4(++++) : > 20 sferosit/lp

51

• Untuk adanya Howell-Jolly bodies : Pos-1 (+) : 0-1/lp Pos-2 (++) : 1-2/lp Pos-3 (+++) : 3-4/lp Pos-4 (++++) : ≥5/lp

• Untuk Anisositosis, dihitung juml.eritrosit yg bervariasi : Pos-1 (+) : juml.sel 15-20% Pos-2 (++) : juml.sel 20-25% Pos-3 (+++) : juml.sel >50%

9

• Yang benar tentang central pallor eritrosit normal adalah, kecuali:

• A. ± 1/2 diameter eritrosit

• B. ± 1/3 diameter eritrosit

• C. berwarna lebih pucat dari tepi eritrosit

• D. terbentuk dari bentuk bikonkaf eritrosit

• E. menggambarkan konsentrasi Hb pada eritrosit

10

• Yang digunakan untuk memperkirakan ukuran eritrosit normal adalah:

• A. diameter inti neutrofil kecil

• B. diameter inti limfosit kecil

• C. diameter inti basophil kecil

• D. diameter inti eosinophil kecil

• E. diameter inti monosit kecil

11

• Bentuk eritrosit bervariasi dilaporkan sebagai:

• A. anisositosis

• B. poikilositosis

• C. anisopoikilositosis

• D. mikrositer

• E. makrositer

12

• Eritrosit yang berbentuk bulat, lebih kecil dan tercat lebih gelap dari pada eritrosit normal adalah:

• A. ovalosit

• B. akantosit

• C. sferosit

• D. target cell

• E. stomatosit

13

• Bentuk eritrosit yg oval, seringkali ditemukan pada kelainan membran eritrosit herediter adalah:

• A. ovalosit

• B. akantosit

• C. sferosit

• D. target cell

• E. stomatosit

14

• Eritrosit dengan central pallor berbentuk celah karena bentuk eritrosit adalah seperti mangkuk:

• A. ovalosit

• B. akantosit

• C. sferosit

• D. target cell

• E. stomatosit

15

• Eritrosit dengan bagian tengah central pallor didapatkan bagian yang tercat gelap adalah:

• A. ovalosit

• B. akantosit

• C. sferosit

• D. target cell

• E. stomatosit

16

• Ukuran eritrosit bervariasi dilaporkan sebagai:

• A. anisositosis

• B. poikilositosis

• C. anisopoikilositosis

• D. mikrositer

• E. makrositer

17

• Inclusion bodies eritrosit yang dapat ditemukan pada kondisi fisiologis adalah:

• A. Heinz bodies

• B. Parasit malaria

• C. Howell-Jolly body

• D. kromatin RNA

• E. Basophilic stippling

18

• Granula siderositik yang mengandung besi, dapat tercat dengan pengecatan besi adalah:

• A. Heinz bodies



• D. kromatin RNA


19

• Bintik-bintik basofilik hasil agregat dari ribosom, dapat ditemukan pada keracunan timah (lead intoxication) adalah:

• A. Heinz bodies



• D. kromatin RNA


20

• Inclusion bodies eritrosit yang tampak dengan pengecatan supravital (methyl-violet), merupakan partikel presipitat hemoglobin, lokasi dekat tepi membran eritrosit, merupakan tanda kerusakan oksidatif eritrosit, adalah:

• A. Heinz bodies



• D. kromatin RNA


66

- Morfologi Abnormal Lekosit :

• Tanda-2 degenerasi toksik netrofil 1. Granulasi toksik (toxic granulation) granula2 gelap dlm sitoplasma netrofil krn pe↑ aktivitas fosfatase alkali dari granula primer . 2. Vakuolisasi Netrofil (vacuolization) yaitu lubang pada sitoplasma akibat degenerasi krn aktivitas fagositosis . Tanda2 toksik mis pd infeksi berat/sepsis .

67

- Granula Toksik & Vakuola dalam sitoplasma netrofil , biasanya dijumpai pada infeksi bakterial berat / septikemia .

68

• Anomali Pelger-Huet : yaitu kegagalan inti netrofil ber-segmentasi. Inti bersegmen ≤ 2 dgn kromatin inti padat . Kelainan ini herediter , kecuali pada lekemia sering dijumpai Pseudo Pelger-Huet .

• Smudge dan Basket-cell : yaitu hasil disintegrasi inti lekosit yg rusak , sering pada limfosit yg fragil (Lekemia Limfositik)

69

- Anomali Pelger-Huet : kegagalan segmentasi herediter → inti ≤ 2, kromatin padat menggumpal .

70

• Auer Rod : yaitu bentukan batang berwarna merah pada sitoplasma mieloblas atau monoblas.

• Limfosit Atipik : yaitu limfosit dgn inti yg tidak khas (atipik), mirip monosit (monositoid) atau sel plasma (plasmasitoid)

71

- Auer Rod dlm sitoplasma mieloblas pada AML .

72

Auer Rod dlm sitoplasma mieloblas pada AML .

73

- Sel Limfosit Atipik ( inti yg plasmasitoid ) ,biasanya pada infeksi virus .

74

- Sel Limfosit Atipik (inti monositoid)

21

• Urutan maturasi hematopoietik yang benar dari seri granulosit adalah:

• A. Promielosit, metamielosit, mielosit, mieloblas, neutrofil

• B. Promielosit, mieloblas, metamielosit, mielosit, neutrofil

• C. Mieloblas, promielosit, mielosit, metamielosit, neutrofil

• D. Mieloblas, promielosit, metamielosit, mielosit, neutrofil

• E. Mieloblas, metamielosit, promielosit, mielosit, neutrofil

22

• Yang benar tentang granula toksik, kecuali:

• A. tercat gelap pada sitoplasma netrofil

• B. tercat gelap pada sitoplasma limfosit

• C. terjadi karena peningkatan aktivitas fosfatase alkali dari granula primer

• D. terjadi pada infeksi bakteri berat

• E. penanda terjadinya sepsis

23

• Yang benar tentang anomaly pelger-huet, kecuali:

• A. terjadi karena kegagalan inti netrofil bersegmentasi

• B. inti bersegmen ≤ 2

• C. kromatin inti padat

• D. merupakan penanda kelainan herediter

• E. merupakan penanda leukemia

24

• Yang benar tentang auer-rod, kecuali:

• A. berwarna merah

• B. berbentuk batang

• C. ditemukan di sitoplasma sel granulosit

• D. ditemukan di sitoplasma limfosit

• E. ditemukan pada keganasan myeloid akut

25

• Yang benar tentang limfosit atipik, kecuali:

• A. inti plasmasitoid

• B. inti monositoid

• C. penanda infeksi bakteri

• D. penanda infeksi virus

• E. sitoplasma berwarna kebiruan

TERIMA KASIH

Paket 1: Hematologi · 2021. 7. 5. · 4 -Cara membuat Hapusan Darah (cara Slide): •1 tetes darah...

Documents

Transcript of Paket 1: Hematologi · 2021. 7. 5. · 4 -Cara membuat Hapusan Darah (cara Slide): •1 tetes darah...