oksidasi_biologis(1)

download oksidasi_biologis(1)

of 31

Transcript of oksidasi_biologis(1)

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    1/31

    KATA PENGANTAR

    Puji syukur kami panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa karena atas

    berkat dan penyertaan-Nya sehingga kami dapat menyelesaikan tugas laporan

    tentang Metabolisme dan Oksidasi Biologis !ami juga mengu"apkan terima

    kasih kepada semua pihak yang mendukung dalam penyusunan tugas laporan ini

    !ami menyadari tugas laporan ini masih belum sempurna# oleh karena itu

    kritik dan saran yang membangun dari para pemba"a sangat membantu kami

    untuk perbaikan tugas ke depan

    $khir kata kami dari kelompok %-& berharap semoga tugas ini berman'aat

    bagi para pemba"a

    (urabaya# )uni *+,

    Penyusun

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 1

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    2/31

    DAFTAR ISI

    !$T$ PEN.$NT$/,

    0$1T$/ 2(2*

    B$B 2 PEN0$3454$N&

    B$B 22 T4)4$N P/$!T2!4M

    B$B 222 METO0E !E/)$ ,6

    B$B 27 3$(25 P/$!T2!4M,8

    *, 4ji 5aktat dehidrogenase dalam ragi

    ** 4ji ("hardinger

    *& 4ji Oksidase dan Pengaruh 7itamin %

    * 4ji (i'at antioksidan 7itamin % terhadap gugus 'enol

    *9 4ji si'at reduksi :itamin % terhadap reaksi Benedi"t

    B$B 27 PEMB$3$($N **

    !E(2MP45$N*;

    B$B 7 0$1T$/ P4(T$!$*8

    5$MP2/$N *an? sampai kepada manusia# makhluk

    yang susunan tubuhnya sangat kompleks 0i dalam proses ini makhluk hidup

    mendapat# mengubah# dan memakai senya>a kimia dari sekitarnya untuk

    mempertahankan hidupnya

    Metabolisme meliputi proses sintesis dan proses penguraian senya>a atau

    komponen dalam sel hidup Proses sintesis itu disebut anabolisme dan proses

    penguraian disebut katabolisme (emua reaksi metabolisme dikatalis oleh en=im#

    termasuk reaksi yang sederhana seperti penguraian asam karbonat menjadi air dan

    karbondioksida? proses pemasukan dan pengeluaran =at kimia dari dan ke dalam

    sel melalui membran? proses biosintesis protein yang panjang dan rumit? atau pun

    proses penguraian bahan makanan dalam sistem pen"ernaan mulai dari mulut#

    lambung# usus# dan penyerapan hasil penguraian tersebut melalui dinding usus#

    serta penyebarannya ke seluruh bagian tubuh yang memerlukannya

    $nabolisme dibedakan dari katabolisme dalam beberapa hal@ anabolisme

    merupakan proses sintesis molekul ke"il menjadi molekul yang lebih besar#

    sedangkan katabolisme adalah sebaliknya# yaitu proses penguraian molekul besar

    menjadi molekul ke"il? anabolisme adalah proses yang membutuhkan energi#

    sedangkan katabolisme adalah proses yang melepaskan energi? anabolisme

    merupakan reaksi reduksi# sedangkan katabolisme adalah reaksi oksidasi?

    seringkali hasil akhir anabolisme merupakan senya>a pemula untuk katabolisme

    1ungsi katabolisme adalah menyediakan bahan baku untuk sintesis molekul lain

    dan menyediakan energi kimia

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 3

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    4/31

    Antioksidan

    0alam pengertian kimia# senya>a antioksidan adalah senya>a pemberi

    elektron Aelectron donors (e"ara biologis# pengertian antioksidan adalah

    senya>a yang mampu menangkal atau meredam dampak negati' oksidan dalam

    tubuh $ntioksidan bekerja dengan "ara mendonorkan satu elektronnya kepada

    senya>a yang bersi'at oksian sehingga akti:itas senya>a oksidan tersebut bisa

    dihambat

    (e"ara umum# antioksidan dikelompokkan menjadi *# yaitu antioksidan

    en=imatis dan non-en=imatis $ntioksidan en=imatis dan non-en=imatis tersebut

    bekerja sama memerangi akti:itas senya>a oksidan dalam tubuh Terjadinya stres

    oksidati' dapat dihambat oleh kerja en=im-en=im antioksidan dalam tubuh dan

    antioksidan non-en=imatis

    $ntioksidan en=imatis

    $ntioksidan en=imatis merupakan antioksidan endogenus Termasuk di

    dalamnya adalah en=im superoksida dismutase A(O0# katalase# glutation

    peroksidase A.(3-PC# serta glutation reduktase A.(3-/ En=im-en=im

    ini bekerja dengan "ara melindungi jaringan dari kerusakan oksidati' yang

    disebabkan oleh radikal bebas oksigen seperti anion superoksida# radikal

    hidroksil# dan hidrogen peroksida A3*O* ABray D Taylor#

    ,

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    5/31

    *++, (enya>a 'itokimia ini membantu melindungi sel dari kerusakan oksidati'

    yang disebabkan oleh radikal bebas

    Berdasarkan mekanisme kerjanya# antioksidan digolongkan menjadi &

    kelompok# yaitu @

    $ntioksidan primer

    $ntioksidan primer meliputi en=im superoksida dismutase A(O0#

    katalase# dan glutation peroksidase A.(3-PC $ntioksidan primer disebut

    juga antioksidan en=imatis (uatu senya>a dikatakan sebagai antioksidan

    primer# apabila dapat memberikan atom hidrogen se"ara "epat kepada

    senya>a radikal# kemudian radikal antioksidan yang terbentuk segera

    berubah menjadi senya>a yang lebih stabil

    $ntioksidan sekunder

    $ntioksidan sekunder disebut juga antioksidan eksogenus atau non-

    en=imatis Menurut (oe>oto A*++, dan 5ampe A,

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    6/31

    Asal Vitamin dalam Bahan Makanan

    (ebagian besar :itamin dibentuk di dalam tumbuhan dan sebagian ke"il

    saja dibentuk di dalam tubuh he>an dan manusia 3e>an dan manusia sanggup

    mengubah beberapa =at tertentu menjadi :itamin Bahan dasar yang kemudian

    diubah menjadi :itamin tersebut# dinamakan prekursor atau pro:itamin

    7itamin merupakan ikatan kimia organik dan =at kimia organik ini

    disusun di dalam tumbuhan yang berhijau jaun Akhloro'il# dari bahan dasar gas

    karbondioksida A%O* dan air# dengan pertolongan tenaga sinar matahari

    7itamin %

    7itamin % merupakan senya>a yang sangat mudah larut dalam air#

    mempunyai si'at asam dan si'at pereduksi yang kuat (i'at-si'at tersebut terutama

    disebabkan adanya struktur enediol yang terkonjugasi dengan gugus karbonil

    dalam "in"in lakton Bentuk :itamin % yang ada di alam terutama adalah 5-asam

    askorbat 0-asam askorbat jarang terdapat di alam dan hanya memiliki ,+ persen

    akti:itas :itamin % Biasanya 0-asam askorbat ditambah ke dalam bahan pangan

    sebagai antioksidan# bukan sebagai sumber :itamin %

    7itamin % atau yang disebut juga asam askorbat# digolongkan atau

    diklasi'ikasikan ke dalam kelompok senya>a yang disebut /edukton (enya>aH

    senya>a yang termasuk golongan redukton berada dalam sistem oksidasi

    reduksi yang bersi'at re:ersible

    (ebagai antioksidan# :itamin % bekerja sebagai donor elektron# dengan

    "ara memindahkan satu elektron ke senya>a logam %u (elain itu# 7itamin % juga

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 6

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    7/31

    dapat menyumbangkan elektron ke dalam reaksi biokimia intraseluler dan

    ekstraseluler 7itamin % mampu menghilangkan senya>a oksigen reakti' di dalam

    sel netro'il# monosit# protein lensa# dan retina 0i luar sel# :itamin % mampu

    menghilangkan senya>a oksigen reakti'# men"egah terjadinya 505 teroksidasi#

    mentrans'er elektron ke dalam toko'erol teroksidasi# dan mengabsorpsi logam

    dalam saluran pen"ernaan A5e:ine# et al#,

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    8/31

    Tabel ! Kand"n#an Vitamin $ dalam sa%"&'sa%"&an dan

    b"a('b"a(an

    !omoditas 7itamin % AmgI,++ g

    0aun katuk rebus B

    !a"ang panjang rebus J *#8+

    !angkung ,,#&

    %abai hijau +#;6

    Bayam

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    9/31

    merupakan isoprenoid berantai sisi %,6 jenuh A'itil dan senya>a lainnya

    berstruktur trienol yang mempunyai & ikatan rangkap pada %,6nya

    Tokotrienol se"ara alami banyak terdapat di berbagai tanaman# namun

    jumlah berlebihan ditemukan dalam minyak kelapa sa>it (umber :itamin E lain

    terdapat dalam beras# ke"ambah gandum# oat# barley# biji-bijian# ka"ang-

    ka"angan# sayuran hijau# minyak nabati# dan minyak hati (ebagai antioksidan

    K-tokotrienol memiliki potensi lebih tinggi daripada K-toko'erol yang dikenal

    sebagai :itamin E Oleh sebab itu# senya>a ini diprediksi akan menjadi

    antioksidan baru yang akan banyak digunakan di kemudian hari

    Tabel )! Kand"n#an Vitamin E dalam sa%"&'sa%"&an

    !omoditas 7itamin E AmgI,+ g

    0aun katuk merah ,#**

    0aun katuk rebus ,#6

    !a"ang panjang mentah ,#&*

    !a"ang panjang rebus +#

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    10/31

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    11/31

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    12/31

    mempengaruhi adalah asam askorbat# tirosin# en=im poli'enol oksidase dan

    oksigen yang tersedia /eaksi pen"oklatan dapat terjadi melalui dua proses yaitu

    proses pen"oklatan en=imatik# disebabkan adanya en=im PPO dan tirosin yang

    berperan sebagai substrat sedangkan proses non en=imatis disebabkan karena

    reaksi Meillard# karamelisasi atau oksidasi asam askorbat Proses pen"oklatan

    yang terjadi kan mengurangi kualitas produk dan menurunkan minat konsumen

    Pada penelitian ini di"oba mempelajari proses yang terjadi apakah proses

    en=imatik atau non en=imatik# dengan menggunakan dua jenis kentang :arietas

    onosobo dan Ta>angmangu Proses pen"oklatan sebenarnya dimulai dari

    kentang yang dikupas# dipotong-potong# oksidasi asam askorbat# senya>a

    phenol seperti senya>a tirosin sebagai substrat# akan dikatalisis en=im PPO

    menjadi Fuinon dan berpolimerisasi membentuk o Fuinon# sehingga

    menghasilkan >arna ke"oklatan Penentuan asam askorbat dalam :arietas

    kentang digunakan untuk proses penghambatan pen"oklatan kentang atau proses

    bro>ning Ainhibitor# karena menurut Mondy#,arna "oklat

    En=im poli'enol oksidase memiliki kode Enzym Commision AE%

    ,,,8,# nama tri:ial monophenol monooygenase dan nama 24P$%

    monophenol# 5-dopa@oygen oidoredu"tase

    (elain itu# en=im ini juga memiliki nama lain# yaitu tyrosinase# phenolase#

    monophenol oidase# "resolase# "ate"hol oidase# polyphenolase# pyro"ate"hol

    oidase# dopa oidase# "hlorogeni" oidase# "ate"holase# monophenolase# o

    diphenol oidase# "hlorogeni" a"id oidase# diphenol oidase# odiphenolase#

    tyrosine-dopa oidase# odiphenol@ oygen oidoredu"tase# polyaromati" oidase#

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 12

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    13/31

    monophenol monooidase# odiphenol oidoredu"tase# monophenol

    dihydroyphenylalanine@ oygen oidoredu"tase# !a"etyl-6-hydroytryptophan

    oidase# monophenol# dihydroy-5-phenylalanine oygen oidoredu"tase# o

    diphenol@O* oidoredu"tase# dan phenol oidase AN%-24BMB *+,+ En=im

    poli'enol oksidase dihasilkan dari reaksi antara 5-tyrosine# 5-dopa# dan O*

    menjadi 5-dopa# dopaFuinone# dan 3*O

    En=im poli'enol oksidase APPO adalah en=im oksidoreduktase yang

    mengandung tembaga A%u yang umumnya dikenal berperan dalam proses

    melanisasi pada he>an dan pen"oklatan pada tanaman En=im PPO tersebar luas

    di alam# mempunyai berat molekul ,*8+++ dalam keadaan murni# tidak

    ber>arna# dan stabil pada p3 netral Pertama kali diidenti'ikasi pada tahun ,

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    14/31

    BAB II

    TU-UAN PRAKTIKUM

    Tujuan analisis biokimia metabolisme dan oksidasi biologis adalah @

    ! Laktat de(id&o#enase dalam &a#i

    Mengetahui peristi>a oksidasi-reduksi berdasarkan akti:itas en=im laktat

    dehidrogenase terhadap substratnya asam laktat

    )! U.i S/(a&din#e&

    Mengamati peristi>a reduksi berdasarkan akti:itas en=im laktat

    dehidrogenase dalam susu segar

    0! U.i 1ksidase dan Pen#a&"( Vitamin $

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 14

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    15/31

    - Memperlihatkan proses oksidasi senya>a 'enol oleh poli'enol oksidase

    APPO di dalam bahan

    - Memperlihatkan e'ek antioksidan :itamin % terhadap oksidasi 'enol oleh

    PPO

    2! U.i si*at antioksidan 3itamin $ te&(ada+ #"#"s *enol

    - Memperlihatkan proses oksidasi senya>a 'enol oleh poli'enol oksidase

    APPO di dalam kentang

    - Memperlihatkan e'ek antioksidan :itamin % terhadap oksidasi 'enol oleh

    PPO

    4! U.i Si*at &ed"ksi 3itain $ te&(ada+ &ea#en benedi/t

    Memperlihatkan proses reduksi :itamin terhadap reagen benedi"t yang

    mengandung ion %uLL

    BAB III

    MET1DE KER-A

    ! Laktat de(id&o#enase dalam &a#i

    /eagen dan Bahan @

    Tabung reaksi# pipet tetes# suspensi ragi Ayeast# metilen blue +#+* #

    sodium laktat# para'in

    Prosedur @

    (iapkan * tabung reaksi# yang diisi dengan 9 ml suspesi ragi dan metilen

    blue +#+* !husus tabung pertama ditambahkan sodium laktat 9 !o"ok

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 15

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    16/31

    pelan 5apisi permukaan tabung dengan para'in# panaskan dalam penangas

    &8Q% $mati perubahan >arna yang terjadi

    )! U.i S/(a&din#e&

    $lat dan Bahan @

    Tabung reaksi# pipet tetes# suspensi ragi Ayeast# metilen blue ++*#

    'ormaldehid +# susu segar#"asteurized milkAsusu yang telah dipanaskan

    sampai ;+o%

    Prosedur @

    (iapkan * tabung reaksi Tabung pertama diisi susu segar# tabung kedua

    diisipasteurized milk Masing-masing tabung ditambahkan & tetes metilen

    blue ++* da sodium laktat 9 sebanyak , ml %ampur dengan baik#

    panaskn dalam penangas 6+Q%# selama &+ menit $mati perubahan >arna

    yang terjadi

    0! U.i 1ksidase dan Pen#a&"( Vitamin $

    Alat dan Bahan '

    Tabung reaksi# pipet tetes# mortir# stamper# pisau# buah-buahan Apisang#

    kentang dll# larutan 'enol , # larutan :itamin %# larutan :itamin E

    "rosedur '

    (ampel Akentang I apel I buah lain dikupas# dilumatIdihan"urkan# diambil

    sarinya# dimasukkan ke dalam & tabung reaksi sebanayak &-9 ml (emua

    tabung ditambahkan larutan 'enol , sebanyak ,+ tetes !husus tabung ,

    ditambahkan larutan :itamin % ,+ tetes# tabung * ditambahkan :itamin E ,+

    tetes !o"ok pelan sampai homogen Perhatikan perubahan >arnaR

    0ilakukan dengan "epat# untuk menghindari kesalahan hasil

    2! U.i si*at antioksidan 3itamin $ te&(ada+ #"#"s *enol$lat dan Bahan @

    Tabung reaksi# pipet tetes# pisau# buah-buahan Apisang# kentang dll# larutan

    asam askorbat

    Prosedur @

    (ampel AkentangIapelIbuah lain dikupas# disayat tipis# *-& potong dalam

    tabung reaksi# ditambahkan larutan asam askorbat ,+ ml pada tabung ,#

    larutan :itamin E ,+ m5 pada tabung * sedangkan tabung & ditambhakna air

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 16

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    17/31

    suling dalam jumlah yang sama (etelah S jam perhatikan perubahan >arna

    buah

    4! U.i si*at &ed"ksi 3itamin $ te&(ada+ &ea#en benedi/t

    $lat dan Bahan @

    Tabung reaksi# pipet tetes# larutan :itamin %# reagen# larutan glukosa

    Prosedur @

    (iapkan * tabung reaksi# yang masing-masing diisi reagen benedi"t

    sebanyak * ml !husus tabung , ditambahkan larutan asam askorbat tetes

    sedangkan tabung * ditambahkan tetes larutan glukosa 0idihkan dalam

    penangas 9 menit atau di api spritus & menit $mati yang terjadi

    BAB IV

    HASIL PRAKTIKUM

    ! Laktat de(id&o#enase dalam &a#i

    /eaksi 4ji 3asil pengamatan kesimpulan

    Tabung ,

    AL sodium laktat 9

    Terjadi perubahan

    >arna menjadi pu"at

    /eduksi

    Tabung * Tidak terjadi

    perubahan >arna

    oksidasi

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 17

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    18/31

    )! U.i S/(a&d&in#e&

    /eaksi 4ji 3asil Pengamatan !esimpulan

    ! 5s"s" se#a&6 Berubah menjadi

    >arna biru pu"at

    Mengalami reduksi

    )! 5pasteurized6 >arna biru tetap Tidak mengalami

    reduksi

    0! U.i 1ksidase den#an Pen#a&"( Vitamin $

    !entang

    Tabung @ ) 0

    ekst&ak kentan# & m5

    Fenol 7 ,+ tetes

    Vitamin $ - ,+ tetes -

    Vitamin E - - ,+ tetes

    !o"ok ad homogen# amati perubahan >arna

    3asil pengamatan @%oklat

    agak tua

    %oklat

    kekuningan

    %oklat

    kemerahan

    $pel

    Tabung @ ) 0

    ekst&ak A+el & m5

    Fenol 7 ,+ tetes

    Vitamin $ - ,+ tetes -

    Vitamin E - - ,+ tetes

    !o"ok ad homogen# amati perubahan >arna

    3asil pengamatan @ %oklat !uning!uning

    keruh

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 18

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    19/31

    )eruk

    Tabung @ ) 0

    Ekst&ak -e&"k & m5

    Fenol 7 ,+ tetesVitamin $ - ,+ tetes -

    Vitamin E - - ,+ tetes

    !o"ok ad homogen# amati perubahan >arna

    3asil pengamatan @ !uning!uning

    jernih

    !uning

    keruh

    (emangka

    Tabung @ ) 0Ekst&ak Seman#ka & m5

    Fenol 7 ,+ tetes

    Vitamin $ - ,+ tetes -

    Vitamin E - - ,+ tetes

    !o"ok ad homogen# amati perubahan >arna

    3asil pengamatan @ Merah!uning

    jernih

    !uning

    keruh

    Pir

    Tabung @ ) 0

    Ekst&ak Pi& & m5

    Fenol 7 ,+ tetes

    Vitamin $ - ,+ tetes -

    Vitamin E - - ,+ tetes

    !o"ok ad homogen# amati perubahan >arna

    3asil pengamatan @Putih

    !e"oklatanPutih keruh

    Putih

    ke"oklatan

    keruh

    2! U.i Si*at antioksidan 3itamin $ te&(ada+ #"#"s *enol

    Pir

    Tabung @ ) 0

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 19

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    20/31

    I&isan Pi& & sayatan

    Vitamin $ ,+ ml - -

    Vitamin E - ,+ ml -

    Ai& S"lin# - - ,+ ml

    3asil pengamatan @arna buah

    tetap

    arna buah

    tetap

    Berubah

    menjadi

    ke"oklatan

    !entang

    Tabung @ ) 0I&isan Kentan# & sayatan

    Vitamin $ ,+ ml - -

    Vitamin E - ,+ ml -

    Ai& S"lin# - - ,+ ml

    3asil pengamatan @arna buah

    tetap

    arna buah

    tetap

    Berubah

    menjadi

    ke"oklatan

    $pel

    Tabung @ ) 0

    I&isan A+el & sayatan

    Vitamin $ ,+ ml - -

    Vitamin E - ,+ ml -Ai& S"lin# - - ,+ ml

    3asil pengamatan @arna buah

    tetap

    arna buah

    tetap

    Berubah

    menjadi

    ke"oklatan

    4! U.i Si*at &ed"ksi Vitamin $ te&(ada+ &ea#en Benedi/t

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 20

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    21/31

    /eaksi 4ji 3asil Pengamatan !esimpulan

    Tab"n# 5Vit $6 arna biru benedi"t

    berubah menjadi >arna

    merah bata

    Tereduksi

    Tab"n# )

    5Gl"kosa6

    arna biru benedi"t tidak

    berubah

    Tidak tereduksi

    BAB V

    PEMBAHASAN

    ! Laktat de(id&o#enase dalam &a#i

    5aktat dehidrogenase A50# 503 adalah en=im intraseluler yang terdapat

    pada hampir semua sel yang bermetabolisme# dengan konsentrasi tertinggi

    dijumpai di jantung# otot rangka# hati# ginjal# otak# dan sel darah merah 503

    merupakan suatu molekul tetramerik yang mengandung empat subunit dari dua

    bentuk? 3 Ajantung dan M Aotot# yang berkombinasi sehingga menghasilkan

    lima isoen=im yang diberi nama 503, A3 sampai 5039 AM 2soen=im-

    isoen=im tersebut memiliki spesi'isitas jaringan yang sangat berguna dalam

    menentukan organ asal

    Pada 4ji 5aktat 0ehidrogenase# metilen blue akan bertindak sebagai

    akseptor hydrogen# sodium laktat sebagai donor hidrogen sedangkan en=im

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 21

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    22/31

    laktat dehidrogenase akan membantu proses pengambilan atom hidrogen dari

    senya>a donor Asodium laktat ke senya>a penerima Ametilen blue En=im

    laktat dehidrogenase yang berasal dari ragi akan membantu perpindahan atom

    hidrogen dari sodium laktat ke metilen blue $tom hydrogen akan mereduksi

    metilen blue sehingga pada tabung 2 yang telah diberi sodium laktat >arna yang

    akan dihasilkan akan lebih pu"at (edangkan pada tabung 22 yang tanpa

    pemberian metilen blue >arna yang dihasilkan akan lebih tua karena pada

    tabung tersebut tidak ada substrat sodium laktat# sehingga metilen blue tidak bisa

    mereduksi karena tidak ada pemberian donor hidrogen

    )! U.i S/(a&d&in#e&

    Pasteurisasi adalah sebuah proses pemanasan makanan yang bertujuan

    membunuh organisme merugikan seperti bakteri# :irus# proto=oaTerdapat tiga

    metode pasteurisasi yang umum dipakai di industri susu# terutama pada

    kombinasi suhu dan >aktu tertentu

    Pada tabung yang berisi susu segar# setelah ditambahkan & tetes metilen

    blue +#+* dan , ml sodium laktat 9 # di"ampur dengan baik# lalu dipanaskan

    selama &+ menit di penangas 6++ % terjadi perubahan >arna menjadi >arna biru

    pu"at 3al ini menunjukkan adanya akti:itas reduksi metilen biru oleh en=im

    dehidrogenase $kibatnya metilen biru yang ditambahkan akan tereduksi

    menjadi >arna putih yang sebelumnya ber>arna biru En=im dehidrogenase

    yang terdapat dalam susu segar mengkatalis pelepasan 3L dari 'ormaldehid#

    atom yang dibebaskan akan bereaksi dengan metilen biru membentuk

    leukobirumetilen 3ydrogen yang diperoleh dari 'ormaldehid untuk mereduksi

    atom 3 yang terjadi oleh en=imnya segera diikat pada oksigen atau atom 3

    diikat oleh akseptor birumetilen AMb# maka terjadilah air atau luekobirumetilen

    yang tidak ber>arna

    Pada tabung yang berisi pasteuri=ed milk# setelah diberi perlakuan yang

    sama dengan tabung yang berisi susu segar tidak mengalami perubahan >arna

    Atetap ber>arna biru# menunjukkan tidak adanya akti:itas reduksi metilen biru

    oleh en=im dehidrogenase 3al ini disebabkan karena adanya pemanasan pada

    susu segar Apasteurisasi yang dapat merusak en=ime dehidrogenase yang ada

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 22

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    23/31

    dalam susu segar sehingga susu tersebut kehilangan akti:itas en=im

    dehidrogenase# dan pada saat pemberian metilen blue dan pemanasan >arna biru

    tetap tidak berubah karena tidak dapat tereduksi oleh en=ime dehidrogenase

    /eaksi 0ehidrogenasi @

    %3&O3 U3*%O L 3*

    0! U.i 1ksidase den#an Pen#a&"( Vitamin $

    Praktikum uji oksidase ini bertujuan untuk mengetahui proses oksidase

    senya>a 'enol oleh en=im poli'enol oksidase APPO serta memperlihatkan e'ek

    pemberian antioksidan berupa :itamin % terhadap oksidasi 'enol oleh en=im

    PPO Bahan yang kami gunakan dalam praktek ini adalah ekstrak kentang#apel#

    pir# jeruk dan semangka yang didapat dari buah yang dikupas lalu dilumatkan

    dalam mortir dan disaring ekstraknya5alu#di masukkan masing-masing dalam &

    tabung reaksi (emua tabung ditambahkan larutan 1enol , 5alu tabung ke *

    ditambahkan larutan :itamin %# dan tabung ke & ditambahkan larutan :itamin

    E

    Pada uji oksidase pertama Atabung reaksi , dimasukkan di dalamnya 9 ml

    ekstrak kentang# apel# atau pir dan ,+ tetes larutan 'enol , Terjadi perubahan

    >arna menjadi "oklat agak tua# atau "oklat Pembentukan >arna "oklat dipi"u

    oleh reaksi oksidasi yang dikatalisis oleh en=im 'enol oksidase atau poli'enol

    oksidase A PPO En=im ini dapat mengkatalis oksidasi senya>a 'enol menjadi

    Fuinon dan kemudian dipolimerasi menjadi pigmen melanin yang ber>arna

    "oklat Oleh karena itu pada tabung , untuk uji ekstrak kentang# apel dan pir

    terjadi perubahan >arna menjadi "oklat

    3al yang sedikit berbeda terjadi pada buah jeruk dan semangka !etika

    dikupas dan dilumatkan dengan mortir# kedua buah ini tidak mengalami

    perubahan >arna menjadi "oklat 0engan penambahan 'enol# kedua buah ini

    tetap tidak menunjukkan perubahan# namun >arnanya tidak terlalu segar Pada

    proses ini terjadi sedikit proses oksidasi Buah jeruk dan semangka termasuk

    jenis buah non-klimakterik (emangka mengandung suatu senya>a# 5ikopen

    merupakan senya>a antioksidan yang berpotensi untuk men"egah radikal bebas

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 23

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    24/31

    Buah semangka dan jeruk merupakan buah yang mengandung antioksidan#

    sehingga ketika berada diuadara bebas tidak terjadi oksidasi karena :itamin % dan

    likopen yang terkandung didalamnya ber'ugsi untuk menghalangi radikal bebas

    yang ada diudara

    Pada tabung yang ditambahkan 'enol dan :itamin E# mengasilkan >arna

    yang tidak terlalu jauh perbedaannya !etika ditambahkan dengan :itamin %#

    >arna kedua buah menjadi "erah dan segar 3al ini karenakan adanya :itamin E

    yang di tambahakan pada tabung & sebagai antioksidan dan men"egah terjadinya

    oksidasi dengan "ara memutus berbagai reaksi rantai radikal bebas dalam ekstrak

    tersebut#karena kemampuannya memindahkan atau menyumbangkan hidrogen

    'enolat kepada radikal bebas yang teroksidasi# sehingga radikal bebas menjadi

    tidak reakti' $danya hidrogen yang disumbangkan kepada radikal bebas ekstrak

    tersebut# toko'erol sendiri menjadi suatu radikal# tetapi lebih stabil karena elektron

    yang tidak berpasangan pada atom oksigen mengalami delokalisasi ke dalam

    struktur "in"in aromatik

    /adikal bebas 'enoksi yang terbentuk dapat bereaksi dengan :itamin %

    untuk menghasilkan kembali toko'erol atau bereaksi dengan radikal bebas

    berikutnya sehingga "in"in kromana serta rantai samping dioksida menjadi

    produk bukan radikal bebas Namun :itamin E daya antioksidannya tidak sekuat

    :itamin %# sehingga >arna pada tabung * ber>arna lebih "oklat dari tabung ,

    2! U.i Si*at antioksidan 3itamin $ te&(ada+ #"#"s *enol

    2risan apel# kentang# pir yang dilarutkan dalam air suling berubah >arna

    menjadi sedikit keruh Aagak ke"oklatan 3al ini dikarenakan ketiga buah

    tersebut mengandung en=im yang disebut oksidase poli'enol APPO atau

    tryosine En=im inilah yang bertanggungja>ab atas >arna "oklat pada apel

    !etika ketiga buah diiris atau digigit# en=im tersebut mun"ul dan bereaksi

    dengan oksigen sehingga mengoksidasi senya>a 'enolik yang terdapat dalam

    jaringan apel o-kuinon O-kuinon kemudian menghasilkan produk-produk

    sekunder ber>arna "oklat yang merubah dari >arna asli apel

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 24

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    25/31

    2risan apel# kentang# pir yang dilarutkan dalam :itamin % tidak terjadi

    perubahan >arna 3al ini dikarenakan :itamin % tersebut men"egah terjadinya

    proses oksidasi senya>a 'enolik yang terdapat dalam jaringan apel# kentang# dan

    pir

    2risan apel# kentang# pir yang dilarutkan dalam :itamin E tidak terjadi

    perubahan >arna 3al ini dikarenakan :itamin E tersebut men"egah terjadinya

    proses oksidasi senya>a 'enolik yang terdapat dalam jaringan apel# kentang# dan

    pir

    4! U.i Si*at &ed"ksi Vitamin $ te&(ada+ &ea#en Benedi/t

    4ji benedi"t bertujuan untuk mengetahui adanya gula pereduksi dalam

    suatu larutan dengan indikator yaitu adanya perubahan >arna menjadi merah

    bata /eagen benedi"t digunakan untuk menguji atau memeriksa adanya gula

    pereduksi dalam suatu "airan /eagen benedi"t terdiri dari "ampuran larutan

    tembaga sul'at#natrium 'iltrat dan natrium karbonat

    Pada tabung yang ditambahkan larutan :itamin %# terjadi

    perubahan menjadi >arna merah bata 7itamin % merupakan reduktor kuat

    dengan adanya gugus enadiol# sehingga mampu mereduksi ion %u*L dari

    pereaksi benedi"t menjadi ion %uL dengan membentuk endapan %u*O yang

    ber>arna merah bata 7itamin % mampu mereduksi tembaga sul'at dari reagen

    benedi"t sehingga menghasilkan endapan ber>arna merah bata 4ji benedi"t

    bukan tergantung dengan senya>anya melainkan pada strukturnya sehingga uji

    benedi"t dapat dilakukan juga untuk uji :itamin % Terbentuknya endapan merah

    bata menunjukkan :itamin % bisa bersi'at sebagai reduktor dan karena

    strukturnya identik sama dengan glukosa

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 25

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    26/31

    Pada tabung yang ditambahkan glukosa# tidak terjadi perubahan

    >arna 5arutan tetap ber>arna biru 3asil ini tidak sesuai karena glukosa

    merupakan gula pereduksi yang seharusnya memberikan hasil perubahan >arna

    menjadi merah bata !esalahan ini mungkin disebabkan kurang telitinya

    praktikan saat mengerjakan praktikum

    KESIMPULAN

    4ji 5aktat dehidrogenase dalam ragi

    En=im laktat dehidrogenase yang berasal dari ragi membantu perpindahan

    atom hidrogen dari sodium laktat ke metilen blue Tanpa pemberian metilen blue

    >arna yang dihasilkan kan lebih tua karena dalam tabung tersebut tidak ada

    substrat sodium laktat

    4ji ("hradinger

    Terdapat akti:itas en=im dehidrogenase yang dalam susu segar dimana

    pada saat pemanasan dapat mereduksi metilen biru A>arna biru berubah menjadi

    putihI biru pu"at

    4ji Oksidase dan pengaruh :itamin % dan 4ji (i'at antioksidan 7itamin %

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 26

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    27/31

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    28/31

    LAMPIRAN

    U.i Laktat de(id&o#enase dalam &a#i

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 28

    1 2

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    29/31

    Tabung , @ 0itambahkan sodium laktat 9

    Tabung * @ Tidak ditambahkan sodium laktat 9

    U.i S/(&adin#e&

    Tabung , @ (usu (egar

    Tabung * @ (usupasteurized

    U.i Si*at antioksidan Vitamin $ te&(ada+ #"#"s *enol

    APEL

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 29

    2 1

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    30/31

    PIR

    U.i Si*at &ed"ksi Vitamin $ te&(ada+ &ea#en Benedi/t

    Tabung , @ 7itamin %

    Tabung * @ .lukosa

    Praktikum Biokimia|METABOLISME dan OKSIDASE BIOLOGIS 30

    12

  • 8/12/2019 oksidasi_biologis(1)

    31/31