METODE PEWARNAAN UMUM

Mikroteknik Fakultas Biologi

STRUKTUR SEL & AFINITASNYA THD ZAT WARNA

PENDAHULUANSEL MEMP. BAGIAN-2, SATU DG YG LAINNYA MEMP SIFAT YG BERBEDA INTI > BERSIFAT ASAM DRPD SITOPLASMA PERLU PEWARNAAN TERTENTU SESUAI DG SIFAT-2 BAGIAN SEL DI DLM SITOPLASMA SEL > DARI 85 % ADL AIR

Bahasan sifat-2 organelMiktokhondria (I dipelajari o/Altman,1894) Benda (1898), nama lain mitokhondria=khondriosoma Apparatus golgi, I diketemukan o/ Lavalette St Gorge Sentriola, adl bulatan kecil terletak pd sitoplasma, hanya terlihat pd sel yg hidup

NUKLEUS

Nukleusstruktur terbesar dlm sel, di dlmnya tdp plasmosoma & karyosomaplasmosoma=nukleolus Tdd : selaput inti, cairan inti, plasmosoma, karyosoma Plasmosoma, sifat ke arah basa, terpulas baik dg zw.asam Karyosoma, sifat ke arah asam, terpulas baik dg zw. Basa Scr keseluruhan nukleus bersifat asam, afinitasnya besar thd zw basa

Pewarna Umum NukleiBila 2 pewarna kromatin, methyl green pyroninkaryosoma & kromosom terwarnai o/ methyl green; plasmosoma terwarnai o/ pyronin Pewarna umum nukleus adl hematoxylin, carmine dll (zw sintetis)hematoxylin bukanlah pewarna, dia tdk dpt memberikan warna hrs di + oksidator Hematoxylin hematein, struktur kimia yg mgd cincin quinonoid (chromopore), sbg pembawa warnashg substansi tsb berwarna

Mordant Haematoxylin buatan Dobell

Metode u/mewarna nuklei, tepatnya umum u/ mewarnai kromosom, tdd : #Lart mordant, iron alum 1% (dlm alkohol 70%) #Lart pewarna, hematein 1% (dlm alkohol 70%) #Lart pendeferensiasi, hidrochloric acid 0.1% (dlm alkohol 70%)

Haematoxylin jenis lain dg mordant

Acid Alum Haematoxylin buatan Ehrlich, dg mordant amonium alum berlebihan + (aquadest; alkohol;glycerin;glacial acetic acid) Haemalum Mayer, dg mordant potassium alumunium sulfat + (aquadest; sodium iodat) Haematoxylin Ehrlich (1886), dg potassium alumunium sulfat berlebihan + (alkohol absolut; aquadest; glycerol; glacial acetic acid) Haematoxylin Harris (1900), dg amonium/potassium alum + (alkohol absolut; aquadest; mercuric oxide)

Pewarna lain nuclei

Carmine Calestin-Blue B Safranin Methyl green Pyronin, untuk warnai DNA, Pyronin spesifik u/ RNA Acetocarmineu/mempelajari mitosis, konsentrasi DNA bertambah Aceto-orceinmewarnai mitosis sel Teknik Papaniculaouu/seks kromatindg cresyl violet 1%teknik Barrseks kromatin ada yg menyebut Barr-body

Pewarna Sitoplasmaasam nukleat

Sitoplasma bersifat acidophyl, terpulas dg zw. Yg bersifat asam, ttp RNA sendiri bersifat basophyl Material basophyl pd sel tumor, sel yg belum dewasa/sel embrional RNA dg pewarna methyl green-pyronin; gallo cyanin Gallocyanin (u/pewarna asam nukleat)tdd.chrome alum; aquadest; gallocyanin

Pewarna MitokhondriaDg

teknik supravital Dg teknik fiksasi

Lazim dg pewarna dichrome dan trichromemisal Masson trichrome dg fiksatif formalin lart.Helly Juga dg Phosphotuncstic Acid Haematoxylin (PTAH) buatan Mallory sgt baik u/memperlihatkan mitokhondria Metode Regaud menurut Almann-Kuhl (cain) Tes Acid Hematin dari Baker Anniline acid fuchsin-Methyl green

Pewarna Apparatus GolgiMetode impregnasi perak Metode osmifikasi Metode Impregnasi perak : prosedur da Fanometode Cobalt nitrate da Fano prosedur Aoyamametode Cadmium chloride Metode Osmifikasi metode Mann-Kopsch-Weighl