1

PENDAHULUAN

Pemanfaatan tumbuhan sebagai bahan baku obatterus meningkat, sampai saat ini sebagian besar bahanbaku tumbuhan obat masih dipanen dari alam. Namundilain pihak kebutuhan akan bahan baku tersebut ternsmeningkat, hal ini seiring dengan kembalinya masya-rakat memanfaatkan tumbuhan sebagai bahan obatalami. Apabila budidaya, pelestarian serta pemanfaatan-nya tidak diperhatikan, maka akan terjadi kekuranganbahan baku dan bahkan akan terjadi kepunahan spesiestumbuhan tertentu (Amzu dan Haryanto, 1990).

Dalam upaya pelestarian tumbuhan obat melaluibioteknologi kultur jaringan dapat dilakukan beberapapendekatan. Sebagai langkah awal dapat dilakukanupaya perbanyakan dan untuk selanjutnya dilakukanpenyimpanan serta regenerasinya, setelah penyimpanan.Melalui kultur in vitro maka biakan dapat disimpandalam waktu lama dan dapat digunakan sewaktu-waktudiperlukan (Nitche, 1983). Pada penyimpanan tersebutdiperlukan metoda untuk menghambat pertumbuhan

jaringan tanaman. Penyimpanan biakan melalui kulturjaringan telah banyak diterapkan dinegara-negara maju,baik dengan metoda yang sederhana untuk penyimpanan jangka pendek atau menengah maupun penyimpananuntuk tujuan jangka panjang.

both endangered species and potential plants to propagate Thepreservation technique is applied through slowing growth and ingrowth storage. In addition, the more efficient storage throughencapsulation is now being studied. The industr^al crops researchinstitute has preserve various medicinal plant such as Pulasari (Alyxiastellata). Pule Pandak (Rauvolfia serpentina), Purwoceng(Pimpinella pruatjan), Inggu (Ruta angustifolia), Temu puteri(Curcuma petiolata), Bidara upas ( Meremia mammosa), Daun dewa(Gynura procumbens), Kencur (Kaempferia galanga), Zingiber(Zyngiber officinalle), Daun encok ( Plumbago zeylanica), Dauntangguh ( Pettivea alliacea), Fennel ( Foeniculum vulgare) and javasom (Talinum paniculatum). Preservation with slow growth ,encapsulation by adding inhibitor (paclobutrazol, ancymidol andcycocel) or retardan (Absisic acid) could minimize subculturfrequency for renewal. Methods In vitro conservation are relativelyvaried, according to the kinds of plants. Some of the medicinalplants above have been stored for 1 to 7 years. Tissue regenerationpotency after storage does not decrease and the seedling visualperformance in the greenhouse is not different from his mother plant.

Key words : In vitro culture, germplasm preservation, endangeredmedicinal crops.

ABSTRACT

Preservation Of Endangered Medicinal Plants Through In VitroCulture. In vitro conservation is one of significan activities aimed atgermplasm conservation in order to overcome plant extinction aswell as to provide genetic variety. Medicinal plant belongs toagricultural commodity with such a rapid genetic erotion that itspreservation is urgently carried out. In vitro culture is one alternativeto preserve genetic resources in the future. Therefore research anddevelopment of jit vitro preservation should be thorougly studied.Recently, the tissue culture laboratory for industrial crops, through invitro preservation, has managed to preserve various medicinal crops.

ABSTRAK

Kultur in vitro Sebagai Metode Pelestarian Tumbuhan ObatLangka. Penyimpanan melalui kultur in vitro merupakan salah satukegiatan untuk menunjang program pelestarian plasma nutfah yangsangat penting baik untuk mengatasi pelangkaan tanaman maupununtuk penyediaan keragaman genetik. Tumbuhan obat merupakankelompok komoditas pertanian yang erosi genetiknya berlangsungsangat cepat sehingga upaya pelestariannya perlu segera dilakukan.Teknik kultur in vitro merupakan teknologi pilihan yang diharapkandapat menyimpan kekayaan hayati dimasa mendatang. Dengandemikian penguasaan dan pengembangan teknik pelestarian plasmanutfah melalui kultur in vitro harus dipelajari. Pada saat inilaboratorium kultur jaringan tanaman industri sudah berhasilmenyimpan berbagai tumbuhan obat secara in vitro baik yangtermasuk dalam kategori langka maupun yang berpotensi untukdikembangkan. Teknik penyimpanan yang dilakukan dengan carapertumbuhan minimal dan penyimpanan dalam keadaan tumbuh.Disamping kedua cara tersebut di atas sedang dipelajari pula carapenyimpanan yang lebih eflsien yaitu melalui enkapsulasi. Sebelumpercobaan penyimpanan maka terlebih dahulu dilakukanperbanyakan biakan melalui kultur in vitro. Tumbuhan obat yangtelah disimpan antara lain Pulasari (Alyxia stellata), Pule pandak(Rauvolfia serpentina), Purwoceng (Pimpinella pruatjan), Inggu(Ruta angustifolia), Temu puteri (Curcuma petiolata), Bidara upas(Meremia mammosa), Daun dewa (Gynura procumben), Kencur(Kaempferia galanga), Jahe (Zingiber officinalle), Daun encok(Plumbago zeylanica), Daun tangguh (Pettivera alliacea), Adas(Foeniculum vulgare) dan Som jawa (Talinum paniculatum).Penyimpanan dengan cara pertumbuhan minimal dan enkapsulasidengan menambahkan inhibitor (paclobutrazol, ancymidol dancycocel) atau retardan (Absisic Acid), dapat mengurangi frekuensisubkultur untuk pembaharuan. Metoda penyimpanan melalui kulturin vitro tidak sama tergantung jenis tumbuhannya. Berbagaitumbuhan obat tersebut diatas ada yang sudah disimpan selama 1sampai dengan 7 tahun. Daya regenerasi jaringan setelahpenyimpanan tidak menurun dan secara visual penampakan bibit dirumah kaca tidak berbeda dengan pohon induknya.

Kata kunci: Kultur in vitro , pelestarian plasma nutfah tanamanobat langka.

KULTUR/TV VITRO SEBAGAI METODE PELESTARIANTUMBUHAN OBAT LANGKA

Endang Gati Lestari dan Ika MariskaBalai Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan

nitrogen cair (James, 1983). Untuk menghindari adanyaperubahan sifat genetik dan tidak mengurangi daya

regenerasi setelah penyimpanan maka organ yang akandisimpan terlebih dahulu diberi perlakuan "praconditioning" untuk melindun^i dari kerusakan karena

pengaruh pembekuan. Penyimpanan dengan cara inidisamping sulit dilakukan juga memerlukan modal awalcukup besar. Namun demikian di negara-negara majumetoda ini sudah banyak dimanfaatkan untuk penyim

panan tunas apikal, kalus, suspensi sel maupun embriosomatik pada tanaman Arachis hypogaea, Asparagusofficinaslis, Daucus carota, Datura stratomium dan Iain-lain. Dimasa mendatang penyimpanan dengan cara ini

merupakan teknologi harapan karena dapat menyimpanspesimen selama 15 sampai dengan 20 tahun.

Disamping melalui ketiga cara tersebut diatasdapat pula digunakan cara lain yaitu denganenkapsulasi memakai sodium alginat dan CaC^ untuk

pengerasan. Ke dalam media enkapsulasi dapat puladitambahkan senyawa penghambat pertumbuhandisamping nutrisi untuk menjaga viabilitas bahan

tanaman yang disimpan. Untuk penyimpanan jangkapanjang melalui kriopreservasi, bahan tanaman yangtelah dienkapsulasi disimpan dalam nitrogen cair.

Menyadari pentingnya upaya pelestarian tumbuh-an obat terutama pada spesies tanaman yang sudahdikategorikan langka maka laboratorium kultur jaringan

tanaman industri sejak tahun 1989 telah mulaimelakukan upaya penyelamatan berbagai tumbuhanobat, khususnya tumbuhan obat yang langka dan

mempunyai potensi untuk dikembangkan (Tabel 1.)

HASIL PENELITIAN PENYIMPANANTUMBUHAN OBAT MELALUI

KULTUR IN VITRO

Untuk mendapatkan bahan tanaman yang akandisimpan maka spesies tumbuhan obat diperbanyakdahulu melalui kultur in vitro, kegiatan tersebut akan

mempermudah dan mempercepat keberhasilan penyimpanan karena sudah dalam kondisi steril dan yangterpenting metoda regenerasinya sudah dikuasai.Penyimpanan spesies tumbuhan obat telah dilakukandengan 2 cara yaitu penyimpanan dalam keadaantumbuh dan penyimpanan dalam kondisi minimal(Tabel 2). Tahapan penyimpanan in vitro dapat dilihatpada Gambar 1. Secara periodik biakan yang disimpandiuji daya tumbuhnya. Penyimpanan dengan carakriopreservasi belum dapat dilaksanakan karena belumtersedianya peralatan yang dibutuhkan.

A. Penyimpanan dalam keadaan tumbuh

Penyimpanan dengan cara ini dilakukan padaspesies tumbuhan yang sangat lambat daya tumbuhnyadan pada tanaman yang sedang diteliti metoda

BEBERAPA CARA YANG DAPATDIGUNAKAN PADA PENYIMPANAN

MELALUI KULTUR JARINGANPenyimpanan dalam keadaan tumbuh

Penyimpanan dalam keadaan tumbuh merupakanpenyimpanan berupa kultur jaringan untuk perbanyakanbiasa yang memerlukan pemindahan secara rutin agarbiakan-tetap hidup. Pemindahan yang berulang kalimemberikan dampak peluang kontaminasi yangmeningkat serta kebutuhan tenaga yang lebih banyak

disamping peningkatan biaya produksi (Bhojwani danRazdan, 1983). Untuk menghindari terjadinya mutasidan menjaga viabilitas tanaman maka zat pengaturtumbuh yang digunakan diusahakan seminimalmungkin (Irawati, 1990).

Penyimpanan pertumbuhan minimal/pertumbuhan

lambatPenyimpanan dengan cara ini diupayakan kultur

tetap tumbuh tetapi sangat lambat, dengan menurun-kan proses pembelahan sel dan proses metabolis-me.Untuk mencapai tujuan tersebut dapat dilakukandengan penurunan temperatur lingkungan penyim

panan (Hu dan Wang, 1983), penggunaan senyawauntuk meningkatkan osmolaritas media seperti

manitol (Withers, 1985) penggunaan inhibitor(paclobutrazol, ancymidol atau cycocel) dan retardan(absisic acid). Dengan cara tersebut tetap diperlukanpemindahan pada media baru akan tetapi frekuensipemindahannya lebih rendah dari pada cara pertama.Beberapa tanaman yang sudah berhasil disimpandengan cara tersebut antara lain: potato, Cassava,Sweet potato dan Yam (Heshaw dan Ohara, 1983).

Penyimpanan jangka panjang (Kriopreservasi)Penyimpanan dengan cara ini proses metabolis-

me dari sel, jaringan maupun organ yang disimpandihentikan sehingga tidak ada proses pertumbuhan

(Bhojwani dan Razdan, 1983). Penyimpanan dengancara kriopreservasi menggunakan temperatur yangsangat rendah yaitu -80C bahkan -196C dalam

Beberapa keuntungan yang dapat diperoleh padapelestarian plasma nutfah melalui kultur jaringan antaralain: 1) tidak memerlukan areal yang luas 2) bebas dari

gangguan hama, penyakit 3) memudahkan pertukarantanaman antar negara 4) biakan dapat segeradiperbanyak apabila diperlukan. Disamping keuntungan

ada beberapa kerugian maupun kendala dalamaplikasinya antara lain: 1) memerlukan biaya yang

relatif tinggi dan keahlian khusus 2) kemungkinanadanya variasi genetik dan 3) pada penyimpanan dalamkeadaan tumbuh diperlukan adanya pembaharuandengan ' frekuensi tinggi yang dapat meningkatkanpeluang terjadinya kontaminasi.

Sumber *) Pokja monograf Depkes (1989)**) Sugati dan Hutapea (1991)

anetol, fenkon, pinena,limolena*)flavonoid, inositol*)

polivenol, saponin,flavonoid**)saponin**)saponin, flavonoidzingiberin, borneol, limolena*)

kumarin, as.organik*)

skianin, tanin, cineol, keton*)

alkaloid, ekitama, ekiserina*)

saponin**)

alkaloid**)damar, zat pahit*)

alkaloid, saponin**)

jantung, darah tinggi

memperlancar air senirheumatikkanker, sakit gigi, obat kulit

tonikumkarminatif, stimulan minuman

kanker ,obat batuk, minumananti kembung

obat demam, sariawan,

desentriobat demam, penenang, obat

kejangtonikum, perut kembungminuman kesehatan, obat kuatobat sakit perut, demammemperlancar air susu ibu,

radang paru-paruobat tekanan darah tinggi

A.Tumbuhan obat langka1.Pulasari (Alyxia stellata)

2.Inggu (Ruta angustifolia)

3.Pulai (Alstonia scolaris)4.Purwoceng (Pimpinella pruatjan)5.Temu puteri (Curcuma petiolata)6.Bidara upas(Meremia mamosa)

1.Pule pandak (Rauvolvia serpentina)

B.Berpotensi untuk dikembangkan1.Daun tangguh (Pettivera aliacea)2.Kencur (Kaempferia galanga L.)3.Adas (Foeniculum vulgare)

4.Tempurung (Sonchus arvensis)

5.Daun encok (Plumbago zeylanica)

6.Daun dewa (Gynura aurantica)7.Som Jawa (Talinum paniculatum)

8.Jahe (Zingiber ojjficinale L.)9.Anectochylus taiwanensis

Kandungan kimiaKegunaanJenis tumbuhanNo

Tabel 1. Berbagai tumbuhan obat yang telah dikoleksi secara in vitro serta kegunaannya

Table 1. Various medicinal crops colected in vitro advantages

pelestariannya. Manfaat tumbuhan ini (akar dandaunnya) adalah sebagai obat kuat dan minumankesehatan. Telah dilakukan percobaan perbanyakansecara kultur in vitro dengan menggunakan tunas lateralsebagai eksplan. Faktor perbanyakan tertinggi diperolehdari media MS yang diberi zat pengatur tumbuh BA 5mg/1, dengan rata-rata jumlah tunas sebanyak 7 buah

(Mariska dkk., 1991). Disamping itu telah dilakukanpercobaan penyimpanan dengan beberapa jenis dankonsentrasi zat penghambat tetapi biakan cepat layu danakhirnya mati. Untuk mengatasi masalah tersebutdilakukan penyimpanan dalam keadaan tumbuh denganmengurangi konsentrasi BA atau penggunaan jenissitokinin lainnya yang daya aktifitasnya lebih rendah.Penggunaan media dasar DKW nampaknya mem-berikan harapan dapat mengurangi frekuensi pembaharuan kultur pada media baru. Purwoceng telah disimpan

dalam kultur in vitro selama 5 tahun.

3. Bidara upas (Meremia mammosa (Lour.) Hallier f.)Bidara upas merupakan tumbuhan obat yang

tergolong langka, tumbuhan tersebut banyak digunakansebagai ramuan jamu untuk memperlancar air susu ibu.

perbanyakannya secara in vitro. Bila biakan telah men-cukupi untuk disimpan dan metoda regenerasinya telahdiperoleh maka langkah selanjutnya dilakukan peneliti-an penyimpanan. Pada species tumbuhan obat yang lajupertumbuhannya cepat maka cara enyimpanan yangakan dipakai yaitu melalui cara pertumbuhan minimal

atau enkapsulasi.

1.Temu puteri (Curcuma petiolata)Temu puteri merupakan tumbuhan obat yang

dikategorikan langka. Manfaat tumbuhan ini adalahuntuk obat demam dan disentri. Untuk mencegah lebihtererosinya tanaman obat tersebut telah dilakukanpercobaan perbanyakan dengan menggunakan mediadasar MS diberi zat pengatur tumbuh BA 5 dan 7 mg/1.Pada formulasi media tersebut tunas yang dihasilkansebanyak 3.75 pada minggu ke-5 setelah tanam.Pembaharuan dilakukan berulang kali agar biakantetap mempunyai daya tumbuh yang baik. Temu puteri

telah disimpan secara in vitro selama 5 tahun.

2.Purwoceng (Pimpinella pruatjan)Purwoceng merupakan tumbuhan obat yang sudah

terancam punah sehingga perlu segera dilakukan upaya

DKW= Driven kuniyuki*) media penyimpanan Mon = MonierKet: *) media perbanyakan

5 tahun5 tahun3tahun5 tahun4tahun

4 tahun

2 tahun

5 tahun

5 tahun

7 tahun

5 tahun

- MS + BA 1 + NAA 1 mg/1- MS + BA 1 + GA 10 mg/1-MS + BA2 mg/1-MS + BA0.5 mg/1-MS + BA3 +2iP3mg/l- DKW+ BA 1 mg/1- MS + BA 3 mg/1

- MS + paclo 3 mg/1**)- enkapsulasi**)- MS + BA 2 mg/1*)

KencurDaun tangguhDaun encokTempuyungBidara upasPurwocengTemu puteriPenyimpanan sederhana

Daun dewa

7.6.5.4.3.2.1.B.

5.

-MS + BA 0.8 mg/1*)-MS + ABA 1 mg/1**)-Mon 14 + paclo 3 mg/1**)-Mon 14 + ancym 0.5mg/l**)

-MS + BA 3+ NAA 0.1mg/l*)-MS3/4 + paclo5mg/l**)-MS 14 + ancym 0.5mg/l**)

-MS % + BA 1 mg/1 *)-MS + manitol 500 mg/1**)-Enkapsulasi**)

-MS + Vit. B5 + BA 5 mg/1*)-MS + paclo, cycocel**)

Jahe4.

3. Inggu

2. Pulasari

A. Penyimpanan pertumbuhanminimal

1. Pulepandak

Lama penyimpanans/dthl996

Formulasi mediaJenis tumbuhan obatNo.

Gambar 1. Diagaram konservasi plasma nutfah melalui kultur invitroFigure I. In vitro preservation steps

Tabel 2. Formulasi media untuk penyimpanan berbagai tumbuhan obatTable 2. Formulation for preservation various medicinals plants

Pemeriksaan periodik

asa penyunpanan

Pembaharuan Koleksi in vitro

Me

Pemanfaatanplasma nutfah

Penyimpanan in vitro jj^-^(jangka pendek + menengah) ^^

roduksi tun;

Tanaman induk-Kebun koleksi-Rumah kaca

I ~~ Media perbanyakan Produksi tunas

Eksplan

Perbanyakan in vitro

tersebut bam diperoleh beberapa bulan yang lalu dansaat ini sedang dicoba diperbanyak secara in vitro. Dariperlakuan yang telah dicobakan nampak beberapabiakan sudah menunjukkan tanggap yang baik dengankemampuan membentuk tunas dalam waktu yang relatifcepat. Bila tunas yang terbentuk sudah memadai akandilanjutkan dengan penelitian penyimpanan denganmetoda pertumbuhan minimal dan akan ditelitikemampuan sel maupun kalus dalam memproduksisenyawa sekunder.

8.Pulai {Alstonia scolaris)Pulai termasuk salah satu tumbuhan obat yang

sudah dikatagorikan langka. Manfaat tumbuhan iniuntuk campuran ramuan jamu. Kegiatan perbanyakanbam dilakukan tahun ini, hasil sementara menunjukkanlaju pertumbuhannya agak lambat dan tunas yangterbentuk cepat gugur. Untuk mengatasi masalahtersebut diberikan senyawa organik tertentu danmemberikan hasil yang lebih baik. Bila metodaperbanyakan telah diperoleh biakan akan dilakukanpercobaan penyimpanan agar dapat dimanfaatkan bilasewaktu-waktu diperlukan.

9.Adas {Foeniculum vulgare Mill.)Adas merapakan tanaman obat yang potensial

untuk dikembangkan. Selurah bagian tanamannya dapatdigunakan untuk berbagai keperluan, yang paling

banyak dimanfaatkan adalah bijinya sebagai obat antikembung. Hasil perbanyakan melalui kultur in vitroadalah pemakaian media dasar MS ditambah BA 0.1

mg/1 + adenin sulfat 160 mg/1 dapat memberikan hasilterbaik untuk multiplikasi tunas, pada minggu ke 6 rata-rata jumlah tunas yang dihasilkan sebanyak 5.6. Untukperakaran dengan menggunakan media dasar MS

ditambah IBA 3 mg/1 + adenin sulfat 160 mg/1 dapatmenghasilkan rata-rata jumlah akar terbanyak yaitusebesar 10.8 (Krishna et al, 1994).

10.Som Jawa {Talinumpaniculatum)Som jawa dikenal sebagai tumbuhan yang

berkhasiat sebagai tonikum yang akhir-akhir ini banyakdiproduksi sebagai minuman untuk kesehatan. TanamSnini berpotensi untuk dikembangkan. Telah dilakukanpercobaan perbanyakan untuk mengetahui responpenggunaan media dasar yang berbeda terhadap faktormultiplikasi tunas. Temyata tidak ada perbedaan yangnyata antara penggunaan • media dasar MS maupunmedia dasar Monnier. Akar dapat terbentuk pada mediadasar MS dan Monnier tanpa penambahan zat pengaturtumbuh auksin (Gati dan Pumamaningsih, 1995).

B. Penyimpanan dengan pertumbuhan minimal

1. Pule pandak (Rauvolvia serpentina)Pule pandak atau akar tikus termasuk dalam

kelompok tumbuhan obat langka yang mulai kritis ke-beradaannya (Amzu dan Haryanto, 1990). Kegunaannya

Sebagai langkah awal dalam pelestariannya, telahdilakukan percobaan perbanyakan, media dasar yangdigunakan adalah MS ditambah zat pengatur tumbuhBA, kinetin dan 2iP. Dari berbagai perlakuan yangdiberikan, tunas yang dihasilkan tidak bertahan lamadan akhirnya gugur dengan demikian diperlukan adanyasub kultur yang berulang kali. Pertumbuhan jaringan kearah diferensiasi membentuk organ sangat lambat danbiakan cenderung membentuk kalus. Karena masalahgugurnya daun maka kultur yang disimpan harus selaludiperbahami setiap 3-4 bulan. Sampai saat ini masihdicari formulasi media yang terbaik untuk mengurangifrekuensi sub kultur.

4.Tempuyung (Sonchus arvensis)Tempuyung banyak digunakan untuk mengobati

penyakit ginjal, memperlancar pembuangan air seni,batuk asma dan bronchitis. Dari semua jaringantanaman baik dari kalus, potongan jaringan daun danmata tunas dapat diregenerasikan membentuk plantlet.Dari eksplan kalus dengan pemberian BA 0.5 mg/1 padamedia dasar MS dapat dihasilkan tunas sebanyak 40,sedangkan dari potongan jaringan daun denganpemberian BA 0.2 + NAA 0.1 mg/1 dapat dihasilkantunas sebanyak 35.4. Untuk perakaran dengan

pemakaian media MS diberi NAA 0.1 mg/1memberikan hasil akar sebesar 15.2 (Mariska dan Gati,

1993).

5.Daun encok {Plumbago zeylanica)Daun encok daunnya dapat digunakan sebagai

obat reumatik atau encok sedangkan akarnya digunakansebagai pengganti pule pandak. Telah dilakukanperbanyakan dengan hasil terbaik dari media dasar MSdiberi BA 2 mg/1 yaitu jumlah tunas sebesar 5.8 padaminggu ke-4 setelah tanam (Yelnititis dan Krishna,1994). Masih dicari metoda penyimpanan yang lebihefisien.

6.Kencur {Kaemferia galanga)Kencur mempunyai potensi untuk dikembangkan

karena nilai jual hasil rimpangnya relatif tinggi. Hasilpercobaan perbanyakan klonal secara in vitro denganmenggunakan mata tunas sebagai eksplan telahdiperoleh bahwa media dasar MS cair stabil yang diberiBA 1 mg/1 serta IAA 1 mg/1 menghasilkan rata-ratajumlah tunas sebanyak 10.2 pada umur 4 minggusetelah tanam. Aklimatisasi dengan menggunakan

media tanah dan pupuk kandang (1:1) memberikanpersentase keberhasilan cukup tinggi yaitu 70 hingga

80% (Seswita et al, 1994).

7.Daun tangguh (Pettivera alliaceae)Daun tangguh merupakan salah satu tumbuhan

obat yang saat ini banyak dibicarakan di masyarakatkarena dilaporkan dapat mengobati kanker prostat,dubur dan alat pemafasan bagian atas. Tumbuhan

penyimpanan kultur selama 3, 6 dan 9 bulan. Walaupundemikian biakan yang disimpan pada perlakuan tersebutdiatas setelah 3 bulan menunjukkan adanya gejalatangkai daun yang layu. Berbeda dengan manitol gejalatersebut baru muncul setelah masa penyimpanan 6bulan. Untuk penelitian selanjutnya sedang dicobapenyimpanan kalus dengan cara enkapsulasi menggunakan sodium alginat dan ditambahkan senyawa inhibitorpaclobutrazol. Setelah 3 bulan dalam penyimpanankalus tetap mampu beregenerasi untuk membentuktunas adventif. Inggu sudah disimpan secara in vitroselama 5 tahun dan secara rutin selalu diuji dayatumbuhnya.

4.Daun dewa (Gynura procumberi)Daun dewa merupakan tumbuhan obat yang

banyak sekali manfaatnya antara lain sebagai obat antitumor, penurun panas dan obat kulit. Kandungankimianya adalah minyak atsiri dan flavonoid. Daripercobaan perbanyakan dengan menggunakan eksplanbatang satu buku hasil terbaik diperoleh dari media MSyang diberi BA 2 mg/1. Telah dilakukan percobaanpenyimpanan melalui enkapsulasi serta penyimpanandalam pertumbuhan minimal dengan menggunakanmedia dasar MS diberi inhibitor paclobutrazol atauabsisic acid. Setelah disimpan dengan enkapsulasiselama 6 bulan mata tunas yang dikeluarkan dari kapsuldan ditanam pada media regenerasi. Dengan kedua caratersebut di atas tunas tetap mampu berdiferensiasi

setelah disimpan.

5.Jahe (Zingiber officinalle)Jahe mempakan salah satu tanaman obat yang

banyak digunakan sebagai bahan rempah dan obat-obatan. Permintaan jahe setiap tahunnya meningkatsejalan dengan semakin bertambahnya industri jamu,makanan dan minuman. Dengan demikian maka kebutuhan bibit terus meningkat, salah satu alternatif untukpenyediaan bibit yang seragam adalah melalui kultur invitro. Dari percobaan perbanyakan diperoleh hasil

terbaik dari media MS cair stabil yang diberi BA (3, 5dan 7 mg/1) dengan rata-rata jumlah tunas sebanyak 9.7.Sampai saat ini biakan jahe sudah mengalami periodekultur in vitro selama 5 tahun dan penelitian terusberlajut untuk menguji kemampuan produksinya dilapang. Selain untuk perbanyakan dan penyimpananmaka aspek lain yang sedang diteliti adalah untukmendapatkan nomor-nomor harapan bam yang tahanpenyakit layu bakteri (Pseudomonas solanacearum).

Penyimpanan jahe dalam kondisi pertumbuhanminimal telah dan sedang berjalan dengan inhibitorpaclobutrazol, ancimidol dan cicocel. Hasil sementaramenunjukkan adanya daya hambat dari inhibitortersebut di atas yang dicirikan dengan tunasnya yangpendek-pendek dan tidak berproliferasi. Disamping itubiakan mempunyai perakaran yang banyak.

sebagai obat penurun panas, penurun tekanan darahtinggi, radang jantung dan radang usus. Untuk per-banyakan in vitro media terbaik yang sudah dihasilkanadalah media dasar MS + BA 0.8 mg/1. Untuk penyim-panan dengan pertumbuhan minimal telah dicoba

penggunaan retardan Absisic Acid (ABA) dan diperolehhasil, biakan yang disimpan pada media yangmengandung ABA 1 mg/1 selama 15 bulan tanpasubkultur tidak menurun daya tumbuhnya bila ditanamkembali pada media regenerasi MS + BA 1 mg/1(Mariska dan Seswita, 1994). Saat ini sedang dicobapenyimpanan biakan pada media MS ditambah inhibitorpaclobutrazol dan ancymidol, setelah disimpan selama 6bulan menunjukkan adanya penghambatan terhadapmultiplikasi dan pertumbuhan tunas yang dicirikandengan tunasnya yang pendek-pendek. Selanjutnyatunas tersebut akan ditanam kembali pada mediaregenerasi untuk mengetahui daya regenerasinya setelahpenyimpanan. Pule pandak sudah disimpan secara invitro selama 5 tahun. Saat ini sedang dipelajari penyimpanan mata tunas melalui enkapsulasi dan ke dalammedia enkapsulasi diberi inhibitor paclobutrazol dan

ancymidol.

2.Pulasari (Alexya stellata aust. Non R. Br)Pulasari merupakan tumbuhan obat yang telah

dikategorikan langka dan perlu dilestarikan. Manfaattumbuhan ini adalah sebagai campuran sebagian besarramuan jamu tradisional, oleh karena itu kebutuhanakan bahan baku simplisia tersebut relatif banyak.Apabila pemanenan tumbuhan tersebut dilakukan terus-menerus maka akan terjadi kepunahan. Sebagai langkahawal pelestarian, telah dilakukan perbanyakan secara invitro dengan hasil terbaik diperoleh dari media dasarMS dan zat pengatur tumbuh BA 3 mg/1 + NAA 0.1mg/1. Pada percobaan penyimpanan dengan mengguna-

kan media dasar MS 1/2 yang diberi inhibitorpaclobutrazol 5 mg/1 merupakan perlakuan yang palingefisien dalam menghambat pertumbuhan biakan (Gatiet al, 1994). Pulasari merupakan tumbuhan obat yangpaling lama disimpan secara in vitro yaitu 7 tahun.

3.Ingu (Ruta angustifolia (L) Pers.)Ingu merupakan tumbuhan yang termasuk dalam

kategori langka sehingga perlu upaya pelestariannya.Manfaat tanaman ini sebagai obat kejang, obat antiketombe dan penyakit gudig. Pada percobaan perbanyakan melalui kultur in vitro dengan menggunakan

media dasar MS 3/4 ditambah BA 1 mg/1 dapatdihasilkan tunas sebanyak 13.4 (Husni et al, 1994)sedangkan dengan menggunakan eksplan kalus darimedia MS + BA 0.3 mg/1 + 2,4-D 0.1 mg/1 dapatdihasilkan rata-rata jumlah tunas adventif sebanyak 24.8(Gati dan Pumamaningsih, 1994). enyimpanan dengan

media MS + ABA 2 mg/1 tidak menunjukkan adanyapenghambatan terhadap daya multiplikasi tunas pada

Gati, E., I. Mariska dan Yelnititis. 1994. Konservasi in vitrotanaman obat langka pulasari melalui carapertumbuhan minimal. Makalah dalam SimposiumPenelitian Bahan Obat Alami.Balittro. 24- 25Nopember. Bogor.

Gati, E. dan R. Purnamaningsih. 1994. Mikropropagasi daundewa melalui kultur in-vitro.Makalah dalam SimposiumPenelitian Bahan Obat Alami VIM. Balittro 24-25Nopember. Bogor.

Gati, E. Dan R. Purnamaningsih. 1995. Respon jaringanTalinum sp pada media dasar MS dan Monnier.Makalah dalam Simposium Nasional I Tumbuhan Obatdan Aromatika. DPI. 10-12 Oktober. Bogor.

Heshaw, G.G. and J.F. Ohara. In vitro approach to theconsercvation and utilization of global plantgenetik resources, p. 219 - 240. In Mantell and Smith(Eds.). Plant Biotechnology. Cambridge UniversityPress. London.

Hu, C.Y. and P.J. Wang. I983. Meristem, shoot tip and budculture, p. 177-227. In. D.A. Evans, W.R. Sharp, P.V.Amiroto and Y. Yamada (Eds.). Handbook of Plant Cellculture Vol I. Techniques for propagation andBreeding. Macmilan publishing New York.

Husni, A., E. Gati dan I. Mariska. I994. Perbanyakan klonaltanaman obat langka inggu melalui kultur jaringan.Makalah dalam Seminar Hasil Penelitian danPengembangan Bioteknologi II. Puslitbang BioteknologiLIPI. 6 - 7 September. Bogor.

Irawati. I990. Pelestarian plasma nutfah melalui kulturjaringan. Makalah dalam Latihan Bioteknologi KulturJaringan, Balittro 12-24 Maret. Bogor.

James, E. I983. Low temperature preservation of living cells,p. 163-187. In. S.H. Manthell and H. Smith (Eds.).Plant Biotechnology. Cambridge University press.London.

Kristina, N.V., A. Husni dan E. Gati. I994. Propagasitanaman adas secara in vitro. Makalah dalam SeminarNasional Kelompok Kerja nasional Tumbuhan ObatBrotowali dan Adas.16-17 Maret. Jakarta.

Mariska, I. dan D. Seswita. 1994. Pengaruh lamapenyimpanan dan zat penghambat terhadap dayaregenerasi biakan pule pandak. Makalah dalamSeminar Hasil Penelitian dan PengembanganBioteknologi II. Puslitbang Bioteknologi LIPI. 6-7September. Bogor.

Mariska, I. dan E. Gati. I993. Perbanyakan tanamantempuyung melalui kultur jaringan. Makalah dalamSeminar POKJANAS TOI . Penggalian pelestarianpengembangan dan pemanfaatan tumbuhan obattempuyung dan saga.manis. Balitro. 13-14 Januari .Bogor.

Mariska, I. E. Gati dan D. Sukmadjaja. 1991. Upayapelestarian tumbuhan obat langka Purwoceng(Pimpinella pruatjan. Molk.) Makalah dalam SeminarPelestarian Pemanfaatan Tumbuhan dari Hutan TopisIndonesia. Jurusan Konservasi Sumberdaya hutan.Fak. Kehutanan, IPB.31 Mei. Bogor..

Nitche, W. I983. Germplasm preservation, p. 282 - 805.In. D.A. Evans, W.R. Sharp, P.V. Amiroto and Y.

Amzu, E dan Haryanto. I990. Pelestarian PemanfaatanTumbuhan Obat di Indonesia. Hal 13-26 Dalam E.A.M.Zuhud (Ed.). Pelestarian Pemanfaatan Tumbuhan Obatdari Hutan Tropis Indonesia. Jurusan KonservasiSumberdaya Hutan Fak Kehutanan IPB. Bogor.

Bhojwani, S. S. and M.K. Razdan. 1983. Plant TissueCulture. Elsevier. Amsterdam. 502 p.

Obat Alam.

DAFTAR PUSTAKA

Anonimus. 1989.Vandemekum BahanDepartemen Kesehatran Rl. 309 hal.

KESIMPULAN

Pemakaian teknik kultur in vitro mempakan salah

satu teknologi pilihan yang baik untuk menunjangprogram pelestarian tumbuhan obat.

Metoda yang terbaik untuk penyimpanan, baikdalam keadaan tumbuh maupun pertumbuhan minimaltersebut berbeda tergantung jenis tumbuhan. Penyimpanan dengan cara pertumbuhan minimal lebih efisienkarena siklus pembahaman dapat diperpanjang.

Media dasar MS umumya dapat digunakan baikuntuk perbanyakan maupun penyimpanan secara in

vitro.Setelah masa penyimpanan selama 1 sampai

dengan 7 tahun daya regenerasinya tidak menumn dansecara visual penampakan bibit dimmah kaca tidak

berbeda dengan pohon induknya.

PEMANFAATAN KULTUR IN VITRO

Aplikasi bioteknologi kultur in vitro di bidangpertanian semakin berkembang untuk memperoleh bibityang seragam dalam jumlah banyak dengan waktu yangrelatif singkat (perbanyakan .vegetatif tanaman). Hal inidapat mengatasi masalah perbanyakan vegetatif secarakonvensional yaitu bahan tanaman yang diperlukanhams banyak, sehingga dapat merusak pohon induk.Terobosan bam di bidang genetika seperti rekayasagenetika meliputi modifikasi dan kontruksi gen bamakan sangat membantu pemulia tanaman konvensionalsehingga akan dihasilkan teknik pemuliaan tanaman

yang lebih cepat.Manfaat teknik kultur in vitro selain untuk

perbanyakan vegetatif antara lain untuk mendapatkantanaman bebas vims, produksi senyawa sekunder,mendapatkan tanaman transgenik, penyimpanan plasmanutfah dan mendapatkan tanaman melalui rekayasa

genetik.Kemgian kultur in vitro, apabila bahan yang

digunakan sebagai sumber eksplan bempa kalus yangdisimpan dalam waktu lama maka tanaman yangdihasilkan akan mengalami mutasi.

Yamada (Eds.). Handbook of Plant Cell Culture Vol I.Withers. L.A. 1985. Cryopreservation and storage ofTechniques for Propagation and Breeding. Macmilangermplasm. p. 169 - 190. In. D.A. Dixon (Ed.). PlantPublishing New York.Cell Culture. IRL Press. Washington.

Seswita, D., I. Mariska dan E.Gati. 1994. Aplikasi kulturYelnititis dan N.V. Kristina. I994. Perbanyakan klonal melaluijaringan untuk perbanyakan klonal tanaman kencur.kultur in vitro tanaman daun encok {PlumbagoMakalah dalam Seminar Nasional VI Tumbuhan Obatzeylanica). Makalah dalam Simposium Hasil-hasilIndonesia. UNPAD. 2 - 3februari. Bandung.Penelitian Tanaman Industri II. Puslitbangtri, 21 - 23

„ •' ^„Nopember. Cipayung Bogor.Sugati. S ; Syamsuhidayat dan J.R. Hutapea. 1991.

Inventaris tanaman obat Indonesia. Dep Kes Rl.Litbangnas. 616 hal.