Isolasi dan karakterisasi kolagen asam-larut dari sisik ikan laut asal Jepang dan Vietnam.

Abstrak

Asam-larut kolagen (ASC) berhasil diekstrak dari sisik ikan Lizard (Saurida Spp.) Dan

makarel kuda (Trachurus japonicus) asal Jepang dan Vietnam dan ikan mullet abu-abu (Mugil

cephalis), ikan terbang (Cypselurus melanurus) dan yellowback seabream (Dentex tumifrons)

asal Jepang. Hasil ASC sekitar 0,43-1,5% (berdasarkan berat kering), tergantung pada jenisnya.

Profil SDS-PAGE menunjukkan bahwa ASCs yang kolagen tipe I terdiri dari dua rantai yang

berbeda, a1 dan a2, serta abcomponent. ASC makarel kuda dari Vietnam mengandung tingkat

asam imino lebih tinggi daripada yang dari Jepang. ASC suhu denaturasi (Td) berkisar 26-29 oC,

tergantung pada jenis ikan dan kandungan asam imino (p <0,01). Kelarutan maksimal kolagen

individu diamati pada pH 1-3. Kelarutan kolagen menurun tajam

pada konsentrasi NaCl> 0,4 M, terlepas dari jenis ikan.

1. PENDAHULUANKolagen adalah protein berserat yang membentuk unsur utama pada kulit, tulang, urat

daging dan jaringan ikat lainnya pada hewan darat. Terdapat 29 kolagen genetik yang berbeda hadir dalam jaringan hewan. Diantaranya, kolagen tipe I merupakan yang paling melimpah, dan telah ditemukan secara luas dan diterapkan di berbagai bidang, seperti produk makanan, biomedis dan farmasi, dan industri kecantikan dan kosmetik (Sobral et al, 2001;. Duan, Zhang, Du, Yao, & Konno, 2009).Umumnya, sumber utama kolagen komersial adalah sapi dan babi. Namun, kekhawatiran tentang sapi dan kesehatan babi, seperti munculnya bovine spongiform encephalopathy dan penyakit kaki dan mulut, telah menyebabkan menurunnya pengadaan kolagen mamalia dalam beberapa tahun terakhir (Kittiphattanabawon, Benjakul, Visessaguan, Nagai, & Tanaka, 2005). Oleh karena itu, kolagen ikan adalah alternatif yang tepat untuk kolagen mamalia (Nagai, Araki, & Suzuki, 2002; Nomura, Sakai, Ishii, & Shirai, 1996).

Spesies ikan laut dan produk olahannya adalah bahan makanan yang sangat penting di Jepang (Nagai dan Suzuki, 2000a; Nagai dan Suzuki, 2000b). Ikan Lizard, makarel kuda, ikan mullet abu-abu, ikan terbang dan seabream yellowback adalah bahan baku yang digunakan untuk memproduksi surimiin Jepang (Shimizu, 1987; Yamanaka & Tanaka, 2007). Makarel kuda juga digunakan untuk mempersiapkan sashimi segar mentah dan sushi, yaitu makanan populer di Jepang (Yamanaka & Tanaka, 2007). Di Vietnam, ikan laut juga memainkan peran penting dalam pengembangan seafood sebagai produk ekonomi. Ikan Lizard dan makarel kuda adalah bahan baku yang digunakan untuk memproduksi bakso ikan di Vietnam (CTU, http://www.ctu.edu.vn/colleges/aquaculture/aquafishdata. Diakses 31.01.13). Namun, selama pengolahan ikan, sejumlah besar produk sampingan, seperti kulit, sisik dan tulang, yang menyumbang 50-70% dari berat ikan, dibuang (Kittiphattanabawon et al., 2005). Pemanfaatan limbah laut, termasuk timbangan, diperlukan dari sudut pandang konservasi lingkungan dan pengembangan industri-industri baru.Kolagen dari sisik ikan mas (Cyprinus carpio) (Duan et al., 2009), melihat goatfish emas (Parupeneus heptacanthus) (Matmaroh, Benjakul, Prodpran, Encarnacion, & Kishimura, 2011), sarden (Sardinop melanostictus), seabream merah (Pagrus utama) dan Bass Jepang (Lateolabrax japonicus) (Nagai, Izumi, & Ishii, 2004) dan redfish laut dalam (Sebastes mentella) (Wang et al., 2008) telah diisolasi dan dikarakterisasi. Dari literatur, dapat diprediksi bahwa kolagen dari berbagai berbeda jenis ikan dalam komposisi molekul dan sifat fungsional. Namun, tidak ada informasi yang ada pada kolagen skala spesies komersial penting di Jepang dan Vietnam, seperti makarel kuda dan ikan kadal. Selain itu, suhu air laut juga dianggap mempengaruhi ikan skala kolagen properties.Jongjareonrak, Benjakul, Visessaguan, dan Tanaka (2005) melaporkan efek suhu lingkungan dan tubuh pada sifat kolagen kulit bigeye kakap. Namun, studi banding dari pengaruh suhu habitat pada sifat kolagen dari sisik ikan kurang. Dengan demikian, tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengkarakterisasi asam-larut kolagen (ASC) dari sisik ikan kadal dan tenggiri kuda tertangkap di Jepang dan Vietnam dan ikan mullet abu-abu, ikan terbang, dan yellowback seabream asal Jepang. Pengaruh suhu lingkungan pada sifat skala ikan juga

dipelajari dengan menganalisis perbedaan antara ikan Lizard dan makarel kuda yang tertangkap di Jepang dan Vietnam.

2. Bahan dan metode

2.1. Persiapan sisik ikan

Sisik ikan kadal (Sauridaspp.), Mullet abu-abu (Mugil cephalis) dan seabream yellowback (Dentex tumifrons) dikumpulkan pada November 2011 di Prefektur Miyazaki, Jepang. makarel kuda (Trachurus japonicus) dan ikan terbang (Cypselurus melanurus) yang dikumpulkan pada Januari 2012 di Prefektur Nagasaki dan Prefektur Chiba, Jepang, masing-masing. Sisik dari ikan kadal dan makarel kuda juga dikumpulkan dari sebuah perusahaan makanan laut beku di bulan Januari, 2012 di Nha Trang Kota dan Provinsi Kien Giang, Vietnam, masing-masing. Timbangan yang diperoleh di Jepang diangkut ke laboratorium kami di bawah kondisi es, dan sampel di Vietnam dibekukan sebelum airfreighted dalam kondisi beku. Timbangan dicuci dengan air suling dingin sebelum dipotong-potong kecil dengan gunting, ditempatkan dalam kantong plastik dan kemudian disimpan di? 20? C sampai digunakan. Waktu penyimpanan adalah 3 bulan atau kurang.

2.2. Penentuan protein dan abu isi

Kadar air, abu dan protein isi sisik ikan laut dianalisis sesuai dengan metode theAOAC (2000). Konversi faktor 5.95 digunakan untuk menghitung kadar protein (Wang et al., 2008).

2.3. Ekstraksi kolagen dari sisik ikan

Kolagen diekstrak mengikuti metode dari Nagai dan Suzuki (2000a) dengan sedikit modifikasi. Sisik ikan telah dihapus dari protein non-kolagen dengan 0,1 M NaOH selama 6 jam pada sampel / Rasio larutan NaOH dari 1: 8 (w / v). Solusi NaOH berubah setelah 3 jam dan dicuci sepenuhnya dalam air suling dingin sampai pH netral dicapai. Demineralisasi skala dicapai dengan memperlakukan dengan 0,5 M Na2EDTA (acid disodium ethylenediaminetetraacetic garam) larutan (pH 7,5) pada rasio larutan sampel / EDTA 1:10 (w / v) selama 24 jam, dan kemudian dicuci dengan air suling dingin. Setelah pretreatment, timbangan diekstraksi dengan 0,5 M asam asetat di sampel / rasio asam 1: 2.5 (w / v) selama 4 hari. Ekstrak disentrifugasi pada 20,000g selama 1 jam menggunakan mesin centrifuge (Suprema 21; Tomy Seiko Co, Ltd, Tokyo, Jepang). Supernatan asin dengan menambahkan NaCl untuk mendapatkan konsentrasi akhir 2,5 M di hadapan 0,05 M Tris (hidroksimetil) aminomethane pada pH 7,0. Endapan yang dihasilkan dikumpulkan dengan sentrifugasi pada 20,000gfor 30 menit. resultanpelet dilarutkan dalam 0,5 M asam asetat, didialisis 0,1 M asam asetat dan air suling dan kemudian liofilisasi. Semua prosedur persiapan dilakukan pada bawah 4? C.

2.4. Hasil ekstraksi ASC

Hasil kolagen ditentukan mengikuti metode Wang et al. (2008). Isi hidroksiprolin dari diekstraksinya solusi dan ikan skala ditentukan oleh HPLC. Ekstrak hasil (YD) dihitung dengan menggunakan persamaan berikut:

2.5. Analisis komposisi asam amino

Dua puluh miligram ASC dihidrolisis dalam 6 M HCl pada 110? C selama 22 jam di bawah vakum. Hidrolisat dinetralkan dengan 6 M dan 0,6 M NaOH, dan disaring melalui filter membran selulosa (0.45lm; Toyo Roshi Kaisha, Ltd., Tokyo, Jepang). Filtrat adalah digunakan untuk analisis asam amino menggunakan asam amino sistem analisis

2.6. Elektroforesis gel SDS-poliakrilamida (SDS-PAGE)SDS-PAGE kolagen dari sisik ditentukan sesuai dengan yang ofLaemmli metode (1970) dengan sedikit modifikasi. Kolagen sampel dilarutkan dalam larutan asam asetat 0,1 M dan kemudian dicampur dengan penyangga sampel (0,5 M Tris-HCl, pH 6,8, yang mengandung 10% (b / v) SDS dan 20% (v / v) gliserol) dengan adanya 10% (v / v) mercaptoethanol pada rasio penyangga kolagen / sampel 1: 2 (v / v). Setiap sampel (10lg) telah dimuat poliakrilamida yang gel (7,5%) dan dielektroforesis pada arus konstan 20 mA. Setelah elektroforesis, gel itu tetap dengan 25% (v / v) metanol dan 5% (v / v) asam asetat selama 30 menit, kemudian diwarnai dengan 0,1% (w / v) Coomassie biru R-250 di 30% (v / v) metanol dan 10% (v / v) asam asetat dan destained dengan 30% (v / v) metanol dan 10% (v / v)asam asetat. Penanda berat molekul tinggi (Sigma Chemical Co, St Louis, MO, USA) digunakan untuk memperkirakan berat molekul protein.

2.7. Kelarutan kolagen Kelarutan kolagen diukur pada 0,1 M asam asetat di berbagai Konsentrasi NaCl dan pH sesuai dengan metode ofMontero, Jimenez-Colmenero, dan Borderias (1991) dengan sedikit modifikasi. Sampel kolagen dilarutkan dalam 0,1 M asam asetat dengan pengadukan lembut pada 4? C untuk mendapatkan konsentrasi akhir 3 dan 6 mg / ml. Untuk mengetahui pengaruh konsentrasi NaCl pada kelarutan kolagen, 5 ml kolagen solusi (6 mg / ml) dicampur dengan 5 ml NaCl 0,1 M asam asetat pada berbagai konsentrasi (0, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1,0 dan 1,2 M). Campuran diaduk perlahan selama 30 menit pada 4? C dan disentrifugasi pada 20,000gfor 30 menit pada 4 ° C. kadar protein dalam supernatan diukur dengan metode Lowry (Lowry, Rosebrough, Farr, & Randall, 1951) menggunakan serum albumin bovine sebagai standar protein. Kelarutan relatif dari sampel kolagen L.T. Minh Thuy et al. / Food Chemistry 149 (2014) 264-270 265 dihitung dan dibandingkan dengan kontrol (tanpa NaCl) menggunakan persamaan berikut:

Untuk mengetahui pengaruh pH pada kelarutan kolagen, 8 ml kolagen solusi (3 mg / ml) telah disesuaikan dengan baik 6 M HCl atau NaOH 6 M untuk mendapatkan berbagai pH akhir dari 1-10, dan volume akhir larutan diatur hingga 10 ml dengan air suling. Campuran yang diaduk perlahan pada 4 C selama 30 menit, dilanjutkan dengan sentrifugasi pada 20,000g selama 30 menit pada 4 ° C. Kadar protein dalam supernatan diukur dengan metode Lowry (Lowry et al., 1951) menggunakan serum bovine albumin sebagai standar protein. Kelarutan relatif dihitung dibandingkan dengan yang diperoleh pada pH memberikan kelarutan tertinggi menggunakan persamaan berikut

2.8. Penentuan suhu denaturasi kolagen

Suhu denaturasi kolagen dianalisis menggunakan termogram DSC (DSC) sesuai dengan metode of Kittiphattanabawon et al. (2005). ASC dilarutkan dalam 0,1 M larutan asam asetat pada rasio sampel / larutan 1:40 (w / v). Itu campuran diizinkan untuk berdiri selama 2 hari pada 4? C. diferensial yang pemindaian kalorimeter dikalibrasi menggunakan indium sebagai standar. Sampel persis ditimbang ke panci aluminium dan disegel. Panci aluminium dipindai pada rentang 20-50? C, dengan tingkat pemanasan 1? C / menit dan menggunakan N2liquid sebagai media pendingin. Sebuah disegel pan kosong digunakan sebagai referensi. Suhu denaturasi (Td,? C) dan perubahan entalpi (DH, mJ / mg) diperkirakan dari puncak transisi DSC kurva.

2.9. analisis statistik

Semua eksperimen dilakukan dalam rangkap tiga dan data yang dinyatakan sebagai berarti ± standar deviasi. perbedaan antara

tabel 1 Hasil panen ekstraksi kolagen larut asam dari sisik ikan laut

. Data dinyatakan sebagai rata-rata ± standar deviasi (n = 3). Superscripts yang berbeda dalam kolom yang sama menunjukkan perbedaan statistik (p <0,05).

Gambar. Pola 1.SDS-PAGE kolagen larut asam dari skala ikan. Lane 1, penanda berat molekul tinggi; jalur 2, kadal ikan dari Jepang; jalur 3, kadal ikan dari Vietnam; jalur 4, makarel kuda dari Jepang; lane 5, makarel kuda dari Vietnam; jalur 6, mullet abu-abu; jalur 7, ikan terbang; jalur 8, seabream yellowback.

tabel 2 Komposisi asam amino kolagen larut asam dari sisik ikan

Data dinyatakan sebagai rata-rata ± standar deviasi (n = 3). '' ND '' berarti tidak terdeteksi. Superscripts yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan statistik (p <0,05).

Sebuah hasil Menunjukkan jumlah hidroksiprolin dan prolin. variabel dievaluasi menggunakan beberapa tes Duncan. Analisis dilakukan dengan menggunakan software SPSS (SPSS 11.5 for Windows).

3. Hasil dan diskusi

3.1. Komposisi proksimat sisik

Komposisi proksimat sisik ikan laut yang ditampilkan dalam. Data Tambahan (Tabel S1). Kandungan protein sisik makarel kuda dari Jepang (35,5 ± 1,3%) lebih rendah dibandingkan dari Vietnam (44,8 ± 0,4%). Di sisi lain, kandungan protein dalam kadal sisik ikan dari Jepang (46,2 ± 0,1%) lebih tinggi dibandingkan dari Vietnam (44,4 ± 0,5%). Namun, isi abu makarel kuda dan sisik ikan kadal terperangkap di Jepang yang mirip dengan yang dari Vietnam. Protein dan abu yang tinggi kandungan ditemukan dalam skala dari mullet abu-abu (50,4 ± 0,4% dan 47,9 ± 0,6%, masing-masing), ikan terbang (34,7 ± 0,9% dan 50,2 ± 0,3%, masing-masing) dan yellowback laut bream (38,5 ± 0,9% dan 46,7 ± 1,2%, masing-masing), yang mirip dengan sisik dari ikan laut lainnya, seperti redfish laut dalam (56,9% dan 39,4%, masing-masing) (Wang et al., 2008) dan melihat goatfish emas (34,5% dan 54,7%, masing-masing) (Matmaroh et al., 2011). Dengan penambahan 0,5 M larutan Na2EDTA pada pH 7,5 selama 24 jam efektif menghapus konten abu sisik ikan laut (dari 42,7-54,7% menjadi 1,4-1,9%).

3.2. Hasil ekstraksi ASC dari sisik ikan laut

Hasil ASC dari sisik ikan disajikan pada Tabel 1. Hasil dari makarel kuda tertangkap di Jepang adalah yang tertinggi (1,51 ± 0,01%) sedangkan dari mullet abu-abu adalah yang terendah (0.43 ± 0,02%). Hasil panen dari makarel kuda dan ikan kadal tertangkap di Jepang (1,51 ± 0,06% dan 0,79 ± 0,01%, masing-masing) yang lebih tinggi dibandingkan dari Vietnam (0,64 ± 0,02% dan 0,69 ± 0,01%, masing-masing). Hasil panen ASC dalam penelitian ini (0,43-1,51%) jauh lebih kecil dari redfish laut dalam (6,8%) (Wang et al., 2008)

Gambar. Kelarutan 2.Relative kolagen larut asam dari skala ikan pada berbagai konsentrasi NaCl. (a) ikan Lizard dan makarel kuda dari Jepang dan Vietnam. (b) abu-abu mullet, yellowback ikan seabream dan terbang.

Dengan demikian, ASC yield tampaknya tergantung pada jenis ikan dan struktur kolagen (Duan et al., 2009).

3.3. Komposisi asam amino

Komposisi asam amino dari ASC diperlihatkan pada Tabel 2. Glycine, yang paling berlimpah ditemukan asam amino dalam kolagen, menyumbang dari 33,2% menjadi 34,4% dari total asam

amino, tergantung pada spesies. ASCs dari sisik ikan sampel terutama terdiri dari alanin, prolin, asam glutamat dan hidroksiprolin, mirip dengan kolagen lain spesies ikan (Bae et al, 2008;.. Wang et al, 2008). Tidak ada tryptophan dapat dideteksi dalam semua sampel kolagen. konten metionin (31-38 residu per 1.000 residu) agak lebih tinggi dibandingkan dengan penelitian lain (Bae et al, 2008;.. Wang et al, 2008; Duan et al., 2009). Isi asam imino (prolin dan hidroksiprolin) ASC (berkisar 165-178 residu per 1.000 residu) agak berbeda dengan yang dari skala dari laut dalam redfish (Wang et al., 2008), melihat goatfish emas (Matmaroh et al., 2011) dan ikan mas (Duan et al., 2009), yang berkisar dari 160 hingga 192 residu per 1.000 residu. Kandungan asam imino adalah faktor penting dalam memperkirakan stabilitas termal kolagen. Kimura, Zhu, Matsui, Shijoh, dan Takamizawa (1988) dijelaskan bahwa kandungan asam imino terkait dengan suhu habitat ikan. ASCs dari jenis ikan yang menghuni lingkungan yang dingin memiliki imino kandungan asam lebih rendah daripada mereka yang berasal dari ikan yang mendiami lingkungan yang hangat (Bae et al., 2008). Skala makarel kuda dari Jepang (Nagasaki Prefecture) dan Vietnam (Kien Giang Province) dikumpulkan pada bulan Januari 2012. Suhu air dicatat untuk lepas pantai Nagasaki saat ini adalah sekitar 15-16? C (JMA, http://www.data.jma.go.jp. Diakses 20.12.12), sedangkan untuk offshore Kien Giang Province adalah 26-28 CIMH, http: // www. imh.ac.vn/c_tt_chuyen_nganh/cb_thongbao_khihau. Diakses 20. 12.12). Perbedaan suhu air dapat menjadi alasan untuk kandungan asam imino rendah ASC dalam skala makarel kuda dari Jepang (165/1000 residu) dibandingkan dengan yang dari Vietnam (175 / 1000 residu). Sisik ikan kadal dikumpulkan pada bulan November 2011 di Prefektur Miyazaki, Jepang dan pada bulan Januari 2012 di Nha Trang, Vietnam. Suhu air laut berbeda minimal

Gambar. 3.Pengaruh pH pada kelarutan ASC dari skala ikan. (a) ikan Lizard dan makarel kuda dari Jepang dan Vietnam. (b) Abu-abu mullet, seabream yellowback dan ikan terbang.

antara dua lokasi (24-25? C di Prefektur Miyazaki di November 2011 (JMA, http://www.data.jma.go.jp. Diakses 20.12.12) dan 25-26 C di Nha Trang City pada Januari 2011 (IMH, http://www.imh.ac.vn/c_tt_chuyen_nganh/cb_thongbao_khihau. Diakses 20.12.12)). Ini mungkin menjadi alasan untuk isi asam imino hampir identik dari ASC di sisik ikan kadal dari Jepang dan Vietnam (170 dan 168/1000 residu, masing-masing).

3.4. Analisis SDS-PAGE dari ASC

Analisis SDS-PAGE pola protein ASC dalam kondisi mengurangi ditampilkan inFig. 1. Pola SDS-PAGE menunjukkan bahwa semua ASCs terdiri dari dua differentachains, anda2 a1, serta ab komponen, dan tidak ada perbedaan dalam pola antara spesies. Dari pola elektroforesis dan mobilitas kolagen, ia menyarankan agar semua ASCs yang tipe I kolagen (terdiri dua differentachains, a1 anda2 dan kepadatan ofa1 lebih tinggi dari a2). ASCs dari skala spesies laut lainnya, termasuk sarden, seabream merah, seabass Jepang (Nagai et al., 2004), redfish laut dalam (Wang et al., 2008) dan melihat goatfish emas (Matmaroh et al., 2011), juga telah diklasifikasikan sebagai kolagen tipe I.

3.5. Kelarutan kolagen

3.5.1. Pengaruh konsentrasi NaCl pada kelarutan kolagen

Kelarutan ASC pada konsentrasi NaCl yang berbeda ditunjukkan pada Gambar. 2a dan b. Semua sampel kolagen menunjukkan perilaku kelarutan yang sama. Semua ASCs menunjukkan kelarutan tinggi pada konsentrasi NaCl dari 0.2- 0,4 M (75,14-100%). Kelarutan semua sampel menurun tajam dengan konsentrasi NaCl> 0,4 M. Hal ini dapat dijelaskan sebagai berikut: pada

konsentrasi NaCl yang tinggi, kelarutan menurun dengan meningkatkan interaksi hidrofobik-hidrofobik antara rantai protein, menyebabkan curah hujan protein (Damodaran, 1996).

3.5.2. Pengaruh pH pada kelarutan kolagen

Pengaruh pH pada kelarutan ASCs di 0,1 M asam asetat adalah ditunjukkan pada Gambar. 3a dan b. Semua ASCs menunjukkan kecenderungan yang sama; ta men menunjukkan kelarutan tinggi pada pH asam (1-5). Namun, masing-masing ASCs menunjukkan kelarutan maksimal di berbagai pH tergantung pada spesies ikan. ASCs kadal ikan dari Jepang, ikan terbang, dan kuda makarel dari Vietnam menunjukkan kelarutan tertinggi pada pH 2, sedangkan kelarutan tertinggi makarel kuda ASC dari Jepang diamati pada pH 1. Abu-abu mullet ASC mencapai solubil maksimum

Gambar 4. Thermograms DSC ASC dari sisik ikan laut dalam 0,1 M asam asetat

pada pH 3, serupa dengan kadal ikan dari Vietnam dan seabream yellowback. Kelarutan menurun secara drastis dalam kisaran pH 7-10, terlepas dari spesies. Hal ini menunjukkan bahwa pH ASC mencapai pI dalam kisaran ini, yaitu, total muatan bersih ASC, menjadi nol, sehingga curah hujan protein (Jongjareonrak et al., 2005). Sebaliknya, pasukan tolakan antara residu dibebankan protein molekul lebih besar dari kekuatan menarik pada pH lebih rendah dari pI, sehingga solubilisasi protein (Damodaran, 1996).

3.6. Suhu denaturasi kolagen

Transisi termal dari ASC dari sisik ikan laut ditunjukkan pada Gambar. 4. Suhu Denaturasi adalah indeks penting untuk mengevaluasi stabilitas termal dari kolagen. Dengan menggunakan DSC untuk mengukur aliran panas endotermik, suhu denaturasi kolagen dapat dihitung.

Ikan kadal dari Jepang dan Vietnam menunjukkan ASCTd yang sama, 27,6 C (DH = 0,44 mJ / mg) dan 27,4? C (DH = 0,42 mJ / mg), masing-masing. Makarel kuda dari Jepang memiliki Td dari 26,1 C (DH = 0,29 mJ / mg), yang lebih rendah dari itu dari Vietnam (28.1 C, DH = 0,59 mJ / mg). Secara umum, Tdof kolagen dari laut sisik ikan sekitar 26-29 C, menunjukkan bahwa kolagen ikan umumnya kurang termal stabil dari kolagen mamalia (Tdabout 41 C) (Burjanadze, 1992). Hasil ini mirip dengan yang dilaporkan untuk kolagen dari sisik laut dalam redfish (17,7? C) (Wang et al., 2008) dan skala ikan mas (sekitar 28? C) (Duan et al., 2009). Banyak laporan telah berfokus pada hubungan antara termostabilitas kolagen dari ikan laut dan asam imino konten (hidroksiprolin dan prolin) (Bae et al, 2008;.. Kittiphattanabawon et al, 2005). Ketahanan panas kolagen adalah dikenal meningkat dengan imino kandungan asam (Wong, 1989). Hasil kami juga menunjukkan bahwa hubungan dekat ada antara suhu denaturasi dan imino kandungan asam dari ASC (y = 3.9x + 62,7, r 2 = 0.78, p <0,01, n = 7), dimana x adalah suhu denaturasi (C) dan Y merupakan kandungan asam imino (residu / 1000 residu). Selain itu, stabilitas termal kolagen tidak hanya tergantung pada kandungan asam imino tetapi juga berhubungan langsung dengan suhu lingkungan dan tubuh spesies ikan (Rigby, 1968). Secara umum, kolagen didenaturasi dengan gelatin bila digunakan sebagai bahan makanan dalam industri makanan. Suhu denaturasi rendah kolagen skala diamati dalam penelitian ini memungkinkan untuk ekstrak gelatin pada suhu rendah dibandingkan dengan mamalia gelatin. Ini mungkin menjadi keuntungan ekonomi bagi menggunakan skala ikan sebagai bahan baku gelatin.

4. Kesimpulan

ASC dapat diisolasi dari skala ikan laut dari Jepang dan Vietnam. Semua kolagen diekstrak dari sisik ikan laut dalam Studi yang diidentifikasi sebagai kolagen tipe I. Sebuah korelasi antara tahan panas kolagen dan asam imino konten ditunjukkan. Kandungan asam imino di ASC dari sisik ikan laut berbeda menurut spesies dan suhu habitat. hasil ini menyarankan kolagen dapat diperoleh secara efektif dari limbah pengolahan beberapa ikan laut komersial dari Jepang dan Vietnam, dan memiliki potensi sebagai alternatif realistis untuk kolagen mamalia.