ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID
description
Transcript of ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID
ISOLASI DAN ELUSIDASI STRUKTUR PARSIAL FLAVONOID
Tujuan:Mahasiswa mampu melakukan:1. Ekstraksi, Fraksinasi, dan Isolasi Flavonoid.2. Identifikasi struktur parsial
Yang harus dipahami terlebih dahulu:Struktur, golongan, tata nama dan sifat
fisikokimianya.
Latihan:
1. Berilah penamaan flavonoid di bawah ini.2. Bagaimana polaritas flavonoid di bawah ini.3. Pelarut apa yg Sdr gunakan untuk menyari
flavonoid di bawah ini. (A) (B)
Alat dan Bahan
Lihat di buku petunjuk praktikum farmakognosi fitokimia
Prosedur KerjaPekan ke-1Pembuatan serbuk Pekan ke-2Infundasi simpan 2 minggu 4 derajad CPekan ke-3Lakukan hidrolisis sebagian, pisahkan glikon dan aglikon, simpan di
flakon.Pekan ke-4Identifikasi dgn KLT dan KKT bentuk pitaPekan ke-5Elusidasi struktur parsial flavonoid dengan spektro
PEMBUATAN SERBUK(Pekan ke-1)
Daun segar
Dikeringkan di bawah sinar matahari, ditutup kain hitam
Diserbuk, dihancurkan dengan diremas remas dengan tangan atau dihancurkan dengan stamper
Daun kering Serbuk daun kering
ditimbang
Ekstraksi dengan Infundasi(Pekan-2)
1
2 3
4
5
Pembahasan setelah infundasi
1. Senyawa apa yang Sdr sari dari daun ketela pohon?
2. Mengapa melakukan penyarian dengan air panas dengan metode infundasi?
3. Mengapa senyawa rutin dapat diperoleh setelah dimasukkan dalam almari es?
4. Bagaimana struktur senyawa rutin?
Pekan ke-3:Filtrasi untuk memperoleh rutin
Hidrolisis sebagian rutin
Timbang kertas saring
Gunakan kertas saring yang sudah ditimbang untuk melapisi corong buchner.Lakukan filtrasi
Keringkan di dalam oven
Pembahasan setelah dilakukan hidrolisis
1. Apa yang dimaksud dengan hidrolisis?2. Gambarkan proses hidrolisis rutin menjadi
senyawa kuersetin dan gulanya!
Pekan ke-4A. Identifikasi hasil hidrolisis
Lakukan KLT untuk identifikasi Fase diam: Kertas Whatman (dua buah kertas
yang diberi totolan sampel dan pembanding yang siap dielusi)
Fase gerak:1. BAW = 4:1:5, fase atas2. Asam asetat 15 %
Pekan ke-4B. KLT Preparatif
Lakukan KLT preparatif glikosida (sari-1) dengan fase gerak asam asetat 15%,
Sesudah dielusi, keringkan kertas, dilihat di bawah lampu UV 366.
Tandai glikosidanya (yang berwarna coklat gelap), kemudian gunting kecil-kecil (0,5x0,5 cm) dan rendam dalam metanol pa.
Pembahasan setelah identifikasi dengan KLT
1. Fase gerak yang Sdr gunakan apa? Mengapa?2. Detektor untuk flavonoid untuk membentuk
garam apa?3. Detektor senyawa gula dalam KLT apa?
Pekan ke-5Identifikasi struktur parsial flavonoid
Lakukan identifikasi struktur parsial flavonoid dengan pereaksi geser, catat panjang gelombang pada absorbansi maksimal
1. Dalam metanol2. Dalam metanol sesudah ditambah NaOH.3. Dalam metanol ditambah MgSO44. Langkah 3 ditambah HCl5. Langkah 1 ditambah asam borat.
PembahasanIdentifikasi Struktur Parsial
Tuliskan reaksi yang terjadi untuk hasil masing-masing penambahan pereaksi geser.
Beri penjelasan mengapa panjang gelombang pada absorbansi maksimal dapat bergeser?
Pembahasan setelah penentuan struktur parsial
1. Apa nama kromatografi yang penotolannya dalam bentuk pita dengan fase diam yang lebih lebar?
2. Apa fungsi penambahan NaOH pada penetapan struktur parsial flavonoid dengan spektrofotometer.
3. Apa fungsi penambahan NaHCO3, Asam borat, AlCl3, HCl setelah ditambah AlCl3