Jurnal Penelitian Sains Volume 14 Nomer 4(C) 14408

Flavonoid Kuersetin dari Tumbuhan Benalu Teh (Scurullaatropurpureea BL. Dans)

FitryaJurusan kimia, FMIPA, Universitas Sriwijaya, Indonesia

Intisari: Telah diisolasi senyawa avonoid dari tumbuhan benalu teh (Scurulla artropurpurea). Ekstraksi dilakukandengan metode maserasi dan isolasi senyawa avonoid dilakukan dengan teknik kromatogra�. Falvonoid hasil isolasiberupa serbuk amorf berwarna kuning dengan titik leleh 177-179�C. Analisis spektrum UV menunjukkan �max pita I(348 nm) dan pita II (255 nm). Pereaksi geser NaOH, NaOAc, NaOAc/asam borat, AlCL3 dan AlCL3/HCl menunjukkanbahwa senyawa avonoid tersubstitusi pada 3,3', 4', 5,7 pentahidroksi avon. Analisis spectrum IR menunjukkan adanyaregang OH (3369 cm�1), regang C-H alifatik (2956 cm�1), regang C=O (1658 cm�1), regang C=C (1606 cm�1) dan ulurC-O (1271-1143 cm�1). Berdasarkan analisis data spektrum UV dan IR dapat disimpulkan senyawa hasil isolasi adalah avonoid 3,3,4,5,7-pentahidroksi avon atau kuersetin.Kata kunci: benalu teh, Scurulla artropurpurea, avonoid

Abstract: The avonoid had been isolated from tea parasite (Scurulla artropurpurea BL). Extraction was done bymaceration methode and isolation of pure compound was done by chromatographic technic. The resulted of isolated avonoid was liked yellow amorf with melting point 177-179�C. UV spectrum analysis showed �max band I (348 nm) andband II (255 nm). The shift reagents of NaOH, NaOAc, NaOAC/boric acid, AlCl3, AlCL3/HCl showed the avonoidsubstituted on 3,3', 4',5,7-pentahydroxy avon. IR spectrum analysis showed that there was stretching of OH (3369cm�1), C-H aliphatic (2956 cm�1), C=O (1658 cm�1), C=C (1606 cm�1), bending of C-O (1271-1143 cm�1). Based onspectroscopic data UV and IR can be suggested that the result of isolation was avonoid 3,3,4,5,7-pentahydroxy avonor quercetine.Keywords: tea parasite, Scurulla artropurpurea, avonoidE-mail: �trya y@yahoo.com

Oktober 2011

1 PENDAHULUAN

Benalu teh adalah salah satu tanaman parasityang biasa digunakan dalam ramuan-ramuan

tradisional. Sebagai tanaman parasit, benalu tidakbanyak dimanfaatkan, hal ini berkaitan dengan sifatdari parasit benalu yang dapat merusak tanamaninang, sementara sebagai salah satu tanaman obat,benalu juga mempunyai peranan yang tidak kecil [1].Secara tradisional benalu digunakan antara lain se-bagai obat batuk, kanker, diuretik, penghilang nyeridan perawatan setelah persalinan [2]. Ekstrak be-nalu teh spesies Scurulla atropurpurea mengandung16 bahan bioaktif yang terdiri dari enam senyawaasam lemak, dua santin, dua glikosida avonol, satuglikosida monoterpen, satu glikosida lignan, dan em-pat avon [3].Benalu teh yang berasal dari spesies Scurulla atrop-

urpurea BL. Dans merupakan tanaman parasit padapohon teh (Thea sinensis L). Sebenarnya, benalu sejak

zaman dahulu telah digunakan untuk mencegah danmengobati berbagai penyakit, untuk mengobati sakitpinggang dan jamu pasca melahirkan, untuk mengob-ati kanker. Benalu teh kering yang direbus airnya da-pat diminum untuk menyembuhkan penyakit kankerrahim dan jenis kanker lainnya. Pasien penderitakanker yang diberi ekstrak benalu dari Viscum albummenunjukkan perbaikkan pada DNA dalam limfositdan sel kekebalan tubuh.Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian yang

lebih intensif sehingga potensi benalu teh sebagai ba-han baku obat dapat lebih dikembangkan. Maka padapenelitian ini diisolasi dan dikarakterisasi senyawa avonoid dari ekstrak metanol tumbuhan benalu teh.Tahap awal isolasi senyawa avonoid dari tumbuhan

benalu teh dilakukan dengan metode maserasi meng-gunakan pelarut metanol. Pemisahan dan pemurniansenyawa dilakukan dengan teknik kromatogra� kolomvakum dan kromatogra� kolom gravitasi. Penentuankemurnian senyawa hasil isolasi dilakukan dengan kro-

c 2011 FMIPA Universitas Sriwijaya 14408-33

Fitrya/Flavonoid Kuersetin dari . . . Jurnal Penelitian Sains 14 4(C) 14408matogra� lapis tipis dan penentuan titik leleh. Identi-�kasi senyawa hasil isolasi dilakukan dengan spektrofo-tometer ultraviolet dan spektrofotometer inframerah.

2 METODOLOGI PENELITIAN2.1 Alat dan BahanPeralatan yang digunakan terdiri dari seperangkatalat destilasi, rotary evaporator R-114 Buchi dengansistem vakum Buchi B-169, chamber, kolom kro-matogra� gravitasi, kolom kromatogra� vakum, ner-aca analitik, berbagai alat gelas yang biasa digunakandi laboratorium, lampu UV, spektrofotometer UV,spektrofotometer IR, alat pengukur titik leleh FischerJhon Melting Point.Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah

bubuk kering benalu teh, metanol teknis, etil asetatteknis, n-heksan teknis, metilen klorida teknis, asetonteknis, plat KLT silika gel G 60 F254, silika gel G 60(70-230 mesh), silika gel G 60 (230-400 mesh), seriumsulfat.

2.2 Prosedur PenelitianEkstraksi dan isolasi. Benalu teh dikumpulkandari perkebunan teh Pagar Alam Sumatera Selatan.Sampel dikeringanginkan kemudian dihaluskan hinggamenjadi serbuk kering. Bubuk kering benalu tehsebanyak 1 kg dimaserasi dengan metanol sebanyak3 � 2; 5 liter. Maserat dipekatkan dengan rotary eva-porator hingga diperoleh ekstrak kental metanol se-banyak 20 g.Pemisahan senyawa-senyawa yang terdapat dalam

ekstrak kental metanol dilakukan kromatogra� kolomcair vakum dengan menggunakan silika gel G 60 (230-400 mesh) sebagai fase diam. Sampel dipreabsorbsidengan silika gel G 60 (70-230 mesh) sebanyak 20 gramkemudian digerus hingga homogen dan kering. Sampeldimasukkan ke dalam kolom lalu dielusi menggunakanpelarut dengan kepolaran meningkat (n-heksan:etilasetat) dengan perbandingan 9:1 sampai 0:10, eluat di-tampung dalam vial yang masing-masing berisi �100mL. Vial-vial yang memberikan pola noda yang samapada KLT yang dimonitor dengan sinar UV pada pan-jang gelombang 254 nm atau dengan pereaksi penam-pak noda serium sulfat, dikelompokkan dalam satufraksi. Pemisahan ini menghasilkan 5 fraksi yaitufraksi A, B, C, D dan E. Fraksi E menunjukkan nodautama setelah cek KLT, sehingga fraksi E dipisahkanlebih lanjut.Fraksi E sebanyak 5 gram dipreabsorbsi, kemu-

dian dipisahkan dengan kromatogra� kolom gravi-tasi dengan menggunakan silika gel G 60 (70-230mesh) sebagai fase diam, kemudian dielusi denganmtc:aseton:metanol (6,5:3:0,5). Eluat ditampung

dalam vial, dengan masing-masing vial berisi �10 mL.Pemisahan ini menghasilkan 6 fraksi yaitu E1-E6.Pemisahan lebih lanjut dengan kolom kromatogra�

gravitasi dilakukan pada fraksi E4 yang memberikannoda berwarna kuning pada KLT setelah disem-prot dengan pereaksi penampak noda serium sulfat.Fraksi E4(2,5 gram) yang sudah dipreabsorbsi dielusimenggunakan eluen mtc:aseton:metanol (6,5:3:0,5 -6:3,5:0,5) Pemisahan ini menghasilkan 3 fraksi (E4;1- E4;3), Fraksi E4;2 memberikan indikasi adanya nodautama dan juga memberikan jumlah yang cukup.Fraksi E4;2 sebanyak 2 gram dipreabsorbsi kemudiandielusi dengan mtc:aseton:metanol dengan perbandi-ngan 6.5:3:0,5 - 6:3,5:0,5 diperoleh 3 fraksi (E4;2;1 -E4;2;3) dari pemisahan ini. Pola noda fraksi E4;2;2yang dilihat pada sinar UV menunjukkan bahwafraksiini sudah terdiri dari satu noda. Fraksi E4;2;2 yangdihasilkan dari pemisahan fraksi membentuk kristal,pola noda kristal fraksi E4;2;2 merupakan noda utama(F1). Dari hasil KLT dengan berbagai macam eluenternyata sudah menghasilkan satu noda.

Uji kemurnian dan identi�kasi senyawa hasilisolasi. Kemurnian senyawa hasil isolasi diuji de-ngan KLT dan uji titik leleh. Senyawa hasil isolasidikatakan murni jika memperlihatkan satu noda padapola KLT dengan berbagai variasi campuran eluen danmemperlihatkan range titik leleh yang sempit (< 2�C).Senyawa murni dikarakterisasi dengan spektrofotome-ter UV, spektrofotometer Inframerah, untuk mengi-denti�kasi struktur senyawa avonoid hasil isolasi.

3 HASIL DAN PEMBAHASANFraksi E4;2;2 (F1) membentuk kristal dan memperli-hatkan pola noda utama. Uji kemurnian dilakukandengan kromatogra� lapis tipis (KLT) menggunakaneluen yang berbeda yaitu mtc: aseton: metanol (6,5:3,5: 0,5), mtc: aseton (2: 8) dan mtc: metanol(8,5:1,5), masing-masing mempunyai harga Rf 0,5. 0,7dan 0,5 (Tabel 1). Hasil KLT menunjukkan nodatunggal pada lampu UV dan berwarna kuning sete-lah diberi pereaksi penampak noda serium sulfat padaplat KLT (Gambar 1).

Tabel 1: Data KLT senyawa hasil isolasi (F1) denganberbagai eluen

MTC Aseton Metanol Rf KLT

6 3,5 0,5 0,5 A2 8 0 0,7 B8,5 0 1,5 0,5 C

Uji kemurnian kristal F1 hasil isolasi dengan berba-gai eluen menunjukkan noda tunggal, sehingga diduga

14408-34

Fitrya/Flavonoid Kuersetin dari . . . Jurnal Penelitian Sains 14 4(C) 14408

Gambar 1: Kromatogram senyawa hasil isolasi denganberbagai eluen

kristal sudah murni. Pengukuran titik leleh kristalsenyawa hasil isolasi memberikan nilai 177-179�C.Hasil ini lebih memperkuat dugaan bahwa kristalsudah murni. Hasil uji �tokimia yang dilakukanterhadap senyawa hasil isolasi dengan logam Mgdan HCl memperlihatkan warna merah. Hal inimengindikasikan bahwa senyawa hasil isolasi tersebutadalah senyawa golongan avonoid.

Identi�kasi senyawa hasil isolasi dengan teknikspektroskopi. Senyawa hasil isolasi (16 mg) berupaserbuk kuning. T.L. 177-179�C memberikan serapanUV �max (log ") pada pita I 348 nm dan pita II 255 nm.Spektrum UV senyawa hasil isolasi (F1) dalam pelarutmetanol menunjukkan serapan maksimal pita I padapanjang gelombang 348 nm yang berasal dari cincinB yang terkonjugasi dengan gugus karbonil menben-tuk sistem sinamoil. Pada pita II serapan maksimamuncul pada panjang gelombang 255 nm yang berasaldari konjugasi sistem benzoil pada cincin A [4]. Initermasuk dalam jarak panjang maksimum avonol de-ngan 3-OH tersubstitusi. Keterangan diatas menun-jukkan bahwa senyawa hasil isolasi F1 adalah avonoidkelompok avonol.Penambahan NaOH pada senyawa hasil isolasi

menyebabkan terjadinya pergeseran batokromik sebe-sar 39 nm (pita I) dengan kekuatan serapan yangmeningkat yang menunjukkan adanya 4'-OH , sertaterbentuknya pita baru pada 338 nm menunjukkanadanya gugus 7-OH. Penambahan pereaksi geserNaOAc menyebabkan pergeseran batokromik 16 nmpada pita II menunjukkan gugus 7-OH. Dan sete-lah penambahan NaOAc+asam borat menyebabkanpergeseran pada pita 1 kearah batokromik sebesar20 nm menunjukkan gugus orto-diOH pada cincin Bkarena pada gugus ini terbentuk kompleks denganasam borat.Penambahan pereaksi geser AlCl3 digunakan un-

tuk menunjukkan terbentuknya kompleks tak tahanasam dengan gugus orto-dihidroksil,terjadi pergeseran

Gambar 2: Spektrum senyawa hasil isolasi dalam metanol(A) dan NaOH (B)

pada pita 1 sejauh 22 nm (pita I) ini mengindikasikanadanya gugus orto-di-OH pada cincin B.yaitu padaposisi C 3' dan C 4' [4]. Penambahan pereaksi geserAlCl?/HCl menunjukkan terbentuknya kompleks taktahan asam antara gugus hidroksi dan keton yangbertetanggaan, terjadi pergeseran sejauh 51 nm (pitaI), mengindikasikan adanya 5-OH. Berdasarkan anal-isa data spektrum UV diduga senyawa F1 adalah go-longan avonoid yang tersubstitusi3,3',4',5 dan 7.Pengukuran serapan senyawa hasil isolasi (F1) de-

ngan spektroskopi IR menunjukkan serapan karak-teristik pada bilangan gelombang sebagaimana ditun-jukkan pada Gambar 4.Spektrum IR senyawa hasil isolasi memberikan in-

formasi adanya puncak serapan gugus hidroksil padabilangan gelombang 3369 cm�1. Gugus hidroksil inimerupakan regang -OH terikat (dapat berikatan hidro-gen), OH terikat terlihat pada bilangan gelombang3450-3200 cm�1 yang membentuk pita lebar denganintensitas yang kuat. Adanya gugus hidroksil inijuga diperkuat dengan munculnya ulur -C-O- pada

14408-35

Fitrya/Flavonoid Kuersetin dari . . . Jurnal Penelitian Sains 14 4(C) 14408

Gambar 3: Spektrum UV hasil senyawa isolasi F1 dalam, NaOAc (C), NaOAc+asam borat (D), AlCl3 (E) danAlCl3/HCl (F)

Tabel 2: Data KLT senyawa hasil isolasi (F1) denganberbagai eluen

�max

Pita MeOH NaOH NaOAc NaOAc+ AlCl3 AlCl3As.Boraks +HCl

I 348 387 352 368 421 399II 255 338 340 260 340 270III 204 271 263 203 274 204

daerah 1272-1143 cm�1. Pita serapan pada bilangangelombang 2956 cm? menunjukkan adanya regang -C-H alifatik dan diperkuat dengan munculnya sera-pan pada 1498-1359 cm? menunjukkan adanya ulur -C-H. Adanya regang -C=O karbonil ditunjukkan olehserapan pada bilangan gelombang 1658 cm�1. Pitaserapan pada bilangan gelombang 1606 cm�1 menun-jukkan adanya regang -C=C-. Pita serapan pada bi-langan gelombang 1574 cm? mengindikasikan bahwasenyawa hasil isolasi merupakan senyawa aromatik,diperkuat dengan munculnya serapan pada bilangan

Tabel 3: Karakteristik gugus-gugus dari spektrum IRsenyawa hasi isolasi F1 (k adalah bilangan gelombang)k (cm�1) Pita Intensitas Gugus Dugaan

3369 Lebar Kuat Regang O-H2956 Tajam Sedang Regang C-H alifatik1658 Tajam Kuat Regang C=O1606 Tajam Kuat Regang C=C1574 Tajam Sedang Regang C=C Ar

1498-1359 Tajam Sedang Ulur C-H1272-1143 Tajam Sedang Ulur C-O

821 Tajam Sedang Ulur C=C-H Ar

gelombang 821 cm�1 mengindikasikan adanya dua Hyang bertetangga dalam cincin aromatik.Berdasarkan spektrum UV dan IR diduga bahwa

senyawa hasil isolasi (F1) merupakan senyawa go-longan avonoid yang tersubstitusi oleh gugus ali-fatik dan gugus karbonil dengan usulan struktur se-bagaimana Gambar 5:

14408-36

Fitrya/Flavonoid Kuersetin dari . . . Jurnal Penelitian Sains 14 4(C) 14408

Gambar 4: Spektrum IR hasil senyawa isolasi F1

Gambar 5: Struktur 3, 3', 4', 5, 7 - pentahidroksi avon(Kuersetin)

4 KESIMPULAN DAN SARAN4.1 KesimpulanSebanyak 16 mg serbuk kuning dengan titik leleh177-179�C telah berhasil diisolasi dari 20 g ekstrakkental metanol tumbuhan benalu teh (Scurulla at-

ropurpurea. BL. Dans). Berdasarkan analisa spek-troskopi dan uji �tokimia diduga senyawa hasil isolasi

adalah 3,3',4',5,7-pentahidroksi avon (Kuersetin) de-ngan struktur diberikan oleh Gambar 5.

4.2 SaranPerlu dilakukan analisa spektroskopi lanjutan denganMS,1H-NMR untuk menentukan secara tepat struktursenyawa hasil isolasi tersebut.

DAFTAR PUSTAKA

[1] Pitojo, S., 1996, Benalu Holtikultura Pengendalian danPemanfaatan, Trubus Agriwidya, Ungaran

[2] Murwani & Subroto, 2001, http;//www. Intisaribenalu-online.com., 18 Nopember 2009

[3] Ohashi et al., 2003, http;//bahan-alam.fa. ac. id., 18Nopember 2009

[4] Markham, K.R., 1988, Cara Mengidenti�kasi Flavonoid,diterjemahkan oleh K. Padmawinata, Edisi II, ITB,Bandung

14408-37