SELEKSI DAN KARAKTERISASI MIKROBA ANTAGONIS

OLEH :M. machmud, M. sudjadi, yadi suryadi

Dipresentasikan :WIJIYONO

SEKOLAH PASCA SARJANAUNIVERSITAS SUMATERA UTARA

LATAR BELAKANG MASALAH

• Berbagai jenis hama patogen yang sulit dikendalikan.

• Kultur tanaman yang tahan hama sulit diperoleh di pasaran

• Pengendalian secara kimia berlebihan dan berkelanjutan

• Pemanfaatan jenis mikroba sebagai bahan aktif bio pestisida

Solusi….Nya..Bagaimana..?

?

Hawar Daun :

Hawar pelepah daun

TUJUAN PENELITIAN

• Untuk mengoleksi dan mengisolasi mikroba antagonis terhadap bakteri Xanthomonas oryzae dan Jamur Rhizoctonia solani

• Untuk mengkatarakterisasi mikroba antagonis• Melakukan preservasi mikroba antagonis yang

dikoleksi

• Menguji viabilitas koleksi mikroba antagonis

KEGIATAN PENELITIAN

• Tempat PenelitianLaboratorium dan rumah kaca diagnostik dan Pengendalian Biologi balai penelitian Bioteknologi dan sumber daya genetik pertanian Bogor

-Tempat Pengambilan sampel :-Bogor, Cianjur, Bandung dan Subang

- Sampel :

Tanah dan air : Diambil disekitar rizosfer yang kena penyakit hawar daun dan hawar pelapah daun.

Tanaman : Tanaman utuh, daun , jerami

Tehnik isolasi

Pengenceran ekstrak tanaman, air, tanah larutan untuk diinokulasikan pada media tanam. Media jamur: PDA ( Potato Dextrosa Agar) Media bakteri dan khamir : NDA ( Nutrient

Dextrosa Agar), Saboroud Agar (SA), King,s B Agar

Inkubasikan selama 24 Jam Bakteri , jamur yang tumbuh di dibiakan murni

secara terpisah pada media agar miring. Identifikasi ciri-ciri mikroba ( Panduan Buku ) :

KARAKTERISASI MIKROBA

Bakteri• Ciri-ciri morfologi sel• Koloni• Fisiologi dan biokimia (Lapage et al.,1970: McGinnis et al., 1974 :

Sly, 1983)

pustaka acuan : bergey’s Manual of Determinative Bacteriology ( Krieg dan Holt, 1984)

JAMUR• Ciri-ciri morfologi hifa• Miselia• Spora• konidia pustaka acuan : Barnett 1960 , Alexopoulous (1962)

POTENSI ANTAGONIS

• POTENSI ANTAGONIS MIKROBA TERHADAP Xanthomonas oryzae dan Rhizoctonia solani :

Zona hambatan pertumbuhan ( Klement et al., 1990)

PRESERVASI MIKROBA

Isolat yang telah diidentifikasi dan karakterisasi disimpan :

Jangka menengah dengan tehnik penyimpanan dalam minyak mineral ( Elliot, 1975 : Sly, 1983 ) pada suhu ruang

Isolat khamir dan jamur di simpan dalam aquades steril

Penyimpanan jangka panjang menggunakan tehnik kering beku ( freeze drying) ( Sly, 1983: Klement et al., 1970)

Uji viabilitas Mikroba

Menumbuhkan mikroba pada medium agar yang sesuai.

Untuk isolat yang disimpan dalam freeze drying , isinya ditambah dengan 0,5ml aquades steril digoyang goyang agar larut.

Ambil larutan suspensi dengan jarum ose steril. Goreskan pada media agar Inkubasikan pada suhu ruang Amati pertumbuhan mikroba setiap hari sampai

tiga hari.

Isolat dalam tabung dengan air steril

• Tabung digoyang agar suspensi mikroba agar rata

• Ambil larutan suspensi dengan jarum ose• Goreskan pada media agar pada cawan petri• Inkubasikan selama 72 jam dan disimpan pada

suhu ruang• Amati pertumbuhan mikroba pada setiap hari.

HASIL DAN PEMBAHASAN

• Tabel 1. Rangkuman hasil isolasi antagonis terhadap Xanthomonas oryzae dan Rhizoctonia solani tahun 2002

Jenis dan nama Mikroba Jumlah Isolat

bakteri

Bacillus subtilis 13

B. Polymixa 5

Pseudomonas fluorescens 7

Jamur

Trichoderma harzianum 16

Khamir

Saccharomyces spp 25

Total 66

Tabel 2. Daftar koleksi isolat bacillus subtilis, B. Polymixa dan Pseudomonas fluorescens tahun 2002

Tabel 3. Daftar Koleksi isolat Saccharomices spp. Tahun 2002. Bogor 2003

Tabel 4. Daftar koleksi isolat trichoderma harzianum tahun 2002

Tabel 5. rangkuman hasil uji viabilitas mikroba antogonis dari koleksi tahun 2001.

Jenis dan nama Mikroba Jumlah Isolat

bakteri

Bacillus subtilis 2

B. thuringiensis 40

Pseudomonas fluorescens 12

Jamur

Trichoderma harzianum 5

Khamir

Saccharomyces spp 2

Total 61

Tabel 6. daftar koleksi isolat Bacillus thuriensis, B subtilis, Pseudomonas fluorescens, Trichoderma harzianum dan saccharomyces cereviciae tahun 2001 yang telah diuji viabilitasnya,

KESIMPULAN

Koleksi dan preservasi mikroba antogonis patogen tanaman pangan pada tahun 2002 memperoleh 66 isolat mikroba yang terdiri atas 25 isolat bakteri ( B. Subtilis, B. polymixa dan P. Flurescens), Isolat jamur T. harzianum dan 25 isolat Khamir Saccharomices spp. Isolat antagonis yang diperoleh dipreservasikan menggunakan teknik kering beku atau dalai tabung reaksi dengan minyak mineral serta disimpan di kulkas atau freezer.

Viabilitas 61 isolat mikroba antogonis koleksi tahun 2001 yang telah disimpan setahun dengan menggunakan teknik kering beku masih tetap baik dan tidak mengalami perubahan ciri-ciri.

SARAN

Koleksi dan prevervasi plasma nutfah mikroba pengendali hama tanaman pertanian perlu dilanjutkan dalam upaya melestarikan biodiversitas mikroba agen pengendali hayati hama tanaman, memperkaya koleksi sumberdaya genetik mikroba, dan menyediakan sumber mikroba bagi pengembangan teknik pengendalian hama penyakit tanaman pertanian yang efektif, efisien dan ramah lingkungan

SEKIAN Terima KASih

Sumber plasma nutfah Mikroba

genetik