dan Lingkungan Untuk Kesehatan -...

Seminar Nasional

Riset Pangan, Obat-Obatan

dan Lingkungan Untuk Kesehatan

iii

“SEMINAR NASIONAL

RISET PANGAN, OBAT-OBATAN,

DAN LINGKUNGAN UNTUK

KESEHATAN”

PROSIDING

Ketua:

Dr. Sutanto, M.Si

Editor:

Prof. Dr. R. Ukun M.S. Soedjanaatmadja

Prof. Dr. Unang Supriatman

Dr. Tri Panji, MS

Diselenggarakan Oleh :

Program Studi Kimia

FMIPA Universitas Pakuan

Jurusan Kimia FMIPA

Universitas Padjadjaran

12 November 2013

Seminar Nasional



v

“SEMINAR NASIONAL

RISET PANGAN, OBAT-OBATAN,

DAN LINGKUNGAN UNTUK

KESEHATAN”

PROSIDING

ISBN

: 978-602-14503-1-4

Tanggal Terbit

: 12 November 2013

Editor : Dr. Sutanto, M.Si, Prof. Dr. R. Ukun

M.S.Soedjanaatmadja, Prof. Dr. Unang

Supriatman, Dr. Tri Panji, MS

Diterbitkan oleh : FMIPA Universitas Pakuan

Jalan Pakuan PO. BOX 452 Ciheuleut Bogor

Telp./Fax. (0251) 8375547

Seminar Nasional



vii

Kata Pengantar

Assalamuala ikum warohmatullohiwabarakatuh

Salam sejahtera bagi kita semua

Puji dan syukur kami panjatkan kehadirat Alloh SWT atas ridho dan inayah-Nya

sehingga prosiding seminar nasional kimia tahun 2013 ini dapat terselesaikan

dengan baik. Prosiding Seminar ini merupakan hasil seminar nasional yang digagas

dan atas kerja bersama program studi kimia FMIPA Universitas Pakuan, Bogor

dengan jurusan Kimia FMIPA Universitas Padjajaran (UNPAD), Bandung dengan

tema: Riset pangan, obat-obatan, dan lingkungan untuk kesehatan”, suatu tema yang

luas tetapi focus yaitu menampung hasil-hasil riset berkaitan dengan kesehatan.

Makalah yang dimuat dalam prosiding ini telah dibahas oleh para mitra bestari

dengan demikian diharapkan dapat menjadi informasi ilmiah yang bermanfaat bagi

dunia riset dan pendidikan umumnya. Selain daripada itu dengan terbitnya

prosiding ini diharapkan dapat memperkaya dokumen ilmiah dari hasil riset di

Indonesia.

Secara khusus ucapan terimakasih kami sampaikan kepada para mitra bestari

yang telah bersedia melakukan telaah karya ilmiah ini, yaitu Prof.Dr.R.Ukun

M.S.Soedjanaatmadja, Prof. Dr. Unang Supratman, dan Dr. Tri Panji, semoga amal

kebaikannya mendapat balasan yang berlipat ganda dari Alloh SWT. Dalam

kesempatan ini pula, panitia mengucapkan terimakasih kepada perusahaan

pendukung diantaranya : PT Berca Niaga Medica; PT Arico Sainsindo, PT Dwi

Prima Rizky; PT. Antam; PT Ditek Jaya; Bank Mandiri Cabang Bogor; juga

kepada para alumni dan ikatan alumni kimia FMIPA Unpak serta pihak lain yang

tak dapat kami sebutkan satu-persatu.

Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.

Wabillahitaufwalhidayah, assalamu alaiukm wr.wb.

Bogor, 12 November 2013

Editor

Seminar Nasional



ix

Sambutan Ketua Pelaksana

Dr. Sutanto, M.Si

Assalamuala ikum warohmatullohiwabarakatuh

Salam sejahtera bagi kita semua

Puji dan syukur kami panjatkan kehadirat Alloh SWT atas

ridho dan inayah-Nya seminar nasional kimia tahun 2013 ini dapat terselenggara

dengan baik. Seminar ini digagasdan atas kerja bersama program studi kimia

FMIPA Universitas Pakuan, Bogor dengan jurusan Kimia FMIPA Universitas

Padjajaran, Bandung. Tema yang diangkat dalam seminar ini adalah: Riset pangan,

obat-obatan, dan lingkungan untuk kesehatan”, suatu tema yang luas tetapi focus

yaitu menampung hasil-hasil riset berkaitan dengan kesehatan.

Seminar ini diikuti oleh lebih dari 60 pemakalah dari berbagai perguruan tinggi

dan lembaga penelitian. Seperti: UNPAD, ITB, UNPAK, UNPAS, UBAYA, STTIF

Bogor, UNAIR, Univ. Pancasila, Biotek-LIPI, Limnologi, BATAN, BPPT, Pusat

penelitian Kimia-LIPI dan sebagainya.

Banyaknya artikel yang dipresentasikan dalam seminar ini menunjukkan bahwa

seminar ini benar menjadi ajang komunikasi ilmiah yang sangat bermanfaat.

Terimakasih kepada seluruh ilmuwan yang bergabung dalam acara ini, semoga

forum ilmiah ini membawa manfaat bagi kita semua.

Dalam kesempatan ini pula, atas nama panitia seminar nasional kimia

mengucapkan terimakasih perusahaan pendukung dana diantaranya : PT Berca

Niaga Medica; PT Arico Sainsindo, PT Dwi Prima Rizky; PT. Antam; PT Ditek

Jaya; Bank Mandiri Cabang Bogor; Rekan-rekan alumni dan ikatan alumni kimia

FMIPA Unpak serta pihak lain yang tak dapat kami sebutkan satu-persatu.

Terimakasih juga disampaikan kepada seluruh panitia, atas kerja kerasnya dan

kerjasamanya dalam acara seminar ini semoga amal kebaikian yang telah diberikan

mendapat balasan yang berlipat ganda dari Alloh SWT. Amin.

Tiada gading yang tak retak, mohon maaf apabila dalam penyelenggaraan

seminar ini terdapat kekurangan. Terimakasih. Selamat melaksanakan seminar.

Wabillahitaufwalhidayah, assalamu alaiukm wr.wb.


Dr. Sutanto, M.Si

Seminar Nasional



xi

Sambutan Dekan FMIPA

Universitas Pakuan

Dr. Prasetyorini, M.S., Dra.

Assalamualaikum warohmatullahi wabarokatuh

Pada kesempatan yang baik ini, marilah kita panjatkan puji

dan syukur ke hadirat Allah swt., karena kita masih diberikan kesempatan,

kekuatan, dan kesehatan untuk melanjutkan ibadah kita, karya kita, serta tugas dan

pengabdian kita dalam upaya mencerdaskan kehidupan bangsa dan negara yang

tercinta melalui kegiatan Seminar Nasional ini. Kegiatan Seminar Nasional ini

terselenggara atas kerjasama yang baik antara Program Studi Kimia Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Pakuan dengan Jurusan Kimia

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Pajajaran. Seminar

Nasional ini rencananya akan diselenggarakan selama 2 hari dengan mengusung

tema ”Pangan, Obat-obatan dan Lingkungan”.

Saya atas nama Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas

Pakuan berharap semoga seminar ini dapat menjadi ajang komunikasi untuk saling

berinteraksi bagi para dosen dan peneliti untuk mengembangkan ilmu-ilmu terkait

yang dapat dimanfaatkan bagi masyarakat yang lebih luas dan kami juga berharap

mudah-mudahan seminar ini juga bukan merupakan kerjasama terakhir yang baru

dimulai dengan jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Padjadjaran. Melalui kesempatan ini saya mengucapkan terimakasih

dan penghargaan kepada Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu pengetahuan Alam

Universitas Padjadjaran Prof. Dr. Budi Nurani Ruchjana beserta rekan-rekan dosen

dari Jurusan Kimia FMIPA-Universitas Padjadjaran.

Mengakhiri sambutan ini, saya atas nama Pimpinan Fakultas Matematika dan

Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Pakuan beserta seluruh sivitas akademika dan

karyawan menyampaikan ucapan selamat mengikuti Seminar Nasional ini semoga

kegiatan ini menambah wawasan bapak dan ibu untuk meneruskan pengabdian

bapak dan ibu sebagai ilmuwan professional dan semoga Tuhan Yang Maha Esa

selalu menyertai kita dan melimpahkan berkah, rahmat, dan hidayahNya kepada

kita semua Terimakasih kepada semua pihak atas kerja kerasnya telah membantu

terselenggaranya seminar ini mudah-mudahan kerja keras yang telah dilakukan akan

mendapatkan balasan yang berlimpah dari Allah swt. Wabillahi taufik wal hidayah,

wassalamualaikum wr wb


Dr. Prasetyorini, MS

Seminar Nasional



xiii

Sambutan Dekan Fmipa

Universitas Padjadjaran

Prof. Dr. Budi Nurani Ruchjana

Assalamualaikum warohmatullahi wabarokaatuh

Selamat pagi dan salam sejahtera

Yang terhormat Bapak Rektor Universitas Pakuan, Ketua Yayasan Pakuan

Siliwangi, Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Universitas Pakuan,

para pembicara tamu, serta undangan sekalian.

Pertama-tama, marilah kita panjatkan puji syukur ke hadirat ilahi karena atas

perkenan-Nya kita diberi kesempatan untuk bertemu dan berkumpul pada Seminar

Nasional ini. Kegiatan Seminar Nasional ini diselenggarakan atas kerjasama antara

Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas

Pakuan dengan Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Padjadjaran. Seminar yang akan dilaksanakan dalam dua hari ini

mengangkat tema ”Pangan, Obat-obatan, dan Lingkungan”.

Saya mengharapkan bahwa seminar ini dapat menjadi wadah bagi para peneliti

untuk saling berinteraksi mengenai hasil penelitiannya dalam rangka untuk

mengembangkan ilmu-ilmu terkait yang dapat dimanfaatkan bukan hanya bagi

kalangan dosen dan peneliti kimia, melainkan juga bagi masyarakat dan para pelaku

industri. Saya sangat berharap kegiatan seminar ini dapat dijadikan sarana untuk

menjalin kerjasama dalam upaya memberdayakan dan melestarikan potensi kimiawi

sumber alam hayati dan non hayati Indonesia.

Saya menyampaikan terima kasih dan penghargaan kepada panitia

penyelenggara atas segala usaha dan upaya yang telah dilakukan dan saya ucapkan

terima kasih kepada semua pihak yang telah mendukung suksesnya acara ini.

Saya ucapkan selamat melaksanakan seminar nasional ini, semoga berjalan

lancar dan sukses.

Wassalamu’alaikum warohmatullahi wabarokaatuh


Prof. Dr. Budi Nurani R.

Seminar Nasional



xv

PANITIA SEMINAR NASIONAL RISET PANGAN, OBAT-OBATAN,

DAN LINGKUNGAN UNTUK KESEHATAN

PANITIA PENGARAH

Pelindung & Pembina

• Dr. Bibin Rubini, M.Pd - Rektor UNPAK

• Dr. Prasetyorini - Dekan FMIPA UNPAK

• Prof. Dr. Budi Nurani R. M.S. - Dekan FMIPA UNPAD

Penanggung Jawab

• Drs. Husain Nashrianto, M.S - Kaprodi Kimia FMIPA UNPAK

• Dr. Euis Julaeha - Ketua Jurusan Kimia FMIPA UNPAD

PENGARAH SAINTIFIK

Tim : Prof. Dr. R. Ukun M.S. Soedjanaatmadja

: Prof. Dr. Unang Supratman

: Dr. Tri Panji, MS

PANITIA PELAKSANA

1. Ketua : Dr. Sutanto, M.Si

2. Sekretaris : Dr. Diana Rakhmawaty Eddy

dan Kesekretariatan : Diana Widiastuti, M.Sc

3. Bendahara : Ade Heri Mulyati, M.Si

4. Publikasi dan Humas : Dr. Dikdik Kurnia

: Yudhie Suchyadi, S.Si

5. Sie Dana dan Usaha : Dr. Anni Anggraeni

: Ani Iryani, M.Si

: Eka Herlina, M.Pd

6. Sie Acara : Judhi Rachmat, Ph.D

: Dr. Tati Herlina

7. Sie Dokumentasi : Tri Aminingsih, M.Si

: Dadang, M.Pd

8. Sie Konsumsi : Farida Nuraini, M.Si

: Ardi Muharini, M.Si

Sem

ina

r N

asi

on

al

Ris

et P

an

ga

n,

Oba

t-O

ba

tan

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk

Kes

eha

tan

xvii

JA

DW

AL

AC

AR

A

Hari

/Tan

ggal:

Kam

is, 27 J

un

i 2013

Wak

tu

Pem

bic

ara

K

egia

tan

/Top

ik

Pen

an

ggu

ngja

wab

/Mo

der

ato

r

07:0

0 –

08:0

0

R

egis

tras

i ula

ng s

eluru

h p

eser

ta

Sek

reta

riat

Pan

itia

Upac

ara

Pem

bukaa

n S

emin

ar

Men

yan

yik

an L

agu K

eban

gsa

an

Indones

ia R

aya

Him

aska

FM

IPA

UN

PA

K

08:0

0 –

08:1

0

Dr.

Suta

nto

L

apora

n K

etua

Pan

itia

Pel

aksa

na

Sem

inar

Dra

. A

ni

Iryan

i, M

.Si

08:1

0 –

08:5

0

Dr.

Bib

in R

ubin

i,

M.P

d/M

ewak

ili

Sam

buta

n R

ekto

r U

NP

AK

Bogor

(sek

alig

us

mem

buka

seca

ra r

esm

i

Sem

inar

)

Dra

. A

ni

Iryan

i, M

.Si

08:5

0 –

09:2

0

Pem

bic

ara

Kunci

(key

note

spea

ker

):

Pro

f. M

asak

azu A

npo,

Vic

e P

resi

den

t/E

xec

uti

ve

Dir

ecto

r, O

saka

Pre

fect

ure

Univ

ersi

ty

Appli

cati

ons

of

Tit

aniu

m O

xid

e-bas

e

Photo

cata

lyst

s as

the

Gre

en a

nd

Sust

ainab

le S

cien

ce a

nd T

echnolo

gy

Pro

f. D

r. U

nan

g S

upra

tman

09:2

0 –

09:3

0

R

ehat

pag

i (M

orn

ing t

ea)

Sek

reta

riat

Pan

itia

09:3

0 –

10:0

0

Pro

f. D

r. H

.O. S

upri

jana,

M.S

c

Pro

duksi

1,3

Dio

leil

-2-p

alm

itoil

gli

sero

l

mel

alui

reak

si e

nzi

mat

ik d

ari

Pal

m

Ste

arin

dan

apli

kas

inya

dal

am f

orm

ula

si

subst

itute

Lem

ak A

ir S

usu

Ibu

Dr.

Tri

Pan

ji, M

.S

10:0

0 –

10:3

0

Dr.

Gan

Chee

Sia

n

Rel

iable

Per

form

ance

for

Support

ing

Hig

h-P

reci

sion D

rug A

nal

ysi

s in

Pro

f. D

r. R

. U

kun M

.S.S

Sem

ina

r Nasio

na

l

Riset P

an

ga

n, O

ba

t-Ob

ata

n

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk K

eseha

tan

xviii

Bio

logical S

amples

10:3

0 –

11:0

0

Ven

katesh

a H

igh T

hro

ughput A

naly

sis of E

merg

ing

Contam

inan

ts in F

ood an

d E

nviro

nm

ent

Pro

f. Dr. R

. Ukun M

.S.S

11:0

0 –

12:0

0

Sesi P

oster atau

2 (d

ua)

oran

g p

embicara tam

u

(dari sp

onso

r)

20 p

oster

Juri

12:0

0 –

13:0

0

M

akan

Sian

g d

an S

holat

13:0

0 –

14:0

0

S

esi Presen

tasi Paralel S

esi I

14.0

0 –

15.0

0

S

esi Presen

tasi Pararel S

esi II

15:0

0 –

15:3

0

Istirah

at dan

Sholat

15:3

0 –

16.3

0

S

esi Presen

tasi Paralel S

esi III

16.3

0 –

17.3

0

S

esi Presen

tasi Paralel S

esi IV

17:3

0 –

17:3

5

P

enutu

pan

18.3

0 - S

elesai

Gala D

inner

Sem

ina

r N

asi

on

al

Ris

et P

an

ga

n,

Oba

t-O

ba

tan

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk

Kes

eha

tan

xix

PR

OG

RA

M P

RE

SE

NT

AS

I (P

ara

lel)

SE

SI

I S

esi

Pa

rale

l I

(13

:00

– 1

4:0

0)

Ru

an

gan

I (

Pan

gan

)

Mo

der

ato

r: D

iana

Wid

iast

uti

, M

.Sc

Ru

an

ga

n I

I (O

bat-

Ob

ata

n)

Mo

der

ato

r: D

r. E

uis

Ju

laeh

a

Ru

an

ga

n I

II (

Lin

gk

un

ga

n)

Mo

der

ato

r: D

r. A

nn

i A

ngg

raen

i

P-0

1

Aid

a W

ula

nsa

ri*,

An

dri

Fad

illa

h M

art

in,

Der

ith

a E

lffy

Ran

tau

da

n T

ri M

uji

Erm

ayan

ti

Per

ban

yak

an B

eber

apa

Akse

si T

alas

(Co

loca

sia

Esc

ule

nta

L.)

Dip

loid

Sec

ara

Ku

ltu

r Ja

ring

an d

an K

onse

rvas

inya

Men

du

ku

ng

Div

ersi

fikas

i P

angan

O-0

1

Ela

No

via

nti

1, A

swin

Djo

ko

Ba

sko

ro2

da

n L

oek

i E

ng

ga

rfit

ri2

Jen

is D

an P

erb

edaa

n E

kto

par

asit

Yan

g

Dit

emu

kan

Pad

a S

yri

an H

amst

er

(Mes

ocr

icet

us

Au

ratu

s) D

ari

Pet

sho

p D

an

Pas

ar H

ewan

, M

alan

g

L-0

1

Ek

a D

jatn

ika N

ug

rah

a,

Ek

o P

ud

jad

i, D

ewi

Ka

rtik

asa

ri

Po

luta

n S

eny

awa

Kim

ia d

an P

eng

aruh

ny

a P

ada

Pro

ses

Pem

ben

tuk

an H

uja

n d

i K

awas

an W

adu

k

Sag

uli

ng

P-0

2

Sa

nd

i D

arn

iad

i*),

Res

a S

etia

A

da

n N

ikm

atu

l H

idayah

Kar

akte

rist

ik F

isik

okim

ia D

an A

trib

ut

Sen

sori

Pan

gan

Fungsi

onal

Snac

k B

ar U

bi

Jala

r H

asil

Uji

Coba

Skal

a In

dust

ri

O-0

2

Wa

hy

u W

ido

wa

ti1,

Ha

na

Ra

tna

wati

1,

Ta

ti H

erli

na

2,

An

gel

a N

ov

an

thia

1

da

n Y

elli

an

ty Y

elli

an

ty3

Po

ten

si T

eh H

ijau

Seb

agai

An

tiag

reg

asi

Pla

tele

t S

ecar

a In

Vit

ro D

engan

Co

lla

gen

Indu

cer

L-0

2

Yu

stin

us

Pu

rwa

ma

rga

pra

tala

1) ,

Ria

ni

Per

mata

sari

2) ,

Ca

nd

ra I

raw

an

3)

Uji

Ad

sorp

si T

itan

ium

Dio

ksi

da

Ter

had

ap

Kro

miu

m

P-0

3

Liv

ia R

. T

an

jun

g

Kan

du

ng

an G

izi

Dan

Nil

ai E

konom

is P

ensi

,

Tu

tut

Dan

Ch

erax

Dar

i D

anau

Man

inja

u

O-0

3

Sh

ab

arn

i G

aff

ar,

Sit

i N

ur

Ina

ya

h, Y

eni

Wa

hy

un

i H

art

ati

Ko

nst

ruk

si V

ekto

r E

ksp

resi

Rek

om

bin

an

yan

g M

eng

and

un

g P

rote

in F

akto

r S

ekre

si

Pic

hia

pa

sto

ris

dan

Klo

nin

g d

alam

Esc

her

ich

ia c

oli

L-0

3

Elv

i Y

etti

*, R

on

i R

idw

an

, Y

op

i, D

wi

Su

sila

nin

gsi

h, N

an

ik R

ah

ma

ni,

Wu

lan

sih

Dw

i A

stu

ti, a

nd

Ya

nty

ati

Wid

ya

stu

ti

Qu

alit

y o

f F

erm

ente

d F

eed

Tre

ated

wit

h R

ice

Str

aw f

rom

Lo

mb

ok

, N

TB

Lo

cal

Rec

ou

rses

P-0

4

Wa

hy

un

ia,b

, A

.R.

Ball

este

rc,

E.

Su

da

rmo

no

wati

b,

R.J

. B

inod

, A

.G.

Bovya

O-0

4

Lit

a T

rira

tna

da

n D

esri

an

i

Clo

nin

g G

en P

eny

and

i D

om

ain

Fla

vin

L-0

4

Su

tan

to, A

ni

Iry

an

i

Sim

ula

si H

uja

n A

sam

dan

L

aec

hin

g

ion

dal

am

Sem

ina

r Nasio

na

l

Riset P

an

ga

n, O

ba

t-Ob

ata

n

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk K

eseha

tan

xx E

valu

asi Kan

dungan

Mik

ronutrien

t

Py

rido

xin

e (Vitam

in B

6) p

ada 3

2 A

ksesi

Bu

ah C

abai (C

ap

sicum

spp

.)

Cello

bio

se Deh

yd

rog

enase u

ntu

k A

plik

asi

Bio

senso

r Lak

tose

tanah

Pad

a Daerah

hujan

Asam

di W

ilayah

Indu

stri Cib

ino

ng

–C

iteureu

p B

og

or

PR

OG

RA

M P

RE

SE

NT

AS

I (Pa

ralel) S

ES

I II S

esi Pa

ralel II (1

4:0

0 –

15

:00

)

Ru

an

gan

I (Pan

gan

)

Mo

dera

tor: D

ra. Tri A

min

ing

sih, M

.Si

Ru

an

ga

n II (O

bat-O

ba

tan

)

Mo

dera

tor: D

r. Tati H

erlina

Ru

an

ga

n III (L

ing

ku

ng

an

)

Mo

dera

tor: D

r. Dian

a Rak

hm

awaty

P-0

5

Ba

mb

an

g H

ariy

an

to, In

dah

Ku

rnia

sari

Wid

ia P

usp

an

tari d

an

Ag

us T

ri Pu

tran

to

Pelu

ang

Pen

gem

ban

gan

Pan

gan

Sag

u

Seb

agai M

akan

an S

ehat

O-0

5

Yen

i Wa

hy

un

i Ha

rtati*

, Rin

i Su

rba

kti,

Nu

rul A

ulia

ny

, Sa

nth

y W

ya

ntu

ti, Sh

ab

arn

i

Ga

ffar

Stu

di B

iosen

sor D

NA

dalam

detek

si

Uru

tan flag

ellin S

alm

on

ella typ

hi d

ari

Am

plik

on

PC

R S

amp

el Darah

L-0

5

Isna

eni 1, R

och

ma

h K

urn

ijasa

nti 2, M

ega

Ferd

ina

Wa

rsito1*

Ko

relasi Pro

fil Asam

Lem

ak M

etil Ester

Strep

tom

yces Sp

p. D

eng

an S

ebaran

Hab

itat

Dan

Kem

otak

son

om

i

P-0

6

Ah

ma

d F

ath

on

i, N. S

ri Ha

rtati, N

ur

Ka

rtika

I

Karak

terisasi Tep

ung U

bi K

ayu d

an M

ocaf

sebag

ai Bah

an B

aku M

akan

an S

ehat

O-0

6

Ay

u N

irma

la S

ari

Peran

Pro

po

lis sebag

ai An

tidiab

etes pad

a

Men

cit (Mu

s mu

sculu

s SW

.) Jantan

Berd

asarkan

An

alisis Kad

ar Glu

ko

sa Darah

,

Kad

ar Insu

lin P

lasma d

an D

ensitas R

eactive

Oxyg

en S

pecies (R

OS

) pad

a Pan

kreas

L-0

6

An

i Irya

ni, S

uta

nto

S

imu

lasi pen

ing

katan

kad

ar NO

3- , C

l - dan

NH

4

dalam

air sum

ur ak

ibat h

ujan

asam d

i wilay

ah

ind

ustri C

iterueu

p B

og

or

P-0

7

Za

ckiy

ah

1, F

loren

tina M

aria

Titin

Su

priy

an

ti 2, Geb

i Dw

iyan

ti 3,

Ka

rima

Hu

ril Ain

i 4

Pem

anfaatan

Frak

si Aktif E

kstrak

Aseto

n

Ku

lit Batan

g N

angka (A

rtocarp

us

O-0

7

Ma

ria G

oretti M

. Pu

rwa

nto

*, M

eiliaw

ati,

Ru

th C

hrisn

asa

ri

Pen

garu

h p

H, S

uh

u d

an K

on

sentrasi S

ub

strat

Terh

adap

Pro

du

ksi K

on

sentrat A

sam L

emak

Om

ega 3

Dari L

imb

ah M

iny

ak Ik

an M

elalui

L-0

7

Sea

ga

mes W

alu

yo

1)2

), Su

stiprija

tno

2),

Su

ha

rson

o 1

)3)

Op

timasi an

tibio

tic hig

rom

isin seb

agai

pen

un

jang

transfo

rmasi g

enetic tem

bak

au

Sem

ina

r N

asi

on

al

Ris

et P

an

ga

n,

Oba

t-O

ba

tan

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk

Kes

eha

tan

xxi

Het

ero

ph

yll

us

Lam

k)

Seb

agai

Bah

an A

dit

if A

lam

i A

nti

-Pen

cokla

tan

Hid

roli

sis

ole

h E

nzi

m L

ipas

e d

ari

Ca

nd

ida

rug

osa

P-0

8

Nin

ik S

ety

ow

ati

& N

ing W

ika

n U

tam

i

Po

ten

si T

um

buhan

Min

or

Pen

gh

asil

Kar

bo

hid

rat

dan

Pro

tein

Un

tuk M

enunja

ng

Pro

gra

m K

edau

lata

n P

angan

Di

Pro

pin

si

Ban

ten

O-0

8

Lu

kit

a D

evy

, S

ob

ir d

an

Do

do

Ru

sna

nd

a

Sa

stra

An

alis

is K

erag

aman

Gen

etik

Tem

ula

wak

(Cu

rcu

ma

Xan

tho

rrh

iza

Rox

b.)

Seb

agai

Das

ar

Per

ekay

asaa

n V

arie

tas

Un

gg

ul

L-0

8

Su

ya

ti,

Nu

nu

ng

Nu

raen

i, D

ewi

Ka

rtik

asa

ri,

M.T

ho

yib

Th

am

rin

, D

ya

h

Dw

i

Ku

sum

aw

ati

Men

entu

kan

In

ten

sita

s T

L d

an P

PT

L p

ada

Sam

pel

S

iO2

PR

OG

RA

M P

RE

SE

NT

AS

I (P

ara

lel)

SE

SI

III

Ses

i P

ara

lel

III

(15

:30

– 1

6:3

0)

Ru

an

gan

I (

Pan

gan

)

Mo

der

ato

r: A

de

Her

i M

uly

ati,

M.S

i R

ua

ng

an

II

(Ob

at-

Ob

ata

n)

Mo

der

ato

r: D

r. D

ikd

ik K

urn

ia

Ru

an

ga

n I

II (

Lin

gk

un

ga

n)

Mo

der

ato

r: D

r. S

uta

nto

P-0

9

Fa

rid

a N

ura

eni

, T

ri A

min

ingsi

h, M

ira

Mir

an

ti

Po

ten

si A

nti

oksi

dan

Lab

u K

unin

g (

cucu

rbit

a

mo

sch

ata

) p

ada

ber

bag

ai P

elar

ut

O-0

9

Ad

e H

eri

Mu

lya

ti, R

ati

h W

ula

nd

ari

,

Hu

sain

Na

shri

an

to

Po

ten

si A

nti

bak

teri

dan

Id

enti

fik

asi

Ko

mp

on

en S

eny

awa

Org

anik

Ek

stra

k

Met

ano

l, E

til

Ase

tat,

dan

Hek

san

dar

i S

irih

Mer

ah p

iper

cf.

fra

gil

e b

enth

L-0

9

Dia

na

Ra

kh

ma

wa

ty E

dd

y*

, J

oic

e C

aro

les,

E.

Evy

Ern

aw

ati

Pro

ses

Fo

tok

atal

isis

TiO

2-S

iO2 C

FA

(C

oa

l F

ly

Ash

) d

alam

Men

uru

nk

an K

adar

Lo

gam

Kro

miu

m d

ari

Air

Su

ng

ai

P-1

0

Len

y H

elia

wati

1.2,

Tri

Mayan

ti2,

Agu

s

Ka

rdin

an

3, R

uk

mia

ti T

jok

ron

ego

ro2

Fit

ok

imia

dan

akti

vit

as a

nti

bak

teri

dar

i ek

stra

k

bij

i g

ewan

g (

Cory

pha u

tan

lam

k)

O-1

0

An

gg

ria

wa

n, I.

M.B

.1,

Ro

swie

m,

A.P

.1,

Nu

rch

oli

s, W

.2

Po

ten

si E

kst

rak

Air

Dan

Eta

no

l K

uli

t B

atan

g

Kay

u M

anis

Pad

ang

Dan

Jaw

a (C

inn

am

om

um

bu

rma

nn

ii D

an C

inn

am

om

um

ver

um

)

Ter

had

ap A

kti

vit

as E

nzi

m α

-Glu

ko

sid

ase

L-1

0

Tri

Am

inin

gsi

h,

Tri

Pa

nji

Pro

du

ksi

dan

Iso

lasi

Fik

osi

anin

dan

Asa

m

Lem

ak T

ak J

enu

h M

ajem

uk

dar

i S

pir

uli

na

pla

ten

sis

yan

g D

ibia

kk

an d

alam

Lim

bah

Per

keb

un

an

Sem

ina

r Nasio

na

l

Riset P

an

ga

n, O

ba

t-Ob

ata

n

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk K

eseha

tan

xxii P

-11

Sa

ta Y

osh

ida

Srie R

ah

ayu

Red

uk

si Kad

ar Logam

Berat d

alam K

ijing

Taiw

an a

no

do

nta

woodia

na

agam

men

jadi

Bah

an P

ang

an K

onsu

msi y

ang

Am

an

O-1

1

Tri M

aya

nti 1, D

ewi S

uin

dra

ti 1, Wa

wa

n

Herm

aw

an

2, Dad

an

Su

mia

rsa1,

da

n E

uis J

ula

eha

1

Triterp

en O

no

cerano

id D

ari Ek

strak E

til

Asetat K

ulit B

atang

Pisitan

(La

nsiu

m

Dom

esticum

Co

rr. Cv

. Pisita

n) d

an A

ktiv

itas

Larv

asidan

ya

L-1

1

Ah

ma

d ra

ma

dh

an

, Su

tan

to, a

ni Iry

an

i M

emb

and

ing

kan

Pereak

si Fen

ton

dan

kap

orit

dalam

Men

uru

nk

an C

hem

ical Ox

yg

en

Dem

and

(CO

D) L

imb

ah L

arutan

Pen

yap

u

Jenu

h

P-1

2

Ha

ni F

itrian

i da

n P

ram

esti Dw

i

Ary

an

ing

rum

Resp

on

Pertu

mbuhan

Tunas In

Vitro

Talas

Sato

imo

(Co

loca

sia escu

lenta

var.

antiq

uoru

m) P

ada B

erbag

ai Jenis P

emad

at

Ag

ar

O-1

2

Sa

dia

h D

jaja

soep

ena

, Sa

ad

ah

Dia

na

Ra

chm

an

& N

etti Vera

N. S

emb

iring

Stu

di P

rod

uk

si Vco

(Virg

in C

oco

nu

t Oil)

Den

gan

Cara F

ermen

tasi Men

gg

un

akan

Neu

rosp

ora S

itop

hila

L-1

2

An

ton

io K

au

tsar S

.Si 1, D

rs. Hu

sain

Na

shria

nto

, M.S

i 1, Ru

di H

erya

nto

, M.S

i 2

Diferen

siasi Asal G

eog

rafis Ku

ny

it (Cu

rcum

a

do

mestica

Va

l.) Men

gg

un

akan

Fo

tom

eter

Po

rtab

le dan

An

alisis Kem

om

etrik

PR

OG

RA

M P

RE

SE

NT

AS

I (Pa

ralel) S

ES

I IV

Sesi P

ara

lel IV (1

6:3

0 –

17

:30

)

Ru

an

gan

I (Pan

gan

)

Mo

dera

tor: D

ra. Eka H

erlina, M

.Pd

Ru

an

ga

n II (O

bat-O

ba

tan

)

Mo

dera

tor: D

rs. Ag

us T

aufik

, M.S

i. R

ua

ng

an

III (Lin

gk

un

ga

n)

Mo

dera

tor: D

ra. An

i Iryan

i, M.S

i

P-1

3

Sa

nd

i Da

rnia

di 1

)*), W

ind

a P

urw

an

i 2) d

an

Din

y A

. Sa

nd

rasa

ri 2)

Ev

alusi S

ifat Sen

sori D

an F

isikokim

ia

Po

wd

er Min

um

an In

stan S

trob

eri Yan

g

Dib

uat D

eng

an M

etod

e Foam

-Mat D

ryin

g

O-1

3

Eu

is Ju

laeh

a, D

esak

Ma

de M

alin

i, da

n

Astri N

ua

nsa

ri H

Histo

log

i Testis D

an E

fidid

imis M

us

Mu

sculu

s Setelah

Pem

berian

Sen

yaw

a Stero

l

Yan

g D

iisolasi D

ari Dau

n C

lerod

end

ron

Serra

tum

Terh

adap

Ku

alitas Sp

erma S

ecara In

Vivo

L-1

3

To

pa

n S

op

ian

, Hu

sain

Na

shria

nto

, An

i

Irya

ni

Isolasi d

an Id

entifik

asi Alk

aloid

Pad

a Ek

strak

dau

n S

irsak (A

nn

on

a m

urica

ta L

.)

Sem

ina

r N

asi

on

al

Ris

et P

an

ga

n,

Oba

t-O

ba

tan

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk

Kes

eha

tan

xxii

i P

-14

Sri

Wa

rda

tun

, S

uta

nto

, D

ara

Aru

m

Pri

ng

ga

dan

i

Uji

Ak

tiv

itas

An

tioksi

dan

dan

Kan

dungan

Tan

in T

ota

l D

aun T

eh c

amel

lia

sinen

sin

ku

ntz

e d

eng

an P

erbed

aan K

etin

ggia

n L

ahan

O-1

4

Nu

r M

ifta

hu

rro

hm

ah

1*, C

atu

r R

ian

i2,

Deb

bie

So

fie

Ret

no

nin

gru

m2

Sp

esif

isit

as P

rod

uk

Sik

lod

ekst

rin

dar

i E

nzi

m

Sik

lod

ekst

rin

Gli

ko

silt

ran

sfer

ase

(CG

TA

SE

)

Ba

cill

us

sp. P

T2

B

L-1

4

1A

gu

sta

Sa

mo

dra

Pu

tra

, 2S

uk

rid

o

Kaj

ian

Rea

ksi

Fer

men

tasi

Lim

bah

Cai

r T

ahu

Cib

un

tu d

eng

an S

acc

ha

rom

yces

cer

evic

eae

Un

tuk

Pem

bu

atan

Bio

etan

ol

P-1

5

Ad

e H

eri,

Hu

sain

Na

shri

an

ti,

Ek

a

Ra

chm

aw

ati

Kan

du

ng

an A

lfat

oksi

n (

B1,

B2, G

1 d

an G

2)

pad

a K

acan

g T

anah

(A

rach

is H

ypoga

ea L

)

yan

g B

ered

ar d

i P

asar

Tra

dis

ion

al D

aera

h

Jabo

tab

ek

O-1

5

Ta

ti H

erli

na

, A

lber

tin

a J

oh

an

a M

ael

oa

,

Did

ik K

urn

ia, Z

ali

na

r U

din

, U

na

ng

Su

pra

tma

n

Sen

yaw

a 5

,7-d

ihid

rok

di-

41-m

eto

ksi

flav

on

dar

i

Tu

mb

uh

an A

kw

ay (

Dri

mys

bec

cari

an

a,

Gib

bs)

Yan

g B

erak

tifi

tas

An

tik

ank

er

Pay

ud

ara

dan

An

tim

alar

ia S

ecar

a In

Vit

ro

L-1

5

Ev

y E

rna

wa

ti,

So

lih

ud

in, d

an

Im

an

R

Pen

gar

uh

Sil

ika

Ter

had

ap D

eraj

at

Pen

gg

emb

un

gan

Mem

bra

n P

erv

apo

rasi

Sel

ulo

sa

Ase

tat

Alb

asia

Pad

a P

emis

ahan

Eta

no

l-A

ir

P-1

6

Dia

na

Wid

iast

uti

1,

Tom

ok

o M

aed

a2,

Na

ofu

mi

Mo

rita

3

Ap

pli

cati

on

of

Soft

-type

Gra

ded

Flo

urs

ob

tain

ed b

y P

oli

shin

g W

hea

t G

rain

s fo

r

Bre

adm

akin

g u

sing e

nzy

mes

as

an i

mpro

ver

O-1

6

Len

y H

elia

wa

ti1. ,

Tri

Ma

ya

nti

2, A

gu

s

Ka

rdin

an

3,

Ru

km

iati

K T

jok

ron

ego

ro2

Ak

tiv

itas

Sit

oto

ksi

k d

ari

Ek

stra

k b

uah

gew

ang

(Co

ryp

ha

uta

n l

amk

) T

erh

adap

Sel

Kan

ker

Mu

rin

Leu

kim

ia P

-38

8

L-1

6

Ati

ek R

ost

ika

No

viy

an

ti, M

uh

am

ad

Ali

,

Dia

na

Ra

kh

ma

wa

ty E

dd

y, d

an

Ism

aN

ura

eni

Ek

sfo

lias

i H

2B

aBi 2

Ti 4

O13 s

ebag

ai K

atal

is

Asa

m P

adat

P-1

7

Tri

M

uji

E

rmayan

ti*,

An

dri

F

ad

illa

h

Ma

rtin

, D

erit

ha

Elf

fy R

an

tau

Ko

lek

si,

Kult

ur

Jari

ng

an

dan

E

val

uas

i

Pro

du

ksi

U

mbi

Tac

ca

Leo

nto

pet

aloid

es

Tan

aman

P

ang

an

Alt

ernat

if

Sum

ber

Kar

bo

hid

rat

0-1

7

Ek

o H

arl

ah

, A

. S

ri.

Pem

bu

atan

Sab

un

M

and

i

Ala

mi

Den

gan

Ek

stra

k

Dau

n

Jati

B

elan

da

(Gu

azu

ma

Ulm

ifo

lia

Lam

k)

L-1

7

An

ni

An

gg

raen

i, T

itin

Sofy

ati

n,

Ab

du

l

Mu

tali

b, H

use

in H

. B

ah

ti

Pem

bu

atan

Un

sur

Tan

ah J

aran

g O

ksi

da

Dar

i

Min

eral

Mon

asit

Has

il S

amp

ing

Pen

amb

ang

an

Tim

ah D

an E

kst

rak

si G

ado

lin

ium

Men

gg

un

akan

Lig

an A

sam

Die

tile

n T

riam

in

Pen

taas

etat

(D

tpa)

Sem

ina

r Nasio

na

l

Riset P

an

ga

n, O

ba

t-Ob

ata

n

da

n L

ing

kung

an

Un

tuk K

eseha

tan

xxiv

O

-18

Ela

No

via

nti, N

urla

ili Ek

aw

ati, A

i Herta

ti

da

n D

jad

jat T

isna

dja

ja

Pen

garu

h

Pem

berian

E

kstrak

E

tano

l D

ari

An

gk

ak

Terh

adap

K

adar

Trig

liserida

dan

Bo

bo

t B

adan

D

ari T

iku

s P

utih

Jan

tan

Hip

erlipid

emia

Seminar Nasional



xxv

Daftar Isi

Kata Pengantar vii

PEMBICARA KUNCI

1

Applications of Titanium Oxide-based Photocatalysts as the Green

and Sustainable Science and Technology –Investigations of highly

active photo-functional materials from molecular level to bulk

semiconductor level-

Masakazu ANPO*

3

Produksi 1,3 Dioleoil-2-Palmitoilgliserol Melalui Reaksi Enzimatik

dari Palm Stearin Dan Aplikasinya Dalam Formulasi Substitut Lemak

Air Susu Ibu

O. Suprijana1,2, A. Zainudin1, Agus Safari1

5

Reliable performance for supporting high-precision drug analysis in

biological samples

Dr. Gan Che Sian

6

High Throughput Analysis of Emerging Contaminants in Food and

Environment

Venkatesha

7

Bidang Pangan

Perbanyakan Beberapa Aksesi Talas (Colocasia esculenta L.) Diploid

Secara Kultur Jaringan dan Konservasinya Mendukung Diversifikasi

Pangan

Aida Wulansari*, Andri Fadillah Martin, Deritha Elffy Rantau

dan Tri Muji Ermayanti

11

Kandungan Gizi Dan Nilai Ekonomis Pensi, Tutut dan Cherax dari

Danau Maninjau

Livia R. Tanjung

21

Evaluasi Kandungan Mikronutrien Pyridoxine (Vitamin B6) pada 32

Aksesi Buah Cabai (Capsicum spp.)

Wahyuni*1,2, Ana Rosa Ballester3, Enny Sudarmonowati2,

Raoul J. Bino4, Arnaud G. Bovy1

31

Seminar Nasional



xxvi

Peluang Pengembangan Pangan Sagu Sebagai Makanan Sehat

Bambang Hariyanto*1, Indah Kurniasari2, Widya Puspantari3,

dan Agus Tri Putranto4

39

Pemanfaatan Fraksi Aktif Ekstrak Aseton Kulit Batang Nangka

(Artocarpus heterophyllus Lamk) Sebagai Aditif Alami Anti-

Pencoklatan

Zackiyah1*, Florentina M.T Supriyanti2, Gebi Dwiyanti3

dan Karima H. Aini4

47

Potensi Tumbuhan Minor Penghasil Karbohidrat dan Protein untuk

Menunjang Program Kedaulatan Pangan di Propinsi Banten*)

Ninik Setyowati

57

Potensi Antioksidan Labu Kuning (Cucurbita moschata) pada

Berbagai Pelarut

Farida Nuraeni1*, Tri Aminingsih2, dan Mira Miranti3

69

Respon Pertumbuhan Tunas In Vitro Talas Satoimo (Colocasia

esculenta var. antiquorum) pada Berbagai Jenis Pemadat Agar

Hani Fitriani*1 dan Pramesti D. Aryaningrum1

81

Uji Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Tanin Total Daun Teh

(Camellia sinensis Kuntze) dengan Perbedaan Ketinggian Lahan

Sri Wardatun*1), Sutanto2), Dara A. Pringgadani3)

91

Kandungan Aflatoksin (B1, B2, G1 DAN G2) Pada Kacang Tanah

(Arachis Hypogaea L) di Pasar Tradisional Daerah JABOTABEK

Ade Heri Mulyati*, Husain Nasrianto, dan Eka Rachmawati

101

Koleksi, Kultur Jaringan dan Evaluasi Produksi Umbi Tacca

Leontopetaloides Tanaman Pangan Alternatif Sumber Karbohidrat

Tri Muji Ermayanti*, Andri Fadillah Martin,

dan Deritha Elffy Rantau

113

Respon Pembentukan Tunas Majemuk Dan Variasi Ukuran Plantlet

Talas Satoimo (Colocasia esculenta var.antiquorum) Pada Beberapa

Konsentrasi 6-Benzylaminopurine (BAP) dan Indole-3-Acetic Acid

(IAA)

Pramesti Dwi Aryaningrum* dan N. Sri Hartati

123

Pengujian Berbagai Jarak Tanam 3 Aksesi Jagung Lokal Maros,

Sulawesi Selatan Terhadap Pertumbuhan dan Produksinya

Ninik Setyowati* dan Ning W. Utami

133

Seminar Nasional



xxvii

Bidang Obat

Jenis dan Perbedaan Ektoparasit yang Ditemukan Pada Syrian

Hamster (Mesocricetus auratus) dari Petshop dan Pasar Hewan,

Malang

Ela Novianti*1, Aswin Djoko Baskoro2, dan Loeki Enggarfitri2

149

Konstruksi Vektor Ekspresi Rekombinan Yang Mengandung Protein

Faktor Sekresi Pichia pastoris dan Kloning Dalam Escherichia coli

Shabarni Gaffar*, Siti N. Inayah dan Yeni W Hartati

159

Kloning Gen Penyandi Domain Flavin Cellobiose Dehydrogenase

Untuk Aplikasi Biosensor Laktosa

Lita Triratna*1 dan Desriani2

169

Peran Propolis Sebagai Antidiabetes Pada Mencit (Mus Musculus

SW.) Jantan Berdasarkan Analisis Kadar Glukosa Darah

Ayu N. Sari*1, Ramadhani E. Putra1 dan Ahmad Ridwan1

177

Pengaruh pH, Suhu dan Konsentrasi Substrat Terhadap Produksi

Konsentrat Asam Lemak Omega 3 Dari Limbah Minyak Ikan

Melalui Hidrolisis Oleh Enzim Lipase dari Candida Rugosa

Maria Goretti M. Purwanto*, Meliawati, Ruth Chrisnasari

189

Analisis Keragaman Genetik Temulawak (Curcuma xanthorrhiza

Roxb.) Sebagai Dasar Perekayasaan Varietas Unggul

Lukita Devy *, Sobir dan Dodo Rusnanda Sastra1

205

Potensi Antibakteri Dan Identifikasi Komponen Senyawa Organik

Ekstrak Metanol, Etil Asetat, Dan Heksan Sirih Merah (Piper cf.

Fragile Benth)

Ade Heri Mulyati, Ratih Wulandari dan Husain Nashrianto

213

Potensi Ekstrak Air Dan Etanol Kulit Batang Kayu Manis Padang

(Cinnamomum Burmannii) dan Jawa (Cinnamomum Verum)

Terhadap Aktivitas Enzim Α-Glukosidase

Made B. Anggriawan*1, Anna P. Roswiem1, dan Waras

Nurcholis2

221

Triterpen Onoceranoid dari Ekstrak Etil Asetat Kulit Batang Pisitan

(Lansium domesticum Corr. cv. pisitan) dan Aktivitas Larvasidanya

Tri Mayanti1*, Dewi Suindrati1, Dadan Sumiarsa1,

Wawan Hermawan2, Euis Julaeha1 dan Tri Mayanti1

235

Seminar Nasional



xxviii

Studi Produksi VCO (Virgin Coconut Oil) Dengan Cara Fermentasi

Menggunakan Neurospora Sitophila

Sadiah Djajasoepena, Saadah Diana Rachman & Netti Vera N.

Sembiring

241

Spesifisitas Produk Siklodekstrin dari Enzim Siklodekstrin

Glikosiltransferase (CGTase) Bacillus sp. PT2B

Nur Miftahurrohmah1*, Catur Riani2, Debbie S. Retnoningrum2

253

Aktivitas Sitotoksik Dari Ekstrak Buah Gewang (Corypha Utan

Lamk) Terhadap Sel Kanker Murin Leukimia P-388

Leny Heliawati*1.2, Tri Mayanti2, Agus Kardinan3,

Roekmi-ati Tjokronegoro2

261

Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol dari Angkak Terhadap Kadar

Trigliserida dan Bobot Badan dari Tikus Putih Jantan Hiperlipidemia

Ela Novianti, Nurlaili Ekawati, Ai Hertati dan Djadjat Tisnadjaja

267

Bidang Lingkungan

Polutan Senyawa Kimia Dan Pengaruhnya Pada Proses Pembentukan

Hujan Di Kawasan Waduk Saguling

Eka Djatnika Nugraha, Eko Pudjadi, Dewi Kartikasari

281

Uji Adsorpsi Titanium Dioksida Terhadap Kromium

Yustinus Purwamargapratala1, Riani Permatasari2,

dan Candra Irawan2

291

Simulasi Pelindian Fe Dan Ca Akibat Hujan Asam di Wilayah

Industri Citeureup Bogor

Sutanto*1 dan Ani Iryani2

301

Simulasi Peningkatan Konsentrasi NO3-, Cl

-, dan Nh4

+ Dalam Air

Sumur Akibat Hujan Asam Di Wilayah Industri Citeureup Bogor

Ani Iryani* dan Sutanto

311

Optimasi Antibiotik Higromisin Sebagai Penunjang Transformasi

Genetik Tembakau

Seagames Waluyo1&2, Sustiprijatno2* dan Suharsono1

321

Menentukan Intensitas Tl dan PPPTl Pada Sampel SiO2

Suyati, Nunung Nuraeni, Dewi Kartikasari, M.Thoyib Thamrin,

dan Dyah Dwi Kusumawati

327

Seminar Nasional



xxix

Penurunan Chemical Oxygen Demand (COD) Limbah Larutan

Penyapu Jenuh Antara Dengan Pereaksi Fenton dan Kaporit

Ahmad Ramadhan*, Sutanto, dan Ani Iryani

333

Diferensiasi Asal Geografis Kunyit (Curcuma Domestica Val.)

Menggunakan Fotometer Portable Dan Analisis Kemometrik

Antonio Kautsar , Husain Nashrianto, Rudi Heryanto

347

Isolasi dan Identifikasi Alkaloid Pada Ekstrak Daun Sirsak (Annona

Muricata L.)

Topan Sopian*, Husain Nashrianto, dan Ani Iryani

361

Kajian Reaksi Fermentasi Limbah Cair Tahu Cibuntu Dengan

Saccharomyces Cereviseae Untuk Pembuatan Bioetanol

Agusta Samodra Putra*1, Sukrido2, Meiliana Fitriani2

369

Poster

Uji Adsorpsi Titanium Dioksida Terhadap Metil Orange

Yustinus Purwamargapratala1, Diah Widiyaningsih2, Hanafi3

377

Koleksi Kultur In Vitro Ubi Kayu (Manihot Esculenta Crantz)

Sebagai Material Perakitan Bibit Unggul

N. Sri Hartati, Nurhamidar Rahman, Hani FItriani,

dan Enny Sudarmonowati

389

Kualitas Air Pada Uji Pembesaran Larva Ikan Sidat (Anguilla Spp.)

Dengan Sistem Pemeliharaan Yang Berbeda

Tri Suryono1, Muhammad Badjoeri1 dan Hasan Fauzi1

399

Daya Hidup dan Pertumbuhan Kultur In Vitro Ubi Kayu (Manihot

Esculanta) Genotip Ubi Kuning Hasil Radiasi

Nurhamidar Rahman*1

, Supatmi1, dan Hani Fitriani

1

409

Potensi Skleroglukan Yang Disekresi Sclerotium Glucanicum

Sebagai Faktor Prebiotik Bagi Pertumbuhan Beberapa Bakteri

Lactobacillus Sp.

Miratul Maghfiroh*1 dan Jayus2

415

Penapisan Fitokimia Dan Uji Toksisitas Daun Artocarpus Elasticus

Salahuddin*, Megawati, Sofa Fajriah

425

Pengaruh Jenis dan Konsentrasi Bahan Penstabil Terhadap Sirup

Lidah Buaya

Hasnelly, Nana Sutisna Achyadi, dan Noventri Rukmaningrum

433

Seminar Nasional



xxx

Perbandingan Penggunaan Enzim Peroksidase dari Batang Sawi

Hijau (Brassica Juncea) dan Enzim Horseradish Pada Sintesis

Isoeugenol dan Uji Aktivitas Antioksidan

Andini Sundowo* dan Yulia Anita

447

Ekstraksi, Partisi Serta Uji Aktivitas Antioksidan dari Daun Tanaman

Artemissia Annua L

Andini Sundowo* dan Yulia Anita

455

Penambahan Virgin Coconut Oil Dalam Sediaan Probiotik

Lactobacillus Menggunakan Teknik Spray Drying

Titin Yulinery*dan Novik Nurhidayat

463

Keragaman Kadar Lovastatin dan Pigmen Dalam Angkak Hasil

Fermentasi Isolat Lokal Monascus Purpureus

Titin Yulinery*

473

Seleksi Bacillus Spp. Terhadap Aktivitas Enzim Amilase Dalam

Larutan Substrat Tepung Talas

Sri Hartin Rahaju1

483

Aktivitas Inhibisi Α-Glukosidase Ekstrak Etil Asetat dan Heksan

Dari Cinnamomum Burmannii dan Cinnamomum Verum

Like Efriani*1, Sitaresmi Yuningtyas1, dan Waras Nurcholis2

491

Sintesis dan Uji Aktivitas Biologi Diamil Nikotinil Glutamat Ester

Yulia Anita*1, M. Hanafi1, Puspa D Lotulung1, Any Kurnia2

497

Karakterisasi Tepung Ubi Kayu dan Mocaf Sebagai Bahan Baku

Makanan Sehat

Ahmad Fathoni*1, N. Sri Hartati1, Nur Kartika I.M2

505

Ucapan Terimakasih

Seminar Nasional

Riset Pangan, Obat-Obatan dan Lingkungan Untuk Kesehatan

159

Konstruksi Vektor Ekspresi Rekombinan Yang Mengandung

Protein Faktor Sekresi Pichia pastoris dan Kloning

Dalam Escherichia coli

Shabarni Gaffar*, Siti N. Inayah dan Yeni W Hartati

Jurusan Kimia, FMIPA, Universitas Padjadjaran.

Jl. Raya Bandung Sumedang Km 21, Jatinangor 453631

*E-mail: [email protected]

ABSTRAK

Protein faktor sekresi Pichia pastoris (Sec4p) merupakan salah satu protein yang

berperan untuk menargetkan protein-protein yang disekresikan ke luar sel. Sec4p sangat

diperlukan pada inang ekspresi Pichia pastoris untuk menjamin bahwa semua protein

rekombinan yang dirancang untuk ekspresi ekstraselular dikeluarkan dari sel. Overekspresi

gen SEC4 dalam suatu inang ekspresi dapat meningkatkan sekresi protein rekombinan.

Penelitian ini berhasil mengkonstruksi suatu vektor ekspresi rekombinan yang mengandung

gen SEC4 dan mengkloningnya dalam Escherichia coli. Gen SEC4 diamplifikasi dari genom

P. pastoris menggunakan metode PCR. Fragmen SEC4 dengan ukuran 615 pb diligasi ke

vektor pJET1.2 menghasilkan plasmid rekombinan pJET1.2-SEC4 dan disubkloning dalam

E. coli TOP10F’. Gen SEC4 dari plasmid pJET1.2-SEC4 yang telah dikarakterisasi,

dipotong menggunakan enzim restriksi EcoR1. Fragmen SEC4 hasil pemotongan dengan

enzim EcoR1 diligasi ke vektor pPIC3.5K menghasilkan vektor ekspresi rekombinan

pPIC3.5K-SEC4 dan selanjutnya dikloning dalam E. coli TOP10F’. Hasil analisis restriksi

dan penentuan urutan nukleotida gen SEC4 dalam plasmid pPIC3.5K-SEC4 hasil kloning

menunjukkan bahwa vektor ekspresi yang mengandung gen SEC4 berhasil dikonstruksi dan

gen SEC4 dengan ukuran 615 pb memiliki urutan nukleotida yang identik dengan urutan

SEC4 P. pastoris di Genbank. Vektor ekspresi yang dihasilkan selanjutnya dapat

diintroduksi ke dalam suatu inang P. pastoris, untuk menghasilkan sel inang yang dapat

mensekresikan protein rekombinan dengan tingkat produksi tinggi.

Kata kunci : faktor sekresi, gen SEC4, vektor ekspresi, Pichia pastoris

Pengantar Ragi metilotropik P. pastoris semakin banyak digunakan sebagai inang untuk

ekspresi protein rekombinan. P. pastoris lebih mudah dimodifikasi secara genetika dan

dikulturkan dibandingkan dengan sel mamalia dan dapat ditumbuhkan hingga mencapai

densitas sel yang tinggi (Cereghino & Cregg, 2000). Selain itu, karena P. pastoris

merupakan eukariot maka cocok digunakan untuk memproduksi protein eukariot

dengan folding yang tepat dan protein yang membutuhkan modifikasi pascatranslasi,

sehingga protein rekombinan tersebut dapat berfungsi dengan baik (Daly & Hearn,

2005). Lebih dari 550 protein rekombinan yang berasal dari bakteri, ragi, protista,

tumbuhan, invertebrata, manusia dan virus telah berhasil disintesis dan diproduksi

dalam ragi ini (Lin-Cereghino et al., 2006, De Schutter et al., 2009). Teknologi ekspresi

P. pastoris tersedia secara komersial semenjak beberapa tahun yang lalu.

Seminar Nasional


160

Produksi secara ekstraselular protein rekombinan menggunakan sistem ekspresi

P.pastoris, umumnya lebih disukai karena memudahkan proses pemurnian sehingga

menurunkan biaya produksi. Sekresi protein oleh suatu inang ekspresi memerlukan

sejumlah protein yang berperan pada transportasi protein yang akan disekresikan dari

retikulum endoplasma sampai ke membran sel (Cregg et al., 1993). Selain itu, tingkat

sekresi protein asing juga dipengaruhi oleh jenis kodon yang digunakan dari gen yang

diekspresikan; jumlah kopi gen; kekuatan promotor; sinyal translasi; jenis peptida

sinyal; pemrosesan dan pelipatan protein dalam retikulum endoplasma dan badan Golgi;

faktor lingkungan dalam sekresi ekstraseluler; serta hidrolisis protein oleh protease (Shi

Hwei et al., 2005; Sreekrishna et al., 1997).

Protein faktor sekresi ekstraselular adalah sekelompok protein yang berperan pada

transportasi protein yang akan disekresikan dengan melibatkan organel sel. Secara garis

besar, protein yang baru terbentuk akan melewati retikulum endoplasma (RE),

kompleks Golgi, dan kemudian menuju membran plasma untuk selanjutnya

disekresikan ke luar sel. Transportasi protein antar kompartemen di dalam sel juga

dimediasi oleh suatu vesikel (Oliveira et al., 2010; Salminen & Novick, 1989).

Berdasarkan analisis genetik protein yang terlibat pada jalur sekresi ragi, telah

ditemukan dua puluh enam gen yang produknya diperlukan untuk transportasi protein

dari retikulum endoplasma ke membran plasma. Sepuluh dari gen-gen tersebut

mengatur peredaran vesikuler dari kompleks Golgi ke membran plasma pada tahap

lanjut sekresi protein. Salah satu dari sepuluh gen ini adalah SEC4, yang mengode

protein pengikat GTP yang berasosiasi dengan sisi sitoplasmik dari vesikel sekresi dan

membran plasma. Protein Sec4 (Sec4p) diperlukan pada eksositosis konstitutif pada ragi

dan mengalami siklus antara membran plasma dan vesikel sekresi. Siklus lokalisasi

Sec4p dirangkai dengan siklus pengikatan dan hidrolisis GTP yang berfungsi untuk

mengontrol peredaran vesikuler (Salminen & Novick, 1989).

Peningkatan jumlah Sec4p dalam suatu inang ekspresi diketahui dapat

meningkatkan sekresi protein asing. Shi-Hwei dan koleganya (2004) melaporkan

overekspresi SEC4 Pichia pastoris dalam inang P. pastoris yang telah mengandung gen

pengode glukoamilase, dapat meningkatkan sekresi glukoamilase sebanyak 2x lipat.

Meskipun peran Sec4p pada sekresi protein di P. pastoris belum pernah dipelajari,

namun urutan asam amino Sec4p dari P. pastoris mirip dengan urutan Sec4p ragi lain

pada domain yang terlibat dalam pengikatan dan hidrolisis nukleotida. Penelitian

tersebut membuktikan Sec4p memiliki kontribusi peran yang penting dalam proses

produksi protein rekombinan, khususnya pada proses sekresi protein.

Sec4p merupakan protein berukuran 24 kDA yang dikode gen SEC4 dari

Saccharomyces cerevisiae. Protein ini termasuk ke dalam keluarga protein Rab dari

protein pengikat GTP yang merupakan regulator penting pada semua aktivitas

peredaran vesikuler. Sec4p berperan penting dalam tahap akhir sekresi protein,

berfungsi untuk menargetkan vesikel sekretori ke membran plasma pada proses pasca-

Golgi dalam sekresi protein pada ragi (Walworth et al., 1989).

Permasalahan yang sering timbul pada produksi protein rekombinan yang dirancang

untuk disekresikan oleh inang P. pastoris adalah tingkat sekresinya masih rendah. Salah

satu cara yang dapat dilakukan untuk mengatasi masalah ini adalah dengan menambah

Seminar Nasional


161

konsentrasi Sec4p intraselular, sehingga jumlah protein rekombinan yang disekresikan

bisa lebih banyak.

Berdasarkan latar belakang tersebut, penelitian ini bermaksud untuk merancang

suatu vektor ekspresi yang membawa gen SEC4 Pichia pastoris. Vektor ekspresi ini

selanjutnya dapat masukkan ke dalam suatu inang yang dirancang untuk menyekresikan

protein asing. Melalui penelitian ini diharapkan dapat dihasilkan vektor ekspresi yang

mengandung gen SEC4 P. pastoris yang dapat digunakan untuk koekspresi SEC4

dalam inang P. pastoris yang telah mengandung gen asing. Koekspresi SEC4

diharapkan dapat meningkatkan level sekresi protein asing oleh P. pastoris.

Bahan dan Metode Bahan

Galur yang digunakan pada penelitian ini adalah Escherichia coli TOP10F’

(Invitrogen) yang digunakan sebagai inang untuk kloning. Vektor yang digunakan

adalah pJet1.2 (Fermentas) dan pPIC3.5K (invitrogen). Enzim restriksi endonuklease

EcoR1, Taq DNA polymerase, dan T4 DNA ligase dari Fermentas. Primer

oligonukleotida untuk PCR (5’Sec4f dan 3’Sec4r) disintesis oleh Research Biolabs

(Singapura). Kit isolasi DNA: GeneJET Gel Extraction Kit, GeneJET Plasmid Miniprep

Kit dan Genomic DNA isolation Kit dari Fermentas. Marker DNA 1 kb dari Fermentas.

Media pertumbuhan, E. coli TOP 10F’ dari Pronadisa dan Oxoid. Reagen reagen lain

yang umum digunakan pada laboratorium biologi mulekul dari Sigma Aldrich dan

Merck. Metode

Amplifikasi SEC4 P. pastoris dan subkloning dalam E. coli.

Gen SEC4 P. pastoris diamplifikasi dengan teknik PCR. Campuran reaksi PCR

terdiri atas 1 μL hasil isolasi DNA genom P. pastoris; bufer PCR 1X; primer 5’Sec4f

(5’-TTGAATTCATGGCATCAAGAGGCACATCA-3’) 0,4 μM; primer 3’Sec4r (5’-

TTGAATTCTC AACAACAAGACGATTTGGT-3’) 0,4 μM (urutan yang

digarisbawahi merupakan urutan sisi pengenalan enzim restriksi EcoR1); dNTP 0,2 mM

(Fermentas); MgCl2 2,5 mM; 1,25 U enzim Taq DNA polymerase (Fermentas) dan air

bebas nuklease hingga 50 μL. Proses PCR dilakukan menggunakan mesin

Mastercycler® 5330 (Eppendorf) sebanyak 30 siklus, dengan masing-masing siklus

terdiri dari tahap-tahap denaturasi templat pada suhu 95oC selama 1 menit, tahap

penempelan primer (annealing) pada suhu 51oC selama 1 menit, dan tahap

pemanjangan primer pada suhu 72oC selama 1 menit. Hasil PCR dianalisis dengan

elektroforesis gel agaros 1% (b/v), kemudian dimurnikan menggunakan GeneJET Gel

Extraction Kit (Fermentas). Fragmen DNA hasil pemurnian, di analisis dengan

elektroforesis agaros 1 %(b/v).

Setelah dimurnikan, hasil PCR diligasi ke vektor pJet1.2 (Fermentas). Reaksi ligasi

dilakukan dengan perbandingan molar antara vektor pJET1.2 dan insert gen SEC4 1:3.

Campuran reaksi ligasi terdiri dari 10 μL buffer 2x reaksi; 5 μL purified SEC4 hasil

PCR; 1 μL (0.05 pmol ends) vektor pJET1.2; 1 uL blunting enzyme, air bebas nuklease

hingga 19 μL; dan 1 μL T4 DNA ligase. Volume total reaksi ligasi adalah 20 μL.

Seminar Nasional


162

Campuran kemudian divortex dan disentrifugasi selama 3-5 detik. Campuran

diinkubasi pada suhu 22C selama 15 menit.

Vektor pJet1.2 yang telah membawa gen SEC4 (pJet1.2-SEC4) digunakan untuk

mentransformasi E. coli TOP10F’. Pembuatan sel kompeten dilakukan mengikuti

prosedur CaCl2 (Sambrook, et al., 1989). Sejumlah 5 μL DNA hasil ligasi ditambahkan

ke dalam tabung yang berisi 50 μL sel kompeten, kemudian diinkubasi selama 30 menit

pada suhu 4C, kemudian dilakukan heat shock pada suhu 42C selama 90 detik.

Kemudian segera didinginkan di dalam es selama 10 menit. Campuran ini kemudian

ditambahkan 950 μL media LB cair dan diinkubasi pada suhu 37C selama 2 jam

dengan laju pengocokan 150 rpm. Kemudian disentrifugasi pada 12000 rpm selama 30

detik. Sebanyak 900 μL supernatan dibuang, pelet sel diresuspensi dengan supernatan

sisa sebanyak 100 μL dan kemudian ditumbuhkan pada media LB padat yang telah

mengandung Tetrasiklin 15 μg/mL dan Ampicillin 100 μg/mL, kemudian diinkubasi

pada suhu 37C selama 16-18 jam.

Koloni transforman E. coli yang tumbuh berwarna putih dikarakterisasi melalui

isolasi plasmid rekombinan (Sambrook, et al., 1989), analisis restriksi menggunakan

EcoR1, kemudian ditentukan urutan nukleotidanya. Urutan nukleotida gen SEC4 hasil

isolasi dari E. coli TOP10F’ dengan konsentrasi DNA sekitar 100 ng/μL ditentukan

dengan metode dideoksi Sanger (Dye Terminator) di Macrogene (Korea). Primer yang

digunakan untuk sekuensing adalah pasangan primer pJetfor dan pJetref (primer

universal untuk vektor pJet1.2). Hasil sekuensing di jajarkan menggunakan program

Seqman pada program DNAStar.

Kostruksi plasmid ekspresi pPIC3,5K-SEC4 dan kloning dalam E. coli

Dua g DNA plasmid pJet1.2-SEC4 dan pPIC3.5K dipotong menggunakan enzim

restriksi EcoR1 (Fermentas). Campuran reaksi mengandung 10 Unit enzim EcoR1 dan

buffer restriksi, kemudian diinkubasi pada suhu 37C selama 1 jam. Pita fragmen DNA

SEC4 (±650 pb) dan fragmen pPIC3.5K (9000 pb) di potong dari gel dan dimurnikan

menggunakan GeneJET Extraction Kit (Fermentas) mengikuti prosedur.

Gen SEC4 yang mengandung sisi restriksi EcoR1 pada ujung-ujungnya diligasi

dengan vektor pPIC3.5K yang mengandung sisi restriksi enzim yang sama. Reaksi

ligasi dilakukan dengan perbandingan molar antara vektor pPIC3.5K dan gen SEC4 1:5.

Campuran reaksi ligasi terdiri dari 2 μL buffer 10x reaksi; 1.22 μL gen SEC4; 1 μL

vektor pJET1.2; air bebas nuklease hingga 19 μL; dan 1 μL T4 DNA ligase. Volume

total reaksi ligasi adalah 20 μL. Campuran kemudian divortex dan disentrifugasi selama

3-5 detik. Campuran diinkubasi pada suhu 22C selama 1 jam.

Campuran ligasi yaitu plasmid pPIC3.5K-SEC4 digunakan untuk mentransformasi

E. coli TOP10F’ dengan metoda CaCl2 (Sambrook, et al. 1989). Transforman E. coli

yang tumbuh merupakan E. coli yang telah mengandung plasmid rekombinan

pPIC3.5K-SEC4. Plasmid rekombinan diisolasi dan dikarakterisasi melalui analisis

restriksi menggunakan enzim EcoR1. Urutan nukleotida gen SEC4 dalam plasmid

pPIC3.5K-SEC4 ditentukan menggunakan pasangan primer 5’AOX dan 3’AOX

(Invitrogen).

Seminar Nasional


163

Hasil dan Pembahasan

Amplifikasi SEC4 P. pastoris dan subkloning dalam E. coli. Amplifikasi gen SEC4 dengan teknik PCR menggunakan pasangan primer 5’Sec4f

dan 3’Sec4r menghasilkan fragmen berukuran 615 pb (Gambar 1a) sesuai dengan

panjang gen SEC4 P. pastoris di GenBank (nomor akses: XM_002492307.1).

Selanjutnya gen SEC4 telah berhasil disubkloning menggunakan vektor pJet1.2 dalam

E. coli (Gambar 1b). Sebanyak 104 koloni transforman E. coli telah diperoleh dan

diremajakan untuk pencarian koloni yang mengandung plasmid rekombinan.

a. b.

Gambar 1. (a) Produk PCR gen SEC4. (lajur 1) marker 1 kb, (lajur 2) SEC4. (b) Koloni

transforman E. coli [pJET1.2-SEC4].

Hasil isolasi plasmid dan karakterisasi dengan enzim EcoR1 diperoleh koloni

yang positif mengandung gen SEC4 (Gambar 2). Hasil restriksi plasmid yang

ditunjukkan pada Gambar 2 menunjukkan bahwa koloni 92 (lajur 6) positif

mengandung plasmid pJET-SEC4, ditunjukkan dengan adanya pita pada daerah ~3000

bp yang sesuai dengan ukuran plasmid pJET1.2 dan pita pada daerah ~615 bp yang

sesuai dengan ukuran gen SEC4. Koloni 64 dan 68 (lajur 3 dan 4) diduga mengandung

vektor pJET1.2 yang mengalami re-ligasi, ditunjukkan dengan pita plasmid yang tidak

terpotong oleh enzim EcoRI karena vektor pJET1.2 tidak memiliki sisi pengenal EcoRI.

Namun, seharusnya koloni ini tidak tumbuh pada media seleksi karena vektor pJET1.2

yang tidak disisipi DNA sisipan akan mengekspresikan protein yang mematikan bagi

transforman E. coli. Diduga hal ini terjadi karena adanya kontaminasi nuklease.

Kontaminasi ini dapat merusak integritas dari gen mematikan dengan rusaknya ujung

vektor pJET1.2 oleh aktivitas nuklease. Hasil restriksi koloni 21 dan 50 (lajur 2 dan 5)

menghasilkan plasmid yang terpotong oleh enzim EcoRI, namun tidak menunjukkan

pita spesifik pET1.2 maupun SEC4. Diduga hal ini terjadi karena proses restriksi yang

kurang sempurna sehingga menghasilkan plasmid pJET-SEC4 linear, ditunjukkan

dengan pita yang terletak diantara daerah ~3500 pb.

Seminar Nasional


164

Gambar 2. Hasil restriksi plasmid pJET1.2-SEC4 dengan enzim EcoRI. (lajur 1) marker 1

kb, (lajur 2) pJET-SEC4 koloni 21 cut/ EcoRI, (lajur 3) pJET-SEC4 koloni 64

cut/ EcoRI, (lajur 4) pJET-SEC4 koloni 68 cut/EcoRI, (lajur 5) pJET-SEC4

koloni 50 cut/ EcoRI, (lajur 6) pJET-SEC4 koloni 92 cut/EcoRI.

Kostruksi plasmid ekspresi pPIC3,5K-SEC4 dan kloning dalam E. coli

Gen SEC4 hasil subkloning dipotong dari plasmid pJet1.2-SEC4 menggunakan

enzim EcoR1. Pemotongan plasmid ini dengan enzim EcoR1 menghasilkan dua pita

DNA yaitu 3000 pb (vektor pJet1.2) dan 615 pb (gen SEC4). Sedangkan pemotongan

plasmid pPIC3.5K dengan enzim EcoR1 menghasilkan satu pita dengan ukuran 9000

pb (Gambar 3).

Gambar 3. Hasil restriks pJET1.2-SEC4 dan vektor pPICK3.5K dengan enzim EcoR1.

(lajur 1) marker 1 kb, (lajur 2) pPICK3.5K cut/ EcoR1, (lajur 3) pJET1.2-SEC4

cut/ EcoR1.

Fragmen 9000 pb (pPIC3.5K) dan 615 pb(SEC4) dipotong dari gel agaros,

kemudian dimurnikan menggunakan GeneJet Gel Extraction Kit (Fermentas). Kedua

fragmen DNA ini diligasi dengan perbandingan molar fragmen SEC4 : vektor

pPIC3.5K = 5:1. Hasil ligasi kemudian dikloning dalam E. coli TOP10F’ dan diperoleh

104 transforman E. coli (Gambar 4).

Seminar Nasional


165

a. b.

Gambar 4. Koloni E. coli [pPIC3.5K-SEC4] yang diremajakan.(a) koloni 1-52, (b) koloni

53-104.

Hasil penentuan urutan nukleotida gen SEC4 dalam plasmid rekombinan pJet1.2-

SEC4 menunjukkan bahwa gen SEC4 hasil subkloning homologi 100% dengan urutan

gen SEC4 P. pastoris pada GenBank (nomor akses: XM_002492307.1) (Gambar 5).

Penelitian ini merupakan penelitian pendahuluan untuk mendapatkan inang P.

pastoris yang mengandung tambahan gen SEC4 yang diperlukan untuk memfasilitasi

overekspresi protein rekombinan lain. Peningkatan jumlah protein Sec4p intraselular

akan menjamin bahwa semua protein yang diekspresikan dikirim keluar sel. Ragi

metilotropik P. pastoris sudah banyak digunakan untuk ekspresi protein rekombinan,

terutama protein eukariot karena memiliki sistem modifikasi pasca translasi dan dapat

mengekspresikan protein ekstraselular. Salah satu kendala ekspresi ekstraselular adalah

kurangnya jumlah protein yang berperan pada transportasi ekstraselular, salah satunya

adalah Sec4p.

Konstruksi vektor ekspresi yang mengandung gen SEC4 diperlukan untuk

menambah jumlah Sec4p yang dihasilkan oleh inang P. pastoris. Vektor ekspresi yang

digunakan merupakan ―suttle vector‖ yang dapat bereplikasi dalam inang bakteri

maupun P. pastoris. Peta vektor rekombinan yang dikonstruksi diperlihatkan pada

gambar 6. Transformasi pPIC3.5K-SEC4 ke dalam inang P. pastoris akan

menyebabkan terjadinya integrasi gen SEC4 ke kromosom yang disebabkan oleh

peristiwa rekombinasi homolog antara vektor dan genom, sehingga jumlah gen SEC4

yang terdapat pada genom akan bertambah.

Seminar Nasional


166

Gambar 5. Homologi urutan nukleotida SEC4 hasil subkloning dengan urutan SEC4 nomor

NCBI. Warna merah menunjukkan tingkat homologi 100%.

Seminar Nasional


167

Gambar 6. Peta vektor pPIC3.5K-SEC4 hasil konstruksi.

Gen SEC4 diekspresikan di bawah kontrol promotor dan terminator AOX1.

Promotor gen AOX1 paling umum digunakan pada ekspresi protein rekombinan

menggunakan inang P. pastoris. Gen AOX1 mengode enzim alkohol oksidase, yang

merupakan enzim kunci pada metabolisme metanol pada P. pastoris. Induksi ekspresi

protein rekombinan dilakukan dengan penambahan metanol ke media pertumbuhan

(Cereghino dan Cregg, 2000). Inang yang telah membawa tambahan gen SEC4

diharapkan dapat mengatasi masalah ekspresi dan sekresi protein asing dalam P.

pastoris

Kesimpulan Vektor ekspresi pPIC3.5K-SEC4 telah berhasil dikonstruksi, hasil penentuan urutan

nukleotida gen SEC4 dalam vektor ekspresi menunjukkan homologi 100% dengan gen

SEC4 P. pastoris pada GenBank (nomor akses: XM_002492307.1). Vektor ekspresi

hasil konstruksi ini dapat diko-ekspresikan dalam inang P. pastoris yang telah memiliki

gen asing, sehingga mengatasi permasalahan ekspresi dan sekresi protein rekombinan

oleh P. pastoris.

Ucapan Terimakasih Peneliti mengucapkan terima kasih pada Lembaga Penelitian dan Pengabdian

Masyarakat Universitas Padjadjaran atas dana penelitian melalui program PUPT

(Penelitian Unggulan Perguruan Tinggi).

Daftar Pustaka Cereghino, J. L. and Cregg, J. M. 2000. Heterologous protein expression in the

methylotrophic yeast Pichia pastoris. FEMS Microbiol. Rev. 24: 45-66.

Cregg, J.M., Vedvick, T.S., Raschke, W.C. 1993. Recent advances in the expression

of foreign genes in Pichia pastoris. BioTechnology 11: 905–910.

pPIC3.5K-

SEC4

10500 pb

dan Lingkungan Untuk Kesehatan -...

Documents

Transcript of dan Lingkungan Untuk Kesehatan -...