Gilang Nugraha, S.Si., M.SiTempat/Tanggal Lahir : Serang, Juli 1990

Pekerjaan : Dosen dan Peneliti

Instansi : Universitas Nahdlatul Ulama Surabaya

Alamat Rumah : Tawangsari – Sidoarjo

Email : gilang@unusa.ac.id

IG : biogilang

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Riwayat Pendidikan

• 2008 – 2011 : D-III Analis Kesehatan, Sekolah Tinggi Analis Bakti Asih Bandung

• 2012 – 2013 : S1 Biomedik, Universitas Nasional Jakarta

• 2014 – 2016 : S2 Kedokteran Laboratorium, Universitas Airlangga

• 2019 – Now : S3 Kedokteran Dasar, Universitas Airlangga

Organisasi

• Pengurus DPW PATELKI Jawa Timur

• Anggota Himpunan Kimia Klinik Indonesia

• Pengurus Pusat Asosiasi Institusi Teknologi Laboratorium Medik Indonesia (AIPTLMI)

• Kepala laboratorium hematologi, Fakultas Kesehatan, Universitas Nahdlatul Ulama Surabaya

Understanding Graphic Displays

in Hematology Analyzer

Gilang Nugraha, S.Si., M.Si

Webinar #5 DPP PATELKI

Sabtu, 6 Februari 2021

Latar Belakang

Standar Profesi Ahli Teknologi Laboratorium MedikKepmenkes RI No. HK.01.07/MENKES/313/2020

Keterampilan ATLM meliputi kemampuan verifikasi dan validasi hasil guna

memberikan hasil yang andal dan di percaya.

Hematology analyzer adalah

digunakan untuk menghitung dan

mengidentifikasi sel darah dengan

kecepatan dan akurasi tinggi.

verifikasi aspek pathofisiologis

verifikasi aspek teknis

Verifikasi aspek administratif

Gaurav Chhabra (2018)

SKKNI TLM Unit Q.86TLM00.076.1 : Validasi hasil

Diff CountParameters

Hematology Analyzer

CBC, 3-part Diff and Other

Lymph, Mxd, Mono

CBC, 5-part Diff and Other

Eo, Baso, Neut, Lymph, Mono

CBC, 6-part Diff and Other

Eo, Baso, Band, Seg, Lymph, Mono

Jenis Hematology Analyzer

Pelaporan Hasil

Hasil pemeriksaan hematology analyzerdisajikan dalam bentuk :

• Numerik

• Histogram

• Scattergram

• Tanda

• Flags

Electrical Impendance

teknik penghitungan dan

pengukuran sel yang

didasarkan pada pengukuran

perubahan impedansi listrik

(hambatan) yang dihasilkan

oleh partikel (yaitu sel darah).

Metode PemeriksaanHematology Analyzer 3-part diff

Each pulse = one cell

Height of pulse = cell volume

Time

Puls

e H

eig

ht

(fL)

Teknologi impedansi

melakukan pengukuran

berdasarkan pada

ukuran sel murni.

• RBC,

• PLT dan

• WBC (Lym, Neut, Mix)

Prinsip Pengukuran ImpendansiHematology Analyzer 3-part diff

Time

Puls

e H

eig

ht

(fL)

Osiloskop

Volume (fL)

Cell

Bum

ber

Histogram

Sampel Darah

HCT

PLTRBC

HGB

WBC

Larutan Pengencer

Reagen Litik

PLT RBC Diff Count

• Penumpukan protein pada aperture:

– Jumlah sel menurun palsu (↓) dan volume sel meningkat palsu (↑)

• Perpindahan sel pada aperture :

– Jumlah sel menurun palsu (↓) dan volume sel meningkat palsu (↑)

Kekurangan Metode Impedansi

• Dua sel atau lebih yang saling melewati celah secara bersamaan dapat terhitung satu pulsa, yang artinya terbaca satu sel.

– Jumlah sel menurun palsu (↓) dan volume sel meningkat palsu (↑)

Hydrodynamic Focusing

Tujuan :menghilangkan coincidence loss

dan variant pulse karena aliran

non-axial dan resirkulasi sel ke

zona sensor.

Histogram RBC

• Peak ideally within 80-100 fL

• 2 flexible discriminator

LD (25-75fL)

UD(200-250fL)

RDW-CV

RDW-SD

Lebar dari 20% ketinggian sumbu y

histogram RBC

𝐿2−𝐿1

𝐿2+𝐿1×100

1𝑆𝐷

𝑀𝐶𝑉×100atau

Interpretasi Histogram RBC

Interpretasi Histogram RBC

LD

PLT

LD

RBC

Penyebab:• Mikro-eritrosit• RBC fragments or dysplastic RBC• Giant Platelets• Platelet Clumps

Catatan:Periksa jumlah PLT.

Tindakan Perbaikan:Konfirmasi dengan estimasi PLT (Fonio)

UD

Tinggi abnormal pada LD RBC Tinggi abnormal pada UD RBC

Penyebab:• Cold Agglutinins• Erythroblasts / Normoblasts /NRBC• Aglutinasi RBC• Rouleaux (jarang)

Tindakan Perbaikan:MCV, MCH, MCHC abnormal lakukan slide review

Catatan:Parameter yang ditandai akibat UD tinggi diperiksa.

Interpretasi Histogram RBC

Penyebab:• Terapi pada IDA• Anemia infeksi atau tumor• Transfusi RBC• Leukositosis ekstrem (WBC >600 x 103/µL)

Catatan:Tanda pada RBC, MCV, RDW-SD & RDW-CV

Tindakan Perbaikan:• Penyebab WBC > dicocokkan dengan

parameter dan histogram WBC.• Leukositosis ekstrem : estimasi WBC

Multiple Peaks RBC Distribution Widh (DW) abnormal

Penyebab:• Indikasi aniso- atau poikilositosis

ekstrem.

Tindakan Perbaikan:Lakukan slide review

Catatan:Parameter yang ditandai akibat DW tinggi diperiksa.

Histogram PLT

• Peak ideally within 8-12 fL

• 2 flexible discriminator

LD (2-6fL)

UD(12-30fl)

MPV

PDW

With the peak height assumed to be 100%,

the distribution width at the 20% frequency

level is PDW.

P-LCR adalah rasio trombosit besar dari

diskriminator 12 fL atau lebih besar.

P-LCR

Interpretasi Histogram PLT

Penyebab:• High blank value• Fragmen sel

Catatan:Cek blank value

Tindakan Perbaikan:• Konfirmasi dengan estimasi PLT• Lakukan pembersian (auto rinse)

Tinggi abnormal pada UD PLT

Penyebab:• PLT Clumps

• EDTA-Incombatibility• Clotted sample

• Giant Platelets• Mikroeritrosit

PLT RBC

Tinggi abnormal pada LD PLT

Catatan:Periksa jumlah PLT.

Tindakan Perbaikan:Konfirmasi dengan estimasi PLT (Fonio)

Interpretasi Histogram PLT

Penyebab:Transfusi PLT

Multiple Peaks PLT

Distribution Widh (DW) abnormal

PDW tidak terdeteksi

Fragmentosit

Giant platelets atau micro-clot

Tindakan Perbaikan:Lakukan slide review

Tindakan Perbaikan:Konfirmasi dengan estimasi PLT (Fonio)

Histogram WBC

• 2 flexible discriminator

LD (30-40fL)

UD(300fL)

• 2 TROUGH discriminator

Interpretasi Histogram WBC

Penyebab:• High blank value• Fragmen sel

Catatan:Cek WBC dan parameter lain yang ditandai akibat kurva tidak berahir pada garis.

Tindakan Perbaikan:• Estimasi leukosit• Encerkan sampel 1:5

Tinggi abnormal pada UD PLT

Penyebab:Erythroblasts / Normoblasts /NRBC

Kurva tidak berakhir di garis dasar

Catatan:Periksa jumlah WBC.

Tindakan Perbaikan:• Estimasi WBC• Koreksi WBC jika ditemukan NRBC 5%

Interpretasi Histogram WBC

Neutrophilia

BandSegLymphMonoEoBaso

8 %77 %

7 %7 %1 %0 %

Differential

WBCLYM%MXD%NEUT%

Results

+ 23.8 x 109/L8.1%7.9%

84.0%

Lymphocytosis

BandSegLymphMonoEoBasoAty-Lym

4 %20 %64 %

4 %5 %0 %3 %

Differential

WBCLYM%MXD%NEUT%

Results

7.9 x 109/L+ 64.7%

15.8%– 19.5%

(x 400)(x 1000)

WBC-Histogram WBC-Histogram

Monocytosis

StabSegLymphMonoEoBasoMetAty-Lym

8 %37 %17 %35 %

1 %0 %1 %1 %

Differential

WBCLYM%MXD%NEUT%

Results

7.7 x 109/LF1 * 13.2%F2 * 37.7%

49.1%

Eosinophilia

StabSegLymphMonoEoBasoMyMetAty-Lym

1 %19 %20 %

9 %47 %

1 %1 %1 %1 %

Differential

WBCLYM%MXD%NEUT%

Results

4.3 x 109/L18,3%

+ 62,2%– 19.5%

(x 1000) (x 1000)

WBC-Histogram WBC-Histogram

Radiofrequency

Metode PemeriksaanHematology Analyzer 5-part diff

Optical/Light Scatter

Arus elektromagnetik tegangan

tinggi mendeteksi ukuran sel

berdasarkan kepadatan sel

sehingga memberikan informasi

karakteristik internal sel.

Cahaya monokromatik dipancarkan yang

dipancarkan pada sel akan menyebar kan

cahayake segala arah yang dapat

memberikan informasi ukuran dan

karakteristik sel.

Metode PemeriksaanHematology Analyzer 5-part diff

Hasil hamburan cahaya :

• Difraksi: pembengkokan di sekitar sudut atau permukaan sel,

• Refraksi: pembengkokan karena perubahan kecepatan, dan

• Refleksi: hamburan sinar ke belakang yang disebabkan oleh halangan.

Light Scatter digunakan

sebagai metodologi utama

atau biasanya

dikombinasikan dengan

metode lain.

Jenis Light ScatterHematology Analyzer 5-part diff

0⁰ = Forward-scattered light 90⁰ = Side-scattered light Fluorescent light

Volume sel / ukuran Struktur internal

(bentuk inti, granula, dll)

Kematangan sel

(DNA dan RNA)

Scatter Plot WBCHematology Analyzer 5-part diff

Pencaran cahaya pada sudut yang berbeda dapat diplot satu sama lain untuk

menghasilkan sitogram dua dimensi atau scatter plot.

Untuk membaca scattergram, kita perlu tahu apa yang di

ukur pada sumbu X dan sumbu Y

Forward-scattered light

Side-scattered light

2D Scatter Plot WBCHematology Analyzer 5-part diff

Multi-Angel Polarized Scatter SeparationHematology Analyzer 5-part diff

Teknologi Multi-Angle Polarized Scatter Separation (MAPSS) menggunakan

empat detektor sebaran cahaya untuk menentukan berbagai fitur seluler.

Semakin banyak detektor (diposisikan pada berbagai sudut) yang digunakan

untuk mengumpulkan sinyal pada setiap sel, semakin banyak informasi yang

dihasilkan mengenai karakteristik seluler, sehingga meningkatkan akurasi

identifikasi sel.

• 0 ° atau Axial Light Loss (ALL): ukuran

• 0 ° - 10 ° Intermediate Angle Scatter (IAS):

kompleksitas seluler

• 90 ° Polarized Side Scatter (PSS): lobularitas

/ segmentasi nuleus

• 90 ° Depolarized Side Scatter (DSS):

granula.

Jenis Scattergram

• Sumbu X: kematangan

• Sumbu Y: ukuran

• Digunakan untuk

pemisahan dan

penghitungan jumlah total

WBC, basofil, dan eritrosit

berinti.

Prinsip Pengukuran

Jenis Scattergram

Prinsip Pengukuran

• Sumbu X: Kompleksitas

• Sumbu Y: Kematangan

• Digunakan untuk pemisahan

dan perhitungan neutrofil,

eosinofil, limfosit, monosit,

dan granulosit belum matang

(Immature Granulocyte, IG)

Jenis Scattergram

Prinsip Pengukuran

• Sumbu X: Kematangan

• Sumbu Y: Ukuran

• Digunakan untuk pemisahan

dan perhitungan retikulosit

Pengelompokan

• low fluorescence ratio (LFR)

• medium fluorescence ratio

(MFR)

• high fluorescence ratio

(HFR)

Jenis Scattergram

Prinsip Pengukuran

• Sumbu X: Kematangan

• Sumbu Y: Ukuran

• Digunakan untuk

pemisahan dan

perhitungan platelet

matang (PLT-F) dan

platelet muda (Immature

Platelet Fraction, IPF)

• IPF mencerminkan

peningkatan produksi

platelet pada sumsum

tulang

Jenis Scattergram

Prinsip Pengukuran

• Sumbu X: kompleksitas

• Sumbu Y: lobularitas

• Membedakan Polimorfonuklear dan Mononuklear

kompleksitas

lobula

rita

s

Jenis Scattergram

Prinsip Pengukuran

• Sumbu X: lobularitas

• Sumbu Y: granularitas

• Pemisahan polimorfonuklear menjadi neutrofil dan eosinofil

lobularitas

gra

nula

rita

s

Jenis Scattergram

Prinsip Pengukuran

• Sumbu X: kompleksitas

• Sumbu Y: ukuran

• Pemisahan populasi WBC

kompleksitas

ukura

n

TERIMA KASIH