8/16/2019 Cara Kerja Beberapa Enzim

http://slidepdf.com/reader/full/cara-kerja-beberapa-enzim 1/4

CARA KERJA BEBERAPA ENZIM

Pada praktikum ini akan dipelajari cara kerja bebera enzim seperti urease, suksinat

dehidrogenase, xantin oksidase dan peroksidase. Enzim urease menguraikan ureum dan

membentuk amonium karbonat yang bersifat alkalis. Terbentuknya amonium karbonat dapat

diketahui mengggunakan indikator phenolphtalein (phenolptalein tidak berwarna pada p

netral dan berwarna merah p alkalis!.

5.1 Urease

Prosedur yang harus dilakukan adalah sebagai berikut"

#. $e dalam tabung yang berisi % ml larutan ureum #& tambahkan # tetes

 phenolphtalein '& kemudian # ml larutan urease. Perhatikan apa yang terjadi. engapa

demikian )

'. *akukanlah percobaan seperti no. #, tetapi terlebih dahulu panaskan

larutan urease sampai mendidih.

+. *akukanlah percobaan seperti no. #, tetapi terlebih dahulu

masukkanlah tetes sublimat ke dalam # ml larutan urease yang akan dipakai. Perhatikan

apa yang akan terjadi.

5.2 Suksinat Dehidr!enase "

Enzim dehidrogenase adalah enzim yang dapat mengkatalisis pengeluaran hidrogen

dari substrat tetapi tidak dapat menggunakan oksigen sebagai akseptor hidrogen yang

dilepasnya. Pada peristiwaperistiwa oksidasi biologis, atom hidrogen yang dilepas dari suatu

substrat oleh enzim dehigogenase biasanya ditangkap -/0 atau -/P0. Enzim

dehidrogenase yang berperan penting pada pengadaan energi dalam tubuh umumnya

menggunakan -/0 sebagai akseptor idrogen yang dilepaskannya. Pada keadaan aerobik 

reduksi dari -/0 tersebut akan diikuti oleh pemindahan hidrogen dan elektron melalui

fla1oprotein, koenzim 2, sistem sitokrom, akhirnya ke oksigen dan terbentuk '3.

4angkaian reaksi redoks ini dikenal sebagai rantai transpor elektron atau rantai respirasi dan

terjadi di dalam mitokondria. Energi yang di lepas pada rangkaian reaksi redoks tersebut akan

ditangkap oleh /P dan Pi sehingga terbentuk TP. (tanpa melalui -/0!, sebagai akseptor 

hidrogen yang dilepasnya dan seterusnya ke koenzim 2, sistem sitokrom lalu ke oksigen

sampai terbentuk '3. Enzim suksinat dehidrogenase ini bekerja pada salah satu tahap

8/16/2019 Cara Kerja Beberapa Enzim

http://slidepdf.com/reader/full/cara-kerja-beberapa-enzim 2/4

reaksi siklus $rebs. 5esuai dengan namanya6 enzim ini mengubah suksinat, dengan jalan

melepas ' atom hidrogen, membentuk fumarat.

Pada percobaan berikut kita akan mempelajari kerja enzim suksinat dehidrogenase.

  7 7'

5ubstrat -/ 8p '3 9 3

  $o2 5istem 5itokrom '3

etilan biru, suatu senyawa organik sintetik berwarna biru akan berubah menjadi tak 

 berwarna bila berikatan dengan hidrogen karena membentuk leuko metilen biru (leuco

methylene blue!.

7 : ' 7'

7iru tak berwarna

3leh karena harga potensial redoks dari 77' hampir sama dengan harga potensial

redoks dari pasangan ubi;uinone ($o2$o2'!, maka 7 akan berkompetisi dengan

ubi;uinone untuk menangkap hidrogen.

5elama rantai respirasi berjalan aktif, kompetisi diatas akan berjalan terus sehingga metilen

 biru hanya sebagian saja yang tereduksi. 7ila 3' tidak ada atau sudah habis, maka perubahan

warna mentilen biru akan lebih jelas. (elihat kerja suksinat dehidrogenase seperti di atas,

termasuk golongan enzim oksidoreduktase yang manakah enzim suksinat dehidrogenase

tersebut )!.

Prosedur yang harus dilakukan adalah sebagai berikut"

#. ulamula jaringan otot katak (yang mengandung enzim suksinat

dehidrogenase dilumatkan dahulu sampai halus!.

'. mbil tiga tabung reaksi, tandai dengan nomor <, <<, <<< isi masingmasing

dengan #= g daging katak di atas, kemudian tambahkan # m larutan penyangga pospat p

>,?.

+. Taruhlah tabung < dalam air mendidih selama % menit.

@. asukkan ke dalam tabung <, dan << masingmasing # ml -atrium suksinat

=,=% -. ke dalam tabung <<< masukkan # ml air.

%. Tambahkan pada tiap tabung # ml larutan metilen biru (# " '=.===!, kocok 

 pelanpelan. $emudian lapisi dengan #= tetes parafin (karena berat jenisnya lebih kecil

8/16/2019 Cara Kerja Beberapa Enzim

http://slidepdf.com/reader/full/cara-kerja-beberapa-enzim 3/4

dari air, parafin berada pada larutan permukaan, memisahkan larutan di bawahnya dari

udara luar!. Aangan dikocok B

>. <nkubasikan ke tiga tabung 6 pada suhu +Co D di dalam waterbath, selama #

 jam.

pa yang nampak pada masingmasing tabung ) jelaskan B

5.# $antin %ksidase

Enzim ini termasuk golongan oksidase, yaitu kelompok enzim yang juga dapat

melepaskan hidrogen dari substrat dengan menggunakan oksigen sebagai akseptornya.

Enzimenzim kelompok ini menghasilkan air atau hidrogen peroksida sebagai produk reaksi.

Enzim yang termasuk ke dalam kelompok oksidase misalnya asam amino oksidase, sitokrom

oksidase, glukosa oksidase dan xantin oksidase. 5itokrom oksidase merupakan hemoprotein

yang tersebar luas dalam banyak jaringan yang mempunyai gugus prostetik heme.

antin oksidase tersebar luas di dalam tubuh dan terdapat di dalam susu, usus halus,

ginjal serta hati. 5usu sapi juga mengandung xantin oksidase, yang dapat mengoksidasi

xanthine. Enzim ini juga mempunyai sifat dapat mengoksidasi aldehid. /i dalam percobaan

ini metilen biru digunakan sebagai akseptor hidrogen.

Prosedur yang harus dilakukan adalah sebagai berikut"

#. 5ediakan + tabung reaksi, beri tanda , F, dan G.

'. asukkan ke dalam tabung dan dan F + ml susu yang mentah.

  Pada tabung G masukkan + ml susu masak (warna biru!

+. 7eri metilen biru formaldehid ('% mg 7 dilarutkan dalam #H% ml air dan %

ml formaldehid @=&! sebanyak %> tetes pada , F dan G. $ocok sampai warnanya rata.

@. Tambahkan pada tabung ? tetes parafin. Aangan dikocok B

%. <nkubasi pada +Co D selama # jam. Perhatikan apa yang terjadi pada , F dan

G.

7agaimana perubahan warna pada masingmasing tabung ) Aelaskan.

5.& Perksidase

Peroksidase termasuk kelompok enzim hidroperoksidase, yaitu kelompok enzim yang

menggunakan hidrogen peroksida atau peroksida organik sebagai substrat. Terdapat dua jenis

enzim yang termasuk kelompok ini, yaitu peroksidase dan katalase. idroperoksidase

melindungi tubuh terhdapa senyawasenyawa peroksida. 5usu mengandung enzim

8/16/2019 Cara Kerja Beberapa Enzim

http://slidepdf.com/reader/full/cara-kerja-beberapa-enzim 4/4

 peroksidase, yang berperan dalam mencegah terjadinya penumpukan hidrogen peroksida di

dalam tubuh. Peroksidase mengkatalisis reaksi berikut ini"

Peroksidase

  '3' : ' IIIIIII ' '3 :

Prosedur yang harus dilakukan adalah sebagai berikut"

#. 5ediakan ' tabung reaksi, beri tanda P dan 2.

asukkan ke dalam tabung P dan 2 masingmasing ' ml susu mentah (warna biru!

'. Panaskan tabung P hatihati selama % menit (didihkan!, kemudian dinginkan

kembali.

+. Tambahkan pada tabung P da 2 " # ml benzidin @& dan # ml '3' +&.

@. $ocoklah dan perhatikan apa yang terjadi

5.5 'u!as Pendahu(uan

5ebalum praktikum dimulai, jawablah pertanyaan di bawah ini"

#. 5ebutkan macammacam enzim dan cara kerjanyaB

'. pakah guna parafin pada percobaan di atas )

+. 7uatlah skema dari percobaanpercobaan di atasB

@. engapa dilakukan inkubasi pada suhu +CJD pada percobaan enzim)

%. 5ebut dan jelaskan macammacam inhibitor kerja enzimB