Bab III Mikro Muzdalifa

8/17/2019 Bab III Mikro Muzdalifa

1/14

Daftar Isi

Media Pertumbuhan 1


2/14

BAB III

MEDIA PERTUMBUHAN

I . Tanggal/ hari pratikum :

Kelompok :

Pukul :

Tempat :

II. Tujuan :

Mahai!a "an mahai!i "apat mengetahui per#e"aan me"ia pertum#uhan PDA $Potato

De%troe Agar& 'TEA $Tuage Ektrak Agar& 'NA $Nutrient Agar &.

Mahai!a "an mahaii!i "apat mengetahui "an mem#uat ma(am)ma(am me"ia

pertum#uhan #er"aarkan kompoii.

Dapat mem#e"akan me"ium intei' emi intei'"an alamiah

Media Pertumbuhan 2


3/14

III. Tinjauan Pustaka :

A. *atar Belakang

Me"ia pertum#uhan atau le#ih "ikenal "engan me"ium. Me"ia pertum#uhan atau

me"ium ini "apat "iartikikan ialah u#tani +ang ter"iri ata (ampuran)(ampuran ,at),at

makanan $nutrient& +ang "ipergunakan untuk pemeliharaan "an pertum#uhan

mikroorganime. Mikroorganime a"alah mahluk hi"up +ang #erukuran ke(il +ang ti"ak

"apat "ilihat kaat mata atau mata telan-ang "engan kata lain haru menggunakan alat

#antu #erupa mikrokop . Mikroorganime "apat #erupa #akteri' -amur'iru'"# .

leh karena itu "alam me"ium itu haru a"a ,at),at atau #ahan)#ahan +ang euai "an

"i#utuhkan oleh mikro#a +ang "iinginkann+a "an "apat kita 0ormulaikan ke"alam

me"ium . 1en+a!a) en+a!a organik +ang "iperlukan "alam pertum#uhan mikro#a mialn+a

protein 'kar#ohi"rat' lemak'mineral'"an itamin. 1elain #erperan e#agai nutrient atau

#ahan makanan untuk mikroorganime +ang akan "ikem#ang#iakan'me"ium -uga

"igunakan untuk melihat gerakan "ari uatu gerakan mikroorganime apakah #eri0at

motil atau non motil.

Peran utama nutrient ini a"alah e#agai um#er energ+ '#ahan pem#angun el "an

e#agai aeptor ele(tron "alam reaki #ioenergetik $reaki +ang menghailkan energ+&. Dalam pem#uatan me"ium 'me"ium haru memenuhi +arat)+arat #erikut :

2& Me"ium haru memenuhi emua ke#utuhan nutrient +ang mu"ah

"igunakan oleh mikroorganime3& Me"ium ti"ak #oleh mengan"ung ,at pengham#at pertum#uhan

4& Me"ium haru teril

5& Me"ium haru memiliki tekanan omoe'ph "an lain)lain.

Ma(am 6ma(am me"ium :

1. Me"ium #er"aarkan i0at 0iikn+a :a. Me"ium Pa"at

Me"ium pa"at +ang mengan"ung agar e#an+ak 27 8 ehingga ketika me"ium

telah "ingin akan mengera atau men-a"i pa"at.

b. Me"ium 1etengah Pa"at

Me"ia +ang mengan"ung agar 9'48 )9'58 ehingga men-a"i e"ikit ken+al'

"enagn kata lain ti"ak #egitu pa"at "an ti"ak #egitu (air. Me"ia ini enga-a "i#uat

Media Pertumbuhan 3


4/14

"engan tu-uan upa+a pertum#uhan mikro#a "apat men+e#ar ke eluruh me"ia'

tetapi ti"ak mengalami per(ampuran empurna -ika tergo+ang.

c. Me"ium air

Me"ium +ang ti"ak mengan"ung agar 'ehingga #entukn+a (air "an ti"ak

mengera

2. Me"ium #er"aarkan kompoii

a. Me"ium inteiMe"ium intei ini a"alah me"ia +ang kompoiin+a/ kompoii ,at kimian+a

telah "iketahui e(ara pati. ontohn+a : ;lu(oe Agar 'Ma( onke+ Agar '

Nutrient Agar' B;BB'P'AMialn+a kompoii NA intei :ter"iri "ari e%tra #ee0 29 gramui(e Agar'Brain Heart In0uion Agar 'Pan(reati( E%tra(t. Tetapi "alam pem#uatan me"ia pertum#uhan $me"ium& kali ini +ang "i#uat

han+a me"ium intei "an emi intei $ NA'PDA'TEA& .

4. Me"ium Ber"aarkan tu-uan

a. Me"ium untuk iolai

Me"ium ini mengan"ung emua en+a!a eenial +ang #erguna elama

pertum#uhan atau perkem#ang#iakan mikro#a. Mialn+a Nutrient Broth'Bloo"

Agar.

#. Me"ium 1elekti0

Me"ium ini #ukan han+a #erii nutrii +ang "iperlukan oleh #akteri a-a 1elma

pertum#uhan namun -uga "itam#hankan uatu ,at tertentu 'ehingga pa"a me"ium

"apat menekan pertum#uhan atau perkem#ang#iakan #akteri lain "an merangang

pertum#uhan atau perkem#ang#iakan #akteri +ang "iinginkan a-a.

(. Me"ium "iperka+a

Media Pertumbuhan 4


5/14

Me"ium ini elain mengan"ung nutrii -uga "itam#ahkan komponen komplek

eperti Bloo" Tellurite Agar 'Bile Agar'1erum Agar "an lain)lain.

". Me"ium untuk Perema-aan Kultur

Me"ium ini "igunakan untuk perema-aan kultur

e. Me"ium untuk menentukan ke#utuhan pei0ik

Me"ium ini "igunakan untuk men"iagnoi "an menganalii meta#olime

0. Me"ium untuk karakteritik #akteri

Me"ium ini "igunakan untuk mengetahui kemampuan pei0ik uatu mikro#a .

g. Me"ium Di00erenial

Me"ium ini #ertu-uan untuk mengi"enti0ikai mikro#a "ari (ampurann+a

#eer"aar karakter pei0ik +ang "itun-ukan pa"a me"ia "i0erenial' mialn+a

T1IA $ Tripel 1ugar Iron Agar &

Meto"e pem#uatan me"ia

Meto"e pem#uatan me"ia a"a "ua +aitu :

2. Meto"e Tuang $pour plate&Meto"e ini +ang "igunakan pa"a pratikum kali ini'+ang "ilakukan a"alah me"ia

pertum#uhan $me"ium& +ang telah "iterilkan kemu"ian "ituang ke"alm mialn+a (a!an

petri atau ta#ung reaki +ang telah "iterilkan' penuangan me"ia "ilakukan "i"ekat api

agar #eker-a e(ara aepti "an menghin"ari kontaminai "ari #akteri luar. Kemu"ian

"iinku#ai elama kurang le#ih 5? -am.

3. Meto"e Permukaan $ 1ur0a(e/ 1prea" Plate&

ara melakukan meto"e permukaan +aitu me"ia (air teril "ituang terle#ih "ahulu

ke"alam (a!an petri' etelah mem#eku "ituang 9'2 ml e"iaan +ang telah "ien(erkan

'lalu "iratakan "engan alat penguap "iata permukaan me"ia. Kemu"ian "iinku#ai

elama kurang le#ih 5? -am.

Bentuk 6#entuk me"ium :2. Bentuk agar miring $agar lant&

Media Pertumbuhan 5


6/14

) Dari me"ium "alam ta#ung' "iautokla0 langung "imiringkan "engan u"ut

kemiringan +ang "iinginkan.) Biarkan hingga mengera

3. Bentuk agar tegak $ agar "eep&

) Dari me"ium "alam ta#ung' "iatokla0 langung "i#iarkan tegak "irak ta#ung

reaki

) Biarkan hingga me"ium menggera.

4. Bentuk agar lempeng

Dari me"ium tuang "alam (a!an petri teril ker-akan e(ara aepti e#an+ak ?)29 ml

'-ika me"um "alam ta#ung me"ium "imaukkan e#an+ak kurang le#ih @)? ml

B. *an"aan Teori

Mikroorganime "apat "itum#uhkan "an "ikem#angkan pa"a uatu u#trat

+ang "ie#ut me"ium. Me"ium +ang "igunakan untuk menum#uhkan "anmengem#ang#iakan mikroorganime tere#ut haru euai uunann+a "engan

ke#utuhan -eni)-eni mikroorganime +ang #erangkutan. Be#erapa

mikroorganime "apat hi"up #aik pa"a me"ium +ang angat e"erhana +ang

han+a mengan"ung gram anorganik "itam#ah um#er kar#on organi( eperti gula

$olk'24&

Air angat penting #agi organime #erel tunggal e#agai komponen utama

protoplaman+a erta untuk maukn+a nutrient ke"alam el. $ Ha"iotomoe '24&

Pem#iakan el memerlukan uatu me"ia e#agai tempat hi"upn+a +ang "ie#ut

kultur "an me"ia #iakan. $Tortora'399& 1upa+a mikro#a "apat tum#uh #aik "alam uatu me"ia 'maka me"ium tere#ut

haru memenuhi +arat)+arat antara lain :

• Haru mengan"ung emua ,at hara +ang mu"ah "igunakan oleh mikro#a

• Haru mempun+ai tekanan amoa'tegangan permukaan "an pH +ang

euai "engan ke#utuhan mikro#a +ang "itim#ulkan.

• Haru mengan"ung ,at),at +ang "apat mengham#at pertum#uhan mikro#a

• Haru #era"a "alam kea"aan teril e#elum "igunakan' agar mikro#a +ang

"iinginkan "apat tum#uh #aik. $1ute"-o'2@&

Alat +ang "igunakan "alam uatu penenlitian atau pratikum haru

"iteriliai terle#ih "ahulu untuk mem#e#akan emua #han "an peralatan

tere#ut "ari emua #entuk kehi"upan .$ Ha"ioetomo' 24&

Media Pertumbuhan 6


7/14

Nutrient agar a"alah me"ium umum untuku-i air "an pro"uk "air+. NA -uga

"igunakan untuk pertum#uhan ma+orita "ari mikroorganime +ang ti"ak

elekti0' "alam artian mikroorganime hetetrotro0. Me"ia ini merupakan me"ia

e"erhana +ang "i#uat "ari ektrak #ee0 'pepton'"an agar . Na merupakan

alah atu merupakan alah atu me"ia umum +ang "igunakan "alam proe"ur

#akteriologi' eperti u-i #iaa "ari air e!age'pro"uk pangan 'untuk mem#a!a

tok kultur' untuk pertum#uhan ampel pa"a u-i #akteri "an mengiolai

organim "alam kultur murni. $ In"an'3994&

IV. Metodologi Pratikum

Alat "an Bahan :

Alat :

2. ;ela ukur 79 ml

Media Pertumbuhan 7


8/14

3. Tim#angan elektrik

4. Ta#ung reaki

5. Rak ta#ung reaki7. a!an petri teril

@. Erlenme+er 379 ml $4&

. Beaker gla?. Tiu

. orong

29. Kerta aring22. Kaa

23. 1en"ok

24. 1patula

25. Ka(a penga"uk27. Hot plate

2@. Autokla0

2. 1er#et

2?. Kerta tim#ang2. Piau

39. 1pritu32. Kapa

33. Kerta perkamen

34. Kerta alumunium

Bahan :2. Kentanng

3. Touge4. NA

5. A=ua"e

7. 1ukroa

@. Agar . De%troe

Media Pertumbuhan 8


9/14

V. Prosedur Kerja

2& Me"ia Potato De%troe Agar $PDA& / 1emi inteti

) Kentang +an telah "iiapkan 'kupa kentang kemu"ian potong kentang

menggunakan piau men-a"i #agian +ang ke(il.) Kemu"ian kentang +ang telah "ipotong ta"i tim#ang menggunakan tim#angan

elektrik "engan ala kerta perkamen e#n+ak 27 gram) Kemu"ian (u(i kentang +ang telah "itim#ang ta"i hingga #erih

) Maukan kentang ke"alam #eaker gla +ang telah "iiapkan

) *alu iapkan 7 ml a=ua"e "an maukkan ke"alm #eaker gla +ang #erii

kentang ta"i

) Maak / re#u menggunakan hot plate 'am#il "ia"uk)a"uk agar kentang ti"ak

hangu) Tunggu ampai men"i"ih

) 1etelah men"i"ih 'aring menggunakan (orong "iata kerta perkamen "an kaa

"imaukkan ke"alam Erlenme+er $maa 2&) Kemu"ian etelah menim#ang kentang ta"i 'tim#ang pula "e%troe agar "engan

menggunaka tim#angan elektrik "an kerta perkamen e#an+ak 27 garam "an

tim#ang pula 3 gram Agar

) ampurkan ke"ua #ahan itu "i"alam atu !a"ah #eaker gla "an tam#ahkan

a=ua"e e#n+ak 7 ml $maa 3&

) Re#u "iata hot plate hingga men"i"ih) Kemu"ian tam#ahakan maa 2 "an maa 3 ke "alam Erlenme+er a"uk hingga

homogen) 1etelah homogen tutup #i#ir Erlenme+er "engan kapa lalu tutup lagi "engan

kerta alumunium 'kemu"ian #eri la#el agar ti"ak tertukar ) 1etelah eleai maukkan ke"alam autokla0 untuk "iteriliaikan

) >ika telah eleai "iteriliaikan kurang le#ih elama 27 menit

Media Pertumbuhan 9


10/14

) Me"ium potato "e%troe agar $PDA& iap "igunakan

3& Me"ia Touge E%tra% Agar $TEA&

) Touge +ang telah "ie"iakan "itim#ang menggunakan tim#angan elektrik "engan

ala kerta perkamen e#n+ak 27 gram) *alu (u(i #erih "an maukkan ke"alam #eaker gla

) 1ipakan 7 ml a=ua"e "an maukkan ke"alam #eaker gla +ang #erii touge

+ang u"ah "i(u(i ta"i

) Kemu"ian re#u "iata hot plate'hingga men"i"ih am#il "ia"uk a"uk $maa 2&

) Kemu"ian etelah men"i"ih maukkan ke"alam Erlenme+er "engaan (ara

"iaring "engan mengunakan kerta aring "an kaa

) 1etelah menim#ang touge 'tim#ang pula ukroa e#an+ak 27 gram "an agar

e#an+ak 3 gram maukkan ke"alm atu !a"ah #eaker gla) Kemu"ian tam#ahakan e#n+ak 7 ml a=ua"e

) Re#u hingga men"i"ih $maa 3&

) 1etelah men"i"ih maukkan maa 3 ke"alam Erlenme+er +ang #erii maa atu

a"uk hingga homogen

) 1etelah homogen tutup #i#ir Erlenme+er "engan kapa lalu lapii "engan kerta

alumunium "an #eri la#el

) Terakhir teriliai "i"alam autokla0 kurang le#ih elama 27 menit '"an me"ium"apat "ituang "an "igunakan

4& Me"ia Nutrient Agar $NA& / 1intei

) Pertama tim#ang NA $nutrient agar& e#an+ak 7 garam menggunakan tim#angan

elektrik "an "ialai oleh kerta perkamen) Kemu"ian tam#ahkan 279 a=ua"e ' re#u /maak "iata hot plate hingga

men"i"ih

) 1etelah men"i"ih tuang ke"alam Erlenme+er "an tutup #i#ir Erlenme+er "engan

menggunakan kapa "an kemu"ian lapii "engan kerta alumunium

) Beri la#el "an teriliai "i autokla0 kurang le#ih elama 27 menit) Kemu"ian -ika u"ah me"ia u"ah #ia "igunakan

VI. Hail "an Pem#ahaan

Media Pertumbuhan 10


11/14

Hail

Hail +ang "i"apatkan "ari pratkum pertum#uhan ini a"alah "i"apatkan me"ia

pertum#uhan $me"ium& +ang teril "an iap "igunakan untuk menum#uhkan #akteri atau

mikroorganime +ang kita inginkan 'euai "engan ke#utuhan "an perlakuan +ang"iinginkan #akteri 'erta "apat mem#uat me"ium "ari #ahan "aar intei "an emi

intei. Bahan intei pa"a pem#uatan me"ium pa"a pratikum kali ini a"ala nutrient

agar $NA& "an #ahan emi intei pa"a pem#uatan me"ium pa"a pratikum kali ini a"ala

potato "e%troe agar $PDA& "an touge e%tra% agar $TEA& .me"ium +ang telah "iteriliai

iap untuk "imaukkan ke"alam (a!an petri teril eta ta#uung reaki. Dalam pratikum

ini meto"e +ang "igunakan a"alah meto"e tuang 'me"ium +ang telah "iteriliaikan ta"i

#aik PDA'TEA' atau NA '"ituang ke"alam (a!an petri teril atau ta#ung reaki "ilakukan

e(ara aepti "an ti"ak -auh "ari api. Kemu"ian me"ium "i#uat "alam tiga #entuk

me"ium +aitu lant $miring& '"eep $tegak& 'lempeng 'untuk me"ium miring tegak "an

lempeng tutp #i#ir ta#ung "engan kapa "an teriliaikan lagi "iautokla0 . Dengan

"emikian etelah emua me"ia "ingin atau mengera 'me"ia "u"ah #ia atau iap

"igunakan e#agai tempat pertum#uhan "an perkem#ang#iakan #akteri.

Pem#ahaan

Me"ia a"alah uatu #ahan +ang ter"iri "ari (ampuran ,at),at hara$nutrient& +ang

#erguna untuk mem#iakan mikro#a. Dengan menggunakan #erma(am)ma(am me"ia

"apat "ilakukan iolai 'per#an+akkan' pengu-ian i0at)i0at 0iiologi "an perhitungan

-umlah mikro#a $ 1(hlegel'25&

Dalam pratikum kali ini kami mem#uat me"ia pertum#uhan atau me"ium "engan

kompoii me"ium intei +ang "igunakan a"alah Nutrient Aagar $NA& "an kompoii

me"ium emi intei "an +ang "igunakan a"alah Potato De%troe Agar $PDA& "an Touge



12/14

E%tra% Agar $TEA&. Pa"a pem#uatan me"ium kompoii nutrient agar $NA& 'tim#ang NA

e#an+ak 3 gram kemu"ian tam#ahkan 279 a=ua"e 'lalu re#u am#il "iaa"uk a"uk

"iata hot plate hingga men"i"ih 'etelah men"i"ih maukkan ke"alam Erlenme+er "an

tutup "engan kapa "an lapii "engan kerta alumunium 'kemu"ian teriliaikan "i"alam

autokla0 elama kurang le#ig 27 menit. Kemu"ian kompoii #ahan emi intei "engan

(ara kentang "an tauge +ang telah "iiapkan untuk kentang "ikupa terle#ih "ahulu "an

"ipotong "a"u kemu"ian tim#ang menggunakan tim#angan elektrik e#an+ak 27 gram

kemu"ian tam#ahkan 7 ml a=ua"e re#u am#il "ia"uk hingga men"i"ih maukkan

ke"alam Erlenme+er kemu"ian tim#ang pula "e%troe agar e#an+ak 27 gram "an 3 gram

agar kemu"ian (ampurkan "engan 7 ml a=ua"e re#u hingga men"i"ih kemu"ian

(ampurkan ke"alam Erlenme+er +ang telah #erii ari kentang ta"i 'a"uk hingga

homogen "an kemu"ian tutup #i#ir Erlenme+er "engan kapa "an lapii "engan kerta

alumunium "an teriliaikan "alam autokla0 elama kurang le#ih 27 menit' lakukan

proe"ur "iata untuk TEA. 1etelah emua #ahan untuk me"ia telah "iterilkan mka

me"ium #ia "igunakan tetapi pin"ahkan "ahulu ke!a"ah lain untuk mem#uat me"ia

tegak'miring'lempeng "enagn menggunakan meto"e tuang +ang "ilaukan e(ara

aepti 'untuk #entuk me"ium lempeng tuangkan me"ia e(ara aepti "i"ekat api kira)

kira ?)29 ml kemu"ian putar meme#entuk angka "elapan "iata me-a agar me"ium rata .

"inginkan "an tunggu hingga mengera 'untuk me"ium "engan #entuk tegak "an miring

tuang me"ium "ari Erlenme+er e(ara aepti kira)kira @)? ml ke"alam ta#ung reaki

'untuk #entuk tegak atau "eep ta#ung reaki +ang telah #erii tutup #i#ir ta#ung "engan

kapa "an maukkan ke"alam ta#ung reaki kemu"ian teriliaikan kem#ali '"an untuk

+ang #er#entuk miring etelah "ituang ke"alam ta#ung reaki miringkan ta#ung #e#erapa

"era-at "an tutup #i#ir ta#ung "engan kapa kemu"ian etelah agak mengera

teriliaikan kem#ali.

Dalam penger-aan pem#uatan me"ia #an+ak hal +ang haru "iperhatikan +aitu mulai

"ari penim#angan "an e#again+a ampai pa"a penggunaan alat)alat. Alat 6alat +ag

"igunakan harulah teril #egitu pula "engan #ahan +ang "igunakan 'elain itu kita e#gai

pratikan -uga haru #eker-a e(ara hati)hati "an #eker-a e(ara aepti untuk menghin"ari

kontaminai pa"a me"ium. 1e#elum #eker-a me-a tempat #eker-a "itterillan terele#ih

"ahulu "engan men+emprotkan al(ohol 98 "an kemu"ian men+alakan api "iata me-a



13/14

untuk menterilkan me-a "an ekita me-a 'kemu"ian e#elum #eker-a kita e#agai

pratikan haru aepti mialn+a tangan kita haru teril "engan men+emprotkan al(ohol

'kemu"ian ketika melakukan meto"e tuang ti"ak #oleh -auh "ari api erta kapa penutup

Erlenme+er -angan "iletakkan "iata me-a. 1emua itu "ilakukan agar me"ium ti"ak

terkontaminai "engan #akteri atau mikro#a +ang a"a "iekitar ruangan atau me-a.

1etelah me"ia telah elai "imaukkan atau "ituang ke"alam (a!am petri "an ta#ung

reaki 'erta ta#ung reki +ang #erii me"ium telah eleai "iteriliaikan kem#ali.

1etelah itu me"ia "imaukkan ke"alam kulka "an etelah mengera maka me"ia u"ah

#ia "igunakan untuk melakukan pertum#uhan atau perkem#ang#iakan mikro#a.

VII. Keimpulan

Para pratikan :

2. Dapat mengetahui "an mem#uat (ara pem#uatan me"ia NA'PDA'TEA

3. Dapat mem#e"akan me"ia #er"aarkan kompoii me"ia #aik me"ium intei "an emi

intei4. Dapat mengetahui #entuk)#entuk me"ium $lant'"eep'lempeng&

5. Dapat melakukan meto"e tuang erta #eker-a e(ara aepti



14/14

VIII. Da0tar Putaka

Lestari !ina.3925.Petun-uk Pratikum Mikro#iologi.Bengkulu

"c#legel !.Han.25.Mikro#iologi Umum E"ii @. Cog+akarta:;a-ah Ma"a'Unierit+

Pre.Indan $ntjang. Mikrobiologi dan parasitologi.Ban"ung:PT.itra A"it+a Bakti.3994

%adioetomo. Teknik dan Prosedur Dasar Laboratorium

Mikrobiologi.;rame"ia:>akarta.24

Volk&.A heeler.M.F.24. Mikro#iologi Daar jilid 1edisi ke 5.Erlangga >akarta.


Bab III Mikro Muzdalifa

Documents

Transcript of Bab III Mikro Muzdalifa