5/10/2018 Autoklaf - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/autoklaf 1/4

 

AutoklafDari Wikipedia bahasa Indonesia, ensiklopedia bebas

Belum Diperiksa 

 

Autoklaf

Autoklaf adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu benda

menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi (1210C, 15 lbs) selama kurang lebih 15

menit.[1][2] Penurunan tekanan pada autoklaf tidak dimaksudkan untuk membunuh mikroorganisme,

 

melainkan meningkatkan suhu dalam autoklaf[1]. Suhu yang tinggi inilah yang akan membunuh

 

microorganisme[1]. Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh endospora, yaitu sel resisten yang

 

diproduksi oleh bakteri, sel ini tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan antibiotik[1]. Pada

 

spesies yang sama, endospora dapat bertahan pada kondisi lingkungan yang dapat membunuh sel

vegetatif bakteri tersebut[1]. Endospora dapat dibunuh pada suhu 100 °C, yang merupakan titik didih

 

air pada tekanan atmosfer normal[1]. Pada suhu 121 °C, endospora dapat dibunuh dalam waktu 4-5

 

menit, dimana sel vegetatif bakteri dapat dibunuh hanya dalam waktu 6-30 detik pada suhu 65 °C[1]. 

 

Perhitungan waktu sterilisasi autoklaf dimulai ketika suhu di dalam autoklaf mencapai 121 °C[3]. Jika

 

objek yang disterilisasi cukup tebal atau banyak, transfer panas pada bagian dalam autoklaf akan

melambat, sehingga terjadi perpanjangan waktu pemanasan total untuk memastikan bahwa semua

objek bersuhu 121 °C untuk waktu 10-15 menit[1]. Perpanjangan waktu juga dibutuhkan ketika cairan

 

dalam volume besar akan diautoklaf karena volume yang besar membutuhkan waktu yang lebih

lama untuk mencapai suhu sterilisasi[1]. Performa autoklaf diuji dengan indicator biologi,

 

contohnya Bacillus stearothermophilus [4][5] .

5/10/2018 Autoklaf - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/autoklaf 2/4

 

Jenis-jenis

Terdapat tiga jenis autoklaf, yaitu gravity displacement , prevacuum atau high vacuum , dan steam- 

flush pressure-pulse [3]. Perbedaan ketiga jenis autoklaf ini terletak pada bagaimana udara

 

dihilangkan dari dalam autoklaf selama proses sterilisasi

[3]

. 

Gravity Displacement Autoclave  

Udara dalam ruang autoklaf dipindahkan hanya berdasarkan gravitasi[3]. Prinsipnya adalah

 

memanfaatkan keringanan uap dibandingkan dengan udara, sehingga udara terletak di bawah

uap[3]. Cara kerjanya dimulai dengan memasukan uap melalui bagian atas autoklaf sehingga udara

 

tertekan ke bawah[3]. Secara perlahan, uap mulai semakin banyak sehingga menekan udara

 

semakin turun dan keluar melalui saluran di bagian bawah autoklaf, selanjutnya suhu meningkat dan

terjadi sterilisasi[3]. Autoklaf ini dapat bekerja dengan cakupan suhu antara 121-134 °C dengan

 

waktu 10-30 menit[3]

. 

Prevacuum atau High Vacuum Autoclave  

 

Autoklaf ini dilengkapi pompa yang mengevakuasi hampir semua udara dari dalam autoklaf[3]. Cara

kerjanya dimulai dengan pengeluaran udara[3]. Proses ini berlangsung selama 8-10 menit[3]. Ketika

 

keadaan vakum tercipta, uap dimasukkan ke dalam autoklaf[3]. Akibat kevakuman udara, uap segera

 

berhubungan dengan seluruh permukaan benda, kemudian terjadi peningkatan suhu sehingga

proses sterilisasi berlangsung[3]. Autoklaf ini bekerja dengan suhu 132-135 °C dengan waktu 3-4

 

menit[3]. 

 

Steam-Flush Pressure-Pulse Autoclave  

Autoklaf ini menggunakan aliran uap dan dorongan tekanan di atas tekanan atmosfer dengan

rangkaian berulang[3]. Waktu siklus pada autoklaf ini tergantung pada benda yang disterilisasi[3]. 

http://id.wikipedia.org/wiki/Autoklaf  

 

Prinsip cara kerja autoklaf 

Seperti yang telah dijelaskan sebagian pada bab pengenalan alat, autoklaf adalah alat

untuk memsterilkan berbagai macam alat & bahan yang menggunakan tekanan 15 psi

(1,02 atm) dan suhu 1210C. Untuk cara kerja penggunaan autoklaf telah disampaikan di

depan. Suhu dan tekanan tinggi yang diberikan kepada alat dan media yang disterilisasi

memberikan kekuatan yang lebih besar untuk membunuh sel dibanding dengan udara

 panas. Biasanya untuk mesterilkan media digunakan suhu 1210C dan tekanan 15

lb/in2

(SI = 103,4 Kpa) selama 15 menit. Alasan digunakan suhu 1210C atau 249,8

0F

5/10/2018 Autoklaf - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/autoklaf 3/4

 

adalah karena air mendidih pada suhu tersebut jika digunakan tekanan 15 psi. Untuk 

tekanan 0 psi pada ketinggian di permukaan laut ( sea level ) air mendidih pada suhu

1000C, sedangkan untuk autoklaf yang diletakkan di ketinggian sama, menggunakan

tekanan 15 psi maka air akan memdididh pada suhu 1210C. Ingat kejadian ini hanya

 berlaku untuk sea level, jika dilaboratorium terletak pada ketinggian tertentu, maka pengaturan tekanan perlu disetting ulang. Misalnya autoklaf diletakkan pada ketinggian

2700 kaki dpl, maka tekanan dinaikkan menjadi 20 psi supaya tercapai suhu 1210C untuk 

mendidihkan air. Semua bentuk kehidupan akan mati jika dididihkan pada suhu 1210C

dan tekanan 15 psi selama 15 menit.

Pada saat sumber panas dinyalakan, air dalam autoklaf lama

kelamaan akan mendidih dan uap air yang terbentuk mendesak 

udara yang mengisi autoklaf. Setelah semua udara dalam

autoklaf diganti dengan uap air, katup uap/udara ditutup

sehingga tekanan udara dalam autoklaf naik. Pada saat tercapai

tekanan dan suhu yang sesuai., maka proses sterilisasi dimulai

dan timer mulai menghitung waktu mundur. Setelah proses

sterilisasi selesai, sumber panas dimatikan dan tekanan

dibiarkan turun perlahan hingga mencapai 0 psi. Autoklaf tidak boleh dibuka sebelum

tekanan mencapai 0 psi.

Untuk mendeteksi bahwa autoklaf bekerja dengan sempurna dapat digunakan mikroba

 pengguji yang bersifat termofilik dan memiliki endospora yaitu Bacillus

 stearothermophillus, lazimnya mikroba ini tersedia secara komersial dalam bentuk  spore strip. Kertas spore strip ini dimasukkan dalam autoklaf dan disterilkan. Setelah proses

sterilisai lalu ditumbuhkan pada media. Jika media tetap bening maka menunjukkan

autoklaf telah bekerja dengan baik.

Beberapa media atau bahan yang tidak disterilkan dengan autoklaf adalah :

- Bahan tidak tahan panas seperti serum, vitamin, antibiotik, dan enzim

- Paelarut organik, seperti fenol

- Buffer engan kandungan detergen, seperti SDS

Untuk mencegah terjadinya presipitasi, pencoklatan (media menjadi coklat) dan

hancurnya substrat dapat dilakukan pencegahan sbb :

- Glukosa disterilkan terpisah dengan asam amino ( peptone) atau senyawa fosfat

- Senyawa fosfat disterilkan terpisah dengan asam amino ( peptone) atau senyawa garam

mineral lain.

- Senyawa garam mineral disterilkan terpisah dengan agar 

- Media yang memiliki pH > 7,5 jangan disterilkan dengan autoklaf 

5/10/2018 Autoklaf - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/autoklaf 4/4

 

- Jangan mensterilisasi larutan agar dengan pH < 6,0

Erlenmeyer hanya boleh diisi media maksimum ¾ dari total volumenya, sisa ruang

dibirkan kosong. Jika mensterilkan media 1L yang ditampung pada erlenmeyer 2L maka

sterilisasi diatur dengan waktu 30 menit.

http://ekmon-saurus.blogspot.com/2008/11/bab-3-sterilisasi.html 

Autoklaf  

 

Autoklaf adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yang digunakan dalam

mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Tekanan yang digunakan pada umumnya

15 Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121oC. Lama waktu untuk mensterilakan alat kurang

lebih 15-20 menit, sedangkan lama waktu untuk mensterilkan bahan kurang lebih 10-15 menit.

Komponen-komponen autoklaf :

o  Tombol pengatur waktu mundur (timer )o  Katup pengeluaran uap

o  pengukur tekanan

o  klep pengaman

o  Termometer

o  Lempeng sumber panas

http://monruw.wordpress.com/tag/autoklaf/