Autoanalizer
Transcript of Autoanalizer
7/24/2019 Autoanalizer
http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 1/6
Elektroforesis adalah teknik pemisahan komponen atau molekul ber muatan berdasarkan
perbedaan tingkat migrasinya dalam sebuah medan listrik .[1] Medan listrik dialirkan pada suatu
medium yang mengandung sampel yang akan dipisahkan. [2] Teknik ini dapat digunakan denganmemanfaatkan muatan listrik yang ada pada makromolekul, misalnya DNA yang bermuatan
negatif.[2]
ika molekul yang bermuatan negatif dile!atkan melalui suatu medium, kemudiandialiri arus listrik dari suatu kutub ke kutub yang berla!anan muatannya maka molekul tersebut
akan bergerak dari kutub negatif ke kutub positif. [2] "e#epatan gerak molekul tersebuttergantung pada nisbah muatan terhadap massanya serta tergantung pula pada bentuk
molekulnya.[2] $ergerakan ini dapat di%elaskan dengan gaya &orent', yang terkait dengan sifat(
sifat dasar elektris bahan yang diamati dan kondisi elektris lingkungan)
* adalah gaya &orent', + adalah muatan yang diba!a oleh ob%ek, adalah medan listrik.
-e#ara umum, elektroforesis digunakan untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan memurnikanfragmen DNA. []
Jenis elektroforesis
7/24/2019 Autoanalizer
http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 2/6
$erangkat elektroforesis gel
lektroforesis kertas adalah %enis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai fase diam dan
partikel bermuatan yang terlarut sebagai fase gerak, terutama ialah ion(ion kompleks. [/] $emisahan ini ter%adi akibat adanya gradasi konsentrasi sepan%ang sistem pemisahan. [/]
$ergerakan partikel dalam kertas tergantung pada muatan atau 0alensi 'at terlarut, luas penampang, tegangan yang digunakan, konsentrasi elektrolit , kekuatan ion, p, 0iskositas, dan
adsorpsi0itas 'at terlarut. []
lektroforesis gel ialah elektroforesis yang menggunakan gel sebagai fase diam untuk
memisahkan molekul(molekul. [3] A!alnya elektoforesis gel dilakukan dengan medium gel kan%i
4sebagai fase diam5 untuk memisahkan biomolekul yang lebih besar seperti protein(protein. [3] "emudian elektroforesis gel berkembang dengan men%adikan agarosa dan poliakrilamida sebagai
gel media. [3]
ELISA 4singkatan bahasa 6nggris) Enzyme-linked immunosorbent assay5 atau 7penetapan kadar
imunosorben taut(en'im7 merupakan u%i serologis yang umum digunakan di berbagailaboratorium imunologi. 8%i ini memiliki beberapa keunggulan seperti teknik penger%aan yang
relatif sederhana, ekonomis, dan memiliki sensiti0itas yang #ukup tinggi. &6-A diperkenalkan
pada tahun 19:1 oleh $eter $erlmann dan 0a ng0all untuk menganalisis adanya interaksi
antigen dengan antibodi di dalam suatu sampel dengan menggunakan en'im sebagai pelapor4reporter label 5.[1]
8mumnya &6-A dibedakan men%adi dua %enis, yaitu competitive assay yang menggunakan
kon%ugat antigen;en'im atau kon%ugat antobodi;en'im, dan non-competitive assay yangmenggunakan dua antibodi. $ada &6-A non-competitive assay, antibodi kedua akan
dikon%ugasikan dengan en'im sebagai indikator. Teknik kedua ini seringkali disebut sebagai
<Sandwich< &6-A.
8%i ini dilakukan pada plate 93(well berbahan polistirena. 8ntuk melakukan teknik <-and!i#h<&6-A ini, diperlukan beberapa tahap yang meliputi)
1. Well dilapisi atau ditempeli antigen.
2. -ampel 4antibodi5 yang ingin diu%i ditambahkan.
. Ditambahkan antibodi kedua yang dikon%ugasikan dengan en'im tertentu seperti
peroksidase alkali. Antibodi kedua ini akan menempel pada antibodi sampel sebelumnya.
/. Dimasukkan substrat en'im yang dapat menimbulkan !arna tertentu saat bereaksi.
. 6ntensitas !arna #ampuran diukur dengan spektrofotometer yang disebut ELISA reader
hingga mendapatkan hasil berupa densitas optis 4=D5. Dengan menghitung rata(rata
kontrol negatif yang digunakan, didapatkan nilai cut-off untuk menentukan hasil positif(
negatif suatu sampel. asil =D yang berada di ba!ah nilai cut-off merupakan hasilnegatif, dan demikian %uga sebaliknya.
7/24/2019 Autoanalizer
http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 3/6
8%i ini memiliki beberapa kerugian, salah satu di antaranya adalah kemungkinan yang besar
ter%adinya hasil false positive karena adanya reaksi silang antara antigen yang satu dengan
antigen lain.[2] asil berupa false negative dapat ter%adi apabila u%i ini dilakukan pada window period , yaitu !aktu pembentukan antibodi terhadap suatu 0irus baru dimulai sehingga %umlah
antibodi tersebut masih sedikit dan kemungkinan tidak dapat terdeteksi. []
$engertian Dan *ungsi Autoanaly'er
Autoanaly'er adalah analisa otomatis menggunakan teknik aliran khusus bernama
>analisis aliran kontinu 4?*A5@, di#iptakan pada tahun 19: oleh &eonard -keggs, $hD dan
pertama dibuat oleh ?orporation Te#hni#on. Aplikasi pertama adalah untuk klinis 4medis5
analisis. Autoanaly'er sangat mengubah karakter laboratorium pengu%ian kimia dengan
memungkinkan peningkatan yang signifikan dalam %umlah sampel yang dapat diolah. Desain
didasarkan pada pemisahan aliran terus mengalir dengan gelembung udara sebagian besar
mengurangi lambat, #eroboh, dan kesalahan metode manual ra!an analisis.
enis(%enis tes yang dibutuhkan meliputi tingkat en'im 4seperti banyak dari tes fungsi hati5,
tingkat ion 4misalnya natrium dan kalium5, dan lainnya 4seperti glukosa, albumin serum, atau
kreatinin5. 6on sederhana sering diukur dengan elektroda selektif ion, yang memungkinkan satu
%enis ion melalui, dan perbedaan mengukur tegangan n'im dapat diukur dengan tingkat mereka
mengubah salah satu 'at !arna yang lain, Dalam tes ini, hasil untuk en'im yang diberikan
sebagai suatu kegiatan, bukan sebagai konsentrasi en'im. Tes(tes lain menggunakan perubahan
kolorimetri untuk menentukan konsentrasi bahan kimia yang bersangkutan. "ekeruhan %uga
dapat diukur.
AutoAnaly'ers digunakan terutama untuk analisis laboratorium rutin dalam bidang
medis, 6nstrumen ini biasanya menentukan tingkat albumin, alkali fosfatase, aspartate
transaminase 4A-T5, nitrogen urea darah, bilirubin, kalsium, kolesterol, kreatinin, glukosa, fosfor
anorganik, protein, dan asam urat dalam sampel darah tubuh serum atau lainnya. AutoAnaly'ers
mengotomatisasi langkah analisis sampel berulang yang seharusnya dapat dilakukan se#ara
manual oleh seorang teknisi, untuk tes medis seperti yang disebutkan sebelumnya. Dengan #ara
ini, sebuah autoanaly'er dapat menganalisis ratusan sampel setiap hari dengan satu teknisi
operasi. A!al autoanaly'er instrumen masing(masing beberapa sampel diu%i se#ara berurutan
untuk analit indi0idu. "emudian Model AutoAnaly'ers seperti -MA? diu%i untuk analit se#ara
bersamaan dalam sampel.
7/24/2019 Autoanalizer
http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 4/6
2.2. $rinsip =perasi
1. ?ontinuous *lo! Analy'er
Dalam ?*A aliran #ontinue dari material dibagi dengan gelembung udara ke segmen
diskrit di mana reaksi kimia ter%adi.Aliran terus(menerus sampel #air dan reagen digabungkan
dan diangkut dalam gulungan tubing dan pen#ampuran. Tubing mele!ati sampel dari satu alat
untuk yang lain dengan alat masing(masing melakukan fungsi yang berbeda, seperti distilasi,
dialisis, ekstraksi, pertukaran ion, pemanasan, inkubasi, dan rekaman berikutnya dari sinyal.
-ebuah prinsip penting dari sistem ini adalah pengenalan gelembung udara. The gelembung
udara setiap segmen sampel ke dalam paket diskrit dan bertindak sebagai penghalang antara
paket untuk men#egah kontaminasi silang saat mereka melakukan per%alanan di sepan%ang pipa.
elembung udara %uga membantu pen#ampuran dengan men#iptakan aliran turbulen 4aliran
bolus5, dan menyediakan operator dengan #ek #epat dan mudah dari karakteristik aliran #airan.
-ampel dan standar diperlakukan dengan #ara yang persis sama saat mereka melakukan
per%alanan pan%ang pipa, menghilangkan perlunya sinyal steady state, namun, karena adanya
gelembung membuat profil gelombang hampir persegi, memba!a sistem ke keadaan stabil tidak
se#ara signifikan menurunkan throughput 4generasi ketiga ?*A analisis rata(rata 9B atau lebih
sampel per %am5 dan diinginkan dalam sinyal steady state 4keseimbangan kimia5 yang lebih
akurat.
2. *lo! 6n%e#tion Analy'er
Metode *6A dapat digunakan untuk kedua reaksi #epat serta reaksi lambat. 8ntuk reaksi
lambat, pemanas sering dimanfaatkan. Ceaksi ini tidak perlu untuk men#apai penyelesaian
karena semua sampel dan standar yang diberikan pada periode yang sama untuk bereaksi. 8ntuk
tes yang khas biasanya diukur dengan *6A 4misalnya, nitrit, nitrat, amoniak, fosfat5 tidak %arang
untuk memiliki throughput 3B(12B sampel per %am. Metode *6A dibatasi oleh %umlah !aktu yang
diperlukan untuk memperoleh sinyal terukur se%ak !aktu tempuh melalui pipa #enderung untuk
memperluas pun#ak ke titik di mana sampel dapat saling menyatu. -ebagai aturan umum,
metode *6A tidak boleh digunakan %ika sinyal yang memadai tidak dapat diperoleh dalam !aktu
dua menit, dan sebaiknya kurang dari satu.
7/24/2019 Autoanalizer
http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 5/6
2.. Ma#am(Ma#am Autoanali'er
Autoanaliser adalah suatu alat yang pada prinsipnya di#iptakan manusia untuk
memudahkan peker%aan manusia. Autoanaliser didesign untuk beker%a dengan ketelitian tinggi
dan dengan !aktu yang #epat serta dapat menangani banyak sampel sekaligus. $ada
laboratorium klinik terdapat 2 ma#am autoanaliser, yaitu)
a. Autoanaliser untuk pemeriksaan hematologi
Adalah alat yang digunakan untuk memeriksa darah lengkap dengan #ara menghitung
dan mengukur sel(sel darah se#ara otomatis berdasarkan 0ariasi impedansi aliran listrik atau
berkas #ahaya terhadap sel(sel yang dile!atkan.Alat ini beker%a berdasarkan prinsip flo!
#ytometer. *lo! #ytometri adalah metode pengukuran %umlah dan sifat(sifat sel yang dibungkusoleh aliran #airan melalui #elah sempit. Cibuan sel dialirkan melalui #elah tersebut sedemikian
rupa sehingga sel dapat le!at satu per satu, kemudian dilakukan penghitungan %umlah sel dan
ukurannya. Alat ini %uga dapat memberikan informasi intraseluler, termasuk inti sel. $emeriksaan
yang bisa dilakukan oleh autoanaliser %enis ini adalah kadar b, umlah sel(sel darah 4 eritrosit,
lekosit, trombosit5 , enis lekosit, hematokrit, dsb.
b. Autoanaliser untuk pemeriksaan kimia klinik
Autoanaliser ini digunakan untuk pemeriksaan kimia klinik, yaitu mengukur kadar 'at('at
yang terkandung dalam darah, #ontohnya adalah glukosa, asam urat, -=T, -$T, kolesterol,
trigliserid, gamma T, albumin,dsb. $rinsip dari alat ini adalah melakukan prosedur pemeriksaan
kimia klinik se#ara otomatis mulai dari pemipetan sampel, penambahan reagen, inkubasi, serta
pemba#aan serapan #ahayanya. "elebihan autoanaliser adalah bah!a tahapan analitik dapat
dilakukan dengan #epat dan bisa digunakan untuk memeriksa sampel dengan %umlah banyak
se#ara bersamaan.
2./. ?ara $era!atan
6nilah hal yang perlu diperhatikan oleh konsumen karena ada beberapa alat ( alat yang
bisa dikatakan <bandel<. Namun sebandel ( bandelnya alat tersebut, tetap sa%a harus mendapatkan
perhatian khusus seperti
( -uhu ruangan
( &akukan #ontrol se#ara berkala
7/24/2019 Autoanalizer
http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 6/6
( -elalu #ek reagen
Ada beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam menggunakan alat ini, seperti)-ampel %angan sampai aglutinasi, gunakan sampel darah yang sudah ditambahkan antikoagulan.
$astikan tidak ada darah yang menggumpal karena akan merusak hasil %ika terhisap.
2..?ara "alibrasi Autoanali'er
Autoanaliser memang sangat membantu analis dalam menger%akan tahapan analitik
namun perlu diperhatikan, setiap hari baik autoanaliser hematologi atau kimia klinik harus selalu
dikalibrasi untuk men%amin keakuratan hasil.
8ntuk autoanaliser kimia klinik, #ara kalibrasinya adalah dengan menggunakan serum
#ontrol. -erum yang sudah diketahui komposisi dan kadarnya diperiksa dengan menggunakan
autoanaliser seperti memeriksa sampel. asil yang didapat dibandingkan dengan kadar serum#ontrol. ika masih dalam range, maka autoanaliser masih memberikan hasil yang 0alid sehingga
dapat digunakan untuk memeriksa sampel.
Eegitu %uga untuk autoanaliser hematologi, digunakan darah yang konsentrasinya sudah
diketahui dengan pasti. Darah #ontrol tersebut dilakukan pemeriksaan sama seperti pemeriksaan
sampel lalu hasilnya dibandingkan dengan kadar darah #ontrol sebenarnya.
"alibrasi yang seperti di%elaskan di atas dilakukan setiap hari sebelum melakukan
pemeriksaan pada sampel sehingga hasil yang didapatkan akurat.
Eerikut ini adalah beberapa #ontoh dari autoanaliser)