Web viewDefinisi . d. an . Sejarah ... Pada tahun 1952 Martin dan James mempublikasikan makalah...
Transcript of Web viewDefinisi . d. an . Sejarah ... Pada tahun 1952 Martin dan James mempublikasikan makalah...
GAS KROMATOGRAFI
Definisi dan Sejarah Kromatografi
Kromatografi adalah suatu istilah umum yang digunakan untuk bermacam-macam
teknik pemisahan yang didasarkan atas partisi sampel diantara suatu fasa gerak yang bisa
berupa gas ( kromatografi gas ) ataupun cair ( kromatografi cair ) dan fasa diam yang juga
bisa berupa cairan ataupun suatu padatan. Hal ini dikarenakan adanya perbedaan polaritas
dari fasa diam dan gerak. Penemu Kromatografi adalah Tswett yang pada tahun 1903,
mencoba memisahkan pigmen-pigmen dari daun dengan menggunakan suatu kolom yang
berisi kapur (CaSO4). lstilah kromatografi diciptakan oleh Tswett untuk melukiskan daerah-
daerah yang berwarna yang bergerak kebawah kolom. Pada waktu yang hampir bersamaan,
D.T. Day juga menggunakan kromatografi untuk memisahkan fraksi-fraksi petroleum, namun
Tswett lah yang pertama diakui sebagai penemu dan yang menjelaskan tentang proses
kromatografi.
Perkembangan tentang kromatografi agak lambat untuk beberapa tahun sampai
digunakan suatu teknik dalam bentuk kromatografi padatan cair (LSC). Kemudian pada akhir
tahun 1930 an dan permulaan tahun 1940 an, kromatografi mulai berkembang. Dasar
kromatografi lapisan tipis (TLC) diletakkan pada tahun 1938 oleh Izmailov dan Schreiber,
dan kemudian diperhalus oleh Stahl pada tahun 1958. Hasil karya yang baik sekali dari
Martin dan Synge pada tahun 1941 (untuk ini mereka memenangkan Nobel) tidak hanya
mengubah dengan cepat kroinatografi cair tetapi seperangkat umum langkah untuk
pengembangan kromatografi gas dan kromatografi kertas. Pada tahun 1952 Martin dan James
mempublikasikan makalah pertama mengenai kromatografi gas. Diantara tahun 1952 dan
akhir tahun 1960 an kromatografi gas dikembangkan menjadi suatu teknik analisis yang
canggih.
Kromatografi merupakan medan yang bergerak cepat karena sangat pentingnya dalam
praktek dalam banyak bidang penelitian. Usaha-usaha berlanjut sepanjang banyak jalur,
beberapa diantaranya adalah : detektor yang lebih baik, bahan kemasan kolom yang baru,
hubungan dengan instrument lain (seperti spektrometer massa) yang dapat membantu untuk
mengidentifikasi komponen-komponen yang dipisahkan.
Kromatografi berkembang menjadi teknik pemisahan untuk zat kimiawi dengan sifat
yang sangat mirip, dan dapat digunakan untuk identifikasi kualitatif dan penetapan
kuantitatif untuk zat-zat yang sudah dipisahkan.
Keuntungan-keuntungan Kromatografi
Keuntungan-keuntungan dari Kromatografi diantaranya :
1. Kromatografi merupakan metoda pemisahan yang cepat, mudah dan menggunakan
peralatan yang murah serta sederhana, kecuali untuk kromatografi gas, hingga
campuran yang kompleks dapat dipisahkan dengan mudah.
2. Kromatografi hanya membutuhkan campuran cuplikan.yang sangat sedikit sekali,
bahkan tidak menggunakan jumlah yang besar, disamping itu kromatografi
pekerjaannya dapat diulang.
Tabel Klasifikasi Kromatografi
Kriteria Nama
Fasa mobil Kromatografi cair, kromatografi gas, kromatografi absorbsi dan
kromatografi partisi
Mekanisme Kromatografi pertukaran ion dan kromatografi gel
Fasa stationer Kromatografi kolom, kromatografi lapis tipis dan kromatografi
kertas
Kromatografi Gas
Umumnya metode kromatografi diklasifikasikan atas jenis fasa yang digunakan dan
sebagian berdasarkan mekanisme pemisahannya, salah satunya adalah kromatografi gas.
Kromatografi Gas adalah metode kromatografi pertama yang dikembangkan pada jaman
instrument dan elektronika yang telah merevolusikan keilmuan selama lebih dari 30 tahun.
Kromatografi gas merupakan alat analitik yang telah lama populer dan merupakan enis yang
umum digunakan dalam analisis kromatografi kimia untuk memisahkan dan menganalisis
senyawa yang dapat menguap tanpa dekomposisi. Khas penggunaan GC termasuk pengujian
kemurnian zat tertentu, atau memisahkan komponen yang berbeda dari campuran (jumlah
relatif komponen tersebut juga dapat ditentukan). Dalam beberapa situasi, GC dapat
membantu dalam mengidentifikasi suatu senyawa. Dalam persiapan kromatografi, GC dapat
digunakan untuk mempersiapkan senyawa murni dari campuran.. Alat ini biasanya digunakan
untuk analisa campuran senyawa organik menjadi komponen-komponennya. Sekarang GC
dipakai secara rutin di sebagian besar laboratorium industri dan perguruan inggi. GC dapat
dipakai untuk setiap campuran yang komponennya mempunyai tekanan uap yang berarti pada
suhu yang dipakai untuk pemisahan.
Tekanan uap atau keatsirian memungkinkan komponen menguap dan bergerak
bersama-sama dengan fase gerak yang berupa gas. Pada kromatografi cair pembatasan yang
bersesuaian ialah komponen cairan harus mempunyai kelarutan yang berarti di dalam fase
gerak yang berupa cairan. Secara sepintas tampaknya pembatasan tekanan uap pada
kromatografi gas lebih serius daripada pembatasan kelarutan pada kromatografi cair, secara
keseluruhan memang demikian. Akan tetapi, jika kita ingat bahwa suhu 400¬0C dapat
dipakai pada kromatografi gas dan bahwa kromatografi dilakukan secara cepat untuk
meminimumkan penguraian, pembatasan itu menjadi tidak begitu perlu. Disamping itu, pada
GC senyawa yang tak atsiri sering dapat diubah menjadi turunan yang lebih atsiri dan lebih
stabil sebelum kromatografi.
Dalam kromatografi gas, Fase yang bergerak (mobile phase) adalah sebuah operatir
gas, yang biasanya gas murni seperti helium atau yang tidak reaktif seperti gas nitrogen.
Stationary atau fasa diam merupakan tahap mikroskopis lapisan cair atau polimer yang
mendukung gas murni, di dalam bagian dari sistem pipa-pipa kaca atau logam yang disebut
kolom.
Instrumen yang digunakan untuk melakukan kromatografi gas disebut gas
chromatograph (”aerograph”, ”gas pemisah”). Zat yang dipisahkan dilewatkan dalam kolom
yang diisi dengan fasa tidak bergerak yang terdiri dari bahan halus yang cocok. Gas pembawa
mengalir melalui kolom dengan kecepatan tetap, memisahkan zat dalam gas atau cairan
ataupun dalam keadaan normal. Cara ini digunakan untuk percobaan identifikasi dan
kemurnian atau untuk penetapan kadar.
Kromatografi gas merupakan metode yang tepat dan cepat untuk memisahkan
campuran yang sangat rumit. Waktu yang dibutuhkan beragam, mulai dari beberapa detik
untuk campuran sederhana sampai berjam-jam untuk campuran yang mengandung 500-1000
komponen. Komponen campuran dapat diidentifikasikan dengan menggunakan waktu tambat
(waktu retensi) yang khas pada kondisi yang tepat. Waktu tambat ialah waktu yang
menunjukkan berapa lama suatu senyawa tertahan dalam kolom. waktu tambat diukur dari
jejak pencatat pada kromatogram dan serupa dengan volume tambat dalam KCKT
( kromatografi cair kinerja tinggi ) dan Rf dalam KLT ( kromatografi lapisan tipis ). Dengan
kalibrasi yang patut, banyaknya (kuantitas) komponen campuran dapat pula diukur secara
teliti.
Pada prinsipnya kromatografi gas digunakan untuk semua zat yang berbentuk gas atau
dapat menguap tanpa penguraian. Kromatografi gas juga bisa digunakan pada pemisahan
alkaloid, senyawa aktif sintetik, gula, lemak, steroid, asam amino, bahkan senyawa polimer
yang bisa digunakan kromatografi gas.
Jenis-jenis Kromatografi Gas
Ada dua jenis kromatografi gas, yaitu kromatografi gas padat (KGP), dan kromatografi
gas cair (KGC). Dalam kedua hal ini yang bertindak sebagai fasa bergerak adalah gas
( hingga keduanya disebut kromatografi gas ), tetapi fasa diamnya berbeda. Meskipun kedua
cara tersebut mempunyai banyak persamaan. Perbedaan antara kedunya hanya tentang cara
kerja. Pada kromatografi gas padat (KGP) terdapat adsorbsi dan pada kromatografi gas cair
(KGC) terdapat partisi (larutan).
Untuk memahami prinsip kerja dari kromatografi gas khususnya kromatografi gas cair
(KGC), yang lazim ditemui adalah pada helium, hydrogen, dan juga nitrogen dapat
digambarkan dengan menggunakan gambar dari kamar-kamar khayal yang masing-masing
berisi suatu porsi cairan atsiri, yang berfungsi sebagai fase stasionernya. Pada kamar pertama
dimasukan suatu sampel fasa gerak, suatu gas seperti nitrogen, yang mengandung uap suatu
senyawa organik, katakan benzena, jika cairan itu cocok maka sejumlah benzena akan
melarut kedalamnya, dan sejumlah lain akan tetap tinggal dalam ruang diatasnya. Hal ini
dinyatakan dalam Hukum Henry dalam bentuknya yang biasa menyatakan bahwa tekanan
parsial yang dilakukan oleh suatu zat terlarut dalam larutan encer akan berbanding lurus
dengan fraksi molnya.
Kelebihan dan Kekurangan Kromatografi Gas
Kelebihan kromatografi gas, diantaranya kita dapat menggunakan kolom lebih panjang
untuk menghasilkan efisiensi pemisahan yang tinggi. Gas dan uap mempunyai viskositas
yang rendah, demikian juga kesetimbangan partisi antara gas dan cairan berlangsung cepat,
sehingga analisis relatif cepat dan sensitifitasnya tinggi. Fase gas dibandingkan sebagian
besar fase cair tidak bersifat reaktif terhadap fase diam dan zat-zat terlarut. Selain itu
keuntungan menggunakan kromatografi gas adalah analisa cepat, resolusi baik, bahkan
komponen dengan titik didih berdekatan mampu dipisahkan dimana pemisahan dengan
destilasi biasa tidak dapat dilakukan.
kekurangan kromatografi gas adalah bahwa ia tidak mudah dipakai untuk memisahkan
campuran dalam jumlah besar. Pemisahan pada tingkat ( mg ) mudah dilakukan, pemisahan
campuran pada tingkat ( g ) mungkin dilakukan, tetapi pemisahan dalam tingkat pon atau ton
sukar dilakukan kecuali jika tidak ada metode lain. Selain itu teknik ini terbatas untuk zat
yang mudah menguap.
Kegunaan Kromatografi Gas
Kromatografi gas telah digunakan pada sejumlah besar senyawa-senyawa dalam
berbagai bidang. Dalam senyawa organik dan anorganik, senyawa logam, karena persyaratan
yang digunakan adalah tekanan uap yang cocok pada suhu saat analisa dilakukan. Berikut
akan kita lihat beberapa kegunaan kromatografi gas pada bidang-bidangnya adalah :
1. Polusi udara
Kromatografi gas merupakan alat yang penting karena daya pemisahan yang
digabungkan dengan daya sensitivitas dan pemilihan detector GLC menjadi alat
yang ideal untuk menentukan banyak senyawa yang terdapat dalam udara yang
kotor, KGC ( kromatografi gas cair ) dipakai untuk menentukan Alkil-Alkil
Timbal, Hidrokarbon, aldehid, keton, SO , HS, dan beberapa oksida dari nitrogen
dll.
2. Klinik
Diklinik kromatografi gas menjadi alat untuk menangani senyawa-senyawa dalam
klinik seperti : asam-asam amino, karbohidrat, CO , dan O dalam darah, asam-
asam lemak dan turunannya, trigliserida-trigliserida, plasma steroid, barbiturate,
dan vitamin
3. Bahan-bahan pelapis
Digunakan untuk menganalisa polimer-polimer setelah dipirolisa, karet dan resin-
resin sintesis.
4. Minyak Atsiri
Digunakan untuk pengujian kualitas terhadap minyak permen, jeruk sitrat, dll
5. Bahan makanan
Digunakan dengan TLC ( kromatografi lapis tipis ) dan kolom-kolom, untuk
mempelajari pemalsuan atau pencampuran, kontaminasi dan pembungkusan
dengan plastik pada bahan makanan, juga dapat dipakai untuk menguji jus, aspirin,
kopi dll.
6. Sisa-sisa peptisida
KGC ( kromatografi gas cair ) dengan detektor yang sensitif dapat menentukan
atau pengontrolan sisa-sisa peptisida yang diantaranya senyawa yang mengandung
halogen, belerang, nitrogen, dan fosfor.
7. Perminyakan
Kromatografi gas dapat digunakan untuk memisahkan dan mengidentifikasi hasil-
hasil dari gas-gas hidrokarbon yang ringan
8. Bidang farmasi dan obat-obatan
Kromatografi gas digunakan dalam pengontrolan kualitas, analisa hasil-hasil baru
dalam pengamatan metabolisme dalam zat-zat alir biologi.
9. Bidang kimia/ penelitian
Digunakan untuk menentukan lama reaksi pada pengujian kemurnian hasil.
Komponen-komponen Kromatografi Gas
Komponen-komponen dalam kromatografi gas dapat dilihat pada gambar di bawah ini.
Fungsi dari komponen-komponen di atas adalah sebagai berikut :
1. Gas pembawa, berfungsi sebagai fasa bergerak
2. Sistem pencuplikan sample, sample diinjeksi dengan mikrosyringe melalui septum
karte silikon kedalam kotak logam yang panas
3. Injector, digunakan untuk memasukkan atau menyemprot gas dan sample kedalam
column. Ada beberapa jenis injection system yaitu :
Packed column injector; umumnya digunakan dengan package column atau
capillary column dengan diameter yang agak besar. injeksi dilakukan secara
langsung (direct injection), Split/Splitless capillary injector; digunakan dengan
capillary column. sebagian gas/sample dibuang melalui split valve dan
Temperature programmable cool on-column, digunakan dengan cool capillary
column, injeksi dilakukan secara langsung.
4. Oven, digunakan untuk memanaskan column pada temperature tertentu sehingga
mempermudah proses pemisahan komponen sample.
5. Kolom, merupakan jantung dari kromatografi gas. Kolom berisi stationary phase
dimana mobile phase akan lewat didalamnya sambil membawa sample. Secara
umum terdapat 2 jenis column, yaitu: 1) Packed column, umumnya terbuat dari
glass atau stainless steel coil dengan panjang 1 – 5 m dan diameter kira-kira 5 mm.
2) Capillary column, umumnya terbuat dari purified silicate glass dengan panjang
10-100 m dan diameter kira-kira 250 mm.
6. Detektor, berfungsi mendeteksi adanya komponen yang keluar dari column.
Detektor ditempatkan pada ujung kolom kromatografi gas sehingga dapat
menganalisis aliran gas yang keluar. Ada beberapa jenis detector, yaitu: Atomic-
Emission Detector (AED), Atomic-Emission Spectroscopy (AES) atau Optical
Emission Spectroscopy (OES).
7. Rekorder atau data sistem, berfungsi untuk merekam data yang akan disajikan
dalam bentuk kromatogram secara grafik.
Prinsip kerja Kromatografi Gas
Kromatografi gas atau yang biasa disebut carrier gas digunakan untuk
membawa sample melewati lapisan (bed) material. Karena gas yang bergerak, maka
disebut mobile phase (fasa bergerak), sebaliknya lapisan material yang diam disebut
stationary phase (fasa diam). Ketika mobile phase membawa sample melewati
stationary phase, sebagian komponen sample akan lebih cenderung menempel ke
stationary phase dan bergerak lebih lama dari komponen lainnya, sehingga masing-
masing komponen akan keluar dari stationary phase pada saat yang berbeda. Dengan
cara ini komponen-komponen sample dipisahkan. Dalam kromatografi gas, fase
bergeraknya adalah gas dan zat terlarut terpisah sebagai uap. Pemisahan tercapai
dengan partisi sampel antara fase gas bergerak dan fase diam berupa cairan dengan titik
didih tinggi (tidak mudah menguap) yang terikat pada zat padat penunjangnya.
Petunjuk Cara Kerja
Walaupun beberapa system KG sangat rumit, pada dasarnya cara kerjanya sama. Jika
KG telah dinyalakan maka dapat dilakukan beberapa langkah berikut ini ;
1. Instrumen diperiksa, terutama jika tidak dipakai terus-menerus. Ini dilakukan untuk
mengecek apakah telah dipasang kolom yang tepat, apakah septum injector tidak
rusak (apakah ada lubang besar atau bocor karena sering dipakai), apakah
sambungan saluran gas kedap, apakah tutup tanur tertutup rapat, apakah semua
bagian listrik bekerja dengan baik, dan apakah detector yang terpasang sesuai.
2. Aliran gas kekolom dimulai atau disesuaikan. Ini dilakukan dengan membukan
katup utama pada tangki gas dan kemudian memutar katup (diafragma) sekunder
kesekitar 15psi dan membuka katup jarum sedikit. Ini memungkinkan aliran gas
yang lambat (2-5 ml)/menit untuk kolom kemas dan sekitar 0,5ml/menit untuk
kolom kapiler melewati system dan melindungi kolom dan detector terhadap
perusakan secara oksidasi. Dalam banyak instrument modern, aliran gas dapat diatur
dengan rotameter atau aliran otomatis atau pengendali tekanan, atau dapat
dimasukkan melalui modul pengendali berlandas mikroprosesor. Apapun jenisnya,
sambungan system (terutama sambungan kolom) harus dicek dengan larutan sabun
untuk mengetahui apakah ada yang bocor, atau dengan larutan khusus untuk
mendeteksi kebocoran (SNOOP),atau dapat juga dengan larutan pendeteksi
kebocoran niaga.
3. Kolom dipanaskan sampai suhu awal yang dikehendaki. Ini dilakukan, pada
instrument buatan lama, dengan memutar transformator tegangan peubah yang
mengendalikan gelungan pemanas dalam tanur kesekitar 90 V.
PERMASALAHAN GC
DAFTAR PUSTAKA
Madbardo.____. Gas Kromatografi. Artikel (online).
http://madbardo.blogspot.com/2010/02/kromatografi-gas.html diakses tanggal 12
April 2010.
Edrushiman. 2009. Gas-Liquid Chromatography. Artikel (online)
http://edrushimawan.com/gas-liquid-chromatography/ diakses tanggal 12 April 2010.
Puspita, Chrisye Dewi. 2007. Kromatografi. Artikel (online). http://ilmu-
kedokteran.blogspot.com/2007/11/kromatografi.html diakses tanggal 12 April 2010.