PEMBUATAN MEDIA

I. TUJUAN PERCOBAANSetelah melakukan percobaan, mahasiswa diharapkan dapat mengetahui. Dan

membuat beberapa macam media yang dibutuhkan oleh mikroorganisme

untuk pertumbuhannya.

II. TEORI DASARA. Macam-macam media

Secara umum media dapat dikelompokkan dalam 3 golongan, yaitu media

alam, media semi buatan, dan media buatan. Media alam contohnya: media

tape, nasi, tanah, dan lain-lain. Media semi buatan yaitu media yang dibuat

dari bahan-bahan kimia dicampur dengan bahan alami, contohnya : media agar

tauge, agar kentang dextrose, dan lain-lain. Sedangkan medium buatan adalah

media yang seluruhnya dibuat dari bahan kimia, contohnya : agar sabouraud,

agar czapek dok, dan lain-lain

Menurut bentuknya, media dapat digolongkan dalam : media cair, media semi

padat dan media padat. Media semi padat adalah media yang mengandung

bahan sama dengan media cair, tetapi ditambah dengan agar-agar sehingga

hampir padat. Sedangkan media padat yaitu : media cair yang ditambah agar-

agar sehingga jadi padat.

Menurut kegunaannya, media dapat digolongkan atas :

a. Medium umum, yaitu medium yang umum dipakai untuk

menumbuhkan mikroorganisme, dimana berbagai

mikroorganisme dapat tumbuh pada medium ini. Contohnya :

agar nutrisi untuk bakteri, agar kentang dextrosa untuk jamur.b. Medium seleksi, yaitu medium yang hanya dapat ditumbuhi

mikroorganisme tertentu saja. Contoh : agar endo, agar SS,

agar HS, dan lain-lain.c. Medium differensial, yaitu media yang dapat ditumbuhi

semacam mikroorganisme dengan memberikan ciri tertentu.

Mikroorganisme tersebut mampu menguraikan lain yang sama-

sama tumbuh disitu tidak mampu. Contoh : agar darah, agar

ecsin, metilen blue, dan lain-lain.d. Medium pengaya, yaitu : medium yang di pakai untuk

menumbuhkan mikroorganisme tertentu sebelum ditumbuhkan

pada medium yang dipakai dalam penelitian dengan maksud

menyuburkan lebih dahulu mikroorganisme tersebut.B. Penyimpanan media

Sebelum digunakan, medium yang sudah disterilkan, baik medium

cairmaupun medium padat, dapat disimpan didalam tabung-tabung gelas

berupa tabung erlemeyer atau tabung reaksi ataupun didalam botol.

Penyimpanan dalam jumlah kecil biasanya dalam tabung reaksi sebanyak 10 –

15 ml untuk agar yang nantinya diperlukan untuk mengisi cawan petri.

Sebanyak 5 – 7 ml untuk membuat agar miring yang diperlukan untuk

menanam biakan, agar miring dibuat dengan memiringkan tabung reaksi

medium setelah disterilkan sebelum medium menjadi padat.

C. PEMBUATAN MEDIA

Nutreint Agar (Agar Kaldu)

Bahan :a. Pepton (bacto) 1 grb. Ekstrak daging 0,6 grc. Aquadest 100 mld. Agar-agar 3,6 gr

Cara kerja :a. Mencampurkan bahan diatas (a-d) dengan aquadest hanya

50 mlb. Memanaskannya hingga mendidih selama 5 – 10 menitc. Menambahkan air hingga 100 mld. Menstreilkan selama 20 menit pada suhu 120 ℃ .

Mendinginkan hingga mengeras.

IV. Langkah Kerja

1. Mencampurkan a-d.

2. Memanaskan hingga mendidih selama 5-10 menit.3. Mengambil dari atas api, menambahkan 3-5 ml NaOH 20 % sambil di

aduk dengan menggoyangkan labu erlenmeyer, hingga bereaksi basa

tehadap brom – thymol blue.4. Membiarkan kotorannya mengendap.5. Menyaring melalui saringan kapas hingga bening.6. Memeriksa reaksinya terhadap “brom – thymol blue” 0,04% dan

menetralkan hingga akhirnya diperoleh pH 6,8 – 7,0.7. Menambahkan airnya hingga mencapai 1 liter.8. Menambahkan agar – agar, memanskan lagi sampai agar- agarnya larut

semua (keliatan larutan bening).9. Mensterilkan selama 20 menit pada suh 1200C.

V. Data Pengamatan

Sifat FisikPengamatanSebelum Pendinginan Sesudah Pendinginan

Warna Kuning KuningBentuk Cair (larutan) PadatBau Berbau Tidak Berbau

VI. Analisa Percobaan

Untuk menumbuhkan dan mengembangbiakkan mikroba diperlukan suatu

subtrat yang disebut medium. Medium yang dijadikan tempat menumbuhkan dan

mengembiakan mikroba tersebut sebelum digunakan harus dalam keadaan steril,

artinya tidak ditumbuhi oleh mikroba lain yang tidak diharapkan. Syarat media

agar mikroba dapat tumbuh dengan baik, yaitu: kebutuhan vitamin, air, nitrogen,

unsur hara, pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroba, mempunyai tekanan

osmosis dan steril. Pada percobaan kali ini ialah membuat media padat dalam

nutrien agar (agar kaldu) dengan menggunakan bahan NaCl, Pepton (bacto),

aquadest dan agar – agar (bacto). Pembuatan media dilakukan dengan

mencampurkan bahan – bahan tersebut ke dalam beaker glass 500 ml. Lalu

dipanaskan desertai pengadukan otomatis di atas hotplate hingga mendidih dan

tercampur rata. Setelah larutan agar berubah menjadi bening maka diangkat dan

dimasukkan ke dalam cawan petri dan tabung reaksi. Lalu dimasukkan ke lemari

es. Amati agar kaldu, jika tidak ditumbuhi agar, berarti percobaan berhasil.

VII. Kesimpulan

1. Dalam pembuatan media, keadaan alat – alat harus steril yaitu dengan

cara autoclave.2. Bahan yang digunakan belum terlalu lama disimpan atau dalam

kondisi baik tidak terkontaminasi.3. Tempat penyimpanan media harus steril, tidak ada keringat dan

tertutup rapat.

VIII. Daftar Pustaka

- Tim Laboratorium Kimia.2014.Penuntun Pratikum Rekayasa

Bioproses.Palembang: Politeknik Negeri Sriwijaya.- http://www.academia.edu/6761271/Laporan-tetap-medium-dan-

inokulasi.

Proses Pembuatan Agar Kaldu

1. Menyiapkan bahan nutrien agar yang

berkualitas baik belum

terkontaminasi kemudian agar di

timbang di neraca analitik.

2. Melarutkan nutrien agar dengan air steril.

3. Menambahkan air sampai 300 ml, kemudian masukkan magnet stirer,

lalu ditutup dengan aluminium foil.

4. Memanaskan nutrien

5. Setelah dingin, msukkan nutrien pada cawan petri.

6. Cawan petri harus selalu di lap bagian tutupnya dengan etanol agar

tidak menimbulkan keringat.

7. Dan meletakkan nutrien pada tabung reaksi

8. Nutrien agar atau agar kaldu (tampilan setelah 1 hari)

Gambar Alat

Gelas Kimia

Pengaduk Spatula

Kaca Arloji

Hot Plate

Neraca Analitik

Aluminium Foil