A08bik

ISOLASIDANKARAKTERISASI Thiobacillusferrooxidans

DARIBERBAGAIJENISTANAH

BRAMANTYOINDRAKUSUMAEFFENDIPUTRO

A24103024

DEPARTEMENILMUTANAHDANSUMBERDAYALAHAN

FAKULTASPERTANIAN

INSTITUTPERTANIANBOGOR

BOGOR

2008

ISOLASIDAN KARAKTERISASI Thiobacillusferrooxidans

DARIBERBAGAIJENISTANAH

BRAMANTYOINDRAKUSUMAEFFENDIPUTRO

Skripsisebagaisalahsatusyaratuntukmemperolehgelar

sarjanapertanianpadaDepartemenIlmuTanahdanSumberdayaLahan

DEPARTEMENILMUTANAHDANSUMBERDAYALAHANFAKULTASPERTANIAN

INSTITUTPERTANIANBOGORBOGOR2008

Judul : IsolasidanKarakterisasiThiobacillusferrooxidans

dariBebagaiJenisTanah

NamaMahasiswa :BramantyoIndraKusumaEffendi Putro

NomorPokok :A24103024

Menyetujui,

PembimbingI PembimbingII

Dr.Ir.DwiAndreasSantosa,MS. Dr.RahayuWidyastuti,M.Sc.

NIP.131803643 NIP.131879328

Mengetahui,

DekanFakultasPertanian

Prof.Dr.Ir.DidySoepandie,M.Agr

NIP.131124019

Tanggallulus:

RINGKASAN

BRAMANTYO INDRA KUSUMA EFFENDI PUTRO. Isolasi danKarakterisasi ThiobacillusferrooxidansdariBebagaiJenisTanah.DibimbingolehDWIANDREASSANTOSAdanRAHAYUWIDYASTUTI.

Kandungan sulfur batubara Indonesia termasuk tinggi sehingga perlu

dilakukan upaya penurunan kandungan tersebut. Beberapa metode telah

diterapkan untuk mengatasi tingginya kandungan sulfur batubara. Salah satu

caranya adalah secara biologi, yaitu dengan memanfaatkan kerja dari

mikroorganisme yang dikenal dengan istilah biodesulfurisasi. Mikroorganisme

yang memegang peranan penting dalam proses tersebut salah satunya adalah

Thiobacillusferrooxidans.

Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan isolat Thiobacillus

ferrooxidansdenganisolasidankarakterisasidariberbagaijenistanah.Bakteriini

diisolasidaritanahgambut,tanahasamsulfat,tanahmineral,dantanahyangkaya

akan unsur sulfur dari daerah Gunung Sanggabuana Jawa Barat, Bukit Petuk

Palangkaraya,KawahSikidangdanKawahSileriDieng,sertaKepulauanRiau.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa Thiobacillus ferrooxidans berhasil

diisolasidari tanahyangberasaldariDieng, tepatnyadi sekitarKawahSikidang

dan Kawah Sileri. Hasil karakterisasi yang didapatkan adalah pH 3,5, suhu

optimal3035C,Gramnegatif,berbentukbatang,rantaipendek,dengansumber

energidarioksidasiFe2+danreduksisulfur.

Katakunci:Thiobacillusferrooxidans,Isolasi,danKarakterisasi

SUMMARY

BRAMANTYO INDRA KUSUMA EFFENDI PUTRO. Isolation andCharacterization of Thiobacillus ferrooxidans from Various Types of Soil.SupervisedbyDWIANDREASSANTOSAandRAHAYUWIDYASTUTI.

Indonesiancoalcontainedhighamountofsulfur,sothatitisnecessaryto

doeffortstoreducethecontentofsulfur.Somemethodshadbeendonetoavoid

thisproblem.Oneof themethodsisbiologicalmethod,thatusedtheadvantages

ofmicroorganisms,whichisknownasbiodesulfurization.Oneofmicroorganisms

whichhasanimportantrole inthatprocessisThiobacillusferrooxidans.

ThepurposeofthisresearchistogetThiobacillusferrooxidansisolatesby

isolation and characterization from various types of soils. This bacteria was

isolated frompeat soils, sulphate acid soils,mineral soils, and sulfurrich soils,

which were taken from Sanggabuana Mountain West Java, Bukit Petuk

Palangkaraya,KawahSikidangandKawahSileriDieng,alsoRiauArchipelago.

TheresultofthisresearchshowedthatThiobacillusferrooxidanshasbeen

succeed isolated from soils which were taken from Dieng, around Kawah

Sikidang and Kawah Sileri. The characterizations of this bacteria are pH 3,5,

optimumtemperatureis3035C,Gramnegativebacteria,rodshapedcells,small

strain,derivesenergyfromtheoxidationof Fe2+andreducedsulfurcompounds.

Keywords:Thiobacillusferrooxidans,IsolationandCharacterization

RIWAYATHIDUP

PenulisdilahirkandiPalembang,provinsiSumateraSelatanpadatanggal

23Mei 1985. Penulis merupakan anak kedua dari tiga bersaudara dari Bapak

R.B.E.GatotHaryantodanIbuAnuariah.

Tahun1997penulismenyelesaikanstudidiSDYKPP5Plaju,kemudian

melanjutkan ke SLTP YKPP 2 Plaju dan lulus pada tahun 2000. Selanjutnya

penulislulusdariSMUYKPP1Plajupadatahun2003.

Tahun2003penulisditerimadiIPBmelaluijalurUSMI.Penulisditerima

diProgramStudiIlmuTanah,Departemen IlmuTanahdanSumberdayaLahan,

FakultasPertanian,InstitutPertanianBogor.

Selama di IPB, penulis pernah menjadi asisten praktikum Pendidikan

AgamaIslamtahunajaran2005/2006dan2006/2007.Penulisjugapernahaktifdi

Dewan Perwakilan Mahasiswa TPB (DPM TPB) 2003/2004, Kesatuan Aksi

Mahasiswa Muslim Indonesia (KAMMI) IPB 20032005, Dewan Perwakilan

Mahasiswa Fakultas Pertanian (DPMA) 2004/2005 dan 2005/2006, Forum

Komunikasi Rohis Departemen Fakultas Pertanian (FKRDA) 2005/2006, serta

Senior Resident (SR) Asrama TPB IPB 2006/2007 dan 2007/2008. Selain itu,

penulisjugapernahmengikutiberbagaiseminardanjugamenjadipanitiaseminar,

baiktingkatIPBmaupun tingkatnasional.

Bogor,September2008

Penulis

KATAPENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala

karuniaNya sehingga karya ilmiah ini dapat diselesaikandengan baik. Shalawat

serta Salam kepadaBaginda RasulullahSAW, para keluarga, sahabat, dan para

pengikutbeliaudaridahuluhinggaakhirzaman.

Penelitian yang berjudul Isolasi dan Karakterisasi Thiobacillus

ferrooxidans dari Berbagai Jenis Tanah, terdorong oleh keinginan untuk

mendapatkan isolat bakteri Thiobacillus ferrooxidans, yang tergolong sulit

didapatkan,untukbiodesulfurisasibatubara.Penelitianinidilakukansebagaisalah

satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Pertanian pada Departemen Ilmu

TanahdanSumberdayaLahan,FakultasPertanian,InstitutPertanianBogor.

Pada kesempatan ini penulis inginmenyampaikan penghargaan dan rasa

terimakasih yangsebesarbesarnyakepadasemuapihak yangtelahmemberikan

masukan, dukungan, dan semangat, baik selama penelitian maupun dalam

penulisanskripsiini.Rasaterimakasihyangtuluspenulissampaikankepada:

1. Dr. Ir. Dwi Andreas Santosa, MS. dan Dr. Rahayu Widyastuti, M.Sc.

selakudosenpembimbingyangtelahmembimbingdanmembantuselama

prosespenelitiandanpenyusunanskripsi.

2. Ir. H. Fahrizal Hazra M.Sc. selaku dosen penguji tamu yang telah

memberikanbanyakmasukanbagipenulis.

3. Ayahanda R.B.E. Gatot Haryanto dan IbundaAnuariah, MbaUlly, Oki

serta seluruh keluarga besar tercinta yang senantiasa memotivasi,

mendorongsertamendoakanpenulisuntukmenyelesaikanstudidiIPB.

4. Dr. Ir. DwiAndreas Santosa,MS. selaku dosen pembimbing akademik,

segenap dosen, staf pengajar, laboran dan pegawai Departemen Ilmu

Tanah dan Sumberdaya Lahan yang telah memberikan ajaran dan

bimbinganpadapenulisselamastudidiIPB.

5. Segenap staf dan pegawai Indonesian Center for Biodiversity and

Biotechnology (ICBB) Mba Lastri, Mba Endar, Mba Salma, Teh Taty,

MasPuput,Kisdanlainlainyangtelahbanyakmemberikanmasukandan

bantuannyadalammenyelesaikanpenelitiandanpenulisanskripsiini.

6. Dr. Bonny P.W. Soekarno, M.Sc. sebagai Kepala Badan Pengelola

Asrama TPB IPB, serta temanteman Senior Resident Asrama TPB IPB

(MasAgus,Mas Budi, MasDesna,Mas Supri,Mas Zul, KAsur, Aris,

Aryo,Dedi,Dian,Erik,Febri,Fherdes,Helmi,Mukhtar,Sofiyan,Usboy,

Zepri, Aida, Alvira, Anni, Arum, Desi, Eni, Evrin, Firdaus, Hesti, Ila,

Intan, Kartika, Mala, Nia, Noer, Patma, Pratiwi, Wacih) yang telah

menjadi inspirasi dan memberikan motivasi bagi penulis hingga dapat

menyelesaikanstudidiIPBini.

7. Temanteman seperjuangan di DPM TPB40 (Cecep Ali, dkk), DPMA

(KAri,dkk),FKRDA(Erick,Mada,Rangga,MbaEti,MbaSanti,Hanif,

Titin), KAMMI IPB, PagiAnaba05, Tim $ (Kristanto, Rio, Zul, Ariza,

Cinta, Dina, Dwi, Hesti, Iin, Mastuty, Nining, Pemi, Wiwin), Tim

SIMPATI (Z3, UCON, NDF, CHU, CHUN), DPD PKS Kota Bogor,

Brigade09, atas segalamasukan,motivasi dan inspirasinya padapenulis

selamastudidiIPB.

8. Mas Atang, KYohan, KCep, KJaya, KHasyim, Adit, Arya, Budi,

Kopral, atas bimbingan, inspirasi, dan motivasinya selama ini. Teman

temanSoil40sertasemuapihakyangtidakdapatdisebutkan.

Akhirnya, semoga hasil penelitian ini dapat bermanfaat bagi yang

memerlukan.

Bogor,September2008

Penulis

DAFTARISI

Hal

DAFTARISI ...................................................................................................i

DAFTARTABEL ...........................................................................................ii

DAFTARGAMBAR.......................................................................................iii

I. PENDAHULUAN.......................................................................................1

1.1.LatarBelakang ...............................................................................1

1.2.TujuanPenelitian.. .........................................................................3

II.TINJAUANPUSTAKA............................................................................4

2.1.Batubara........................................................................................4

2.2.Biodesulfurisasi...............................................................................5

2.3. Thiobacillus...................................................................................8

III. BAHANDANMETODE .........................................................................11

3.1.TempatdanWaktu ..........................................................................11

3.2.BahandanAlat................................................................................11

3.2.1.Bahan ................................................................................11

3.2.2.Alat ....................................................................................11

3.3.Metode Penelitian ..........................................................................12

3.3.1.PenyiapanMedia ................................................................12

3.3.2.IsolasiBakteridariBerbagaiSumber...................................12

3.3.3.KarakterisasiBakteriThiobacillusferrooxidans .................. 13

IV.HASILDANPEMBAHASAN15

4.1.IsolasiBakteri Thiobacillusferrooxidans15

4.2.KarakterisasiBakteriThiobacillusferrooxidans .............................21

V.KESIMPULANDANSARAN.....................................................................24

5.1.Kesimpulan...................................................................................... 24

5.2.Saran.................................................................................................24

VI.DAFTARPUSTAKA.................................................................................25

DAFTARTABEL

Teks

Nomor

Halaman

1. PerbandinganPerkiraanHargadariBerbagaiProsesDesulfurisasi 6

Batubara

2. Komposisimediumcairdengangaramferro(tiap1000ml) 12

3. Komposisimediapadat(agar)tiap1000ml14

4. HasilIsolasiSampelTanahdiDaerahBukitPetuk,Palangkaraya 16

5. HasilIsolasiSampelTanahSekitarGunungSanggabuanadan 17

Palelawan,Riau

6. HasilIsolasiSampelTanahSekitarKawahSikidangdanKawah 19

SileriDieng

7. HasilKarakterisasiBakteri ThiobacillusferrooxidansyangBerhasil 23

Diisolasi(SI6636CdanSI6671P)

DAFTARGAMBAR

Teks

Nomor

Halaman

1. PerubahanWarnapadaMediasaatIsolasi 20

(kiritidaktumbuhkanantumbuh).

2.IsolatBakteriyangDitumbuhkanpadaMediaPadat 22

(A.Tumbuh,B.Tidaktumbuh).

I.PENDAHULUAN

1.1.LatarBelakang

Batubara memainkan peran yang penting dalam membangkitkan tenaga

listrikdanperantersebutterusberlangsung.Saatinibatubaramenjadibahan bakar

pembangkit listrik dunia sekitar 39% dan proporsi ini diharapkan untuk tetap

beradapadatingkatdemikianselama30tahunkedepan.Konsumsibatubaraketel

uap diproyeksikan untuk tumbuh sebesar 1,5% per tahun dalam jangka waktu

20022030. Batubara muda, yang juga dipakai untuk membangkitkan tenaga

listrik, akan tumbuh sebesar 1% per tahun. Kebutuhan batubara kokas dalam

industri besi dan baja diperkirakan akanmengalami kenaikan sebesar 0,9%per

tahunselamajangkawaktutersebut.

Tingginya harga bahan bakar minyak (BBM) mendorong perusahaan

perusahaan yang memakai BBM mencari energi alternatif lain, salah satunya

adalahpenggunaanbatubarauntukpenggantiBBM.ProduksibatubaraIndonesia

pada tahun 2005 mencapai 151,594 juta ton, jumlah ini meningkat pesat jika

dibandingkan pada tahun 1992 yang hanyamencapai 22,951 juta ton.Kenaikan

produksi batubara tiap tahunnya sekitar 15,67%, kenaikan produksi disebabkan

permintaanbatubaradalamnegeridanluarnegeriyangmeningkattiaptahunnya.

Batubara dewasa ini digunakan sebagai bahan bakar padat untuk

menghasilkan listrik dan panas melalui pembakaran. Konsumsi batubara dunia

sekitar 6,2 milyar ton per tahun, dimana sekitar 75% digunakan untuk

menghasilkan listrik.Chinamemproduksi 2,38milyar ton pada tahun 2006dan

India memproduksi sekitar 447,3 juta ton pada 2006. 68,7% listrik di China

berasal dari batubara. Amerika Serikat mengkonsumsi sekitar 1,053milyar ton

batubaratiaptahunnya,menggunakannya90%untukpembangkitlistrik.Batubara

di dunia ini diproduksi sekitar 6,19 milyar ton pada tahun 2006 (Wikipedia,

2008).






yang memegang peranan penting dalam proses tersebut adalah Thiobacillus

ferrooxidans, Thiobacillus thiooxidans, Leptospirillum ferrooxidans, dan dari

genus Sulfolobus (S. acidocaldarius) (Handayani, 1996 Woods and Rawlings,

1989).

Thiobacillus ferrooxidans, merupakan bakteri Gram negatif

kemolitoautotropik yangmendapatkanenergidanelektronelektrondarioksidasi

besiferrodan/atausulfurdanberagamreduksisenyawasulfurpadapH2dengan

menggunakan oksigen sebagai akseptor elektron. Bakteri ini mengikat CO2

dengan skema CalvinBasshamBenson dan juga dapat mengikat nitrogen di

bawah kondisi mikroaerofilik. T. ferrooxidans diketahui dapat tumbuh dengan

hidrogen sebagai sumber energi baik secara aerobik maupun anaerobik dengan

kesamaanreduksidariFe(III)(Levican etal.,2002).

TujuanPenelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan isolat Thiobacillus

ferrooxidans dengan cara mengisolasi dan mengkarakterisasinya dari berbagai

jenistanahyangdiambildariberbagailokasi.

II.TINJAUANPUSTAKA

2.1.Batubara

Batubaraadalahbahanbakarfosil.Batubaradapatterbakar,terbentukdari

endapan,batuanorganikyangterutamaterdiridarikarbon,hidrogendanoksigen.

Batubara terbentuk dari tumbuhan yang telah terkonsolidasi antara strata batuan

lainnya dan diubah oleh kombinasi pengaruh tekanan dan panas selama jutaan

tahunsehinggamembentuk lapisanbatubara.Dewasa inibatubara telahmenjadi

salah satu industri global,dimana batubaraditambang secara komersial di lebih

dari50negaradanbatubaradigunakandilebihdari70negara(Worldcoal,2004).

Berdasarkan datadariBPStatisticalReviewofEnergy 2004(Raharjo,2006),pada

tahun2003,8besarnegaradengancadanganbatubaraterbanyakadalahAmerika

Serikat,Rusia,China,India,Australia,Jerman,AfrikaSelatan,danUkraina.

Proses pengolahan batubara pada umumnya diawali oleh pemisahan

limbah dan batuan secara mekanis diikuti dengan pencucian batubara untuk

menghasilkan batubaraberkualitas lebih tinggi. Dampak potensial akibat proses

iniadalahpembuanganbatuanlimbahdanbatubaratakterpakai,timbulnyadebu

danpembuanganairpencuci(BAPEDAL,2001).Salahsatukandunganbatubara

yang dapat menimbulkan pencemaran akibat dari sisa pembakarannya adalah

sulfur.






yang memegang peranan penting dalam proses tersebut adalah Thiobacillus

ferrooxidans, Thiobacillus thiooxidans, Leptospirillum ferrooxidans, dan dari

genus Sulfolobus (S. acidocaldarius) (Handayani, 1996 Woods and Rawlings,

1989).

2.2.Biodesulfurisasi

Penyingkiran sulfur pada batubara dapat dilakukan dengan tiga metode,

yaitu fisika, kimiawi, dan biologis. Penyingkiran sulfur secara biologis atau

biodesulfurisasiadalahmetodepenyingkiransulfurdenganmenggunakanmikroba

yang paling murah dan paling sederhana. Ada beberapa faktor yang dapat

mempengaruhi biodesulfurisasi batubara, yaitu: temperatur,pH,mediumnutrisi,

konsentrasi sel, konsentrasi batu bara, ukuran partikel, komposisi medium,

kecepatanaerasiCO,penambahanpartikulatdansurfaktan,sertainteraksidengan

mikroorganismelain (Nuella,2005).

Berbagai teknologi untuk menghilangkan sulfur dari batubara telah

dikembangkan diantaranya TRW Ferric Leaching, Batelle Hydrothermal,

KennecottOxygenLeaching danSolventrefinedCoal.Berbagai proses kimiawi

tersebut tergolongmahaldan seringkalimenyebabkan strukturbatubaramenjadi

rusak. Terkait dengan hal tersebutdalam tahuntahun terakhir dikembangkanlah

pendekatanbioteknologidenganmendasarkandiripadaaktivitasmikroorganisme

untuk desulfurisasi (microbial desulfurization) (Koizumi, 1984). Menurut Detz

dan Barvinchak (1980), teknologi ini paling murah dibanding teknologi

desulfurisasi lainnyadan keunggulan lainnya strukturbatubara tidakmengalami

perubahan.PerbandinganhargainidapatkitalihatpadaTabel1berikut.

Tabel 1. Perbandingan Perkiraan Harga dari Berbagai Proses Desulfurisasi

Batubara

Proses HargaUS$/ton

Precombustion

Biotechnology

TRWFerricLeaching(Meyers)

BattelleHydrothermal

KennecottOxygenLeaching

SolventrefinedCoal

1014

20

20

22

45150

Postcombustion

FlueGasDesulfurization 2040

ProsesdesulfurisasibatubaradenganmetodeMeyersmenghilangkanlebih

dari80%jumlahtotalsulfurdalambatubaramelaluipencuciankimiawidari90

95%kandungansulfurpiritdalambatubaradenganlarutansulfatferriencerpada

suhu 90130C. Proeses ini terdiri dari beberapa tahap termasuk penghancuran,

perlakuan kimiawi, pemindahan sulfur, dan regenerasi larutan (Meyers et al.,

1976). Proses lain desulfurisasi batubara secara kimiawi adalah Battelle

Hydrothermal. Proses ini tidak hanya menguntungkan secara ekonomi

dibandingkanprosesyang lain, tetapi jugamemilikikeuntungan yangsignifikan

secarateknologi.ProsesBattelleHydrothermaltidakmenghasilkanlimbahdalam

jumlah yang banyak pada pembuangan. Produk akhir utama merupakan bahan

bakarpadatyangbersihdansulfurelemental,yangmudahdisimpan,danpotensial

menjadi bahan daur ulang yang berharga. Proses ini juga berpotensi untuk

menghasilkanpeningkatancadangangasdanbahanbakarcairsertamemproduksi

larutanbatubarayangdapatmenjadisumberbahankimiabatubara(Stambaughet

al.,1977).

Laboratorium Kennecott Copper Corp`s Ledgemont telah menemukan

proses pencucian oksigen, dimana kekentalan batubara diletakkan pada reaktor

pencucian di bawah kondisi dengan suhu, tekanan, density, dispersi gas, dan

campuran yang sesuai, sulfur pirit dioksidasi menjadi sulfat yang dapat larut.

Kekentalantersebutkemudiandipisahkandan,denganfraksibatubara,dicuci.Air

dari operasi pencucian dinetralkan dengankapurataubatu kapur. Senyawabesi

dangipsumdipisahkandariairdandikirimkankeareayangsesuai,danairbersih

tersebut digunakan kembali. Pemindahan pirit merupakan tahap yang penting

pada hidrogenasi batubara, yang dapat menghasilkan bahan kimia berharga,

beberapacairanbatubararendahsulfur,danbahandengankadarabuyangrendah

sulfur,yangdapatdibakaruntukmenghasilkanlistrik (ECD, 1974).

Solventrefined Coal, yang juga dikenal sebagai SRCI, berkadar rendah

sulfur,rendahabu,bahanbakarpadatyangdiproduksidaribatubaradanmemiliki

komposisi yang dapat digunakan sebagai bahan bakar ketel uap yang dapat

dibakardibawahkondisilingkunganyangsesuai.SolventrefinedCoaldihasilkan

daridisolusidanhidrogenasihancuranbatubaradalamprosesasalbahanpelarut.

Hasil Solventrefined Coal merupakan fraksi hidrokarbon yang memiliki titik

didihsecarasubstansilebihbesardari850Fdansecaraumummewakili4070%

kelembaban abu daribatubara yang tersedia secara bebas (Lennon, 1984). Flue

Gas Desulfurization (FGD) merupakan teknologi yang digunakan untuk

memindahkansulfurdioksidamenggunakan alatpembuangangasyangmembakar

batubara atau minyak untuk menghasilkan uap air untuk turbin uap air yang

mengendalikan pembangkitlistrik (Wikipedia,2006).

Alternatif yang paling aman dan ramah terhadap lingkungan untuk

desulfurisasi batubara adalah secara mikrobiologi menggunakan bakteri

Thiobacillus ferrooxidans dan Thiobacillus thiooxidans. Penggunaan kombinasi

kedua bakteri ini ditujukan untuk lebih mengoptimalkan desulfurisasi.

Thiobacillus ferrooxidans memiliki kemampuan untuk mengoksidasi besi dan

sulfur, sedangkan Thiobacillus thiooxidans tidak mampu mengoksidasi sulfur

dengan sendirinya, namun tumbuh pada sulfur yang dilepaskan setelah besi

teroksidasi(Yusuf,2005).

2.3. Thiobacillus

Thiobacillus berukuran kecil, bakteri Gram negatif, selnya berbentuk

batang (0,5x1,04,0m) dengan beberapa spesies bersifat motil dengan flagel

polar. Energi didapatkan dari oksidasi satu atau lebih reduksi senyawa sulfur,

termasuksulfida,sulfur,thiosulfida,polithionat,danthiosionat.Sulfatmerupakan

produk akhir dari oksidasi senyawa sulfur, tetapi sulfur, sulfit, atau polithionat

mungkin terakumulasi oleh kebanyakan spesies. Spesies tertentu juga

mendapatkan energi dari mengoksidasi besi ferro menjadi besi ferri. Seluruh

spesies dapat mengikat karbondioksida lewat lingkaran BensonCalvin dan

mampu tumbuh secara autotropik beberapa spesies adalah obligat

khemolitotropik.BakteriinihiduppadapHoptimal28dansuhuoptimal2043C

(Holtetal.,1994).

GenusThiobacillusjugadikenaldengannamaAcidithiobacillus.Genusini

bersifat termofilik, hidup pada suhu 4550C. Genus ini juga termasuk dalam

genus asidofil, yang hidup pada pH 1,52,5. Beberapa spesies hidup pada pH

netral (Robertson and Kuenen, 2005). Beberapa bakteri khemolithotrof dapat

mengoksidasi sulfur dan memperoleh energi dari reduksi CO2 (Rheinheimer,

1991). Menurut Ingledew (1990), khemolithotrof meliputi sejumlah genera:

Thiobacillus, Sulfolobus, dan Leptospirillum, dan kemungkinan besar masih

banyakyanglain.

Leptospirillumferrooxidansmerupakanbakteriyangdapatmemanfaatkan

pirit dengan mengoksidasi Fe(II) menjadi Fe(III), akan tetapi tidak mampu

mengoksidasiS0 secara langsung(Sugioetal.,1994Ingledew,1990Schippers

et al., 1996). Thiobacillus ferrooxidans mampu mengoksidasi Fe(II) menjadi

Fe(III) dan mengoksidasi senyawasenyawa belerang tereduksi serta

memanfaatkanoksidasiinisebagaisumberenerginya(Schlegel,1994),sedangkan

Sulfolobus acidocaldarius merupakan khemolithotrof yang hidup di tempat

dengansuhuoptimum70CdansuatupHoptimum23.Bakteri ini jugamampu

mengoksidasiFe(II)dansenyawasenyawasulfur(Ingledew,1990).

Woods and Rawlings (1989) menyebutkan bahwa Thiobacillus

ferrooxidansmemilikikebutuhannutrisi yangsangatkecil.Semuastrainbersifat

autotropik, yang berarti mikroorganisme tersebut dapat menggunakan CO2 dari

atmosfir sebagai sumberkarbon untukmensintesa senyawa organik, akan tetapi

tidak dapat tumbuh pada sumber karbon organik. Menurut Dick (1992),

Thiobacilluskebanyakanhidupsecaraaerobobligatyangmemerlukankeberadaan

oksigen untuk kehidupannya. Pada Thiobacillus sumber energi berasal dari

oksidasi sulfur elemental, sulfit, thiosulfit, polithionat, dan thiosianat yang

dijadikansebagaidonorelektron.

Thiobacillusbanyaktersebardi laut,perairan,dantanahterutamatempat

dimana komponen sulfur melimpah, seperti pada sumber sulfur, mineral sulfit,

simpanan sulfur, daerah pengolahan limbah dan sumber gas yang mengandung

sulfur.SpesiesThiobacillusdapatdijumpaiditanahvulkanikyangbersifatasam,

sungai atau aliran air di sekitar pertambangan (Mc Kane and Kandel, 1996).

MenurutRheinheimer(1991),diperairansepertisungai,danau,danpantaispesies

Thiobacillus tampaknyamenjadipengoksidsisulfurpalingpenting.

Thiobacillustidakberwarna,berbentuklonjong,bakteri Gramnegatifyang

berflagelpolar.Bakteri inidapatmengoksidasibesi, yangmenyebabkanmereka

dapatmemetabolismeionionmetalsepertibesiferro:

Fe2++O2+2H+ >Fe3++H2O(RobertsonandKuenen,2005).

ReaksioksidasipiritmenurutBoyd(1982)adalahsebagaiberikut:

1)FeS2+H2O+3,5O2FeSO4+H2SO4

2)2FeSO4+O2+H2SO4Fe2(SO4)3+H2O

3)FeS2+7Fe2(SO4)3+8H2O15FeSO4+8H2SO4

Produksiferrisulfatdariferrosulfatsangatbesarkarenaprosespembentukannya

dipercepat oleh aktivitas bakteri Thiobacillus ferrooxidans (No. 2), dan pada

kondisi yangmasam reaksi pirit dengan ferri sulfat (No. 3) berlangsungsangat

cepat.Ferrisulfatjugadapatterhidrolisissehinggamenambahkemasamanseperti

diperlihatkanreaksiberikut:

Fe2(SO4)3+6H2O2Fe(OH)3+3H2SO4.

III.BAHANDANMETODE

3.1. TempatdanWaktuPenelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Lingkungan,

Indonesian Center for Biodiversity and Biotechnology (ICBB) di Situ Gede,

Bogor.WaktupenelitiandaribulanMaret2007sampai dengan bulan Juli2008.

3.2. BahandanAlat

3.2.1. Bahan

Bahan yang digunakanuntukpenelitian ini adalah sampel berbagai jenis

tanah,yaitutanahgambut,tanahasamsulfat,tanahmineral,dantanahyangkaya

akan unsur sulfur dari daerah Gunung Sanggabuana Jawa Barat, Bukit Petuk

Palangkaraya, Kawah Sikidang danKawah Sileri Dieng, sertaKepulauanRiau.

Media Leathen et al. (1956) yang terdiri atas (gram/liter): K2HPO4 (0,05),

(NH4)2SO4 (0,15),Ca(NO3)2 (0,01),MgSO4.7H2O(0,50),KCl(0,05),FeSO4.7H2O

(1,00), dan agar (12,00). Bahan untuk pewarnaan Gram, yaitu kristal ungu,

iodium,alkohol95%,safranindanakuades.

3.2.2. Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi shaker, autoclave,

timbangan, pipet, mikropipet, labu Erlenmeyer, tabung isolasi, tabung reaksi,

pembakar bunsen, kertas pH, cawan petri, testube, korek api, mikroskop dan

peralatangelaslainnya.

3.3. MetodePenelitian

3.3.1. PenyiapanMedia

PadapenelitianinidigunakanmediacairdariLeathenetal.(1956)dengan

pH3,5.KomposisimediadisajikanpadaTabel2.

Tabel2.KomposisiMediumCairdenganGaramFerro(tiap1000ml)

Bahan T.ferrooxidansMedium(Leathenetal., 1956)

pH3,5

K2HPO4 0,05gram

(NH4)2SO4 0,15gram

Ca(NO3)2 0,01gram

MgSO4.7H2O 0,50gram

KCl 0,05gram

FeSO4.7H2O 1,00gram

Sumber:Nurseha,2000

Bahan kimia tersebut dicampurkan ke dalam akuades sebanyak 800 ml

terkecualiFeSO4.7H2O,diadukdandisterilkanpadasuhu121Cdandidinginkan.

UntukFeSO4.7H2O, dipersiapkanakuades yang telah steril dan telah ditetapkan

pHnya, yaitupH3,5,sebanyak200ml,setelah itudimasukkanFeSO4.7H2Odan

dipanaskansampaisuhu50C,laludidinginkan.Kedualarutantersebutkemudian

dicampursecaraapsetik.Mediainikemudiandibagibagikedalamtabungisolasi

yangtelahsteril.

3.3.2.IsolasiBakteridariBerbagaiSumber

Isolasidilakukandengancaramemasukkan1gramsampeltanahkedalam

9 ml larutan fisiologis (0,85%NaCl) yang telah disterilkan, kemudian dikocok

selama 15 menit, lalu diamkan untuk memisahkan endapannya, selanjutnya

diambil 1 ml larutan kemudian dimasukkan ke dalam media. Kultur tersebut

selanjutnya diinkubasi pada suhu kamar. Isolasi dilakukan juga dengan cara

memasukkan sampel langsung ke dalammedia steril yang langsung diinkubasi

sampaiwarnacairannyaberubah.

Medium isolasi yang digunakan berupamediumcair yang selektifuntuk

pertumbuhanbakteri,yaitumediaLeathenetal.(1956).Mediatersebutkemudian

diinkubasi pada suhu kamar dengan cara dikocok dengan menggunakan shaker

250 rpm, selanjutnya disimpan pada ruangan yang tidak terlalu banyak cahaya.

Apabilatelahterjadiperubahanwarnamenjadikuningataukuningkarat,makadi

dalamsumbertersebutdidugaterdapat Thiobacillusferrooxidans.

3.3.3. KarakterisasiBakteri Thiobacillusferrooxidans

Setelah isolat diperoleh maka perlu dilakukan pemindahan isolat dari

media cair kemedia padat yang selektif. Pemindahan isolat darimedia cair ke

media padat dilakukan dengan cara memasukkan media agar yang telah

dipersiapkansebanyak10mlkedalamcawanpetriyangsudahsteril.Isolatpada

mediumcair tersebutkemudiandisebarsebanyak1mlkeatasmediapadatyang

telah disiapkan, kemudian diinkubasi sampai terbentuk koloni dari bakteri yang

diinginkan.

Pengamatan mikroskopis dengan menggunakan mikroskop dilakukan

setelah koloni terbentuk, kemudian dianalisis untuk mengetahui morfologi dan

sifatsifat yang melekat pada bakteri tersebut. Komposisi media agar (padat)

disajikanpadaTabel3.

Tabel3.KomposisiMediaPadat(agar)tiap1000ml

Bahan T.ferrooxidansMedium(Leathenetal., 1956)

pH3,5

K2HPO4 0,05gram

(NH4)2SO4 0,15gram

Ca(NO3)2 0,01gram

MgSO4.7H2O 0,50gram

KCl 0,05gram

FeSO4.7H2O 1,00gram

Agar 12,00gram

Isolat yang sudah tumbuh pada media padat ini kemudian dapat

dipergunakan selain untuk pemurnian isolat pada medium yang sama juga

digunakan untuk pewarnaan Gram diferensial. Pewarnaan Gram diferensial

bertujuan untuk melihat bakteri secara mikroskopik dengan bantuanmikroskop

untuk membedakan antara bakteri Gram positif dengan bakteri Gram negatif.

Karakterisasidaribakteri yang telahdidapatkan, dilakukan setelahmendapatkan

hasildaripewarnaanGram diferensialtersebut.

IV.HASILDANPEMBAHASAN

4.1. IsolasiBakteriThiobacillusferrooxidans

MediayangdigunakandalamisolasiiniadalahmediacairdariLeathenet

al. (1956), karena media ini merupakan media yang paling cocok untuk

menumbuhkanThiobacillus ferrooxidans.Hal ini terjadi karena kandunganbesi

ferro pada media ini tidak terlalu tinggi (1 g per liter). Keadaan inilah diduga

menyebabkan isolatisolat bakteri lebih mampu menyesuaikan diri pada media

tumbuhtersebut.MediaLeathenetal.(1956)inidigunakankarena lebihmudah

menekan terjadinya oksidasi besi secara kimia karena makin tinggi kandungan

besiferronya,makakemungkinanterjadinyaoksidasisecarakimia juga semakin

besar(Nurseha,2000).

Isolasi dilakukan sebanyak tiga kali, dengan jenis tanah dan lokasi

pengambilan sampel tanah yang berbedabeda. Pada isolasi yang pertama, dari

berbagai sumber isolasi yang digunakan diperoleh empat sumber yang berhasil

diisolasi untuk bakteri Thiobacillus ferrooxidans.Sampel tanah yang digunakan

pada isolasi ini berasal dari empat tempat, yaitu Desa Selat Baru, Kecamatan

Karau Kuala Danau Betung, Desa Petuk Bukit, Kecamatan Bukit Batu,

PalangkarayaAnjirSampit,DesaBuntoi,KecamatanKahayanHilir,Kabupaten

PulangPisaudanAnjir PulangPisau,perbatasanGohongPulangPisau. Semua

sampel tersebut berasal dari Kalimantan. Sampel tanah digunakan setelahmasa

penyimpananyangcukuplama,yaitusekitarempattahun.

HasilisolasidapatdilihatpadaTabel4.

Tabel4.HasilIsolasiSampelTanahdiDaerahBukitPetuk,Palangkaraya

KodeBahanIsolasi pH JenisTanahLokasi Hasil

SB23 4,5 Mineral SelatBaru

BTGB3631 SulfatMasam DanauBetung

BTGB3635 SulfatMasam DanauBetung +

DNTV3731 SulfatMasam DanauTakapan

DNLT3784 SulfatMasam DanauLentang

ASU4744 4,0 Mineral AnjirSampit

ASS4788 4,0 Mineral AnjirSampit

MDB5794 5,5 Gambut MentarengII

MDB5809 5,5 Gambut MentarengII

MDT5825 5,5 Gambut MentarengII +

MDT5829 5,5 Gambut MentarengII

APPT5642 3,0 Mineral AnjirPulangPisau

APPT5660 3,0 Mineral AnjirPulangPisau

APPB5666 3,0 Mineral AnjirPulangPisau +

APPB5668 3,0 Mineral AnjirPulangPisau +

Keterangan:+: terjadiperubahanwarnamenjadikuningkecoklatan

:warnatidakberubah

Tabel4menunjukkanbahwadari limabelassampelhanyaempatsampel

yangberhasilmengalamiperubahanwarna,yangmengindikasikanadanyabakteri

Thiobacillus ferrooxidans dalam kandungan tanah tersebut. Keempat tanah

tersebutterdiridariduajenistanahmineral,satutanahasamsulfat,dansatutanah

gambut,dengankisaranpH3,05,5.Perubahanwarnatersebutterjadisetelahmasa

inkubasiselamalebihdaritigabulan,sehinggauntukkeempatisolattersebuttidak

dilanjutkankeprosesselanjutnyakarenawaktupertumbuhanyangterlalulama.

Pada isolasi yang kedua, diambil dari sampel tanah sebanyak dua puluh

delapansampelyangberasaldarisekitarGunungSanggabuana,JawaBaratserta

limasampeltanahdaridaerahPalelawan,KepulauanRiau(Tabel5).

Tabel5.HasilIsolasiSampelTanahSekitarGunungSanggabuanadanPalelawan,

Riau

KodeBahanIsolasi pH JenisTanahLokasi Hasil

PGSB5 4,05,0Mineral GunungSanggabuana

PGBB6 4,05,0 Mineral GunungSanggabuana

PGSU8 4,05,0MineralGunungSanggabuana

PGSS84,05,0Mineral GunungSanggabuana

PGSS94,05,0 Mineral GunungSanggabuana



PGSS13 4,05,0 Mineral GunungSanggabuana

PGSU174,05,0Mineral GunungSanggabuana


PGST244,05,0Mineral GunungSanggabuana



PGST29 4,05,0Mineral GunungSanggabuana

TGS304,05,0 Mineral GunungSanggabuana


TGS33 4,05,0 Mineral GunungSanggabuana

TGS42 4,05,0Mineral GunungSanggabuana






T1R2 Mineral Palelawan,Riau

T4R1 Mineral Palelawan,Riau

RAPPG03 Mineral Palelawan,Riau



Keterangan: :warnatidakberubah

Tabel5menunjukkanbahwadarisemuasampelyangdiisolasi, tidakada

sampel yang menunjukkan hasil positif, sehingga untuk semua sampel tersebut

tidak dapat dilanjutkan ke proses berikutnya. Hal tersebut terjadi karena jenis

tanah yang digunakan pada isolasi ini kemungkinan miskin akan unsur sulfur

dan/ataupirit,sebagaisumberenergiThiobacillus,sehinggatidakadasatusampel

pun yang menunjukkan hasil positif. Masa penyimpanan sampel yang terlalu

lama, sekitar satu tahun, juga mempengaruhi hasil dari isolasi tersebut. Tanah

yang berasal dariGunungSanggabuanamemiliki kadarCorganik 4,9%9,27%,

kandungan unsur kalium (K) 0,100,97 meq/100g tanah, dan pH 4,05,0,

sedangkantanahpadadaerahPalelawan,Riauberupatanahtanahmineral.

Pada isolasi yang ketiga, dari berbagai sumber isolasi yang digunakan,

didapatkan sepuluh sampel yang berhasil diisolasi untuk bakteri Thiobacillus

ferrooxidans, dengan kecepatan tumbuh yang berbedabeda. Hal ini diketahui

denganmengamatiperubahanwarnamediacair,dimanaterjadiperubahanwarna

pada mediamedia yang menunjukkan hasil positif, sedangkan sampel yang

menunjukkanhasil yangnegatif tidakmengalamiperubahanwarnaatauberubah

warnanamuntidakkeruh.

Sampel yang digunakan pada isolasi ketiga ini berasal dari Kawah

Sikidang dan Kawah Sileri, Dieng, Wonosobo, yang kaya akan unsur sulfur,

sehingga isolasi yangdikerjakanbanyak yangmenunjukkan hasilpositif.Waktu

penyimpanan sampel tanah yang digunakan pun tidak lama, sekitar dua bulan,

sehinggajenistanahyangdigunakanmasihtergolongsegar.

HasilyangdidapatkandapatdilihatdiTabel6.

Tabel 6.Hasil Isolasi SampelTanahSekitarKawahSikidang danKawahSileri

Dieng

KodeBahan pH JenisTanahLokasi Hasil WaktuTumbuh

Isolasi (hari)

SI6706(P) 2,5 Mineral KawahSikidang + 4

SI6636(C) 2,5 Mineral KawahSikidang+ 4

SI6640(C) 2,5 Mineral KawahSikidang + 4

WS6571(P) 2,5 Mineral KawahSileri + 4

WS6598(C) 2,5 Mineral KawahSileri + 4

SI6644(C) `2,5 Mineral KawahSikidang + 7

SI6645(C) 2,5 Mineral KawahSikidang + 7

SI6663(P) 2,5 Mineral KawahSikidang + >7



SI6639(C) 2,5 Mineral KawahSikidang

SI6675(P) 2,5 Mineral KawahSikidang

WS6574(P) 2,5 Mineral KawahSileri




WS6600(C) 2,5 Mineral KawahSileri



Keterangan:+: terjadiperubahanwarna

: tidakterjadiperubahanwarna

P: padat/tanahsekitarkawah/tanahsemburangasbumi

C:cair/airbelerang

Dari Tabel 6 didapatkan bahwa dari 19 sampel yang diisolasi, terdapat

sepuluh sampel yang menunjukkan hasil yang positif, yaitu terjadi perubahan

warna pada media menjadi warna kuning kecoklatan (warna karat). Hal ini

disebabkan terbentuknya besi ferri (Fe3+) karena dioksidasinya besi ferro (Fe2+)

oleh bakteri pengoksidasi besi (Untung, 1999 Sugio et al., 1994 Erskini dan

Budiyanto, 1994 Brock and Michael, 1991). Pada sampel yang lain tidak

menunjukkanperubahanwarnaatauberubahwarnanamuntidakberwarnakuning

kecoklatan.Perubahan warnatersebutdapatdilihatpadaGambar1.

Gambar1.PerubahanWarna padaMedia saat Isolasi (kiri tidak tumbuh kanan

tumbuh).

Isolatisolat yang tumbuh tersebut kemudian dimurnikan kembali pada

media yang sama selama tigaminggu.Berdasarkan hasil pemurnian didapatkan

bahwa dari sepuluh sampel yang dimurnikan terdapat delapan sampel yang

berhasil tumbuh (WS6598C,SI6706P,SI6636C,SI6640C,SI6644C,SI

6645C,SI6671P,SI6663C),sedangkanduasampellainnyatidaktumbuh(SI

6668P,WS6571P).

Hasil penelitian menunjukkan bahwa dari seluruh sampel tanah yang

diisolasi,sampelyangmenunjukkanhasilpositifdidapatkandarikawasanKawah

SikidangdanKawahSileriDieng,dimanatanahnyakayaakansulfur,dansampel

yang digunakan relatif segar sehingga memungkinkan bakteri untuk tumbuh.

Sampel tanah lain yang berasal dari kawasan Gunung Sanggabuana, Palelawan

Kepulauan Riau, dan Bukit Petuk Palangkaraya tidak menunjukkan hasil yang

positif,haliniterjadikarenatanahpadadaerahtersebutkemungkinanmiskinakan

unsur sulfur dan/atau pirit sebagai sumber energi bakteri, selain itu waktu

penyimpanansampel yangrelatif lamamenyebabkanbakteri yangdiisolasi tidak

tumbuhlagi.

B.KarakterisasiBakteriThiobacillusferrooxidans

Isolatisolat yang sudah dimurnikan kemudian ditumbuhkan pada media

padat (agar). Komposisi media padat sama dengan komposisi media cair yang

digunakan, perbedaannya adalah penambahan agar sebanyak 12 gram.

Pemindahanisolatinidilakukandengancaraisolattersebutdisebarsecaramerata

di permukaanmedia padat yang telah disiapkan. Setelah masa inkubasi selama

tigaminggu,daridelapanisolathasilpemurnian,terdapatenamisolatyangdapat

tumbuhpadamediapadat,yaituWS6598C,WS6644C,SI6671P,SI6663P,

SI6636C,SI6645C.SedangkanduaisolatyangtidaktumbuhadalahSI6640C

danSI6706P.

Isolat bakteri yang dapat tumbuh pada media cair belum tentu dapat

tumbuhpadamediapadat,dalamhalinimediaagar.Bakteriyangdiisolasiadalah

bakteriasidofipengoksidasibesidansulfuryangmerupakanobligatautotrofyang

membutuhkan senyawa anorganik untuk pertumbuhan dan perbanyakan, bukan

padasenyawaorganiksepertiagar(Nurseha,2000).

Isolatisolat yang tumbuh tersebut kemudian dipindahkan kembali ke

media padat yang sama. Pemindahan kedua ini dilakukan dengan cara

menggoreskan isolat yangtumbuhpadamediapadatpertamakeataspermukaan

media padat kedua yang telahdisiapkan. Pemindahan kemedia padat kedua ini

merupakan tahap penyeleksian terhadap koloni tunggal yang terbentuk. Setelah

masa inkubasi selama tiga minggu, dari enam isolat yang digoreskan, terdapat

lima isolat yangberhasilmembentukkoloni tunggal(WS6644C,SI6671P,SI

6663P, SI 6636C, SI 6645C), sedangkan satu isolat lagi (WS 6598C) tidak

berhasil tumbuh. Hasil pertumbuhan isolat padamedia padat dapat dilihat pada

Gambar2.

A B

Gambar2. IsolatBakteri yangDitumbuhkanpadaMediaPadat (A.Tumbuh,B.

Tidaktumbuh).

Terbentuknya koloni tunggal inimerupakantandabahwabakterimampu

hidup pada media padat tersebut dengan ciriciri membentuk koloni karat di

permukaanmedia,berlendirdanmencembungdipermukaanmedia agar. Isolat

isolat yang berhasil tumbuh di media padat tersebut kemudian dipindahkan

kembalikemediacairsemula yangbertujuanuntukmembuktikanbahwakoloni

tunggalyangterbentukadalahbakteriyangingindiisolasi.

Selain morfologi yang tampak pada gambar, karakter dari bakteri yang

telahberhasildiisolasidapatdilakukandenganberbagaicara, salah satucaranya

adalah pewarnaan diferensial, yaitu pewarnaan Gram yang dapat membedakan

bakteriGrampositifdanbakteriGramnegatif.

BakteriGrampositifberwarnaungudisebabkanolehkomplekszatwarna

kristalvioletyodiumtetapdipertahankanmeskipuntelahdiberi larutanpemucat,

sedangkanbakteriGramnegatifberwarnamerahkarena kompleks tersebut larut

sewaktu pemberian larutan pemucat dan kemudian mengambil larutan pewarna

keduayaituberwarnamerah.Haliniterjadikarenaperbedaanstrukturdindingsel

kedua kelompok bakteri. Hasil karakterisasi bakteri Thiobacillus ferrooxidans

dapatdilihatpadaTabel7.

Tabel 7. Hasil Karakterisasi Bakteri Thiobacillus ferrooxidans yang Berhasil

Diisolasi(SI6636CdanSI6671P)

Kondisi Karakterisasi

pH 3,5

Suhulingkunganpertumbuhan 3035C

PewarnaanGram Gramnegatif

Bentuksel Berbentuk batang, kecil, rantai

pendek,ujungmembulat

Sumberenergi Oksidasi Fe2+ danreduksisulfur

Kebutuhanoksigen Aerobobligat

SumberNitrogen Amonium,nitrat

Motilitas +

BerdasarkanTabel 7. hasil yangdidapatkan sesuai dengan karakter oleh

RobertsonandKuenen(2005),bahwabakteriThiobacillusferrooxidansmemiliki

ciricirihiduppadakisaranpH1,34,5,Gramnegatif,bentukbatangatautongkat.

Bakteri ini jugamenggunakanhasiloksidasidariFe2+danreduksi sulfursebagai

sumberenerginya, sertaamonium,dannitrat sebagai sumbernitrogennya, selain

itusangatmembutuhkanoksigenuntukkehidupan.

V.KESIMPULANDANSARAN

5.1. Kesimpulan

1. Thiobacillus ferrooxidans dapatdiisolasidari tanahdengan pH3,5 yang

berasaldariKawahSikidangdanKawahSileri,Dieng,Wonosobo.

2. Terdapat5isolatyangberhasilditumbuhkan,yaituWS6644C,SI6671P,

SI 6663 P, SI 6636 C, SI 6645 C dan semuanya adalah Thiobacillus

ferrooxidans.

3. Isolat Thiobacillus ferrooxidans mempunyai kemampuan untuk

mengoksidasibesidansulfur.

5.2. Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan melakukan uji coba

desulfurisasibatubaramenggunakanisolatbakteriyangsudahdidapatkan.

DAFTARPUSTAKA

Boyd,C.E.1982.WaterQualityManagementforFishPondCulture.ElsevierSci.PublicationCo.Amsterdam.

Brock,D.T andM.T.Madigan.1991.Biology ofMicroorganism.PrenticeHallInternational.Inc.Englewood.NewJersey.

Dick,W.A.1992.SulfurCycledidalamEncyclopediaofMicrobiologyVolume4.AcademicPressInc.

Detz, C.M and G. Barvinchak. 1980. Microbial Desulfurization of Coal.www.freepatentsonline.com[diakses21Juli2008].

ECD.1974.OxygenLeachingSystemShowsCommercialPromiseforRemovingSulfurfromCoal.www.product.biblio.jsp.htm[diakses3Juli2008].

ErskinidanBudiyanto.1994.PenelitianleachingmikrobamineralsulfidadaerahSangkaropiSulawesiTenggara.MajalahBPPT.LVII:119.

Hadioetomo, R.S. 1990. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. PT Gramedia.Jakarta.

Handayani, S. 1997. Application of biooxidation technology in mineralprocessing.Indon.Min.J. 2(2):16.

Holt, J.G, N.R. Krieg, P.H.A Sneat, J.T. Staley, and S.T. Williams. 1994.BergeysManualofDeterminativeBacteriology, ninth edition.WilliamsandWilkins.AWaverlyCompany.Maryland.

Ingledew, W.J. 1990. Acidophiles. In Edward, C (Ed). EnvironmentalBiotechnology. Microbiology of Extreme Environments. Mc GrawHill.NewYorkp:3353.

Isa, I. 2007. Bioleaching Logam Berat Timbal dari Sedimen Tercemar olehPseudomonasfluorescens,Thiobacillusferrooxidans,EscherichiacolidanBacillussp(SuatuPendekatanEksperimentalLaboratorik).Tesis,ProgramPascaSarjana,UNAIR.Surabaya.

Karliansyah, M.R. 2001. Aspek Lingkungan dalam AMDAL BidangPertambangan.PusatPengembangandanPenerapanAMDALBAPEDAL.Jakarta.

Koizumi, J. 1984. Genetically Engineered Microorganisms Exploitation forBiocleaningofCoal:ACountermeasuretoAcidRain.InMurooka,YandT. Imanaka (Eds). 1994. Recombinant Microbes for Industrial andAgricultural Applications. www.googlebooksearch.htm [diakses 20 Mei2008].

Leathen,W.W,N.A.Kinsel, and S.A.Braley.1956.Ferrobacillus ferrooxidans:achemosyntheticautotrophicbacterium.J.Bacteriol.,72,700704.

Lennon,D.R.1984.PneumaticConveyingofPulverizedSolventRefinedCoal.www.freepatentsonline.com[diakses3Juli2008].

Levican, G, P. Bruscella, M. Guacunano, C. Inostroza, V. Bonnefoy, D.S.Holmes, and E. Jedlicki. 2000. Characterization of The petI and resOperons of Acidithiobacillus ferrooxidans. www.articlerender.fcgi.htm[diakses20Mei2008].

McKane,LandJ.Kandel.1996.MicrobiologyEssentialsandApplications.McGrawHillInc.NewYork.

Meyers,R.A,L.J.van Nice,andM.J.Santy.1976.MeyersProcessPlantDesign,Economics and Energy Balance. www.google/1976cgl.confR.V.htm[diakses3Juli2008].

Nuella, I. 2005. Effect of Sulfur Concentration and pH on Desulfurization ofIndonesian Subbituminous Coals Using Thiobacillus ferrooxidans.www.ITB/databaseabstraksi/Lihatdetailabstraksi.htm [diakses 2September2008].

Nurseha,2000.IsolasidanUjiAktivitasBakteriAsidofilikPengoksidasiBesidanSulfur dari Ekosistem Air Hitam. Tesis, Program Pasca Sarjana, IPB.Bogor.

Raharjo, I.B. 2006. Mengenal Batubara. www.beritaberitaiptek20060209MengenalBatubara(1).htm[diakses20Mei2008].

Rheinheimer, G. 1991. Aquatic Microbiology, fourth edition. John Wiley andSons.London.

Robertson, L.A and J.G. Kuenen, 2005. Thiobacillus: Description andSignificance. http://microbewiki.kenyon.edu./index.php/thiobacillus[diakses20Mei2008].

Santosa, D.A, K.Murtilaksono, F.S.Beni, Sulastri, Samsurizal, S.Shahab,P.Giyono, Endarwati, Hartati, D.E.Saputra, E.N.Hidayah, Jajat, Samadi,dan Juma. 2007. Sumberdaya Hayati Kawasan Sanggabuana: Potensi,Transaksi Bioprospeksi, Bank Gen. Indonesian Center for BiodiversityandBiotechnology (ICBB).Bogor.

Schegel,H.G.1994.MikrobiologiUmum.(terjemahan).GajahMadaUniversityPress.688pp.

Schippers, A, P.G. Jozsa and W. Sand. 1996. Sulfur chemistry in bacterialleachingofpyrite.Appl.Environ.Microbiol. 62(9):34243431.

Stambaugh,E.P, J.F. Miller, S.S. Tam, S.P. Chauhan, H.F. Feldmann, H.E.Carlton, J.F. Foster, N. Nack, and J.H. Oxley. 1977.www.google/1977ieee.conf.124S.htm [diakses3Juli2008].

Sugio, T, S. Uemura, I. Makino, K. Iwahori, T. Tano and R.C. Blake. 1994.Sensitivity of ironoxidizing bacteria, Thiobacillus ferrooxidans andLeptospirillumferrooxidanstobisulfite ion.Appl.Environ.Microbiol.60(2):722725.

Untung, S.R. 1999. Isolating Thiobacillus ferrooxidans from the Cikotok GoldMineforleachingpurposes.IndonesianMiningJournal.5:5456.

Wikipedia. 2006. Flue Gas Desulfurization. www.wikipedia/fluegasdesulfurization.htm[diakses21Juli2008].

Wikipedia.2008.Coal. www.en.wikipedia.org/wiki/coal[diakses20Mei2008].

Wood,D.andD.E.Rawlings. 1989.BacterialLeaching andBiomining In J. L.Marx(ed).ARevolutioninBiotechnology.Cambridge,ISCU.NewYork.

Worldcoal.2004.SumberDayaBatubara:TinjauanLengkapMengenaiBatubara.www.worldcoal.org.htm[diakses20Mei2008].

Yusuf, D. 2005. Batubara, Energi Alternatif Pengganti BBM.http://www.islamuda.com Rubrik.htm[diakses20Mei2008].

A08bik

Documents

Transcript of A08bik