LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

Diajukan untuk melengkapi tugas mata kuliah mikrobiologi dasar

Dosen pengampu: Ranti An Nisaa, S.Pd.

OLEH: NIM :

Andhika DwiCahya 1001145010

Maratun Solehah 1001145056

Medika Dara Rizki 1001145058

Pitria Nelmi Jesicca 1001145077

Putri Nur Wulan 1001145080

Biologi 4B

Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan

Universitas Muhammadiyah Prof. Dr. Hamka

2011/2012

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

PERCOBAAN I

A. Judul Praktikum

Pembiakan mikroba tanah pada media apel dan kentang.

B. Tujuan Praktikum

Untuk mengetahui dan mengamati pertumbuhan mikroorganisme pada

media apel dan kentang dari berbagai karakteristik tanah.

C. Dasar Teori

Dalam bidang mikrobiologi kita mempelajari mengenai bakteri atau

mikroorganisme, baik bentuknya, susunannya, dan lain-lain. Oleh karena

itu untuk dapat melihat dengan jelas penampakan mikroba maka perlu

diadakan piaraan atau biakan mikroorganisme.

Untuk mendapatkan piaraan murni (pure culture) atau satu spesies saja

dalam satu media maka kita dapat memperoleh dari biakan campuran

(mixed culture). Kemudian akan kita tanam atau kultur dalam media yang

steril. Dengan demikian akan tumbuh bermacam-macam koloni yang

masing-masing mempunyai sifat-sifat yang khas.

D. Alat dan Bahan

Alat :

1. Alumunium foil

2. Pisau

3. Kapas steril

4. Pemanas/bunchen/kompor

5. Baki/wadah

6. Kertas label

7. Spatula

8. Kain bersih

Bahan :

1. 4 macam tanah (sawah, lapang, sampah, dan pasir)

2. Apel dan kentang (masing-masing 4 buah)

3. Mama lemon/desinfektan dan air

E. Cara kerja

1. Apel dan kentang dicuci bersih dengan air, kemudian dicuci lagi

dengan Mama lemon/desinfektan lalu keringkan.

2. Panaskan pisau dengan pembakar Bunchen sa,pai memijar/merah lalu

biarkan sampai dingin kemudian dipakai untuk melubangi tepi buah

apel dan kentang kira-kira sedalam 3 cm.

3. Setiap selesai melubangi 1 buah, pisau dicuci bersih dan dipanaskan

(seperti cara kerja nomor 2).

4. Setelah semua apel dan kentang dilubangi, masukkan masing-masing

jenis tanah ke dalamnya dengan menggunakan spatula.

Untuk setiap tanah pasir : 1 kentang dan 1 apel

Untuk setiap tanah sampah : 1 kentang dan 1 apel

Untuk setiap tanah lapang : 1 kentang dan 1 apel

Untuk setiap tanah sawah : 1 kentang dan 1 apel

5. Setelah diberi 4 jenis tanah pada masing-masing buah, lubang ditutup

dengan kapas steril. Setelah itu buah dibungkus dengan alumunium

foil sampai rapat dan diberi label untuk menandakan jenis buah dan

jenis tanah.

6. Setelah selesai letakkan pada baki/wadah yang disediakan.

7. Lakukan pengamatan selama 1 minggu.

PERCOBAAN II

A. Judul Praktikum

Sterilisasi alat atau medium dengan autoklaf (uap air panas bertekanan).

B. Tujuan Praktikum

Untuk membebaskan semua bentuk kehidupan khususnya mikroba pada

alat dan medium.

C. Dasar Teori

Bahan atau peralatan yang dipergunakan di bidang mikrobiologi harus

dalam keadaan steril, artinya pada bahan atau peralatan tersebut ridak

terdapat mikroba yang tidak diharapkan kehadirannya, baik yang akan

mengganggu media maupun proses yang sedang dikerjakan. Steril akan

didapatkan melalui proses sterilisasi.

D. Alat dan Bahan

1. 8 cawan petri

2. 8 tabung reaksi

3. 2 gelas kimia

4. 2 labu erlenmeyer

5. Pengaduk kaca

6. Kain kassa

7. Kapas steril

8. Kertas sampul kopi

9. Kertas/label

10. Karet gelang

11. Tali bangunan

12. Kain lap bersih

13. Lemari es

14. Autoklaf

15. Air

16. Sunlight/sabun pembersih

E. Cara Kerja

1. Semua alat dicuci bersih dengan menggunakan sabun pembersih

kemudian dilap dan dikeringkan.

2. Cara sterilisasi tabung reaski dan labu Erlenmeyer :

a. Kapas dibungkus kain kassa membentuk bulatan

b. Bungkusan kapas dimasukkan ke mulut tabung reaksi dan labu

Erlenmeyer

c. Bungkus alat-alat dengan kertas kopi dan ikat dengan karet

gelang/tali bangunan

d. Masukkan ke dalam autoklaf.

3. Cara sterilisasi cawan petri dan gelas kimia :

a. Kapas dimasukkan ke dalam cawan petri dengan gelas kimia

hingga memenuhi ruang di dalamnya

b. Tutup rapat, bungkus dengan kertas kopi lalu ikat

c. Masukkan ke dalam autoklaf.

4. Cara mengunakkan autoklaf

a. Alat-alat dimasukkan ke autoklaf

b. Ditutup rapat, karena pada pipa uap dibuka, suhu akan naik

1210C (dipertahankan 15-20 menit)

c. Karena uap ditutup, maka suhu mulai turun dan manometer 0

autoklaf dibuka.

5. Setelah disterilkan dengan autoklaf, alat-alat dibiarkan dingin dahulu.

6. Setelah dingin, masukkan ke dalam lemari es dan dibuka bungkusnya

apabila akan digunakan dalam pembuatan media.

PERCOBAAN III

A. Judul Praktikum

Pembuatan media semi sintesis : PDA (Potato Dextrose Agar)

B. Tujuan Praktikum

Mengenal jenis dan cara pembuatan media

C. Dasar Teori

Media adalah bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makanan untuk

menumbuhkan mikroorganisme. Selain itu kita dapat mengetahui sifat-

sifat mikroorganisme. Ada beberapa bentuk media :

1. Berdasarkan fase (sifat fisik dari media)

a. Media padat adalah media yang unsur utamanya agar, contoh : NA

(Nutrient Agar)

b. Media 12

padat adalah media dengan kandungan agar ≤ 0,5%

c. Media cair adalah media yang tidak mengandung agar, contoh :

Nutrient Broth (kaldu)

2. Berdasarkan komposisinya (susunan)

a. Media sintesis adalah media yang kandungan zat kimianya

diketahui, contoh : GA (Glucose Agar)

b. Media semi sintesis adalah media yang sebagian dari komposisi

bahan kimianya diketahui, contoh : PDA (Potato Dextrose Agar)

dan TA (Taoge Agar)

c. Media non-sintesis adalah media yang komposisi kimianya tidak

diketahui, contoh : media apel.

D. Alat dan Bahan

Alat :

1. Labu Erlenmeyer

2. Gelas kimia

3. Tabung reaksi

4. Cawan petri

5. Pengaduk kaca/sendok

6. Timbangan

7. 2 baskom sedang

8. Kain saring

9. Autoklaf

10. Pisau

11. Panci

12. Kompor gas

Bahan :

1. 150 gr kentang

2. 10 gr sukrosa/gula pasir

3. 20-22 gr agar-agar warna bubuk merah

4. 1000 ml aqudest

E. Cara Kerja

1. Kentang dikupas, dicuci kemudian potong dadu

2. Potongan kentang direbus selama 12

jam dengan 500 ml aquadest

3. Setelah mendidih, disaring dengan kain penyaring

4. Agar-agar dimasukkan ke dalam 500 ml aquadest sambil diaduk

hingga homogen

5. Campurkan agar-agar dengan ekstrak kentang lalu didihkan kembali

6. Setelah mendidih campurkan sukrosa/gula pasir ke dalam larutan agar

+ kentang, lalu diaduk sampai homogen

7. Disaring dengan kain penyaring dan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer

atau gelas kimia. Tutup kembali dengan buntalan kapas

8. Bedakan dalam 3 medium :

a. Agar tegak

b. Agar miring

c. Agar cawan petri

9. Media PDA siap digunakan

PERCOBAAN IV

A. Judul Praktikum

Membuat piaraan mikroba

B. Tujuan Praktikum

Dapat melihat sifat pertumbuhan dan bentuk koloni mikroba pada berbagai

macam media.

C. Alat dan Bahan

1. Tabung reaksi steril

2. Cawan petri steril

3. Pemanas Bunchen

4. Jarum ose lurus dan bengkok

5. Kertas label

6. Media PDA

7. Biakan bakteri

D. Cara Kerja

1. Buka buntalan kapas dari mulut tabung reaksi dan cawan petri,

usahakan jangan terlalu lebar dan buntalan kapas jangan jauh-jauh.

2. Tuangkan media PDA ke dalam cawan petri steril dan tabung reaksi

steril dengan cara didekatkan ke pemanas Bunchen, dan langsung

ditutup kembali dengan penutupnya untuk cawan petri. Sedangkan

untuk tabung reaksi ditutup dengan kapas kembali.

3. Lalu biarkan samapi dingin. Untuk tabung reaksi dibuat dalam 2

wadah yaitu media agar miring dan media agar tegak.

4. Setelah media dingin/mengeras, tabung reaksi dan cawan petri

diinokulasi dengan biakan mikroorganisme tanah yang terdapat pada

apel dan kentang (Praktikum I), caranya :

a. Untuk media agar miring :

Siapkan biakan dan pegang jarum ose bengkok di tangan kanan

dan media di tangan kiri

Panaskan jarum ose, lalu dinginkan sebentar, kemudian

sentuhan ke biakan

Tarik jarum ose ke atas permukaan agar mualai dari bagian

dasar dengan gerak zigzag dan jangan sampai merusak agar

Tutup kemudian beri label (biakan dari buah apa dan tanah apa)

Ulangi untuk media agar miring lainnya dengan cara yang

sama sambil sesekali jarum ose dipanaskan kembali

b. Untuk media agar tegak :

Siapkan biakan dan pegang jarum ose lurus di tangan kanan

dan media di tangan kiri

Panaskan jarum ose, dinginkan sebentar, sentuhkan ke biakan

Tusuk jarum ose ke bagian tengah media sampai mendekati

dasarnya

Tarik kembali perlahan-lahan, tutup, beri label

c. Untuk media agar cawan petri/media datar

Siapkan biakan dan pegang jarum ose lurus di tangan kanan

dan media di tangan kiri

Panaskan jarum ose, dinginkan sebentar, sentuhkan ke biakan

Goreskan jarum ose pada permukaan agar secara zigzag

Tutup, beri label

5. Setelah beberapa hari, amati pertumbuhan koloni pada media-media

tersebut.

PERCOBAAN V

A. Judul Paktikum

Identifikasi mikroorganisme tanah

B. Tujuan Praktikum

Mengetahui jenis-jenis mikroorganisme yang tumbuh pada berbagai tanah

C. Alat dan Bahan

Cawan petri dari tabung reaksi yang sudah diinokulasikan, kaca

pembesar/lup

D. Cara Kerja

1. Lakukan pengamatan pada media agar tegak, agar miring, dan cawan

pertri dengan kaca pembesar/lup

2. Catat jenis mikroorganisme yang terdapat pada media-media tersebut

pada media-media tersebut pada tabel yang sudah disediakan

3. Catat pula tekstur (lender, serabut, atau titik) dan warna

mikroorganisme yang teramati.

TABEL HASIL PENGAMATAN

SUMBER

BIAKAN

MEDIA PDA

Tabung Reakasi Cawan Petri

Tegak Miring

Apel Kentang Apel Kentang Apel Kentang

Tanah Sawah

Tanah Lapang

Tanah Pasir

Tanah Sampah

PERTANYAAN :

1. Medium pertumbuhan mikroba menggunakan apel dan kentang? Jelaskan

kandungan nutrisi keduanya!

2. Apa fungsi gula pasir pada media PDA?

3. Alat mana yang lebih baik untuk sterilisasi? Autoklaf atau oven? Jelaskan !

4. Mengapa jarum ose selalu dipanaskan setelah diinokulasi ke media?

5. Dari hasil pengamatan, sumber biakan manakah yang paling banyak

mengandung mikroba? Jelaskan !