6 BAB III IMUNOLOGI.doc

SUB LABORATORIUM IMUNOLOGI

Laboratorium imunologi merupakan sub laboratorium yang ada di laboratorium Patologi Klinik RSUP Sanglah. Laboratorium imunologi memiliki 3 dasar langkah kerja yaitu:

a. Pra-analitik

Pra-analitik adalah langkah awal yang dilakukan sebelum melakukan pemeriksaan. Pra-analitik sangat berperan besar apabila pada proses pra-analitik dikatakan gagal maka untuk ketahap berikutnya akan lebih sulit dan juga dapat berpengaruh dengan hasil. b. Analitik

Tahapan analitik meliputi prosedur pemeriksaan sampai diperoleh hasil pemeriksaan. Pada proses ini di laboratorium imunologi Sanglah, pemeriksaan dilakukan dengan menggunakan alat dan ada juga yang masih menggunakan cassete atau manual.c. Pasca analitik

Pasca analitik yaitu tahapan akhir setelah semua pemeriksaan selesai dilakukan sampai pengesahan terhadap hasil pemeriksaan tersebut kemudian hasil akan dicrosscheck oleh dokter dengan melihat history dari pasien.A. Langkah-langkah setelah sampel diterima di Sub Laboratorium Imunologi

1. Bahan diterima dari petugas sampling.

2. Bahan dievaluasi dan dicocokkan dengan Bukti Tindakan Laboratorium.

3. Bahan diberi nomor urutan dan dilakukan sentrifugasi untuk memperoleh serum.

4. Persiapan alat dan bahan sesuai jenis pemeriksaan.

5. Bahan dikerjakan sesuai dengan pemeriksaan pada Bukti Tindakan Laboratorium (BTL).

6. Scan barcode.

7. Input hasil dan pencetakan hasil pemeriksaan.

8. Validasi oleh analis kesehatan dan verifikasi hasil pemeriksaan oleh dokter jaga laboratorium.

9. Hasil dikeluarkan untuk pasien dan siap dipertanggung jawabkan.

B. Pemeriksaan yang dikerjakan di Sub Laboratorium Imunologi

Pemeriksaan yang dikerjakan di Sub Laboratorium Imunologi terdiri dari pemeriksaan manual dan pemeriksaan secara otomatis.A. Pemeriksaan Otomatis

Alat yang digunakan :

1. Alat VIDAS 1Alat ini digunakan untuk pemeriksaan sebagai berikut :

a. Tiroid : T3, T4.

b. Tumor marker : TPSA, CEA (s), AFP.

c. Torc : Toxo IgG, Toxo IgM

d. Hepatitis : HbsAg, Anti-HBS.2. Alat VIDAS 2Alat ini digunakan untuk pemeriksaan sebagai berikut :

a. Tiroid : TSHsb. Reproduction fertility : Estradiol, Prolaktin, FSH, HCG, LH.

c. Tumor marker : CA 15-3, CA 19-9, CA 125.

d. Alergi : Total IgE

e. Hepatitis : HAV IgM

f. Severe bacterial infections : Procalcitonin3. Alat Cobas e 411Alat ini digunakan untuk pemeriksaan:

a. HBsAg

b. Ferritin

c. Anti HCV

d. TSHe. FT4

4. Alat Pemeriksaan CD-4 (BD FACS Count)

Alat ini dapat memeriksa CD4, CD3 dan CD8

B. Pemeriksaan Manual

Pemeriksaan terdiri dari :

1. Pemeriksaan Widal

2. Pemeriksaan ASO

3. Pemeriksaan VDRL (Veneral Disease Research Laboratory)

4. Pemeriksaan TPHA (Treponema Pallidum Hemaglutination Assay)

5. Rheumatoid Factor Test

6. IgM Salmonella Thypi (TUBEX)

7. Pemeriksaan anti HIV

8. Pemeriksaan DHF (IgG dan IgM)9. Pemeriksaaan NS1A. PEMERIKSAAN FERITIN 1. Tujuan Kegiatan a. Mahasiswa dapat melakukan pemeriksaan feritin.

b. Mahasiswa dapat mengetahui nilai feritin sampel serum pasien. 2. Metode Metode yang digunakan dalam pemeriksaan feritin adalah metode ECLIA (Electro Chemilumineschene Imunoassay).

3. PrinsipPrinsip pemeriksaan Feritin dengan metode ECLIA adalah terbentuknya suatu reaksi kimia atau suatu kompleks cahaya. Kompleks antigen antibodi berdasarkan prinsip sandwich dan kompetitif. Kompetitif dipakai untuk menganalisis substrat yang mempunyai berat molekul yang kecil. Sedangkan prinsip sandwich digunakan untuk substrat dengan berat molekul yang besar. Reaksi electrochemiluminescent terjadi pada saat label telah terikat dan misi cahaya akan dihitung melalui tabung fotomultiplier.

4. Dasar Teori Besi merupakan zat penting bagi tubuh manusia karena keberadaannya dalam banyak hemoprotein. Pada penyerapan besi, Fe3+ diubah menjadi Fe2+ oleh enzim feri reduktase dan Fe2+ di angkut dalam enterosit oleh pengangkutan besi membran apikal DMT1. Heme diangkut ke dalam eritrosit oleh pengangkutan heme yang berbeda (HT) dan heme oksidase (HO) membebaskan Fe2+ dari heme. Sebagian Fe2+ intrasel akan diubah menjadi Fe3+ dan diikat oleh suatu protein yang dikenal dengan ferritin. Ferritin mengandung sekitar 23% besi. Setiap satu kompleks ferritin bisa menyimpan kira kira 3000 - 4500 ion Fe3+ di dalamnya. Ferritin bisa ditemukan atau disimpan di Liver, Limpa, Otot Skelet dan Sumsum Tulang. Dalam keadaan normal, hanya sedikit ferritin yang terdapat dalam plasma manusia. Jumlah ferritin dalam plasma menggambarkan jumlah besi yang tersimpan di dalam tubuh kita. (Shvoong, 2010)Ferritin adalah protein berbentuk glubular dan mempunyai dua lapisan dengan diameter luarnya berukuran 12 nm dan diameter dalamnya berukuran 8 nm. Besi tersimpan di dalam protein ferritin tersebut tepatnya di tengah. Bila dilihat dari stuktur kristalnya, satu monomer ferritin mempunyai lima helix penyusun yaitu blue helix, orange helix, green helix, yellow helix dan red helix dimana ion Fe berada di tengah kelima helix tersebut. (Shvoong, 2010)Besi bebas bersifat toxic untuk sel, karena besi bebas merupakan katalisis pembentukan radikal bebas dari Reactive Oxygen Species (ROS) melalui reaksi Fenton. Untuk itu, sel membentuk suatu mekanisme perlindungan diri yaitu dengan cara membuat ikatan besi dengan ferritin. Jadi ferritin merupakan Protein utama penyimpan besi di dalam sel. (Shvoong, 2010)Asupan zat besi yang masuk ke dalam tubuh kita kira-kira 10 20 mg setiap harinya, tapi ternyata hanya 1 2 mg atau 10% saja yang di absorbsi oleh tubuh. 70% dari zat besi yang di absorbsi tadi di metabolisme oleh tubuh dengan proses eritropoesis menjadi Hemoglobin, 10 - 20% di simpan dalam bentuk ferritin dan sisanya 5 15% di gunakan oleh tubuh untuk proses lain. Besi Fe3+ yang disimpan di dalam ferritin bisa saja di lepaskan kembali bila ternyata tubuh membutuhkannya. (Shvoong, 2010)Kadar ferritin normal 30-300 ng/mL untuk pria dan 15-200 ng/mL untuk wanita. Kadar ferritin yang terlalu tinggi dapat menyebabkan terjadinya hemokromatosis sedangkan kadar ferritin yang terlalu rendah dapat menyebabkan terjadinya anemia defisiensi besi. (Shvoong, 2010)Anemia defisiensi besi atau yang dikenal juga dengan Anemia Sideropenik biasanya disebabkan karena asupan zat besi yang kurang, infeksi parasit, menoragi, metroragi, menstruasi, premenopause, kehamilan, ulkus peptikum, penggunaan obat-obatan dalam jang waktu yang lama dan lain lain. Ketika tubuh kehilangan zat besi melebihi asupannya maka tubuh akan mulai membongkar dan memakai besi yang tersimpan dalam ferritin di liver, limpa, otot dan sumsum tulang, yang merupakan cadangan dalam tubuh. Kadar ferritin pun berkurang secara progresif. Cadangan besi yang telah berkurang tidak dapat memenuhi kebutuhan untuk pembentukan eritrosit, sehingga eritrosit yang dihasilkan jumlahnya menjadi lebih sedikit. Kadar eritrosit menurun mengakibatkan hemoglobin pun ikut menurun. Mulailah terjadi anemia. Tubuh pun berusaha melakukan kompensasi, dimana sumsum tulang berusaha untuk menggantikan kekurangan besi dengan mempercepat pembelahan sel dan menghasilkan eriitrosit dengan ukuran yang sangat kecil (Mikrositik) yang khas untuk anemia defisiensi besi. (Shvoong, 2010)Pemeriksaan serum Ferritin merupakan pemeriksaan yang paling spesifik untuk mendiagnosa Anemia defisiensi besi. Kadar serum ferritin yang sangat rendah menunjukkan Anemia defisiensi besi. (Shvoong, 2010)5. Alat dan Bahan a. Alat

1. Cobas e 411

2. Sample cup

3. Gunting

4. Mikropipet

5. Yellow tip

b. Bahan

1. Reagen Cobas

2. Serum

6. Cara Kerjaa. Menghidupkan Instrumen Cobas e 411

1. Reagen dikeluarkan dari lemari pendingin, dibiarkan mencapai suhu ruang.

2. Cairan pencuci, waste dan disposable (assay cup dan assay tip) diperiksa. Jika sudah habis diganti dengan yang baru.

3. Reagen dimasukkan ke dalam reagen disk (tutup kembali segera), ditekan Reagen dan ditekan Scan reagen.

4. Kalibrator atau kontrol dimasukkan ke dalam sampel disk, ditekan System Overview, ditekan Sampel Tracking dan ditekan Sampel Scan.

5. Untuk kalibrator atau kontrol baru dilakukan BC Card Scan pada menu Calibrator Instal (untuk kalibrator) dan QC lalu Instal (untuk kontol).

Catatan: untuk kontrol baru aktifkan kontrol terlebih dahulu.

6. Ditekan START.

b. Order Pasien Rutin pada Cobas e 411

1. Ditekan workplace, lalu ditekan test selection ion ditekan routine.

2. Dimasukkan data sampel ID, posisi sampel dan rotor disk yang digunakan.

3. Parameter yang akan dikerjakan dipilih, lalu ditekan save.

4. Order pasien diperiksa pada menu data pasien pada menu data review lalu ditekan start.

5. Untuk sampel barcode ditekan (E) (System overview), lalu sampel tracking.

6. Sampel pada tempat disk diletakkan, ditekan sampel scan dan dipilih sampel dan parameter yang akan dikerjakan.

7. Ditekan save kemudian start.

c. Order pengenceran

1. Letakkan diluent universal dalam reagen disk, lalu tekan scan reagen.

2. Sampel ID dan posisi sampel dimasukkan pada menu test selection.

3. Dipilih parameter yang akan dilakukan : pengenceran, ditekan dilution fact or dipilih pengenceran yang sesuai, ditekan save.

4. Order pasien diperiksa pada menu data review, ditekan start.

7. Hasil Kegiatan Kegiatan pemeriksaan Feritin di sub laboratorium imunologi RSUP Sanglah yang telah dilakukan oleh mahasiswa PKL yang berasal dari pasien rawat jalan atau rawat inap, yaitu:

Hari, TanggalJumlah Pasien (orang)

Senin, 23 Maret 201522

Selasa, 24 Maret 201519

Rabu, 25 Maret 201512

Kamis, 26 Maret 201520

Jumat, 27 Maret 201513

Sabtu, 28 Maret 201513



Rabu, 1 April 201514

Kamis, 2 April 201517

Jumat, 3 April 2015-

Sabtu, 4 April 201520

Total 177

Contoh hasil pemeriksaan Feritin yang dikeluarkan oleh RSUP Sanglah terlampir.8. Permasalahan Permasalahan yang ditemui ketika melakukan pemeriksaan Feritin antara lain:

a. Mahasiswa belum dapat melakukan kontrol alat karena dilakukan oleh petugas laboratorium.

b. Barcode yang tidak terbaca secara otomatis menyebabkan alat tidak dapat melakukan pemeriksaan.

9. Pembahasan dan Pemecahan Masalah Pemeriksaan ferritin tidak dapat dipisahkan dari pemeriksaan hematologi rutin agar dapat memberikan informasi diagnostik lebih baik. Jika ditemukan keadaan anemia maka perlu diperiksa apakah jenis anemianya mikrositik hipokrom atau tidak. Pada anemia mikrositik hipokrom perlu diperiksa ferritin untuk menentukan apakah anemianya disebabkan oleh defisiensi besi atau oleh penyebab lainnya seperti thalassemia, anemia penyakit kronis, dan lain-lain.Pemeriksaan ferritin dilakukan untuk mengukur konsentrasi ferritin atau cadangan besi di dalam tubuh. Sekitar 30% besi yang berada di dalam tubuh, tersimpan sebagai feritin di limpa, sumsum tulang dan hati. Pemeriksaan ini berkorelasi dan berguna pada evaluasi total body storage iron. Manfaat pemeriksaan ini adalah untuk pemantauan perkembangan defisiensi besi pada penyakit anemia, diagnosa hipokromik dan anemia mikrositik. Kadar ferritin berkolerasi dengan dan berguna pada evaluasi dari total body storage iron. Pada hemokromatosis, ferritin dan iron saturation meningkat. Kadar ferritin pada hemokromatosis bisa mencapai > 1000 ng/mL (Serum Iron/SI : > 1000 ng/mL).Pemeriksaan feritin yang dilakukan di laboratorium imunologi RSUP Sanglah menggunakan sampel serum pasien. Darah pasien yang ditampung di dalam tabung vacutainer merah disentrifugasi dengan kecepatan 3500 rpm selama 10 menit. Kriteria sampel yang digunakan adalah sampel serum yang tidak hemolisis. Persiapan terhadap serum pasien sebelum pemeriksaa adalah jika dikerjakan di alat COBAS e 411 maka sampel serum dipindahkan ke sample cup yang tutupnya sudah digunting. COBAS e 411 menggunakan metode ECLIA (Electro Chemiluminescence Immunoassay). ECLIA menggunakan teknologi tinggi yang memberi banyak keuntungan dibandingkan dengan metode lain. Pada metode ECLIA yang menggunakan kompetitif dipakai untuk menganalisis substrat yang mempunyai berat molekul yang kecil. Sedangkan prinsip sandwich digunakan untuk substrat dengan berat molekul yang besar.

Pemeriksaan dengan alat COBAS e 411, sampel serum diletakkan di tabung sampel pada alat. Yang perlu diperhatikan adalah barcode pada tabung diletakkan menghadap ke depan, sehingga alat akan mendeteksi sendiri jenis pemeriksaan apa saja yang dilakukan. Alat sendiri akan memproses sampai diperolehnya hasil pemeriksaan yang langsung terinput ke komputer.

Jumlah pemeriksaan Feritin yang pernah dikerjakan selama praktek kerja lapangan adalah sebanyak 177 sampel. Nilai rujukan yang digunakan untuk pemeriksaan feritin adalah 30-400 ng/mL. Permasalahan yang ditemukan pada pengerjaan feritin dapat diselesaikan dengan cara antara lain :

a. Mahasiswa tidak ikut dalam pengerjaan kontrol alat dimana dilakukan oleh petugas laboratorium sendiri sehingga hanya diperoleh penjelasan saja.

b. Kurangnya reagen pemeriksaan feritin menyebabkan pemeriksaan ditunda lalu sampel pasien disimpan dalam kulkas dengan suhu 2-80C dalam bentuk serum.

c. Barcode yang tidak terbaca pada alat COBAS e 411 sering menimbulkan error pada hasil pemeriksaan sehingga dilakukan pemeriksaan dengan langkah memasukkan data pasien secara manual pada alat.B. PEMERIKSAAN TIROID

1. Tujuan Kegiatan

1. Untuk dapat melakukan pemeriksaan kelainan tiroid pada sampel serum pasien.

2. Untuk dapat mendiagnosis dan mengetahui kadar tiroid yang ada pada sampel serum pasien.

b. Metode

Metode yang digunakan dalam pemeriksaan tumor marker yaitu ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay).

c. Prinsip

Prinsip pemeriksaan ini adalah kombinasi dari metode imunoenzim dan imunocapture dengan hasil akhir dibaca menggunakan fluoresensi (ELFA). Sampel dimasukkan ke dalam alat, kemudian alat akan membaca secara otomatis dan hasilnya dicetak oleh printer secara otomatis. Hasil dari pemeriksaan adalah nilai indeks yang didapat secara otomatis hasil dari kalkulasi alat terhadap standar yang sudah disimpan dalam dalam memori alat.d. Dasar Teori Kelenjar tiroidadalah salah satu darikelenjarendokrinterbesar pada tubuh manusia. Kelenjar ini dapat ditemui di bagian depan leher, sedikit di bawahlaring. Kelenjar ini berfungsi untuk mengatur kecepatan tubuh membakar energi, membuatprotein, dan mengatur sensitivitas tubuh terhadaphormonlainnya.Berikut adalah pemeriksaan laboratorium yang digunakan untuk mendiagnosa kelainan tiroid, antara lain: a. Pemeriksaan FT4 PemeriksaanFT4merupakan pemeriksaan sensitif untuk fungsi tiroid. Peningkatan konsentrasiFT4terlihat pada kondisi hipertiroid, sedangkan penurunan konsentrasi terjadi pada kondisi hipotiroid. Pemeriksaan ini merupakan indikator yang lebih baik dibandingkan dengan T4 total karena tidak dipengaruhi oleh perubahan thyroxine-binding proteins. Pemeriksaan ini bermanfaat untuk membantu diagnosa hipertiroid dan hipotiroid; klarifikasi status pasien pada kondisi seperti hipotiroid sekunder yang berkaitan dengan penyakit pituitari. (Prodia, 2012)

b. Pemeriksaan TSHThyroid stimulating hormone(TSH) adalah hormon yang dihasilkan oleh hipofisa anterior. TSH berfungsi merangsang produksi hormon tiroid seperti T4 dan T3 melalui reseptornya yang ada di permukaan sel tiroid. Sintesis dari TSH ini dipengaruhi olehthyrotropin releasing hormone(TRH) yang dihasilkan oleh hypothalamus bila didapatkan kadar hormon tiroid yang rendah di dalam darah. Bila kadar T3 dan T4 meningkat, produksi TSH akan ditekan sehingga akan terjadi penurunan kadar T3 dan T4. (Biomedika, 2012)

PemeriksaanTSHmerupakan pengukuran kadar Thyroid Stimulating Hormone (TSH) dalam darah, dan dapat digunakan untuk menilai fungsi tiroid. TSH berfungsi untuk menstimulasi sekresi hormon tiroid yang sangat penting bagi tubuh. Pemeriksaan ini bermanfaat untuk kkrining kelainan tiroid, diagnosis hipotiroidisme (primer, sekunder dan tersier) dan hipertiroidisme. (Prodia, 2012)c. Pemeriksaan T4Thyroxine (T4) di dalam aliran darah ada dalam bentuk free T4 dan yang terikat dengan protein. Protein pengikat T4 adalah TBG sebanyak 75%, albumin 10% dan prealbumin 15% dari T4 total. Sebagian kecil yaitu 0.03% dari T4 ada dalam bentuk bebas yang disebut free T4. Free T4 ini merupakan suatu uji laboratorium yang paling baik untuk mengetahui adanya disfungsi dari kelenjar tiroid. (Biomedika, 2012)d. Pemeriksaan T3Triidothyronine (T3) adalah hormon tiroid yang ada dalam darah dengan kadar yang sedikit yang mempunyai kerja yang singkat dan bersifat lebih kuat daripada tiroksin (T4). T3 disekresikan atas pengaruhthyroid stimulating hormone(TSH) yang dihasilkan oleh kelenjar hipofise danthyroidreleasing hormone(TRH) yang dihasilkan oleh hipotalamus. T3 didalam aliran darah terikat denganthyroxine binding globulin(TBG) sebanyak 38 80%, prealbumin 9 27% dan albumin 11 35%. Sisanya sebanyak 0.2 0.8% ada dalam bentuk bebas yang disebut free T3. Free T3 meningkat lebih tinggi daripada free T4 pada penyakit graves dan adenoma toxic. Free T3 dipakai untuk monitoring pasien yang menggunakan obat anti-tiroid, karena pada pengobatan tersebut, produksi T3 berkurang dan T4 dikonversi menjadi T3. Selain itu, kadar free T3 diprediksi untuk menentukan beratnya kelainan tiroid. (Biomedika, 2012)

e. Alat dan Bahan

1. Alat

1. VIDAS 1 & 22. Cobass e 4113. Mikropipet

4. Yellow tip

2. Bahan

1. Reagen Biomerieux

2. Serum

f. Cara Kerja

1. Cara Menyalakan VIDAS PC

1. Nyalakan secara berurutan :

UPS

Modul Vidas

Print dan Monitor

Komputer

2. Ditunggu beberapa menit hingga komputer selesai melakukan inisial.

3. Username dan Password dimasukkan dan diklik pada icon pada monitor tampak VIDAS PC is starting...please wait.

4. Pada monitor akan tampak Menu utama dari VIDAS PC.

2. Cara Memasukkan Sampel

1. Data pasien dimasukkan lewat komputer.

2. Parameter pemeriksaan yang diinginkan dimasukkan.

3. Parameter yang sama diletakkan pada satu section.

4. Strip dan SPR dimasukkan pada section sesuai dengan jenis dan jumlah pemerikasaan.

5. Sampel dipipet sesuai jenis pemeriksaan yaitu :

Pemeriksaan FT4: 100 L

Pemeriksaan TSH: 200 L

Pemeriksaan T4: 200 L

Pemeriksaan T3: 100 L6. Sampel diteteskan pada reagen.

7. Reagen dimasukkan ke alat VIDAS.

8. Pemeriksaan dijalankan lewat komputer dengan memilih start sesuai dengan nomor rak yang dimasukkan sampel.

9. Lamanya pemeriksaan tercantum pada alat.

3. Cara Mematikan Vidas PC

1. Pastikan tidak ada parameter yang diperiksa dan reagen strip dan SPR dalam alat.

2. Tanda X diklik pada bagian kanan atas layar kerja, muncul pertanyaan Do you want to quit this application?.

3. Tekan Yes, pada monitor tampak Windows NT desktop.

4. Klik Start pada bagian bawah kiri monitor, pilih Shutdown.

g. Hasil Kegiatan Kegiatan pemeriksaan tiroid yang dilakukan di sub laboratorium imunologi RSUP Sanglah yang telah dilakukan oleh mahasiswa PKL yang berasal dari pasien rawat jalan atau rawat inap, yaitu:

a. Pemeriksaan FT4Hari, TanggalJumlah Pasien (orang)













Total 137

b. Pemeriksaan TSHHari, TanggalJumlah Pasien (orang)













Total 102

c. Pemeriksaan TSHsHari, TanggalJumlah Pasien (orang)



Rabu, 25 Maret 2015-


Jumat, 27 Maret 2015-




Rabu, 1 April 20153




Total 28

d. Pemeriksaan T4Hari, TanggalJumlah Pasien (orang)


Selasa, 24 Maret 2015-







Rabu, 1 April 20151



Sabtu, 4 April 2015-

Total 9

e. Pemeriksaan T3Hari, TanggalJumlah Pasien (orang)







Senin, 30 Maret 2015-


Rabu, 1 April 20152

Kamis, 2 April 2015-


Sabtu, 4 April 2015-

Total 6

Contoh hasil pemeriksaan tiroid yang dikeluarkan oleh RSUP Sanglah terlampir.

h. PermasalahanPermasalahan yang dihadapi dalam pemeriksaan tumor marker antara lain :

a. Mahasiswa masih kesulitan menghafal volume sampel yang diperlukan untuk masing-masing parameter pemeriksaan karena setiap parameter memerlukan volume sampel yang berbeda. Hal ini dikarenakan kendala waktu yang singkat yang diperoleh mahasiswa pada PKL ini.b. Hasil pemeriksaan yang langsung terhubung ke komputer sering mengalami gangguan sehingga beberapa hasil pemeriksaan berstatus tertunda.i. Pembahasan dan Pemecahan MasalahEndokrinologi adalah spesialisasi medis yang berkenaan dengan studikelenjar endokrindan zat yang mereka hasilkan, dan juga diagnosis dan pengobatan gangguan sistem endokrin. Kelenjar endokrin memproduksihormonyang mengatur banyak fungsi tubuh. Endokrin adalahkelenjaryang mengatur fungsi tubuh melaluihormonyang dikeluarkan kedalam aliran darah. Sistem endokrinmeliputihipotalamus,kelenjar pituitari,tiroid, kelenjaradrenal, dangonad(ovariumdantestis). Penyakit endokrin adalah penyakit yang pada umumnya disebabkan oleh ketidakseimbangan dalam beberapa bagian dari sistem endokrin, yang terdiri dari kelenjar yang bertanggung jawab untuk menciptakan dan mengatur hormon-hormon yang diperlukan untuk fungsi-fungsi tubuh penting.

Stres, infeksi dan perubahan dalam cairan darah dan keseimbangan elektrolit dapat mempengaruhi tingkat hormon sehingga surplus (hipersekresi) atau kekurangan (hiposekresi). Penyakit endokrin juga dapat terjadi jika tubuh tidak merespon hormon sebagaimana mestinya. Selain itu, kelenjar endokrin juga rentan terhadap tumor, yang biasanya tidak terkait dengan ketidakseimbangan hormon.

Mendiagnosis penyakit endokrin bisa sulit karena biasanya melibatkan pengukuran jumlah hormon dalam aliran darah. Ini adalah tugas yang sulit. Karena itu, hormon kadang-kadang diukur secara tidak langsung. Contohnya adalah pengukuran glukosa darah, bukan insulin, untuk diabetes.Tiroid adalah kelenjar endokrin besar yang terletak di pangkal leher bagian depan, di bawah lapisan kulit dan otot. Kelenjar tiroid berbentuk kupu-kupu dengan dua sayap yang merupakan lobus tiroid kiri dan kanan di sekitar trakea.

Fungsi tunggal tiroid adalah membuat hormon tiroid (tiroksin dan triiodotironin) yang berperan meningkatkan aktivitas metabolisme pada hampir semua jaringan tubuh. Pemeriksaan tiroid di laboratorium imunologi RSUP Sanglah dilakukan dengan menggunakan alat VIDAS dan Cobas. Bahan pemeriksaan diperoleh dari pengambilan darah vena dan ditampung dalam tabung vacutainer tutup merah. Bahan ini kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 3500 rpm selama 10 menit yang kemudian diperoleh serum untuk bahan pemeriksaan.

Hal yang perlu diperhatikan selama melakukan pemeriksaan yaitu :

1. Menginput data pasien beserta jenis pemeriksaan yang dilakukan.2. Meletakkan reagen pada rak pemeriksaan sesuai dengan urutan yang ada pada komputer.3. Reagen pemeriksaan yang digunakan dicatat pengeluarannya pada kartu pencatatan reagen.4. Sampel serum dipipet dan dimasukkan sesuai dengan reagen pemeriksaan (hindari adanya gelembung udara).5. Volume serum yang digunakan sesuai dengan jenis pemeriksaan yang dilakukan.Pemeriksaan tiroid yang dilakukan pada alat VIDAS dan Cobas e 411 yaitu FT4, TSH, TSHs, T4, dan T3. Metode yang digunakan adalah ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay). Pemeriksaan dengan metode ELFA ini merupakan kombinasi dari metode imunoenzim dan imunocapture dengan hasil akhir dibaca menggunakan fluorensi. Sampel serum yang dimasukkan ke dalam alat, kemudian akan dibaca secara otomatis dan hasilnya dicetak oleh printer secara otomatis. Hasil dari pemeriksaan adalah nilai indeks yang didapat secara otomatis hasil dari kalkulasi alat terhadap standar yang sudah disimpan dalam dalam memori alat.

Berikut beberapa pemeriksaan tiroid yang telah dilakukan selama 6 hari PKL di sub laboratorium imunologi antara lain :a. Pemeriksaan FT4PemeriksaanFT4merupakan pemeriksaan sensitif untuk fungsi tiroid. Peningkatan konsentrasiFT4terlihat pada kondisi hipertiroid, sedangkan penurunan konsentrasi terjadi pada kondisi hipotiroid. Jumlah pemeriksaan yang telah dilakukan adalah sebanyak 137 dengan jumlah sampel yang diperlukan sebanyak 100 L. Lama pemeriksaan FT4 dengan alat Cobass e 411 adalah 40 menit. Pemeriksaan ini sesungguhnya dapat dilakukan di alat vidas namun karena reagennya habis dilakukan pemeriksaan pada alat Cobass e 411.b. Pemeriksaan TSHPemeriksaanTSHmerupakan pengukuran kadar Thyroid Stimulating Hormone (TSH) dalam darah, dan dapat digunakan untuk menilai fungsi tiroid. Pemeriksaan ini bermanfaat untuk skrining kelainan tiroid. Jumlah pemeriksaan yang telah dilakukan adalah sebanyak 102 dengan jumlah sampel yang diperlukan sebanyak 200 L. Lama pemeriksaan TSH dengan alat Cobas e 411 adalah 40 menit.c. Pemeriksaan T4T4 ini merupakan suatu uji laboratorium yang paling baik untuk mengetahui adanya disfungsi dari kelenjar tiroid. Jumlah pemeriksaan yang telah dilakukan adalah sebanyak 9 dengan jumlah sampel yang diperlukan sebanyak 200 L. Lama pemeriksaan T4 dengan alat VIDAS 1 adalah 40 menit.d. Pemeriksaan T3T3 dipakai untuk monitoring pasien yang menggunakan obat anti-tiroid, karena pada pengobatan tersebut, produksi T3 berkurang dan T4 dikonversi menjadi T3. Selain itu, kadar free T3 diprediksi untuk menentukan beratnya kelainan tiroid. Jumlah pemeriksaan yang telah dilakukan adalah sebanyak 6 dengan jumlah sampel yang diperlukan sebanyak 100 L. Lama pemeriksaan T3 dengan alat VIDAS 1 adalah 40 menit.Sebagai contoh, diperoleh hasil pemeriksaan yang dilakukan oleh pasien Viny Rosita Soetanto (34 tahun, perempuan) dimana pasien melakukan pemeriksaan FT4, TSH, T3, T4. Hasil pemeriksaan FT4 yaitu 1,16 ng/dL dan TSH yaitu 5,10 lU/mL nilai T3 1,37 nmol/L dan nilai T4 94,14 nmol/L. Nilai FT4, T3 dan T4 yang diperoleh dibandingkan dengan nilai rujukan berada nilai normal. Sedangkan nilai TSH berada diatas nilai normal, dimana nilai rujukannya yaitu 0,250-5,000 lU/mL. Hasil pemeriksaan yang telah diperoleh ini langsung tersambung dengan komputer, lalu dilakukan penginputan data dan pencetakan hasil. Hasil pemeriksaan divalidasi oleh petugas sub laboratorium imunologi dan diverifikasi oleh dokter jaga laboratorium.

Terdapat beberapa permasalahan yang dihadapi selama melakukan praktek kerja lapangan di sub laboratorium imunologi. Dari beberapa permasalahan tersebut mahasiswa sudah mampu mengatasi seperti mencatat volume-volume sampel yang diperlukan pada masing-masing pemeriksaan, membuka panduan jumlah pemipetan yang diletakkan dekat dengan alat sehingga tidak terjadi kekeluruan dalam hal pemipetan sampel, dan hasil pemeriksaan yang tidak terkoneksi ke komputer dilakukan pencatatan manual dengan melihat hasil print dari alat.

C. PEMERIKSAAN SEROLOGY1. Tujuan Kegiatana. Untuk dapat melakukan pemeriksaan serology pada sampel serum pasien.

b. Untuk dapat mendiagnosis dan mengetahui kadar parameter pemeriksaan serology yang ada pada sampel serum pasien.

2. Metode

Metode yang digunakan dalam pemeriksaan serology yaitu ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay).

3. Prinsip

Prinsip pemeriksaan ini adalah kombinasi dari metode imunoenzim dan imunocapture dengan hasil akhir dibaca menggunakan fluoresensi (ELFA). Sampel dimasukkan ke dalam alat, kemudian alat akan membaca secara otomatis dan hasilnya dicetak oleh printer secara otomatis. Hasil dari pemeriksaan adalah nilai indeks yang didapat secara otomatis hasil dari kalkulasi alat terhadap standar yang sudah disimpan dalam dalam memori alat.

4. Dasar TeoriSerologi ialah ilmu yang mempelajari reaksi antigen antibody secara invitro, untuk dapat menegakkan diagnose suatu penyakit infeksi:kita harus dapat mengisolasi atau menemukan kuman penyebabnya. Proses isolasi atau menemukan kuman tersebut memakan waktu yang cukup lama dan sulit dalam pelaksanaannya. Apabila sebuah kuman masuk kedalam tubuh kita maka kuman tersebut akan merupakan suatu antigen (benda asing)bagi tubuh kita dan selanjutnya akan merangsang tubuh kita untuk membentuk antibody terhadap kuman tersebut. Dengan dapat ditemukannya antibody tersebut dalam tubuh kita, mka hal ini akan membantu kita dalam menegakkan diagnose suatu penyakit infeksi. Proses untuk menemukan atau mendeteksi adanya antigen dan antibody tersebut yang selanjutnya kita kenal dengan pemeriksaan serologi. (Areg, 2011)

Berikut adalah beberapa pemeriksaan serology, yaitu: a. Pemeriksaan Toxo IgGPemeriksaan Anti-Toxoplasma IgG dilakukan untuk mengetahui adanya antibodi IgG terhadap parasit Toxoplasma gondii. Anti-Toxoplasma IgG muncul 1-2 minggu setelah infeksi primer dan mencapai konsentrasi puncak dalam waktu 4-8 minggu. Konsentrasi IgG dalam darah dapat menurun setelah beberapa bulan atau tahun dan akan menetap seumur hidup dengan konsentrasi rendah. IgG dapat melewati plasenta dan pada neonatus, IgG yang berasal dari ibu dapat bertahan kurang lebih selama 6 bulan. Bayi akan mulai membentuk antibodi IgG sendiri pada usia 2-3 bulan. Manfaat pemeriksaan ini adalah Uji saring/skrining infeksi toxoplasma; memperkirakan status imun; dan diagnosis infeksi toxoplasma aktif (peningkatan konsentrasi IgG yang signifikan dari dua pemeriksaan dengan interval waktu 3 minggu). (Prodia, 2012)b. Pemeriksaan Toxo IgMPemeriksaan Anti-Toxoplasma IgM dilakukan untuk mengetahui adanya antibodi IgM terhadap parasit Toxoplasma gondii. Anti-Toxoplasma IgM muncul 5 hari setelah infeksi, dan konsentrasinya akan meningkat dengan cepat dalam waktu 1-2 minggu serta mencapai konsentrasi puncak dalam waktu 1-4 minggu. IgM akan menghilang dalam beberapa bulan, namun dapat menetap sampai lebih dari 6 bulan bahkan sampai bertahun-tahun (IgM non-spesifik). IgM ibu tidak dapat menembus plasenta, dan pada janin mulai dibentuk pada akhir trimester I. manfaat pemeriksaan ini adalah untuk diagnosis infeksi toxoplasma primer (pada ibu dan janin), harus dikonfirmasi dengan peningkatan konsentrasi IgG. (Prodia, 2012) 5. Alat dan Bahan 1. Alat

1. VIDAS 1 dan 22. Mikropipet

3. Yellow tip

2. Bahan

1. Reagen Biomerieux

2. Serum

6. Cara Kerja a. Cara Menyalakan VIDAS PC

1. Nyalakan secara berurutan :

UPS

Modul Vidas

Print dan Monitor

Komputer

2. Ditunggu beberapa menit hingga komputer selesai melakukan inisial.

3. Username dan Password dimasukkan dan diklik pada icon pada monitor tampak VIDAS PC is starting...please wait.

4. Pada monitor akan tampak Menu utama dari VIDAS PC.

b. Cara Memasukkan Sampel

1. Data pasien dimasukkan lewat komputer.

2. Parameter pemeriksaan yang diinginkan dimasukkan.

3. Parameter yang sama diletakkan pada satu section.

4. Strip dan SPR dimasukkan pada section sesuai dengan jenis dan jumlah pemerikasaan.

5. Sampel dipipet sesuai jenis pemeriksaan yaitu :

Pemeriksaan Toxo IgG: 200 L

Pemeriksaan Toxo IgM: 100 L6. Sampel diteteskan pada reagen.

7. Reagen dimasukkan ke alat VIDAS.

8. Pemeriksaan dijalankan lewat komputer dengan memilih start sesuai dengan nomor rak yang dimasukkan sampel.

9. Lamanya pemeriksaan tercantum pada alat.

c. Cara Mematikan Vidas PC

1. Pastikan tidak ada parameter yang diperiksa dan reagen strip dan SPR dalam alat.

2. Tanda X diklik pada bagian kanan atas layar kerja, muncul pertanyaan Do you want to quit this application?.

3. Tekan Yes, pada monitor tampak Windows NT desktop.

4. Klik Start pada bagian bawah kiri monitor, pilih Shutdown.

7. Hasil Kegiatan Kegiatan pemeriksaan serology yang dilakukan di sub laboratorium imunologi RSUP Sanglah yang telah dilakukan oleh mahasiswa PKL yang berasal dari pasien rawat jalan atau rawat inap, yaitu:a. Pemeriksaan Toxo IgM dan Toxo IgG Hari, TanggalJumlah Pasien

Toxo IgM (orang)Jumlah Pasien

Toxo IgG (orang)

Senin, 23 Maret 2015--

Selasa, 24 Maret 2015--









Jumat, 3 April 2015--

Sabtu, 4 April 2015--

Total 1214

Contoh hasil pemeriksaan tumor marker yang dikeluarkan oleh RSUP Sanglah terlampir.

8. Permasalahan Permasalahan yang dihadapi dalam pemeriksaan tumor marker antara lain :

a. Mahasiswa masih kesulitan menghafal volume sampel yang diperlukan untuk masing-masing parameter pemeriksaan karena setiap parameter memerlukan volume sampel yang berbeda. Hal ini dikarenakan kendala waktu yang singkat yang diperoleh mahasiswa pada PKL ini.b. Hasil pemeriksaan yang langsung terhubung ke komputer sering mengalami gangguan sehingga beberapa hasil pemeriksaan berstatus tertunda.

9. Pembahasan dan Pemecahan MasalahSecara umum, pemeriksaan serology melibatkan reaksi antara antigen dan antibodi. Pemeriksaan serologi masih banyak yang dikerjakan secara manual seperti widal, ASTO, RA, dan lain-lain. Pemeriksaan serology di laboratorium imunologi RSUP Sanglah dilakukan dengan menggunakan alat VIDAS. Bahan pemeriksaan diperoleh dari pengambilan darah vena dan ditampung dalam tabung vacutainer tutup merah. Bahan ini kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 3500 rpm selama 10 menit yang kemudian diperoleh serum untuk bahan pemeriksaan.

Hal yang perlu diperhatikan selama melakukan pemeriksaan yaitu :

a. Menginput data pasien beserta jenis pemeriksaan yang dilakukan.b. Meletakkan reagen pada rak pemeriksaan sesuai dengan urutan yang ada pada komputer.c. Reagen pemeriksaan yang digunakan dicatat pengeluarannya pada kartu pencatatan reagen.d. Sampel serum dipipet dan dimasukkan sesuai dengan reagen pemeriksaan (hindari adanya gelembung udara).e. Volume serum yang digunakan sesuai dengan jenis pemeriksaan yang dilakukan.Pemeriksaan serology yang dilakukan dengan alat VIDAS diantaranya, Toxo IgG, dan Toxo IgM. Berikut beberapa pemeriksaan serology yang telah dilakukan selama 6 hari PKL di sub laboratorium imunologi antara lain :

a. Pemeriksaan Toxo IgGPemeriksaan Anti-Toxoplasma IgG dilakukan untuk mengetahui adanya antibodi IgG terhadap parasit Toxoplasma gondii. Jumlah pemeriksaan yang telah dilakukan adalah sebanyak 14 dengan jumlah sampel yang diperlukan sebanyak 200 L. Lama pemeriksaan Toxo IgG dengan alat VIDAS 1 adalah 40 menit.b. Pemeriksaan Toxo IgM Pemeriksaan Anti-Toxoplasma IgM dilakukan untuk mengetahui adanya antibodi IgM terhadap parasit Toxoplasma gondii. Anti-Toxoplasma IgM muncul 5 hari setelah infeksi. Jumlah pemeriksaan yang telah dilakukan adalah sebanyak 12 dengan jumlah sampel yang diperlukan sebanyak 100 L. Lama pemeriksaan Toxo IgM dengan alat VIDAS 1 adalah 40 menit.Sebagai contoh, diperoleh hasil pemeriksaan yang dilakukan oleh I Putu Nur Budi Santika (31 tahun, laki - laki) dimana pasien melakukan pemeriksaan Toxo IgG dengan hasil 1 IU/mL dan Toxo IgM dengan hasil 0,06 units. Nilai Toxo IgG yang diperoleh dibandingkan dengan nilai rujukan yaitu non reaktif

6 BAB III IMUNOLOGI.doc

Documents

Transcript of 6 BAB III IMUNOLOGI.doc