8/13/2019 405828084_abs

http://slidepdf.com/reader/full/405828084abs 1/3

Penulis : Hanifah Chai Rani Fakultas : Sains dan Teknologi 

Program Studi : Kimia IPK : 3.24 

Pembimbing I : Dr. Ni Nyoman Tri Puspaningsih, M.Si Pembimbing II : Dr. Mirni Lamid, M.P, drh 

Pemisahan dan pemurnian kompleks enzim selulase dari bakteriacidothermus cellulolyticus

Abstrak :

<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:Calibri; mso-font-alt:\"Century Gothic\";

 mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable;

 mso-font-signature:-1610611985 1073750139 0 0 159 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal,

li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:\"\"; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt;

 line-height:115%; mso-pagination:widow-orphan; font-size:11.0pt; font-family:Calibri;

 mso-fareast-font-family:Calibri; mso-bidi-font-family:\"Times New Roman\";} @page Section1

 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt;

 mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->

 ABSTRAK 

Pada penelitian ini telah dilakukan pemisahan dan pemurnian kompleks enzim selulase dari bakteri

 Acidothermus cellulolitycus. Enzim selulase tersebut berasal dari bakteri hasil eksplorasi asal isolat rumensapi yang memiliki suhu optimum 50°C dan pH optimum 8. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk 

mengetahui aktivitas masing-masing jenis enzim selulase menggunakan substrat spesifik dan mengetahui

tingkat kemurnian enzim tersebut menggunakan diafiltrasi dan kromatografi penukar ion. Proses penelitian

dimulai dengan memproduksi enzim selulase dari bakteri

 Acidothermus cellulolitycus, kemudian diendapkan menggunakan amonium sulfat dengan kadar kejenuhan

optimum sebesar 80%. Pelet enzim yang diperoleh dilarutkan dalam buffer fosfat sitrat pH 7 untuk 

dimurnikan lebih lanjut dari protein-protein lain dan ammonium sulfat dengan diafiltrasi. Selanjutnya

dilakukan kromatografi penukar ion untuk memisahkan protein berdasarkan muatannya. Enzim dialiri

dengan eluen NaCl [0-0,5] M dalam buffer Tris HCl pH 8 dan NaCl [0-1] M dalam buffer Tris HCl pH 7,

bergradien dari konsentrasi rendah ke tinggi dengan matriks DEAE-toyopearl 650 M dalam etanol.

 Berdasarkan hasil penelitian menunjukkan bahwa enzim selulolitik dari Acidothermus cellulolitycus

mampu menghidrolisis beberapa substrat spesifik (CMC, pNPG, pNPC) dengan aktivitas ekstrak kasar 

selulolitik yaitu CMC (0,00264 U/mL), pNPG (0,0309 U/mL) and pNPC (0,0279 U/mL).

  Diperoleh hasil terbaik kromatografi penukar ion fraksi A pH 7 dengan tingkat kemurnian 75,62 kali

ekstrak kasarnya.

Kata kunci: enzim selulase, Acidhotermus cellulolitycus, kromatografi penukar ion, diafiltrasi, tingkat 

kemurnian

Page 1

8/13/2019 405828084_abs

http://slidepdf.com/reader/full/405828084abs 2/3

Penulis : Hanifah Chai Rani Fakultas : Sains dan Teknologi 

Program Studi : Kimia IPK : 3.24 

Pembimbing I : Dr. Ni Nyoman Tri Puspaningsih, M.Si Pembimbing II : Dr. Mirni Lamid, M.P, drh 

 ABSTRACT 

This research, have been separated and purified the complex of cellulase enzymes from Acidothermus

cellulolitycus.

This cellulase enzyme comes from exploration bacteria that was isolated from cow rumen that have

optimum temperature and pH were 50°C and pH 8. The aim of this research are to determine activity

of each complex cellulase enzymes used to specific substrate and to determine purification level of enzymeby diafiltrate and ion exchange chromatography. This process was started by producing cellulase enzyme

 from Acidothermus cellulolitycus, then precipitated it using ammonium sulphate with optimum

concentration of saturated 80%. The pellets of enzyme was diluted by phosphate citric pH 7 then purified 

by diafiltrate in order to separate enzyme from other proteins and ammonium sulphate. After that, there

was purifying enzyme by ion exchange chromatography in order to separate enzyme based on its ion.

 Enzyme was eluted by NaCl [0-0,5] M in Tris HCl pH 8 and NaCl [0-1] M in Tris HCl pH 7 (low

concentration to high concentration gradient) with DEAE-toyopearl 650 M in ethanol as the matrix. Based 

on the experiment that cellulolityc enzymes from Acidothermus cellulolitycus could hydrolyzed several

specific substrate (CMC, pNPG, pNPC)

 with activities crude extract cellulolityc are : CMC (0,00264 U/mL), pNPG (0,0309 U/mL) and pNPC (0,0279 U/mL).

The best result of this ion exchange chromatography on A fraction pH 7 had purification level 75,62 from

Page 2 

8/13/2019 405828084_abs

http://slidepdf.com/reader/full/405828084abs 3/3

Penulis : Hanifah Chai Rani Fakultas : Sains dan Teknologi 

Program Studi : Kimia IPK : 3.24 

Pembimbing I : Dr. Ni Nyoman Tri Puspaningsih, M.Si Pembimbing II : Dr. Mirni Lamid, M.P, drh 

crude extract.

Keywords: cellulase, Acidhotermus cellulolitycus, ion exchange chromatography, diafiltrate, purification

level

Page 3