39

4. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Pengamatan Morfologi dan Tingkah Laku Udang Vaname

Pengamatan morfologi dan tingkah laku udang vaname dilakukan secara

makroskopik yaitu dengan kasat mata. Perlakuan yang diamati adalah udang

kontrol positif (K+) yaitu udang sehat tanpa pemberian ekstrak rumput laut

Eucheuma cottoni dan tanpa infeksi virus WSSV, udang kontrol negatif (K-) yaitu

udang tanpa pemberian ekstrak rumput laut yang diinfeksi virus WSSV serta

udang perlakuan P1, udang perlakuan P2, dan udang perlakuan P3 yaitu udang

yang diberi ekstrak rumput laut dengan dosis 5gr/kg, 10 gr/kg, dan 15gr/kg yang

diinfeksi virus WSSV.

4.1.1 Pengamatan Udang Kontrol Positif (K+)

Udang perlakuan kontrol positif (K+) yaitu udang sehat tanpa pemberian

ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii dan tanpa diinfeksi virus WSSV. Menurut

Arafani et al., 2016, udang sehat memiliki ciri – ciri yaitu tubuh udang berwarna

cerah, anggota tubuh utuh, ekor utuh, udang bergerak aktif, dan mata udang

memantulkan warna sinar merah bila terkena cahaya pada malam hari. Hasil

pengamatan morfologi dan tingkah laku udang kontrol positif dapat dilihat pada

Tabel 2.

Tabel 2. Ciri – Ciri Tingkah Laku dan Morfologi Udang Kontrol Positif (K+)

No Hari Ciri – ciri tingkah laku dan morfologi

1 1 - Nafsu makan normal, udang bergerak aktif, badan terlihat segar

2 2 - Nafsu makan masih normal, rangsangan terhadap sentuhan

masih normal, badan udang terlihat segar

3 3 - Nafsu makan normal, badan udang segar, pergerakan normal

4 4 - Nafsu makan normal, respon terhadap sentuhan normal

- Badan udang terlihat segar

5 5 - Nafsu makan normal, respon terhadap sentuhan normal

- Badan terlihat cerah

6 6 - Nafsu makan normal, pergerakan gesit, badan terlihat segar

40

4.1.2 Pengamatan Udang Kontrol Negatif (-)

Udang perlakuan kontrol negatif (K-) diperoleh dari udang yang telah

diberi virus WSSV tanpa pemberian ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii.

Penginfeksian virus menggunakan metode perendaman dengan dosis 20 µg/ml.

Pengamatan dilakukan mulai hari pertama pasca infeksi hingga hari ke enam

pasca infeksi. Hasil pengamatan dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3. Ciri – Ciri Tingkah Laku dan Morfologi Udang Kontrol Negatif (K-)

No Hari Ciri – ciri tingkah laku dan morfologi

1 1 - Nafsu makan normal, udang bergerak aktif

- Badan terlihat segar

2 2 - Nafsu makan masih normal, rangsangan terhadap sentuhan

masih normal

- Badan udang terlihat segar

3 3 - Nafsu makan normal, tetapi ada yang tersisa

- Badan udang mulai terlihat kemerahan

- Pergerakan mulai lemah, dan tidak begitu respon terhadap

sentuhan

4 4 - Nafsu makan mulai berkurang, udang bergerak di dasar secara

lambat, badan sampai ekor terlihat kemerahan

5 5 - Nafsu makan semakin berkurang dilihat dari sisa pakan yang

masih banyak, warna merah pada udang terlihat jelas, udang

bergerak melambat di dasar kolam,

6 6 - Nafsu makan turun, pergerakan lambat dan lemas, mengalami

kematian

Berdasarkan Tabel 3 dapat diketahui bahwa pada hari ke-1 dan hari ke- 2

pasca infeksi WSSV udang masih menunjukan perilaku yang normal yaitu terlihat

dari nafsu makan yang normal dan peka terhada rangsangan. Kemudian pada

hari ke tiga nafsu makan mulai menurun, badan mulai terlihat kemerahan yang

dimungkinkan hal ini terjadi karena pengaruh dari virus WSSV yang mulai

menginfeksi udang vaname. Selanjutnya pada hari ke-4 dan ke-5 nafsu makan

dan pergerakan semakin menurun serta kemerah – merahan nampak semakin

jelas dan pada hari ke-6 udang mengalami kematian. Menurut Utami et al., 2012

41

gejala klinis udang yang terinfeksi WSSV yaitu nafsu makan berkurang,

berenang miring dan lemah, mendekati gelembung udara, kaki renang, telson

dan uropod kemerahan.

4.1.3 Pengamatan Udang Perlakuan P1

Udang perlakuan P1 diperoleh dari udang vaname yang dberi virus

WSSV yang sebelumnya sudah diberi ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii

dengan dosis 5g/kg pakan. Data hasil pengamatan ciri – ciri tingkah laku dan

morfologi dapat dilihat pada Tabel 4.

Tabel 4. Ciri – Ciri Tingkah Laku dan Morfologi Udang Perlakuan P1

No Hari Ciri – ciri tingkah laku dan morfologi

1 1 - Udang bergerak aktif, responsif terhadap sentuhan - Nafsu makan normal, badan udang terlihat segar

2 2 - Pergerakan udang aktif, nafsu makan normal

- Respon terhadap sentuhan tinggi,

- Badan udang masih terlihat segar

3 3 - Nafsu makan masih normal, badan udang terlihat segar

- Masih respon terhadpa sentuhan

4 4 - Nafsu makan menurun, warna udang mulai memerah

- Udang masih aktif bergerak,

- Ketika diberi sentuhan masih menghindar

5 5,6 - Nafsu makan menurun, pergerakan mulai menurun

- Warna udang memerah, udang lebih banyak diam

Berdasarkan Tabel 4 dapat diketahui bahwa pada hari pertama sampai

hari ke-3 pasca infeksi udang menunjukkan perilaku normal yaitu nafsu makan

masih normal, udang bergerak aktif dan badan masih terlihat segar. Kemudian

pada hari ke-4, 5 dan ke-6 nafsu makan menurun, pergerakan mulai menurun,

badan mulai memerah dan udang lebih banyak diam, hal ini dimungkinkan

karena virus WSSV mulai menginfeksi udang vaname sehingga terjadi

perubahan tingkah laku. Menurut Kordi (2009) gejala umum udang yang

terinfeksi virus WSSV yaitu nafsu makan menurun, keadaanya lemah dan

42

kehilangan keseimbangan, tubuh udang berwarna merah mula – mula pada

bagian kepala dan ekor dan akhirnya ke seluruh tubuh.

4.1.4 Pengamatan Udang Perlakuan P2

Udang perlakuan P2 diperoleh dari udang vaname yang dberi virus

WSSV yang sebelumnya sudah diberi ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii

dengan dosis 10g/kg pakan. Data hasil pengamatan ciri – ciri tingkah laku dan

morfologi dapat dilihat pada Tabel 5.

Tabel 5. Ciri – Ciri Tingkah Laku dan Morfologi Udang Perlakuan P2

No Hari Ciri – ciri tingkah laku dan morfologi

1 1,2,3 - Udang bergerak aktif, respon terhadap sentuhan baik - Badan udang terlihat segar dan cerah - Nafsu makan normal

2 4 - Udang bergerak aktif

- Nafsu makan mulai menurun

- Badan udang terlihat segar

- Masih respon terhadap sentuhan

- apabila diberi cahaya pada malam hari udang mendekat

3 5 - Nafsu makan menurun

- Pergerakan lambat

- Ada sisa pakan

4 6 - Nafsu makan menurun

- Respon terhadap rangsangan rendah

- Warna udang memerah

Berdasarkan Tabel 5 pada hari ke-1 sampai hari ke-3 pasca infeksi

WSSV udang masih menunjukkan perilaku yang normal dilihat dari nafsu makan

yang normal, pergerakan normal, dan badan masih terlihat cerah dan segar.

Kemudian pada hari ke-4 udang masih bergerak aktif akan tetapi nafsu makan

menurun, hari ke-5 nafsu makan menurun dan pergerakan lambat, hari ke-6

warna udang memerah. Hal ini dimungkinkan karena pengaruh virus WSSV yang

mulai menyerang udang vaname sehingga terjadi perubahan morfologi dan

tingkah laku. Menurut Hameed (1997) dalam Amrillah et al., 2015, gejala klinis

yang timbul pada udang yang terinfeksi WSSV ditunjukkan oleh penurunan

konsumsi pakan, udang menunjukkan perilaku lesu, terjadi pelunturan warna

43

(diskolorisasi) pada hepatopankreas dari warna merah muda hingga menjadi

coklat kemerahan dan perubahan warna kemerahan pada abdomen.

4.1.5 Pengamatan Udang Perlakuan P3

Udang perlakuan P3 diperoleh dari udang vaname yang dberi virus

WSSV yang sebelumnya sudah diberi ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii

dengan dosis 15g/kg pakan. Data hasil pengamatan ciri – ciri tingkah laku dan

morfologi dapat dilihat pada Tabel 6.

Tabel 6. Ciri – Ciri Tingkah Laku dan Morfologi Udang Perlakuan P3

No Hari Ciri – ciri tingkah laku dan morfologi

1 1 - Udang bergerak aktif, respon terhadap sentuhan baik

- Badan udang masih terlihat segar dan berwarna cerah

- Udang lebih banyak di dasar bak, nafsu makan normal

2 2 - Udang bergerak aktif, nafsu makan masih normal

- Badan udang terlihat segar dan berwarna cerah

3 3 - Nafsu makan normal, warna udang segar dan cerah, udang

bergerak normal, ketika diberi sentuhan masih menghindar

4 4 - Nafsu makan menurun, respon terhadap rangsangan baik,

udang lebih banyak diam di dasar,

5 5,6 - Nafsu makan menurun

- Pergerakan lambat

- Ada sisa pakan

- Badan memerah

Berdasarkan Tabel 6 dapat diketahui bahwa pada hari ke-1 sampai hari

ke-3 pasca infeksi WSSV udang vaname menunjukkan morfologi dan perilaku

yang normal yaitu ditandai dengan nafsu makan yang normal, udang bergerak

aktif, badan terlihat segar dan cerah. Kemudian pada hari ke-4 sampai hari ke-6

udang vaname mulai menunjukkan perubahan tingkah laku yaitu nafsu makan

turun, pergerakan lambat, ada sisa pakan dan badan memerah. Hal ini

dimungkinkan karena udang vaname mulai terinfeksi virus WSSV. Menurut

Corteel (2013), gejala udang vaname yang terserang WSSV sangat bervariasi

dan tidak spesifik. Gejala umum berupa adanya bintik-bintik putih pada karapas

bagian kepala tidak selalu ditemukan pada udang. Namun, pada udang terinfeksi

44

WSSV muncul warna kemerahan di kepala maupun ujung ekor. Gejala-gejala

lain WSSV, di antaranya udang bergerombol di pinggir kolam, nafsu makan

menurun drastis, tidak peka rangsangan, dan tubuhnya berwarna kuning susu.

4.2 Pengamatan Differential Haemocyte Count (DHC) Udang Vaname

Pengamatan DHC udang vaname dilakukan secara mikroskopik yaitu

dengan menggunakan mikroskop. Perlakuan yang diamati dalam penelitia ini

yaitu perlakuan kontrol positif (K+) yaitu udang sehat yang tidak diberi virus

WSSV maupun ekstrak rumput laut Eucheuma cottoni, udang perlakuan kontrol

negatif (K-) yaitu udang yang telah diinfeksi virus WSSV tanpa diberi ekstrak

rumput laut Eucheuma cottonii, udang perlakuan P1 yaitu udang yang diberi

ekstrak rumput laut yang dicampur ke pakan dengan dosis 5 g/kg pakan dan

kemudian diinfeksi virus WSSV, udang perlakuan P2 yaitu udang yang diberi

ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii yang dicampur ke pakan dengan dosis 10

g/kg pakan dan kemudian diinfeksi virus WSSV, dan perlakuan P3 yaitu udang

yang diberi ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii yang dicampur ke pakan

dengan dosis 15 g/kg pakan dan kemudian diinfeksi virus WSSV. Menurut Lee

dan Shiau (2001), jumlah total hemosit merupakan indikator respon

meningkatnya pertahanan tubuh udang. Parameter untuk mengetahui

kemampuan suatu zat atau senyawa untuk menstimulasi sistem pertahanan

nonspesifik udang yaitu melalui peningkatan jumlah hemosit. Selanjutnya

Hartinah et al., (2014) menyatakan bahwa perubahan jumlah hemosit dan

perubahan komposisi diferensiasi sel dapat menjadi indikator awal bagi kondisi

vitalitas juvenil udang windu secara dini. Perubahan jumlah hemosit sampai

batas tertentu, biasanya diikuti dengan perubahan komposisi diferensiasi sel-sel

hemosit. Gambar tipe – tipe sel hemosit yang ditemukan saat penelitian dapat

dilihat pada Gambar 6.

45

Gambar 6. (a) Sel Hyalin, (b) Sel semi granular, (c) Sel Granular

(Dokumentasi Pribadi, 2017)

Differential Haemocyte Count (DHC) terdiri dari 3 jenis sel yaitu sel hyalin.

sel semi granular dan sel granular. Data DHC dapat dilihat pada Lampiran 2.

4.2.1 Nilai DHC Udang Kontrol Positif (K-)

Data hasil pengamatan menunjukkan bahwa udang kontrol positif (+)

memiliki jumlah rata – rata sel granular 43,86 %, nilai sel semi granular 21,80 %,

dan sel hyalin 34,34 %. Histogram Nilai DHC udang kontrol positif (K+) dapat

dilihat pada Gambar 7.

0

10

20

30

40

50

K +

Pro

sen

tase

sel

(%)

Perlakuan

Hialin

Semi Granular

Granular

Gambar 8. Prosentase Sel Hyalin, Semi Granular dan Sel

Granular pada Masing-masing Perlakuan Kontrol

Positif (K+)

Hemosit merupakan salah satu bentuk sistem pertahanan tubuh yang

bersifat seluler dan memainkan peranan penting dalam respon kekebalan tubuh

46

(Setyati, 2007). Berdasarkan klasifikasinya sel hemosit dibedakan menjadi 3

yaitu sel hyalin, sel semi granular, dan sel granular. Tipe sel hemosit yang

berbeda mempunyai fungsi yang berbeda pula dalam sistem pertahanan tubuh.

Sel hyalin dan sel semi granular mempunyai peran penting dalam sistem

pertahanan tubuh udang terutama dalam proses fagositosis (Ermantianingrum et

al., 2013). Fungsi lain dari sel hemosit dalam sistem pertahanan tubuh yaitu

berperan dalam pengaktifan sistem prophenoloxidase yang dilakukan oleh sel

semi granular dan sel granular (Andrade, 2011).

4.2.2 Nilai DHC Udang Kontrol Negatif (K-)

Data hasil pengamatan menunjukkan bahwa udang kontrol negatif (-)

memiliki jumlah rata – rata sel granular 29,91 %, nilai sel semi granular 40,65 %,

dan sel hyalin 29,44%. Histogram Nilai DHC udang kontrol positif (K+) dapat

dilihat pada Gambar 8.

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

K (-)

Pro

sen

tase

sel

(%

)

Perlakuan

Hialin

Semi Granular

Granular

Gambar 8. Prosentase Sel Hyalin, Semi Granular dan Sel

Granular pada Masing-masing Perlakuan Kontrol

Negatif (K-)

Diferensiasi hemosit merupakan pembagian jenis/tipe sel hemosit dalam

hemolim udang. Secara umum hemosit pada krustasea terdiri atas 3 tipe sel,

47

yakni sel hyalin, sel granular, dan sel semigranular (Kakoolaki et al., 2011). Sel

hyalin dicirikan dengan ukuran yang lebih kecil dan tanpa granular. Sel granular

ditandai dengan ukuran yang besar dan memilki granular dalam selnya

sedangkan sel semi-granular mempunyai ciri seperti sel granular akan tetapi

ukurannya cenderung lebih kecil. Hemosit merupakan faktor yang sangat penting

dalam sistem pertahanan seluler yang bersifat non spesifik. Kemampuan hemosit

dalam aktivitas fagositosis yang dapat meningkat pada kejadian infeksi,

menunjukkan pertahanan tubuh yang bersifat seluler. Menurut Jusilla (1997)

dalam Putri et al., 2012, jumlah hemosit yang bersirkulasi dalam hemolim

krustasea menunjukkan reaksi yang berbeda terhadap stressor lingkungan dan

penyakit, sehingga dapat menjadi indikator status kesehatan krustasea dan

adanya stressor lingkungan.

4.2.3 Nilai Sel Hyalin Udang Vaname

Data hasil pengamatan DHC udang vaname sebelum infeksi dan sesudah

infeksi didapatkan data bahwa rata – rata nilai sel hyalin sebelum infeksi pada

perlakuan kontrol negatif (-) sebesar 31,11 %, perlakuan P1 adaah sebesar

32,48 %, perlakuan P2 sebesar 35,26 %, perlakuan P3 sebesar 32,92 %,

sedangkan nilai sel hyalin setelah infeksi didapatkan rata – rata pada perlakuan

kontrol negatif (-) sebesar 29,44 %, perlakuan P1 sebesar 33,87 %, perlakuan P2

sebesar 39,48 %, perlakuan P3 sebesar 35,20 %. Histogram nilai sel hyalin

dapat dilihat pada Gambar 9.

48

Gambar 9. Prosentase Sel hyalin pada Masing-masing

Perlakuan Sebelum dan Sesudah Infeksi

Keterangan :

K (-) = perlakuan udang yang diinfeksi WSSV tanpa diberi ekstrak

Eucheuma cottonii

P1 = perlakuan udang yang diberi ekstrak Eucheuma cottoni

dicampur ke pakan sebesar 5 gr/kg dan diinfeksi WSSV

P2 = perlakuan udang yang diberi ekstrak Eucheuma cottoni

dicampur ke pakan sebesar 10 gr/kg dan diinfeksi WSSV

P3 = perlakuan udang yang yang diberi ekstrak Eucheuma

cottoni dicampur ke pakan sebesar 15 gr/kg dan diinfeksi

WSSV

Berdasarkan Gambar 9 terlihat bahwa jumlah sel hyalin tertinggi sebelum

dan sesudah infeksi WSSV ditunjukkan pada perlakuan P2 dengan dosis ekstrak

rumput laut 10gr/kg, sedangkan sel hyalin terendah pada perlakuan kontrol

negatif (K-). Hasil pengamatan menunjukkan bahwa sel hyalin sesudah infeksi

mengalami peningkatan kecuali pada perlakuan kontrol. Hal ini menunjukkan

bahwa sel hyalin berperan aktif dalam melawan adanya patogen, karena ketika

ada patogen sel hyalin lah yang berperan langsung dalam melawan patogen

tersebut. Selain itu jika dibandingkan dengan perlakuan kontrol positif (K+) yaitu

49

udang yang sehat tanpa perlakuan apapun menunjukkan bahwa jumlah sel

hyalin lebih tinggi, hal ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak rumput laut

Eucheuma cottonii memiliki potensi yang tinggi untuk meningkatkan respon imun

udang vaname yang terseranng virus WSSV. Menurut Soderhall and Cerenius

(1992), sel hyalin menjadi sel utama dalam proses fagositosis dan sel semi

granular lebih berperan dalam proses enkapsulasi yang mengindikasikan adanya

penggabungan beberapa sel hemosit untuk menghalangi partikel asing dalam

peredaran darah.

Menurunnya jumlah sel hyalin pada perlakuan kontrol negatif (K-) diduga

akibat proses fagositosis yang mengakibatkan terjadinya penghancuran partikel

patogen bersama dengan sel hyalin yang tidak didukung dengan pihak lain

dalam hal ini adalah senyawa antioksidan yang terkandung dalam ekstrak rumput

laut Eucheuma cottonii. Sementara pada udang yang diberi pakan dengan

tambahan ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii mengalami peningkatan

sesudah diinfeksi WSSV dimungkinkan karena meningkatnya proliferasi sel

seiring dengan peningkatan dosis ektrak. Menurut Soderhall dan Cerenius (1992)

yang menyatakan bahwa sistem kekebalan tubuh pada udang masih primitif dan

tidak seperti pada ikan serta mamalia yang mempunyai imunoglobulin, sehingga

imunoglobulin pada udang digantikan oleh Prophenoloxidase Activating Enzim

(PPA). PPA tersebut merupakan protein yang berlokasi di sel granular hemosit.

PPA ini dapat diaktifkan oleh lipopolisakarida dan β 1,3-Glukan, yang akan

merangsang prophenoloksidase menjadi phenoloksidase. Sebagai akibat dari

perubahan ini akan dihasilkan semacam protein Opsonin Factor yang dapat

menginduksi sel-sel hyalin untuk melakukan proses fagositosis. Van de Braak

(2002) dan Smith, et al. (2003) juga mendukung pernyataan diatas bahwa sel

hemosit tersebut akan melakukan degranulasi, dan beberapa protein akan

50

dilepas untuk kepentingan respon imun, seperti : meningkatnya sel-sel haemosit,

dan meningkatnya aktifitas penjeratan dan fagositosis.

4.2.4 Nilai Sel Granular Udang Vaname

Data hasil pengamatan DHC udang vaname sebelum infeksi dan sesudah

infeksi didapatkan data bahwa rata – rata nilai sel granular sebelum infeksi pada

perlakuan kontrol negatif (-) sebesar 33,33 %, perlakuan P1 adalah sebesar

37,60 %, perlakuan P2 sebesar 47,30 %, perlakuan P3 sebesar 41,25 %,

sedangkan nilai sel granular setelah infeksi didapatkan rata – rata pada

perlakuan kontrol negatif (-) sebesar 29,91 %, perlakuan P1 sebesar 33,10 %,

perlakuan P2 sebesar 44,97 %, perlakuan P3 sebesar 40,32 %. Histogram Nilai

sel granular dapat dilihat pada Gambar 10.

0

10

20

30

40

50

K- P1 P2 P3

Pro

sen

tase

sel

(%

)

Perlakuan

Sel Granular SebelumInfeksi

Sel Granular SesudahInfeksi

Gambar 10. Prosentase Sel Granular pada Masing-masing

Perlakuan Sebelum dan Sesudah Infeksi

Keterangan :

K (-) = perlakuan udang yang diinfeksi WSSV tanpa diberi ekstrak

Eucheuma cottonii

P1 = perlakuan udang yang diberi ekstrak Eucheuma cottoni

dicampur ke pakan sebesar 5 gr/kg dan diinfeksi WSSV

51

P2 = perlakuan udang yang diberi ekstrak Eucheuma cottoni

dicampur ke pakan sebesar 10 gr/kg dan diinfeksi WSSV

P3 = perlakuan udang yang yang diberi ekstrak Eucheuma

cottoni dicampur ke pakan sebesar 15 gr/kg dan diinfeksi

WSSV

Gambar 10 menunjukkan perbedaan persentase sel granular pada setiap

perlakuan, dimana persentase sel granular tertinggi sebelum dan sesudah infeksi

adalah pada perlakuan P2 dengan dosis ekstrak 10gr/kg. Sedangkan persentase

sel granular terendah adalah pada perlakuan kontrol negatif (K-). Hal ini

menunjukkan bahwa jumlah sel granular udang vaname yang diberi pakan

dengan tambahan ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii lebih tinggi

dibandingkan dengan sel granular udang vaname yang tanpa pakan dengan

tambahan ekstrak rumput laut Eucheuma cottonii. Saat terjadinya serangan

patogen, sel granular dan semi granular akan melakukan proses degranulasi,

cytotoxicity dan lisis terhadap material tersebut dengan demikian jumlah sel

granular yang beredar dalam hemolim akan mengalami penurunan. Hasil proses

degranulasi adalah pelepasan peroxinectin yang akan memicu munculnya

fagositosis (Ekawati et al.,2012).

Hasil pengamatan menunjukkan bahwa sel granular mengalami

penurunan setelah diinfeksi WSSV, hal ini menunjukkan bahwa sel granular

berperan dalam menjaga ketahanan tubuh udang vaname. Menurut Ekawati et

al., 2012, fungsi sel granular lebih pada proses menghasilkan enzim

phenoloksidase yang memiliki peranan penting dalam sistem pertahanan non

spesifik. Supamattaya (2002) menjelaskan granula pada sel granular hemosit

terdiri dari propenoloksidase. Dalam aktivasi prophenoloksidase (proPO) akan

membebaskan suatu enzim dari sel granular. Sistem ini juga dipacu oleh adanya

komponen mikrobial seperti β-glucan. Ekawati et al., (2012) menjelaskan pada

52

saat terjadinya serangan patogen, sel granular dan semi granular akan

melakukan proses degranulasi, cytotoxicity dan lisis terhadap material asing

dengan demikian jumlah sel granular yang beredar dalam hemolim akan

mengalami penurunan.

4.2.5 Nilai Sel Semi Granular Udang Vaname

Data hasil pengamatan DHC udang vaname sebelum infeksi dan sesudah

infeksi didapatkan data bahwa rata – rata nilai sel semi granular sebelum infeksi

pada perlakuan kontrol negatif (-) sebesar 34,44 %, perlakuan P1 adalah

sebesar 29,91 %, perlakuan P2 sebesar 17,44 %, perlakuan P3 sebesar 25,83

%, sedangkan nilai sel semi granular setelah infeksi didapatkan rata – rata pada

perlakuan kontrol negatif (-) sebesar 40,65 %, perlakuan P1 sebesar 29,70 %,

perlakuan P2 sebesar 15,56 %, perlakuan P3 sebesar 24,48 %. Histogram Nilai

sel semi granular dapat dilihat pada Gambar 11.

Gambar 11. Prosentase Sel Semi Granular pada Masing-

masing Perlakuan Sebelum dan Sesudah Infeksi

Keterangan :

K (-) = perlakuan udang yang diinfeksi WSSV tanpa diberi ekstrak

Eucheuma cottonii

P1 = perlakuan udang yang diberi ekstrak Eucheuma cottoni

dicampur ke pakan sebesar 5 gr/kg dan diinfeksi WSSV

53

P2 = perlakuan udang yang diberi ekstrak Eucheuma cottoni

dicampur ke pakan sebesar 10 gr/kg dan diinfeksi WSSV

P3 = perlakuan udang yang yang diberi ekstrak Eucheuma

cottoni dicampur ke pakan sebesar 15 gr/kg dan diinfeksi

WSSV

Gambar 11 menunjukkan adanya perbedaan persentase sel pada setiap

perlakuan. Dapat dilihat bahwa persentase sel semi granular sebelum dan

sesudah infeksi tertinggi terdapat pada perlakuan kontrol (-), sedangkan

persentase sel terendah terdapat pada perlakuan P2 dengan dosis ekstrak

rumput laut Eucheuma cottonii sebesar 10gr/kg. Hasil pengamatan menunjukkan

bahwa sel semi granular mengalami penurunan kecuali pada perlakuan kontrol

negatif, hal tersebut menunjukkan bahwa sel semi granular kurang berperan

dalam menjaga ketahanan tubuh udang. Sel semi granular merupakan

pematangan dari sel hyalin yang ketika terjadi serangan patogen maka yang

berperan pertama adalah sel hyalin, sehingga sel ini tidak berkembang menjadi

sel semi granular dan terlihat penurunan jumlah sel semi granular yang terdapat

dalam hemosit (Van De Braak,2002). Sel semi granular berperan utama dalam

proses enkapsulasi dan sedikit dalam proses fagositosis (Ekawati et al., 2012).

Sel semi granular lebih dimungkinkan mudah terinfeksi virus WSSV (Andrade,

2011) dan virus tersebut melakukan replikasi lebih cepat di sel semi granular

daripada sel granular sehingga jumlah sel semi granular secara bertahap

menurun dalam sirkulasi darah (Jiravanichpaisal et al.,2005).

4.3 Kelulushidupan Udang Vaname

Tingkat kelululushidupan atau Survival Rate udang vaname selama

penelitian paling besar adalah perlakuan P2 yaitu 43,33 % dari jumlah semua

perlakuan adalah 30 ekor dan setelah diuji tantang dengan WSSV menyisakan

54

13 ekor, kemudian diikuti perlakuan P3 yaitu 30 % dari jumlah semua perlakuan

30 ekor setelah diuji tantang dengan WSSV menyisakan 9 ekor, perlakuan P1

yaitu 23,33 % dari jumlah semua perlakuan 30 ekor dan setelah diuji tantang

dengan WSSV menyisakan 7 ekor dan perlakuan kontrol negatif (K-) yaitu 10 %

dari jumlah semua perlakuan 30 ekor dan setelah diuji tantang dengan WSSV

menyisakan 3 ekor.

Survival rate erat kaitannya dengan jumlah hemosit, dimana survival rate

yang tinggi menandakan adanya respon imun yang baik pada udang dan begitu

sebaliknya. Pada udang yang diberi ekstrak rumput laut Eucheuma cottonni

diketahui memiliki survival rate yang lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan

kontrol (-). Hal ini menunjukkan bahwa imunostimulan yang masuk ke dalam

tubuh udang dapat melindungi (bersifat protektif) pada udang vaname terhadap

adanya faktor luar yang masuk ke dalam tubuh udang, misalnya adanya infeksi

oleh patogen yang merupakan salah satu penyebab utama terjadinya kematian

udang. Hal ini disebabkan karena imunostimulan yang masuk ke dalam tubuh

udang akan merangsang aktifitas sel - sel haemosit baik agranular (hyalin)

maupun ganular, sebagai upaya untuk melawan patogen yang masuk dalam

tubuh udang tersebut (Darwantin et al., 2016). Sebagaimana diketahui bahwa

sistem pertahanan tubuh pada krustase termasuk udang vaname adalah

pertahanan tubuh yang didominasi dilakukan oleh hemolim. Apabila ada patogen

yang masuk dalam tubuh maka udang akan meningkatkan produksi hemolim di

mana dalam hemolim akan terjadi aktivitas fagositosis oleh sel hyalin dan semi-

granular, penghancuran patogen oleh aktivitas phenoloksidase (Tassanakajon et

al., 2011).

55

4.4 Analisis Sidik Ragam DHC Sebelum dan Sesudah Infeksi

4.4.1 Analisis Sidik Ragam Sel Hyalin Sebelum Infeksi

Berikut merupakan Tabel sidik ragam nilai DHC sel hyalin pada

udang vaname sebelum diinfeksi WSSV yang disajikan pada Tabel 7.

Tabel 7. Sidik Ragam Sel Hyalin Sebelum Infeksi

F tabel

SK dB JK KT F hit F 0,05 F 0,01

Perlakuan 3 26,88597 8,961989 0,530835 4,07 7,59

Galat 8 135,06 16,88283

Total 11 161,95

Berdasarkan hasil pada analisis ragam ANOVA dari perhitungan

rancangan acak lengkap pada Tabel 7 diketahui nilai F hitung lebih kecil dari

pada F tabel sehingga tidak dilakukan uji lanjut. Nilai sel hyalin sebelum infeksi

tidak menunjukkan adanya perbedaan, hal ini dikarenakan nilai sel hyalin pada

setiap perlakuan hampir sama dan ekstrak rumput laut berperan sebagai

imunomodulator. Imunomodulator membantu tubuh untuk mengoptimalkan fungsi

sistem imun yang merupakan sistem utama yang berperan dalam pertahanan

tubuh di mana kebanyakan orang mudah mengalami gangguan sistem imun.

Fungsi imunomodulator adalah memperbaiki sistem imun yaitu dengan cara

stimulasi (imunostimulan) atau menekan/menormalkan reaksi imun yang

abnormal (imunosupresan) (Suhirman dan Winarti, 2014). Sel hyalin merupakan

tipe sel yang paling kecil dengan ratio nukleus sitoplasma tinggi dan tanpa atau

hanya sedikit granula sitoplasma. Sel hyalin berperan dalam proses fagositosis

(Manopo dan Kolopita, 2014). Fagositosis merupakan mekanisme pertahanan

non-spesifik yang secara umum mampu melindungi adanya serangan penyakit

(Darwantin et al., 2016).

56

4.4.2 Analisis Sidik Ragam Hyalin Sesudah Infeksi

Berikut merupakan Tabel sidik ragam nilai DHC sel hyalin pada udang

vaname sesudah diinfeksi WSSV yang disajikan pada Tabel 8.

Tabel 8. Sidik Ragam Sel Hyalin Sesudah Infeksi

F tabel

SK dB JK KT F hit F 0,05 F 0,01

Perlakuan 3 153,6704 51,22348 2,299999 4,07 7,59

Galat 8 178,17 22,27108

Total 11 331,84

Berdasarkan hasil pada analisis ragam ANOVA dari perhitungan

rancangan acak lengkap pada Tabel 8 diketahui nilai F hitung lebih kecil dari

pada F tabel sehingga tidak dilakukan uji lanjut. Nilai sel hyalin sesudah infeksi

tidak menunjukkan adanya perbedaan, hal ini dikarenakan ekstrak rumput laut

berperan sebagai imunomodulator. Imunomodulator merupakan suatu senyawa

yang dapat meningkatkan mekanisme pertahanan tubuh baik secara spesifik

maupun non spesifik. Pertahanan non spesifik terhadap antigen ini disebut

paraimunitas dan zat bersangkutan disebut penginduksi paraimunitas. Induktor

semacam ini biasanya tidak atau sedikit sekali kerja antigennya, bahkan

sebagian bekerja sebagai mitogen yaitu menaikkan proliferasi sel yang berperan

pada imunitas. Sel target dari imunomodulator adalah makrofag, granulosit,

limfosit T dan B, karena induktor paraimunitas ini terutama menstimulasi

mekanisme pertahanan seluler (Parlinaningrum et al., 2014). .Sel hyalin biasa

juga disebut sel darah mudah yang akan dilepaskan oleh inang bila terjadi

serangan bakteri atau benda asing (Braak, 2000). Sel hyalin merupakan tipe

yang paling kecil dengan rasio nukleus sitoplasma tinggi dan bertanggung jawab

dalam proses fagositosis (Johansson et al., 1989).

57

4.4.3 Analisis Sidik Ragam Sel Semi Granular Sebelum Infeksi

Berikut merupakan Tabel sidik ragam nilai DHC sel hyalin pada udang

vaname sebelum diinfeksi WSSV yang disajikan pada Tabel 9.

Tabel 9. Sidik Ragam Sel Semi Granular Sebelum Infeksi

F tabel

SK dB JK KT F hit F 0,05 F 0,01

Perlakuan 3 470,0445 156,6815 8,175515 4,07 7,59

Galat 8 153,32 19,16473

Total 11 623,36

Berdasarkan hasil pada analisis ragam ANOVA dari perhitungan

rancangan acak lengkap pada Tabel 9 diketahui nilai F hitung lebih besar dari

pada F tabel. Karena F hitung lebih besar dari pada F tabel maka dilakukan uji

lanjut dengan menggunakan uji BNT. Dari analisis uji BNT diketahui bahwa

setiap perlakuan berbeda nyata, yaitu K- , P1, P2, dan P3 masing – masing

berbeda dengan taraf 5%. Sel semi granular dikarakteristikkan dengan

terdapatnya granula pada sitoplasma. Sel ini mampu merespon polisakarida dari

dinding sel bakteri atau β-glucan yang berasal dari jamur. Sel semi granular ini

dapat melakukan proses enkapsulasi dan sedikit berperan dalam proses

fagositosis (Johansson et al., 2000). Menurut Danwattananusorn (2009),

enkapsulasi adalah merupakan reaksi pertahanan melawan partikel dalam

jumlah yang besar dan tidak mampu difagosit oleh sel hemosit.

4.4.4. Analisis Sidik Ragam Sel Semi Granular Sesudah Infeksi

Berikut merupakan Tabel sidik ragam nilai DHC sel hyalin pada udang

vaname sesudah diinfeksi WSSV yang disajikan pada Tabel 10.

58

Tabel 10. Sidik Ragam Sel Semi Granular Sesudah Infeksi

F tabel

SK dB JK KT F hit F 0,05 F 0,01

Perlakuan 3 988,0268 329,3423 29,83837 4,07 7,59

Galat 8 88,30 11,03754 Total 11 1076,33

Berdasarkan hasil pada analisis ragam ANOVA dari perhitungan

rancangan acak lengkap pada Tabel 10 diketahui nilai F hitung lebih besar dari

pada F tabel. Karena nilai F hitung lebih besar dari pada F tabel maka dilakukan

uji lanjut dengan menggunakan uji BNT. Dari analisis uji BNT diketahui bahwa

setiap perlakuan berbeda nyata, yaitu K- , P1, P2, dan P3 masing – masing

berbeda dengan taraf 5%. Sel semi granular memiliki sejumlah granul kecil. Sel

ini bertanggung jawab untuk mengenal dan merespon molekul asing atau bakteri

patogen yang masuk ke dalam tubuh krustasea (Soderhall dan Cerenius, 1992).

4.4.5 Analisis Sidik Ragam Sel Granular Sebelum Infeksi

Berikut merupakan tabel sidik ragam nilai DHC sel hyalin pada udang

vaname sebelum diinfeksi WSSV yang disajikan pada Tabel 11.

Tabel 11. Sidik Ragam Sel Granular Sebelum Infeksi

F tabel

SK dB JK KT F hit F 0,05 F 0,01

Perlakuan 3 274,1522 91,38405 2,421485 4,07 7,59

Galat 8 301,91 37,73884

Total 11 576,06

Berdasarkan hasil pada analisis ragam ANOVA dari perhitungan

rancangan acak lengkap pada Tabel 11 diketahui nilai F hitung lebih kecil dari F

Tabel sehingga tidak dilakukan uji lanjut. Sel granular sebelum infeksi tidak

menunjukkan adanya perbedaan hal ini dikarenakanan rumput laut berperan

sebagai imunomodulator. Imunomodulator adalah substansi atau obat yang

59

dapat memodulasi fungsi dan aktivitas sistem imun. Imunomodulator dibagi

menjadi 3 kelompok: i) imunostimulator, berfungsi untuk meningkatkan fungsi

dan aktivitas sistem imun, ii) imunoregulator, artinya dapat meregulasi sistem

imun, dan iii) imunosupresor yang dapat menghambat atau menekan aktivitas

sistem imun (Wiedosari, 2007). Fungsi lain dari sel hemosit dalam sistem

pertahanan tubuh yaitu berperan dalam pengaktifan sistem prophenoloxidase

yang dilakukan oleh sel semi granular dan sel granular (Andrade, 2011).

Pengaktifan sistem prophenoloxidase ini merupakan salah satu asepek penting

dalam sistem pertahanan tubuh udang. Sritunyalucksana and Soderhall (2000)

menyatakan bahwa prophenoloxidase mempunyai peran penting dalam respon

imun krustasea yang sering disertai dengan adanya proses melanisasi.

4.4.6 Analisis Sidik Ragam Sel Granular Sesudah Infeksi

Berikut merupakan Tabel sidik ragam nilai DHC sel granular pada udang

vaname sesudah diinfeksi WSSV yang disajikan pada Tabel 12.

Tabel 12. Sidik Ragam Sel Granular Sesudah Infeksi

F tabel

SK dB JK KT F hit F 0,05 F 0,01

Perlakuan 3 365,7345 121,9115 2,895867 4,07 7,59

Galat 8 336,79 42,09844

Total 11 702,52

Berdasarkan hasil pada analisis ragam ANOVA dari perhitungan

rancangan acak lengkap Tabel 12 diketahui nilai F hitung lebih kecil dari pada F

tabel sehingga tidak dilakukan uji lanjut. Nilai sel granular sesudah infeksi tidak

menunjukkan adanya perbedaan, hal ini dikarenakan ekstrak rumput laut

berperan sebagai imunomodulator. Imunomodulator merupakan senyawa yang

mengubah aktivitas sistem imun tubuh dengan dinamisasi regulasi selsel imun

seperti sitokin. Cara kerja Imunomodulator meliputi mengembalikan fungsi imun

60

yang terganggu (imunorestorasi), memperbaiki fungsi sistem imun (imunostimulasi)

dan menekan respons imun (imunosupresi) (Puspitanisngrum et al., 2015). Jumlah

hemosit dapat sangat bervariasi berdasarkan spesies, respon terhadap infeksi,

stres lingkungan, aktivitas endokrin selama siklus molting (Johansson et al. 2000).

Granulosit merupakan jaringan untuk sistem pertahanan seluler melawan infeksi,

sel ini akan bermigrasi ke daerah-daerah yang mengalami infeksi. Granulosit

mengandung granula di dalam sitoplasmanya (Darwantin et al., 2016).

4.5 Kualitas Air

Hasil pengukuran kualitas air sebagai parameter penunjang dalam

penelitian ini meliputi pengukuran suhu, DO (Oksigen terlarut), pH, salinitas dan

amonia. Data hasil dari pengukuran dapat dilihat pada Tabel 13.

Tabel 13. Data Parameter Kualitas Air

Perlakuan

Kisaran Nilai Kualitas Air

Suhu (°C) DO (mg/l) pH Salinitas

(Ppt)

Amonia

(mg/l)

Kontrol (+) 27,9-29,5 4,45-7,59 8-8,5 10 0,01-0,02

Kontrol (- ) 27,8-29,4 5,75-7,8 8,1-8,4 10 0,02-0,04

P1 27,9-29,6 4,85-7,26 7,5-8,4 10 0,01-0,03

P2 27,6-29,4 5,56-7 8-8,6 10 0,02-0,05

P3 27,6-29,2 4,43-7,68 8-8,6 10 0,01-0,06

Standart Baku Mutu

Air 28-32* >3,0* 7,5-8,5* 5-40*

61

4.5.1 Parameter Fisika

a. Suhu

Data hasil pengamatan suhu didapatkan suhu terendah yaitu 27,6°C dan

suhu tertinggi yaitu 29,6°C . Suhu tersebut masih dalam kisaran optimal sesuai

dengan pendapat Kordi dan Tancung (2007) yang menyatakan bahwa Kisaran

suhu yang optimum untuk pertumbuhan udang vaname yaitu 28-31°C dan

tumbuh dengan baik pada suhu 24-34°. Suhu yang rendah dapat menyebabkan

rendahnya laju konsumsi pakan pada udang, sedangkan suhu yang tinggi

menyebabkan tingkat konsumsi pakan menjadi berhenti (Arsad et al.,2017). Suhu

air sangat berkaitan erat dengan konsentrasi oksigen terlarut dan laju konsumsi

oksigen hewan air. Toksisitas suatu senyawa kimia dipengaruhi oleh derajat

keasaman suatu media. Sedang titik batas kematian organisme air tehadap pH

adalah 4 dan 11 (Sucipto, 2005 dalam Jalaludin. 2014).

4.5.2 Parameter Kimia

a. pH

Data hasil pengamatan pH didapatkan nilai pH terendah yaitu 7,5 dan pH

tertinggi yaitu 8,6. Nilai tersebut masih dalam kisaran normal. Amri (2003),

menyatakan pada nilai pH diatas 10 dapat membunuh udang, sementara nilai pH

dibawah 5 mengakibatkan pertumbuhan udang terhambat. Nilai pH perairan

merupakan parameter yang dikaitkan dengankonsentrasi karbon dioksida (CO2)

dalam ekosistem. Semakin tinggi konsentrasi karbon dioksida, pH perairan

semakin rendah. Penurunan karbondioksida dalam ekosistem akan

meningkatkan pH perairan. Sebaliknya, proses respirasi oleh semua komponen

ekosostem akan meningkatkan jumlah karbon dioksida, sehingga pH perairan

menurun (Wetzel, 1983).

62

b. DO

Data hasil pengukuran oksigen terlarut didapatkan nilai terendah sebesar

4,43 mg/l dan nilai tertinggi sebesar 7,68 mg/l. Nilai oksigen tersebut masih

dalam batas yang normal sesuai pernyataan Haliman dan Adijaya (2005) bahwa

kadar oksigen terlarut yang baik berkisar 4-6 mg/l. Oksigen terlarut merupakan

suatu faktor yang sangat penting di dalam ekosistim perairan, terutama sekali

dibutuhkan untuk respirasi bagi sebagian besar organisme air. Oksigen terlarut

dalam air merupakan parameter kualitas air yang paling kritis. Konsentrasi

oksigen terlarut dalam perairan selalu mengalami perubahan yang dinamik, oleh

karena itu pemantauan oksigen terlarut dalam kegiatan budidaya harus selalu

dilakukan sehingga apabila terjadi kritis oksigen maka dapat diambil suatu

tindakan untuk mengantisipasi hal yang dapat berpengaruh buruk terhadap

organisme yang dibudidayakan (Hendrajat et al., 2014).

Kecepatan difusi oksigen dari udara, tergantung dari beberapa faktor,

seperti kekeruhan, air, suhu, salinitas, pergerakan massa air, dan udara. Pada

lapisan permukaan, kadar oksigen akan lebih tinggi, karena adanya proses difusi

antara air dengan udara bebas serta adanya proses fotosintesis. Kandungan

oksigen terlarut minimum adalah 2 mg/L dalam keadaan normal dan tidak

tercemar oleh senyawa beracun (toksik). Kandungan oksigen terlarut minimum

ini sudah cukup mendukung kehidupan organisme (Swingle, 1968 dalam Fitria,

2012).

Menurut Purba dan Khan (2010), Oksigen terlarut memegang peranan

sangat penting dalam perairan dalam fungsinya sebagai salah satu yang

dibutuhkan oleh organisme perairan. Salah satu yang memengaruhi kadar

oksigen terlarut di perairan adalah suhu. Oksigen terlarut juga menentukan

kuantitas organisme suatu perairan. Selain itu oksigen terlarut juga dipengaruhi

faktor lain seperti tekanan uap air dan salinitas. Oksigen larut di kolom air dengan

63

berbagai reaksi dan proses-proses kimia yang berlangsung di perairan, namun

fluktuasi suhu akan menimbulkan perubahan konsentrasi oksigen terlarut di

perairan.

c. Salinitas

Data salinitas didapatkan yaitu 10 ppt. Nilai tersebut masih dalam kisaran

normal sesuai pernyataan McGraw dan Scarpa (2002) dalam Sahrijana dan

Sahabbudin (2014) bahwa udang vaname dapat hidup pada kisaran 0,5-45 ppt.

Salinitas merupakan salah satu parameter lingkungan yang mempengaruhi

proses biologi dan secara langsung akan mempengaruhi kehidupan organisme

antara lain yaitu mempengaruhi laju pertumbuhan, jumlah makanan yang

dikonsumsi, nilai konversi makanan, dan daya sintasan (Andrianto, 2005).

d. Amonia

Data amonia didapatkan dengan nilai terendah 0,01 mg/l, dan nilai

tertinggi yaitu 0,06 mg/l. Nilai tersebut masih dalam kisaran normal. Sesuai

pernyataan Amri dan Khana (2008) bahwa kadar amonia dalam perairan tidak

boleh lebih dari 0,1 mg/l. Amonia merupakan parameter kualitas air yang harus

diketahui kadarnya di lingkungan perairan atau tambak. Udang yang

menggunakan protein sebagai sumber energi menghasilkan amonia dalam

metabolisme. Sumber utama amonia dalam tambak adalah ekskresi dari udang

atau ikan maupun timbunan bahan organik dari sisa pakan dan plankton yang

mati. (Sahrijana dan Sahabbudin, 2014). Konsentrasi amonia yang melebihi 0,45

mg/l dapat menghambat pertumbuhan udang sampai 50%. Level amonia yang

tinggi di perairan dapat meningkatkan konsentrasi amonia dalam darah sehingga

mengurangi aktifitas darah (hemocyanin) dalam mengikat oksigen. Selain itu

tingginya kadar amonia juga dapat meningkatkan kerentanan udang terhadap

penyakit (Kilawati dan Maimunah, 2015).