1. sujaya et al

5/10/2018 1. sujaya et al - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/1-sujaya-et-al 1/8

52

Jurnal Veteriner Juni 2008 Vol. 9 No. 2 : 52-59

ISSN : 1411 - 8327

Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Asam Laktat

dari Susu Kuda Sumbawa

(CHARACTERIZATION OF LACTIC ACID BACTERIA ISOLATED

FROM SUMBAWA MARE MILK)

INengah Sujaya1, 2., Yan Ramona2, 3, Ni Putu Widarini1, Ni Putu Suariani1,

Ni Made Utama Dwipayanti1, Komang Ayu Nocianitri2, 4, Ni Wayan Nursini2

1Program Studi Ilmu Kesehatan Masyarakat,2 UPT. Laboratorium Terpadu Biosain dan Bioteknologi

3 Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam4 Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian

Universitas Udayana, Kampus Bukit Jimbaran, Badung, Bali.

Tel/Fax : +62 361 701 805; Email : [email protected]

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian untuk mengisolasi dan mengkarakterisasi bakteri asam laktat (BAL)

dari susu kuda sumbawa. Isolasi BAL dilakukan pada medium Man Rogosa Sharpe (MRS) agar.

Karakterisasi isolat dilakukan dengan metode standar seperti pewarnaan Gram, pengamatan morfologi

sel, serta kemampuannya untuk memfermentasi glukosa. Daya hambatnya terhadap bakteri patogen

ditentukan dengan metode dual culture assay. Isolat yang menunjukkan spektrum daya hambat paling

luas diidentifikasi lebih lanjut dengan menggunakan kit API 50 CHL. Hasil penelitian menunjukkan

bahwa susu kuda sumbawa didominasi oleh bakteri lactobacilli dan weisella/leuconostoc. Sebanyak 26

dari 36 isolat yang diisolasi merupakan kelompok lactobacilli homofermentatif dan 10 isolat merupakan

kelompok lactobacilli heterofermentatif/weisella/leuconosto Sebanyak 24 isolat menghambat pertumbuhan

Escherichia coli 25922, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium, dan Staphylococcus aureus 29213. Dua

isolat yang mempunyai daya hambat terbesar, yaitu Lactobacillus sp. SKG34 dan Lactobacillus sp. SKG49,

berturut-turut teridentifikasi sebagai Lactobacillus rhamnosus SKG34 dan L. ramnosus SKG49. Kedua

strain ini merupakan strain yang khas untuk susu kuda sumbawa dan sangat berpotensi untukdikembangkan menjadi probiotik.

Kata kunci : Susu kuda sumbawa, bakteri asam laktat, Lactobacillus rhamnosus, probiotik

ABSTRACT

A study was carried out to isolate and characterize lactic acid bacteria (LAB) from the Sumbawa

mares milk The Isolation of LAB was conducted in Man Rogosa Sharpe (MRS) agar. The isolates were

characterized by standard methods, such as Gram staining, cell morphology study and fermentation

activities. The ability of the isolates to inhibit some pathogenic bacteria was studied by dual culture

assay. Isolates showing the widest spectrum of inhibiting pathogenic bacteria were further identified

using API 50 CHL. The results showed that Sumbawa mare milk was dominated by lactobacilli and

weisella/leuconostoc. As many as 26 out 36 isolates belong to homofermentative lactobacilli and another10 isolates belong to both heterofermentative lactobacilli and weissella or leuconostoc. Twenty four isolates

inhibited the growth of Escherichia coli 25922, Shigela flexneri, Salmonella typhimurium, and Staphylococcus

aureus 29213. Two promising isolates with the widest spectrum of inhibiting pathogenic bacteria,

Lactobacillus sp. SKG34 and Lactobacillus sp. SKG49, were identified respectively as Lactobacillus

rhamnosus SKG34 and L. ramnosus SKG49. These two isolates were specific strains of the sumbawa mare

milk and are very potential to be developed as probiotic for human.

Key Words : Sumbawa mare milk, lactic acid bacteria, rhamnosus, probiotic



53

PENDAHULUAN

Pergeseran pola makan masyarakat moderndengan konsumsi bahan makanan yangmengandung protein dan lemak yang tinggi serta

kandungan serat yang rendah diduga sebagaisalah satu pemicu munculnya berbagai penyakityang berhubungan dengan saluran pen-cernaan(Saarela et al. 2002). Modifikasi komposisibakteri saluran pencernaan dapat dilakukanmelalui konsumsi bakteri hidup sehingga dapatmenjaga keseimbangan bakteri yangmenguntungkan di dalam saluran pencernaan,yang disebut dengan probiotik (Fuller, 1989).Bakteri probiotik bakteri yang beredar dipasaran umumnya dari golongan bakteri asamlaktat (BAL), khususnya dari genus

Lactobacillus dan Bifidobacterium . Adanyaklaim menyehatkan telah memicu perburuanstrain BAL dari berbagai sumber alamai, sepertisaluran pencernaan manusia dan hewan sertamakanan terfermenatsi secara tradisional.

Probiotik telah banyak dimanfaatkandalam penanggulangan berbagai penyakitinfeksi di negara-negara maju, sepertimenanggulangi diare pada anak-anak (Marteauet al, 2001), atopi (Kalliomaki et al. 2003),kelainan sistem imun (Isolauri et al. 2002),infeksi Helicobacter pylori, vaginosis (Reid et al.,2001), dan kanker kolon (Hirayama dan Rafter,1999). Probiotik yang beredar di pasarditujukan, 1) untuk mencegah diare(Lactobacillus acidophilus dikombinasikandengan Lactobacillus bulgaricus, L. rhamnosus

GG , Enterococcus faecium SF68i dan Bifidobacterium longum, Saccharomyces

boulardi ; 2) untuk menanggulangigastroenteritis akut L. rhamnosus GG ,

Lactobacillus reuteri, Lactobacillus casei strainShirota, Enterococcus faecium SF68 dan Sacc.

boulardi; 3) untuk mengatasi Traveller�s

diarrhoea: L. acidophilus, L. acidophilus

dikombinasikan dengan L. bulgaricus, L. fermentum strain KLD, L. rhamnosus GG danSacc. boulardi (Marteau et al. 2001).

Susu kuda sumbawa merupakan salah satu jenis susu hasil pemerahan kuda yang dilepasdi padang rumput di Nusa Tenggara Barat,khususnya di Kabupaten Dompu, Bima danSumbawa, dan di pasaran dikenal dengan nama�susu kuda liar� yang banyak diklaimmempunyai berbagai efek menyehatkan.Beberapa efek kesehatan yang diklaim darimeminum susu kuda liar adalah penyembuhan

bronchitis, paru-paru basah, tifus, menurunkankolesterol, hipertensi dan sebagainya. Susu kudasumbawa dapat menghambat pertum-buhanMycobacterium tuberculosis (Rijatmiko, 2003)dan bakteri patogen perusak bahan pangan

(Hermawati et al, 2004). Susu terfermentasialamiah memang banyak diklaim memberikandampak menyehatkan seperti yoghurt, susuterfermentasi dengan menggunakan L.

acidophilus yang dapat mencegah konstipasi,diare dan beberapa penyakit saluran pencernaan(Steinkraus, 1996). Hal tersebut memunculkanhipotesis bahwa dampak penyehatan yangditimbulkan oleh konsumsi susu kuda sumbawasebagai akibat aktifitas BAL dan atau metabolikmikroba pada susu kuda sumbawa. Di lainpihak terbatasnya penelitian yang dilakukan

khususnya pada aspek mikrobiologi dari susukuda sumbawa menyebabkan kurangnya buktiilmiah aspek penyembuhan penyakit melaluikonsumsi susu kuda sumbawa. Mengingat susukuda sumbawa mempunyai potensi yang khas,perlu dilakukan penelitian yang mendasaruntuk dapat menggali lebih dalam potensi susukuda liar sebagai makanan kesehatan.Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi danmengkarakterisasi BAL dalam susu kudasumbawa untuk pengembangan probiotik isolatlokal Indonesia guna meningkatkan derajatkesehatan masayarakat Indonesia.

METODE PENELITIAN

Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam

Laktat dari Susu Kuda Sumbawa

Susu kuda sumbawa yang dipergunakandalam penelitian ini adalah susu kuda sumbawaterfermentasi (susu asam) dalam kemasan yangdiperoleh dari penjual susu dan susu segar(tidak terfermentasi) yang diperoleh dariSumbawa. Sebanyak 1 ml dari masing-masingsampel susu diperkaya dengan menggunakan

100 ml medium MRS cair (de Man RogosaSharpe broth, Pronadisa) yang terdiri atas20 g/l dekstrosa, 10g/l pepton, 8g/l beef extract,5g/l Na-asetat, 4g/l yeast extract , 2g/l dipotasiumposfat, 1g/l tween 80, 2g/l diamonium sitrat, 0,2g/l magnesium sulfat, dan 0,05g/l mangan sulfat,dan diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jamdalam keadaan anaerob (anaerobic chamber,

Oxoid) yang diisi dengan gas generating kit

(Mitsubishi gas). Setelah diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37oC dilakukan pengenceranbertingkat dan selanjutnya 0,1 ml disebar pada

Sujaya et al Jurnal Veteriner



54

media MRS agar mengandung 60 ppmbromocresol purple dalam cawan petri (Sujayaet al. 2000). Cawan petri diinkubasi kembalipada kondisi yang sama dengan pemupukan diatas. Koloni BAL akan nampak sebagai koloni

yang dikelilingi oleh zona berwarna kuningselanjutnya diisolasi dan digores pada mediaMRS agar. Isolat murni selanjutnya disimpanpada larutan gliserol dengan konsentrasi akhir15% dan disimpan sebagai stok kultur pada suhu-20oC. Untuk biakan kerja (working culture)dibuat dalam bentuk kultur tusuk (stab).

Untuk konfirmasi isolat BAL dilakukan ujikatalase dan pengecatan Gram. Satu teteskultur di atas diteteskan di atas larutan 30%H

2O

2. Katalase positif ditandai dengan

terbentuknya gelembung udara (Kozaki et al.

1992). Pengecatan Gram dilakukan untukmelihat bentuk sel dan sifat Gram.Pembentukan gas dari glukosa dilakukan looppanas yang ditandai dengan terbentuknya buih(Sperber dan Swan, 1976).

Identitifiasi dilakukan pada strain yangberpotensi dikembangkan sebagai probiotikberdasarkan karakteristik penghambatanterhadap mikroorganisme patogen dankarakteristik pertumbuhan pada MRS broth.Isolat BAL dalam gliserol yang disimpan dalam freezer -20oC ditrasfer ke dalam MRS broth danselanjutnya diinkubasi pada suhu 37oC selama24 jam. Isolat BAL dimurnikan denganmenggores kembali (re-streaking ) pada mediumMRS agar untuk mendapatkan koloni tunggal(single colony isolation) selanjutnyadipergunakan dalam penelitian ini. Identifikasiuntuk menentukan spesies isolat Lactobacillus

spp, dilakukan dengan menggunakan API 50CHL kit (bioMerieux, Marcy l�Etoile, France)mengikuti protokol kerja yang diberikan (Annuket al. 2003).

Uji Daya Hambat Isolat Bakteri Asam

Laktat Terhadap Bakteri LainIsolat BAL ditumbuhkan pada media MRS

cair dan diinkubasi selama 24-48 jam pada suhu37oC. Sebanyak 1 ml dari kultur aktif diambil,kemudian disentrifugasi pada kecepatan 5.000rpm, selama 10 menit. Pengujian penghambatanisolat BAL terhadap beberapa bakteri patogendilakukan menurut metode Schillinger danLucke (1989) terhadap beberapa mikroba uji:Escherichia coli 25922, Shigela flexmeri,Salmonela typhimurium, dan Staphylococcus

aureus 29213. Sebanyak 0,1 ml kultur cair

mikroba uji ditambahkan ke dalam 15 mlnutrient agar (NA, yang komposisinyamengandung 1g/l beef extract, 2g/l yeast extract,5g/l pepton, 5g/l NaCl, pH 7,4 + 0,2 serta 0,85%agar) yang suhunya 55oC. Media NA yang telah

diinokulasi dengan bakteri indikator dituang kedalam cawan petri. Setelah agar membeku,dibuat sumur dengan menggunakan ujung pipetbiru (blue tip) yang dipotong sehingga besarnyadiameter sumur sekitar 3-4 mm. Sebanyak 10µl supernatan dari isolat BAL yang telahdipersiapkan sebelumnya diteteskan ke dalamsumur pada media NA dan selanjutnyadidiamkan selama 15-20 menit. Cawan petridiinkubasi pada suhu 37oC selama 48 jam danpenghambatan ditandai dengan terbentuknyazona bening. Isolat yang mampu menghambat

pertumbuhan mikroba uji dipergunakan untukpenelitian selanjutnya.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Isolat Bakteri Asam Laktat Dari Susu

Kuda Sumbawa

Sebanyak 36 isolat Gram positif dan katalasenegatif diisolasi dari susu kuda sumbawa yangterdiri dari golongan homofermentatif (26 isolat)and heterofermentatif (10 isolat) dengan bentuksel didominasi oleh bentuk batang pendek danbatang panjang dengan konfigurasi sel batangtunggal dan berbentuk rantai (Tabel 1). Isolatdengan kode SKG mempunyai bentuk danrangkaian sel yang khas, yaitu batang kurusdan panjang seperti benang (foto mikroskopiktidak tersedia). Semantara isolat yangteridentifasi sebagai Lactobacillus sp., Weissella

sp. atau Leuconostoc sp. mempunyai bentuk selbatang pendek Hasil penelitian jugamenunjukkan bahwa pada susu kuda sumbawasegar ditemukan BAL lebih beragam dari padasusu kuda sumbawa kemasan. Pada sususubawa segar lebih banyak ditemukan BAL yang

mempu membentuk gas (heterofermentatif BAL)dibandingkan dengan pada susu sumbawakemasan (asam dengan pH 3,1). Pembentukanasam diduga berasal dari BAL dan khamir padasusu kuda sumbawa selama fermentasi yangmembunuh lactobacilliheterofermentatif.

Kandungan nutrisi yang baik pada susudan hasil olahannya memicu pertumbuhan BALalamiah sehingga secara ekologis BALmendominasi komunitas mikroba. Cepatnyapertumbuhan BAL pada susu akan menye-babkan penurunan pH susu secara dramatis




55

karena pembentukan asam laktat yangmenghambat pertumbuhan bakteri lainnya.Salah satu produk susu terfermentasi secaraalamiah yang diketahui adalah koumis yaituminuman beralkohol yang merupakan produk

susu kuda terfermentasi dari Rusia (Steinkraus,1996). Susu kuda mengandung laktosa palingtinggi (6, 2 g/100 g susu kuda) susu yangdiproduksi oleh hewan lainnya seperti susu sapi4,7 gr/100 gr (Tamime dan Robinson, 1993). Dilain pihak, susu kuda mengandung protein yangpaling rendah (1,9 gr/100 gr) sementara sususapi mengandung 3,9 gr/100 gr protein.Kandungan laktosa yang tinggi ini menye-babkan susu kuda sumbawa terfermentasimempunyai pH yang rendah (pH 3,1) yangkemungkinan akibat fermentasi BAL dan

khamir (yeasts) pada suhu tropis sehinggacenderung membentuk asam organik yangberlebihan dibandingkan dengan pembentukanalkohol.

Karakteristik Bakteri Asam Laktat

Identifikasi dilakukan pada isolat yangterpilih berdasarkan kemampuannya untukmenghambat bakteri patogen yang dipergu-nakan sebagai indikator karakteristik individustrain seperti pertumbuhan dan kemampuanmemproduksi massa sel yang banyak padamedia cair. Dengan harapan bahwa strain yangdiidentifiaksi dapat dipergunakan untuk studipengembangan probiotik maka paling tidakstrain yang terpilih memenuhi kriteriapengembangan probiotik BAL (Klaenhammerdan Kullen, 1999) yang antara lain strain harusteridentifiaksi dengan baik, kemudahanteknologi produksi massa sel (kultivasi) danmempunyai aktivitas penghambatan terhadapbakteri pathogen. Dengan pertimbangan inimaka isolat Lactobacillus sp. SKG34 danLactobacillus sp. SKG49 dipilih untukdiidentifikasi lebih lanjut.

Lactobacillus sp. SKG34 dan Lactobacillussp. SKG49 mempunyai bentuk sel yang mirip,yaitu batang kurus dengan sel yang panjang(ukuran sel tidak bisa diberikan karenaketerbatasan kemampuan mikroskop yangada), tidak membentuk gas dari glukosa(homofermentatif lactobacilli). Hasil penelitianmenunjukkan bahwa setelah dibandingkandengan standar strain yang disediakan padapanduan Kit API 50 CHL, Lactobacillus spSKG34 dan Lactobacillus sp. SKG49diidentifikasi sebagai Lactobacillus rhamnosus.

Kedua isolat mempunyai pola fermentasi yangsangat mirip (Tabel 2, 3 dan 4). Perbedaaan padakedua strain ini hanya terlihat padakemampuan Lactobacillus sp. SKG34 dalammemfermentasi maltosa (microtube nomor 28)

dan amidon (microtube nomor 36), yang tidakdimiliki oleh Lactobacillus sp. SKG49. Hal inimenunjukkan bahwa kedua strain mempunyaikarakteristik yang berbeda. Hal yang menarikdari kedua strain tersebut adalah bahwa daristandar kit yang ada menunjukkan bahwa 99%L. rhamnosus mampu memfermentasi manosa(microtube nomor 28) tetapi tidak ditemukanL. rhamnosus memfermetasi amidon (microtube

nomor 36). Hal kontradiktif terjadi dimana L.

rhamnosus SKG34 memfermentasi maltosa danamidon sementara L. rhamnosus SKG 45 tidak

memfermentasi kedua karbohidrat tersebutsehingga secara fisiologis kedua strain inimempunyai kekhasan sendiri-sendiri dimana L.

rhamnosus SKG34 bersifat amidon positif sementara di lain pihak L. rhamnosus SKG49bersifat maltosa positif.

Berdasarkan deskripsi species L.

rhamnosus dikelompokkan ke dalam group Bb

Lactobacillus (Hammes and Vogel, 1995).Kelompok lactobacilli ini terdiri dari spesiesdengan tipe fakultatif heterofermentatif,sehingga sesuai dengan pengamatan dalampenelitian ini bahwa Lactobacillus sp. SKG34dan Lactobacillus sp. SKG49 tidak nampakmembentuk gas dari glukosa. Susu merupakansalah satu habitat L. rhamnosus (Hammes and Vogel, 1995) sehingga adalah rasional apabilaspecies ini juga terisolasi dari susu kudasumbawa. Di lain pihak adanya kekhasanfisiologis strain ini menibulkan pertanyan risetmengani klaisfikisasi dan sistematika strain iniyang perlu diteliti dimasa yang akan datang.Keunikan kedua strain ini perlu diteliti lebihlanjut untuk mengetahui apakah perbedaan polafermentasi karbohidrat juga berasosiasi dengan

potensi yang berbeda untuk pengembangannyasebagai probiotik seperti daya kolonisasi dalamsaluran pencernaan, stimulasi sistem imunyang ditimbulkan serta hubungannya denganefek menyehatkan lainnya bagi manusia.

Uji Daya Hambat Isolat Bakteri Asam

Laktat Terhadap Bakteri Patogen

Hasil penelitian menunjukkan bahwa 24dari 36 isolat menghambat pertumbuhan ke 4indikator mikroorgaisme yang dipergunakan dansisanya 12 isolat tidak menunjukkan peng-




56

Diameter zone hambatan(cm)No Isolat Gas Bentuk sel Identifikasi presumtif

Ec Slt. Shf Sta

1 SK1 + Batang pendek Lactobacillus sp./ Weissella sp./ Leuconostoc sp.

0,0 0,0 0,0 0,0

2 SK2 - Batang pendek Lactobacillus sp. 0,0 0,0 0,0 0,0

3 SK4 +Batang pendek Lactobacillus sp./

Weissella sp./ Leuconostoc sp.1,1 1,1 0,7 1,1









11 SK23 - Batang pendek Lactobacillus sp. 0,0 0,0 0,0 0,012 SK24 - Batang pendek Lactobacillus sp. 0,0 0,0 0,0 0,0





15 SKA 4 - Batang pendek Lactobacillus sp. 0,8 1,0 0,7 0,8

16 SKA14 - Batang pendek Lactobacillus sp. 0,7 0,6 0,7 0,7





21 YSK1 +

Batang pendek Lactobacillus sp./

Weissella sp./ Leuconostoc sp. 0,8 0,8 1,1 0,8

22 YSK2 +Batang pendek Lactobacillus sp./









27 SKG5 - Batang panjang Lactobacillus sp. 0,7 0,7 1,2 1,2



30 SKG10 - Batang panjang Lactobacillus sp. 0,9 0,9 1,5 1,331 SKG11 - Batang panjang Lactobacillus sp. 0,9 0,9 1,3 1,1



34 SKG34 - Batang anjang Lactobacillus sp. 0,8 0,8 1,2 1,0



Ec: Escherichia coli; Slt: Salmonella thypimurium; Shf: Shigella flexneri; Sta: Staphylococcus aureus

Tabel 1 Karakteristik bakteri asam laktat yang diisolasi dari susu kuda sumbawa




57

1 .

M i c r o t u b e n o 2 5 h a s i l p o s i t i f d i t u

n j u k k a n d e n g a n p e r u b a h a n w a r n a d a r i u n g u m e n j a d i h i t a m ( B

) ; ( 2 ) , +

= h a s i l p o s i t i f ( w a r n a p a d a m i c r o t u

b e k u n i n g ) , ( 3 )

G = h a s i l p o s i t i f n a m u n p e r t u m b u h a n i s o l a t r e l a t i f l a m b a t ( w a r n a p a

d a m i c r o t u b e h i j a u k e u n g u a n ) , d a n

( 4 ) , - = h a s i l n e g a t i f ( w a r n a p a d a m

i c r o t u b e u n g u )

2 .

A n g k a p a d a s t r a i n s t a n d a r y a n g

p a l i n g m e n d e k a t i p o l a f e r m e n t a s i i s o l a t S K G 3 4 d a n S K G 4 9 m e n u n j u k k a n j u m l a h s t r a i n y a n g m e m b e r i k a n h a s i l u j i

p o s i t i f d a r i 1 0 0 s t r a i n y a n g b e r b e d a y a n g d i u j i p a d a m a s i n g - m a s i n g

m i c r o t u b e ( p r o s e n t a s e s t r a i n y a n g

m e n u n j u k k a n h a s i l u j i p o s i t i f )

3 .

S t d : p o l a f e r m e n t a s i k a r b o h i d r a t

o l e h s t a n d a r L a c t o b a c i l l u s r h a m n o

s u s p a d a A P I 5 0 C H L .


T a b e l 2 . P o l a f e r m e n t a s i L a c t o b a c i l l u s s p . S K G 3 4 d a n s t r a i n s t a n d a r y a n g p a l i n g m e n d e k a t i p a d a K

i t A P I 5 0 C H L

T a b e l 3 . P o l a f e r m e n t a s i L a c t o b a c i l l u s s p . S K G 4 9 d a n s t r a i n s t a n d a r y a n g p a l i n g m e n d e k a t i p a d a K

i t A P I 5 0 C H L



58

hambatan pada indikator mikroorganisme yangdipergunakan (Tabel 1).

Susu kuda sumbawa dilaporkan mem-punyai aktivitas antimikrobial denganspektrum yang cukup luas (Hermawati et al.

2004). Tetapi, penghambatan yang didapatkanberasal dari komponen bahan aktif hasilekstraksi langsung dari susu kuda sumbawa.Pada penelitian ini beberapa isolat BAL mampumenghambat mikroorganisme patogen. Tetapi,aktivitas penghambatan terhadap mikro-organisme patogen tidak nampak setelahpengaruh asam pada supernatan yang diperolehdari isolat BAL dihilangkan melalui netralisaidengan NaOH. Hal ini menujukkan bahwapenghambatan yang terdeteksi sebelumnyakemungkinan disebabkan oleh metabolit lain

selain bakteriosin BAL. Penghambatan BALterhadap patogen melalui produksi asam laktatserta asam organik yang lainnya seperti asetatserta adanya hidrogen peroksida. Namundemikian, masih perlu dilakukan penelitianlanjutan untuk lebih memahami secaramekanistik penghambatan BAL terhadapbakteri patogen. Adanya penghambatan patogenoleh isolat BAL susu kuda sumbawa menunjukkan bahwa BAL memenuhi salah satupersyaratan dalam pengembangan probiotik(Klaenhammer dan Kullen, 1999), walaupunmasih diperlukan serangkaian penelitian tahapin vivo. Aktivitas penghambatan ini dijadikandasar dalam pemilihan isolat yangdipergunakan untuk penelitian selanjutnyadengan tujuan dalam pengembangan potensiBAL isolat susu kuda sumbawa sebagaiprobiotik.

SIMPULAN

Ganus Lactobacillus, Weissella dan atauLeucostoc adalah BAL dominan pada susu kudasumbawa. Tidak diketemukan BAL yang

membentuk bakteriosin sehingga aktivitasantimikrobial BAL yang diisolasi dari susukuda sumbawa terhadap E. coli 25922, Sh.

flexneri, S. typhimurium 29213 dan Staph.

aureus disebabkan oleh asam dan metabolitlainnya. Dua isolat, Lactobacillus sp. SKG34 danLactobacillus sp. SKG49 yang mempunyaikemampuan membentuk masa sel yang baikserta dapat menghambat beberapa bakteripatogen diidentifikasi sebagai L. rhamnosus.

Kedua strain ini mempunyai karakteristikfisiologis yang berbeda dengan umumnya L.

rhamnosus dalam kemampuannya memfer-mentasi maltosa dan amidon sehingga L.

rhamnosus yang diisolasi dari susu kudasumbawa merupakan strain yang khas.

SARAN

Perlu dilakukan penelitian lanjutan untukmengeksplorasi potensi probiotik BAL yangdiisolasi dari susu kuda sumbawa.

UCAPAN TERIMA KASIH

Penulis mengucapkan terima kasih kepadaBapak Bejamin, S.KM. atas bantuannyamendapatkan sampel susu kuda sumbawa segar.Penelitian ini didanai dari dana Pengembangan

Staf PS. IKM Univ. Udayana tahun 2006 sertaPengembangan Penelitian Unggulan di UPT.Lab. Terpadu Biosain dan Bioteknologi, Univ.Udayana Tahun 2006.

DAFTAR PUSTAKA

Annuk JS, Kullisaar T, Songisepp E, Zilmer M,Mikelsaar M. 2003. Characterization of intestinal lactobacilli as putative probioticscandidates. J Appl Microbiol 94: 403-412.

Fuller R. 1989. A Review: Probiotics in man andanimals. J Appl Bacteriol 66: 365-378.

Gibson GR, Roberfroid MB. 1995. Dietarymodulation of the human colonic microbiota-introducing the concept of prebiotics. J

Nutr125: 1401-1412.Hirayama K, Rafter J. 1999. The role of lactic

acid in prevention of colon cancer:mechanistic consideration. Ann van

Leewenhoek,.76: 391-394.Hammes WP, Vogel RF. 1995. The genus

Lactobacillus . In: Wood, B.J.B. andHolzapfel, W.H. (Ed). The Genera of Lactic Acid Bacteria. Blackie Academic &

Professional. London. Pp: 18-124.Hermawati D, Sudarwanto M, Soekerto ST,

Zakaria FR, Sudardjat S, Tjatur Rasa, F.S.2004. Aktivitas antimikroba pada susukuda sumbawa, J Teknol Industri

Pangan.15: 47-53.Isolauri E, Rautava S, Kalliomaki M,

Kirjavainen P, Salminen, S. 2002. Role of probiotics in food hypersensitivity. Curr Opin

Allergy Clin Immunol 2:263-267.




59

Kalliomaki M, Salminne S, Pussa T, ArvilommiH, Isolauri E. 2003. Probiotics andprevention of atopic disease: a randomisedplacebo-controlled trial. Lancet. 61:1869-1871.

Klaenhammer TR, Kullen MJ.1999. Selectionand design of probiotics. Int J Food

Microbiol.50:45�57Kozaki M, Uchimura Y, Okada S. 1992. Manual

for isolation and identification of lactic acidbacteria. Asakura shoten. Tokyo.

Marteau PR, de Vrese M, Cellier CJ,Schrezeenmeier J. 2001. Protection fromgastrointestinal diseases with the use of probiotics. Am J Clin Nutr 73: 430S-436S.

Reid G, Howard J, Gan BS. 2001. Can bacterialinterference prevent infection?. Trends in

Microbiol. 9: 424-427.Rijatmoko D. 2003. Pengaruh susu kuda

sumbawa terhadap petumbuhan Myco-

bacterium tuberculosis secara in vitro.Thesis. Bogor : Institut Pertanian Bogor.

Saarela M, Lahteenmaki L, Crittenden R,Salminen S, Mattila-Sandholm T. 2002. Gutbacteria and health foods: the Europeanpersefective. Int J Food Microbiol 78: 99-117.

Schillinger U, Lucke F. 1989. Antibacterialactivity of Lactobacillus sake isolated frommeat. Appl Environ Microbiol 55: 1901-1906.

Sperber WH, Swan J. 1976. Hot-loop test for the

determination of carbon dioxide productionfrom glucose by lactic acid bacteria. App.

Environ Microbiol 31: 990-991.Sujaya I N, Amachi S, Yokota A, Asano A,

Tomita F. 2000. Isolation and caharcte-rization of lactic acid bacteria in ragi tape.World J Microbiol Biotechnol 17:349-357.

Steinkraus KH. 1996. Indigenous Fermented

Foods Involving and Acid Fermentation:

Preserving and Enhancing Organoleptic

and Nutritional Qualities of Fresh Food.

In Steinkraus, K.H., (Ed) Handbook of

Indigenous Fermented Foods, 2nd

Ed. New York : Marcel Dekker, Inc. Pp: 111-348.

Tamime AY, Robinson RK. 1999. Yoghurt,

Sciene and Technology. CRC Press. New York. Pp: 1-9.


1. sujaya et al

Documents

Transcript of 1. sujaya et al