Download - TRANSFER GEN.ppt

8/14/2019 TRANSFER GEN.ppt

1/26

Dosen: DR. ABINAWANTO


2/26

PendahuluanStruktur DNA yang dipublikasikan olehWatson dan Crick pada tahun 1953 telahmembuka wahana bagi perkembangan

genetika molekularPerkembangan bioteknologi terkini telahmemasuki tahap pemasaran GEP(Genetically Engeneered Plants) yang lebih

dikenal dengan tanaman transgenik.

(Paolela 1998: 202)


3/26

Tanaman transgenik dapat dibuat

dengan menyisipkan suatu gen

(transgen)Transgen dapat diintroduksi ke dalam

sel inang dengan transformasi


4/26

Transformasi dapat dilakukan dengan beberapa

cara, yaitu:

(1) dengan perantara Agrobacteriumtumefaciens

(2) biolistik

(3) mikroinjeksi

(4) elektroporasi(5) transfer secara langsung dengan bantuan

zat kimia PEG.


5/26

Biolistik

Proses transformasi DNA denganpenembakan menggunakan partikelyang terbuat dari emas atau tungsten

Banyak digunakan pada tumbuhanmonokotil

Memanfaatkan tekanan udara untuk

mendorong partikel yang telah dilapisiDNA yang ingin disisipi ke sel


6/26

[Jr-academy (?): 4]


7/26

Prinsip Kerja BiolistikMembuat DNA (atau RNA) menjadi lengket,sehingga dapat melekat pada partikel yanglebih berat seperti atom logam (tungsten atau

emas).Partikel DNA tersebut dipercepat dalamruang hampa dan jaringan target diletakkanpada bagian yang dipercepat sehingga DNA

dapat diintroduksi dengan cepat

(McDonald 2002: 1)


8/26

Gene Gun

Alat yang biasa digunakan dalam metodebiolistik adalah PDS 1000/He.

Alat tersebut dapat mempercepat masuknya

partikel subseluler seperti tungsten atau emasyang telah dilapisi oleh DNA dengankecepatan tinggi menuju target.

PDS 1000/He dapat dengan tepat mentransfer

sel yang dikultur secara utuh. Teknik tersebutlebih efisien dan cepat daripada mikroinjeksiembrio

(Anonim 2006: 1).


9/26

PDS 1000/He

[Lisbeth. P. 2001]


10/26

Cara Kerja Gene Gun

(Skematik)

(Anonim 2006: 1)


11/26

Aplikasi Biolistik

Aplikasi biolistik diantaranya:

Vaksinasi DNA,

Terapi gen,Biologi tumor,

Penyembuhan luka,

Virologi tumbuhan.

(Voiland & McCandless 1999: 1)


12/26

Aplikasi Biolistik (2)

Beberapa contoh produk aplikasi biolistik:

Padi tahan kadar garam tinggi dankekeringan yang disisipi gen gandum

Padi tahan hama serangga yang disisipigen kentang

Buah-buahan perenial tahan virus

(Voiland & McCandless 1999: 1)


13/26


14/26


15/26

Kendala Aplikasi BiolistikPenetrasi partikel yang dangkal

Kerusakan sel

Keharusan jaringan target yang untuk

beregenerasi,Mahalnya biaya peralatan, dan

Kekhawatiran bahwa DNA asing dapatpindah ke tumbuhan liar dan seranggasehingga terjadi resistansi

(Mcdonald 2002: 1)


16/26

TEKNIK TRANSFORMASI

LAINNYA


17/26

Agrobacterium tumefaciens

Bakteri gram negatif yang

menyebabkan penyakit tumor pada

tanaman dikotilMengandung plasmid Ti (tumour-

inducing plasmid)


18/26

TI-PLASMID


19/26

PROSES


20/26


21/26


22/26

Alat mikroinjeksi

Proses

Mikroinjeksi


23/26


24/26


25/26

Perbedaan biolistik dan

beberapa teknik transformasi


26/26

SEKIAN