Bakteri coliform adalah golongan bakteri intestinal, yaitu hidup dalam saluranpencernaan manusia. Bakteri coliform adalah bakteri indikator keberadaan bakteri patogeniklain. Lebih tepatnya, sebenarnya, bakteri coliform fekal adalah bakteri indikator adanyapencemaran bakteri patogen. Penentuan coliform fekal menjadi indikator pencemarandikarenakan jumlah koloninya pasti berkorelasi positif dengan keberadaan bakteri patogen.Selain itu, mendeteksi Coliform jauh lebih murah, cepat, dan sederhana daripada mendeteksibakteri patogenik lain. Contoh bakteri coliform adalah, Esherichia coli dan Entereobacteraerogenes. Jadi, coliform adalah indikator kualitas air. Makin sedikit kandungan coliform,artinya, kualitas air semakin baik.Terdapatnya bakteri coliform dalam air dapat menjadi indikasi kemungkinan besaradanya organisme patogen lainnya. Bakteri coliform dibedakan menjadi 2 tipe, yaitu faecalcoliform dan non-faecal coliform. E. coli adalah bagian dari faecal coliform. Keberadaan E. colidalam air dapat menjadi indikator adanya pencemaran air oleh tinja. E. coli digunakan sebagaiindikator pemeriksaan kualitas bakteriologis secara universal dalam analisis dengan alasan;a) E. coli secara normal hanya ditemukan di saluran pencernaan manusia (sebagai flora normal)atau hewan mamalia, atau bahan yang telah terkontaminasi dengan tinja manusia atau hewan;jarang sekali ditemukan dalam air dengan kualitas kebersihan yang tinggi,b) E. coli mudah diperiksa di laboratorium dan sensitivitasnya tinggi jika pemeriksaan dilakukandengan benar,c) Bila dalam air tersebut ditemukan E. coli, maka air tersebut dianggap berbahaya bagipenggunaan domestik,d) Ada kemungkinan bakteri enterik patogen yang lain dapat ditemukan bersama-sama denganE. coli dalam air tersebut.Penting untuk kita mengetahui adanya bakteri coliform atau tidak, yaitu bila terjadiperubahan warna jadi kuning/orange dan terdapat gas pada tabung durham maka pada sampeltersebut terdapat bakteri golongan coliform. Bila belum mengalami perubahan warna maka airdieramkan lagi 48 jam, jika dalam 48 jam tidak ada perubahan warna maka air tersebut tidakmengandung bakteri coliform. Untuk mengetahui jumlah sel bakteri golongancoli f orm yang terdapatdalam sampel air, dilakukan metoda Jumlah Perkiraan Terdekat atau Most Probable Number, untukmenentukan apakah air yang digunakan masih sesuai peruntukannya sebagai air minum atau tidak.Berdasarkan hasil percobaan yang dilakukan terhadap 8 sampel yang di uji (air merekaqua, air masak, air zam-zam, air sumur, air tanah, air pam, air keran, air kosan), terdapat tigatahap pengujian yang dilakukan yaitu :a. Uji PradugaMedia pada tabung adalah Lactose Broth yang diberi indikator perubahan pH danditambah tabung durham. Pemberian sampel pada tiap seri tabung berbeda-beda. Untuk sampelsebanyak 10 ml ditumbuhkan pada media LBDS (Lactose Broth Double Stegth) yang memilikikomposisi Beef extract (3 gr),peptone (5 gr),lactos e (10 gr) dan Bromthymol Blue (0,2 %) perliternya. Untuk sampel 1 ml dan 0,1 ml dimasukkan pada media LBSS (Lactose Broth SingleStegth) yang berkomposisi sama tapi hanya kadar laktosa setengah dari LBDS yaitu 5 gr.1.Tanda positif pada tabel hasil pengamatan menunjukkan adanya bakteri coliformdalam sample air yang diuji. Indikator yang digunakan dalam melakukan pengamatan iniadalah dengan melihat perubahan warna yaitu menjadi kuning, ada gelembung dalam tabungdurham dan gas pada tabung reaksi, hal ini terjadi karena mikroba (bakteriColifor m) yangtumbuh mampu memfermentasikan laktosa menjadi asam dan gas. Gelembung gasmenunjukan adanya metabolisme pada bakteri tersebut. Berdasarkan tabel hasil pengamatanhanya sampel 3,4 6, dan 8 yang positif pada waktu inkubasi 24 jam sedangkan sampel 5( air tanah ) dan 7 (air keran) terbentuk gas pada inkubasi 48 jam sehingga di sebutmeragukan.2.Tanda negatif (-) pada tabel menunjukkan tidak terdapatnya gelembung dalamtabung durham dan gas pada tabung reaksi, hal ini menunjukkan tidak terdapat aktivitasmikroba (bakteriColifor m) dalam tabung kultur. Hasil negatif terdapat pada sampel 1 dan 2.3.Nilai MPN ditentukan dengan kombinasi jumlah tabung positif (asam dan gas)tiap serinya setelah diinkubasi. Untuk inkubasi 24 jam 4.Hasil sample air pada tabung yang positif ( sampel 3, 4, 6 dan 8 ) dan yangmeragukan ( sampel 5 dan 7) kemudian dilakukan uji lanjut, yaitu uji penguat.b. Uji PenguatPada uji ini digunakan medium EMB yang komposisinya terdiri dari Pepton 10 gram, 5gram lactose, 2 gram42HPOK, 13.5 gram agar, 0.4 gram eosin Y, 0.065 Methylene blue. EMB(Eosin-Methylen Blue) merupakan media selektif untuk isolasi dan diferensial bakteri enterik,karena kandungan eosin akan menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif, sedangkanMethylen Blue sebagai indikator fermentasi laktosa dan sukrosa yang ditunjukkan oleh adanyaperubahan warna Hasil dari isolasi pada media EMB tampak adanya koloni berbentuk bulat,sirkuler dan halus berwarna hijau metalic sheen yaitu pada sampel 6 ( Air pam) dan sampel 7 (airkeran) . Fermentasi laktosa dan sukrosa membentuk koloni berwarna gelap. Presipitat gelap inimungkin MB-eosionate yang dipresipitasi sebagai akibat pH rendah yang berada di sekitarkoloni yang memfermentasi laktosa atau sukrosa. Sedangkan pada 4 petri lainnya tidak terjadiwarna hijau metalik hal ini menunjukan pada ke empat sampel air tersebut tidak ditemukannyaE.coli. Untuk lebih meyakinkan adanya keberadaan E.coli pada sampel tersebut maka perlulahdilakuka uji selanjutnya yaitu uji Penyempurna. c. Uji PenyempurnaUji ini dilakukan untuk memperkuat dugaan bahwa pada sampel air 6 dan 7 terdapatbakteri E.coli. Pada uji ini dilakukan dua pengujian yaitu dengan menggunakan LB dan tabungdurham sedangkan yang kedua dengan menanam bakteri tersebut pada NA agar miring sehinggasetelah inkubasi selama 24 jam dapat diamati di bawah mikroskop dengan terlebih dahulumelakukan pewarnaan gram. LB digunakan untuk menguji kembali terbentuknya gas padatabung durham sebagai hasil fermentasi lactose oleh E.coli dan berdasarkan hasil percobaan padakedua tabung reaksi terbentuk gelembung gas. Namun pada pengamatan mikroskop, sampelnomor 6 ( air pam ) teridentifikasi adanya bakteri gram negatif yang ditandai dengan warna pinkpada dinding selnya, dan bentuknya berupa basil pendek. Berdasarkan identifikasi tersebutberarti pada sampel 6 terdapat E.coli. Lain halnya dengan sampel 7 (air keran), hasil pengamatandi bawah mikroskop mengidentifikasikan bakteri yang ada adalah bakteri gram positif yangditandai dengan warna ungu pada dinding sel yang terwarnai dengan bentuknya berupa basilpendek. Berdasarkan identifikasi tersebut berarti pada sampel 7 tidak terdapat E.coli. KESIMPULAN.Koliform sebagai suatu kelompok dicirikan sebagai bakteri berbentuk batang, gramnegatif, tidak membentuk spora, aerobik dan anaerobik fakultatif yang memfermentasilaktosa dengan menghasilkan asam dan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 35oCFaktor-faktor yang mempengaruhi pengidentifikasian bakteri E.coli adalah sebagaiberikut :a.Media cair Lactosa Broth yang digunakan untuk media penanaman bakteri karenamemiliki molekul gula yang lebih sederhana sehingga mudah difermentasi olehbakteri.b.Tabung durham pada tabung reaksi yang digunakan untukmengidentifikasi adanya metabolism bakteri coliform dimana udara pada tabungdurham yang merupakan hasil dari fermentasi dari laktosa.c.Media EMBA yang digunakan untuk dapat digunakan untuk penanaman bakteri.Pengidentifikasian bakteri E. coli tersebut dilakukan dengan berbagai tahapan,mulai dari pembiakan bakteri pada lactose broth, penanaman pada EMBA, yangkemudian dilanjutkan dengan pengecatan gram. Sampel akan dikatakan mengandungbakteri E. coli apabila menunjukkan warna hijau metalik.Bakteri coliform adalah bakteri indikator keberadaan bakteri patogenik lain.DAFTAR PUSTAKASujaya, I Nengah.2005.Penuntun Praktikum Mikrobiologi.Denpasar:Program Studi IlmuKesehatan Masyarakat.Dwidjoseputro, D. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Surabaya: DjambatanPelczar, Michael. 2006. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta : UI PressDarkuni, M. Noviar. 2001. Mikrobiologi (Bakteriologi, Virologi, dan Mikologi). Malang:Universitas Negeri Malang.