UJI POTENSI BAKTERI ENDOFIT DARI BEBERAPA JENIS … · UJI POTENSI BAKTERI ENDOFIT DARI BEBERAPA...
Transcript of UJI POTENSI BAKTERI ENDOFIT DARI BEBERAPA JENIS … · UJI POTENSI BAKTERI ENDOFIT DARI BEBERAPA...
UJI POTENSI BAKTERI ENDOFIT DARI BEBERAPA JENIS JAGUNG
SEBAGAI PENAMBAT NITROGEN DAN PENGHASIL HORMON IAA
(Indole Acetic Acid)
SKRIPSI
Diajukan sebagai Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Strata Satu (S1)
pada Program Studi Agroteknologi
Oleh:
DYAH KURNIANINGTIYAS
Nim. 201010200311035
PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI
JURUSAN AGRONOMI
FAKULTAS PERTANIAN-PETERNAKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2014
HALAMAN PERSEMBAHAN
“I believe, DREAMING is the first step that you have to make.
While, the act is the next step that you have to do.”
Keyakinan atas kebesaran ALLAH merupakan harapan dan solusi, karna
Ibrahim As mengatakan “Tidak ada orang yang berputus asa dari rahmat
TuhanNya, kecuali orang-orang yang sesat”. (QS Al Hijr:56)
“Mom, I Love You more than anything in the world”
Syukur Alhamdulillah dipanjatkan kepada ALLAH SWT, Tuhan Semesta
Alam yang Maha Pengasih, Maha Penyayang, Maha Adil, Maha Bijaksana, Maha
Melihat, Maha Mendengar, Maha Pemenuh doa, Maha Pengampun, Maha pemaaf
atas semua rahmatNya yang tak terhingga.
Skripsi ini dipersembahkan kepada :
1. Ibunda Suliyantiningsih dan Ayahanda Sugiarto, atas segala doa, motivasi
yang selalu mengiringi hingga sampai saat ini.
2. Mas Kikik, Mbak Dewi, Mas Wahyu dan adik Ozy, saudara tercinta.
3. Tita, Ifa dan Kiki, sahabat sepanjang masa.
4. Para pencari ilmu, semoga skripsi ini dapat bermanfaat.
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan pada tanggal 17 Mei 1992 di Sidoarjo, Jawa
Timur, sebagai putri ketiga dari empat bersaudara. Ayahanda
bernama Sugiarto dan Ibunda bernama Suliyantiningsih. Penulis
menyelesaikan pendidikan Taman Kanak-Kanak tahun 1996 di
TK Dharma Wanita Krian, melanjutkan Sekolah Dasar di SD
Negeri 1 Krian (1998-2004). Sekolah Menengah Pertama di
SMP Negeri 1 Krian (2004-2007), kemudian Sekolah Menengah Atas di SMA
Muhammadiyah 1 Gresik (2007-2010).
Pada tahun 2010 penulis melanjutkan pendidikan di Jurusan Agronomi
Fakultas Pertanian-Peternakan, Universitas Muhammadiyah Malang hingga
selesai. Selain menjadi mahasiswa fakultas pertanian-peternakan, penulis juga
pernah menjabat sebagai Sekretaris di Komisi Pemilihan Umum Raya Fakultas
Pertanian-Peternakan (2011-2012), Anggota di Himpunan Mahasiswa Jurusan
Agronomi (2011-2012), dan Bendahara Senat Mahasiswa Fakultas Pertanian
Peternakan (2011-2012). Penulis juga pernah menjadi asisten laboratorium di
Laboratorium Biologi (2011-2013) dan asisten laboratorium Mikrobiologi di
Laboratorium Hutan (2014).
KATA PENGANTAR
Syukur Alhamdulillah kehadirat Allah SWT atas limpahan nikmat dan
hidayah-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Potensi
Bakteri Endofit Dari Beberapa Jenis Jagung Sebagai Penambat Nitrogen
Dan Penghasil IAA (Indole Acetic Acid)”. Penelitian ini merupakan salah satu
syarat untuk mendapatkan gelar sarjana (Strata Satu) di Jurusan Agronomi
Fakultas Pertanian-Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.
Pada kesempatan ini, penulis menyampaikan terima kasih kepada :
1. Dr.Ir. Ali Ikhwan, MP. selaku dosen pembimbing utama yang telah
memberikan bimbingan, arahan, dan saran kepada penulis, dari sebelum
pelaksaan penelitian hingga terselesaikannya laporan penelitian ini dan
Ir. Henik Sukorini, MP. P.hD selaku dosen pembimbing pendamping yang
telah memberikan bimbingan, arahan, dan saran kepada penulis, dari sebelum
pelaksaan penelitian hingga terselesaikannya laporan penelitian ini.
2. Dr. Ir. Erny Ishartati, MP. dan Dr. Ir. Aniek Iriany, MP. selaku dewan penguji
yang selalu bersedia memberikan segala informasi, bimbingan, arahan, dan
saran kepada penulis.
3. Kepala beserta Staff Lab. Bioteknologi UMM yang telah membantu dalam
penyediaan alat-alat dan tempat yang sangat dibutuhkan selama penelitian.
4. Teman – teman seperjuangan agronomi angkatan 2010 yang ikut membantu
dalam proses pengerjaan skripsi.
Penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi perbaikan
penulisan selanjutnya. Semoga tulisan ini dapat bermanfaat bagi semua pihak
yang memerlukannya.
Malang, Juli 2014
Penulis
vii
DAFTAR ISI
Isi Halaman
KATA PENGANTAR ............................................................................. vii
DAFTAR ISI ............................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................. x
DAFTAR TABEL ................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................... xi
RINGKASAN .......................................................................................... xii
I. PENDAHULUAN ............................................................................ 1
1.1. Latar Belakang ......................................................................... 1
1.2. Tujuan ...................................................................................... 4
1.3. Hipotesis .................................................................................. 4
II. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................. 5
2.1. Bakteri Endofit Dalam Tanaman ............................................. 5
2.2. Peran Bakteri Endofit Dalam Tanaman ................................... 6
2.3. Unsur Hara N .......................................................................... 8
2.3.1 Fungsi N Dalam Tanaman ............................................... 8
2.3.2 Mekanisme Fiksasi N ....................................................... 8
2.4. Hormon IAA ............................................................................ 10
2.4.1 Fungsi IAA Dalam Tanaman ............................................ 10
2.4.2 Sintesis IAA ..................................................................... 11
2.5. Tanaman Jagung ...................................................................... 13
2.5.1 Morfologi Tanaman Jagung ............................................. 13
2.5.2 Fase Pertumbuhan Jagung ................................................ 15
III. METODE PENELITIAN ........................................................... 16
3.1. Tempat dan Waktu .................................................................. 16
3.2. Alat dan Bahan ........................................................................ 16
3.3. Tahapan Pelaksanaan Penelitian ............................................. 16
3.3.1. Pengambilan Sampel Tanaman Jagung ......................... 16
viii
3.3.2. Isolasi Bakteri Endofit ................................................... 17
3.3.3 Uji Kemampuan Bakteri Endofit Secara In Vitro ......... 19
a. Uji Kemampuan Fiksasi N2 ........................................... 19
b. Uji Kemampuan Produksi Hormon Pertumbuhan IAA. 19
3.3.4 Analisis Produksi IAA Oleh Bakteri Endofit Jagung .... 20
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................... 21
4.1. Isolasi Bakteri Endofit ............................................................ 21
4.2. Uji Fiksasi N ........................................................................... 27
4.2.1. Jagung Cantel ................................................................ 29
4.2.2. Jagung Manis Hibrida ................................................... 31
4.2.3. Jagung Lokal ................................................................ 34
4.2.4. Jagung Hibrida .............................................................. 35
4.2.5. Bagian Jaringan Akar .................................................... 38
4.2.6 Bagian Jaringan Batang ................................................ 39
4.2.7. Bagian Jaringan Daun ................................................... 40
4.2.8 Bagian Jaringan Biji/Tongkol ........................................ 41
4.3 Uji Sintesis Hormon IAA Ekstraseluler ................................. 42
V. PENUTUP ....................................................................................... 48
5.1. Kesimpulan ............................................................................ 48
5.2. Saran ...................................................................................... 49
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................. 50
LAMPIRAN ............................................................................................. 44
ix
DAFTAR GAMBAR
Nomor Halaman
1. Skema Siklus Penambatan N2 ...................................................... 10
2. Mekanisme Produksi Hormon (IAA, diacetyl, acetoin dan 2,3
butanediol) Pada Bakteri Endofit ................................................. 12
3. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dari Tanaman Jagung
Cantel ........................................................................................... 31
4. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dari Tanaman Jagung
Manis Hibrida .............................................................................. 33
5. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dari Tanaman Jagung
Lokal ............................................................................................ 35
6. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dari Tanaman Jagung
Hibrida .......................................................................................... 37
7. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dalam Jaringan Akar Pada
Tanaman Jagung .......................................................................... 39
8. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dalam Jaringan Batang Pada
Tanaman Jagung .......................................................................... 40
9. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dalam Jaringan Daun Pada
Tanaman Jagung .......................................................................... 41
10. Grafik Pertumbuhan Bakteri Endofit Dalam Jaringan Tongkol
Pada Tanaman Jagung ................................................................. 42
11. Produksi IAA Dari Beberapa Isolat Bakteri Endofit Pada Tanaman
Jagung Cantel, Jagung Manis Hibrida, Jagung Lokal Dan Jagung
Hibrida .......................................................................................... 45
12. a) Kurva Pertumbuhan Isolat Bakteri Penambat N Terbaik Dari
Tanaman Jagung ........................................................................... 46
b) Produksi IAA Terbaik Oleh Isolat Bakteri Dari Tanaman Jagung 46
x
DAFTAR TABEL
Nomor Halaman
1. Total Isolat Bakteri Endofit Dari Beberapa Jenis Tanaman Jagung .......................................................................................... 21
2. Karakteristik Morfologi Bakteri Endofit Dari Tanaman Jagung .. 25
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor Halaman
1. Riwayat Denah Penanaman Sampel Tanaman Jagung ................. 54
2. Denah Pengambilan Sampel Tanaman Jagung ............................ 58
3. Komposisi Media Dan Reagen Salkowski .................................... 59
4. Pedoman Karakterisasi Morfologi Bakteri ................................... 60
5. Tabel Pengamatan Uji Potensi Bakteri Endofit Dari Tanaman
Jagung Penghasil Fiksasi N .......................................................... 62
6. Kurva Standart IAA .................................................................... 67
7. Nilai Absorbansi Uji Sintesis IAA Ekstraseluler ......................... 68
8. Dokumentasi Alat Dan Bahan ...................................................... 69
9. Dokumentasi Pengamatan ............................................................ 70
xi
DAFTAR PUSTAKA
Andreote, F. D., W. L. Araujo, J. L. Azevedo, J. D. Elsas, U. N. Rocha and L. S.
Overbeek. 2009. Endophytic Colonization of Potato (Solanum tuberosum
L) by a Novel Competent Bakterial Endopyte, Pseudomonas putida
Strain P9, and Its Effect on Associated Bacterial Communities.
Appl.Environ.Microbiol. 75(11): 3396-3406.
Ajdukovic, K.J. and D.M. Vasic. 2005. “Different Sterilization Methods For
Overcoming Internal Bacterial Infection In Sunflower Seeds”. Proc. Nat.
Sci, Matica Srpska Novi Sad. 109: 59-64.
Arifah, S. M. dan S. Purwati. 1993. Budidaya Tanaman Padi dan Palawija.
Universitas Muhammadiyah Malang: 168-171.
Barac, T., S. Taghavi, B. Borremann, A. Provoost, L. Oeyen, J. V. Colpaert, J.
Vangronsveld and D. van der Lelie. 2004. “Enginered endophitic bacteria
improve phytoremediation of water-soluble, volatile, organic pollutants”.
Natural Biotechnology. 22(5): 583-588.
Compant, Stéphane., B. Reiter, A. Sessitsch, J. Nowak, C. Clément and E. A.
Barka. 2005. Endophytic Colonization of Vitis vinifera L. by Plant
Growth-Promoting Bacterium Burkholderia sp. Strain PsJN. Appl.
Environ. Microbiol. 71(4): 1685-1693.
Cruz, L. M., E. M. Souza, O. B. Weber. J. I. Baldani., J. Dobereiner, and F. de.O.
Pedrosa. 2001. “16S ribosomal DNA characterization of nitrogen-fixing
bacteria isolated from Banana (Musa spp.) and Pineapple (Ananas
comosus L)”. Applied and Environmental Microbiology: 2375-2379.
Dong, Zhongmin., J. Martin, Canny, E. Margaret, McCully, R. R. Maria., F.C
Clemente., O. Eduardo and R. Rosita. 1994. “A Nitrogen-Fixing
Endophyte of Sugarcane Stems”. Plant Physiol. 105: 1139-1147.
Dwidjoseputro. 1989. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Penerbit Djambatan: Jakarta.
Fosket, E.D. 1994. Plant Growth and Development. Academic Press: USA.
Gyaneshwar, Prasad., E. K. James, N. Mathan, P. M. Reddy, B. Reinhold-Hurek
and J. K. Ladha. 2001. Endophytic Colonization of Rice by a
Diazotrophic Strain of Serratia marcescens. Journal of Bacteriology.
183(8): 2634-2645.
Hajoeningtijas, O. D. 2012. Mikrobiologi Pertanian. Graha Ilmu: Yogyakarta.
Heddy, S. 1989. Hormon Tumbuhan. Rajawali Pers: Jakarta.
Ikhwan, Ali. 2008. “Uji Potensi Rhizobakteri Perombak Pestisida DDT sebagai
Pupuk Hayati (Biofertilizer)”. Publikasi-P2U-biofertilizer. (online)
http://www.ejournal.umm.ac.id/index.php/gamma/article/view/100/114.
Jensen, P and Robert S.B. 1994. “Metabolism and Synthesis of Indole-3-Acetic
Acid (IAA) in Zea Mays”. Plant Physiol. 106: 343-351
Khairani, G. 2009. Isolasi dan Uji Kemampuan Bakteri Endofit Penghasil
Hormon IAA (Indole Acetic Acid) dari Akar Tanaman Jagung (Zea mays
L.). [Skripsi]. Medan: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,
Universitas Sumatera Utara.
Mendes, Rodrigo., A.A. Pizzirani-Kleiner, W.L. Araujo and J.M. Raaijmakers.
2007. Diversity of Cultivated Endophytic Bacteria From Sugarcane:
Genetic and Biochemical Characterization of Burkholderia cepacia
Complex Isolates. Applied and Environmental Microbiology.
73(22):7259-7267.
Mujibur, M.R. 2013. Isolasi dan Uji Potensi Bakteri Endofit dari Empat Jenis
Tanaman Padi dalam Menambat N dan Mensintesis Hormon IAA
Ekstraseluler. [Skripsi] Malang. Fakultas Pertanian-Peternakan.
Universitas Muhammadiyah Malang.
Munif, Abdul., J. Hallmann., and R. Sikora. 2012. “Isolation of Endophytic
Bacteria From Tomato And Their Biocontrol Activities Againts Fungal
Diseases”. Journal Microbiology 6(4): 148-156.
Prakamhang, Janpen. 2007. Microbial Communities and Their nifh Gene
Expression in Rice Endophytic Diazotroph Bacteria. A thesis Submitted
in Partial Fulfillment of the Requirements for the degree of Master of
Science in Biotechnology Suranaree University of Technology. Thailand.
Prasetyoputri, A. dan A. Ines. 2003. “Mikroba Endofit: Sumber Molekul Acuan
Baru Yang Berpotensi”. BioTrends. 1(2): 13-15.
Rai, Rhitu., P.K. Dash, B.M. Prasamna and A. Singh. 2007. ”Endophytic Bacterial
Flora In The Stem Tissue of a Tropical Maize (Zea mays L) Genotype:
Isolation: Identification and Enumeration”. World J. Microbiol
Biotechnol. 23: 853-858.
Ratna, I.D.A. 2007. Fiksasi N biologis pada ekosistem tropis. [online]
http://pustaka.unpad.ac.i/wp-
content/uploads/2009/06/rhizobia_mklh_1.pdf. Diakses pada tanggal 7
Mei 2014.
Reynold, J. 2011. Bacterial Colony Morphology. Biol 2421. Richland College
Schlegel, H. G. 1989. Mikrobiologi Umum alih bahasa Baskoro, Tedjo. Gadjah
Mada University Press: Yogyakarta.
Simanungkalit, R. D. M., Saraswati, Rasti, R. D. Hastuti dan E. Husen. 2006.
“Bakteri Penambat Nitrogen dalam Pupuk Organik dan Pupuk Hayati”.
Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Sumberdaya Lahan Pertanian:
113-140.
Sofyadi, E. 2011. Aspek Budidaya, Prospek, Kendala, dan Solusi Pengembangan
Sorgum Di Indonesia. [Online] http://edysof.wordpress.com/
2011/04/21/aspek-budidaya-prospek-kendala-dan-solusi-pengembangan-
sorgum-di-indonesia. Diakses pada tanggal 18 Juli 2014.
Sophyan, R. 2013. Deskripsi Jagung. [Online]
http://rahmatsophyan.blogspot.com/ 2013/08/deskripsi-jagung.html.
Diakses pada tanggal 18 Juli 2014.
Strobel, G. A. and B. Daisy. 2003. Bioprospecting for Microbial Endopyhytes and
Their Natural Products. Microbiology and Molecular Biology Review
:491-502.
Subekti, N. A., Syafruddin, E. Roy dan S. Sri. 2013. Morfologi Tanaman dan
Fase Pertumbuhan Jagung. Balai Penelitian Tanaman Serealia. Maros:
16-28.
Sukara, E. 2007. “Present Status And Challenges On Agricultaral Microbe Bio-
Prospecting In Indonesia”. Annales Bogorienses, 11(1): 31-39.
Suriaman, E. 2010. Potensi Bakteri Endofit Dari Akar Tanaman Kentang
(Solanum tuberosum) Dalam Menfiksasi N2 Di Udara Dan
Menghasilkan Hormon IAA Secara In Vitro. [Skripsi]. Malang: Fakultas
Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Malang.
Suseno, H. 1974. Fisiologi Tumbuhan: Metabolisme Dasar Dan Beberapa
Aspeknya. Institut Pertanian Bogor.
Susilowati, D. N., R. Saraswati dan E. Yuniarta. 2003. “Isolasi dan Seleksi
Mikroba Diazotrof Endofitik dan Penghasil Zat Pemacu Tumbuh pada
Tanaman Padi dan Jagung”. Balai Penelitian Bioteknologi dan
Sumberdaya Genetik Pertanian: 128-143.
Taghavi, S., C. Garafola., S. Monchy., L. Newman., A. Hoffman., N. Weyens., T.
Barac., J. Vangronsveld and D.V.D. Lelie. 2009. “Genome Survey and
Characterizations of Endophytic Bacteria Exhibiting a Beneficial Effect
on Growth and Development of Poplar Trees”. Applied and
Environmental Microbiology.75(3): 748-757.
Urquiaga, S., K.H.S. Cruz and R.M. Boddey. 1992. “Contribution of Nitrogen
Fixation to Sugarcane: 15
N and Nitrogen Balance Estimates”. Soil Sci.
Soc. Am. J. 56: 105-114.
Willey. J.M, M.S. Linda and J. W. Christopher. 2009. Prescott’s Principles of
Microbiology. McGraw-Hill Higher Education: 118-134.
Wisnhugitha. 2012. Komoditi Jagung Manis. [Online]
http://wisnhugitha.wordpress.com/2012/12/04/komoditi-jagung-manis.
Diakses pada tanggal 18 Juli 2014.
Yurnaliza, M.W. Siregar dan N. Priyani. 2013. “Peran Bakteri Endofit Penghasil
IAA (Indole Acetic Acid) Terseleksi Terhadap Pertumbuhan Tanaman
Padi (Oryza sativa L)”. Prosiding Seminar Nasional Biologi: 219-228.