UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium …repository.ump.ac.id/6172/1/COVER.pdf ·...
Transcript of UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium …repository.ump.ac.id/6172/1/COVER.pdf ·...
i
UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium
polyanthum) TERHADAP BAKTERI Aeromonas hydrophila
GPl-04 SECARA IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat
Mencapai Derajat Sarjana (S-1)
Oleh :
NANI TRISNAYANTI
1001070062
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2014
ii
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
iii
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
iv
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
v
OMOOM
﴾وإلى ربك ٧﴾فإذا فرغت فانصب﴿٦العسر يسر﴿ إن مع
﴾٨فارغب﴿
“ Sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan, maka apabila engkau telah
selesai (dari sesuatu urusan) kerjakanlah dengan sungguh-sungguh (urusan yang
lain), dan hanya kepada Tuhanmulah engkau berharap”
( QS. Al Insyirah : 6 – 8)
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
vi
PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan untuk :
1. Ayah dan ibuku tercinta
2. Adikku (Alfi Retnowati)
3. Seluruh keluarga besar, Sahabat, dan Teman-teman seperjuangan biologi
angkatan 2010 Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
vii
UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium
polyanthum) TERHADAP BAKTERI Aeromonas hydrophila GPl-04
SECARA IN VITRO
Nani Trisnayanti
1001070062
ABSTRAK
Kebutuhan terhadap protein ikan terus meningkat setiap tahunnya
sehingga mendorong masyarakat untuk melakukan budidaya ikan. Namun, dalam
proses budidaya ikan banyak mengalami kendala, salah satunya adalah timbulnya
penyakit pada ikan. Penyakit MAS merupakan penyakit pada ikan yang
disebabkan oleh bakteri Aeoromonas hydrophila. Penanggulangan yang selama
ini dilakukan dengan pemberian antibiotik sintetik. Pemberian antibiotik sintetik
sudah efektif, tetapi menyebabkan bakteri menjadi resisten dan beresiko
menimbulkan residu dalam tubuh ikan. Oleh karena itu, dibutuhkan bahan alami
sebagai alternatif lain untuk mengganti antibiotik sintetik tersebut. Salah satu
bahan alami yang dapat digunakan adalah daun salam (Syzygium polyanthum).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keefektivan ekstrak daun salam
terhadap pertumbuhan bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04. Penelitian
dilaksanakan selama bulan Maret – Juni 2014 di Laboratorium Terpadu dan
Laboratorium Biologi Fakultas Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Metode
penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen menggunakan Rancangan
Acak Lengkap (RAL) dengan 3 kali ulangan pada masing-masing konsentrasi,
yaitu konsentrasi 30%, 40%, 50%, 60%, 70% (v/v), dan kontrol positif
(kloramfenikol). Parameter yang diamati adalah zona hambat yang dihasilkan oleh
ekstrak daun salam dan antibiotik kloramfenikol. Analisis data dilakukan
menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) dengan uji F pada taraf
kepercayaan 95% dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pada taraf
kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun salam
mempunyai kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila GPl-04,
dan terdapat perbedaan yang bermakna antar perlakuan. Namun, berdasarkan tabel
CLSI kemampuan penghambatan tersebut termasuk kategori resisten dan tidak
efektif jika dibandingkan dengan antibiotik kloramfenikol. Hasil perbandingan
kesetaraan antara ekstrak daun salam dan antibiotik kloramfenikol adalah 10.656 :
1 (satuan ppm).
Kata kunci : Aeromonas hydrophila GPl-04, daun salam, efektivitas, kesetaraan,
kloramfenikol
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
viii
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Alloh SWT atas segala limpahan
rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul “Efektifitas Ekstrak Daun Salam (Syzygium polyanthum) Terhadap
Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04 Secara In Vitro”.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang setulus-
tulusnya kepada Dini Siswani Mulia, S.Pi, M.Si dan Drs. Arif Husin, M.Si yang
telah membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulisan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai
pihak, oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih juga kepada :
1. Drs. Ahmad, M.Pd, selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan
Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si, selaku ketua Program Studi Pendidikan Biologi
Fakultas Keguruan dan Ilmu Pedidikan Universitas Muhammadiyah
Purwokerto.
3. Para Dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu
Pedidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
4. Staf Laboratorium Program Studi Pendidikan Biologi dan Staf Laboratorium
Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
5. Ayah dan ibuku tercinta sebagai tanda bukti, hormat, dan terima kasih atas
segala kasih sayang, dukungan, dan doa yang tiada mungkin dapat kubalas
hanya dengan selembar kertas yang tertuliskan kata cinta.
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
ix
6. Keluarga yang telah membantu dan mendukung penelitian penulis.
7. Arif Suryadin terima kasih telah meluangkan waktunya, selalu mendukung,
dan mendoakan.
8. Sahabat-sahabatku (Fitriah, Selvy, Umul, Langgeng, Wahyudianto) semoga tali
silahturahmi kita tidak akan pernah terputus.
9. Teman-teman kost (Ida, Azizah, Widi, Wiwi, Eka) terima kasih untuk motivasi
dan nasehat – nasehatnya.
10. Teman-teman Pendidikan Biologi angkatan 2010.
11. Semua pihak yang ikut serta membantu dalam penulisan skripsi ini yang tidak
dapat penulis sebutkan satu persatu.
Penulis menyadari sepenuhnya akan segala keterbatasan pengetahuan dan
kemampuan yang penulis miliki, sehingga diperlukan kritik dan saran yang dapat
membangun dan bermafaat.
Akhir kata semoga Alloh SWT selalu melimpahkan rahmat, karunia, dan
hidayah-Nya dan semoga skripsi ini bermanfaat bagi para pembaca.
Purwokerto, 12 Agustus 2014
Penulis
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
x
DAFTAR ISI
Halaman
UCAPAN TERIMAKASIH ........................................................................... viii
DAFTAR ISI .................................................................................................. x
DAFTAR TABEL .......................................................................................... xiii
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xv
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................. 1
A. Latar Belakang ................................................................................ 1
B. Rumusan Masalah ........................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................ 3
D. Manfaat Penelitian .......................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 4
2.1 Bakteri Aeromonas hydrophila .................................................... 4
2.1.1 Klasifikasi Bakteri A. hydrophila ......................................... 4
2.1.2 Morfologi Bakteri A. hydrophila ......................................... 4
2.1.3 Habitat dan Penyebaran Baketri A. hydrophila ................... 5
2.1.4 Penyakit MAS dan Gejala Penyerangannya ......................... 5
2.2 Antibiotik ........................................................................................ 6
2.3 Tanaman Salam .............................................................................. 8
2.3.1 Klasifikasi Tanaman Salam ................................................. 8
2.3.2DeskripsiTanaman Salam ..................................................... 8
2.3.3ManfaatTanaman Salam ....................................................... 9
2.3.4KandunganMetabolit Sekunder Tanaman Salam ................. 9
2.4 Simplisia ......................................................................................... 11
2.5 Ekstraksi ......................................................................................... 12
2.6 Kromatografi Lapis Tipis (KLT) .................................................... 14
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
xi
Halaman
BAB III METODEPENELITIAN ................................................................. 15
3.1. Waktu dan Tempat Penelitian .................................................. 15
3.2. Alat dan Bahan ......................................................................... 15
3.2.1 Alat yang Digunakan dalam Penelitian ............................. 15
3.2.1.1 Alat untuk Pembuatan Ekstrak Daun Salam ........... 15
3.2.1.2 Alat Uji Fitokimia Simplisia Daun Salam .............. 15
3.2.1.3 Alat Uji Fitokimia Ekstrak Daun Salam dengan
Bantuan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) .............. 15
3.2.1.4 Alat Uji Efektivitas Antibakteri Daun Salam ......... 16
3.2.2 Bahan yang Digunakan dalam Penelitian .......................... 16
3.2.2.1 Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04 ................... 16
3.2.2.2 Ekstrak Daun Salam ................................................ 16
3.2.2.3 Media Tumbuh Bakteri A. hydrophila GPl-04 ........ 16
3.2.2.4 Kloramfenikol ......................................................... 17
3.3 Rancangan Penelitian ................................................................ 17
3.4 Cara Kerja ................................................................................. 17
3.4.1 Pembuatan Ekstrak Daun Salam ....................................... 17
3.4.2 Uji Fitokimia Simplisia Daun Salam ................................ 18
3.4.3 Uji Fitokimia Ekstrak Daun Salam dengan Bantuan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ...................................... 19
3.4.4 Membuat Media Tumbuh BakteriA. hydrophila GPl-04 .. 20
3.4.5 Purifikasi Bakteri A. hydrophila GPl-04 ........................... 21
3.4.6 Perhitungan Jumlah Sel Bakteri Bakteri Menggunakan
Metode Total Plate Count (TPC) ...................................... 21
3.4.7 Uji Sensifitas Antibiotik Pembanding Kloramfenikol
Terhadap Bakteri A. hydrophila GPl-04 ............................ 22
3.4.8 Uji Daya Hambat Antibakteri Ekstrak Daun Salam .......... 23
3.4.9 Penentuan Kesetaraan Efektivitas Ekstrak Daun Salam
dengan Antibiotik Pembanding Kloramfenikol ................. 23
3.4.10 Analisis Data ................................................................... 24
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
xii
Halaman
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 25
4.1 Pembuatan Ekstrak Daun Salam ................................................ 25
4.2 Uji Fitokimia Simplisia Daun Salam ......................................... 26
4.3 Uji Fitokimia Ektrak Daun Salam dengan Bantuan
Kromatografi Lapis tipis (KLT) ............................................... 28
4.4 Purifikasi Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04 ..................... 29
4.5 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri (A. hydrophila GPl-04)
Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ...................... 30
4.6 Uji Sensifitas Antibiotik Pembanding Kloramfenikol ............... 32
4.7 Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Salam Terhadap Bakteri A.
hydrophila GPl-04 .................................................................... 33
4.8 Kesetaraan Ekstrak Daun Salam dengan Antibiotik Pembanding
Kloramfenikol ........................................................................... 36
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 39
A. Kesimpulan ..................................................................................... 39
B. Saran ................................................................................................ 39
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 40
LAMPIRAN .................................................................................................. 43
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
xiii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Berat Bahan Baku Pembuatan Ekstrak Daun Salam .................... 25
Tabel 4.2 Hasil Uji Simplisia Daun Salam .................................................. 27
Tabel 4.3 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Daun Salam dengan Bantuan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................................ 28
Tabel 4.4 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Uji (Aeromonas
hydrophila GPl-04) Menggunakan Metode Total Plate Count
(TPC) .......................................................................................... 30
Tabel 4.5 Hasil Uji Sensifitas Antibiotik Kloramfenikol ........................... 32
Tabel 4.6 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Salam ............................. 34
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
xiv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Daun Salam (Syzygium polyanthum) ........................................ 8
Gambar 4.1 Ekstrak Daun Salam .................................................................. 26
Gambar 4.2 Uji Kandungan Senyawa Kimia Simplisia Daun Salam ........... 27
Gambar 4.3 Uji Fitokmia Ekstrak Daun Salam dengan Bantuan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................................ 29
Gambar 4.4 Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04 dalam Media GSP ...... 30
Gambar 4.5 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Uji (Aeromonas
hydrophila GPl-04) Menggunakan Metode Total Plate Count
(TPC) .......................................................................................... 31
Gambar 4.6 Hasil Uji Sensivitas Antibiotik Pembanding Kloramfenikol .... 33
Gambar 4.7 Hasil Uji Daya Hambat Daun Salam ........................................ 36
Gambar 4.8 Kurva Hubungan Antara Konsentrasi Kloramfenikol
dengan Diameter Zona Hambat .................................................. 37
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Daun Salam
(Syzygium polyanthum) .............................................................. 44
Lampiran 2 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri (Aeromonas
hydrophila GPL-04) Menggunakan Metode Total Plate
Count (TPC) ............................................................................... 45
Lampiran 3 Standar Zona Hambat Antibiotik Menurut CLSI ...................... 46
Lampiran 4 Hasil Analisis Statistik Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Salam 47
Lampiran 5 Hasil Analisis Regresi Linear Sederhana Antibiotik
Kloramfenikol ............................................................................ 50
Lampiran 6 Dokumentasi Penelitian ............................................................. 52
Uji Efektivitas Ekstrak..., Nani Trisnayanti, FKIP, UMP, 2014