UJI EFEKTIVITAS BERBAGAI MEDIA SELEKTIF UNTUK ISOLASI Trichoderma spp. DARI TANAH PADA BERBAGAI

LAHAN YANG BERBEDA

Oleh

BINTI MIFTAKHUN NIKMAH

UNIVERSITAS BRAWIJAYA FAKULTAS PERTANIAN

MALANG

2017

UJI EFEKTIVITAS BERBAGAI MEDIA SELEKTIF UNTUK ISOLASI Trichoderma spp. DARI TANAH PADA BERBAGAI

LAHAN YANG BERBEDA

Oleh

BINTI MIFTAKHUN NIKMAH

135040200111026

PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI

MINAT HAMA DAN PENYAKIT TUMBUHAN

SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar

Sarjana Pertanian Strata Satu (S-1)

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

FAKULTAS PERTANIAN JURUSAN HAMA DAN PENYAKIT TUMBUHAN

MALANG

2017

PERNYATAAN

Saya menyatakan bahwa segala pernyataan dalam skripsi ini merupakan

hasil penelitian saya sendiri, dengan bimbingan komisi pembimbing. Skripsi ini

tidak pernah diajukan untuk memperoleh gelar di perguruan tinggi manapun dan

sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang

pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang dengan jelas

ditunjukkan rujukannya dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Malang, Agustus 2017

Binti Miftakhun Nikmah

Skripsi ini kupersembahkan untuk

Kedua orang tuaku tercinta Ibu Tutik Mubarokah dan Bapak Ahmad Muhtarom serta Keluarga yang selalu mendoakan, mendukung dan membimbingku.

i

RINGKASAN

BINTI MIFTAKHUN NIKMAH (135040200111026): Uji Efektivitas Berbagai Media Selektif untuk Isolasi Trichoderma spp. dari Tanah pada Berbagai Lahan yang Berbeda. Dibimbing oleh Prof. Dr. Ir. Abdul Latief Abadi, MS., sebagai Pembimbing Utama dan Restu Rizkyta Kusuma, SP., MP., M.Sc., sebagai Pembimbing Pendamping

Trichoderma sp. merupakan salah satu jamur tanah yang tersebar luas dan hampir dapat ditemui di lahan pertanian ataupun hutan. Trichoderma sp. banyak digunakan sebagai agens hayati karena memiliki kemampuan antibiosis, parasitisme, dan kompetisi. Permasalahan yang masih banyak ditemui di masyarakat adalah petani masih bergantung pada penggunaan fungisida dalam teknik pengendalian penyakit. Penggunaan fungisida sintetis selain dapat menimbulkan kerusakan tanah juga dapat meninggalkan residu di dalam tanah dan tanaman sehingga menyebabkan kerusakan ekosistem, berkurangnya mikroorganisme tanah, dan kerentanan tanaman. Isolasi Trichoderma spp. dari tanah seringkali sulit karena pesatnya pertumbuhan jamur tanah lainnya pada media agar biasa yang dapat menghambat pertumbuhan Trichoderma sp.. Tujuan dilaksanakannya penelitian ini adalah memperoleh media efekif untuk isolasi Trichoderma spp. dari tanah dan mengetahui pengaruh pengelolaan lahan terhadap keanekaragaman spesies Trichoderma spp. pada berbagai lahan.

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Sentral Ilmu Hayati Universitas Brawijaya Malang. Pengambilan sampel tanah uji dari hutan raya R. Suryo, Cangar dan sampel tanah dari lahan krisan milik Kelompok Tani bunga krisan Mulyo Joyo di desa Sidomulyo, Batu. Waktu penelitian dimulai dari bulan Februari sampai bulan Juli 2017. Penelitian dilakukan dengan menggunakan metode survei, eksplorasi dan komparasi. Pelaksanaan penelitian terdiri dari dua unit percobaan, yang pertama uji efektivitas media selektif untuk isolasi Trichoderma sp. dengan menggunakan 4 media yaitu PDAC (Potato Dextrose Agar + Chloramphenichol), RBC (Rose bengal + Chloramphenichol), PDACP (Potato Dextrose Agar + Chloramphenichol + propamocarb), dan RBCP (Rose bengal + Chloramphenichol + propamocarb). Percobaan kedua untuk melihat kelimpahan jenis Trichoderma spp. dari 4 lahan yang berbeda yaitu lahan krisan PHT, lahan krisan konvensional I, lahan krisan konvensional II, dan lahan hutan.

Hasil uji efektivitas media selektif untuk isolasi Trichoderma sp.,

menunjukkan bahwa media RBCP dan RBC merupakan media yang lebih efektif dibanding media PDAC dan PDACP karena mampu menumbuhkan Trichoderma sp., meskipun belum selektif karena Penicillium sp. dan Fusarium sp. masih mampu tumbuh pada media. RBC merupakan media buatan yang mengandung rose bengal yang menghambat pertumbuhan jamur dan khamir, dan kloramfenikol sebagai antibakteri. Sedangkan RBCP merupakan media RBC yang ditambahkan propamocarb hydrochloride sebagai antimjaur. Hasil eksplorasi Trichoderma sp. dengan media RBC dan RBCP pada lahan krisan PHT yaitu T. viride, T. harzianum dan T. longibrachiatum. Pada lahan krisan konvensional I didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T. koningii dan T. harzianum. Pada pada lahan konvensional II ditemukan 1 spesies Trichoderma sp. yaitu T. harzianum. Sedangkan lahan hutan didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T. koningii dan T. viride.

ii

SUMMARY

BINTI MIFTAKHUN NIKMAH (135040200111026): Effectiveness Test of Selective Media for Isolation Trichoderma spp. from Soil on Different Areas. Supervised by prof. Dr. Ir. Abdul Latief Abadi, MS. and Restu Rizkyta Kusuma, SP., MP., M.Sc.

Trichoderma sp. is one of the soil fungi and almost can be found in agricultural lands or forest. Trichoderma sp. widely used as a biological agent to control soil pathogens because it has the ability of antibiosis, parasitism, and competition. The problem that is still widely found in the community is that farmers still depend on the use of fungicides in disease control techniques. The use of synthetic fungicides in addition to causing soil damage can also leave residues in the soil as well as crops causing ecosystem damage, reduced microorganisms in it, and crop susceptibility. In addition, to isolate Trichoderma spp. from soil is often difficult because of the rapid growth of other soil fungi on ordinary media that can inhibit the growth of Trichoderma sp. The purpose of this research is to obtain an effective media for the isolation of Trichoderma spp. from the soil and know the effect of land management on the diversity of species Trichoderma spp. on various lands.

The research was conducted at Central Laboratory of Biological Sciences Universitas Brawijaya, Malang. Sampling of test ground from R. Suryo, Cangar and chrysanthemum field belonging to Chrysanthemum Group of Mulyo Joyo in Sidomulyo village, Batu. The research started from February to July 2017. The research was conducted by using survei method, exploration and comparison. The implementation of the research consisted of two experimental units, the first being to test the effectiveness of Selective Media Trichoderma sp. using four media, namely PDAC (Potato Dextrose Agar Chloramphenichol), RBC (Rose bengal Chloramphenichol), PDACP (Potato Dextrose Agar Chloramphenichol propamocarb hydrochloride), and RBCP (Rose bengal Chloramphenichol propamocarb hydrochloride). The second experiment to see the diversity of Trichoderma spp. from various field uses soil samples from 4 different areas i.e

IPM chrysanthemum, first conventional chrysanthemum field, second conventional chrysanthemum field and forest.

The results of effectiveness test of a selective medium for Trichoderma spp. indicated that RBCP and RBC are more effective than PDAC and PDACP because they are able to grow Trichoderma sp., although Penicillium sp. and Fusarium sp. are still growing, but the numbers are fewer than on the PDAC and PDACP. RBC is an artificial medium containing rose bengal as an inhibitory growth of fungi and yeast, and chloramphenicol as antibacterial. While RBCP is an RBC that added propamocarb hydrolcoride as an anti-fungal. RBC and RBCP are then used for exploration of Trichoderma sp. on chrysanthemum field and forest. Species Trichoderma sp. most commonly found in the IPM chrysanthemum field of 3 Trichoderma species, including T. viride, T. harzianum and T. longibrachiatum. In the first conventional chrysanthemum field obtained 2 species of Trichoderma sp. namely T. viride and T. harzianum. In the second conventional chrysanthemum found 1 species of Trichoderma sp. namely T. harzianum. While In forest obtain 2 species of Trichoderma sp. are T. koningii and T. viride.

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan

hidayah-Nya kepada kita semua, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi

yang berjudul “Uji Efektivitas berbagai Media Selektif untuk Isolasi Trichoderma

spp. dari Tanah pada Berbagai Lahan yang Berbeda”.

Pada kesempatan kali ini penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-

besarnya, kepada Prof. Dr. Ir. Abdul Latief Abadi, MS. dan Restu Rizkyta Kusuma,

SP., MP., M.Sc., selaku dosen pembimbing atas segala kesabaran, saran,

motivasi dan bimbingan yang diberikan kepada penulis. Ucapan terima kasih juga

penulis sampaikan kepada Dr. Ir. Mintarto Martosudiro, MS. dan Dr. Akhmad

Rizali, SP., M.Si., selaku penguji atas nasihat, arahan dan bimbingannya. Juga

kepada Ketua Jurusan Dr. Ir. Ludji Pantja Astuti, MS. beserta seluruh dosen dan

karyawan Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan Universitas Brawijaya atas

keramahan, fasilitas dan bantuan yang diberikan.

Penghargaan yang tulus penulis berikan kepada orang tua tercinta, kakek,

nenek serta seluruh keluarga penulis yang selalu mendoakan, memberikan

motivasi dan pengorbanannya baik dari segi moril ataupun materil kepada penulis.

Juga kepada Ahmad Ubaidillah, terima kasih atas dukungan, motivasi, doa dan

juga bantuannya. Seluruh teman – teman sebimbingan, khususnya Ismalia

Rosidah yang menjadi partner penulis selama penelitian. Ana Waumrina, Yayan

Nurkhasanah, Amalia Rizki, Rohiyatul Miskah, Asima Purba, Medi Humaidi dan

teman – teman yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu, terima kasih atas

dukungan dan kebersamaannya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.

Tidak lupa penulis mengucapkan terima kasih kepada teman – teman Kos Bahagia

Anisa Mufida, Rozy Ifthaqul Fariha, Aprilia Nur Andhini, Fauziyah Ghina Tsamarah

dan Ima Fitriani atas dukungan, semangat dan doanya. Juga kepada teman –

teman di Buyung Kos Tutik, Fitri, Dinda, Afni, Mbak Nita atas motivasi dan

dukungannya serta semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu

yang telah membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

Penulis berharap semoga hasil penelitian ini dapat bermanfaat bagi banyak

pihak dan memberikan sumbangan pemikiran dalam kemajuan ilmu pengetahuan.

Malang, Agustus 2017

Penulis

iv

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Blitar pada tanggal 5 November 1994 sebagai putri

tunggal dari Bapak Ahmad Muhtarom dan Ibu Tutik Mubarokah.

Penulis menempuh pendidikan dasar di SDN Bakung 02 Blitar pada tahun

2001 sampai tahun 2007, kemudian penulis melanjutkan ke SMPN 01 Srengat

pada tahun 2007 dan selesai pada tahun 2010. Setelah selesai menempuh

pendidikan SMP, penulis melanjutkan pendidikan di SMAN 01 Srengat pada tahun

2010 sampai tahun 2013. Penulis terdaftar sebagai mahasiswa Strata Satu (S-1)

Program Studi Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya

Malang, Jawa Timur, melalui jalur tes tulis Seleksi Bersama Masuk Perguruan

Tinggi Negeri (SBMPTN).

Selama menjadi mahasiswa, penulis pernah menjadi asisten praktikum

Mata Kuliah Dasar Budidaya Tanaman semester genap 2014/205 dan semester

genap 2015/2016, Ilmu Penyakit Tumbuhan semester genap 2016/2017 dan

Mikologi Pertanian semester genap 2016/2017. Penulis juga pernah mengikuti

kegiatan magang kerja selama 3 bulan yaitu bulan Juli – Oktober 2016 di Kampung

Organik Brenjonk, Trawas, Mojokerto.

v

DAFTAR ISI

RINGKASAN ............................................................................................................. i SUMMARY ............................................................................................................... ii KATA PENGANTAR ............................................................................................... iii RIWAYAT HIDUP .................................................................................................... iv DAFTAR ISI.............................................................................................................. v DAFTAR TABEL ..................................................................................................... vi DAFTAR GAMBAR ................................................................................................ vii I. PENDAHULUAN .................................................................................................. 1

1.1. Latar Belakang ..................................................................................................... 1 1.2. Rumusan Masalah .............................................................................................. 2 1.3. Tujuan ................................................................................................................... 2 1.4. Hipotesis ............................................................................................................... 2 1.5. Manfaat ................................................................................................................. 3

II. TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................................... 4 2.1. Jamur Trichoderma sp. ....................................................................................... 4

2.1.1. Klasifikasi Trichoderma sp. ......................................................................... 4 2.1.2. Morfologi dan Fisiologi Trichoderma sp .................................................... 4 2.1.3. Ekologi Trichoderma sp. ............................................................................. 5 2.1.4. Peran Trichoderma sp ................................................................................. 6

2.2. Medium Pertumbuhan Mikroba ......................................................................... 7 III. METODE PENELITIAN.................................................................................... 10

3.1. Tempat dan Waktu Penelitian.......................................................................... 10 3.2. Alat dan Bahan .................................................................................................. 10 3.3. Metode Pelaksanaan ........................................................................................ 10 3.4. Variabel Pengamatan ....................................................................................... 16

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................... 18 4.1. Hasil Uji Efektivitas Media Selektif .................................................................. 18 4.2. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. .................................................................... 20

4.2.1. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media RBC ......................... 20 4.2.2. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media RBCP ...................... 21

4.3. Kenampakan Morfologi Trichoderma sp. ....................................................... 23 4.4. Pembahasan Umum ......................................................................................... 26

V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................................... 29 5.1. Kesimpulan ......................................................................................................... 29 5.2. Saran ................................................................................................................... 29

DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 30 LAMPIRAN ............................................................................................................ 33

vi

DAFTAR TABEL

Nomor Hal Teks

1. Jenis lahan pada percobaan II.......................................................................... 14 2. Hasil Isolasi jamur dari tanah hutan pada empat media selektif..................... 18 3. Hasil Isolasi jamur tanah dari lahan krisan dengan media RBC dan RBCP .. 20 4. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media buatan RBC ........................ 21 5. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media buatan RBCP ..................... 22

vii

DAFTAR GAMBAR

Nomor Hal Teks

1. Diagram tahapan penelitian .............................................................................. 11 2. Penentuan titik pengambilan sampel tanah ..................................................... 15 3. Trichoderma koningii ......................................................................................... 23 4. Trichoderma viride ............................................................................................ 24 5. Trichoderma harzianum .................................................................................... 25 6. Trichoderma longibrachiatum ........................................................................... 25

Lampiran

1. Dokumentasi Lahan tempat pengambilan sampel tanah ................................. 33 2. Pengambilan sampel tanah di lapang .............................................................. 33 3. Media buatan untuk uji efektifitas media selektif .............................................. 34 4. Kegiatan penelitian ........................................................................................... 34 5. Hasil isolasi tanah hutan pada empat media.................................................... 34 6. Denah Lokasi Lahan Krisan di Desa Sidomulyo, Batu; ................................... 35

I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Trichoderma sp. merupakan salah satu jamur tanah yang tersebar luas dan

hampir dapat ditemui di lahan pertanian ataupun hutan. Anggota jamur dari genus

Trichoderma merupakan jamur yang hidup bebas pada tanah dan daerah sekitar

akar tanaman (rhizosfer). Jamur ini bersifat menguntungkan, avirulen dan menjadi

parasit jamur lainnya (Harman et al., 2004). Trichoderma sp. merupakan jamur

tanah yang berperan dalam menguraikan bahan organik tanah, dimana bahan

organik tanah ini mengandung beberapa komponen unsur seperti N, P, S dan Mg

serta unsur hara lain yang dibutuhkan tanaman dalam pertumbuhannya (Tindaon,

2008). Trichoderma sp. banyak digunakan sebagai agens hayati untuk

mengendalikan patogen tular tanah. Mekanisme kerja jamur Trichoderma sp.

sebagai agens hayati adalah antagonis terhadap jamur lain. Penekanan patogen

berlangsung dengan proses antibiosis, parasitisme, kompetisi O2 dan ruang yang

dapat mematikan patogen tersebut (Tindaon, 2008). Hal ini merupakan salah satu

kelebihan pemanfaatan Trichoderma sp. sebagai agens hayati khususnya untuk

patogen tular tanah.

Permasalahan yang masih banyak ditemui di masyarakat adalah mayoritas

petani masih bergantung pada penggunaan fungisida yang intensif dalam

mengendalikan OPT. Hasil survei tahun 1992 (Abadi, et.al, 1993) pada petani-

petani sayuran di Batu, Malang mengidentifikasikan penggunaan beberapa

fungisida berspektrum luas. Umumnya petani menyemprot fungisida pada

tanaman dengan interval 2-3 kali setiap minggu dengan dosis 1 kg/200 liter air

yang setara dengan konsentrasi 5 gram/liter air. Penyemprotan fungisida dapat

ditambah intervalnya bila cuaca dianggap menguntungkan hama dan penyakit.

Pengelolaan lahan pertanian juga menjadi salah satu faktor yang dapat

mempengaruhi kelimpahan jamur tanah, termasuk Trichoderma sp. Penerapan

sistem pertanian konvensional yang masih menggunakan pestisida kimia sebagai

pilihan utama dalam pengendalian hama penyakit kurang tepat. Penggunaan

fungisida sintetis selain dapat menimbulkan kerusakan tanah, resistensi dan

resurgensi patogen target, juga dapat meninggalkan residu di dalam tanah dan

juga tanaman sehingga menyebabkan kerusakan ekosistem dan berkurangnya

mikroorganisme di dalamnya. Hal ini dikarenakan tanah merupakan habitat bagi

bermacam-macam mikroorganisme. Muhibbudin et al. (2011), menyebutkan

bahwa keberadaan mikroorganisme tanah berpengaruh terhadap sifat fisik dan

2

kimia tanah karena dapat berperan sebagai dekomposer, penambat unsur hara

dan sebagai agens biokontrol. Peningkatan keanekaragaman jamur tanah dapat

menekan kejadian dari dominasi tipe mikroorganisme yang menyebabkan patogen

sehingga dapat menurunkan kemungkinan adanya penyakit pada tanaman.

Di samping itu, untuk mengisolasi Trichoderma spp. dari tanah seringkali

sulit karena pesatnya pertumbuhan jamur tanah selain Trichoderma sp. pada

media agar biasa yang dapat menghambat pertumbuhan Trichoderma sp..

Sehingga diperlukan suatu media selektif yang mampu mengisolasi Trichoderma

sp. dari tanah. Penelitian terkait media selektif untuk isolasi Trichoderma spp. juga

tergolong masih sedikit. Di Indonesia, sampai saat ini belum pernah dilaporkan

penelitian mengenai media selektif untuk isolasi Trichoderma spp. dari tanah.

Berdasarkan uraian tersebut, penelitian ini dilakukan untuk menguji berbagai

media selektif yang efektif untuk isolasi Trichoderma spp. dari tanah dengan

penambahan antibiotik dan antijamur serta melihat kelimpahan Trichoderma spp.

dari berbagai jenis lahan. Sehingga, diharapkan memperoleh media yang efektif

untuk isolasi Trichoderma spp. dari tanah dan dapat mengetahui pengaruh

pengelolaan lahan terhadap keberadaan Trichoderma sp. di dalam tanah.

1.2. Rumusan Masalah

Rumusan masalah untuk penelitian ini adalah:

1 Apa media yang efektif untuk isolasi Trichoderma spp. dari tanah?

2 Bagaimana pengaruh pengelolaan lahan terhadap keberadaan Trichoderma

sp. dalam tanah?

1.3. Tujuan

Tujuan dilaksanakannya penelitian ini adalah:

1. Mengetahui media yang efekif untuk isolasi Trichoderma spp. dari tanah.

2. Mengetahui kelimpahan Trichoderma sp. pada berbagai lahan yang berbeda.

1.4. Hipotesis

Hipotesis yang diajukan dalam penelitian ini adalah:

1. Media selektif dengan penambahan antibiotik dan antijamur yang tepat dapat

mengoptimalkan proses isolasi Trichoderma spp. dari tanah dibanding media

buatan yang sedikit atau tanpa penambahan antibiotik dan antijamur.

2. Kelimpahan Trichoderma sp. yang ditemukan pada lahan tanpa penggunaan

fungisida sintetis lebih tinggi dibanding pada lahan yang menggunakan

fungisida sintetis.

3

1.5. Manfaat

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai media

yang efektif untuk isolasi Trichoderma spp. dari tanah. Selain itu dapat

memberikan informasi terkait kelimpahan Trichoderma sp. pada berbagai lahan

sehingga dapat digunakan untuk memperkirakan jenis Trichoderma sp. yang ada

di tanah secara optimal.

II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Jamur Trichoderma sp.

2.1.1. Klasifikasi Trichoderma sp.

Trichoderma sp., merupakan mikroorganisme anggota Kingdom

Fungi, Divisi Ascomycota, Kelas Pyrenomycetes, Ordo Hypocreales, Famili

Hypocreaceae, Genus Trichoderma, dan Spesies Trichoderma sp. (Agrios,

2005)

2.1.2. Morfologi dan Fisiologi Trichoderma sp.

Trichoderma sp. memiliki koloni berwarna putih, kuning, hijau

muda, sampai hijau tua. Susunan sel Trichoderma sp. bersel banyak

berderet membentuk benang halus yang disebut hifa. Hifa Trichoderma sp.

berbentuk pipih, bersekat dan bercabang-cabang membentuk anyaman

yang disebut miselium. Percabangan hifa membentuk sudut siku-siku pada

cabang utama. Konidiofor bercabang dan pada ujungnya terbentuk fialid

(ujung percabangan) berjumlah 1 – 3. Fialid berbentuk pendek dengan

kedua ujungnya meruncing dan bagian tengah berukuran 5 – 7 µm. Konidia

berbentuk semi bulat hingga oval berukuran 2,8 – 3,2 µm, berlendir dan

berdinding halus (Gandjar, 1999).

Adapun karakteristik fisiologi Trichoderma sp. adalah sebagai

berikut:

a. Kandungan air

Pada umumnya, Trichoderma sp. memiliki hifa yang lebih tahan

terhadap kekeringan dibanding khamir atau bakteri. Namun, terdapat

batasan kandungan air total pada tanaman untuk pertumbuhan

Trichoderma sp. Estimasi batasan kandungan air total yaitu di

kandungan air di bawah 14 – 15% pada biji-bijian atau makanan kering

dapat mencegah atau memperlambat pertumbuhan Trichoderma sp.

b. Suhu

Mayoritas Trichoderma sp. termasuk dalam kelompok mesofilik,

yaitu dapat tumbuh pada suhu normal. Suhu optimum pada

kebanyakan jamur sekitar 25°C – 30°C. akan tetapi, beberapa jenis

jamur dapat tumbuh baik pada suhu 35°C - 37°C atau lebih. Sejumlah

jamur termasuk dalam psikrotofik, yaitu yang dapat tumbuh baik pada

suhu dingin dan beberapa masih dapat tumbuh pada suhu di bawah

5

pembekuan (-5 sampai 10°C). Hanya beberapa yang mampu tumbuh

pada suhu tinggi (termofilik).

c. Kebutuhan oksigen dan derajat keasaman

Jenis jamur yang memiliki hifa seperti Trichoderma sp. biasanya

bersifat aerob, yang membutuhkan oksigen untuk pertumbuhannya.

Kebanyakan jamur dapat tumbuh pada interval pH yang luas yaitu pH

2.0 – 8.5).

d. Kebutuhan makanan (nutrisi)

Trichoderma sp. pada umumnya mampu menggunakan

bermacam-macam nutrisi, dari yang sederhana sampai yang

kompleks. Kebanyakan jamur memiliki bermacam-macam enzim

hidrolotik yaitu amylase, pectinase, proteinase dan lipase (Hidayat,

2006).

e. Senyawa penghambat

Trichoderma sp. merupakan salah satu jenis mikroba yang

memiliki kemampuan dalam menghambat pertumbuhan patogen

dengan menghasilkan senyawa aktif biologis secara in vitro. Senyawa

aktif tersebut meliputi alkaloid, paxillin, lolitrems, dan tetranone steroid

(Sudhanta & Abdul, 2011).

Trichoderma sp. mengeluarkan metabolit sekunder yang dapat

menghambat pertumbuhan jamur dan beberapa bakteri dengan

adanya senyawa antibiotik berupa viridin dan trikomidin. Viridin dan

trikomidin dapat menghasilkan enzim β1,3 glukanase dan kitinase.

Enzim– enzim tersebut secara aktif mendegradasi sel-sel jamur lain

yang sebagian besar tersusun dari bahan β1,3 glukon dan kitin,

sehingga mampu melakukan penetrasi ke dalam hifa jamur lain

(Adriansyah, 2015).

2.1.3. Ekologi Trichoderma sp.

Trichoderma sp. merupakan salah satu jamur tanah yang tersebar

luas dan hampir dapat ditemui di lahan-lahan pertanian ataupun

perkebunan. Trichoderma sp. termasuk dalam salah satu jamur tanah yang

dominan dan bersifat saprob sehingga secara ekologis mampu

berkompetisi dengan jamur yang lain serta mampu mengkolonisasi

berbagai substrat yang ada di hutan, sehinga Trichoderma sp. dapat

dikembangkan sebagai agens pengendali hayati patogen tular tanah (Elad

6

et.al., 1983). Trichoderma sp termasuk saprofit pada tanah, kayu, dan

beberapa jenis bersifat parasit pada jamur lain. Trichoderma sp, bersifat

kosmopolit dan dapat diisolasi dari tanah, biji-bijian, kertas, tekstil, rhizosfer

kentang, gula bit, rumput, jerami, serta kayu. Suhu pertumbuhan optimum

15°C – 30°C dan maksimum 30°C – 36°C (Gandjar, 1999).

2.1.4. Peran Trichoderma sp.

Trichoderma sp. adalah jamur saprofit tanah yang secara alami

merupakan parasit dan menyerang banyak jenis jamur penyebab penyakit

tanaman atau memiliki spektrum pengendalian yang luas. Dalam keadaan

lingkungan yang kurang baik, miskin hara atau kekeringan, Trichoderma

sp. akan membentuk klamidospora sebagai propagul untuk bertahan dan

berkembang kembali jika keadaan lingkungan sudah menguntungkan.

Oleh karena itu, dengan sekali aplikasi Trichoderma sp. akan tetap tinggal

dalam tanah. Hal ini merupakan salah satu kelebihan pemanfaatan

Trichoderma sp. sebagai agens pengendalian hayati khususnya untuk

patogen tular tanah (Berlian, 2013).

Mekanisme pengendalian dengan agens hayati terhadap jamur

patogen tumbuhan secara umum dibagi menjadi tiga macam, yaitu

kompetisi terhadap tempat tumbuh dan nutrisi, antibiosis, dan parasitisme

(Baker and Cook, 1982). Umumnya kematian mikroorganisme disebabkan

kekurangan nutrisi, oleh karena itu pengendalian dengan agens hayati

salah satunya bertujuan untuk memenangkan kompetisi dalam

mendapatkan nutrisi. Beberapa jenis Trichoderma sp. menghasilkan

siderofor yang mengikat besi dan menghentikan pertumbuhan jamur lain.

T. harzianum berhasil mengendalikan Fusarium oxysporum dengan cara

mengkoloni rizosfer dan mengambil nutrisi lebih banyak (Mohiddin et al.,

2010).

Antibiosis adalah mekanisme antagonis yang melibatkan hasil

metabolit penyebab lisis, enzim, senyawa folatil dan non-folatil atau toksin

yang dihasilkan oleh suatu mikroorganisme. Meskipun mikoparasitisme

dianggap sebagai mekanisme antagonisme yang utama, tetapi penelitian

lebih lanjut mengungkapkan bahwa metabolit sekunder yang dihasilkan

Trichoderma sp. juga berperan penting dalam aktifitas antijamurnya (Chet

et al., 2005). Proses antagonis muncul dikarenakan adanya persaingan

yang terjadi antara dua jenis jamur yang ditumbuhkan berdampingan

7

karena masing-masing membutuhkan tempat tumbuh dan nutrisi untuk

hidup (Dwiastuti, 2015).

Mekanisme parasitisme berperan penting dalam proses

pengendalian hayati. Trichoderma sp. biasanya menggunakan mekanisme

ini bersama mekanisme lain yaitu kompetisi dan antibiosis. Trichoderma

sp. telah diujikan terhadap beberapa patogen tanaman seperti Ganoderma

sp.. Pada umumnya mekanisme antagonis Trichoderma sp. dalam

menekan patogen yaitu sebagai mikoparasitik dan kompetitor yang agresif.

Awalnya, hifa Trichoderma sp. tumbuh memanjang, kemudian membelit

dan mempenetrasi hifa jamur inang sehingga hifa inang mengalami

vakuolasi, lisis dan akhirnya hancur. Trichoderma sp. melakukan penetrasi

ke dalam dinding sel inang dengan bantuan enzim pendegradasi dinding

sel yaitu kitinase, glukanase, dan protease, selanjutnya menggunakan isi

hifa inang sebagai sumber makanan. Pada saat melilit dan menghasilkan

enzim untuk menembus dinding sel inang, Trichoderma sp. juga

menghasilkan antibiotik seperti gliotoksin dan viridian (Harjono dan

Widyastuti, 2001).

2.2. Medium Pertumbuhan Mikroba

Mikroorganisme, termasuk jamur dapat hidup dimana-mana dan

termasuk spesies yang dapat tumbuh dengan variasi llingkungan yang luas

dengan menggunakan kumpulan-kumpulan substrat baik secara alami

maupun buatan. Beberapa diantaranya adalah jenis yang spesifik, hingga

sekarang belum diketaui nutrisi yang diperlukan untuk pertumbuhannya. Oleh

karena itu mereka tidak dapat tumbuh baik di media yang diformulasikan dari

bahan-bahan alami yang didapat dari tempat mereka diisolasi (Smith, 1994).

Syarat-syarat untuk pertumbuhan jamur dapat bervariasi dari satu jenis

ke jenis yang lain, walaupun kultur yang dilakukan dari spesies dan genus

ditunjukkan untuk petumbuhan terbaik pada media yang sama. Media akan

mempengaruhi morfologi koloni dan warna, dan mempengaruhi penyimpanan

dari isolat (Smith, 1994). Tujuan utama dalam menyusun media biakan bagi

setiap mikroorganisme adalah memberikan campuran dengan syarat nutrisi

yang berimbang dan pada konsentrasi yang dapat memungkinkan

pertumbuhan yang baik. Medium yang seluruhnya terdiri dari nutrisi yang

ditentukan secara kimiawi disebut medium sintetis. Medium yang berisi bahan-

8

bahan zat kimia yang komposisinya tidak diketahui disebut medium kompleks.

Jika mikroorganisme dapat tumbuh di atas beberapa bahan atau zat kimia di

laboratorium, bahan atau zat kimia tersebut dinamakan media kultur. Dari

ribuan media yang berbeda, telah ditemukan dan disusun ke dalam suatu

susunan kompleksitas yang didapat dari jaringan hidup sampai ke campuran

sederhana dari bahan – bahan anorganik (Sarles et al., 1956).

Secara umum, media diperuntukkan untuk tiga tujuan utama, yaitu

untuk pertumbuhan dan pemeliharaan, mempelajari reaksi mikroorganisme

terhadap zat-zat yang ada pada medium dan dengan penggunaan

mikroorganisme dapat membantu beberapa produk khusus atau kombinasi

dari beberapa produk (Sarles et al, 1956). Media dapat dibagi menjadi dua

macam, yaitu:

a. Media alami, yaitu bahan-bahan alami yang dapat digunakan sebagai

media kultur karena pada kenyataannya mikroorganisme parasit akan

tumbuh hanya pada jaringan hidup dan hasil sekresi atau ekstrak dari

jaringan hidup. Potongan kentang atau wortel dapat digunakan sebagai

media kultur dengan cara mengupas dan merebus kentang atau wortel

hingga lunak dan air rebusan tersebut disterilisasi. Dalam penggunaannya,

media tersebut terlebih dahulu dituang dari botol ke tempat yang akan

digunakan untuk menginokulasi jaringan tanaman yang telah

disterilisasikan.

b. Media buatan, yaitu media yang dibuat dari berbagai macam bahan atau

zat, jika komposisi dari bahan-bahan tersebut diketahui, maka medium ini

dinamakan medium sintetis. Tetapi jika komposisi dari bahan-bahan

tersebut belum diketahui maka medium ini dinamakan medium non sintetis.

Medium ini dapat digolongkan menjadi medium cair, semi padat dan

medium padat (Sarles et al., 1956).

Jenis medium untuk isolasi jamur atau mikroorganisme lainnya dapat

digolongkan menjadi empat jenis menurut Dharmaputra (1989), yaitu:

a. Medium umum, adalah medium yang mengandung kebutuhan pokok

penunjang pertumbuhan sebagian besar mikroorganisme.

b. Medium efektif, adalah medium yang mengandung nutrisi dalam jumlah

minimum yang dapat menunjang pertumbuhan mikroorganisme tertentu.

9

c. Medium selektif, adalah medium yang dimodifikasi dengan pengaturan pH

medium atau dengan menambah zat penghambat sehingga pertumbuhan

mikroorganisme yang tidak dikehendaki dapat dihambat.

d. Medium diferensial, adalah medium yang digunakan untuk mengisolasi dan

mengidentifikasi jamur tertentu.

III. METODE PENELITIAN

3.1. Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Sentral Ilmu Hayati Universitas

Brawijaya Malang. Pengambilan sampel tanah uji dari hutan raya R. Suryo, Cangar

dan sampel tanah dari lahan krisan milik Kelompok Tani bunga krisan Mulyo Joyo

di Desa Sidomulyo Kota Batu. Waktu penelitian dimulai bulan Februari sampai

bulan Juli 2017.

3.2. Alat dan Bahan

a) Pengambilan Sampel Tanah

Alat yang digunakan dalam pengambilan sampel tanah adalah sekop

untuk mengambil sampel tanah, kantong plastik untuk tempat sampel tanah

dan spidol permanen untuk memberi label.

b) Isolasi, purifikasi dan identifikasi jamur Trichoderma sp.

Alat yang digunakan adalah kompor listrik, panci, autoklaf, botol media,

Laminar Air Flow (LAF), bunsen, cawan petri, gelas kimia, tabung reaksi, gelas

ukur, pipet, mikro pipet, jarum ose, timbangan, rak tabung reaksi, korek, kertas

penanda, objek glass, cover glass, mikroskop.

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tanah sampel, alkohol

70%, aquades steril, spirtus, plastik wrap, kapas, alumunium foil, dan tisu.

Media yang digunakan yaitu Potao Dextrose Agar (PDA), dan Rose bengal

Chloramphenicol (RBC) dengan penambahan antibiotik dan antijamur.

Komponen antibiotik yang ditambahkan yaitu chloramphenicol. Komponen

antijamur menggunakan rose bengal dan propamocarb hydrochloride.

Sehingga, media yang digunakan ada empat jenis yaitu: media PDAC (Potato

Dextrose Agar + Chlorampenichol), PDACP (Potato Dextrose Agar +

Chlorampenichol + propamocarb), RBC (Rose bengal Chlorampenichol), dan

RBCP (Rose bengal Chlorampenichol + propamocarb).

3.3. Metode Pelaksanaan

Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan metode survei, eksplorasi

dan komparasi. Metode survei dilakukan untuk mendapatkan informasi terkait

kondisi lahan. Metode eksplorasi dilakukan untuk melihat keanekaragaman jenis

Trichoderma sp. dari tanah pada berbagai media selektif yang berbeda dan

metode komparasi untuk membandingkan Trichoderma sp. yang didapat dari dua

media selektif pada empat lahan berbeda.

11

Pelaksanaan penelitian terdiri dari dua unit percobaan. Percobaan pertama

bertujuan mengetahui media yang efektif untuk isolasi Trichoderma sp. dengan

indikator media tersebut selektif, artinya mampu menumbuhkan Trichoderma sp.

dan menghambat pertumbuhan bakteri ataupun jamur lain selain Trichoderma sp.

Sampel tanah dari hutan alami dipilih pada percobaan pertama karena tanah pada

hutan alami merupakan reservoir mikroba sehingga diindikasikan memiliki tingkat

biodiversitas mikroba yang tinggi, sehingga sesuai untuk menguji efektivitas media

selektif untuk Trichoderma sp.. Hasil dari percobaan I, yaitu 2 media yang paling

efektif kemudian digunakan untuk eksplorasi Trichoderma sp. dari lahan krisan

dengan berbagai pengelolaan lahan yang berbeda. Tujuannya untuk melihat

efektivitas dari kedua media tersebut dalam mengisolasi Trichoderma sp. dari

tanah pada lahan krisan dan melihat pengaruh pengelolaan lahan terhadap

kelimpahan Trichoderma sp. dalam tanah (Gambar 1).

Gambar 1. Diagram tahapan penelitian

Percobaan I(Uji efektivitas media selektif untuk isolasi Trichoderma spp.)

Pembuatan empat jenis media selektif

Pengambilan sampel tanah hutan alami

Isolasi Trichoderma spp. pada 4 media biakan yang berbeda

Seleksi dua media yang selektif untuk digunakan pada percobaan II

Percobaan II(Melihat kelimpahan jenis Trichoderma sp. dari berbagai lahan)

Pengambilan sampel tanah dari 4 lahan berbeda

Isolasi Trichoderma spp. pada dua media yang paling selektif

Purifikasi

Identifikasi Trichoderma sp.

12

A. Pembuatan Media

Media yang digunakan dalam penelitian ini ada empat media, yaitu:

1. Potato Dextrose Agar (PDA) + Chloramphenicol

Media PDA dibuat dengan cara melarutkan 39 gram PDA instan

pada 990 ml aquades steril. Larutan dididihkan selama 30 menit kemudian

disterilisasi dengan menggunakan autoclave selama 15 menit pada suhu

121°C. Chloramphenicol dilarutkan dalam 10 ml aquades steril dan

ditambahkan pada media yang telah di autoclave.

PDAC merupakan media yang mangandung sari kentang, dextrose,

agar, aquades dan penambahan kloramfenikol. Penambahan

kloramfenikol berfungsi sebagai antibiotik untuk menghambat

pertumbuhan bakteri pada media biakan.

2. Potato Dextrose Agar (PDA) + Chloramphenicol + propamocarb

Media PDACP dibuat dengan cara melarutkan 39 gram PDA instan

pada 990 ml aquades steril. Larutan dididihkan selama 30 menit kemudian

disterilisasi dengan menggunakan autoclave selama 15 menit pada suhu

121°C. Chloramphenicol dan propamocarb hydrochloride dilarutkan dalam

10 ml aquades steril dan ditambahkan pada media yang telah di autoclave.

PDACP merupakan media yang mangandung sari kentang,

dextrose, agar, aquades, kloramfenikol dan propamocarb. Penambahan

kloramfenikol berfungsi sebagai antibiotik untuk menghambat

pertumbuhan bakteri pada media biakan sedangkan propamocarb

berfungsi sebagai antijamur. Propamocarb merupakan salah satu bahan

aktif yang biasa digunakan dalam fungisida untuk mengendalikan jamur.

3. Rose bengal Chloramphenicol (RBC)

Media RBC dibuat dengan cara melarutkan 16 gram Rose bengal

Agar Base pada 500 ml aquades steril. Larutan dididihkan selama 30 menit

kemudian disterilisasi dengan menggunakan autoclave selama 15 menit

pada suhu 121°C. Didinginkan sampai suhu 43-46°C. Chloramphenicol

dicampurkan pada media yang sudah di autoclave.

RBC merupakan media selektif yang mengandung pepton, glukosa,

K2HPO4, MgSO4.7H2O, rose bengal, kloramfenikol, agar dan aquades

(Jarvis, 1973). Penghambat yang digunakan dalam media RBC adalah

rose bengal dan kloramfenikol. Penambahan rose bengal berfungsi untuk

menekan jumlah jamur atau khamir, sedangkan penambahan

13

kloramfenikol dalam media bertujuan untuk menghambat pertumbuhan

bakteri. Jarvis (1973) menyebutkan bahwa media dengan pH 7-7,2 yang

dilengkapi dengan antibakteri seperti kloramfenikol atau klorotetrasiklin

dan agen penghambat jamur seperti rose bengal (RB) dapat menghambat

pertumbuhan bakteri, serta membatasi pertumbuhan koloni jamur.

4. Rose bengal Chloramphenicol (RBC) + propamocarb

Media RBCP dibuat dengan cara melarutkan 16 gram Rose bengal

Agar Base pada 500 ml aquades steril. Larutan dididihkan selama 30 menit

kemudian disterilisasi dengan menggunakan autoclave selama 15 menit

pada suhu 121°C. Larutan didinginkan sampai suhu 43-46°C. Kemudian

0.05 gram chloramphenicol dan propamocarb hydrochloride (Previcur N-

12, solution concentrate, 722 g/l ), 0.08 gr dilarutkan pada media yang

sudah di autoclave.

RBCP merupakan media selektif yang mangandung pepton,

glukosa, K2HPO4, MgSO4.7H2O, rose bengal, kloramfenikol, agar, aquades

(Jarvis, 1973) dan penambahan propamocarb hydrocloride. Penambahan

propamocarb memiliki fungsi yang sama dengan rose bengal yaitu sebagai

anti jamur. FAO (2013) menyebutkan bahwa, Propamocarb merupakan

salah satu bahan aktif yang biasa digunakan dalam fungisida untuk

mengendalikan jamur. Propamocarb mengandung propamocarb

hydrochloride dan memiliki pH 2 – 4.

B. Pengambilan Sampel Tanah

Pada percobaan I, pengambilan sampel tanah dilakukan pada lahan

hutan alami. Lahan hutan dipilih karena tanah hutan umumnya memiliki tingkat

biodiversitas mikroorganisme yang tinggi dan menjadi habitat sejumlah besar

mikroba pendegradasi bahan-bahan organik. Pengambilan sampel tanah pada

percobaan II dilakukan pada lahan Krisan dan hutan (Tabel 1).

14

Tabel 1. Jenis lahan pada percobaan II No Jenis Lahan Deskripsi singkat

1 Lahan A

(Lahan krisan

PHT)

Pengolahan tanah yang dilakukan antara lain penggemburan tanah,

pembuatan bedengan, penambahan pupuk kandang, pupuk organik

cair dan aplikasi PGPR yang dilakukan dengan cara merendam

pangkal bibit stek pada PGPR sebelum dibibitkan. Kemudian

dilakukan penyemprotan PGPR saat tanaman berumur 2 MST dan

9 MST.

Pengendalian OPT dilakukan dengan mengintegrasikan beberapa

teknik pengendalian seperti pemasangan yellow sticky trap,

pengambilan hama secara langsung, pencabutan tanaman yang

terkena penyakit, penggunaan agens hayati yang mengandung

Trichoderma sp. Aplikasi Trichoderma sp. dilakukan saat tanaman

masih dalam masa awal vegetatif. Penggunaan pestisida/fungisida

sangat dibatasi. Hanya diaplikasikan apabila tingkat serangan OPT

sudah tinggi dan menyebabkan penurunan kualitas dan kuantitas

bunga.

Penyakit yang biasa menyerang adalah karat daun dan layu dengan

intensitas penyakit 5 – 10%. Kualitas bunga mayoritas masuk dalam

grade A dan warna bunga yang dihasilkan lebih cerah.

2 Lahan B

(Lahan krisan

konvensional

I)

Pengolahan tanah yang dilakukan antara lain penggemburan tanah

dengan cangkul, pembuatan bedengan, penambahan pupuk

kandang dan penambahan dolomit pada tanah sebelum

penanaman.

Pestisida/ fungisida sintetis masih menjadi pilihan utama dalam

mengendalikan OPT. Fungisida yang dipakai pada lahan krisan

konvensional I adalah fungisida sintetis berbahan aktif metil tiofanat

dan propineb yang diaplikasikan secara terjadwal yaitu seminggu

sekali.

Penyakit yang biasa menyerang adalah karat daun dan layu dengan

intensitas penyakit 40 – 50%. Kualitas bunga masuk dalam grade A

dan grade B.

3 Lahan C

(Lahan krisan

konvensional

II)

Pengolahan tanah yang dilakukan antara lain penggemburan tanah

dengan cangkul, penambahan pupuk kandang dan pupuk kimia

anorganik.

Pestisida/ fungisida sintetis masih menjadi pilihan utama dalam

mengendalikan OPT. Fungisida yang dipakai pada lahan krisan

konvensional II adalah fungisida sintetis berbahan aktif propineb

70%, mancozeb dan pyraclostrobin + metiram yang

diaplikasikaecara tejadwal yaitu seminggu sekali.

Penyakit yang biasa menyerang adalah karat daun dan layu dengan

intensitas penyakit 60 – 70%. Kualitas bunga masuk dalam grade A

dan grade B.

4 Lahan H

(Lahan hutan

alami)

Tanah hutan yang diambil berasal dari tanah Hutan raya R. Suryo

yang merupakan kawasan hutan konservasi Dinas Kehutanan

wilayah Batu.

Prosedur pengambilan sampel tanah yaitu menentukan terlebih dahulu

titik pengambilan sampel tanah. Pada setiap lahan diambil lima titik

15

pengambilan sampel (Gambar 2). Kemudian tanah pada masing-masing titik

sampel diambil menggunakan sekop dengan kedalaman 15 cm dan

dikompositkan. Pada setiap kantung berisi sampel tanah diberi label sesuai

tempat sampel tanah yang diambil. Setelah itu dimasukkan ke dalam kotak

pendingin yang berisi es batu untuk menjaga sampel tanah agar tetap dalam

kondisi optimum. (Sastrahidayat dan Djauhari, 2012).

Gambar 2. Penentuan titik pengambilan sampel tanah

C. Isolasi Jamur dari Tanah

Isolasi jamur dari sampel tanah dilakukan dengan menggunakan

metode soil dilution plate, yaitu 1 gr tanah dimasukkan dalam tabung rekasi

lalu ditambahkan aquades steril hingga mencapai 10 ml. Selanjutnya digojok

hingga homogen. Kemudian dari larutan tersebut diambil 1 ml, dimasukkan

dalam tabung reaksi dan ditambahkan aquades streril hingga mencapai 10 ml.

Hal tersebut dilakukan hingga mencapai tingkat pengenceran 10-4. Hasil

pengenceran kemudian diambil 1 ml untuk dituangkan ke dalam cawan petri

yang telah berisi media agar yang sudah padat dan diratakan menggunakan

L-stick. Kegiatan penanaman jamur tanah pada media agar dilakukan pada

Laminar Air Flow (LAF) untuk mencegah adanya kontaminasi dari

mikroorganisme lain selama proses isolasi. Isolasi jamur dari tanah dilakukan

dengan tiga kali ulangan.

D. Purifikasi

Purifikasi dilakukan pada koloni jamur yang dimungkinkan merupakan

koloni dari Trichoderma sp. berdasarkan kenampakan morfologinya meliputi

warna koloni dan bentuk koloni. Purifikasi dilakukan dengan cara pengambilan

koloni jamur yang dimungkinkan merupakan koloni dari Trichoderma sp.

dengan menggunakan jarum ose dan ditanam pada cawan petri yang berisi

media agar padat. Kegiatan purifikasi dilakukan pada Laminar Air Flow (LAF)

untuk mencegah adanya kontaminasi dari mikroorganisme lain selama proses

purifikasi. Setelah dilakukan purifikasi, hasil purifikasi tersebut diinkubasi dan

16

dilakukan pengamatan pada koloni. Apabila terdapat kontaminan, maka

dilakukan purifikasi lagi hingga mendapatkan koloni murni.

E. Identifikasi

Identifikasi dilakukan pada isolat jamur yang dimungkinkan merupakan

koloni dari Trichoderma sp. Pengamatan dilakukan secara makroskopis dan

mikroskopis berdasarkan panduan buku identifikasi jamur. Buku identifikasi

yang digunakan adalah A Revision of The Genus Trichoderma (Rifai, 1969),

Trichoderma and Gliocladium (Kubicek et al., 2002) dan tambahan informasi

dari sumber pendukung lainnya.

Pengamatan makroskopis dilakukan dengan menumbuhkan isolat murni

dari Trichoderma sp. pada cawan petri yang berisi media PDA. Kegiatan

tersebut dilakukan pada Laminar Air Flow (LAF) untuk mencegah adanya

kontaminasi dari mikroorganisme lain. Pengamatan mikroskopis dilakukan

dengan pembuatan preparat jamur terlebih dahulu. Pembuatan preparat jamur

dilakukan dengan cara pengambilan jamur dari cawan petri menggunakan

jarum ose yang sebelumnya sudah disterilkan menggunakan alkohol 70%.

Jamur tersebut diletakkan pada kaca objek yang sudah diberi sedikit media

yang selanjutnya ditutup dengan kaca penutup. Proses pembuatan preparat

dilakukan di dalam LAF. Preparat diinkubasi selama 2-3 hari di dalam wadah

yang telah dialasi dengan tisu lembab dan ditutup rapat agar tidak

terkontaminasi oleh spora jamur dari udara. Tujuan dari inkubasi adalah untuk

menumbuhkan spora jamur pada preparat sehingga lebih mudah pada saat

diidentifikasi menggunakan mikroskop. Pengamatan menggunakan mikroskop

dengan perbesaran 400x (40 x 10).

3.4. Variabel Pengamatan

1. Jumlah jenis jamur tanah pada keempat media berbeda

Mengetahui jenis jamur tanah yang tumbuh dengan mengamati

hasil isolasi jamur tanah dari tanah hutan pada masing-masing media yang

berbeda. Selanjutnya jamur-jamur yang tumbuh dibedakan menurut

kenampakan morfologinya meliputi warna koloni, bentuk koloni, tepi koloni

dan tekstur koloni pada 5 hsi. Dari keempat media yang berbeda tersebut,

dipilih dua media dengan jenis jamur tanah yang paling sedikit tumbuh

untuk digunakan dalam tahap selanjutnya, yaitu eksplorasi Trichoderma

sp. dari empat lahan berbeda.

17

2. Identifikasi Trichoderma sp. dari empat jenis lahan berbeda

Identifikasi Trichoderma sp. dilakukan dengan mengamati

kenampakan makroskopis dan mikroskopisnya. Pengamatan makroskopis

dilakukan dengan cara mengamati kenampakan morfologi koloni jamur

secara makroskopis yang meliputi warna koloni, pola persebaran koloni

dan waktu yang dibutuhkan oleh koloni untuk memenuhi cawa petri (full

plate duration). Pengamatan warna koloni dilakukan dengan mengamati

warna koloni pada saat muda sampai tua. Pengamatan pola persebaran

koloni dalam cawan petri dilakukan dengan mengamati bentuk koloni

dalam cawan petri (konsentris dan tidak konsentris), sedangkan

pengamatan tekstur koloni meliputi kasar dan halus, rapat dan renggang,

serta tebal dan tipis koloni yang tumbuh pada media. Pengamatan full plate

duration dilakukan untuk mengetahui kemampuan tumbuh koloni jamur

tanah pada media agar dengan melihat waktu yang dibutuhkan koloni

untuk mencapai diameter 9 cm.

Pengamatan mikroskopis dilakukan dengan cara mengamati

kenampakan morfologi koloni jamur dengan menggunakan mikroskop

yang meliputi ada atau tidaknya septa pada hifa, pertumbuhan hifa

(bercabang atau tidak bercabang), warna hifa (gelap atau hialin), ada

tidaknya konidia, warna konidia, bentuk konidia (bulat, lonjong, elips, oval

atau tidak beraturan).

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil Uji Efektivitas Media Selektif

Hasil uji efektivitas media selektif untuk isolasi Trichoderma sp. dari tanah

hutan berdasarkan perbedaan karakteristik morfologi jamur secara makroskopis

didapatkan 10 isolat pada media PDAC, 7 isolat pada media RBC, 8 isolat pada

media PDACP, dan 6 isolat pada media RBCP (Tabel 2).

Tabel 2. Hasil Isolasi jamur dari tanah hutan pada empat media selektif

Dari tabel tersebut diketahui bahwa pada keempat media, yaitu media

PDAC, PDACP, RBC dan RBCP mampu menghambat pertumbuhan bakteri. Pada

media PDAC didapatkan 10 jenis jamur yang berbeda berdasarkan ciri

morfologinya. Dari 10 jenis jamur, 2 diantaranya termasuk ke dalam genus

Trichoderma sp.. Media kedua yaitu media RBC, didapatkan 7 jenis jamur yang

berbeda berdasarkan ciri morfologinya dan 1 diantaranya merupakan jamur

Trichoderma sp. Media ketiga yaitu media PDACP, didapatkan 8 jenis jamur yang

berbeda berdasarkan ciri morfologinya dengan 1 jenis jamur yang tumbuh

merupakan jamur Trichoderma sp. Sedangkan pada media keempat yaitu media

RBCP, didapatkan 7 jenis jamur yang berbeda berdasarkan ciri morfologinya dan

No Jamur yang ditemukan Media Buatan

PDAC PDACP RBC RBCP*

1 Trichoderma sp. isolat 1 √ √ - -

2 Trichoderma sp. isolat 2 √ - - -

3 Trichoderma koningii - - √ √

4 Trichoderma viride - - - √

5 Penicillium sp. isolat 1 √ √ - -

6 Penicillium sp. isolat 2 √ √ √ √

7 Penicillium sp. isolat 3 √ - - -

8 Penicilium sp. isolat 4 - - √ √

9 Penicillium sp. isolat 5 - √ √ -

10 Aspergillus sp. isolat 1 √ √ - -

11 Aspergillus sp. isolat 2 √ - - -

12 Fusarium sp. isolat 1 √ - √ -

13 Fusarium sp. isolat 2 √ √ √ √

14 Fusarium sp. isolat 3 - √ √ √

15 Lecanicillium sp. isolat 1 √ √ - -

16 Mucor sp. isolat 1 √ - - -

Jumlah jenis jamur 10 8 7 6

19

2 diantaranya merupakan jamur Trichoderma sp.. Hal tersebut dilihat dari

kenampakan koloni yang semula putih menjadi kehijauan dan pertumbuhannya

yang cepat.

Keempat media selektif yaitu media PDAC, PDACP, RBC dan RBCP mampu

menumbuhkan Trichoderma sp. dan efektif menghambat pertumbuhan bakteri.

Media PDAC dengan penambahan antibiotik berupa kloramfenikol kurang efektif

dalam menghambat pertumbuhan jamur lain karena masih terdapat 8 jenis jamur

yang mampu tumbuh pada media yaitu dari genus Aspergillus sp., Penicillium sp.,

Fusarium sp., Lecanicillium sp., dan Mucor sp.. Media PDACP dengan

penambahan antijamur berupa propamocarb hydrochloride mampu mereduksi

beberapa jamur yang dapat tumbuh di media PDAC antara lain Penicillium sp.

isolat 3, Aspergillus sp. isolat 2, Fusarium sp. isolat 1 dan Mucor sp.

Media RBC yang mengandung rose bengal sebagai antijamur dan

kloramfenikol sebagai antibiotik mampu menumbuhkan 1 spesies Trichoderma sp.

yaitu T. viride dan lebih efektif menghambat jamur lain dibanding media PDAC dan

PDACP karena mampu menghambat jamur dari genus Asperillus sp.,

Lecanicillium sp., dan Mucor sp. Meskipun jamur Fusarium sp. dan Penicillium sp.

masih tumbuh pada media tersebut. Media keempat, yaitu media RBCP yang

mengandung kloramfenikol sebagai antibiotik dan rose bengal serta propamocarb

hydrochloride sebagai antijamur lebih efektif digunakan untuk isolasi Trichoderma

sp. dari tanah. Media RBCP paling efektif dibanding media PDAC, PDACP, dan

RBCP karena terdapat 2 spesies Trichoderma sp. yang mampu tumbuh dan jenis

jamur lain yang dapat tumbuh pada media tersebut paling sedikit. Meskipun pada

media RBCP belum mampu menghambat jamur Fusarium sp. dan Penicillium sp.,

akan tetapi Fusarium sp. isolat 1 dan Penicillium sp. isolat 5 yang tumbuh pada

media RBC mampu dihambat pada media RBCP.

Hasil uji efektivitas keempat media menunjukkan bahwa Media RBCP dan

RBC lebih efektif untuk isolasi Trichoderma sp. karena mampu mereduksi jamur

lain selain Trichoderma sp. lebih banyak dibanding media PDAC dan PDACP .

Kedua media tersebut selanjutnya digunakan untuk isolasi dan eksplorasi

Trichoderma sp. pada 3 lahan krisan, yaitu lahan krisan dengan sistem PHT,

Lahan Krisan Konvensional I, dan Lahan Krisan Konvensional II (Tabel 3).

20

Tabel 3. Hasil Isolasi jamur tanah dari lahan krisan dengan media RBC dan RBCP

Keterangan: LA (Lahan Krisan PHT), LB (Lahan Krisan Konvensional I), LC (Lahan Krisan

Konvensional II).

Hasil isolasi sampel tanah dari tiga lahan krisan menggunakan media RBP

dan RBCP didapatkan 11 jenis jamur yang berbeda berdasarkan kenampakan

makroskopisnya. Sesuai dengan hasil isolasi pada sampel tanah hutan, dari ciri

makroskopis, jenis jamur yang masih bisa tumbuh pada media RBC dan RBCP

yaitu dari genus Trichoderma sp, Penicillium sp, dan Fusarium sp. Hal ini

membuktikan bahwa media RBCP lebih efektif untuk isolasi Trichoderma sp. dari

tanah meskipun belum cukup selektif karena Penicillium sp. dan Fusarium sp.

masih mampu tumbuh pada media tersebut.

4.2. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp.

4.2.1. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media RBC

Hasil eksplorasi Trichoderma sp. pada lahan hutan dengan media RBC

didapatkan 1 spesies Trichoderma sp. yaitu Trichoderma koningii. Dari lahan

krisan PHT didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu Trichoderma viride dan

Trichoderma longibrachiatum. Dari lahan krisan konvensional I didapatkan 1

spesies Trichoderma sp. yaitu Trichoderma harzianum dan dari lahan krisan

konvensional II didapatkan 1 spesies Trichoderma sp. yaitu Trichoderma

harzianum (Tabel 4).

No Jamur yang ditemukan Media RBC Media RBCP

LA LB LC LA LB LC

1 Trichoderma harzianum - √ √ √ √ √

2 Trichoderma viride √ - - √ - -

3 Trichoderma longibrachiatum √ - - - - -

4 Trichoderma koningii - - - - √ -

5 Penicillium sp. isolat 2 - √ - - - -

6 Penicillium sp. isolat 3 √ - - - - -

7 Penicillium sp isolat 4 √ - - - - √

8 Penicillium sp. isolat 5 - √ - - √ -

9 Fusarium sp. isolat 1 √ - - √ - -

10 Fusarium sp. isolat 2 √ √ √ √ √ -

11 Fusarium sp. isolat 3 - - √ - - -

Jumlah jenis jamur 6 4 3 4 4 2

21

Hasil tersebut didasarkan atas perbedaan karakteristik morfologi jamur secara

makroskopis dan mikroskopis.

Tabel 4. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media buatan RBC

No Nama Isolat Karakter Morfologi Hasil

Identifikasi

1 Trichoderma sp. isolat RH1 lahan H (tanah hutan)

Koloni berwarna putih kemudian berwarna putih agak kuning kehijauan, bentuk koloni bulat, tipis. Koloni tumbuh cepat dan merata. Diameter koloni mencapai diameter 9 cm 4 hsi. Konidiofor bercabang, bentuk fialid mengerucut, di ujung fialid terbentuk fialospora. Bentuk fialospora oval.

Trichoderma koningii

2 Trichoderma sp. isolat RA2 lahan A (Krisan PHT)

Koloni berwarna putih kemudian berubah menjadi hijau sedikit putih dan membentuk zonasi. Bentuk koloni bulat dengan tekstur bertepung. Koloni tumbuh cepat dan merata. Diameter koloni mencapai diameter 9 cm pada 4 hsi. Konidiofor bercabang serupa cemara. Fialid pendek dan diujung fialid terbentuk fialospora. Fialospora bulat.

Trichoderma viride

4 Trichoderma sp. isolat RA4 lahan A (Krisan PHT)

Koloni berwarna putih kemudian berubah menjadi hijau saat tua. Bentuk koloni bulat, agak tebal, padat dan tekstur kasar. Koloni tumbuh cepat dan merata. Diameter koloni mencapai diameter 9 cm pada 4 hsi. Konidiofor bercabang seperti rumbai. Fialid berbentuk seperti botol dengan pangkal sedikit ramping. Fialospora berbentuk oval.

Trichoderma longibrachiatum

5 Trichoderma sp. isolat RB5 lahan

B (Krisan konvensional I)

Koloni berwarna putih kemudian berubah menjadi hijau sedikit putih dan membentuk zonasi putih - hijau. Bentuk koloni bulat dengan tekstur bertepung. Koloni tumbuh cepat dan merata. Diameter koloni mencapai diameter 9 cm pada 4 hsi. Konidiofor bercabang menyerupai pohon. Fialid tunggal, beberapa 2-3 pada tiap percabangan. Fialospora terkumpul di ujung fialid berbentuk bulat.

Trichoderma harzianum

6 Trichoderma sp. isolat RC1 lahan

C (Krisan konvensional II)

Karakteristik sama dengan Trichoderma sp isolat RB5 tanah fungisida I.

Trichoderma harzianum

4.2.2. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media RBCP

Hasil eksplorasi Trichoderma sp. dari lahan hutan dengan media RBCP

didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T. koningii dan T. viride. Dari lahan

krisan PHT didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T. viride dan T. harzianum,

22

dari lahan krisan konvensional I didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T.

harzianum dan T. koningii, dan dari lahan krisan konvensional II didapatkan 1

spesies Trichoderma sp. yaitu T. harzianum (Tabel 5).

Tabel 5. Hasil Eksplorasi Trichoderma sp. dengan media buatan RBCP

No Nama Isolat Karakter Morfologi Hasil

Identifikasi

1 Trichoderma sp. isolat RPH1

Lahan H (tanah hutan)

Koloni berwarna putih kemudian berwarna putih sedikit kuning kehijauan. Bentuk koloni bulat, Koloni tumbuh cepat dan merata. Diameter koloni mencapai diameter 9 cm pada 4 hsi. Konidiofor bercabang dan ramping. Fialid mengerucut dan diujung fialid terdapat fialospora berbentuk oval

Trichoderma koningii

2 Trichoderma sp. isolat RPH10

Lahan A (tanah hutan)

Koloni berwarna putih kemudian berwarna putih agak kehijauan dan saat tua berwarna hijau, bentuk koloni bulat dengan tekstur bertepung. Koloni tumbuh cepat dan merata. Diameter koloni mencapai diameter 9 cm pada 4 hsi. Konidiofor bercabang serupa cemara. Fialid pendek dan diujung fialid terbentuk fialospora. Fialospora bulat.

Trichoderma viride

3 Trichoderma sp. isolat RPA2

lahan A (Krisan PHT)

Karakteristik sama dengan Trichoderma sp isolat RPH10 tanah hutan.

Trichoderma viride

4 Trichoderma sp. isolat RPA4

lahan A (Krisan PHT)

Koloni berwarna putih kemudian berubah menjadi hijau tua. Bentuk koloni bulat dengan tekstur bertepung. Koloni tumbuh cepat dan merata dan mencapai diameter 9 cm pada 4 hsi. Konidiofor bercabang menyerupai pohon. Fialid tunggal, beberapa 2-3 pada tiap percabangan. Fialospora terkumpul di ujung fialid berbentuk bulat.

Trichoderma harzianum

6 Trichoderma sp. isolat RPB5

lahan B (Krisan konvensional I)

Karakeristik sama seperti Trichoderma sp isolat RPA4 tanah PHT.

Trichoderma harzianum

7 Trichoderma sp. isolat RPB6

lahan B (Krisan konvensional I)

Karakteristik sama dengan Trichoderma sp isolat RPH1 tanah hutan.

Trichoderma koningii

8 Trichoderma sp. isolat RPC1

lahan C (Krisan konvensional II)

Karakeristik sama seperti Trichoderma sp isolat RPA4 tanah PHT.

Trichoderma harzianum

Dari tabel tersebut bisa dilihat juga bahwa jenis Trichoderma sp pada lahan

PHT lebih banyak dibandingkan lahan krisan konvensional dan lahan hutan.

Sedangkan spesies Trichoderma sp. paling sedikit ditemukan pada lahan

23

konvensional II yang menggunakan fungisida berbahan aktif propineb70%,

mancozeb dan pyraclostrobin + metiram saat budidaya krisan.

4.3. Kenampakan Morfologi Trichoderma sp.

Hasil eksplorasi Trichoderma sp. dari empat lahan yang berbeda, didapatkan

4 spesies Trichoderma sp. yang masing-masing memiliki ciri morfologi yang

berbeda-beda. Kenampakan morfologi tiap spesies Trichoderma sp. yang

ditemukan adalah sebagai berikut:

1. Trichoderma koningii

Secara makroskopis, koloni jamur pada usia 1-2 hari setelah inkubasi

berwarna putih, kemudian pada hari ketiga koloni berwarna putih agak hijau

kekuningan. Permukaan koloni halus dan berbentuk bulat. Terbentuk miselium

udara yang menyerupai rambut. Pertumbuhan koloni cepat dan mencapai

diameter 9 cm pada hari ke-4 seteah inkubasi. Secara mikroskopis, jamur ini

memiliki bentuk konidiofor bercabang dan ramping. Fialidnya mengerucut dan

diujung fialid terbentuk fialospora. Fialospora pada jamur ini berbentuk oval

berwarna agak hijau (Gambar 3). Dari ciri-ciri morfologinya, jamur ini sesuai

dengan karakteristik T. koningii dalam Rifai (1996) yang menyebutkan bahwa

koloni T. koningii memiliki permukaan halus membentuk miselium udara yang

menyerupai rambut. Terjadi perubahan warna koloni mulai dari putih transparan,

putih kehijauan, hijau kekuningan hingga hijau. Konidiofor bercabang mirip pohon

dan fialid yang terbentuk ramping. Fialospora berbentuk agak oval.

Gambar 3. Trichoderma koningii; (a) Koloni pada PDA umur 7 hsi, (b) konidiofor, (c)

fialid, (d) fialospora

a b

c

d

20 µm 5 µm

24

2. Trichoderma viride

Secara makroskopis, koloni jamur pada usia 1-2 hari setelah inkubasi

berwarna putih, kemudian pada hari ketiga koloni berwarna putih agak hijau dan

membentuk zonasi. Pada hari kelima, warna koloni menjadi hijau tua sedikit putih.

Pertumbuhan koloni cepat dan memenuhi cawan pada hari ke-4 seteah inkubasi.

Secara makroskopis, jamur ini memiliki bentuk konidiofor bercabang serupa

cemara. Fialidnya pendek dan diujung fialid terbentuk fialospora. Fialospora pada

jamur ini berbentuk bulat dan berwarna hijau (Gambar 4). Dari ciri-ciri

morfologinya, jamur ini sesuai dengan karakteristik T. viride dalam Rifai (1996)

yang menyebutkan bahwa koloni T. viride memiliki permukaan halus.Terjadi

perubahan warna koloni mulai dari putih transparan, putih kehijauan hingga hijau.

Konidiofor bercabang. Beberapa cabang utama membentuk cabang lain sehingga

mirip seperti cemara. Fialospora berbentuk bulat dan jarang yang oval.

Gambar 4. Trichoderma viride; (a) Koloni pada PDA umur 7 hsi, (b) konidiofor, (c)

fialid, (d) fialospora

3. Trichoderma harzianum

Secara makroskopis, koloni jamur pada usia 1-2 hari setelah inkubasi

berwarna putih, kemudian pada hari ketiga koloni berwarna putih kehijauan.

Pertumbuhan koloni cepat dan memenuhi cawan pada hari ke-4 setelah inkubasi.

Secara makroskopis, jamur ini memiliki bentuk konidiofor bercabang menyerupai

pohon. Fialid yang terbentuk antara 2-3 pada tiap percabangan. Fialospora

terkumpul di ujung fialid berbentuk bulat (Gambar 5). Dari ciri-ciri morfologinya,

jamur ini sesuai dengan karakteristik T. hazianum dalam Rifai (1996) yang

menyebutkan bahwa koloni T. harzianum memiliki permukaan halus dan dapat

membentuk miselium udara. Terjadi perubahan warna koloni mulai dari putih

transparan, putih kehijauan hingga hijau. Konidiofor bercabang mirip pohon.

b

a

c

d

10 µm 5 µm

25

Cabang yang terbentuk biasanya tunggal, namun ada beberapa yang membentu

2 -3 percabangan. Fialospora terkumpul diujung fialid berbentuk bulat.

Gambar 5. Trichoderma harzianum; (a) Koloni pada PDA umur 7 hsi, (b) konidiofor,

(c) fialid, (d) fialospora

4. Trichoderma longibrachiatum

Secara makroskopis, koloni jamur pada usia 1-2 hari setelah inkubasi

berwarna putih, kemudian pada hari ketiga koloni berwarna putih kehijauan yang

kemudian menjadi hijau tua. Permukaan koloni agak kasar dan rapat.

Pertumbuhan koloni cepat dan memenuhi cawan pada hari ke-4 seteah inkubasi.

Secara makroskopis, jamur ini memiliki bentuk konidiofor bercabang seperti

rumbai. Fialidnya berbentuk seperti botol dengan pangkal sedikit ramping.

Fialospora pada jamur ini berbentuk oval (Gambar 6). Dari ciri-ciri morfologinya,

jamur ini sesuai dengan karakteristik T. longibrachiatum dalam Rifai (1996) yang

menyebutkan bahwa koloni T. longibrachiatum awalnya memiliki permukaan halus

kemudian agak kasar. Terjadi perubahan warna koloni mulai dari putih transparan

menjadi hijau. Konidiofor bercabang dan membentuk seperti rumbai yang kompak.

Fialid yang terbentuk biasanya sedikit ramping di pangkal. Fialospora kebanyakan

berbentuk oval.

Gambar 6. Trichoderma longibrachiatum; (a) Koloni pada PDA umur 7 hsi, (b)

konidiofor, (c) fialid, (d) fialospora

10 µm 10 µm

10 µm 5 µm

b c

d a

c

b

d

a

26

4.4. Pembahasan Umum

Hasil uji efektivitas media selektif untuk isolasi Trichoderma sp.,

menunjukkan bahwa media RBCP dan RBC merupakan media selektif yang lebih

efektif untuk isolasi Trichoderma sp. dari tanah. Pada kedua media tersebut,

mampu menumbuhkan Trichoderma sp., dan mampu menghambat jamur lain

seperti Aspergillus sp., Lecanicillium sp. dan juga Mucor sp. yang merupakan

jamur-jamur kosmopolit. Akan tetapi, media dengan penambahan antijamur rose

bengal dan propamocarb hydrochloride belum mampu menghambatPenicillium sp.

dan Fusarium sp. Wojtkowiak-Gębarowska (2006) menyebutkan bahwa

propamocarb kurang efektif digunakan untuk mengandalikan Fusarium sp.

Media RBC yang mengandung rose bengal memiliki tingkat efektifitas yang

lebih tinggi dibanding media PDAC dan PDACP untuk isolasi Trichoderma sp. dari

tanah. Rose bengal merupakan garam sodium yang mengalami perubahan warna

menjadi merah keunguan yang biasa digunakan untuk menghambat beberapa

mikroorganisme pada media. Beberapa jamur yang mampu dihambat dengan

penambahan rose bengal diantaranya, jamur Penicillium sp., Mucor sp. dan

Aspergillus sp. Martin (1980), menjelaskan bahwa penambahan rose bengal

efektif dalam mereduksi persebaran koloni jamur dan mengeliminasi bakteri yang

tumbuh. Pada media yang menggunakan rose bengal, beberapa isolat

Trichoderma sp. tumbuh lebih cepat daripada yang lain, membentuk koloni yang

lebih besar yang menekan pertumbuhan isolat lainnya, sehingga mengurangi

jumlah koloni.

Media RBCP yaitu media RBC yang ditambahkan propamocarb

hydrochloride. Media RBCP dapat mengisolasi jamur Trichoderma sp. lebih

banyak dan mampu mereduksi jamur lain lebih banyak dibanding media RBC.

Propamocarb ditambahkan untuk menghambat pertumbuhan jamur lain selain

Trichoderma sp. Propamocarb hydrochloride merupakan salah satu bahan aktif

fungsida yang dapat mengendalikan bebera patogen tular tanah seperti Phytium

sp., dan Sclerotium sp.. Hu (2007) menyebutkan Propamocarb hydrochloride pada

umumnya juga digunakan untuk mengendalikan Phythopthora sp.

Trichoderma sp. mampu tumbuh dalam media RBC dan RBCP karena

Trichoderma sp. termasuk jamur yang toleran dan pertumbuhannya sangat cepat.

Selain itu Trichoderma sp. dapat bertahan pada kondisi miskin unsur hara,

kekeringan, dan lingkungan yang tidak menguntungkan. Hal ini didukung oleh

pernyataan Berlian (2013) yang menyebutkan bahwa beberapa jenis Trichoderma

27

spp. dapat bertahan hidup dengan membentuk klamidospora pada kondisi yang

tidak menguntungkan dan cukup tahan terhadap fungisida dan herbisida. Hal ini

dipertegas dengan pernyataan Hu (2007) yang menerangkan bahwa Trichoderma

viride dan Trichoderma harzianum lebih resisten pada fungsida berbahan aktif

iprodione dan propamocarb. Kemampuan tersebut menjadikan satu kelebihan

dalam pemanfaatan Trichoderma spp. sebagai agens pengendalian hayati

khususnya untuk patogen tular tanah.

Media yang lebih efektif yaitu RBC dan RBCP selanjutnya digunakan untuk

isolasi Trichoderma sp. dari tanah pada 4 lahan berbeda meliputi lahan krisan

PHT, lahan krisan konvensional I, lahan krisan konvensional II, dan lahan hutan.

Spesies Trichoderma sp. paling barnyak ditemukan pada lahan krisan PHT yaitu

sebanyak 3 spesies Trichoderma sp., meliputi T. viride, T. harzianum dan T.

longibrachiatum. Pada lahan krisan konvensional I didapatkan 2 spesies

Trichoderma sp. yaitu T. koningii dan T. harzianum. Pada lahan konvensional II

hanya ditemukan 1 spesies Trichoderma sp. yaitu T. harzianum. Sedangkan pada

lahan hutan didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T. koningii dan T. viride.

Pengelolaan lahan yang berbeda pada lahan krisan berpengaruh terhadap

kelimpahan Trichoderma sp. dalam tanah. Pengelolaan lahan yang kurang tepat

akan berdampak pada menurunnya kelimpahan Trichoderma sp. dalam tanah.

Trichoderma sp. merupakan mikroorganisme tanah yang dapat berperan sebagai

agens hayati pengendali patogen khususnya patogen tular tanah, sehingga

apabila kelimpahan Trichoderma sp. dalam tanah menurun maka dapat

mempengaruhi pertumbuhan dan ketahanan tanaman. Adanya pengelolaan lahan

dan pemberian bahan masukan lain kedalam tanah membentuk suatu lingkungan

yang sesuai dengan pertumbuhan Trichoderma sp. Hal ini tersebut mendukung

hasil yang menyatakan jumlah spesies Trichoderma sp. yang ditemukan di lahan

krisan PHT lebih banyak dibanding pada lahan hutan karena pada lahan hutan,

vegetasi yang ada dibiarkan tumbuh secara alami dan tidak ada pengolahan tanah

ataupun perlakuan khusus seperti penambahan input dari luar.

Suryanti et al., (2003) menyatakan bahwa agens hayati Trichoderma sp.

mampu mendekomposisi lignin, selulosa, dan kitin dari bahan organik menjadi

unsur hara yang siap diserap tanaman. Adapun Lehar (2012) menyebutkan

peranan agens hayati Trichoderma sp. yang ditambahkan adalah untuk

mendegradasi bahan organik menjadi hara. Bustaman (2000) menambahkan

pemberian mikroorganisme Trichoderma sp. dapat menimbulkan ketahanan pada

28

tanaman yang diberi pupuk organik yang menyediakan fosfor sehingga tanaman

tumbuh lebih kuat karena tanaman mampu membentuk epidermis yang lebih tebal.

Pengolahan lahan membantu dalam memberikan kecukupan ruang pori

untuk aerasi sehingga mendorong pertumbuhan mikroorganisme tanah termasuk

Trichoderma sp. yang membutuhkan oksigen untuk pertumbuhannya. Hidayat

(2006), menjelaskan bahwa Trichoderma sp. termasuk jamur yang bersifat aerob,

yang membutuhkan oksigen untuk pertumbuhannya dan kebanyakan dapat

tumbuh pada interval pH yang luas yaitu pH 2.0 – 8.5. Prihastuti (2011) juga

menerangkan bahwa pengelolaan tanah mempengaruhi keberadaan komunitas

mikroba. Penggunaan pestisida, kompos, kotoran ternak dan introduksi mikroba

akan mempengaruhi struktur komunitas mikroba dalam tanah.

Adapun keanekaragaman spesies Trichoderma sp. pada lahan

konvensional II paling rendah bisa disebabkan karena pengelolaan lahan yang

kurang tepat. Pengendalian OPT masih menggunakan pestisida/ fungisida yang

beranekaragam dan diaplikasikan secara terjadwal. Hasil wawancara dengan

petani krisan menyebutkan bahwa intensitas serangan penyakit pada lahan krisan

konvensional II paling tinggi diantara lahan krisan lainnya, yaitu mencapai 60 –

70%. Dampak penggunaan fungisida yang terus menerus dapat menurunkan

keanekaragaman dan aktivitas mikroba bermanfaat dalam tanah. Widiastuti (2011)

menjelaskan bahwa kelemahan fungisida sistemik yang perlu diwaspadai adalah

memiliki sasaran bunuh yang spesifik sehingga mengakibatkan munculnya

resistensi dari patogen yang timbul sebagai reaksi perlawanan dari patogen yang

terpapar suatu senyawa kimia secara terus menerus.

Mengacu pada buku A revision of the Genus Trichoderma oleh Rifai (1969),

terdapat 9 spesies Trichoderma sp. yang berhasil teridentifikasi. Sehingga secara

umum, keanekaragaman spesies Trichoderma sp. pada lahan krisan baik itu pada

lahan krisan PHT maupun konvensional bisa dikatakan cukup tinggi karena

ditemukan 4 spesies Trichoderma sp. yaitu T. viride, T. harzianum dan T.

longibrachiatum dan T. koningii.

V. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1. Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan

sebagai berikut:

1. Media selektif RBCP dan RBC lebih efektif untuk isolasi Trichoderma sp.

dari tanah dibanding media PDAC dan PDACP.

2. Kelimpahan spesies Trichoderma sp. pada lahan krisan PHT lebih banyak

dibandingkan lahan lainnya. Pada lahan krisan PHT didapatkan 2 spesies

Trichoderma sp. yaitu T. viride, T. harzianum dan T. longibrachiatum. Pada

lahan krisan konvensional I didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T.

koningii dan T. harzianum. Pada pada lahan konvensional II didapatkan 1

spesies Trichoderma sp. yaitu T. harzianum. Sedangkan lahan hutan

didapatkan 2 spesies Trichoderma sp. yaitu T. koningii dan T. viride

5.2. Saran

Saran yang diajukan terkait hasil penelitian yang telah dilakukan adalah

media RBC dan RBCP efektif digunakan sebagai media untuk isolasi Trichoderma

sp., akan tetapi belum selektif karena jamur Fusarium sp. dan Penicillium sp masih

tumbuh sehingga perlu adanya penelitian lanjutan terkait perlakuan atapun bahan

lain yang dapat ditambahkan pada media tersebut sehingga bisa didapatkan

media yang selektif untuk isolasi Trichoderma sp. dari tanah. Selain itu, dalam

penggunaan fungisida sintetis perlu dibatasi karena pemakaian yang intensif

berdampak pada kesehatan tanah dan keanekaragaman mikroba bermanfaat

dalam tanah.

DAFTAR PUSTAKA

Abadi, A. L., A. Widodo., dan K. Hidayat. 1993. Studi Sistem Aplikasi Pestisida

Dalam Usaha Tani Hortikultura dan Upaya Pengendaliannya di Sub DAS

Brantas Jawa Timur. Jurnal Universitas Brawijaya 1: 1-12.

Adriansyah, A., M. Arri., M. Hamawi., dan A. Ikhwan. 2015. Uji Metabolit

Sekunder Trichoderma sp. Sebagai Antimikrobia Patogen Tanaman

Pseudomonas solanacearum Secara in Vitro. Gontor AGROTECH Science

Journal 2 (1): 19 – 30.

Agrios G. N. 2005. Plant Pathology 5th ed. New York: Academic Press.

Ariyanto, E. F., A. L. Abadi., dan S. Djauhari. 2013. Keanekaragaman Jamur

Endofit pada Daun Tanaman Padi (Oryza sativa L.) dengan Sistem

Pengelolaan Hama Terpadu (PHT) dan Konvensional di Desa Baye,

Kecamatan Kasembon, Kabupaten Malang. Jurnal HPT 1(2): 37 – 51.

Baker, K. F., and R. J. Cook. 1982. Biological Control of Plant Pathogens. The

American Phytopathology Society. Minnessota Fravel.

Berlian, I., B. Setyawan., dan H. Hadi. 2013. Mekanisme Antagonis Trichoderma

sp. Terhadap Beberapa Patogen Tular Tanah. Warta Perkaretan 32(2): 74

– 82.

Bustaman, H. 2000. Penggunaan Jamur Pelarut Fosfat untuk Meningkatkan

Pertumbuhan Tanaman Jahe dan Penurunan Penyakit Layu. Seminar

Nasional BKS Barat Bidang Ilmu Pertanian. 23-24 September 2000.

Chet, I., N. Benhamou., dan S. Haran. 2005. Mycoparasitism and Lytic Enzymes.

In Harman, G. E. and C. P. Kubicek (Eds), Trichoderma and Gliocladium

enzymes biological control and commercial applications Volume 2. Taylor

and Francis. London.

Dharmaputra O. S., A.W. Gunawan., dan Nampiah. 1989. Mikologi Dasar.

Bogor: Penuntun Praktikum. Departemen dan kebudayaan Direktorat

Jenderal Pendidikan Tinggi PAU Ilmu Hayat, IPB.

Dwiastuti, M.E., Fajri, M.N., dan Yunimar. 2015. Potensi Trichoderma spp.

sebagai Agens Pengendali Fusarium spp. Penyebab Penyakit Layu pada

Tanaman Stroberi (Fragaria x ananassa Dutch.). J. Hortikultura. 25(4): 331

– 339.

Elad Y. Chet I, 1983. Improved Selective Media for Isolation of Trichoderma sp.

or Fusarium sp. Phytoparasitica 11: 55 8.

FAO. 2013. FAO Specifications and Evaluations for Agricultural Pesticides

Propamocarb. (available on http://www.fao.org/agriculture/crops/core-

themes/theme/pests/jmps/en/).

Gandjar, I., R.A. Samson., K. Van den Tweel-Ver Meulen., A. Oetari., dan I.

Santoso. 1999. Pengenalan Jamur Tropik Umum. Jakarta. Yayasan Obor

Indonesia.

http://www.fao.org/agriculture/crops/core-themes/theme/pests/jmps/en/http://www.fao.org/agriculture/crops/core-themes/theme/pests/jmps/en/

31

Hadisuwito, S. 2007. Membuat Pupuk Kompos Cair. Penerbit Agromedia

Pustaka. Jakarta.

Harjono., S. M. dan Widyastuti. 2001. Antifungal Activity of Purified Endochitinase

Produced by Biocontrol Agent Trichoderma reseei Againsts Ganoderma

philippii. Pakistan J. Biol. Sc. 4 (10): 1232 – 1234.

Harman, G. E., C. R. Howell., A. Viterbo., I. Chet, and M. Lorito. 2004.

Trichoderma species – Opportunistic, Avirulent Plant Symbionts. Nat Rev

Microbiol 2: 43 – 56.

Hu, J., Hong, C., Stromberg, E. L., and Moorman, G. W. 2007. Effects of

propamocarb hydrochloride on mycelial growth, sporulation, and infection

by Phytophthora nicotianae isolates from Virginia nurseries. Plant Disease.

91 (4): 414 – 420.

Jarvis, B. 1973. Comparison of an Improved Rose-Bengal-Chlortetracycline Agar

with Other Media for the Selective Isolation and Enumeration of Moulds and

Yeasts in Food. J. Appl. Bacteriol. 36: 723 – 727.

Lehar, L. 2012. Pengujian Pupuk Organik Agens Hayati (Trichoderma sp.)

terhadap Pertumbuhan Kentang (Solanum Tuberlosum L). Jurnal

Penelitian Pertanian Terapan 12(2): 115 – 124.

Mohiddin, F. A., M. R. Khan, S. M. Khan., and B.H. Bhat. 2010. Why Trichoderma

is Considered Super Hero (Super Fungus) Against the Evil Parasites?.

Plant Pathology Journal 9: 92 – 102..

Muhibbudin, A., Addina, L., Abadi, A. L., dan Ahmad, A. 2011. Biodiversity of Soil

Fungi on Integrated Pest Management Farming System. Agrivita 33(2):

111 – 118.

Prihastuti. 2011. Struktur Komunitas Mikroba Tanah dan Implikasinya dalam

Mewujudkan Sistem Pertanian Berkelanjutan. El-Hayah 1(4): 174-181.

Rifai, M.A. 1969. A Revision of the Genus Trichoderma sp.. Mycological Papers

116: 1 – 116.

Rostaman, T., L. Angria., dan A. Kasno. 2003. Ketersediaan Hara P dan K Pada

Lahan Sawah Dengan Penambahan Bahan Organik Pada Inceptisols.

Prosiding Seminar dan Kongres Nasional Himpunan Ilmu Tanah Indonesia

(HITI) X. Buku 1: 116-124. Jurusan Ilmu tanah Fakultas Pertanian UNS

Bekerjasama dengan Himpunan Ilmu Tanah Indonesia (HITI).

Sarles W. B., C. F. William, B. W. Joe, and G. K. Stanley. 1956. Microbiology

General and Applied 2nd edition New York: Harper and Brother.

Sastrahidayat, I. R. and S. Djauhari. 2012. Phytopathology Research Techniques

(Plant Pathology) (in Indonesian). Malang: UB Press. p. 174.

Smith D., and H. S Onions. 1994. The Preservation and Maintenance of Living

Fungi 2nd ed. London: Commonwealth Agricultural Bureaux Internasional.

Sudantha, I.M., dan A.L. Abadi. 2011.Uji Efektivitas Beberapa Jenis Jamur

Endofit Trichoderma spp. Isolat Lokal NTB Terhadap Jamur Fusarium

32

oxysporum f. sp. vanillae Penyebab Penyakit Busuk Batang pada Bibit

Vanili. Crop Agro 4(2): 64 – 73.

Suryanti, T. Martoedjo, A-H. Tjokrosoedarmono, dan E. Bustaman, H. 2000.

Penggunaan Jamur Pelarut Fosfat untuk Meningkatkan Pertumbuhan

Tanaman Jahe dan Penurunan Penyakit Layu. Seminar Nasional BKS

Barat Bidang Ilmu Pertanian. 23-24 September 2000.

Tindaon, H. 2008. Pengaruh Jamur Antagonis Trichoderma harzianum dan

Pupuk Organik untuk Mengendalikan Patogen Tular Tanah Sclerotium

rolfsii Sacc. Pada Tanaman Kedelai (Glycine max L) di Rumah Kasa.

Sumatera Utara. USU Repository.

Widiastuti, A., W. Agustina, A. Wibowo, dan C. Sumardiyono. 2011. Uji Efektivitas

Pestisida Terhadap Beberapa Patogen Penyebab Penyakit Penting pada

Buah Naga (Hylocereus sp.) Secara in Vitro. Jurnal Perlindungan Tanaman

Indonesia 12 (2): 73 – 76.

Wirawan, A.E., S. Djauhari, dan L. Sulistyowati. 2014. Analisis Perbedaan

Pengaruh Penerapan Sistem PHT dan Konvensional terhadap

Keanekaragaman Trichoderma sp. pada Lahan Padi. Jurnal HPT 2 (3):

66 – 73.

Wojtkowiak-Gębarowska. E., and S.J. Pietr. 2006. Colonization of Roots and

Growth Stimulation of Cucumber by Iprodione-resistant Isolates of

Trichoderma spp. Applied Alone and Combined with Fungicides.

Phytopathology. 41 : 51 – 64.

Bagian Depan.pdfBAB I.pdfBAB II.pdfBAB III.pdfBAB IV.pdfBAB V.pdfDaftar Pustaka.pdf