i

UJI CEMARAN KAPANG, KHAMIR DAN

BAKTERI Staphylococcus aureus PADA SERBUK JAMU KUNYIT

DI PASAR GEDE SURAKARTA

TUGAS AKHIR

Diajukan untuk memenuhi salah satu persyaratan

memperoleh gelar Ahli Madya D3 Farmasi

Oleh:

JULY ISWARA

NIM: M3513027

DIPLOMA 3 FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

2016

ii

iii

iv

UJI CEMARAN KAPANG, KHAMIR DAN

BAKTERI Staphylococcus aureus PADA SERBUK JAMU KUNYIT

DI PASAR GEDE SURAKARTA

JULY ISWARA

Jurusan D3 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sebelas Maret

INTISARI

Jamu banyak dikonsumsi oleh masyarakat untuk mengurangi, menghilangkan dan

menyembuhkan penyakit atau gejala penyakit. Salah satu jamu yang banyak diminati

masyarakat adalah jamu serbuk kunyit, selain karena harganya murah, mudah dalam

penggunaanya, jamu serbuk kunyit memiliki manfaat untuk memperlancar peredaran

darah, antiinflamasi, antibakteri, dan antioksidan. Mutu dan keamanan jamu serbuk

kunyit yang dikonsumsi masyarakat dapat dilihat dari nilai Angka Kapang/Khamir (AKK) dan ada tidaknya bakteri Staphylococcus aureus yang ditemukan sampel

jamu. Adanya AKK yang melebihi batas dan bakteri S.aureus yang ditentukan oleh

BPOM RI No.12 Tahun 2014 dapat membahayakan kesehatan. Penelitian ini

bertujuan untuk mengetahui AKK da nada tidaknya bakteri S.aureus pada jamu

serbuk kunyit yang dijual di Pasar Gede Surakarta.

Penelitian ini merupakan penelitian non-eksperimental dengan pendekatan survei

dan rancangan deskriptif. Penelitian yang dilakukan meliputi penentuan dan

pemilihan tempat pengambilan sampel, pengambilan sampel jamu serbuk kenyit,

pengujian AKK dan S.aureus, serta dilakukan analisis hasil.

Data dianalisa menggunakan metode analisa mikrobiologi yang ditetapkan

Departemen Kesehatan tahun 1992. Hasil pengujian menunjukkan nilai AKK jamu

serbuk kunyit adalah <10 sampai 3,8 x 102 koloni/ml dan negatif bakteri S.aureus.

Kata Kunci : Jamu serbuk kunyit, AKK, S.aureus

v

THE TEST OF MOLD, YEAST CONTAMINATION AND

Staphylococcus aureus IN THE POWDER OF JAMU KUNYIT

AT PASAR GEDE SURAKARTA

July Iswara

Diploma 3 Pharmacy, Faculty of Mathematic and Science

Sebelas Maret University

ABSTRACT

Jamu is a traditional herbal-medicine that has comsumed by lot people to reduce,

eliminate and disease or symtoms disease. One of the many popular herbal medicine

that consumed by lot people is the powder of jamu kunyit, it’s because relatively low

cost, easy to use, and the powder of jamu kunyit has many medicinal benefits for

improving blood circulation, anti-inflammatory, antibacterial and antioksidan.

The quality and safety the powder of jamu kunyit that comsumed should be seen

from the molds figure and yeast (AKK) and the presence or absence of S.aureus

bacteria in samples of herbal medicine. The existence of the Number of Mold/Yeast

(AKK) exceeding the limit specified by the BPOm No. 12 of 2014 would be danger

for health. The purpose og this research were to find out the AKK and the presence or

absence of S.aureus bacteria in the powder of jamu kunyit that sold in Pasar Gede

Surakarta.

The study was non-experimental, designed by survey and descriptive. The

research was conducted on the determination and selection of sampling place,

sampling the powder of jamu kunyit, AKK testing process and S.aureus testing

process, also from analysis result. The result of research analysis based of

Microbiological Analysis Method that specified by Depatemen Kesehatan of 1992.

The result of research showed that the number of mold/yeast is between <10 to 3,8 x

102 and S.aureus can’t be identified.

Keyword: The powder of jamu kunyit, Number of Mold/Yeast, S.aureus

vi

MOTTO

Barangsiapa yang memberi kemudahan kepada orang yang mengalami kesulitan,

maka Allah akan memberi kemudahan kepadanya di dunia dan di akhirat”

-HR. Muslim-

Aku akan berjalan bersama mereka yang berjalan karena aku tidak akan berdiri diam

sebagai penonton yang menyaksikan perarakan berlalu.

–Khalil Gibran–

Don’t be afraid to move, because the distance of 1000 miles starts by a single step.”

-Anonim-

Aku datang, aku bimbingan, aku ujian, aku revisi, dan aku menang.

vii

PERSEMBAHAN

Dengan mengucap syukur Alhamdullillah, tugas akhir ini

penulis persembahkan untuk :

Kedua orang tua ku tercinta, bapak Sri Harjono dan ibu

Surami, yang selalu memberikan kasih sayang tak

terhingga dan mendoakanku serta menanti keberhasilanku.

Kedua kakakku, mas Reza Aristiyanto dan mbak Wika

Septiani, dan simbah uti yang selalu memberikan

dukungan.

Ibu Estu Retnaningtyas Nugraheni, S.TP., M.Si selaku

pebimbing Tugas Akhir.

Teman seperjuanganku, Desi Purnaning Putri dan Retno

Dwi Ningrum, terimakasih telah berjuangan bersama.

Sahabatku tercinta Arna, Meylana, Dewi, Shinta, Wulan,

Tika, Betty, Renita, Dias

Teman-teman D3 Farmasi angkatan 2013

Almamater yang ku banggakan, Universitas Sebelas Maret

viii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat dan karunia-

Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir yang berjudul Uji Cemaran

Kapang, Khamir dan Bakteri Staphylococcus aureus pada Jamu Serbuk Kunyit di

Pasar Gede Surakarta dengan baik dan lancar. Penulisan tuga akhir ini merupakan

salah satu syarat untuk dapat memperoleh gelar Ahli Madya Farmasi Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta.

Penelitian ini merupakan penelitian non-ekseperimental yang dilakukan di

laboratorium untuk memberikan informasi cemaran angka kapang/khamir dan bakteri

Staphylococcus aureus pada jamu serbuk kunyit di Pasar Gede Surakarta. Penulisan

tugas akhir ini tidak terlepas dari bimbingan, bantuan dan dukungan dari berbagi

pihak baik secara langsung maupun tidak langsung, oleh sebab itu penulis

mengucapkan terima kasih yang setulusnya kepada :

1. Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc.(Hons), Ph.D, selaku Dekan Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret.

2. Estu Retnaningtyas Nugraheni S.TP.,M.Si selaku kepala progam studi D3

Farmasi FMIPA Universitas Sebelas Maret dan dosen pembimbing tugas akhir.

3. Anif Nur Artanti, M.Sc., Apt selaku dosen pembimbing akademik.

4. Kedua orang tua yang selalu memberikan doa restunya dan dukungan.

5. Teman-teman D3 Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sebelas Maret angkatan 2013.

ix

6. Berbagai pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, yang telah

memberikan segala bantuan dan dukungannya.

Penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun dari semua

pihak karena penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan laporan tugas akhir ini

masih banyak kesalahan dan kekurangannya. Penulis berharap semoga laporan tugas

akhir ini dapat bermanfaat bagi pembaca pada umumnya dan dapat bermanfaat bagi

perkembangan ilmu kefarmasian pada khhususnya.

Surakarta, Juni 2016

Penulis

x

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................. i

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... ii

HALAMAN PERNYATAAN .............................................................................. iii

INTISARI .............................................................................................................. iv

ABSTRACT .......................................................................................................... v

HALAMAN MOTTO ........................................................................................... vi

HALAMAN PERSEMBAHAN............................................................................ vii

KATA PENGANTAR .......................................................................................... viii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ................................................................................................. xiii

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xiv

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xv

DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................... xvi

BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ............................................................................ 1

B. Rumusan Masalah ..................................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ...................................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian .................................................................................... 3

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 5

A. Tinjauan Pustaka ....................................................................................... 5

1. Obat Tradisional .................................................................................. 5

xi

2. Jamu .................................................................................................... 6

3. Jamu Serbuk Kunyit ............................................................................ 8

4. Kapang dan Khamir ............................................................................ 9

5. Staphylococcus aureus ........................................................................ 11

6. Media Pertumbuhan ............................................................................ 12

7. Metode Pengujian................................................................................ 13

B. Kerangka Pemikiran .................................................................................. 14

BAB III. METODOLOGI PENELITIAN............................................................. 15

A. Metode Penelitian...................................................................................... 15

B. Variabel penelitian dan Definisi Operasional ........................................... 15

C. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................... 16

D. Bahan Penelitian........................................................................................ 16

E. Alat Penelitian ........................................................................................... 16

F. Rancangan Penelitian ................................................................................ 17

1. Pemilihan dan Pengambilan Sampel ................................................... 17

2. Sterilisasi Alat dan Ruangan ............................................................... 17

3. Pembuatan Media ................................................................................ 17

4. Pengenceran Sampel ........................................................................... 18

5. Pengujian Sampel ................................................................................ 19

6. Analisa Data ........................................................................................ 20

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 22

A. Penentuan dan Pemilihan Tempat Pengambilan Sampel .......................... 22

xii

B. Pemilihan dan Pengambilan Sampel ......................................................... 23

C. Sterilisasi Media, Alat, dan Ruangan ........................................................ 23

D. Homogenisasi dan Pengenceran Sampel ................................................... 25

E. Uji Cemaran Angka Kapang Khamir ........................................................ 26

F. Uji Cemaran Bakteri Staphylococcus aureus ............................................ 30

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 33

A. Kesimpulan ............................................................................................... 33

B. Saran .......................................................................................................... 33

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 34

LAMPIRAN .......................................................................................................... 37

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel I. Nilai AKK pada Sampel .......................................................................... 28

Tabel II. Hasil Uji Cemaran S.aureus pada Sampel.............................................. 31

xiv

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Lokasi Penjual Jamu di Pasar Gede Surakarta .................................... 22

Gambar 2. Sampel Jamu ....................................................................................... 23

Gambar 3. Proses Sterilisasi .................................................................................. 24

Gambar 4. Hasil pengujian cemaran AKK setelah Inkubasi 3 hari ...................... 28

Gambar 5. Hasil uji S.aureus pada Sampel ........................................................... 31

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Perhitungan Kloramfenikol .............................................................. 38

Lampiran 2. Data koloni kapang khamir............................................................... 39

Lampiran 3. Perhitungan AKK pada Jamu Serbuk Kunyit ................................... 41

Lampiran 4. Gambar AKK Sampel Jamu Serbuk kunyit ...................................... 44

Lampiran 5. Gambar Uji Cemaran S.aureus pada Sampel. ................................ 34

xvi

Daftar Singkatan

AKK : Angka Kapang/Khamir

S.aureus : Staphylococcus aureus

PDA : Potato Dekstrosa Agar

MSA : Manitol Salt Agar

1

BAB I

PENDAHULUAN

I. Latar Belakang

Jamu adalah salah satu ciri khas Indonesia yang sangat terkenal. Jamu

tetap menjadi andalan masyarakat Indonesia yang dikonsumsi secara

turun-menurun meskipun ilmu pengetahuan dan teknologi semakin

berkembang. Masyarakat Indonesia menggunakan obat tradisional,

termasuk jamu untuk menjaga kesehatan (Pratiwi, 2005). Jamu serbuk

adalah sediaan obat tradisional berupa butiran homogen dengan derajat

halus yang cocok, bahan bakunya berupa simplisia sediaan galenik, atau

campurannya. Sediaan serbuk ini penggunaannya dengan cara diseduh

dalam air mendidih. Air seduhan diminum sesuai kebutuhan (Anonim,

1994).

Peningkatan penggunaan obat tradisional perlu disikapi secara bijak,

karena masih adanya pandangan yang keliru bahwa obat tradisional selalu

aman, tidak ada risiko bahaya bagi kesehatan dan keselamatan konsumen

(Anonim, 2007). Departemen Kesehatan (Depkes) RI dalam Keputusan

Menteri kesehatan RI No: 661/Menkes/SK/II/1994 menyatakan bahwa

perlu dicegah beredarnya obat tradisional yang tidak memenuhi

persyaratan keamanan, kemanfaatan dan mutu. Menurut BPOM RI No. 12

tahun 2014 tentang persyaratan mutu jamu sediaan lain bentuk serbuk

tidak boleh mengandung Angka Kapang Khamir lebih dari 103

koloni/gram dan negatif bakteri patogen.

2

Berdasarkan observasi yang dilakukan oleh peneliti kepada lima

penjual jamu di Pasar Gede Surakarta, diperoleh informasi bahwa jamu

serbuk kunyit merupakan jamu yang paling banyak dikonsumsi

masyarakat karena dipercaya mampu mereduksi lemak atau sebagai

pelangsing dan untuk memelihara kecantikan. Selain itu harga jamu serbuk

kunyit relatif ekonomis..

Berdasarkan hal tersebut, mendorong peneliti untuk melakukan

penelitian mengenai aspek mikrobiologis pada jamu serbuk kunyit yang

dikonsumsi oleh masyarakat di Pasar Gede Surakarta. Pasar Gede

merupakan salah satu pasar di Surakarta yang banyak menjual jamu

racikan, selain itu Pasa Gede juga memiliki letak strategis dan banyak

dikunjungi masyarakat luas, terutama untuk membeli jamu. Dalam

Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia tentang Registrasi Obat

Tradisional pasal 4 ayat 1 menyatakan usaha jamu racikan tidak perlu

memiliki izin edar sehingga mayoritas standar mutu dan keamanan jamu

belum sepenuhnya terjamin. Adanya cemaran mikroorganisme pada jamu

serbuk dapat menyebabkan penurunan mutu dan keamanan jamu. Hal ini

mendorong peneliti untuk melakukan pengujian cemaran angka kapang

khamir dan S.aureus pada jamu sebuk kunyit yang merupakan salah satu

parameter jaminan mutu jamu serbuk secara mikrobiologi. Dengan adanya

penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi terhadap produsen

jamu serbuk kunyit tentang mutu dan keamanan jamu serbuk kunyit yang

3

dijual di Pasar Gede Surakarta sehingga dapat meningkatkan mutu dan

keamanan konsumen jamu serbuk kunyit.

II. Rumusan Masalah

1. Apakah terdapat cemaran mikroba berupa kapang, khamir, dan bakteri

S.aureus pada jamu serbuk kunyit di Pasar Gede Surakarta?

2. Berapakah nilai AKK yang terdapat pada jamu serbuk kunyit dari penjual

jamu di Pasar Gede Surakarta ?

3. Apakah hasil uji cemaran mikroba kapang, khamir, dan bakteri S.aureus

dalam jamu serbuk kunyit di Pasar Gede Surakarta sesuai persyaratan

Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan RI No. 12 tahun

2014?

III. Tujuan

1. Mengetahui ada tidaknya cemaran mikroba berupa kapang, khamir, dan

bakteri S.aureus pada jamu serbuk kunyit di Pasar Gede Surakarta.

2. Mengetahui nilai AKK dalam jamu serbuk kunyit dari penjual jamu di

Pasar Gede Surakarta.

3. Mengetahui kesesuaian hasil uji cemaran mikroba kapang khamir dan

bakteri S.aureus pada jamu serbuk kunyit di Pasar Gede Surakarta

dengan persyaratan Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan

Makanan RI Nomor 12 tahun 2014

IV. Manfaat

1. Untuk melindungi masyarakat terhadap obat tradisional yang tidak

memenuhi syarat mutu dan keamanan jamu.

4

2. Sebagai sumber informasi terkait keamanan dan mutu jamu serbuk kunyit

yang dikonsumsi.

3. Bahan acuan Dinas Kesehatan dan BPOM agar dapat lebih

memperhatikan adanya cemaran mikroba pada jamu tradisional.

4. Menambah wawasan di bidang kesehatan lingkungan tentang cemaran

mikroba pada jamu tradisional.

5. Sebagai bahan atau ide untuk melakukan penelitian selanjutnya.

5

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. TINJAUAN PUSTAKA

I. Obat Tradisional

Obat tradisional adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa

bahan tumbuhan, bahan mineral, sediaan sarian (galenik) atau

campuran dari bahan tersebut yang secara turun temurun telah

digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman (Anonim,

1992).

Obat tradisional telah berada dalam masyarakat dan digunakan

secara empiris karena memberikan manfaat dalam meningkatkan

kesehatan tubuh dan pengobatan berbagai penyakit. Departemen

Kesehatan mengklasifikasikan obat tradisional sebagai jamu, obat

herbal terstandar, dan fitofarmaka (Anonim, 2005).

Obat tradisional adalah ramuan dari berbagai macam jenis bagian

tanaman yang mempunyai khasiat untuk menyembuhkan berbagai

macam penyakit. Obat tradisional di Indonesia dikenal dengan nama

jamu. Obat herbal berstandar adalah sediaan obat bahan alam yang

telah dibuktikan keamanan dan khasiatnya secara ilmiah dengan uji

praklinik dan bahan bakunya telah distandarisasi. Fitofarmaka adalah

sediaan obat bahan alam yang telah dibuktikan keamanan dan

khasiatnya secara ilmiah dengan uji praklinik dan uji klinik, bahan

baku dan produk jadinya telah distandarisasi (Anonim, 2005).

6

Pada umumnya khasiat obat tradisional tidak dapat langsung

dirasakan. Cara kerjanya bertahap dengan pemakaian yang terus

menerus (Soedibyo, 2004). Berdasarkan fakta tersebut, perlu dilakukan

uji untuk memberi jaminan bahwa bahan obat tidak mengandung

cemaran mikroorganisme yang melebihi batas yang dipersyaratkan

oleh BPOM (2014) yaitu tidak lebih dari 103

koloni/gram. Jika dalam

obat tradisional terdapat cemaran mikroorganisme dengan jumlah yang

melebihi batas yang diperbolehkan dan dikonsumsi secara rutin, maka

penggunaan obat tradisional yang bertujuan untuk meningkatkan

kesehatan tidak dapat tercapai. Dengan jumlah cemaran

mikroorganisme yang melebihi batas, dikhawatirkan dapat berdampak

negatif bagi kesehatan masyarakat yang mengkonsumsi jamu,

misalnya terjadi gangguan pencernaan (Fardiaz, 1992).

Upaya untuk menjamin mutu dan keamanan obat tradisional harus

dilakukan sejak proses pembuatan obat tradisional, mulai dari

pemilihan dan penggunaan simplisia, seluruh proses produksi sampai

produk tersebut beredar di masyarakat (Warsito, 2011).

II. Jamu

Jamu adalah obat tradisional Indonesia yang dibuat dari tumbuhan,

bahan hewan, bahan mineral, sediaan sarian (galenik) atau campuran

dari bahan tersebut, yang secara turun temurun telah digunakan untuk

pengobatan berdasarkan pengalaman. Bahan-bahan yang digunakan

7

tidak menggunakan bahan kimia sintetik (Hermanto dan Subroto,

2007).

Jamu serbuk adalah sediaan obat tradisional berupa butiran

homogen dengan deraiat halus yang cocok; bahan bakunya berupa

simplisia sediaan galenik, atau campurannya. Sediaan serbuk ini

penggunaannya dengan cara diseduh dalam air mendidih. Air seduhan

diminum sesuai kebutuhan (Anonim, 1994).

Menurut Suharmiati dan Handayani (1998), pencemaran mikroba

pada produk-produk tradisional (termasuk jamu) dan produk makanan

pada umumnya bersumber dari bahan baku, pekerja, dan lingkungan

pengolahan termasuk peralatan produksi.

Menurut Keputusan Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan

tentang persyaratan mutu obat tradisional Nomor 12 Tahun 2014,

persyaratan mutu obat tradisional jamu serbuk sebagai berikut:

a. Organoleptik

Pengamatan dilakukan terhadap bentuk, rasa, baud an warna.

b. Kadar air

≤ 10%

c. Cemaran mikroba

Angka Lempeng Total : ≤ 104

koloni/g

Angka Kapang Khamir : ≤ 103

koloni/g

Escheria coli : negatif/g

Salmonella spp : negatif/g

Shigella spp : negatif/g

Pseudomonas aeruginosa : negatif/g

Staphylococcus aureus : negatif/g

8

d. Aflatoksi total (aflatoksin B1, B2, G1 dan G2)

Kadar aflatoksin total ≤ 20 dengan syarat aflatoksin B1 ≤ 5µg/kg.

e. Cemaran Logam Berat

Pb : ≤ 10 mg/kg atau mg/L atau ppm

Cd : ≤ 0,3 mg/kg atau mg/L atau ppm

As : ≤ 5 mg/kg atau mg/L atau ppm

Hg : ≤ 0,5 mg/kg atau mg/L atau ppm

f. Bahan Tambahan

Penggunaan pengawet, pemanis, dan pewarna diizinkan sesuai

peraturan yang berlaku

III. Jamu Serbuk Kunyit

Hampir semua orang Indonesia pernah mengkonsumsi kunyit baik

sebagai pelengkap bumbu masakan, jamu atau untuk menjaga

kesehatan dan kecantikan tubuh. Nama ilmiah tanaman ini adalah

Curcuma domestica Val. Kunyit banyak mengandung senyawa yang

berkhasiat sebagai obat, yaitu kurkuminoid yang terdiri dari kurkumin,

demetoksikurkumin, dan bisdemetoksikurkumin. Selain itu kunyit

mengandung minyak atsiri berupa sesquiterpen, tumeron, tumeon

zingiberen, dan garam-garam mineral lainnya. Bagian tanaman yang

banyak digunakan adalah rimpangnya. Kunyit berkhasiat untuk

mengobati penyakit diabetes mellitus, disentri, keputihan, haid tidak

lancar, dan perut mulas saat haid (Warsito, 2011).

Kunyit mempunyai khasit sebagai jamu dan obat tradisional untuk

berbagai penyakit. Senyawa yang terkandung mempunyai peranan

sebagai antioksidan, antitumor, antikanker, antimikroba, antipikun,

dan antiracun. Secara tradisional kunyit sering digunakan oleh

9

masyarakat untuk mengobati berbagai penyakit, seperti penyakit yang

disebabkan mikroba parasite, gigitan serangga, penyakit mata, cacar,

gangguan pencernaan, asma, menghilangkan gatal-gatal, mengurangi

nyeri dan sakit pada penderita rematik arthritis (Anonim, 2013).

IV. Kapang dan Khamir

Kapang merupakan mikroorganisme bersel banyak yang

membentuk misela yang tampak sebagai benang-benang halus.

Mikroba ini membentuk spora sebagai salah satu alat

perkembangbiakannya. Kapang juga dapat membentuk mikotoksin

yang telah dikenal sebagai penyebab keracunan (Anonim, 1998).

Kapang adalah fungi multiseluler yang mempunyai filamen.

Filamen merupakan ciri khams morfologi kapang yang membedakan

dengan khamir. Dengan adanya filamen, penampakan koloni kapang

berserabut seperti kapas. Pertumbuhan mula-mula berwarna putih,

tetapi jika spora telah timbul akan membentuk berbagai warna

tergantung dari jenis kapang (Fardiaz, 1992).

Beberapa kapang dapat menyebabkan karsinogenik (menyebabkan

kanker) yang berbahaya bagi manusia dan beberapa kapang

merupakan penyebab berbagai infeksi pernafasan dan kulit pada

manusia (Buckle, 1985).

Khamir adalah fungi uniselular yang menepati habitat air dan

lembab, termasuk getah pohon dari jaringan hewan. Khamir

bereproduksi secara aseksual, dengan cara pembelahan sel sederhana

10

atau dengan cara pelepasan sel tunas dari sel induk. Beberapa fungi

dapat tumbuh sebagai sel tunggal atau sebagai miselium filament,

tergantung pada ketersediaan zat-zat hara yang ada (Cambell et al,

2003).

Faktor-faktor intrinsik yang diperlukan dalam pertumbuhan khamir

adalah cukup suplai air, suhu optimal 25oC sampai 30

oC dan tumbuh

optimal secara aerobik (sebagian tumbuh pada lingkungan anaerobik)

(Winarno, 1997).

Kapang/khamir dapat mencemari obat tradisional, melalui bahan

baku yang digunakan dalam pengolahan obat tradisional seperti pada

rimpang kunyit yang pada umumnya tumbuh di dalam tanah. Kapang

khamir terdapat di dalam tanah. Bahan baku yang tumbuh di dalam

tanah tersebut memiliki kondisi lingkungan yang menunjang

pertumbuhan fungi (kapang khamir), seperti keadaan tanah yang

lembab atau basah dan kandungan air yang terdapat dalam bahan baku

obat tradisional. Oleh karena itu, bahan baku yang digunakan harus

dicuci bersih sebelum digunakan sehingga dapat mengurangi

kontaminasi kapang khamir. Selain tumbuh di dalam tanah, kapang

khamir dapat tumbuh selama proses penyimpanan bahan baku jamu,

penyimpanan makanan dan minuman, serta dalam kondisi tanah yang

lembab (Pratiwi, 2008).

11

V. S.aureus

Bakteri S.aureus termasuk kedalam famili Microccaceae, pada

umumnya membentuk pigmen kuning keemasan, memproduksi

koagulasi, dapat memfermentasi glukosa dan manitol dengan

memproduksi asal dalam keadaan anaerobik. Bakteri ini berbentuk

bulat (kokus), berukuran 1µm, gram positif, tidak berspora, katalase

positif, dan biasanya sel-selnya terdapat dalam kelompok seperti buah

anggur (Supardi dan Sukamto, 1999).

Radji (2011), mengemukakan bahwa S.aureus merupakan flora

normal yang terdapat pada kulit manusia. Jenis bakteri patogen yang

dapat menimbulkan infeksi dan kelainan pada kulit. Secara ekologis,

S.aureus erat sekali hubungannya dengan manusia terutama pada

bagian kulit, hidung dan tenggorokan. Dengan demikian

makanan,minuman, dan produk jamu yang diolah secara manual akan

mudah tercemar S.aureus.

Gejala-gejala dari produk yang tercemar Staphylococcus aureus

bersifat intoksikasi. Pertumbuhan organisme ini dalam bahan pangan

menghasilkan racun enterotoksin, dimana apabila termakan dapat

mengakibatkan serangan mendadak, yaitu kekejangan pada perut dan

muntah-muntah yang hebat dan diare dapat juga terjadi (Buckle et al,

2008).

Apabila dalam jamu serbuk kunyit yang akan dikonsumsi tercemar

bakteri S.aureus maka akan mengakibatkan keracunan yang ditandai

12

serangan mendadak, yaitu kekejangan pada perut dan muntah-muntah

hebat, dan diare. Hal tersebut karena zat yang tercemar bakteri

S.aureus bersifat intoksikasi dan dapat menghasilkan racun

enterotoksin (Dwidjoseputro, 2003).

VI. Media Pertumbuhan

Untuk menumbuhkan suatu mikroorganisme, diperlukan suatu

substrat makanan yang disebut media. Media pertumbuhan

mikroorganisme adalah bahan yang tersusun dari bermacam-macam

zat makanan atau nutrisi yang diperlukan untuk pertumbuhan

mikroorganisme dalam komponen sel-selnya (Aulia, 2012).

Berikut adalah media yang digunakan untuk penelitian:

1. Potato Dextrose Agar (PDA).

Media ini menyediakan nutrisi untuk menstimulasi pertumbuhan

konidium pada jamur (Murray, 1999). PDA mengandung

dektrosa dan ekstrak kentang sebagai sumber nutrisi yang baik

untuk pertumbuhan fungi (Bridson, 2006).

2. Manitol Salt Agar (MSA)

MSA merupakan media selektif dan media diferensial (Sharp,

2006). Penanaman dilakukan dengan cara satu usap biakan

diambil dari media pepton, dan diusapkan pada media MSA,

kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam (Lay, 1994).

Staphylococcus aureus pada media MSA menunjukkan

pertumbuhan koloni berwarna putih kekuningan dikelilingi zona

13

kuning karena kemampuan memfermentasi manitol. Bakteri yang

tidak mampu memfermentasi manitol tampak zona berwarna

merah atau merah muda (Boyd dan Morr, 1984).

VII. Metode Pengujian Cemaran

a. Uji Angka Kapang Khamir

Prinsip uji angka kapang khamir pada makanan dan minuman

sesuai metode analisis mikrobiologi (MA PPOM 62/MIK/06)

yaitu pertumbuhan kapang/khamir setelah cuplikan diinokulasi

pada media yang sesuai dan diinkubasi pada suhu 20-25oC. Pada

uji ini digunakan aquadest steril sebagai larutan pengencer, PDA

yang ditambahkan kloramfenikol (100 mg/L) (0,01%) sebagai

media pertumbuhannya.

b. Uji S.aureus

Untuk mengidentifikasi bakteri S.aureus secara konvensional

menggunakan media MSA. Media MSA merupakan media yang

bekerja dengan prinsip bakteri yang dapat tumbuh pada keadaan

garam yang tinggi dan selama pertumbuhan menghasilkan asam,

sehingga mengubah indikator pH yang mengubah warna merah

menjadi kuning. Pengujian dilakukan dengan cuplikan diinokulasi

pada media MSA dan diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam

(Bintoro, 2008).

14

B. Kerangka Pemikiran

Pembuatan jamu serbuk kunyit berasal dari rimpang kunyit

yang berada dalam tanah sehingga memiliki kondisi yang

lembab untuk ditumbuhi kapang, khamir dan banyak

mengandung mikroba patogen.

Pada proses pengolahan yang masih manual dan sederma

pengolahan secara langsung menggunakan tangan tidak

menutup kemungkinan terkontaminasi bakteri S.aureus.

Produk jamu serbuk yang siap dikonsumsi memiliki standar

persyaratan mutu yang diatur dalam BPOM RI No. 12

Tahun 2014

Jamu bentuk serbuk memiliki AKK tidak

lebih dari 103 koloni/gram.

Jamu bentuk serbuk bebas/negatif

bakteri S.aureus

15

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Jenis penelitian ini adalah penelitian non-eksperimental dengan

pendekatan survei dan rancangan deskriptif, karena dalam penelitian tidak

dilakukan perlakuan pada subjek penelitian.

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional

1. Variabel Penelitian

a. Variabel Bebas : jamu serbuk kunyit yang dijual oleh lima penjual

jamu di Pasar Gede Surakarta.

b. Variabel Tergantung : nilai AKK dan cemaran bakteri S.aureus.

c. Variabel Terkendali : suhu inkubasi, lama inkubasi, media yang

digunakan, sterilisasi alat, sterilisasi media.

2. Definisi Operasional

a. Jamu serbuk adalah sediaan obat tradisional berupa butiran

homogen dengan deraiat halus yang cocok, bahan bakunya berupa

simplisia sediaan galenik, atau campurannya (Anonim, 1994).

b. Uji Angka Kapang/Khamir (AKK) adalah suatu uji cemaran

mikroba yang dilakukan dengan menghitung jumlah koloni kapang

dan khamir yang terdapat dalam sampel yang diperiksa setelah

cuplikan diinokulasikan pada media yang sesuai dan mengalami

inkubasi pada suhu 25oC selama 3-5 hari dengan metode dan

analisa hasil sesuai PPOMN 2006.

16

c. Uji Identifikasi S.aureus adalah uji untuk melihat keberadaan

S.aureus pada sampel yang diperiksa menggunakan media selektif

MSA dan pengamatan koloni dapat dilakukan dengan mengamati

adanya koloni cembung warna kuning dan media berubah menjadi

jernih (BPOM RI, 2008).

C. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Pusat FMIPA Universitas

Sebelas Maret Surakarta pada bulan Februari hingga April 2016.

D. Bahan Penelitian

1. Bahan Utama

Bahan utama yang digunakan adalah jamu serbuk kunyit yang

diperoleh dari lima penjual jamu diwilayah Pasar Gede Surakarta.

2. Media Uji dan Bahan Kimia

a. Media yang digunakan untuk pengujian AKK adalah media PDA.

b. Media selektif S.aureus yang digunakan untuk mengetahui ada

tidaknya S.aureus adalah media MSA.

c. Kloramfenikol, aquadest steril, dan aquadest.

E. Alat Penelitian

Alat yang digunakan dalam penelitian Laminar Air Flow (Speg Air

Tech), autoclave (Sturdy), inkubator (Selecta), pipet volume, pipet tetes

(iwaki), tabung reaksi (pyrex), gelas beaker (pyrex), cawan petri (pyrex),

gelas ukur (pyrex), neraca analitik (Mettler Toledo), batang pengaduk,

spreader glass, hotplate, bunsen, dan colony counter (colony star).

17

F. Rancangan Penelitian

1. Pemilihan dan Pengambilan Sampel

Sampel jamu serbuk kunyit diperoleh dari penjual jamu yang

menetap atau kios jamu yang terdapat di Pasar Gede. Terdapat 5 (lima)

kios jamu yang menetap di Pasar Gede. Pengambilan sampel jamu

diambil dari keseluhan kios jamu.

Pengambilan jamu serbuk kunyit diambil secara acak dengan

mengambil pada beberapa bagian yaitu bagian atas, tengah, dan bawah

yang selanjutnya dihomogenkan dengan cara diaduk, sampel diambil

sebanyak 50 gram.

2. Sterilisasi Alat dan Ruangan

Alat-alat yang digunakan terlebih dahulu dicuci bersih dan

dikeringkan. Tabung reaksi, erlenmeyer, gelas ukur, dan pipet ditutup

mulutnya dengan kapas, kemudian dibungkus dengan kertas perkamen.

Cawan petri dibungkus terpisah dengan perkamen, kemudian semua

alat disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121ºC dan tekanan 15 lbs

selama 15 menit. Spatel dan pinset disterilkan dengan cara flambier

pada lampu spiritus. Lemari aseptis dibersihkan dengan menggunakan

metanol 70%.

3. Persiapan Pembuatan Media

a. Potato Dextrose Agar (PDA)

Serbuk PDA sebanyak 39 gram disuspensikan dalam 1000mL

aquadest, kemudian dilarutkan dengan pemanasan dan diaduk

18

hingga merata, diamsukkan kedalam wadah yang sesuai

selanjutnya ditambah kloramfenikol dan dicampur hingga merata.

Sterilisasi dengan autoclave selama 15 menit pada suhu 121oC,

kemudian dituang kedalam cawan petri dan biarkan memadat.

b. Pembuatan Manitol Salt Agar (MSA)

Sebanyak 108 gram media disuspensikan dalam 1 liter

aquades, dipanaskan sampai bahan terlarut sempurna. Selanjutnya

media disterilisasi menggunakan autoklaf pada tekanan 1 atm dan

suhu 1210C selama 15 menit. Kemudian dituang ke dalam cawan

petri steril. media dibiarkan membeku (menjadi padat).

4. Pengenceran Sampel

a. Sampel untuk uji AKK

Sampel jamu dipipet secara aseptis sebanyak 1mL dan

dimasukkan dalam wadah yang sesuai yang telah berisi 10mL

aquadest steril sehingga diperoleh pengenceran (1 : 10) 10-1

.

Kemudian dikocok beberapa kali hingga homogen. Selanjutnya

dipipet 1mL sampel pengenceran 10-1

, dimasukkan kedalam tabung

reaksi yang telah berisi 9mL aquadest steril sehingga diperoleh

pengenceran 10-2

, kemudian dikocok hingga homogen. Pengencern

dibuat hingga pengenceran 10-4

.

19

b. Sampel untuk uji S.aureus

Satu gram sampel jamu serbuk kunyit dilarutkan dalam 10 ml

aquadest steril, dikocok hingga homogen sehingga diperoleh

pengenceran 10-1

.

5. Pengujian sampel

a. Uji Angka Kapang/Khamir

Pengujian cemaran kapang/khamir dari sampel jamu serbuk

kunyit yang telah dilarutkan mengacu pada metode analisis

mikrobiologi BPOM (Anonim, 2006) dilalukuan dengan teknik

cawan agar sebar (spread plate method) dilakukan replikasi duplo.

Sebanyak 1 ml suspensi hasil pengenceran sampel dituang

pada permukaan media PDA dan diratakan dengan bantuan

spreader glass. Sebagai kontrol digunakan media yang telah

ditambah kloramfenikol dan larutan pengencer (larutan aquadest

steril). Cawan petri selanjutnya diinkubasi pada temperature 20-

250C selama 3 - 5 hari. Penghitungan jumlah koloni kapang/khamir

yang tumbuh pada media dilakukan sesuai cara perhitungan yang

ditetapkan dalam prosedur operasional baku pengujian

mikrobiologi oleh Departemen Kesehatan tahun 1992.

b. Uji cemaran bakteri S.aureus

Pengujian cemaran S.aureus dilakukan dengan sebanyak 1 ml

suspensi sampel dituang pada permukaan media MSA dan

diratakan dengan spreader glass. Cawan petri selanjutnya

20

diinkubasi pada temperatur 37oC selama 24 jam (Pelczer dan Chan,

2005). Bakteri S.aureus dapat diketahui dengan adanya perubahan

warna dari media dari warna merah menjadi jernih.

6. Analisis Data

a. Perhitungan cemaran kapang/khamir

Dipilih cawan petri dari satu pengenceran yang menunjukkan

jumlah koloni antara 40-60. Jumlah koloni dari kedua cawan petri

dihitung kemudian dikalikan dengan faktor pengencerannya. Bila

pada dua cawan pada tingkat dua tingkat pengenceran dan

berurutan menunjukkan jumlah antara 40-60, maka dihitung

jumlah koloni dan dikalikan faktor pengenceran kemudian diambil

rata-rata. Angka diambil dinyatakan sebagai angka kapang/khamir

dalam tiap gram contoh. Untuk beberapa kemungkinan lain yang

berbeda dari pernyataan di atas, maka ikuti petunjuk sebagai

berikut:

1) Bila hanya salah satu dari kedua cawan petri dari pengenceran

yang sama menunjukkan jumlah koloni antara 40-60 buah,

dihitung jumlah koloni dari kedua cawan dan dikalikan dengan

faktor pengenceran.

2) Bila pada tingkat pengenceran yang lebih tinggi didapat koloni

lebih besar dari dua kali jumlah koloni pada pengenceran

dibawahnya, maka dipilih tingkat pengenceran terendah.

21

3) Bila dari seluruh cawan petri tidak ada satu pun yang

menunjukkan jumlah antara 40-60 koloni, maka dicatat angka

sebenarnya dari tingkat pengenceran terendah dan dihitung

sebagai angka kapang/khamir perkiraan.

4) Bila tidak ada pertumbuhan pada semua cawan bukan

disebabkan factor inhibitor, maka angka kapang/khamir

dilaporkan sebagai kurang dari satu dikalikan faktor

pengenceran (Departemen Kesehatan tahun 1992).

b. Analisis cemaran bakteri S. aureus

Analisis dilakukan dengan cara mengamati adanya koloni

cembung warna kuning yeng menyebabkan media berubah menjadi

jernih.

22

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Jamu serbuk adalah sediaan obat tradisional berupa butiran homogen dengan

deraiat halus yang cocok, bahan bakunya berupa simplisia sediaan galenik, atau

campurannya (Anonim, 1994). Jamu serbuk kunyit sering digunakan oleh

masyarakat untuk mengobati berbagai penyakit, seperti penyakit yang disebabkan

mikroba parasite, gigitan serangga, penyakit mata, cacar, gangguan pencernaan,

asma, menghilangkan gatal-gatal, mengurangi nyeri dan sakit pada penderita

rematik arthritis (Anonim, 2013).

A. Penentuan dan Pemilihan Tempat Pengambilan Sampel

Peneliti memilih Pasar Gede Surakarta ini karena merupakan salah satu pasar

terlengkap di Surakarta. Pasar Gede ini memiliki letak yang strategis yang banyak

diketahui dan dikunjungi masyarakat.. Pasar Gede Surakarta banyak dikunjungi

pembeli, bahkan pekerja di sekitar pasar sehingga biasanya masyakat membeli

jamu di Pasar Gede. Terdapat 5 (lima) kios jamu menetap yang menjual jamu

serbuk kunyit di Pasar Gede Surakarta yang berada pada satu tempat yang

berdekatan yang dapat dilihat pada gambar 1.

Gambar 1. Lokasi Penjual Jamu di Pasar Gede

23

B. Pemilihan dan Pengambilan Sampel

Pemilihan jamu serbuk kunyit, didasarkan hasil wawancara di lapangan

diketahui presentase penggunaan kunyit yang cukup tinggi dan menunjukkan

kunyit merupakan jamu yang sering dibeli masyarakat maka peneliti memilih

jamu serbuk kunyit. Pemilihan jamu bentuk sediaan serbuk karena masyarakat

lebih sering mengkonsumsi sediaan bentuk serbuk karena lebih praktis, dimana

dalam mengkonsumsi jamu hanya perlu diseduh dengan menggunakan air hangat.

Pengambilan sampel dilakukan secara acak yaitu dengan mengambil bagian

atas, tengah, dan bawah kemudian dihomogenkan dengan cara diaduk dari

masing-masing penjual. Sampel yang diambil sebanyak 50 gram. Sampel

dimasukkan dalam bungkus plastik bening menyesuaikan keadaan realita

pembelian jamu yang dilakukan masyarakat yaitu dengan menggunakan bungkus

plastik bening yang dapat dilihat pada gambar 2.

Gambar 2. Sampel Jamu Serbuk Kunyit yang akan diuji

C. Sterilisasi Media, Alat, dan Ruangan

Sterilisasi adalah proses atau kerja untuk membebaskan suatu bahan seperti

medium pertumbuhan mikroba atau peralatan laboratorium dari semua bentuk

kehidupan (Imam, 2010). Prosesnya dapat berupa pemanasan, pemberian zat

kimia, radiasi, atau filtrasi. Sehingga dalam pemilihan metode sterilisasi dilakukan

24

tergantung sifat dan jenis bahan yang akan disterilisasikan (Gruendemann dan

Fernsebner, 2006).

Sterilisasi perlu dilakukan karena apabila alat maupun media yang digunakan

selama pengerjaan tidak steril, maka tidak dapat dibedakan apakah cemaran

mikroba yang tumbuh berasal dari sampel atau hasil kontaminasi alat maupun

media, sehingga perlu dilakukan sterilisasi untuk membebaskan alat dan media

dari segala bentuk kontaminasi (Hadioetomo, 1985).

Pada penelitian menggunakan air dan media PDA serta MSA merupakan

media yang terkandung banyak nutrisi yang digunakan untuk pertumbuhan

kapang/khamir dan mikroorganisme S. aureus sehingga sterilisasi menggunakan

metode sterilisasi panas basah menggunakan autoklaf suhu 121o C selama 15

menit. Prinsip kerja dari metode ini adalah mendenaturasikan atau

mengkoagulasikan protein pada organisme hidup dan dengan demikian

mematikannya (Hadioetomo, 1985).

Peralatan seperti cawan petri dan peralatan kaca lainnya yang telah dicuci,

ditutup kapas atau alumunium foil pada ujung tabung reaksi, dan dibungkus kertas

disterilisasikan menggunakan metode sterilisasi panas basah menggunakan

autoklaf suhu 121o C selama 20 menit seperti pada gambar 3.

Gambar 3. Proses Sterilisasi Alat

25

Sterilisasi ruangan digunakan dengan mengelap tempat bekerja menggunakan

alkohol 70% sebelum memulai pekerjaan. Penggunaan Laminar Air Flow (LAF)

perlu disterilisasi dengan menyemprotkan alcohol 70% pada dinding bagian dalam

LAF kemudian dilap menggunakan kapas steril. Kemudian LAF ditutup dan

lampu UV dinyalakan selama 1 jam pada panjang gelombang UV 260-270 nm

sehingga akan menghambat replikasi DNA sehingga mikroorganisme akan mati

(Suriawiria, 2005)

D. Homogenisasi dan Pengenceran Sampel

Homogenisasi merupakan cara penyiapan sampel untuk memperoleh

distribusi bakteri atau jamur sebaik mungkin dalam sampel yang ditetapkan

(Anonim, 1992). Dasar dari homogenisasi adalah membebaskan sel-sel bakteri

atau sel-sel jamur yang terlindung oleh partikel dalam sampel dan untuk

menggiatkan kembali sel-sel bakteri atau sel-sel jamur yang mungkin terganggu

kelangsungan hidupnya karena kondisi yang kurang menguntungkan di dalam

sampel (Hadioetomo, 1985). Pengenceran ampel bertujuan untuk membantu

dalam perhitungan koloni yang benar (Lay, 1994).

Homogenisasi sampel yang digunakan untuk uji angka kapang dan khamir

dilakukan secara aseptis dengan cara mebuka dan mengencerkan dekat nyala api

bunsen dan di dalam LAF, untuk pengujian AKK sampel dilakukan pengenceran

hingga 10-4

, sedangkan untuk pengujian cemaran S. aureus pengenceran hingga

10-1

. Apabila pengenceran tidak dilakukan, maka koloni yang akan tumbuh

semakin pekat dan sulit dihitung jumlah yang nantinya akan menyulitkan proses

perhitungan jumlah koloni. Prinsip dari pengenceran ini adalah diperolehnya

26

individu fungi yang tumbuh secara terpisah dan tampak pada cawan setelah

inkubasi.

Pengenceran sampel menggunakan pelarut aquadest steril. Hal ini karena jika

pelarut yang digunakan telah steril maka tidak akan mempengaruhi hasil uji yang

dilakukan.

E. Uji Cemaran Angka Kapang Khamir

Pengujian angka kapang khamir bertujuan untuk mengetahui jumlah koloni

kapang/khamir dalam jamu serbuk kunyit yang dijual di Pasar Gede Surakarta. Uji

ini merupakan salah satu parameter mutu dan kualitas jamu yang dikonsumsi.

Jamu dikatakan aman dikonsumsi jika angka kapang khamir tidak melebihi batas

yang ditentukan BPOM. Pertumbuhan kapang dan khamir dipengaruhi oleh

kondisi yang lembab.

Jamu serbuk kunyit dan simplisia jamu kunyit memiliki perbedaan luas

permukaan, simplisia memiliki bentuk rajangan tipis halus sedangkan jamu serbuk

berbentuk serbuk dengan derajat kehalusan tertentu. Untuk mengkonsumsi jamu

serbuk dan simplisia ini juga memiliki perbedaan jamu simplisia diperlukan

pencucian, penumbukan kemudian direbus sedangkan jamu serbuk hanya perlu

diseduh dengan air hangat. Perbedaan luas permukaan pada jamu serbuk dan

simplisia akan mempengaruhi nilai AKK pada jamu meskipun berasal dari bahan

yang sama. Jamu serbuk memiliki luas permukaan yang lebih besar sehingga

memungkin lebih mudah tercemar mikroorganisme.

Pada uji AKK ini menggunakan media yang sesuai untuk pertumbuhan

kapang dan khamir yaitu PDA (Potato Dextrosa Agar). PDA mengandung

27

dekstrosa, ekstrak kentang dan agar karena media ini menyediakan faktor nutrient

yang sangat baik untuk pertumbuhan kapang dan khamir (Murray, 1996). Pada

penelitian ini PDA ditambahkan antibiotik kloramfenikol bertujuan antibakteri

sehingga diharapkan yang tumbuh dalam media adalah kapang/khamir.

Kloramfenikol adalah antibilotik yang mempunyai aktivitas spectrum antibakteri

yng relative luas dan tahan terhap panas. Kloramfenikol berkerja terhadap bakteri

intra maupun ekstraseluler secara bakteriostatik. Kloramfenikol bekerja

menghambat sintsis protein bakteri yang mengakibatkan lisi dan mati (Wattimena,

1991). Kloramfenikol efektif terhadap Streptococcus pneumonia, Streptococcus

pyogenes, Streptococcus viridans, Haemophilus, Nisseria, Bacillus spp, Listeria,

Bartonella, Brucella, hlamydia fragilities (Katzung, 2004).

Kloramfenikol tidak akan menghambat pertumbuhan kapang/khamir karena

kapang/khamir adalah sel eukariotik yang tidak memiliki sub unit ribosom 50s

(Fardiaz, 1992). Kloramfenikol sudah dapat memberikan aktifitas antibiotik yang

optimal pada konsentrasi 50mg/L dengan perhitungan pada lampiran 1 (Theantena

et al, 2007).

Penelitian membuat blangko dibuat kontrol media dan kontrol pelarut.

Kontrol media hanya berisi media PDA saja, sedangkan kontrol pelarut berisi

media PDA dengan larutan pengencer yaitu aquadest steril yang digunakan. Hal

ini bertujuan untuk memastikan bahwa mikroorganisme yang tumbuh bukan

berasal dari media atau pelarut yang digunakan.

Prinsip uji kapang/khamir pada makanan dan minuman sesuai metode analisa

mikrobiologi (MAPPOM 62/MIK/06) yaitu pertumbuhan kapang/khamir setelah

28

cuplikan diinokulasi pada media yang sesuai dan diinkubasi pada suhu 20-25oC.

Pada penelitian ini menggunakan suhu inkubasi 25oC yang diinkubasi selama 3

hari. Kapang/khamir memiliki struktur yang kompleks dan membutuhkan waktu

yang lama untuk membentuk spora (Bridson, 2006). Koloni yang tumbuh pada

petri dihitung dan dianalisa dengan cara yang ditetapkan oleh Badan Standarisasi

Nasional dalam Standar Nasional Indonesia No. 01-2897-1992 sehingga dapat

diketahui jumlah koloni/gram jamu serbuk. Pertumbuhan koloni dapat dilihat pada

gambar 4.

A (-)

B (-)

C (+) Gambar 4. Hasil pengujian cemaran AKK setelah Inkubasi 3 hari

Keterangan Gambar A: Kontrol Media PDA, B: Kontrol Pelarut Aquades Steril, C: Koloni

Kapang/Khamir pada Sampel, (-) = Tidak Ada Pertumbuhan Kapang/Khamir, (+) = Terdapat

Pertumbuhan Kapang/Khamir

Setelah inkubasi selama 3 hari didapatkan data jumlah koloni sampel pada

(lampiran 2), dihitung nilai AKK sampel dan diperoleh hasil pada tabel 1.

Tabel 1. Angka Kapang Khamir (AKK) Jamu Serbuk Kunyit

Sampel AKK (koloni/mL)

A 2,50 x 102

B 3,80 x 102

C 0,40 x 102

D 0,25 x 102

E <10

Pelarut 0

Media 0

29

Dari Tabel 1, kontrol media dan kontrol sampel tidak ditumbuhi kapang atau

khamir, sehingga pada sampel yang telah dikolonikan pada media yang ditumbuhi

kapang atau khamir merupakan bukan berasal dari media atau pelarut yang

digunakan, selanjutnya nilai AKK dari jamu serbuk kunyit dibandingkan dengan

persyaratan dari BPOM No. 12 Tahun 2014 batas keamanan yang diperbolehkan

tidak melebihi 103

koloni/gram. Pada kelima sampel jamu serbuk kunyit yang

diuji seluruhnya berada pada batas aman atau masuk dalam range aman yang

dipersyaratkan.

Nilai AKK pada jamu harus dibatasi dalam batas aman untuk dikonsumsi

karena kapang dapat menghasilkan metabolit beracun yang disebut mikotoksin.

Beberapa jenis kapang selama proses pembusukan pangan atau pertumbuhannya

dalam bahan pangan dapat memproduksi racun yang dikenal sebagai mikotoksin.

Sebagai suatu kelompok zat, mikotoksin dapat menyebabkan gangguan hati,

ginjal dan susunan syaraf pusat dari manusia maupun hewan. Selain itu terdapat

khamir yang menyebabkan pembusukan pada produk makanan atau minuman

seperti Saccharomyces rouxii (Winarno, 1980).

Agar diperoleh jamu yang aman dikonsumsi, Untuk itu dalam mengolah jamu

maka perlu diperhatikan masalah kebersihan, kesehatan, dan sanitasi saat proses

pengolahan jamu tradisional yaitu mulai dari memilih bahan baku, membersihkan,

menakar, menghancurkan, menyaring, hingga mewadahi jamu tradisional. Sumber

tingginya AKK dapat berasal bahan baku, peralatan, dan SDM.

Menurut (Suharmiati, 2013), hal yang perlu diperhatikan pada bahan baku,

menggunakan bahan yang masih segar dan dicuci, apabila menggunakan bahan

30

ramuan yang sudah dikeringkan seharusnya dipilih yang tidak berjamur,

penggunaan yang digunakan baik untuk pencucian atau penggolahan digunakan

air bersih, matang, dan masak.

F. Uji Cemaran bakteri S.aureus

Uji Cemaran bakteri S.aureus pada jamu serbuk jamu kunyit di Pasar Gede

Surakarta ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya bakteri S. aureus. Uji ini

merupakan salah satu parameter keamanan dan mutu jamu yang dikonsumsi. Jamu

dikatakan aman dikonsumsi jika salah satunya negatif bakteri S.aureus.

Keberadaan S. aureus pada jamu perlu dilakukan pengujian karena bakteri

tersebut erat sekali hubungannya dengan manusia terutama pada bagian kulit,

hidung, dan tenggorokan. Dengan demikian jamu kebanyakan tercemar melalui

pengolahan oleh manusia (Buckle, 2008).

S.aureus merupakan salah suatu bakteri patogen dan biasanya bakteri ini

dapat digunakan sebagai indikator dari pengolahan jamu yang tidak higienis,

sehingga mampu menghasilkan enterotoksin yang dapat langsung dideteksi dalam

jamu yang dikonsumsi. Enterotoksin dapat menyebabkan jamu tercemar dan

mengakibatkan keracunan pada manusia.

Pada pengujian S.aureus menggunakan media MSA. MSA merupakan media

selektif dan media diferensial (Sharp, 2006). Tujuan penggunaan media MSA

adalah hanya untuk menyeleksi atau mengidentifikasi bakteri S.aureus saja.

Parameter adanya cemaran S.aureus pada media MSA menunjukkan

pertumbuhan koloni berwarna putih kekuningan dikelilingi zona kuning karena

kemampuan memfermentasi manitol. Bakteri yang tidak mampu memfermentasi

31

manitol tampak zona berwarna merah atau merah muda (Boyd dan Morr, 1984).

Hasil inkubasi sampel dapat dilihat pada gambar 6.

A (-)

B (-)

C (-)

Gambar 6. Hasil Uji Cemaran S. aureus pada sampel setelah inkubasi 24 jam

Ket. Gambar: A: Kontrol Media MSA, B: Kontrol Pelarut Aquades Steril, C: Pertumbuhan

Bakteri S.aureus pada Sampel , (-) = Tidak Ada Pertumbuhan Staphylococcus aureus, (+) =

Terdapat Pertumbuhan Staphylococcus aureus

Hasil pengamatan setelah media yang telah diberi sampel diinkubasi selama 24

jam sebagai berikut:

Tabel 2. Hasil Uji Cemaran S aureus Jamu Serbuk Kunyit

Sampel Replikasi Hasil

A 1 - (negatif)

2 - (negatif)

B 1 - (negatif)

2 - (negatif)

C 1 - (negatif)

2 - (negatif)

D 1 - (negatif)

2 - (negatif)

E 1 - (negatif)

2 - (negatif)

Pelarut - - (negatif)

Media - - (negatif)

Dari tabel 2 dalam dilihat bahwa kontrol media dan kontrol pelarut negatif

tidak terdapat cemaran S.aureus. Selanjutnya dari kelima sampel jamu serbuk

kunyit diperoleh hasil negatif, dimana seluruh sampel jamu serbuk kunyit yang

32

dijual di Pasar Gede Surakarta bebas bakteri S.aureus. Hal tersebut menunjukkan

bahwa jamu serbuk kunyit aman untuk dikonsumsi.

Hasil uji cemaran S.aureus pada jamu serbuk kunyit adalah keseluruhan

sampel negatif S.aureus, hal tersebut menunjukkan bahwa proses pembuatan

pekerja memperhatikan kebersihan dan sanitasi begitu pula pada proses

penyimpanannya. (Soemarno, 2000). Karena bakteri S.aureus mudah

dikontaminasikan melalui manusia maka untuk menghindari hal tersebuk

diperlukan Higienen Perorangan.

Menurut (Dwidjoseputro, 1998), bahwa bakteri S.aureus sering terdapat pada

pori-pori dan permukaan kulit, kelenjar keringat, dan saluran usus, sehingga

adanya bakteri ini perlu dicegah untuk menghindari keracunan pada manusia.

Sehingga tindakan utama yang dapat dilakukan adalah menjaga kebersihan atau

sanitasi yang baik dan dengan menggunakan bahan mentah yang tidak

terkontaminasi.

33

BAB V

PENUTUP

1. KESIMPULAN

1. Terdapat cemaran mikroba kapang/khamir pada seluruh sampel jamu

dan bebas bakteri S.aureus.

2. Nilai AKK jamu serbuk kunyit yang diperoleh dari kelima penjual jamu

di Pasar Gede Surakarta berkisar antara kurang dari 10 sampai dengan

3,8x102

koloni/mL,

3. Hasil uji cemaran kapang dan khamir pada jamu serbuk kunyit yang

dijual oleh kelima penjual jamu di Pasar Gede Surakarta tidak melebihi

batas keamanan yang dipersyaratkan Peraturan Kepala BPOM No. 12

Tahun 2014 serta tidak mengandung bakteri Staphylococcus aureus,

sehingga aman dikonsumsi menurut standar keamanan yang ditetapkan

2. SARAN

1. Masyarakat lebih memperhatikan obat tradisional yang akan

dikonsumsi. Agar dapat terhindar dari hal-hal yang tidak diinginkan.

2. Para penjual jamu perlu menjaga sanitasi dan kebersihan sejak

pengolahan hingga penyimpanan.

3. BPOM dan Dinas Kesehatan lebih meningkatkan pengawasan terhadap

obat tradisional yang beredar guna meningkatkan kesehatan masyarakat

34

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 1992, Undang-Undang Republik Indonesia Nomor 23 tahun 1992 tentang

Kesehatan, 2, Jakarta: Depkes RI.

Anonim, 1994, keputusan Menkes RI No 386/Menkes/IV/1994 tentang Pedoman

periklanan Obat Bebas,Obat Tradisional, Alat Kesehatan,

Kosmetika, Perbekalan Rumah Tangga dan Makanan Minuman,

Depkes RI, Jakarta.

Anonim, 1998, Peraturan Menkes RI. No. 715/Menkes/SK/V/2004 Tentang

Persyaratan Higiene Jasa Boga, Depkes RI, Jakarta.

Anonim, 2005, Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik

Indonesia No. HK.00.05.4.1380 tentang Pedoman Cara Pembuatan

Obat Tradisional yang Baik, BPOM RI, Jakarta.

Anonim, 2007, Pemastian Mutu Obat Kompendium Pedoman dan Bahan-Bahan

Terkait GMP dan Inspeksi, vol. 2, diterjemahan oleh Fabiola C.R.

Hutabarat, 93,144-148, Penerbit Buku Kedokteran, Jakarta.

Anonim, 2013, Khasiat Kunyit Sebagai Obat Tradisional dan Manfaat Lainnya,

Warta Pene;itian dan Pengembangan Tanaman Industri, Vol 19 No.

2.

Aulia, 2012, Medium Pertumbuhan Bakteri, 1-2, Bapelkes, Jakarta.

Bintoro, V. P., 2008, Teknologi Pengelolaan Dagingdan Analisa Produk,

Universitas Diponegoro, Semarang, Hal. 137.

Boyd, R. I. and Morr, J. J., 1984, Medical Microbiology, 34-37, Little Bown and

Company USA.

BPOM RI, 2006, Metode Analisa Mikrobiologi Suplemen 2000. Pusat pengujian

Obat dan Makanan Badan Pengawasan Obat dan Makanan Repyblik

Indonesia, Jakarta.

BPOM RI, 2008, Info POM Vol 9 No 2, Badan Pengawas Obat Dan Makanan

Republik Indonesia, Jakarta.

BPOM RI, 2014, Peraturan Kepala BPOM RI No 12 Tahun 2014 Tentang

Persyaratan Mutu Obat Tradisional, Badan Pengawas Obat dan

Makanan RI, Jakarta.

Bridson, E., Y., 2006, Oxoid manual 9th

Edition, Oxoid Limited, England.

35

Buckle, KA., Edwards R.A., Fleet G.H, dan Wooton, M. (1985). Ilmu Pangan.

Terjemahan dari Bahasa Inggris oleh H. Purnomo dan Adiono.

Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. Hal. 23-26, 49-50, 57-58.

Campbell., Reece dan Mitcheel, 2003, Biologi. Erlangga, Jakarta.

Buckle, K. A., 2008, Ilmu Pangan, UI Press, Jakarta.

Dwidjoseputro, D., 1998, Dasar-dasar Mikrobiologi 1, Djambatan, Jakarta.

Dwidjoseputro, D., 2003, Dasar-dasar Mikrobiologi, Djambatan, Jakarta.

Gruendemann, B. J., dan Fernsebner, B., 2006, Buku Ajar

Keperawatan Perioperatif. Kedokteran, EGC, Jakarta.

Fardiaz, S., 1992, Mikrobiologi Pangan 1, 557-608, PT. Gramedia Pustaka Utama,

Jakarta.

Hadioetomo, R., S., 1985, Mikrobiologi Dasar dan Praktek-teknik dan Prosedur

Dasar dalam Laboratorium, 42-46, Gramedia, Jakarta.

Hermanto dan Subroto, 2007., Pilih Jamu dan Herbal Tanpa Epek Samping. PT

Elex Media Komputindo, Jakarta.

Katzung, Bertram G., 2007, Basic & Clinical Pharmacology, Tenth Edition.,

Lange Medical Publications, United States.

Lay, B. W., 1994, Analisis Mikroba di Laboratorium, 15-22, 81-85, PT. Raja

Grafindo Persada, Jakarta.

Murray, P., R., 1996, Munual of linical Microbiology, 7th

ed., 73, American

Society for Microbiology, Washington DC.

Pelczar, M.J and E.C.S.Chan, 2005, Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid 2, UI Press,

Jakarta.

Pratiwi, S. T., 2005, Pengujian Cemaran Bakteri dan Cemaran Kapang/Khamir

Pada produk Jamu Gendong di Daerah Istimewa Yogyakarta,

PHARMACON, Vol. 6, No. 1, Juni 02-15.

Pratiwi, S.T., 2008, Mikrobiologi Farmasi. 38, 135-140, 206-207, Erlangga,

Yogyakarta.

Radji, M., 2011, Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan

Kedokteran, 127, EGC, Jakarta.

36

Sharp, S. E. and idy, S., 2006, Comparison of mannitol salt Agar and Blood agar

paltes for identification and susceptibility testing of Staphylococcus

aureus in specimen from cystic fibrosis patients. 44(12): 4545-4546,

J.Clin. Microbiol.

Soedibyo, M,. 2004, Jamu Obat Sepanjang Zaman, diakses dari

http://www.tokohindonesia.com/ensiklopedi/m/mooryatisoedibyo/opi

ni.shtml pada tanggal 20 Desember 2015.

Soemarno, 2000, Isolasi dan identifikasi bakteri klinik, Akademi Analis

Kesehatan Yogyakarta Departemen Kesehatan RI, Yogyakarta.

SNI, 1992, Cara Uji Cemaran Mikroba, 15-16, SNI-012897-1992, Jakarta.

Suharmiati, 2003, Menguak Tabir dan Potensi Jamu Gendong, 51, Agromedia

Pustaka, Jakarta.

Suharmiati dan Handayani, L., 1998. Bahan Baku, Khasiat dan Cara Pengolahan

Jamu Gendong: Studi Kasus di Kotamadya Surabaya, Pusat

Penelitian dan Pengembangan Pelayanan Kesehatan, Departemen

Kesehatan RI, http://www.tempo.co.id/medika/arsip/052001/art-

1.html, 25 Desember 2015.

Supardi, I dan Sukamto, 1999. Mikrobiologi Dalam Pengolahan dan Keamanan

Produk Pangan. Bandung: Yayasan Adhi Karya Dan The Ford

Fondation.

Suriawiria, U., 2005, Mikrobiologi dasar, 65, Papas Sinar Sinanti, , Jakarta.

Theantena, T., Hyde, K.D., & Lumyong, S., 2007, Asparaginase Production by

Endophytic Fungi Isolated From Some Thai Medical Plants, Jurnal

Kmilt Sci. Tech. J. Vol. 7 No S1.

Winarno, F. G., 1997, Sterilisasi Komersial Produk Pangan, PT. Gramedia

Pustaka Utama, Jakarta.

Warsito, H., 2011, Obat Tradisional Kekayaan Indonesia, 5,14,17-19,26-27,51,72,

Graha Ilmu, Yogyakarta.

Wattimena, J.R., Sugiarso, N.., Widianto, M.B., Sukandar, E.Y., A.A., Setiabudi,

1991, farmakodinamik dan Terapi Antibiotik, 184,187, Gajah Mada

University Press, Yogyakarta,

Winarno, F. G., 1997, Sterilisasi Komersial Produk Pangan, PT. Gramedia

Pustaka Utama, Jakarta.

37

L

A

M

P

I

R

A

N

38

Lampiran 1. Perhitungan Kloramfenikol

Menurut Theantana et al (2007), kloramfenikol 50 mg/L telah memberikan altivitas

antibiotik yang optimal. Berikut perhitungan penambahan kloramfenikol

50 mg/L

Jika penggunaan media PDA sebanyak 500 ml, maka kloramfenikol yang digunakan

Untuk 500 ml media PDA = 0,05 mg/ml x 500 ml

= 25 mg

= 0,025 gram kloramfenikol

39

Lampiran 2. Jumlah koloni yang tumbuh pada media setelah 3 hari

inkubasi

Sampel Pengenceran Replikasi Jumlah Koloni

A 10-1

1 26

2 24

10-2

1 0

2 0

10-3

1 0

2 0

10-4

1 0

2 0

B 10-1

1 40

2 36

10-2

1 0

2 0

10-3

1 0

2 0

10-4

1 0

2 0

C 10-1

1 3

2 5

10-2

1 17

2 14

10-3

1 0

2 0

10-4

1 0

2 0

D 10-1

1 3

2 2

10-2

1 0

2 0

10-3

1 0

2 0

10-4

1 0

2 0

E 10-1

1 0

2 0

10-2

1 0

2 0

10-3

1 0

2 0

10-4

1 0

2 0

40

Pelarut - - 0

Media - - 0

41

Lampiran 3 . Perhitungan AKK sampel jamu serbuk kunyit pada inkubasi hari

ke-3

1. Sampel jamu serbuk kunyit penjual A

a. Sampel jamu A replikasi 1

Dipilih penegnceran 10-1

karena seluruh cawan tidak menunjukkan range

40-60. Sehingga dicatat angka sebenarnya pada tingkat pengenceran

terendah yaitu 10-1

Perhitungan sebagai berikut:

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 24 x 10 = 2,4 x 102

b. Sampel jamu A replikasi 2

Dipilih penegnceran 10-1

karena seluruh cawan tidak menunjukkan range

40-60. Sehingga dicatat angka sebenarnya pada tingkat pengenceran

terendah yaitu 10-1

Perhitungan sebagai berikut:

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 26 x 10 = 2,6 x 102

Rata-rata nilai AKK =

koloni/gram

2. Sampel jamu serbuk kunyit penjual B

Pada penjual jamu kunyit B hanya salah satu dari kedua cawan petri dari

pengenceran yang sama yaitu 10-1

menunjukkan jumlah koloni antara 40-60

buah, dihitung jumlah koloni dari kedua cawan dan dikalikan dengan faktor

pengenceran.

a. Sampel jamu B replikasi 1

42

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 40 x 10 = 4 x 102

b. Sampel jamu B replikasi 2

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 36 x 10 = 3,6 x 102

Rata-rata nilai AKK =

koloni/gram

3. Sampel jamu serbuk kunyit penjual C

a. Sampel jamu C replikasi 1

Dipilih pengenceran 10-1

karena seluruh cawan tidak menunjukkan range

40-60. Sehingga dicatat angka sebenarnya pada tingkat pengenceran

terendah yaitu 10-1

Perhitungan sebagai berikut:

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 3 x 10 = 3 x 10

b. Sampel jamu C replikasi 1

Dipilih pengenceran 10-1

karena seluruh cawan tidak menunjukkan range

40-60. Sehingga dicatat angka sebenarnya pada tingkat pengenceran

terendah yaitu 10-1

Perhitungan sebagai berikut:

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 5 x 10 = 5 x 10

Rata-rata nilai AKK =

koloni/gram

43

4. Sampel jamu serbuk kunyit D

a. Sampel jamu D replikasi 1

Dipilih pengenceran 10-1

karena seluruh cawan tidak menunjukkan range

40-60. Sehingga dicatat angka sebenarnya pada tingkat pengenceran

terendah yaitu 10-1

Perhitungan sebagai berikut:

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 3 x 10 = 3 x 10

b. Sampel jamu D replikasi 2

Dipilih pengenceran 10-1

karena seluruh cawan tidak menunjukkan range

40-60. Sehingga dicatat angka sebenarnya pada tingkat pengenceran

terendah yaitu 10-1

Perhitungan sebagai berikut:

Pada pengenceran 10-1

= jumlah koloni x faktor pengenceran

= 2 x 10 = 2 x 10

Rata-rata nilai AKK =

koloni/gram

5. Sampel jamu serbuk kunyit E

Pada penjual jamu kunyit E tidak ada pertumbuhan pada semua cawan bukan

disebabkan factor inhibitor, maka angka kapang/khamir dilaporkan sebagai

kurang dari satu dikalikan faktor pengenceran.

Rata-rata nilai AKK = koloni/gram

44

Lampiran. 4. AKK Sampel Jamu Serbuk kunyit

AKK sampel jamu serbuk kunyit setelah 3 hari inkubasi

A

B

C

D

E

F

Ketengan gambar

A : Jumlah koloni pada sampel pengenceran 10-1

B : Jumlah koloni pada sampel pengenceran 10-2

C : Jumlah koloni pada sampel pengenceran 10-3

D : Jumlah koloni pada sampel pengenceran 10-4

E : Kontrol Media

F : Kontrol Pelarut

45

Lampiran 5. Uji Cemaran S.aureus pada sampel jamu serbuk kunyit setelah

inkubasi

A

B

C

Ketengan gambar

A : Hasil inkubasi pada sampel jamu serbuk kunyit

B : Hasil inkubasi kontrol media

C : Hasil inkubasi kontrol pelarut