UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN...

18
i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL KANKER PAYUDARA T47D SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi RIDWAN SETIAJI 1308010119 PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2018 Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Transcript of UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN...

Page 1: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

i

UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN

WATER PADA SEL KANKER PAYUDARA T47D

SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk

memperoleh gelar Sarjana Farmasi

RIDWAN SETIAJI

1308010119

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2018

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 2: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

ii

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 3: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

iii

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 4: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

iv

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 5: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

v

KATA PENGANTAR

Bismillahirohmanirohim, Alhamdulillahirobbil’alamin, segala puji bagi

Allah SWT, karena dengan petunjuk dan pertolonganNya penulis dapat

menyelesaikan skripsi yang berjudul Uji Aktivitas Sitotoksik Dan Proliferasi Dari

Kangen Water Pada Sel Kanker Payudara T47D sebagai salah satu syarat

mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari dalam penyusunan skripsi ini masih banyak kekurangan,

oleh sebab itu kritik dan saran yang membangun penulis harapkan untuk

perbaikan di masa yang akan datang. Penulis mengucapkan banyak terima kasih

atas segala bantuan, bimbingan, serta kerjasama dengan berbagai pihak yang

terkait dalam penyusunan skripsi ini, karena terselesaikannya skripsi ini tidak

terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis mengucapkan

terimakasih kepada:

1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H., selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

2) Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memimpin

keseluruhan proses mengajar ditempat penulis menuntut ilmu.

3) Wahyu Utaminingrum, M.Sc., Apt., selaku Ketua Progam Studi Sarjana

Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

4) Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si dan Elza Sundhani, M.Sc., Apt

selaku pembimbing yang telah memberikan arahan, bimbingan dan

inspirasi kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

5) Dwi Hartanti, M. Farm., Apt dan Wahyu Utaminingrum, M.Si., Apt.,

selaku penguji yang telah memberi masukan dalam menyelesaikan skripsi

ini.

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 6: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

vi

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 7: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

vii

RIWAYAT HIDUP

Nama : Ridwan Setiaji

Tempat, Tanggal Lahir : Cilacap, 08 Agustus 1995

Nama Orang Tua : Satiwan (Ayah), Siti Markhamah

(Ibu)

Riwayat Pendidikan :

a. Sekolah Dasar : SD Negeri 05 Kedawung

b. Sekolah Menengah Pertama : SMP Negeri 1 Kroya

c. Sekolah Menengah Atas : SMA Negeri 1 Kroya

d. Perguruan Tinggi : Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

Riwayat Organisasi

1. Anggota Badan Eksekutif Mahasiswa BEM Fakultas Farmasi periode

2013-2014 dan 2014-2015

2. Ketua Staff Departemen Agama Badan Eksekutif Mahasiswa BEM

Fakultas Farmasi periode 2015-2016

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 8: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

viii

MOTTO

“Apa yang kita tanam baik pada hari ini, maka kita akan menuai baik pula pada

keesokan hari”

“Hidup berlandaskan Al-Qur’an dan As-Sunnah”

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 9: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

ix

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 10: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

x

PERSEMBAHAN

Anugerah terindah dari Allah SWT yang tak ternilai hingga terciptalah sebuah

karya sederhana. Alhamdulillahirabbil’alamin, puji syukur kehadirat Allah SWT

yang telah memberikan kemudahan dan kelancaran kepada saya sehingga skripsi

ini dapat terselesaikan dengan baik dan benar.

Bismillahirrahmanirrahim, skripsi ini saya persembahkan untuk:

Ibu dan Ayah yang selalu memberikan doa dan segala bentuk dukungan

hingga saat ini.

Kedua kakak saya yang memberikan semangat.

Teman-teman kos (Rizko, Ronny, Prayogo, Agif, Surya, Muji, Rere, Riza)

yang selalu bersama hampir setiap hari.

Teman-teman “Tim Kultur” (Aisyah, Senja, Dyfa, Binaripan, Atika,

Yanah, Miya, Endah, Yosi, Darsini, Desi) yang selalu membantu dalam

skripsi dan saling mensupport.

Dosen pembimbing saya Ibu Asmi dan Ibu Elza, terimakasih

bimbingannya dari awal penyusunan proposal hingga skripsi selesai.

Kelompok praktikum dalam perkuliahan yang selalu bersama.

Semua teman-teman yang membantu dan berjuang bersama selama 4

tahun.

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 11: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xi

Uji Aktivitas Sitotoksik dan Proliferasi dari Kangen Water pada Sel Kanker

Payudara T47D

Ridwan Setiaji1, Asmiyenti Djaliasrin Djalil

2, Elza Sundhani

3

ABSTRAK

Kangen water adalah air yang dihasilkan dari mesin ionisasi air, dengan

menggunakan proses elektrolisis, mesin kangen water sanggup merestrukturisasi

air biasa dan mengubahnya menjadi air yang bersifat alkali. Penelitian ini

bertujuan untuk mengetahui apakah kangen water memiliki aktivitas sitotoksik

dan antiproliferasi terhadap sel kanker payudara T47D. Kangen water yang

digunakan diperoleh dari produsen di wilayah Purwokerto. Uji sitotoksik

dilakukan menggunakan metode MTT assay dengan waktu inkubasi selama 24

jam, sedangkan kinetika proliferasi sel dilakukan dengan metode doubling time.

Uji sitotoksik kangen water menunjukkan potensi sitotoksisitas yang sedang pada

pH 2,5 (IC50 59,439 %), pH 6 (IC50 46,986 %), pH 9 (IC50 46,611 %). Sel T47D

mengalami penurunan jumlah sel pada jam ke-24 hingga 72 pada sel yang diberi

perlakuan dibanding dengan kontrol sel. Pemberian sampel kangen water dengan

pH 6 konsentrasi 12,5% dapat menurunkan proliferasi sel T47D lebih baik

dibandingkan dengan pH lainnya pada konsentrasi yang bervariasi.

Kata Kunci: Kangen water, antikanker, sel T47D

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 12: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xii

Test of Cytotoxic and Proliferative Activity of Kangen Water against T47D

Breast Cancer Cells

Ridwan Setiaji1, Asmiyenti Djaliasrin Djalil

2, Elza Sundhani

3

ABSTRACT

Kangen Water is water produced from water ionization machine by using an

electrolysis process. The machine that is used to produce Kangen Water is able to

restructure ordinary water and convert it into alkaline water. This research aims to

determine whether or not Kangen Water has cytotoxic and anti-proliferative

activity against T47D breast cancer cells. The Kangen Water that was used in this

research was from one of the producers addressed in Sumampir, Purwokerto. The

cytotoxic test in this research was performed by using MTT assay method with 24

hours incubation time, while cell proliferation was performed by using doubling

time method. The cytotoxic test on Kangen Water showed a potential moderate

cytotoxicity at pH 9 (IC50 46.611 %). The treated T47D cells were having a cell

amount reduction during 24 to 72 hours. The sampling of Kangen Water by using

pH 6 with 12.5% concentration could decrease the proliferation of cell T47D

better than other pH in various concentrations.

Keywords: Kangen Water, anti-cancer, cell T47D

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 13: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xiii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i

LEMBAR PERSETUJUAN........................................................................... ii

LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... iii

LEMBAR PERNYATAAN ORISINALITAS .............................................. iv

KATA PENGANTAR ................................................................................... v

RIWAYAT HIDUP ........................................................................................ vii

MOTTO ......................................................................................................... viii

LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI ..................................................... ix

PERSEMBAHAN .......................................................................................... x

ABSTRAK ..................................................................................................... xi

ABSTRACT ..................................................................................................... xii

DAFTAR ISI .................................................................................................. xiii

DAFTAR TABEL .......................................................................................... xvi

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xvii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xviii

BAB I. PENDAHULUAN ............................................................................ 1

A. Latar Belakang Masalah ..................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ............................................................................ 3

C. Tujuan Penelitian ................................................................................ 3

D. Manfaat Penelitian .............................................................................. 3

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................. 4

A. Penelitian Terdahulu ......................................................................... 4

B. Landasan Teori .................................................................................. 4

1. Kanker ......................................................................................... 4

2. Daur Sel (Cell Cycle) .................................................................. 6

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 14: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xiv

3. Kanker Payudara ......................................................................... 7

4. Sel T47D ..................................................................................... 8

5. Kangen Water.............................................................................. 8

C. Kerangka Konsep .............................................................................. 10

D. Hipotesis ............................................................................................ 11

BAB III. METODE PENELITIAN ............................................................ 12

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ......................................................... 12

B. Variabel Penelitian ............................................................................. 12

C. Definisi Variabel Operasional ............................................................ 12

D. Waktu dan Tempat Penelitian ............................................................ 13

E. Alat dan Bahan ................................................................................... 13

F. Jalannya Penelitian ............................................................................. 14

1. Preparasi Sel ................................................................................ 14

2. Pembuatan Larutan Sampel......................................................... 15

3. Uji Sitotoksik Menggunakan Metode MTT ................................ 15

4. Pengamatan Proliferasi Sel ......................................................... 15

G. Analisis Data ..................................................................................... 16

1. Analisisi IC50 ............................................................................... 16

2. Analisisi Proliferasi Sel ................................................................ 16

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................... 17

A. Pengumpulan Sampel Kangen Water ................................................ 17

B. Uji Nilai pH Sampel Kangen Water .................................................. 17

C. Potensi Sitotoksik Kangen Water....................................................... 18

D. Uji Proliferasi dengan Doubling Time ............................................... 24

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................... 27

A. Kesimpulan ........................................................................................ 27

B. Saran ................................................................................................... 27

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 15: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xv

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 28

LAMPIRAN .................................................................................................. 31

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 16: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xvi

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1 Hasil pengukuran pH sampel kangen water ....................................... 17

Tabel 4.2 Hasil nilai IC50 dari masing-masing pH .............................................. 24

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 17: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xvii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Sel Kanker .......................................................................................... 6

Gambar 2.2 Bagan generator elektrolisis air dan senyawa yang dihasilkan

(Huang et al., 2008) ........................................................................... 9

Gambar 2.3 Kangen water (sumber pribadi: diambil di Laboratorium

Kultur Sel dan Jaringan, 2017).......................................................... 10

Gambar 4.1 Uji pengecekan nilai pH Kangen Water pada alat pH meter ............. 18

Gambar 4.2 Reduksi MTT didalam sel hidup oleh enzim reduktase

didalam mitokondria menghasilkan kristal formazan (Ebada

et al, 2008) ........................................................................................ 19

Gambar 4.3 Morfologi sel T47D setelah diberi perlakuan selama 24 jam

dengan sampel kangen water diamati menggunakan

mikroskop .......................................................................................... 21

Gambar 4.4 Morfologi sel T47D sebelum dan sesudah diberi MTT (A)

kontrol sel sebelum diberi MTT terlihat sel normal dengan

bentuk bulat sampai memanjang dan berisi; (B) kontrol sel

setelah diberi MTT, MTT masuk kedalam sel; (C) pH6

konsentrasi 50% sebelum diberi MTT; (D) pH6 konsentrasi

50% setelah diberi MTT dilanjutkan dengan inkubasi selama

4 jam .................................................................................................. 22

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018

Page 18: UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN ... - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/7586/1/RIDWAN SETIAJI_COVER.pdf · i UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN WATER PADA SEL

xviii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Uji Pengecekan Nilai pH Sampel Kangen Water ............................. 31

Lampiran 2. Perhitungan Seri Konsentrasi untuk Uji Sitotoksik Sel T47D ......... 32

Lampiran 3. Pemetaan Uji Sitotoksik dan Proliferasi. .......................................... 33

Lampiran 4. Hasil Uji Sitotoksik pH 2,5 .............................................................. 34

Lampiran 4. Hasil Uji Sitotoksik pH 6 ................................................................. 40

Lampiran 4. Hasil Uji Sitotoksik pH 9 ................................................................. 46

Lampiran 5. Hasil Uji Proliferasi dengan Doubling Time .................................... 52

Uji Aktivitas Sitotoksik Dan... Ridwan Setiaji, Fakultas Farmasi UMP, 2018