TLC

Konsep

Kromatografi lapis tipis TLC disebut, adalah metode kromatografi, pemisahan cepat

dan analisis kualitatif sejumlah kecil zat adalah teknik eksperimental yang penting,

adalah padat - kromatografi adsorpsi cair.

TLC (Thin Layer Chromatography) biasanya dinyatakan TLC, juga dikenal sebagai kromatografi lapis tipis, padat - kromatografi adsorpsi cair. Dalam beberapa tahun terakhir mengembangkan jejak, cepat dan sederhana kromatografi. Ini menggabungkan kromatografi kolom, dan keunggulan kromatografi kertas, di satu sisi untuk sampel kecil (sampai beberapa mikrogram, atau bahkan 0,01 mikrogram) pemisahan; tangan dalam pembuatan lapis tipis papan, teradsorpsi lapis tebal untuk meningkatkan sampel titik garis, sampel dapat dipisahkan hingga 500mg. Dengan demikian, sampel dapat digunakan dimurnikan, metode ini sangat cocok untuk suhu kurang mudah menguap atau tinggi tidak dapat dengan mudah mengubah bahan yang dianalisis dengan kromatografi gas. Selain itu, selama reaksi kimia, metode ini juga dapat digunakan untuk melacak kromatografi lapis tipis dan kromatografi kolom reaksi organik sebelum "pre-test", sering menggunakan tempat baku diamati dengan kromatografi lapis tipis untuk menentukan menghilangnya bertahap reaksi selesai.

 

TLC dicuci piring kaca bersih (10 × 3cm atau lebih) pada lapisan seragam agen

adsorben atau dukungan, yang akan dikeringkan, diaktifkan setelah larutan sampel

dengan pembentukan nozzle kapiler menjatuhkan dari piring TLC sekitar 1cm di

salah satu ujung dari garis start, Plat TLC kering atau kering di belakang diisi dengan

pengembangan tangki ekspansi pelarut, kedalaman perendaman 0.5cm. Tunduk

pada terdepan eluen sekitar 1cm dari atas dekat pelat kromatografi dihapus,

dikeringkan dan disemprot dengan reagen kromogenik, atau warna di bawah sinar

UV.

Prinsip

Pertama, prinsip dasar

Kromatografi Prinsip dasar adalah dengan menggunakan campuran komponen

dalam adsorpsi suatu zat atau kelarutan yang berbeda, atau interaksi afinitas lain

dan perbedaan kinerja dari solusi campuran melalui substansi, adsorpsi atau

berulang distribusi dan sebagainya, sehingga untuk memisahkan masing-masing

komponen. TLC adalah jejak, cepat dan sederhana metode kromatografi. Berbagai

senyawa polar yang berbeda, kapasitas adsorpsi yang tidak sama, yang

mengembangkan agen bergerak, dengan berbagai tingkat penyelesaian,

berdasarkan asal ke pusat tempat utama dan agen tepi jarak menghitung nilai Rf

(Rf):

Kapasitas adsorpsi senyawa sebanding dengan polaritas mereka, adsorpsi yang kuat

dari senyawa yang lebih polar, nilai Rf begitu kecil. Di bawah kondisi yang diberikan

(adsorben, agen, tebal plat, dll), senyawa dan zat bergerak dari rasio jarak yang

ditempuh sudah pasti, bahwa nilai Rf dari konstanta fisik senyawa, senyawa sendiri

hanya ukuran struktur, dan karena itu identifikasi senyawa sesuai dengan nilai Rf.

TLC diterapkan pada sampel kecil (beberapa hingga puluhan mikrogram atau

0.01μg) pemisahan: dapat digunakan sampai dengan 500mg sampel pemisahan,

adalah kimia organik modern untuk kualitatif dan kuantitatif sarana penting.

Terutama berlaku untuk senyawa-senyawa volatilitas rendah, dan perubahan kimia

di bawah suhu tinggi, bukan dengan analisis kromatografi gas bahan.

Kedua, percobaan aliran dasar

Bentangkan papan kromogenik bercak nilai Rf dihitung

Ambil papan 7.5x2.5cm sekitar 5 slide, kering dibersihkan. Pada 50ml gelas, tempat

3g silika gel G, secara bertahap menambahkan 0,5% berair natrium

karboksimetilselulosa (CMC) 8ml, menjadi pasta homogen, diterapkan pada kaca

obyek yang bersih, tangan slide dengan bubur di desktop horisontal berjoget naik-

turun sedikit, membuat Bohou yang seragam, permukaan datar dan halus dari pelat

TLC, dilapisi dengan lapisan tipis silika gel G baik piring kaca tingkat ditempatkan

pada suhu ruang selama 0.5 h, menempatkan ke suhu oven perlahan-lahan

dinaikkan menjadi 110 ℃, suhu 0.5 h, dihapus, dan ditempatkan dalam desikator sejuk.

Bercak menggunakan kapiler bercak diameter dalam <LMM cerat pembentukan

kapiler, sampel dilarutkan dalam rendah titik didih pelarut (dietil eter,

aseton, etanol, tetrahidrofuran, dll) solusi dijuluki. Bercak terlebih dahulu sebelum

papan dengan pensil di salah satu ujung di 5mm kecil lembut dengan garis, seperti

garis start, dan kemudian mengambil sampel menggunakan kapiler hati

dalam starting line-seperti, untuk diulang bercak, itu harus sebelumnya bercak fokus

setelah penguapan pelarut. Jika jumlah poin yang sama sampel di papan, jarak

antara titik sampel dari 5mm.

Pemilihan agen sesuai dengan polaritas sampel, kelarutan dan aktivitas adsorben

Jika senyawa itu sendiri mempunyai warna-warna, langsung dapat mengamati

bintik-bintik. Jika Anda sudah memiliki berwarna, dapat diamati di bawah sinar UV

tanpa bintik-bintik neon (bahan cincin benzena memiliki),

Nilai rf dihitung secara akurat mengidentifikasi asal dan depan pelarut dan pusat

sampel setelah dimulainya tempat diukur dan sampel depan pelarut bergerak jarak

dalam pelat tipis diperoleh memiliki nilai Rf.

Ketiga, memperhatikan

Satu, karena itu adalah pelat kering, penghiasan tangan untuk halus atau mudah

merata.

2, ketika jumlah sampel titik-seperti berada dalam garis lurus, ukuran ke kanan

(diameter spot tidak lebih dari 2mm), jarak 5 ~ 6mm.

3, bercak digunakan dengan kapiler tidak cross.

4, karena solusi yang terlalu tipis, titik-seperti jika tidak perlu mengulang titik-

seperti, itu harus seperti titik fokus sebelumnya setelah penguapan pelarut, untuk

mencegah sampel terlalu besar, menyebabkan tailing, fenomena difusi,

mempengaruhi efek pemisahan.

5, setelah bercak akhir sampel kering sebelum melanjutkan dimulai. Bercak

terhadap cahaya, tidak bisa menembus lapisan tipis.

6 ﹑ meletakkan tangan ke papan halus, atau keluar dari garis miring.

Adnan, M., 1997, Teknik Kromatografi Untuk Analisis Bahan Makanan, Andi, Yogyakarta.

Akbar, Y., 2011, Pemisahan dan Identifikasi Asam Amino (online), (http:// akbarbanjar.wordpress.com/2011/03/17/laporan-biokimia/), diakses pada tanggal 15 November 2013 pukul 01.38 WITA.

Alimuddin, R., 2011, Identifikasi Asam Amino (online), (http://duniaraa13.blogspot.com), diakses pada tanggal 15 November 2013 pukul 01.40 WITA

Bresnick, S., 2004, Intisari Kimia Organik, Hipokrates, Jakarta.

Gritter, A., 1991, Biokimia 1, PT. Gramedia, Jakarta.

Poedjiadi A., 1994, Dasar-Dasar Biokimia, UI Press, Jakarta.

Poedjiadi, A. dan F. M. T. Supriyanti., 2009. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta,          Penerbit Universitas Indonesia.

Sumarto, S., 2002, Evaluasi Jaminan Sosial Program Lanjut Usia, P3KS, Jakarta.

Tim Dosen, 2013, Penuntun dan Laporan Praktikum Biokimia, Universitas Hasanuddin, Makassar.