Teknologi Sediaan Bahan Alam

5/24/2018 Teknologi Sediaan Bahan Alam

1/8

TUGAS TEKNOLOGI SEDIAAN BAHAN ALAM

SKRINING FITOKIMIA DAN IDENTIFIKASI

SENYAWA HIPERIN DARI DAUN

JAMBU BIJI (Psidium guajava L.)

Disusun oleh :

Alfina Faizah (1041311169)

Nayli Nurrizqiyawati U (1041311180)

Anita Ratnasari (1041111174)

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI "YAYASAN PHARMASI

SEMARANG

2014


2/8

SKRINING FITOKIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA HIPERIN DARI DAUN

JAMBU BIJI (Psidium guajava L.)

ABSTRAK

Guava guajava L. (keluarga - Myrtaceae) merupakan tanaman yang sangat penting. Hal ini

digunakan untuk pengobatan berbagai penyakit seperti diare, gastroenteritis, disentri,

diabetes, hipertensi, kerusakan, luka, nyeri dan demam. Tanaman ini juga memiliki efek anti-

mikroba, anti malaria, antitusif, hepatoprotektif dll. Sehingga sangat penting untuk

membakukan phrmacognostically bagian tanaman untuk pemanfaatannya dalam formulasi

yang berbeda. Penelitian ini berkaitan dengan karakterisasi pharmacognostical bersama

dengan skrining fitokimia awal dan dilanjutkan dengan isolasi senyawa hiperin didalam

tanaman. Secara mikroskopik, terlihat sabit khas berbentuk lignified pembuluh kayu lapis

yang ditemukan di bagian melintang bersama dengan banyak kalsium oksalat kristal, meliputi

uniseluler trikoma, kelenjar trikoma, gabus sel, lurus berdinding poligonal atas epidermis sel.

Dalam pendahuluan skrining fitokimia, kehadiran alkaloid, steroid, glikosida jantung,

flavonoid, triterpenoids diamati dalam metanol ekstrak daun. Metode yang digunakan untuk

penentuan kuantitatif untuk golongan flavonoid (Shinoda Test). Ekstrak dicampur dengan

magnesium dan asam klorida pekat ditambahkan tetes . Terbentuk warna oranye, merah,

merah muda, atau ungu warna menunjukkan adanya flavonoid

Selanjutnya dengan komposisi fitokimia yang beragam daun Psidium guajava maka memiliki

bertanggung jawab untuk aktivitas biologis dari bagian obat. Secara khusus, glikosida

flavonol menunjukkan efek menguntungkan pada diabetes melitus tipe II. Sebuah metode

HSCCC sederhana dan efisien telah dikembangkan untuk pemisahan preparatif dari lima

glikosida flavonoid dan satu diphenylmethane glikosida dari P. guajava. Sebuah sistem

pelarut yang terdiri dari n-heksana-etil asetat-metanol-air (0.7:4:0.8:4, v / v / v / v)

dioptimalkan untuk pemisahan. Fase atas digunakan sebagai fase diam, dan fase yang lebih


3/8

rendah digunakan sebagai fase gerak. Di bawah kondisi optimal, hyperoside (15,3 mg),

dipisahkan dari sampel minyak mentah (19,8 g). Struktur semua

isolat diidentifikasi oleh ESI-MS, 1H-NMR dan 13C-analisis dan kemurnian mereka (> 95%)

ditentukan dengan menggunakan HPLC.

I. PENDAHULUANFitokimia atau kimia tumbuhan mempelajari aneka ragam senyawa organic yang

dibentuk dan ditimbun oleh tumbuhan, yaitu mengenai struktur kimianya, biosintesisnya,

penyebarannya secara ilmiah serta fungsi biologinya. Senyawa kimia sebagai hasil metabolit

sekunder atau metabolit sekumder telah banyak digunakan sebagai zat warna, racun, aroma

makanan, obat-obatan dan sebagainya serta sangat banyak jenis tumbuh- tumbuhan yangdigunakan obat-obatan yang dikenal sebagai obat tradisional sehingga diperlukan penelitian

tentang penggunaan tumbuh-tumbuhan berkhasiat dan mengetahui senyawa kimia yang

berfungsi sebagai obat. Senyawa-senyawa kimia yang merupakan hasil metabolisme

sekunder pada tumbuhan sangat beragam dan dapat diklasifikasikan dalam beberapa

golongan senyawa bahan alam yaitu terpenoid, steroid, kumarin, flavonoid dan alkaloid.

Pendekatan skrining fitokimia meliputi analisis kualitatif kandungan kimia dalam

tumbuhan atau bagian tumbuhan (akar, batang, daun, bunga, buah, biji), terutama

kandungan metabolit sekunder yang bioaktif, yaitu alkaloid, antrakinon, flavonoid,

glikosida jantung, kumarin, saponin (steroid dan triterpenoid), tannin (polifenolat),

minyak atsiri (terpenoid), iridoid, dan sebagainya. Adapun tujuan utama dari pendekatan

skrining fitokimia adalah untuk mensurvai tumbuhan untuk mendapatkan kandungan

bioaktif atau kandungan yang berguna untuk pengobatan.

Daun jambu biji merupakan salah satu bahan alam yang banyak dimanfaatkan untuk

pengobatan tradisional. Salah satu senyawa yang terdapat dalam jambu biji adalah hyperin

yang merupakan golongan flavonoid. Flavonoid terdapat dalam semua tumbuhan hijau dan

merupakan metabolit sekunder yang termasuk golongan fenol alam terbesar. Flavonoid

memiliki banyak khasiat dan aktivitas biologik antara lain sebagai, antioksidan, anti kanker

dan antiinflamasi.

Flavonoid adalah kelompok senyawa fenil propanoid dengan kerangka karbon C6-C3-

C6. Flavonoid dan isoflavonoid adalah salah satu golongan senyawa metabolit sekunder yang

banyak terdapat pada tumbuh-tumbuhan, khususnya dari golongan leguminoceae (tanaman

berbunga kupu-kupu). Kandungan senyawa flavonoid dalam tanaman sangat rendah yaitu


4/8

sekitar 25 %. Senyawa-senyawa tersebut pada umunya dalam keadaan terikat / konjugasi

dengan senyawa gula. Flavonoid dalam tumbuhan mempunyai empat fungsi :

1. Sebagai pigmen warna2. Fungsi fisiologi3. Aktivitas farmakologi4. Flavonoid dalam makanan

Penelitian ini dilakukan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa flavonoid

pada daun jambu biji. Ruang lingkup penelitian meliputi pemeriksaan mikroskopis, skrining

fitokimia terhadap serbuk simplisia, isolasi dan dan identifikasi isolat menggunakan HSCC,

HPLC dan ESI-MS

II.PEMBAHASAN1. Karakterisik Mikroskopik

Keterangan :

P : Parenkim

Ep : Epidermis

T : Trikoma

AdPh : Floem adaxial

Xy : Xylem

AbPh : Floem abaxial

Co : Kolenkim

Pada bagian melintang dari pelepah tersebut, epidermis bawah daun dan abaxial

ditemukan. 5-7 lapisan xilem mengalami lignifikasi ditemukan secara berurutan untuk

membentuk bentuk sabit di mana proto-xylems berada di sisi atas dan meta-xylem berada


5/8

di sisi abaxial. Sel-sel xilem yang terjepit di antara lapisan floem yang non-mengalami

lignifikasi. Collenchymas hadir terutama di sisi abaxial atas sel-sel epitel.

Dalam bentuk bubuk mikroskop, kristal banyak kalsium oksalat, trikoma

uniseluler, trikoma kelenjar, sel gabus, berdinding poligonal sel-sel epidermis atas lurus,

sel batu, stomata bersama dengan bergelombang berdinding sel-sel epidermis yang lebih

rendah dan xylems ditemukan.

2. Skrining FitokimiaHasil skrining fitokimia pada daun jambu biji menunjukkan adanya alkaloid,

steroid, glikosida jantung, flavonoid, triterpenoid. Ini menunjukkan bahwa daun jambu

biji mengandung senyawa metabolit sekunder. Pada pengujian flavonoid yang dilakukan

dengan Shinoda Testmenunjukkan hasil positif dengan perubahan warna oranye, merah,

merah muda, atau ungu. Ekstrak dicampur dengan magnesium dan ditambahkan asam

klorida pekat secukupnya. Warna yang dihasilkan menunjukkan adanya flavonoid.


6/8

3. Isolasi dan identifikasi senyawa flavonoidTujuan dari teknik pemisahan adalah untuk memisahkan komponen yang akan

ditentukan berada dalam keadaan murni, tidak tercampur dengan komponen-komponen

lainnya.

HSCC (High Speed Counter Current Chromatography)HSCCC adalah metode yang berguna untuk memisahkan dan mengisolasi

glikosida flavonoid dan glikosida benzofenon galloyl dari ekstrak etil asetat dari

daunjambu biji dengan sistem pelarut dua fase terdiri dari n-heksana-etil asetat-

metanol-air (0,7 : 4 : 0,8 : 4 v/v). HSCCC adalah teknik yang efisien untuk

mengisolasi dan memisahkan senyawa bioaktif murni dari produk alami.

Penggunaannya lebih luas dari kromatografi dan HPLC preparati, sampel minyak

mentah dapat digunakan dengan HSCCC dan ukuran sampel juga lebih besar.

HSCCC memiliki beberapa kekurangan, seperti efisiensi yang buruk dan konsumsi

waktu. Sebagai teknologi pemisahan yang muncul, metode dan teknik HSCCC perlu

penelitian lebih lanjut.

Berdasarkan penelitian dengan metode ini menghasilkan kromatogram,

kromatogram HSCCC dari ekstrak etil asetat dari daun P. guajava . Pemurnian

ekstrak Ethyl asetat dari daun P. guajava masih campuran senyawa hyperin (1) dan

senyawa isoquercitrin.


7/8

HPLCHasil dari metode HSCCC dilanjutkan dengan memisahkan hyperoside dan

campuran isoquercitrin dengan kromatografi cair semi-preparatif dengan

menggunakan :

a. Fase GerakAir asam 0,2 % fosfat ( v / v )

b. Fase DiamKolom Thermo Scientific Hypersil Emas Phenyl ( 5 pM , 10 250 mm )

c. Laju aliran yang ditetapkan sebesar 1,0 mL / menit , suhu kolom adalah 40 Cdan volume injeksi sampel adalah 20 uL .

d. Waktu retensi : 35 minAnalisis HPLC dari masing-masing fraksi HSCCC mengungkapkan bahwa

kemurnian senyawa ini adalah 98,1 %. Untuk menghemat waktu dan pelarut,

senyawa dengan nilai K yang lebih tinggi , yang masih dipertahankan dalam kolom

setelah senyawa dielusi ,telah dihapus dengan memaksa keluar fase diam dengan

kompresor udara. Setelah masing-masing berjalan, kolom dibersihkan dengan 100

mL etanol.

ESI-MSMetode ini untuk Identifikasi Sasaran Senyawa sehingga memastikan senyawa yang

terdapat didalam suatu tanaman dengan perbandingan dengan data literatur, senyawa

1 diidentifikasi sebagai quercetin - 3 - O - - D - galactopyranoside ( hyperin ) .

Dengan hasil berupa :

Senyawa 1 kuning bubuk Light, ESI - MS ( ve modus ion ) : m / z 465,1 [ M + H ] +

, 487,1 [ M + Na ] + ; 1H - NMR ( DMSO - d6 ) : 6.20 ( 1H , d , J = 1,8 Hz , H - 6) , 6,40 ( 1H , d , J = 1,8 Hz , H - 8 ) , 7.53 ( 1H , d , J = 1,8 Hz , H - 2 ' ) , 6.82 ( 1H ,


8/8

d , J = 8,4 Hz , H - 5 ' ) , 7.66 ( 1H , dd, J = 8,4 , 1,8 Hz , H - 6 ' ) , 5,37 ( 1H , d , J =

7,8 Hz , H - 1 '' ) , 3.17 ~ 3.66 ( 6H , m , H - 2 '' -6 '' ) ; 13C - NMR ( DMSO - d6 ).

III. KESIMPULANDari hasil skrining fitokimia, simplisia daun jambu biji menunjukkan adanya senyawa

alkaloid, steroid, glikosida jantung, flavonoid, triterpenoid.

Dari hasil isolasi dan identifikasi secara HSCC, HPLC dan ESI-MS diperoleh Senyawa

quercetin - 3 - O - - D - galactopyranoside ( hyperin) golongan flavonoid.

DAFTAR PUSTAKA

1. Mailoa,Meigy Nelce,dkk.2014.Antimicrobial Activities Of Tannins Extract From GuavaLeaves (Psidium Guajava L) On Pathogens Microbial.diakses 14 Maret 2014

2. Biswas Bipul,dkk.2013.Antimicrobial Activities of Leaf Extracts of Guava (Psidiumguajava L.) on Two Gram-Negative and Gram-Positive Bacteria.diakses 14 Maret 2014

3. Mailoa,Meigy Nelce,dkk.2013. Tannin Extract Of Guava Leaves (Psidium guajava L)Variation With Concentration Organic Solvents .diakses 13 April 2014

4. Samanta Krishanu.2013. Preliminary Physico-phytochemical Study andPharmacognostical Standardization of Psidium guajava Leaves.diakses 13 April 2014

5. Zhu Yindi,dkk.2013. Preparative Isolation and Purification of Five FlavonoidGlycosides and One Benzophenone Galloyl Glycoside from Psidium guajava by High-

Speed Counter-Current Chromatography (HSCCC).diakses 14 April 2014

Teknologi Sediaan Bahan Alam

Documents

Transcript of Teknologi Sediaan Bahan Alam