REFRAT

EFEK PROPOLIS SEBAGAI ANTI OKSIDAN DAN ANTI INFLAMASI

Oleh:

Madinatul Munawaroh G99141094

Adinda Ferinawati G99141095

Pembimbing :

dr. Agung Susanto, Sp.PD,FINASIM

KEPANITERAAN KLINIK SMF ILMU PENYAKIT DALAM

FAKULTAS KEDOKTERAN UNS/RSUD DR MOEWARDI

S U R A K A R T A

20

HALAMAN PENGESAHAN

Refrat Ilmu Penyakit Dalam dengan judul:

EFEK PROPOLIS SEBAGAI ANTI OKSIDAN DAN ANTI INFLAMASI

Oleh:

Madinatul Munawaroh G99141094

Adinda Ferinawati G99141095

Telah disetujui untuk dipresentasikan pada hari :

Rabu, 29 Juli 2015

Pembimbing,

(dr. Agung Susanto, Sp.PD,FINASIM)

2

BAB I

PENDAHULUAN

A. Pengertian Propolis

Propolis berasal dari bahasa Yunani yaitu “pro” (sebelum) dan “polis”

(kota). Secara umum dapat diartikan “sebagai pelindung sarang lebah dari faktor-

faktor berbahaya yang terdapat di luar sarang. Bahan-bahan yang terkandung

dalam propolis sangatlah kompleks, dan lebih dari 200 komponen telah

teridentifikasi. Secara garis besar, propolis terdiri dari 50% balsam (fraksi

polifenol), 30% getah, 10% minyak esensial, 5% pollen, serta 5% zat organik dan

anorganik. Kandungan polifenol yang tinggi di dalam propolis berfungsi sebagai

antibakteri, anti-virus, anti-jamur, antioksidan, anti-peradangan, serta

meningkatkan sistem kekebalan tubuh [2,8].

Propolis adalah produk yang dihasilkan oleh serangga (lebah madu).

Lebah menghasilkan beberapa produk seperti madu, royal jeli, polen dan propolis.

Propolis adalah bahan resin yang melekat pada bunga, pucuk dan kulit kayu.

Sifatnya pekat, bergetah , berwarna coklat kehitaman mempunyai bau yang khas,

dan rasa pahit. Lebah menggunakan bahan propolis untuk pertahanan sarang,

mengkilatkan bagian dalam sarang dan menjaga suhu lingkungan [7,11]. Manusia

dapat memanfaatkan propolis sebagai bahan kosmetik, teknologi pengolahan

makanan dan obat-obatan. Menurut Made, [12] propolis mengandung senyawa

kompleks vitamin, mineral, enzim, senyawa fenolik dan flavonoid untuk

menghambat pelepasan histamin dengan cara stabilisasi selaput sel lipid. Propolis

juga mengandung Caffeic Acid Phenehhyl Ester (CAPE), yang memiliki efek

imunostimulator dan dapat bekerja pada sistem pertahanan tubuh.

Propolis telah terbukti dapat membunuh bakteri paling aktif yang menjadi

musuh lebah, yaitu larva Bacillus penyebab busuk Brood Amerika (Mlagan dan

3

Sulimanovic, 1982; Meresta dan Meresta, 1988). Penggunaan propolis dapat

mengurangi kemungkinan infeksi pada anak-anak dan pertumbuhan bakteri dalam

jaringan hewan mati.

Komposisi propolis tergantung pada jenis tanaman yang dapat diakses oleh

lebah. Propolis mengubah warna, bau dan karakteristik obat, menurut sumber dan

musim dalam setahun. Selain itu, beberapa lebah dan beberapa koloni merupakan

koloni yang giat mengumpulkan, umumnya merupakan lebah ternakan, karena

propolis adalah zat yang sangat lengket, sehingga sulit untuk menghapus rangka

dari kotak sarang.

Lebah madu dari bagian barat Apis mellifera merupakan spesies yang

mencari makanan berupa propolis. Spesies Asian Apis tidak mengumpulkan

propolis. Hanya lebah bersengat atau lebah Meliponine yang diketahui

mengumpulkan zat lengket semacam resin, untuk menyegel sarang dan

membangun pot madu dan serbuk sari untuk penyimpanan.

Sebaran alami dari Apis mellifera, memiliki banyak kegunaan tradisional

yang dikenal karena zat tersebut memiliki sifat serbaguna. Orang Yunani dan

Romawi telah mengetahui bahwa propolis dapat menyembuhkan abses kulit dan

selama berabad-abad digunakan dalam kedokteran. Bangsa Mesir kuno telah

mengetahui tentang manfaat propolis dan di Afrika saat ini propolis masih

digunakan sebagai obat, perekat untuk drum tuning, penyegelan wadah air retak

atau kano dan berbagai kegunaan lain. Propolis dapat dimasukkan dalam pernis

khusus seperti yang digunakan oleh Stradivarius untuk biola nya (Jolly, 1978).

B. Karakterisitik Fisik Propolis

Warna propolis berkisar antara kuning hingga coklat tua, bergantung pada

sumber resin. Propolis transparan sendiri telah dilaporkan oleh Coggshall dan

Morse (1984). Pada suhu 45-2500C propolis bersifat lentur, lembut dengan

substansi sangat lengket. Pada suhu kurang dari 150C dan terutama ketika beku,

propolis menjadi keras dan rapuh. Propolis akan tetap rapuh bahkan pada suhu

yang lebih tinggi. Di atas suhu 450C propolis akan menjadi semakin lengket dan

4

bergetah. Biasanya propolis akan menjadi cair pada suhu 60-700C, tetapi untuk

beberapa sampel, titik lelehnya dapat mencapai 1000C.

Pelarut yang paling umum digunakan untuk ekstraksi komersial adalah

etanol (etil alkohol), eter, glikol dan air. Untuk analisis kimia berbagai macam

pelarut dapat digunakan untuk mengekstrak berbagai fraksi. Banyak komponen

bakterisida yang larut dalam air atau alkohol.

C. Komposisi propolis

Dalam salah satu analisis propolis dari Inggris, 150 senyawa yang

diidentifikasi hanya dalam satu sampel namun lebih dari 180 telah diisolasi sejauh

ini. Resin propolis dikumpulkan dari berbagai macam pohon dan semak-semak.

Setiap daerah dan koloni tampaknya memiliki pilihan sumber resin tersendiri,

yang menghasilkan variasi warna, bau dan komposisi.

Sebuah studi di Kuba menunjukkan bahwa resin tanaman yang

dikumpulkan setidaknya telah dimetabolisme sebagian oleh lebah (Cuellar dkk,

1990.). Kehadiran gula juga menunjukkan beberapa metabolisme oleh lebah, yaitu

sebagai hasil dari penambahan air liur selama menghisap dan mengunyah.

Senyawa-senyawa utama resin terdiri dari flavonoid dan asam fenolat atau

esternya, yang sering terbentuk hingga 50% dari semua bahan. Variasi dalam

konten lilin lebah juga mempengaruhi analisis kimia. Selain itu, kebanyakan studi

tidak berusaha untuk menentukan semua komponen, tetapi membatasi diri untuk

kelas bahan kimia atau metode ekstraksi.

Tabel 1.Komposisi Kimia Propolis

Kelas Komponen Jumlah Grup Komponen

Resin 45-55% Flavonoid, asamfen olat dan

esternya

Lilin dan asam lemak

25-53% Sebagian besar dari lilin lebah dan beberapa

5

dari tanaman

Minyak essensial 10% Senyawa volatil

Protein 5% Protein kemungkinan berasal dari pollen dan aminoBebas

Senyawa organik laindan mineral

5% 14 macam mineral yang paling terkenal adalah Fedan Zn, sisanya seperti Au, Ag, Cs, Hg, La dan Sb.Senyawa organik lain seperti keton, laktan, kuinon,asam benzoat dan esternya, gula, vitamin (B3) sertagula

D. Efek Fisiologis Propolis

Salah satu sifat yang paling banyak dikenal dan diuji secara luas dari

propolis adalah aktivitas antibakteri. Banyak test ilmiah telah dilakukan dengan

berbagai bakteri, jamur, virus dan mikroorganisme lainnya. Banyak dari tes telah

menunjukkan kontrol positif dari organisme dengan berbagai ekstrak dan

konsentrasi propolis. Efek sinergis telah dilaporkan dari ekstrak propolis yang

digunakan secara bersama dengan antibiotik (Chernyak, 1971). Kadang-kadang,

ekstrak propolis lebih efektif dibandingkan obat yang tersedia secara komersial

(Millet-Clerc, et al., 1987). Dalam semua kasus, kondisi khusus dan ekstrak harus

sangat dipertimbangkan. Meskipun ada berbagai macam efek dikaitkan dengan

propolis, banyak laporan didasarkan pada studi pendahuluan. Sebagian besar

penelitian dilakukan di negara-negara Eropa Timur. Banyak kerja praktek dan

penelitian juga sedang dilakukan di Cina, tetapi sulit untuk memperoleh

informasi, tidak sedikit karena hambatan bahasa. Studi lebih rinci diperlukan

untuk menentukan manfaat potensial dari penggunaan obat propolis, terutama

6

untuk usus, aplikasi dermatologi dan gigi. Sebagian besar penelitian bersifat in

vitro, tetapi uji klinis juga dilakukan.

E. Manfaat Propolis

1. Pada kosmetik

Aplikasi dermatologi dan kosmetik saat ini mungkin merupakan

penggunaan paling umum dari propolis dan ekstrak nya). Dampaknya

pada regenerasi jaringan dan renovasi telah diteliti dengan baik.

Karakteristik bakterisida dan fungisida memberikan banyak manfaat

dalam berbagai aplikasi dalam kosmetik.

2. Pengobatan

Obat yang umumnya menggunakan propolis termasuk pengobatan

sistem kardiovaskular dan darah (anemia), aparatus pernapasan (untuk

berbagai infeksi), perawatan gigi, dermatologi (jaringan regenerasi,

borok, excema, penyembuhan luka - luka bakar khususnya, mikosis,

infeksi selaput lendir dan lesi), pengobatan kanker, pendukung sistem

kekebalan tubuh dan perbaikannya, saluran pencernaan (bisul dan

infeksi), perlindungan hati dan dukungan dan banyak lainnya.

Aplikasi eksternal langsung dari ekstrak etanol atau salep

terkonsentrasi (sampai dengan 33% propolis) telah memberikan hasil

yang baik dalam penggunaan untuk penyembuhan luka. Operasi plastik

juga menggunakan ekstrak propolis untuk penyembuhan luka,

perbaikan dan pengembangan jaringan.

3. Penggunaan tradisional

Di Eropa dan Afrika Utara, sifat-sifat khusus penyembuhan luka

oleh propolis sudah dikenal orang Mesir, Yunani dan Romawi dan di

zaman kuno. Dalam catatan abad ke-12, persiapan obat dengan propolis

disebutkan kegunaan propolis untuk mengobati infeksi mulut dan

7

tenggorokan, serta karies. Propolis mungkin telah lebih umum

digunakan dalam pengawet kayu atau pernis seperti yang dikutip

Stradivarius (Jolly, 1978).

Di Sahara Afrika, propolis masih digunakan sebagai obat-obatan

herbal dan aplikasi lain seperti pelapis anti-air dan pelapis kayu,

perekat, persiapan busur dan untuk drum tuning.

4. Teknologi Pangan

Antioksidan, antimikroba dan antijamur dari propolis dapat

diaplikasikan dalam teknologi makanan. Satu keuntungan istimewa

adalah bahwa, tidak seperti beberapa pengawet konvensional, residu

propolis memiliki efek yang bermanfaat pada kesehatan manusia.

Namun, hanya sedikit penelitian yang telah dilakukan menyebutkan

mengenai kemungkinan efek samping peningkatan konsumsi propolis.

Secara tersendiri, beberapa komponen yang diidentifikasi dalam

propolis bisa sangat merusak kesehatan manusia.

Mizuno (1989), mendaftarkan paten yang mencakup propolis

sebagai bahan pengawet dalam makanan kemasan. Propolis diizinkan

sebagai pengawet untuk ikan beku. Oleh berbagai penulis di Jepang,

penambahan hanya 30 ppm (bagian per juta) dari propolis untuk pakn

ayam petelur dapat meningkatkan produksi telur, konversi makanan dan

berat badan ayam oleh S mencapai 6% (Bonomi, et al., 1976 ).

Ghisalberti (1979) melaporkan peningkatan berat badan tambahan

untuk ayam broiler hingga 20% ketika 500 ppm propolis ditambahkan

dalam pakan diet.

5. Lainnya

Pencarian penggunaan baru dari propolis masih terus berlanjut.

Sangalli (1990) menyebutkan penggunaan propolis untuk pengobatan

pasca panen dan konservasi buah-buahan. Aplikasi dalam pestisida dan

fungisida masih dalam tahap pengujian. Peternak lebah menggunakan

8

propolis, dilelehkan bersama-sama dengan lilin atau dalam larutan

amonia (Anon, 1982) untuk dimasukkan ke bagian dalam sarang atau

perangkap untuk menarik segerombolan kawanan lebah. Ventilasi yang

memadai dan aerasi diperlukan setelah penggunaan larutan amonia.

9

BAB II

EFEK ANTI OKSIDAN DAN ANTI INFLAMASI PROPOLIS

A. PROPOLIS SEBAGAI ANTI OKSIDAN

Antioksidan adalah senyawa kimia yang dapat menyumbangkan satu atau

lebih elektron kepada radikal bebas, sehingga radikal bebas tersebut dapat

diredam. Antioksidan didefinisikan sebagai senyawa yang dapat menunda,

memperlambat, dan mencegah proses oksidasi lipid. Dalam arti khusus,

antioksidan adalah zat yang dapat menunda atau mencegah terbentuknya reaksi

radikal bebas (peroksida) dalam oksidasi lipid (Dalimartha dan Soedibyo, 1999).

Untuk kehidupannya, manusia maupun hewan tergantung pada oksigen.

Oksigen yang esensial berguna untuk kehidupan, bekerja melalui mekanisme

reaksi berurutan di dalam sel-sel tubuh, mempunyai batasan fungsi dan kemudian

dapat memberikan efek samping. Reaksi oksidasi yang lebih kompleks akan

menghasilkan radikal bebas, yang apabila tidak terdapat system antioksidan, akan

menghancurkan elemen vital sel-sel tubuh. Nampaknya secara praktis, semua

penyakit yang menimpa manusia melibatkan oksidasi pada tingkat subseluler dari

sel, apakah sebagai penyebab atau sebagai reaksi lanjutan. Selanjutnya kerusakan

jaringan akan merupakan bagian atau keseluruhan gejala patologi (Muchtadi,

2009).

Salah satu bahan yang mempunyai kandungan antioksidan tinggi adalah

propolis. Propolis terdiri dari beberapa senyawa alami kompleks, yang sebagian

besar mempunyai potensi sebagai antioksidan kuat, antara lain: terpenoid,

flavonoid, dan ester asam fenolat. Propolis juga diketahui mempunyai kandungan

fenol yang tinggi. Fenol adalah suatu senyawa yang memiliki gugus hidroksil

(OH-) yang mempunyai efek sebagai antioksidan karena mampu mengikat dan

menetralisir radikal bebas. Fenol merupakan antioksidan yang lebih potensial

10

dibanding vitamin C, E, dan beta-caroten .Kandungan antioksidan dari propolis

diduga dapat mencegah terjadinya stres oksidatif, sehingga dapat digunakan untuk

mencegah timbulnya beberapa penyakit. Karena kandungan flavonoidnya yang

tinggi maka propolis merupakan

antioksidan yang kuat. De la Fuente dan Victor (2000) mendapatkan hasil bahwa

antioksidan mampu menstimulus sistem imun dengan meningkatkan perlekatan

serta kemotaksis dari limfosit. Sedangkan menurut Hegazi et al. (1995), flavonoid

dalam propolis terbukti meningkatkan persentase fagositosis makrofag pada ayam

yang terserang Newcastle disease.

Propolis mengandung beragam antioksidan kuat terutama terpenoid,

flavonoid dan fenol. Antioksidan-antioksidan tersebut bekerjasama dalam

mencegah stres oksidatif dan menetralisir dampak negatif radikal bebas, sehingga

menimbulkan dampak protektif yang optimal. Beberapa antioksidan yang

bekerjasama, membentuk suatu jaringan kerja (network) akan menghasilkan daya

protektif yang kuat (Halliwell & Gutteridge 1999, Harjanto 2003). Penelitian

yang menguji efek protektif propolis dalam mencegah stres oksidatif akibat

aktifitas fisik berat (Swimming Stress) oleh Hairrudin & Dina Helianti

memberikan fakta bahwa propolis mempunyai efek protektif yang baik dalam

mencegah terjadinya stres oksidatif pada tikus yang diberi perlakuan aktifitas fisik

berat secara bermakna (p=0.00).

Telah diketahui bahwa metabolisme sel menghasilkan Reaktif Oksigen

Spesies (ROS), seperti hidrogen peroksida (H2O2), anion superoksida (), dan ion

hidroksil yang sangat reaktif (), serta spesies nitrogen reaktif (RNS), terutama

nitrat oksida (NO). ROS dan RNS adalah molekul sinyal yang ideal karena

mereka dihasilkan secara lokal, dan menyebar dengan cepat, dan dapat dinetralkan

oleh antioksidan seluler [37, 38]. ROS biasanya didetoksifikasi oleh enzim

intraseluler, seperti glutathione, superoksida dismutase, katalase. Namun,

produksi dan degradasi ROS dan RNS yang tidak seimbang dapat

mengakibatkan akumulasi spesies reaktif, sering disebut sebagai.stres oksidatif

11

Paparan makromolekul (lipid, protein, DNA, dll) dengan spesies reaktif

menghasilkan modifikasi oksidatif dengan efek yang merusak.

Kemampuan antioksidan dari propolis mungkin berhubungan dengan beberapa

efek biologisnya, termasuk kemoprevensi. Flavonoid dalam propolis merupakan

antioksidan kuat, mampu mencegah radikal bebas dan dengan demikian

melindungi membran sel terhadap oksidasi lipid . Selain itu, ROS dan RNS,

bersama-sama dengan faktor-faktor lain, yang terlibat dalam penuaan sel dan

kematian dalam kondisi, seperti penyakit jantung, arthritis, kanker, diabetes,

penyakit Parkinson, dan penyakit Alzheimer . Propolis dapat mengurangi tingkat

H2O2 dan NO, yang mungkin terlibat dalam efek anti-inflamasi.

Beragam kandungan senyawa dari propolis telah diketahui sebagai

inhibitor potensial dari stres oksidatif. telah diketahui bahwa komposisi propolis

adalah bervariasi; Namun, salah satu komponen utamanya adalah caffeic acid

ester phenethyl (CAPE), yang berfungsi mengehentikan produksi ROS di

beberapa sistem . CAPE juga telah diidentifikasi sebagai salah satu senyawa

utama yang ersifat kemopreventif terhadap kanker dan merupakan senyawa anti-

inflamasi dalam propolis.

Secara In vitro, propolis menghambat oksidasi dari LDL dan nitrasi

protein. Selain itu, dalam sel-sel endotel aorta sapi, propolis dilaporkan

meningkatkan ekspresi eNOS dan menghambat NADPH oksidase (NOx). secara

In vivo, propolis dapat meningkatkan kapasitas antioksidan pada hewan dan

manusia , yang menyebabkan penurunan oksidasi lipid, yang sangat terkait

dengan risiko penyakit kardiovaskular . Propolis Turki menghambat hidrogen

peroksida (H2O2-) yang menyebabkan kerusakan DNA dalam fibroblas.

Aktivitas antioksidan dari komponen fenol dari propolis Turki dapat mengurangi

kerusakan DNA yang disebabkan oleh H2O2, yang mungkin berkaitan dengan

aktivitas kemopreventif nya. Propolis merah dari Kuba telah menunjukkan efek

protektif dalam kerusakan hati yang diinduksi alkohol, kemungkinan besar karena

12

sifat antioksidannya. [56]. Propolis menghambat apoptosis dari makrofag melalui

efek pada glutation (GSH) dan TNF / nuclear factor kappa B (TNF / NF &

propolis merah Brasil telah dikaitkan dengan chalcones dan isoflavonoid

(termasuk 7-O-methylvestitol, medicarpin, dan 3, 4,2 ', 3'-tetrahydrochalcone)

yang bertindak sebagai donor elektron [63]. Selain itu, kandungan total flavonoid

dalam propolis merah Brasil berkorelasi dengan aktivitas antioksidan,

menunjukkan bahwa baik senyawa fenol dan flavonoid berkontribusi dalam efek

antioksidan[64] . propolis merah Cina memiliki aktivitas antioksidan lebih tinggi

dari propolis dari sumber lain, yang disebabkan terutama karena CAPE [65].

propolis Chili juga memiliki sifat antioksidan, yang berkorelasi dengan komposisi

kimianya [66]. Selain itu, efek antioksidan dan pencegahan terbentuknya radikal

bebas oleh propolis, mungkin disebabbkan oleh kandungan fenilpropanoid [67].

Dengan demikian, data yang tersedia menunjukkan bahwa propolis dari asal yang

berbeda dan komposisi yang berbeda secara konsisten menunjukkan efek

antioksidan. Selain efek antioksidan ini, senyawa bioaktif dalam propolis

mempengaruhi sejumlah besar jalur sinyal biokimia, juga proses fisiologis dan

patologis. Kapasitas antioksidan adalah salah satu sifat yang paling penting dari

propolis. Meskipun ada beberapa penelitian yang menguatkan potensi aktivitas

antioksidan dari propolis, belum ada data yang kuat mengenai dosis aman pada

manusia. Dengan demikian, perlu adanya studi klinis penggunaan propolis dan

senyawa biologis aktif didalamnya, termasuk studi tentang keamanan dan

bioavailabilitasnya.

B. PROPOLIS SEBAGAI ANTI INFLAMASI

Konsep peradangan telah berkembang sejak penemuan sel pada abad ke-

19. Pada saat ini, peradangan dipandang sebagai suatu proses yang didahului oleh

cedera sel dan jaringan, lalu diikuti perubahan pada vaskularisasi darah yaitu

emigrasi leukosit yang merupakan peristiwa sekunder. Pada analisis secara fisika

kimia peradangan diawali dengan stres sel dan perubahan jaringan lokal, lalu

13

meningkatnya konsentrasi oksidan dan tekanan osmotik. Peradangan pada

dasarnya dapat didefinisikan sebagai perubahan keseimbangan morfologi pada

area spesifik dari jaringan yang disebabkan oleh berbagai jenis agen: fisik, kimia,

atau biologi. Hal ini dapat diwakili oleh dilatasi kapiler dengan akumulasi cairan

(edema) dan oleh emigrasi fagosit dan akumulasi (neutrofil, monosit, makrofag),

yang juga berkontribusi terhadap generasi hiperalgesia dan hilangnya fungsi

jaringan (42). Karakteristik lainnya, seperti erithema dan demam, juga dapat

muncul selama proses inflamasi. Proses terakhir terjadi setelah pelepasan sitokin

(IL-1, TNF a) oleh makrofag yang teraktivasi, yang selanjutnya mengakibatkan

dilatasi pembuluh karena relaksasi otot halus dan diikuti dengan peningkatan

aliran darah lokal (hipotermia). Terjadi pula adanya peningkatan hematokrit yang

mengarah ke adanya agregasi eritrosit, dan leukosit yang bergerak perifer.

Demikian pula, banyak phospholipases intra dan ekstraseluler yang telah

diaktifkan dari fosfolipid membran sitoplasma dan mengaktifkan enzim lain,

seperti cyclooxygenase (COX) dan lipoxygenase (LOX), yang bertindak atas

asam arakidonat (AA) dan metabolisme eicosanoid. Sistem fibrinolitik, histamin,

serotonin dan nitrit oksida (NO) dapat menyebabkan peradangan ketika terjadi

perubahan pada sistem fisiologis tubuh. Peristiwa inflamasi melibatkan perubahan

mikro-vaskular dengan peningkatan permeabilitas pembuluh darah, termasuk

protein plasmatic dan amplifikasi mediator kimia endogen.

14

Gambar 1. Mekanisme Inflamasi26

Jumlah berlebihan radikal bebas (FR) memicu neutrofil NADPH

oksidase dan memisahkan berbagai sistem redoks, termasuk xanthine

dehidrogenase dari sel endotel di daerah peradangan. perubahan oksidatif Low-

density lipoprotein, inaktivasi dari -1-protease, kerusakan DNA, dan heat-shock

sintesis protein juga dipengaruhi oleh FR yang berlebih. Kolagen dan perubahan

asam hialuronat juga dapat terjadi, campur dengan viskositas cairan sinovial,

membentuk radikal karbon yang bereaksi terhadap diri mereka sendiri, penurunan

fleksibilitas molekul kolagen.

Oksigen reaktif Intermediet yang dapat berpartisipasi dalam proses

peradangan, seperti:

(a) leukosit polimorfonuklear (PMN) dan monosit / makrofag kemotaksis

(b) stimulus khusus yang terkait dengan gangguan pernafasan, terutama

pada sel-sel inflamasi dengan produksi FR lebih besar;

(c) konsentrasi rendah dari enzim pengangkut di ruang interstitial; dan

(d) pembentukan logam kompleks imun yang juga dapat menghasilkan OH

15

Adhesi selular endotel-leukosit terjadi dalam urutan suatu proses, dan

molekul tertentu disajikan dalam berbagai tahap. Selectins (E, P, dan L), integrin

(VLA-4 dan LFA-1), dan anggota immunoglobulin super fam (ICAM-1 dan

ICAM-2) memindahkan leukosit dari lumen pembuluh darah ke jaringan.

Menanggapi beberapa mediator, vaskular endotel mengungkapkan glikoprotein

spesifik pada permukaan sel, yang berhubungan dengan ekstravasasi leukosit

darah yang penting untuk perbaikan jaringan. Respon tubuh telah memungkinkan

klasifikasi peradangan ke imunogenik dan non-imunogenik (non-self) yang

terakhir dibagi dalam fase akut dan kronis.

Respons fase akut melibatkan peristiwa kejadian mikro-vaskular dalam

sel timbulnya serosa, fibrinous, supuratif atau eksudatif, respon ini terjadi dalam

waktu 72 jam. respon-fase kronis termasuk peristiwa proliferatif dan perubahan

histologis, berbeda dengan di fase akut, ditandai dengan emigrasi sel dan mitosis

yang intensif. Pembentukan sel multinuclear raksasa berlangsung, dan semua

peristiwa ini disebabkan oleh inflamasi. Selain itu, peradangan mungkin fisiologis

atau patologis, tergantung terutama pada aspek histologis. Peristiwa tertentu-

imun, seperti reaksi hipersensitif (jenis I, II, III, dan IV) juga dapat menyebabkan

peradangan.

Terlepas dari klasifikasi di atas, peradangan terdiri dari berbagai macam

reaksi yang terjadi dalam tubuh, misalnya arthritis. Beberapa jalur etiologi dan

metabolisme terlibat dalam respon inflamasi. Semua peristiwa peradangan yang

berbeda, yang berpuncak pada edema dan nyeri di tulang sendi umumnya arthritis.

Studi peradangan membutuhkan model eksperimental yang berbeda, sehingga

jalur metabolisme yang berbeda dapat dijelaskan. Peradangan merupakan agen

penyebab penting morbiditas dan mortalitas manusia, seperti sindrom respon

inflamasi sistemik (SIRS), beberapa sindrom disfungsi organ (MODS), dan

kegagalan organ multiple (MOF).8 Dengan cara ini, peristiwa peradangan

memungkinkan identifikasi molekul dan memungkinkan pengembangan obat

yang mampu bekerja pada berbagai jalur metabolik terkait.

16

Pemberian beberapa kortikosteroid pada asma, rhinitis, dan dermatitis

digunakan dalam terapi anti-inflamasi dalam tes klinis dan pra-klinis.6 Seperti

hormon lainnya, kortikosteroid bertindak di banyak jaringan yang berbeda dan

sistem tubuh. Pada konsentrasi fisiologis, mereka mempertahankan tekanan darah

normal, fungsi jantung, merespon inflamasi prostaglandin (PG), dan

mempertahankan volume darah, mengurangi permeabilitas endotel vaskular .8,10

Namun, efek ini ditekankan pada konsentrasi farmakologis tinggi, yang mengarah

ke sasaran-sel disfungsi (sel mast, makrofag, otot polos pembuluh darah, dan

kelenjar lendir).9,10

Glukokortikoid digunakan karena aktivitas anti-inflamasi umum mereka,

juga bertindak atas aktifitas sitokin yang terlibat yaitu eosinofil, basofil, dan

limfosit.7 Aktivitas senyawa ini tergantung pada kehadiran kelompok hidroksil

karbon-11.10. Temuan simultan telah dilaporkan pada anggota keluarga kalsium

anexin dan fosfolipid protein dari beberapa kelompok intrinsik dalam kontrol

fosforilasi.6,10 Efek anti-inflamasi glukokortikoid dengan LC-1 protein bertindak

atas asam arakidonat (AA) metabolit, fosfolipase A 2 (PLA 2) inaktivasi, dan

COX dan LOX (88). Peristiwa ini hadir dalam memicu proses apoptosis dalam

berbagai jenis sel, perlindungan terhadap oklusi arteri limpa, dan reperfusi

makrofag peritoneal10 dan neutrofil. Namun, fungsi biologis yang tepat belum

benar-benar jelas.6,8

Tindakan penghambatan glukokortikoid pada interaksi endotelium-

leukosit mempengaruhi ekspresi seluler adhesi molekul (CAM). Glukokortikoid

menghambat ekspresi Elam-1 dan ICAM-1 di endothelium dan menekan ekspresi

LFA-1 di limfosit.4,6 Efek obat anti-inflamasi non-steroid (NSAID) pada sintesis

prostaglandin inflamasi, terutama PGE 2, secara luas dikenal. Tujuan

farmakologis yang utama NSAID adalah COX-enzim (PGHS atau PGH 2)2,4. Dua

isoform enzim ini dijelaskan, COX-1 dan COX-2, berbeda dalam ekspresi

jaringan dan distribusi. Mekanisme semua NSAID dipelajari sampai sekarang

didasarkan pada keterlibatan mereka dengan daerah hidrofobik dari kedua

17

isoform, di mana cara struktur molekul obat berhubungan dengan daerah ini

mungkin berbeda.1,3

Semua NSAID diuji pada model hewan dan manusia untuk mencegah

nyeri, edema, dan erithema menyebabkan berkurangnya reaksi inflamasi. Pada

manusia, NSAID telah dianggap sangat efektif dalam peradangan akut dan kronis,

seperti arthritis, tendinitis, dan perikarditis.5 COX-1 penghambatan oleh NSAID

dapat menyebabkan efek samping, seperti pencernaan dan gangguan ginjal.4

Setelah munculnya glycobiology, studi klinis dengan CAM telah

memungkinkan pengembangan strategi anti-inflamasi. Reaksi inflamasi seperti

pada glomerulonefritis, ulcerative colitis, sindrom stres pernapasan, rheumatoid

arthritis, autoimunitas, dan aterosklerosis sebagian merupakan hasil dari aktivasi

patologis adhesi endotel-leukosit.8

Penghambatan produksi FR telah dirangsang oleh sintesis antioksidan

endogen dan beberapa faktor dan co-faktor untuk pembentukan antioksidan

eksogen. Produksi fisiologis FR berhubungan dengan:

1) aktivasi dan migrasi sel fagosit;

2) aktivasi COX selama metabolisme AA;

3) oksidasi katekolamin;

4) pembentukan asam urat melalui xantin oksidase;

5) enzim mikrosomal P-450 pada membran internal mitokondria melalui

sitokrom oksidase yang kompleks dengan reduksi oksigen. Oksigen

diangkut oleh hemoglobin (67); Namun, jumlah yang berlebihan dari

FR berhubungan erat dengan beberapa proses inflamasi, yaitu

terbentuknya reactive oksigen spesies (ROS).2,8,10

Mekanisme antioksidan alami (enzimatik atau non-enzimatik) telah

dirangsang. Mikromolekull dan ion logam (selenium, seng, tembaga, mangan,

vitamin A, C, dan E, sistein, dan glutathione reduksi, dan beberapa senyawa

18

plasma) berpartisipasi dalam acara inflamasi dan bertindak atas terbentuknya

ROS.6,9

(Kumar, et.al.2005)

Berdasarkan data tersebut, manusia telah mencari produk alami yang

dapat digunakan sebagai terapi, terutama yang berasal dari tanaman dan lebah.4

Beberapa tanaman menghasilkan eksudat resin dengan anti-mikroba dan anti-

nekrotik yang bersifat kuat. Lebah mengumpulkan eksudat resin dari tanaman

tertentu dan menambahkan sekresi mereka, fragmen kayu, serbuk sari, dan lilin,

produk ini dari lebah dan tumbuhan disebut propolis. Kata propolis berasal dari

19

bahasa Yunani yang berarti pro 'dalam membela’ dan polis' kota ', yang mewakili

pertahanan kota lebah (atau sarang). Propolis telah digunakan dalam pengobatan

tradisional sejak zaman purba.3 propolis ini digunakan dalam ritual Mesir untuk

membalsem mayat pada zaman mereka, sebagai pernis biola di Italia pada abad

ke-17, dan sebagai antiseptik lokal untuk tali pusar di Abad Pertengahan.3,4 Saat

ini, propolis masih digunakan dalam obat buatan sendiri dan kosmetik. Dua

karakteristik propolis adalah bau dan berbagai warna dari hijau gelap sampai

coklat.

Komposisi kimia propolis telah berkorelasi dengan keanekaragaman

tumbuhan di sekitar sarang lebah. Secara umum, propolis baku terdiri dari resin

50% dan balsam, 30% lilin, 10% minyak esensial dan aromatik, 5% serbuk sari,

dan 5% zat lainnya, termasuk fragmen kayu. Lebih dari 210 senyawa yang

berbeda telah diidentifikasi sejauh ini, seperti asam alifatik, ester, asam aromatik,

asam lemak, karbohidrat, aldehida, asam amino, keton, chalkones,

dihydrochalcones, terpenoid, vitamin, dan zat anorganik.2,3,4

Etanol, pelarut yang paling umum digunakan untuk pembuatan propolis,

dan pelarut lain seperti eter ethylic, air, metanol, petroleum eter, dan kloroform

digunakan untuk mengekstraksi dan mengidentifikasi banyak senyawa propolis.

Selain itu, gliserin, propilen glikol telah digunakan dalam pembuatan propolis

oleh industri farmasi dan kosmetik.9

Propolis adalah bahan resin yang dikumpulkan oleh lebah madu dari

berbagai jenis tumbuhan. Flavonoid adalah senyawa kimia utama dalam propolis

yang menghambat pertumbuhan bakteri dan mengurangi terlepasnya radikal

bebas, sehingga diduga senyawa ini memiliki sifat anti bakteri dan anti-

inflamasi.13Flavonoid juga dapat bermanfaat sebagai inhibitor terbentuknya asam

arakidonat28, juga sebagai inhibitor enzim fosfolipid A2, cyclooxygenase dan

lipooxygenase hingga akhirnya juga dapat menurunkan terbentuknya

leukotrien.27,28

20

Senyawa Propolis baru-baru ini telah menjadi subyek penelitian untuk

menentukan aplikasi terapeutik, flavonoid yang paling aktif secara biologi.7

Namun, terdapat beberapa reaksi hipersensitif yang disebabkan oleh propolis

terutama mereka yang berasal dari asam sinamat yang telah dilaporkan. Edema

dan erithema di wajah dan tangan di Cremona, Italia, terkait dengan dermatitis

kontak dengan propolis. Reaksi alergi yang disebabkan oleh propolis juga telah

dilaporkan.7,8

Propolis memiliki toksisitas oral akut rendah, seperti yang ditunjukkan

oleh LD 50 diuji pada tikus (2,000-7,300 mg / kg) dan flavonoid dievaluasi pada

tikus (8,000-4,000 mg / kg). Tidak ada efek samping telah terlihat di oral untuk

tikus lebih tinggi dari 4.000 mg / kg / hari selama dua minggu dan dalam air

minum di 1.400 mg / kg / hari dan selama 90 hari, dan untuk tikus di 2.740 mg /

kg / hari selama 60 hari. Di sisi lain, pemberian intraperitoneal ekstrak propolis

etanol memiliki efek sedikit pada hewan tersebut. Pemberian secara oral Propolis

tidak menunjukkan perubahan signifikan dalam beberapa tingkat enzim penting

dalam tikus.6,7

Mengingat propolis yang terdiri dari campuran kompleks, interaksi

sinergis antara senyawa sebagai faktor penting dalam kegiatan anti-inflamasi.

Propolis ditemukan secara komersial dalam bentuk semprotan, salep, kapsul,

lotion kapiler, dan pasta gigi, karena aktivitas bakteriostatik dan sifat

farmakologinya.

Saat ini, banyak percobaan in vitro dan in vivo dilakukan dengan ekstrak

propolis etanol (PEE) dan ekstrak propolis udara (PAE) untuk mengkonfirmasi

aktivitas anti-inflamasi. Efek anti-inflamasi PAE diamati pada penghambatan

agregasi platelet, in vitro PG biosintesis, dan adjuvant pada kaki edema secara in

vivo, ketika pemberian secara oral dan dalam dosis tertentu. PAE menghambat

peradangan akut dan peradangan kronis (formaldehida yang disebabkan arthritis).

Efek anti-inflamasi pemberian secara oral PEE dapat diamati dalam

21

penghambatan carrageenin yang diinduksi edema dan permeabilitas pembuluh

darah dan analgesia dengan cara dan tergantung dosis.3,7

Propolis merupakan bahan lipofilik yang ditemukan di sarang lebah

madu. Dalam penelitian di Korea yaitu efek anti-inflamasi dari propolis yang

diekstrak dengan etanol, dan digunakan sebagai bahan uji. Nilai LD50 dengan

pemberian ekstrak etanol propolis secara oral (EEKP) lebih tinggi secara

signifikan dalam menghambat perkembangan kaki edema yang disebabkan oleh

carrageenin pada tikus. Pretreatment secara oral dari ekstrak propolis nyata

menghambat peningkatan permeabilitas pembuluh darah. Ekstrak Propolis, 50 dan

100 mg / kg P.O. per hari selama 7 hari, menghasilkan efek penghambatan yang

signifikan terhadap granuloma dan pembentukan eksudat pada tikus. Efek

penghambatan ini ditingkatkan dengan penggunaan bersama dengan prednisolon

(2,5 mg / kg). Hasil ini menunjukkan bahwa propolis ternyata memiliki aktivitas

anti-inflamasi yang kuat.12

Ekstrak Propolis bertindak pada kekebalan host dengan mengaktifkan

makrofag non-spesifik, merangsang pelepasan H2O2, dan menghambat generasi

nitrat oksida dalam cara tergantung dosis. Aktivitas anti-inflamasi ini dapat

dijelaskan oleh adanya flavonoid aktif dan turunan asam sinamat. Mantan

termasuk acacetin, quercetin, dan naringenin, yang terakhir termasuk caffeic acid

fenil ester (CAPE) dan asam caffeic (CA).7,8,9,10

Aksi CAPE dapat diamati pada beberapa generasi proses oksidatif sel:

a) aktivitas myeloperoxidase (MPO) oleh infiltrasi PMN di telinga tikus

yang diinduksi oleh promotor tumor;

b) Membludaknyanya PMN pada manusia

c) pembentukan oksida-dasar dalam DNA epidermal terisolasi pada tikus

yang diobati secara in vivo.7

Hal itu juga mengamati bahwa CAPE dan CA adalah penghambat LOX

kuat, menekan produksi leukotrien oleh makrofag peritoneal. Aksi mereka di LTC

22

4 lebih kecil in vivo.8 Quercetin menghambat LOX, dan pada konsentrasi tinggi

dapat memblok COX. Naringenin hanya menghambat LTC 4 degan menyebabkan

kelemahan. Propolis konstituen memiliki kemampuan untuk menghasilkan radikal

bebas dalam peristiwa inflamasi termasuk neutrofil chemiluminescence. Namun,

beberapa model induksi peradangan (di mana phlogogen dilemahkan in vitro)

tidak menunjukkan efek ekstrak propolis pada peradangan yang sudah ditetapkan. 7,8

Ekstrak propolis air telah diuji pula dalam sebuah penelitian mengenai

aktifitasnya dalam menghambat produksi nitrit oksid (NO) pada aktivasi

lipopolisakarida (LPS). CAPE analog dan cinnamyl caffeate terlihat berpotensi

untuk menghambat NO. 3-phenylpropyl caffeate dan 4-phenylbutyl caffeate

memiliki efektifitas yang lebih kuat dalam menghambat produksi NO daripada

dengan CAPE. Namun CAPE memiliki rantai karon yang lebih panjang, CAPE

dimungkinkan dapat memblok aktivasi dari iNOS.15

Dalam berbagai model penelitian in vitro ekstrak propolis ditunjukkan untuk

menghambat agregasi platelet dan menghambat sintesis eicosanoid, hal ini

menunjukkan bahwa propolis memiliki sifat antiinflamasi yang kuat. Sebuah

ekstrak propolis udara (PAE) 13% diuji secara oral dalam beberapa tingkatan

dosis (1, 5 dan 10 ml / kg) pada tikus karagenan model kaki edema dan tikus yang

diinduksi arthritis. Dalam model kedua, ekstrak menunjukkan aktivitas yang kuat

terkait dengan dosis antiinflamasi, yang dibandingkan dengan diklofenak (sebagai

standar acuan). Hal ini menyimpulkan bahwa ekstrak propolis memiliki sifat

antiinflamasi kuat secara in vivo. Aktivitasnya dapat juga berkorelasi dengan efek

pada pelepasan berbagai mediator inflamasi.11

Terdapat pula sebuah penelitian yang menguji perawatan kaping pulpa

langsung dengan ekstrak flavonoid propolis pada pulpa gigi tikus yang hasilnya

menyimpulkan propolis mampu menghambat inflamasi pulpa dan menstimulus

terbentuknya dentin reparatif.13

23

Propolis suatu bahan alami yang banyak dikonsumsi sebagai penghilang

nyeri sendi lutut, mengandung bioflavonoid dan Caffeic Acid Polyphenol Ester.

Beberapa penelitian membuktikan efek propolis sebagai anti-inflamasi,

mekanisme kerjanya dalam menekan jumlah makrofag dibandingkan dengan anti

inflamasi lain juga sudah diteliti dengan dibandingkan dengan celecoxib. Propolis

menghambat jumlah makrofag 4-5 kali lebih kuat dibandingkan dengan celecoxib

pada synovitis sendi lutut.14

Semua data ini menunjukkan aksi penghambatan yang kuat dan berbeda

dari beberapa propolis atau konstituen yang terisolasi pada peristiwa peradangan.

Namun, efek anti-inflamasi memiliki pote.si yang besar. Dalam upaya untuk

menetapkan standar kualitas untuk propolis, studi analisis kimia fisik masih belum

memadai terutama untuk berbagai macam senyawa yang terdeteksi dalam propolis

dari daerah tropis. Standar-standar ini harus tergantung secara khusus pada

aktivitas farmakologi yang berbeda dari tiap senyawa tersebut.4,7

Ada beberapa studi melaporkan aktivitas anti-inflamasi in vivo propolis.

Berdasarkan data tersebut, evaluasi potensi anti-inflamasi dari produk propolis

yang komersial dari beberapa asal phyto-geografis adalah sangat penting untuk

indikasi dalam proses inflamasi.

24

BAB III

PENUTUP

A. Simpulan

1. Propolis memiliki banyak manfaaat bagi kehidupan manusia baik

dari segi pengobatan, tradisional, kosmetik, dan pangan.

2. Manfaat propolis terutama dalam bidang medik yaitu sebagai

antimikrobia, antiviral, antiinflamasi, anti malaria, hepatoprotektif

dengan aktivitas melawan tumor, anti kanker, serta menstimulus

sistem imun.

B. Saran

25

1. Perlunya penelitian lebih lanjut mengenai dosis aman propolis

bagi manusia, termasuk studi tentang keamanan dan

bioavailabilitasnya.

DAFTAR PUSTAKA

1) Al Firman, J.U., Radiati, L.E., Awwaly, Kh. L. & Kalsum, U., 2010. Pengaruh

2) Pemberian Ekstrak Propolis Terhadap Sistem Kekebalan Seluler Pada Tikus Putih

3) I Gede, D.B.T. 2010. Mycobacterium Tuberculosis Sebagai PenyebabPenyakit Tuberculosis. May 21, 2010 at 4:41 pm.

4) Jaya, F, Radiati, L.E., Al Awwa, K.U. & Kalsum, U., Pengaruh Pemberian Ekstrak Propolis Terhadap Sistem Kekebalan Seluler Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Strain Wistar.

26

5) Miller, E.A. & Ernst, J.D. 2009. Anti-TNF immunotherapy and tuberculosis reactivation: another mechanism revealed. Journal of Clinical Investigation,119(5):1079.

6) Made, L., & Made, B. nd. Pengaruh Propolis Terhadap Sekresi Interkulin-Pada Supernatan Kultur Magrofag Dari Penderita Tuberkulosis Paru yang Diinfeksi M.Tuberculosis. http://ejournal.unud.ac.id/abstrak/dr%20linawati_1.pdf.

7) Chevion S, Moran DS & Heled Y. 2003. Serum antioxidant stress and cell injury after severe physicaal exercise. Proceedings of The United State of America. 100 (9) : 5119-5123.

8) Hairrudin, 2005. Pengaruh pemberian ekstrak jinten hitam dalam mencegah stres oksidatif akibat latihan olahraga anaerobik. Jurnal Biomedis III (1) : 1-11.

9) Bankova V, Popov S, marekov nl. A study on flavonoids of propolis. J. Nat. Prod., 1983, 46, 478-4.

10) Bankova V., Dyulgerov al., Popov S., Marekov n. a gc/ms study of the propolis phenolic constituents. Z. Naturforsch. C, 1987, 42, 147-51.

11) Bankova V., Christov R., Stoev G., Popov S. Determination of phenolics from propolis by capillary gas chromatography. J. Chromatogr., 1992, 607, 150-3.

12) Barnes PJ. Mechanisms of action of glucocorticoids in asthma. Am. J. Respir. Crit. Care Med., 1996, 154, S21-7.

13) Baue ae.,Durham r., Faist e. Systemic inflammatory response syndrome (SIRS), multiple organ dysfunction syndrome (MODS), multiple organ failure (MOF) are we winning the battle? Shock, 1998, 10, 79-89.

14) Baumann J., Bruchhausen FV., Wurm G. Flavonoids and related compounds as inhibitors of arachidonic acid peroxidation. Prostaglandins, 1980, 20, 627-39.

15) Bisby RH. Interactions of vitamin E with free radicals and membranes. Free Radic. Res. Commun., 1990, 8, 266-306.

16) Burdock GA. Review of the biological properties and toxicity of bee propolis (propolis). Food Chem. Toxicol., 1998, 36, 347-63.

27

17) Cheng PC., Wong G. Honey bee products: prospects in medicine. Bee World, 1992, 77, 8-15.

18) Delmaestro RF. An approach to free radicals in medicine and biology. Acta Physiol. Scand., 1980, 492, 153-68.

19) Khayyal MT1, el-Ghazaly MA, el-Khatib AS. Mechanisme of antiinflammation in propolis extract.

20) Eun-Hee Park, Sun-Hee Kim, Soo-Sun Park. Anti inflammation activity of propolis. Oktober 1996, Volume 19, Issue 5, pp 337-341

21) Ardo sabir. A histopathologic study of direct pulp-capping treatment with propolis-flavonoids extract. Department of Conservative Dentistry, Faculty of Dentistry, Hasanuddin University

22) Hendra Gunawan, Hermawan Nagar Rasyid, Nucki Nursjamsi Hidajat, Agus Hadian Rahim. Comparison between Propolis and Celecoxib as Anti-inflammatory Agent in Rat with Knee Synovitis. The Journal of Indonesian Orthopaedic, Volume 40, Number 1, April 2012

23) Takema Nagaoka, Arjun H. Banskota, Yasuhiro Tezuka, Kiyoshi Midorikawa, Katsumichi Matsushige, and Shigetoshi Kadota. Caffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE) Analogues: Potent Nitric Oxide Inhibitors from the Netherlands Propolis. . Biol. Pharm. Bull. 26(4) 487—491 (2003)

24) Niraldo Paulino1, Andreia Pires Dantas2, Vassya Bankova3, Daniela Taggliari Longhi1, Amarilis Scremin1, Solange Lisboa de Castro2,*, and João Batista Calixto. Bulgarian Propolis Induces Analgesic and Anti-inflammatory Effects in Mice and Inhibits In Vitro Contraction of Airway Smooth Muscle. J Pharmacol Sci 93, 307 – 313 (2003)

25) Koichi TAN-NO,*,a Takeharu NAKAJIMA,a Takehiro SHOJI,a Osamu NAKAGAWASAI,a Fukie NIIJIMA,a Masaaki ISHIKAWA,b Yasuo ENDO,c Takumi SATO,d Susumu SATOH,d and Takeshi TADANO. Anti-inflammatory Effect of Propolis through Inhibition of Nitric Oxide Production on Carrageenin-Induced Mouse Paw Edema. Biol. Pharm. Bull. 29(1) 96—99 (2006)

26) Kumar, et al.2005.The Molecular Mechanisme of Chronic Inflammation Development. Google books.

28

27) Alcarez, M J. and M L Ferrandiz.1991.Anti inflammatory activity and inhibition of arachidonic acid metabolism by flavonoids.Springer journ.Vol.32:pp 283-288.

28) Kim, Hun Pyo., Kun Ho Son,Hyeun Wook Chang,San Sik Kang.2004.Anti inflammatory Plant Flavonoids and Celluler Action Mechanisms. Journ of Pharm Sc.Vol.96: (3) 229-245.

29