Rancangan Acak Lengkap DEBOY

download Rancangan Acak Lengkap DEBOY

of 30

  • date post

    12-Apr-2016
  • Category

    Documents

  • view

    22
  • download

    7

Embed Size (px)

description

metode penelitian

Transcript of Rancangan Acak Lengkap DEBOY

METODOLOGI PENELITIANRancangan Acak LengkapUji Sitotoksik Hasil Fermentasi Kapang Endofit

Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) terhadap Sel MCF-7

Oleh :

DEBY BAYU SETYA PUTRA (1201013)S1-IVA

Dosen Pembimbing : Musyirna Rahma Nst, M.Si

PROGRAM STUDI S-1 FARMASISEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI RIAUPEKANBARU2014

Uji Sitotoksik Hasil Fermentasi Kapang Endofit

Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) terhadap Sel MCF-7

A. PENDAHULUANTinjauan PustakaRancangan percobaan merupakan suatu uji dalam atau deretan uji baik menggunakan statistika deskripsi maupun statistika inferensia, yang bertujuan untuk mengubah peubah input menjadi suatu output yang merupakan respon dari percobaan tersebut (Mattjik & Sumertajaya). Dalam suatu rancangan percobaan, data yang dianalisis dikatakan sah jika data tersebut memenuhi tiga prinsip dasar berikut, yaitu: 1. Ulangan, yaitu melokalisasi sutu perlakua tertentu terhadap beberapa unit percobaan pada kondisi seragam. 2. Pengacakan, yaitu setiap unit percobaan harus memiliki peluang yang sama untuk diberikan suatu perlakuan tertentu. 3. Pengendalian lingkungan, yaitu usaha untuk mengendalikan keragaman yang muncul akibat keheterogenan kondisi lingkungan. Istilah-istilah dalam rancangan percobaan yang biasa dikenal adalah perlakuan yaitu suatu prosedur atau metode yang diterapkan pada unit percobaan, unit percobaan yaitu unit terkecil dari suatu percobaan yang diberikan suatu percobaan, dan satuan amatan yaitu anak gugus dari unit percobaan tempat dimana respon perlakuan diukur. Rangkaian kegiatan untuk mengamati pengaruh peubah X atau variabel bebas (dependent variable) terhadap Y peragam tak bebas (independent variable), maka X disebut dengan faktor perlakuan dan Y faktor pengamatan. Rancangan Acak Lengkap (RAL) merupakan rancangan yang paling sederhana dan merupakan dasar dari rancangan yang lain. Pada RAL, peletakan perlakuan diacak pada seluruh materi percobaan. Hal ini berarti seluruh unit percobaan mempunyai peluang yang sama besar untuk menerima perlakuan. Rancangan Acak Lengkap sangat sesuai bila digunakan pada percobaan yang memiliki karakteristik:1. Materi percobaan dan faktor lingkungan relative homogen sehingga keragaman galat relative kecil, perlakuan yang merupakan sumber keragaman yang ada adalah satu-satunya sumber keragaman yang masuk dalam percobaan, selain perlakuan yang sengaja diberikan tidak ada sumber keragaman yang lain yang diketahui.2. Jumlah perlakuan dan ulangannya sedikit sehingga dengan penggunaan rancangan yang lain akan menyebabkan derajat bebas galat tidak maksimum dan terlalu kecil.3. Materi percobaannya terbatas Karena setiap perlakuan tidak perlu mendapat ulangan yang sama.Sebenarnya analisis ANOVA satu arah dapat dipakai untuk menghadapi kasus variabel bebas lebih dari satu. Hanya saja analisisnya dilakukan satu per satu, sehingga akan menghadapi banyak kasus ( N semakin banyak ). Dengan melakukan Anova dua arah akan dihindari pula pula terjadinya noise (suatu kemungkinan yantg menyatakan terdapat suatu efek karena bercampurnya suatu analisis data). Noise ini dapat dihindari pada ANOVA dua arah karena analis disini melibatkan kontor terhadap perbedaan(katagorikal) variabel bebas.Interaksi suatu kebersamaanantar fektor dalam mempengaruhi variabel bebas, dengan sendirinyapengaruh faktor-faktor secara mandiri telah dihilangkan. Jika terdapat interaksi berarti efek faktor satu terhadap variabel terikatakan mempunyai garis yang tidak sejajar dengan efek faktor lain terhadap variabel terikatsejajar (saling berpotongan), maka antara faktor tidak mempunyai interaksi. Anova dua arah digunakan peneliti untuk mengatasi perbedaan nilai variabel terikat yang dikategorikan berdasarkan variasi bebas yang banyak dan masing-masing variabel terdiri dari beberapa kelompok. Anova dua arah merupakan penyempurnaan Anova satu arah.Anova dua arah lebih efisien daripada anova satu arah, karena:1. kasus yang dihadapi lebih sedikit yaitu sejumlah sampel2. noise dapat dihilangkan.3. dapat diketahui unsur kebersamaan variabel bebas dalam mempengaruhi variabel terikat.Jika hasil dari uji analisis ragam menunjukkan tertolaknya HO, maka akan muncul sebuah pertanyaan mengenai mana diantara nilai-tengah populasi tersebut yang tidak sama dan mana diantara taraf faktor tersebut yang pengaruhnya berbeda. Uji Beda Nyata Terkecil adalah salah satu uji lanjutan untuk menelaah perbedaan antar populasi.

Uji T pada taraf nyata untuk hipotesis tersebut menggunakan aturan uji

Adapun Sgabsebagai penduga dalam hal ini diganti dengandengan dbGalat sebagai derajat bebas sebarantyang dipakai, dan aturan uji atas hipotesis

tadi menjadi

Pada penerapannya,

dikenal sebagai beda nyata terkecil (BNT), sehingga aturan uji beda nyata terkecil adalah

Sebenarnya analisis ANOVA satu arah dapat dipakai untuk menghadapi kasus variabel bebas lebih dari satu. Hanya saja analisisnya dilakukan satu per satu, sehingga akan menghadapi banyak kasus ( N semakin banyak ). Dengan melakukan Anova dua arah akan dihindari pula pula terjadinya noise (suatu kemungkinan yantg menyatakan terdapat suatu efek karena bercampurnya suatu analisis data). Noise ini dapat dihindari pada ANOVA dua arah karena analis disini melibatkan kontor terhadap perbedaan(katagorikal) variabel bebas.Interaksi suatu kebersamaanantar fektor dalam mempengaruhi variabel bebas, dengan sendirinyapengaruh faktor-faktor secara mandiri telah dihilangkan. Jika terdapat interaksi berarti efek faktor satu terhadap variabel terikatakan mempunyai garis yang tidak sejajar dengan efek faktor lain terhadap variabel terikatsejajar (saling berpotongan), maka antara faktor tidak mempunyai interaksi. Anova dua arah digunakan peneliti untuk mengatasi perbedaan nilai variabel terikat yang dikategorikan berdasarkan variasi bebas yang banyak dan masing-masing variabel terdiri dari beberapa kelompok. Anova dua arah merupakan penyempurnaan Anova satu arah.Anova dua arah lebih efisien daripada anova satu arah, karena:kasus yang dihadapi lebih sedikit yaitu sejumlah sampelnoise dapat dihilangkan.dapat diketahui unsur kebersamaan variabel bebas dalam mempengaruhi variabel terikat.Jika hasil dari uji analisis ragam menunjukkan tertolaknya HO, maka akan muncul sebuah pertanyaan mengenai mana diantara nilai-tengah populasi tersebut yang tidak sama dan mana diantara taraf faktor tersebut yang pengaruhnya berbeda. Uji Beda Nyata Terkecil adalah salah satu uji lanjutan untuk menelaah perbedaan antar populasi.

Uji T pada taraf nyata untuk hipotesis tersebut menggunakan aturan uji

Adapun Sgabsebagai penduga dalam hal ini diganti dengandengan dbGalat sebagai derajat bebas sebarantyang dipakai, dan aturan uji atas hipotesis

tadi menjadi

Pada penerapannya,

dikenal sebagai beda nyata terkecil (BNT), sehingga aturan uji beda nyata terkecil adalah

Analisi di lanjutkan dengan Salah satu prosedur uji yang paling sederhana untuk menjawab pertanyaan tentang nilai tengah perlakuan mana yang berbeda apabila H1 diterima adalah uji beda nyata terkecil (Least Significant Different = LSD). Uji ini sangat cocok digunakan apabila pengujian nilai tengah perlakuan yang akan dibandingkan sebelumnya telah direncanakan. Tingkat ketepatan uji BNT akan berkurang jika digunakan untuk menguji semua kemungkinan pasangan nilai tengah perlakuan (melakukan pembanding yang tidak terencana). Beberapa aturan dasar yang perlu diperhatikan agar uji ini dapat digunakan secara efektif antara lain: gunakan uji BNT hanya apabila F. Hitung > F. Tabel, tidak menggunakan uji BNT untuk membandingkan semua kombinasi pasangan nilai tengah perlakuan karena hanya cocok untuk membandingkan dengan kontrol atau tidak lebih dari lima perlakuan. Apabila setiap perlakuan mempunyai ulangan yang sama yaitu r, maka formula untuk perhitungan nilai pembanding (NP) BNT pada taraf nyata adalah:

NP BNT = t .

Nilai t dilihat pada tabel t dengan menggunakan derajat bebas galat dan yang digunakan.

Untuk menilai apakah dua nilai tengah perlakuan berbeda secara statistika, maka bandingkan dengan selisih (beda) dua nilai tengah perlakuan tersebut dengan nilai BNT. Jika beda dua nilai tengah > nilai BNT , maka dua nilai tengah dikatakan berbeda secara nyata pada taraf , sebaliknya jika beda dua nilai tengah nilai NP BNT, maka dua nilai tengah dikatakan tidak berbeda nyata. PermasalahanPermasalahan dalam penelitian ini adalah: (1) apakah ada efek sitotoksik dari hasil fermentasi kapang endrofit Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) terhadap Sel MCF-7 terhadap sel kanker secara in vitro

TujuanTujuan utama penelitian ini untuk mengetahui efek sitotoksiknya terhadap sel kanker secara in vitro. Pada penelitian ini digunakan sel MCF-7 (sel kanker payudara manusia) karena tingkat kejadian kanker payudara yang tinggi di Indonesia dan pengujian sitotoksik dengan menggunakan sel MCF-7 masih jarang dilakukan.

HipotesisAdanya pengaruh efek sitotoksik dari hasil fermentasi kapang endrofit Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) terhadap Sel MCF-7 terhadap sel kanker secara in vitro. Metoda yang di gunakanBAHAN. Supernatan hasil fermentasi isolat KVM/a dan KIVM/b kapang endofit buah mahkota dewa, diekstraksi dengan pelarut semipolar (etil asetat), kemudian ekstrak dievaporasi sehingga didapat ekstrak kental.Sel MCF-7 (sel kanker payudara manusia), cisplatin (Platosin), DMSO (dimetil sulfoksida), medium kultur RPMI 1640, FCS (Fetal Calf Serum), streptomisin, natrium bikarbonat, dinatrium hidrogen fosfat, kalium dihidrogen fosfat, natrium klorida, kalium klorida, air suling steril, etanol absolut, merah netral, tripsin, biru tripan, SDS (sodium dodecyl sulphate), kloroform, metanol, asam asetat, n-heksan, etil asetat.Labu kultur jaringan 25 ml (Tissue Culture Flask, Nunclon), pelat kultur jaringan 96 sumuran (Tissue Culture Plate 96 well,