Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

24
USULAN PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA JUDUL PROGRAM PERBEDAAN EFEK ANTIHIPERGLIKEMIA INFUSA DAUN KEMBANG BULAN (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) DAN METFORMIN: PENELUSURAN POTENSI ETNOMEDIK MASYARAKAT KALIMANTAN BARAT BIDANG KEGIATAN: PKM PENELITIAN Diusulkan oleh: Tiara Grhanesia Denashurya I1011131016 Angkatan 2013 Widiayu Sekar Putri I1011131028 Angkatan 2013 Agung Prasetyo I1011131069 Angkatan 2013 Jovi Pardomuan Siagian I11112008 Angkatan 2012 UNIVERSITAS TANJUNGPURA PONTIANAK 2013

description

Proposal PKM-P Dikti

Transcript of Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

Page 1: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

USULAN PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

JUDUL PROGRAM

PERBEDAAN EFEK ANTIHIPERGLIKEMIA INFUSA DAUN KEMBANG BULAN

(Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) DAN METFORMIN: PENELUSURAN

POTENSI ETNOMEDIK MASYARAKAT KALIMANTAN BARAT

BIDANG KEGIATAN:

PKM PENELITIAN

Diusulkan oleh:

Tiara Grhanesia Denashurya I1011131016 Angkatan 2013

Widiayu Sekar Putri I1011131028 Angkatan 2013

Agung Prasetyo I1011131069 Angkatan 2013

Jovi Pardomuan Siagian I11112008 Angkatan 2012

UNIVERSITAS TANJUNGPURA

PONTIANAK

2013

Page 2: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

PENGESAHAN USULAN PKM-PENELITIAN

1. Judul Kegiatan : Perbedaan Efek Antihiperglikemia Infusa Daun

Kembang Bulan (Tithonia diversifolia

(Hamsley) A. Gray) dan Metformin:

Penelusuran Potensi Etnomedik Masyarakat

Kalimantan Barat

2. Bidang Kegiatan : PKM-P

3. Ketua Pelaksana Kegiatan

a. Nama Lengkap : Tiara Grhanesia Denashurya

b. NIM : I1011131016

c. Jurusan : Pendidikan Dokter

d. Universitas/Institut/Politeknik : Universitas Tanjungpura

e. Alamat Rumah dan No Tel./HP : Komplek Untan Jln. Sekadau No. K58 /

08990988839

f. Alamat email : [email protected]

4. Anggota Pelaksana Kegiatan/Penulis : 3 orang

5. Dosen Pendamping

a. Nama Lengkap dan Gelar : dr. Muhammad In’am Ilmiawan, M.Biomed

b. NIDN : 0018107905

c. Alamat Rumah dan No Tel./HP : Jln. Kom. Yos Sudarso, Gg. Kelontan II No. 12

Kel. Sui. Jawi / 081257724098

6. Biaya Kegiatan Total

a. Dikti : Rp. 8.910.000,00

b. Sumber lain : -

7. Jangka Waktu Pelaksanaan : 3 bulan

Pontianak, 25 Oktober 2013

Menyetujui

Pembantu Dekan II Ketua Pelaksana Kegiatan

Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura

( Iswahyudi, S.Si., Apt., Sp.FRS ) ( Tiara Grhanesia )

NIP. 19691215 199703 1 011 NIM. I1011131016

Wakil Rektor Bidang Kemahasiswaan Dosen Pendamping

Universitas Tanjungpura Pontianak

( Ir. Waskitha, MM ) ( dr. Ita Armyanti )

NIP. 19520601 198403 1 001 NIP. 19811004 200801 2 011

Page 3: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

iii

DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL i

HALAMAN PENGESAHAN ii

DAFTAR ISI iii

DAFTAR GAMBAR v

RINGKASAN 1

BAB 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah 1

1.2 Rumusan Masalah 2

1.3 Urgensi Penilitian 2

1.4 Tujuan Penelitian 2

1.5 Luaran yang Diharapkan 2

1.6 Kegunaan 2

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Diabetes Mellitus 3

2.2 Hiperglikemia 3

2.3 Metformin 3

2.4 Obat Hipoglikemik Oral (OHO) 4

2.5 Penelitian Tanaman Kembang Bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) 4

2.6 Tinjauan Fungsi Senyawa Aktif Tithonia diversifolia (Hemsl) A.Gray 4

BAB 3 METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian 5

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian 5

3.3 Perlakuan dan Pengukuran 6

3.4 Bahan dan Alat Penelitian 6

3.5 Metode Penelitian 7

3.6 Uji Efektivitas 8

3.7 Alur Kerja 9

BAB 4 BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN

4.1 Anggaran Biaya 9

4.2 Jadwal Kegiatan 9

DAFTAR PUSTAKA 9

Page 4: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

iv

LAMPIRAN

Lampiran 1 Biodata Ketua dan Anggota 11

Lampiran 2 Justifikasi Anggaran Kegiatan 15

Lampiran 3 Susunan Organisai Tim Kegiatan dan Pembagian Tugas 17

Lampiran 4 Surat Pernyataan Ketua Peneliti/Pelaksana 19

Page 5: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

v

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Tanaman Kembang Bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) 5

Gambar 2. Skema Rancangan Penelitian 5

Gambar 3. Alur Kerja 9

Page 6: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

1

RINGKASAN

Diabetes mellitus (DM) adalah penyakit yang menduduki peringakatan ke 9 dari 10 penyakit

utama penyebab kematian di rumah sakit di Indonesia. DM dapat diatasi dengan mengonsumsi OHO

(Obat Hipoglikemia Oral) tetapi obat ini tidak boleh sembarangan dikonsumsi karena dikhawatirkan

penderita akan mengalami hipoglikemia, contohnya adalah metformin yang memiliki efek samping

antara lain diare, mual, muntah dan beberapa efek samping lainnya.

Penelitian sebelumnya mengatakan adanya zat antioksidan di daun kembang bulan. Oleh

karena itu, perlu diadakan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui efek hipoglikemik. Penelitian ini

bertujuan untuk mengetahui perbedaan efektifitas antara Metformin dan daun kembang bulan. Selain

itu jika ditemukan bahwa efektifitas daun kembang bulan lebih tinggi, maka daun ini dapat dijadikan

alternatif pengobatan DM yang memiliki efek samping minimal dan terjangkau, alami dan mudah

didapat bagi masyarakat, serta dijadikan alternatif pengobatan di bidang kedokteran.

DM adalah gangguan metabolisme yang secara genetis dan klinis termasuk heterogen dengan

manifestasi berupa hilangnya toleransi karbohidrat. Sedangkan hiperglikemia adalah komplikasi

metabolik akut dari diabetes tipe 2 yang sering terjadi pada penderita diabetes tipe 2 yang lebih tua.

DM dapat dapat diatasi dengan obat-obatan antidiabetes, satu diantaranya adalah metformin.

Metformin dapat menurunkan glukoneogenesis yang meningkat pada orang dengan diabetes melitus

tipe 2, meningkatkan ambilan glukosa pada sel otot, menurunkan absorpsi glukosa, meningkatkan

oksidasi asam lemak, menurunkan LDL dan VLDL di sirkulasi.

Daun kembang bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) mengandung saponin,

polifenol dan flavonoid. Dan dari penelitian sebelumnya menyatakan bahwa efek pertama pemberian

Td pada mencit hiperglikemia peroral, menunjukkan bahwa level gula darah pada mencit

hiperglikemik setelah diberi Td (100, 500, 1500 mg/kg) dapat menurunkan gula darah (7 jam setelah

pemberian Td).

Metode penelitian dilakukan secara eksperimental, rancangan penelitian menggunakan

Randomized Pre-Post Test Control Group Design. Rancangan ini terdiri dari 5 kelompok

(sekelompok kontrol negatif (K), kelompok dosis 1 (P1), dosis 2 (P2), kelompok dosis 3 (P3) , dan

metformin (B kelompok kontrol positif dengan)).

Perlakuan yang diberikan adalah infusa dari tanaman Kembang bulan (Tithonia diversifolia)

secara per oral kepada tikus putih (Rattus norvegicus) yang telah diberi aloksan sebagai efek

hiperglikemia. Tikus putih yang diteliti terdiri dari 30 ekor, yang masing masing kelompok berjumlah

6 ekor. Metodologi penelitian meliputi ; pembuatan infusa daun kembang bulan, skrining fitokimia,

perhitungan dosis infusa daun kembang bulan, perhitungan dosis Metformin. Tahap akhir, dilakukan

uji efektifitas antara infusa daun kembang bulan dan Metformin.

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang Masalah

Menurut American Diabetes Association (ADA) tahun 2003, Diabetes Mellitus (DM)

adalah penyakit kronik yang ditandai dengan meningkatnya kadar gula darah, membutuhkan

perawatan medis berkelanjutan dan memerlukan kerjasama dengan penderitanya untuk dapat

mengelola secara mandiri, dalam rangka mencegah komplikasi akibat penyakitnya. Keadaan ini

disebabkan adanya faktor yang menghambat kerja insulin atau jumlah insulin menurun.

Berdasarkan data tahun 2012 diperkirakan penduduk Indonesia penderita diabetes yang

berumur 20-79 tahun berjumlah 7,6 juta, jumlah ini menempatkan Indonesia di peringkat 7 dunia

dibawah Negara China, India, USA, Brazil, Rusia dan Meksiko (International Diabetes

Federation, 2012).

Page 7: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

2

Secara umum DM dapat diatasi dengan obat-obatan antidiabetes yang secara medis disebut

obat hipoglikemia oral (OHO). Obat hipoglikemik oral tidak boleh sembarangn dikonsumsi

karena dikhawatirkan penderita menjadi hipoglikemia (Prapti, 2003). Satu diantaranya adalah

Metformin, yang digunakan untuk menurunkan glukoneogenesis yang meningkat pada penderita

DM tipe 2 (Rang et al., 2012). Obat ini memiliki efek samping berupa diare, mual, muntah,

gangguan abdominal, kecap logam (metallic taste), anoreksia (Gunawan et al., 2009).

Berdasarkan alasan tersebut, perlu dicari obat tradisional sebagai alternatif untuk

mengurangi efek samping yang ditimbulkan oleh obat Metformin. Satu diantara berbagai macam

obat tradisional adalah tumbuhan kembang bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) yang

memiliki sifat sebagai antioksidan dengan cara menghambat rantai reaksi dari peroksidasi lipid

dan berperan sebagai zat hipoglikemik. Selain itu, daun kembang bulan juga mengandung zat

antimalaria, antiinflamasi dan analgesik (Thongsom, 2013).

Hal ini sesuai dengan Kebijakan Obat Nasional menyatakan bahwa di dalam upaya

penyediaan obat, obat tradisional yang terbukti berkhasiat dikembangkan dan digunakan dalam

upaya kesehatan. Namun demikian, diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui

perbedaan efek daun kembang bulan dan Metformin terhadap penyembuhan hiperglikemia.

1.2. Rumusan Masalah

Bagaimana perbandingan efektifitas penggunan daun kembang bulan dengan obat

Metformin dalam penyembuhan penyakit Hiperglikemia?

1.3. Urgensi Penelitian

Diperoleh obat tradisional untuk penyembuhan hiperglikemia bagi masyarakat yang efektif,

relatif murah dan tidak menimbulkan efek samping.

1.4. Tujuan Penelitian

Untuk mengetahui perbedaan efek antihiperglikemia infusa daun kembang bulan (Tithonia

diversifolia (Hamsley) A. Gray) dan Metformin

1.5. Luaran yang Diharapkan

Jika dari penelitian ini didapatkan bahwa efektivitas zat antiperglikemia infusa daun

kembang bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) lebih tinggi daripada metformin, maka

luaran yang diharapkan adalah tanaman ini bisa dijadikan alternatif pengobatan DM yang

memiliki efek samping minimal dan terjangkau bagi masyarakat.

1.6. Kegunaan

Bagi penulis, menjadi sarana pembelajaran dalam meneliti potensi tanaman herbal sebagai

alternatif terapi pengobatan DM. Sedangkan bagi profesi kedokteran, menjadi alternatif dalam

terapi pengobatan DM secara alami. Selain itu bagi masyarakat, daun kembang bulan juga

menjadi pilihan pengobatan alternatif yang alami, mudah didapat dan terjangkau.

Page 8: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

3

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Diabetes Mellitus

DM adalah gangguan metabolisme yang secara genetis dan klinis termasuk heterogen

dengan manifestasi berupa hilangnya toleransi karbohidrat. Jika telah berkembang penuh secara

klinis, maka DM ditandai dengan hiperglikemia puasa dan postprandial, aterosklerotik dan

penyakit vascular mikroangiopati, dan neuropati. Manifestasi klinis hiperglikemia biasanya sudah

bertahun – tahun mendahului timbulnya kelainan klinis dari penyakit vaskularnya. Pasien dengan

kelainan toleransi glukosa ringan (gangguan glukosa puasa dan gangguan toleransi glukosa)

dapat tetap berisiko mengalami komplikasi metabolic diabetes. (Price & Wilson, 2006)

Ada 2 tipe DM, yaitu diabetes tipe 1 dan tipe 2. Diabetes tipe 1 ditandai dengan kerusakan

sel-sel beta pada pulau langerhans dan tidak ada insulin sama sekali. Kerusakan sel beta

dipercaya sebagai respons autoimun, yang mungkin dipicu oleh virus (awitan diabetes biasanya

secara tiba-tiba). Diabetes bentuk ini lebih sering pada anak – anak dan kemungkinan ada

predisposisi genetiknya.

Diabetes tipe 2 insulin diproduksi tapi tidak memberi efek pada sel karena defisiensi

reseptor insulin pada membran sel. Awitan diabetes tipe 2 ini biasanya bertahap dan faktor

risikonya meliputi riwayat diabetes pada keluarga dan berat badan berlebihan (Scanlon &

Sanders, 2006).

2.2 Hiperglikemia

Hiperglikemia adalah komplikasi metabolik akut dari DM tipe 2 yang sering terjadi pada

penderita DM tipe 2 yang lebih tua. Bukan karena defisiensi insulin absolute, namun relatif,

hiperglikemia muncul tanpa ketosis. Hiperglikemia berat dengan kadar glukosa serum lebih besar

dari 600 mg/dl. Hiperglikemia menyebabkan hiperosmolalitas, dieresis osmotic dan dehidrasi

berat. Penyakit ini dapat menyebabkan kematian bila tidak segera ditangani. Pengobatan

hiperglikemia adalah rehidrasi, penggantian elektrolit dan insulin regular.

2.3 Metformin

Metformin merupakan obat antihiperglikemia. Obat ini dapat menurunkan glukoneogenesis

yang meningkat pada penderita DM tipe 2, selain itu obat ini dapat menurunkan absorpsi glukosa,

meningkatkan oksidasi asam lemak, meningkatkan ambilan glukosa pada sel otot, menurunkan

LDL dan VLDL di sirkulasi (Rang et al., 2012).

Metformin terutama diserap oleh usus halus, bersifat stabil, tidak terikat dengan protein

plasma dan dieksresikan melalui urin tanpa mengalami perubahan. Waktu paruhnya sekitar 2 jam

dan dosis awal 2 x 500 mg. Umumnya dosis pemeliharaan 3 x 500 mg dan dosis maksimal dalam

sehari yaitu 2,5 g (Gunawan et al., 2009). Pada pemberian dosis terapi normal, konsentrasi

plasma steady state metformin dicapai dalam 24-48 jam dan umumnya < 1 µg/ml, dengan

konsentrasi plasma maksimal tidak lebih dari 5 µg/ml walaupun diberikan pada dosis maksimal

Page 9: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

4

(Idkaidek et al., 2011). Efek samping metformin yaitu diare, mual, muntah, gangguan abdominal,

kecap logam (metalic teste), dan anoreksia (Gunawan et al., 2009).

2.5 Obat Hipoglikemik Oral ( OHO )

Secara umum DM dapat diatasi dengan obat-obatan antidiabetes yang secara medis disebut

obat hipoglikemia oral (OHO). Obat hipoglikemik oral tidak boleh sembarangn dikonsumsi

karena dikhawatirkan penderita menjadi hipoglikemia (Prapti, 2003).

Atas dasar pengalaman klinis, pembagian macam Obat Hipoglikemik Oral (OHO) dapat

dibedakan berdasarkan cara kerjanya, yaitu insulin secretagogues, insulin sensitizer, insulin

enzyme inhibitors, dan fixed dose combination types (Tjokroprawiro, 2007).

2.4 Penelitian Tanaman Kembang Bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray)

Penelitian tentang tanaman kembang bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) sudah

banyak dilakukan. Penelitian-penelitian tersebut diteliti mulai dari daun hingga biji bunganya.

Berbagai manfaat tanaman Kembang bulan dapat ditemui. Satu diantaranya adalah mengatasi

penyakit DM. Toshihiro Miura (2005), dalam penelitiannya menunjukkan efek pertama

pemberian Td pada mencit hiperglikemia peroral, bahwa level gula darah pada mencit

hiperglikemik setelah diberi Td ( 100, 500, 1500 mg/kg) dapat menurunkan gula darah (7 jam

setelah pemberian Td). Pemberian Td dilakukan terus menerus selama 2-3 minggu,

mengakibatkan penurunan gula darah (hypoglikemia). Selain itu berat badan pada tikus

hyperglikemia yang telah diberi Td pun menunjukkan hasil yang tidak jauh berbeda dengan berat

badan mencit sebelum perlakuan. Setelah perlakuan pada mencit hyperglikemik, peneliti

melakukan insulin tolerance test, yang menunjukkan penurunan gula darah mencit secara

signifikan.

Selain itu, Montakarn thongsom (2013), meneliti bahwa cairan ekstrak daun kembang bulan

menunjukkan efek anti hiperglikemia pada glukosa. Tes toleransi glukosa oral (OGTT)

mengukur kemampuan tubuh untuk menggunakan glukosa (sumber utama tubuh). OGTT dapat

digunakan sebagai diagnosis penyakit pradiabetes dan diabetes. pemberian Td (500 mg/kg)

selama 30 hari menunjukkan efek yang signifikan terhadap pengurangan FBG. Kedua perwakilan

dari berbagai penelitian Td tersebut menguatkan bahwa Tithonia diversifolia adalah obat

alternatif DM.

2.6 Tinjauan Fungsi Senyawa Aktif Tithonia diversifolia (Hemsl) A. Gray

Daun tanaman Kembang bulan memberikan hasil tes positif terhadap hemolisis, dan hasil

tes negatif untuk flavonol-flavonol, alkaloid-alkaloid, tanin-tanin, dan sterol-sterol (Watt et al,

1962). Sulistijowati (1999) menyatakan bahwa daun kembang bulan (Tithonia diversifolia

(Hemsl) A. Gray) mengandung saponin, polifenol dan flavonoid.

Thongsom (2013) menyatakan bahwa daun Kembang bulan mengeluarkan kandungan

antioksidan dengan menghentikan rantai reaksi dari peroksidasi lipid dan berperan sebagai

akitivitas hipoglikemia, menurunkan kadar gula darah pada tikus yang diinduksi aloksan.

Page 10: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

5

BAB 3. METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian

Sesuai dengan latar belakang, rumusan masalah dan tujuan penelitian, maka penelitian ini

dilakukan secara eksperimental, dengan rancangan penelitian yang digunakan adalah Randomized

Pre-Post Test Control Group Design

K : sebagai kelompok kontrol negatif

P1 : sebagai kelompok dosis 1

P2 : sebagai kelompok dosis 2

P3 : sebagai kelompok dosis 3

B : sebagai kelompok kontrol positif

dengan metformi

Rancangan penelitian dapat dilihat pada skema sebagai berikut :

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini akan dilaksanakan di Laboratorium Farmasi Fakultas Kedokteran Universitas

Tanjungpura pada bulan Maret-Mei 2014. Pengukuran kadar glukosa darah tikus putih di Unit

Laboratorium Kesehatan Kalimantan Barat.

Gambar 2. Skema Rancangan Penilitian

Infusa Daun kembang bulan

K

1 P1

Pengkondisian

Hiperglikemia

Tikus

Negatif

Positif

7-8 hari

Random

Alokasi

Dikeluarkan

P2

B

P3

Pemeriksaa GDP

2 minggu

Gambar 1. Tanaman Kembang Bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray)

Page 11: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

6

3.3 Perlakuan dan Pengukuran

3.3.1 Perlakuan

Perlakuan yang diberikan adalah infusa dari tanaman Kembang bulan (Tithonia diversifolia)

secara per oral dengan variasi zat aktif pada dosis 50, 100, 150 mg.

3.3.2 Pengukuran

Jumlah sampel yang digunakan akan dibagi menjadi 5 kelompok dengan perhitungan jumlah

tikus putih untuk setiap kelompok berdasarkan pada rumus Federer.

Keterangan:

t = jumlah kelompok

n = jumlah pengulangan tiap sampel

dengan t = 5 maka didapatkan jumlah sampel yang dibutuhkan:

(n-1) (5-1) ≥ 15

n-1 ≥ 3,75

n ≥ 4,75

n ≈ 5

3.4 Bahan dan Alat Penelitian

3.4.1 Hewan Coba

Hewan coba yang digunakan adalah tikus putih (Rattus norvegicus) yang diperoleh

dari Laboratorium Farmasi Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura. Kriteria Inklusi

sampel penelitian ini adalah tikus putih dengan berat badan 15-20 gram, tidak ada

abnormalitas anatomis dan metabolis, kondisi badan sehat, tidak ada kelainan anatomis, aktif

dan tidak cacat. Sedangkan Kriteria Eksklusi penelitian adalah tikus putih yang mati selama

diberikan periode penelitian dan tikus putih yang sakit atau tidak bergerak aktif selama

periode penelitian.

Jenis hewan yang akan digunakan adalah tikus putih. Jumlah hewan coba yang akan

dijadikan sampel menurut WHO yaitu tiap kelompok minimal 5 ekor. Pada penelitian ini,

jumlah sampel yang digunakan tiap kelompok adalah 6 ekor tikus putih. Yang mana tiap

kelompok terdiri dari 5 ekor dan 1 ekor sebagai cadangan, dimana sebelum diberikan infusa

daun kembang bulan, tikus putih diuji dengan pengukuran kadar glukosa puasa.

Adapun pengacakan yang dilakukan adalah dibagi menjadi 30 kelompok kemudian

dikelompokkan secara random menjadi 5 kelompok yaitu; Kelompok K (6 tikus putih),

Kelompok P1 (6 tikus putih), Kelompok P2 (6 tikus putih), Kelompok B (6 tikus putih).

3.4.2 Alat dan Bahan

Alat yang digunakan adalah kandang tikus putih, spuit oral, sonde lambung, jarum

suntik, gelas ukur, tabung reaksi, minor set, kapas, glukometer, kain flannel dan panci infus.

Sedangkan bahan yang digunakan antara lain; daun kembang bulan, metformin, aloksan,

pakan tikus putih, akuades, dan alkohol 70%.

(t-1) (n-1) ≥15

Page 12: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

7

3.5 Metode Penelitian

3.5.1 Pembuatan infusa daun Kembang bulan

Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan mencari simplisia nabati dengan air pada

suhu 900C selama 15 menit (Depkes RI, 2000). Pembuatan infusa dilakukan dengan cara

sebagai berikut: daun Kembang bulan yang telah ditimbang, dicuci kemudian dimasukkan ke

dalam panci infus ditambah akuades 100 ml dan ditambah lagi akuades sebanyak dua kali

bobot daun Kembang bulan kemudian dipanaskan selama 15 menit mulai dihitung ketika

suhunya 90˚C sambil sekali-kali diaduk. Infusa diserkai selagi panas melalui kain flannel.

Untuk mencukupi kekurangan air, dapat menambahkan air melalui ampasnya (Ariyanti et

al.,2007)

3.5.2 Skrining fitokimia

Skrining fitokimia dilakukan dengan cara yang berdasarkan panduan Departemen

Kesehatan RI (1995). Sedangkan senyawa-senyawa yang akan diskrining meliputi; (1)

Flavonoid, (2) Alkaloid, (3) Tanin, (4) Saponin dan (5) Terpenoid atau Steroid

3.5.3 Perhitungan dosis infusa daun Kembang bulan

Dalam penelitian ini, digunakan dosis bertingkat untuk mengetahui dosis efektif infusa

daun Kembang bulan yang dapat menurunkan kadar glukosa darah. Dosis yang digunakan

dalam penelitian ini adalah:

Pembuatan stok ekstrak

Jumlah total tikus putih = 30 ekor

Dosis 1 = 2500 mg/kgBB × 0,02 kg = 50 mg/ 200 gBB

Dosis 2 = 5000 mg/kgBB × 0,02 kg = 100 mg/ 200 gBB

Dosis 3 = 750 0mg/kgBB × 0,20 kg = 150 mg/ 200 gBB

3.5.4 Perhitungan Dosis Metformin

Perhitungan dosis metformin untuk tikus putih didasarkan pada dosis terapi per-oral

untuk manusia. Dosis sekali minum untuk manusia berat badan 50 kg adalah 500 mg. Maka

perhitungan dosis metformin untuk tikus putih dengan berat 200 g adalah:

Dosis metformin = 70/50 × 500 mg × unit konversi Laurence and Bacharach

= 700 mg × 0,018

= 12.6 mg

Maka, dosis per kilogram berat badan tikus putih adalah:

Dosis metformin = 12.6 mg/0.2kgBB = 63 mg/kgBB

Pembuatan stok metformin:

1 kelompok = 6 tikus putih

Pemberian metformin 1×1 selama 14 hari = 14 kali pemberian

Dosis 12.6 mg/200 gBB × 14 = 176.4mg

Page 13: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

8

3.6 Uji Efektivitas

1. Pada hari ke-1 setelah aklimatisasi, tikus dipuasakan selama 8-12 jam kemudian dilanjutkan

dengan pemeriksaan kadar glukosa awal.

2. Pada hari ke-2 setelah aklimatisasi, tikus pada semua kelompok diinduksi aloksan secara

intravena pada vena lateral ekor dengan dosis 40 mg/kgBB selama 2 hari berturut-turut

untuk memicu diabetes.

3. Tikus dibagi secara acak menjadi 5 kelompok dengan masing-masing kelompok terdiri dari

6 ekor tikus.

4. Pada hari ke-4 setelah induksi aloksan, tikus dipuasakan kemudian diambil darahnya untuk

diukur kadar glukosa darah puasa.

5. Setelah tikus menjadi diabetes, 5 kelompok tikus tersebut diberi perlakuan per oral 1 kali

sehari selama 14 hari:

K : Kelompok kontrol. Tikus putih yang diinduksi aloksan, diberi cairan akuades.

P1 : Kelompok perlakuan 1. Tikus putih yang diinduksialoksan, diberi infusa daun

kembang bulan (Tithonia diversifolia) dengan dosis 50 mg/ 200gBB

P2 : Kelompok perlakuan 2. Tikus putih yang diinduksi aloksan, diberi infusa daun

kembang bulan (Tithonia diversifolia) dengan dosis 100 mg/ 200 gBB

P3 : Kelompok perlakuan 3. Tikus putih yang diinduksi aloksan, diberi infusa daun

kembang bulan (Tithonia diversifolia) dengandosis 150 mg/ 200gBB

B : Kelompok perbandingan. Tikus putih yang diinduksi aloksan, diberi metformin

dengan dosis 12,6 mg/ 200 gBB

6. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan setiap minggu setelah terlebih dahulu

dipuasakan selama 8-12 jam (hari ke-19, hari ke-26). Cara pemeriksaan glukosa darah

(Labkes Kalbar, 2012):

a. Darah yang telah ditampung dibiarkan selama ½ ­ 1 jam kemudian dimasukkan ke

dalam alat sentrifuge kemudian diputar selama 5-10 menit menit dengan kecepatan

4000 rpm.

b. Serum yang digunakan untuk pemeriksaan sebanyak 10 µL

c. Diinkubasi dalam inkubator fotometer selama 30 menit pada suhu 20-25°C atau selama

15 menit pada suhu 37°C dengan panjang gelombang 546 nm

7. Semua data kadar glukosa darah sebelum dan setelah perlakuan yang diperoleh ditabulasi

dan dianalisis.

8. Pengukuran

% Penurunan GDP =

Page 14: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

9

3.7 Alur Kerja

BAB 4. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN

4.1 Anggaran Biaya

No Jenis Pengeluaran Biaya (Rp)

1 Peralatan penunjang 3.125.000,00

2 Bahan habis pakai 4.285.000,00

3 Perjalanan 500.000,00

4 Lain – lain 1.000.000,00

Jumlah 8.910.000,00

4.2 Jadwal Kegiatan

DAFTAR PUSTAKA

American Diabetes Association (ADA). 2003. Definition and Classification of Diabetes Mellitus.

(online) (http://care.diabetesjournals.org/content/33/Supplement_1/S62.full) diakses tanggal 22

Oktober 2013.

No Jadwal Kegiatan Bulan

1 2 3

1. Persiapan dan Pengumpulan Tikus

2. Pemilihan dan Adaptasi Tikus

3. Pengondisian (Induksi Aloksan)

4. Pemberian Perlakuan dengan Infusa Daun

Kembang Bulan

5. Pengontrolan Keadaan Tikus

6. Perbandingan Efek Secara Metamorfi dan

Etnodemik

7. Pencatatan dan Pelaporan

Gambar 3. Alur Kerja

2 minggu 2 minggu 2 minggu 2 minggu

30 Ekor Tikus Adaptasi 1

minggu

Induksi

Aloksan

gagal

ekslusi

berhasil

Random Alokasi

K

(6 ekor)

P1

(6 ekor)

B

(6 ekor)

P3

(6 ekor) P2

(6 ekor)

+ Infusa + Infusa

+ Infusa

+ metformin

Pengecekan GDP

Page 15: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

10

Ariyanti, Rina; Nurcahyanti Wahyuningtyas; Arifah Sri Wahyuni. 2007. Pengaruh Pemberian Infusa

Daun Salam (Eugenia polyantha Wight) terhadap Penurunan Kadar Asam Urat Darah Mencit

Putih Jantan yang Diinduksi dengan Potasium Oksonat. PHARMACON, Vol. 8, No. 2: 56-63.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995, Farmakope Indonesia, Ed ke-4, Depkes RI, Jakarta.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tanaman Obat,

Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan-Direktorat Pengawasan Obat Tradisional,

Jakarta.

Gunawan, G. S., Nafrialdi, R. S.,Elysabeth, 2009,Farmakologi dan Terapi, Ed ke-5, Departemen

Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.

Idkaidek, N.; Arafat, T.; Melhim, M.; Alawneh, J.; Hakooz, N., 2011, Metformin IR versus XR

Pharmacokinetics in Human, J Bioequiv Availab., 3: 233-235.

International Diabetes Federation, 2012, IDF Diabetes Atlas, Ed ke-5, IDF, Brussels.

Lailatul, L.; Kadarohman, A.; Eko, R., 2010, Efektivitas Biolarvasida Ekstrak Etanol Limbah

Penyulingan Minyak Akar Wangi (Vetiveria zizanoides) terhadap Larva Nyamuk Aedes aegypti,

Culex sp. dan Anopheles sundaicus, Jurnal Sains dan Teknologi Kimia, 1 (1): 59-65.

Miura, Toshihiro; Kosuke Nosaka; Hiroyasu Ishii; Torao Ishida. 2005. Antidiabetic Effect of

Nitobegiku, the Herb Tithonia diversifolia, in KK-Ay Diabetic Mice. Biol. Pharm. Bull., 28(11):

2152-2154.

Prapti. 2003. Tanaman Obat untuk Mengatasi Diabetes Mellitus. Tangerang: Agromedia Pustaka

Rang, H.P.; Dale, M.M; Ritter, J.M.; Flower, R.J.; Henderson, G., 2012, Rang and Dale’s

Pharmacology, Ed ke-7, Elsevier Churchill Livingstone, New York.

Sulistijowati, Asri; Didik Gunawan. 1999. Efek Ekstrak Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia

A. Gray.) terhadap Candida albicans serta Profil Kromatografinya. Media Litbangkes Edisi

Khusus “Obat Asli Indonesia” Volume VIII Nomor 3 & 4.

Sylvia A. Price dan Lorainne M. Wilson. 2006. Patofisiologi Vol 2 Edisi 6. Jakarta: EGC.

Thongsom, Montakarn; Warangkana Chunglok; Rapeporn Kuanchuea; Jitbanjong Tangpong. 2013.

Antioxidant and Hypoglycemic Effects of Tithonia diversifolia Aqueous Laeves Extract in

Alloxan-induced Diabetic Mice. Original Article of Advances in Environmental Biology, 7(9):

2116-2125.

Tjokroprawiro Askandar DKK, Diabetes Mellitus, Buku Ajar Penyakit Dalam Fakultas Kedokteran

Airlangga Rumah Sakit Pendidikan Dr. Soetomo Surabaya, Cetakan I, Airlangga University

Press, Surabaya, 2007, p. 32-38, 46-70.

Unit Laboratorium Kesehatan Provinsi Kalimantan Barat, 2012, Instruksi Kerja Metode Pemeriksaan

Glukosa, Laboratorium Kesehatan Kalimantan Barat, Pontianak.

Valerie C. Scanlon dan Tina Sanders. 2006. Buku Ajar Anatomi dan Fisiologi, Ed. 3. Jakarta: EGC

Watt, J.M.; Brayer-Brandwijk; gerdina, M., 1962, The Medical and Poisonous Plants of Shouternand

Eastern Africa, 2nd

Ed., E and S Living Stone Ltd, Edinbergh, London.

Page 16: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

11

Lampiran 1 Biodata Ketua dan Anggota

A. Identitas Diri

1 Nama Lengkap (dengan gelar) Tiara Grhanesia Denashurya

2 Jenis Kelamin L/P

3 Program Studi Pendidikan Dokter

4 NIM I1011131016

5 Tempat dan Tanggal Lahir Pontianak, 5 April 1995

6 E-mail [email protected]

7 Nomor Telepon/HP 08990988839

B. Riwayat Pendidikan

SD SMP SMA

Nama Institusi SD Al-azhar 21

Pontianak

SMP Al-azhar 17

Pontianak

Semesta Bilingual

Boarding School

Semarang

Jurusan - - IPA

Tahun Masuk–Lulus 2001-2007 2007-2010 2010-2013

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

No Nama Pertemuan Ilmiah /

Seminar Judul Artikel Ilmiah Waktu dan Tempat

1 -

2

3

D. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi lainnya)

No Jenis Penghargaan Institusi Pemberi

Penghargaan Tahun

1 Seleksi OSN Tingkat Kota Semarang Kota Semarang 2011

2

3

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat

dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai ketidaksesuaian

dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.

Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam

pengajuan Hibah PKM Penelitian.

Pontianak, 26 Oktober 2013

Pengusul

(Tiara Grhanesia Denashurya)

Page 17: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

12

Lampiran 1 Biodata Ketua dan Anggota

A. Identitas Diri

1 Nama Lengkap (dengan gelar) Widiayu Sekar Putri

2 Jenis Kelamin L/P

3 Program Studi Pendidikan Dokter

4 NIM I1011131028

5 Tempat dan Tanggal Lahir Pontianak, 24 Desember 1995

6 E-mail [email protected]

7 Nomor Telepon/HP 085246897702

B. Riwayat Pendidikan

SD SMP SMA

Nama Institusi SD Al-Azhar 21

Pontianak

SMP Negeri 10

Pontianak

SMAS Tunas

Bangsa Kubu Raya

Jurusan - - IPA

Tahun Masuk–Lulus 2001-2007 2007-2010 2010-2013

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

No Nama Pertemuan Ilmiah /

Seminar Judul Artikel Ilmiah Waktu dan Tempat

1 -

2

3

D. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi lainnya)

No Jenis Penghargaan Institusi Pemberi

Penghargaan Tahun

1 -

2

3

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat

dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai ketidaksesuaian

dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.

Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam

pengajuan Hibah PKM Penelitian.

Pontianak, 26 Oktober 2013

Pengusul

(Widiayu Sekar Putri)

Page 18: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

13

Lampiran 1 Biodata Ketua dan Anggota

A. Identitas Diri

1 Nama Lengkap (dengan gelar) Agung Prasetyo

2 Jenis Kelamin L/P

3 Program Studi Pendidikan Dokter

4 NIM I1011131069

5 Tempat dan Tanggal Lahir Pontianak, 9 Januari 1996

6 E-mail [email protected]

7 Nomor Telepon/HP 085252105980

B. Riwayat Pendidikan

SD SMP SMA

Nama Institusi SD Swasta Pertiwi SMP Negeri 10

Pontianak

SMA Negeri 1

Pontianak

Jurusan - - IPA

Tahun Masuk–Lulus 2001-2007 2007-2010 2010-2013

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

No Nama Pertemuan Ilmiah /

Seminar Judul Artikel Ilmiah Waktu dan Tempat

1 -

2

3

D. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi lainnya)

No Jenis Penghargaan Institusi Pemberi

Penghargaan Tahun

1 Peringkat 3 Seleksi OSN Tingkat Kota

Pontianak Kota Pontianak 2009

2

3

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat

dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai ketidaksesuaian

dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.

Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam

pengajuan Hibah PKM Penelitian.

Pontianak, 26 Oktober 2013

Pengusul

(Agung Prasetyo)

Page 19: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

14

Lampiran 1 Biodata Ketua dan Anggota

A. Identitas Diri

1 Nama Lengkap (dengan gelar) Jovi Pardomuan Siagian

2 Jenis Kelamin L/P

3 Program Studi Pendidikan Dokter

4 NIM I11112008

5 Tempat dan Tanggal Lahir Sanggau, 8 Juli 1994

6 E-mail [email protected]

7 Nomor Telepon/HP 089693313464

B. Riwayat Pendidikan

SD SMP SMA

Nama Institusi SDN 08 Sanggau SMPN 1 Sanggau

SMAS Tunas

Bangsa Kubu Raya

Jurusan - - IPA

Tahun Masuk–Lulus 2000-2006 2006-2009 2009-2012

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

No Nama Pertemuan Ilmiah /

Seminar Judul Artikel Ilmiah Waktu dan Tempat

1 -

2

3

D. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi lainnya)

No Jenis Penghargaan Institusi Pemberi

Penghargaan Tahun

1 -

2

3

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat

dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai ketidaksesuaian

dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.

Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam

pengajuan Hibah PKM Penelitian.

Pontianak, 26 Oktober 2013

Pengusul

(Jovi Pardomuan Siagian)

Page 20: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

15

Lampiran 2 Justifikasi Anggaran Kegiatan

1. Peralatan Penunjang

Material Justifikasi

Pemakaian Kuantitas

Harga Satuan

(Rp) Keterangan

Kandang Tikus - 5 buah 150.000 750.000

Minor Set - 1 buah 350.000 350.000

Jarum Suntik Induksi aloksan 30 buah 3.000 90.000

Kapas Induksi aloksan 2 roll 75.000 150.000

Glukometer Pengecekan

GDP 1 buah 400.000 400.000

Bohlam Lampu

10 watt

Untuk kandang

tikus 5 buah 5.000 25.000

Spuit Oral Pemberian

perlakuan 1 box 100.000 100.000

Sonde Lambung Pemberian

perlakuan 30 buah 17.000 510.000

Panci Pembuatan

infusa 1 buah 450.000 450.000

Kain Flanel Pembuatan

infusa 5 lembar 30.000 150.000

Termometer

Digital

Pembuatan

infusa 1 buah 150.000 150.000

SUB TOTAL (Rp) 3.125.000,00

2. Bahan Habis Pakai

Material Justifikasi

Penggunaan Kuantitas

Harga Satuan

(Rp) Keterangan

Tikus - 30 ekor 55.000 1.650.000

Aloksan - 10 gram 110.000 1.100.000

Kembang Bulan Pembuatan

infusa - 1.000 1.000

Kertas Tissue - 10 roll 5.000 50.000

Sarung Tangan

(Handscoon) Induksi aloksan 1 kotak 70.000 70.000

Masker - 1 kotak 15.000 15.000

Pakan Tikus - 20 kg 10.000 200.000

Serbuk Kayu - 5 kg 10.000 50.000

Aquades - 3 liter 175.000 525.000

Alkohol - 2 botol 70.000 140.000

Metformin - 2 strip 2.000 4.000

Pemeriksaan

Kadar Glukosa - 60 kali 8.000 480.000

SUB TOTAL (Rp) 4.285.000,00

Page 21: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

16

3. Perjalanan

Material Justifikasi

Penggunaan Kuantitas

Harga Satuan

(Rp) Keterangan

Transportasi Pembelian alat

dan bahan - 500.000 500.000

SUB TOTAL (Rp) 500.000,00

4. Lain – Lain

Material Justifikasi

Penggunaan Kuantitas

Harga Satuan

(Rp) Keterangan

Publikasi - 4 rangkap 100.000 400.000

Pembuatan

Laporan - 4 rangkap 150.000 600.000

SUB TOTAL (Rp) 1.000.000

Total (Keseluruhan) 8.910.000

Page 22: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

17

Lampiran 3 Susunan Organisasi Tim Kegiatan dan Pembagian Tugas

No Nama / NIM Program Studi Bidang

Ilmu

Alokasi

Waktu

(jam/minggu)

Uraian Tugas

1

Tiara Grhanesia

Denashurya/I10111

31016

Pendidikan Dokter Kesehatan 72

jam/minggu

Ringkasan,

Urgensi

Penelitian,

Rumusan

Masalah,

Tujuan

Penelitian,

Diabetes

Mellitus,

Hiperglikemi

a, Penelitian

tanaman

Kembang

bulan(Tithoni

a diversifolia

(Hamsley) A.

Gray) dan

Metode

Penelitian

2 Widiayu Sekar

Putri/I1011131028 Pendidikan Dokter Kesehatan

72

jam/minggu

Ringkasan,

Tinjauan

Fungsi Aktif

Daun

Kembang

Bulan(Tithon

ia

diversifolia

(Hamsley) A.

Gray), Daftar

Isi dan Daftar

Gambar,

Skema

Rancangan

Penelitian,

Skema Alur

Kerja, Jadwal

Kegiatan dan

Metode

Penelitian

3

Agung

Prasetyo/I1011131

069

Pendidikan Dokter Kesehatan 72

jam/minggu

Ringkasan,,

Latar

Belakang

Masalah,

Luaran yang

Diharapkan,

Kegunaan,

Diabetes

Mellitus,

Hiperglikemi

a,

Page 23: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

18

Metformin,

Obat

Hiperglikemi

Oral,Daftar

Pustaka,

Lembar

Pengesahan,

Lampiran

dan Metode

Penelitian

4 Jovi Pardomuan

Siagian/I11112008 Pendidikan Dokter Kesehatan

72

jam/minggu

Ringkasan,

Metode

Penelitian,

Publikasi,

Pembuatan

laporan,dan

Halaman

Sampul.

Page 24: Proposal Uji Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan

19

Lampiran 4 Surat Pernyataan Ketua Peneliti/Pelaksana

SURAT PERNYATAAN KETUA PENELITI/PELAKSANA

Yang bertanda tangan di bawah ini:

Nama : Tiara Grhanesia Denashurya

NIM : I1011131016

Program Studi : Pendidikan Dokter

Fakultas : Kedokteran

Dengan ini menyatakan bahwa usulan PKM Penelitian saya dengan judul:

Perbedaan Efek Antihiperglikemia Infusa Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A.

Gray) dan Metformin: Penelusuran Potensi Etnomedik Masyarakat Kalimantan Barat

yang diusulkan untuk tahun anggaran 2013 bersifat original dan belum pernah dibiayai oleh

lembaga atau sumber dana lain.

Bilamana di kemudian hari ditemukan ketidaksesuaian dengan pernyataan ini, maka saya bersedia

dituntut dan diproses sesuai dengan ketentuan yang berlaku dan mengembalikan seluruh biaya

penelitian yang sudah diterima ke kas negara.

Demikian pernyataan ini dibuat dengan sesungguhnya dan dengan sebenar-benarnya.

Pontianak, 26 Oktober 2013

Mengetahui, Yang menyatakan,

Wakil Rektor Bidang Kemahasiswaan

Universitas Tanjungpura

( Ir. Waskitha, MM ) ( Tiara Grhanesia Denashurya )

NIP. 19520601 198403 1 001 NIM. I1011131016

KEMENTERIAN PENDIDIKAN NASIONAL

UNIVERSITAS TANJUNGPURA

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS TANJUNGPURA

Jalan Jendral Ahmad Yani Pontianak telepon (0561) 740191 Kotak pos 1049